QUIMICA ANALITICA APLICADA TEMA 1: Introduccién a la quimica anali ica aplicada La quimica analitica es una ciencia metrolégica que desarrolla, optimiza y aplica herramientas de amplia naturaleza, que se concretan en procesos de medida encaminados a obtener informacién quimica y bioquimica de calidad sobre materias o sistemas de amplia naturaleza en el espacio y el tiempo, para resolver problemas cientificos, técnicos, econémicos y sociales. Se aplica a diversos campos, como la quimica, la farmacia, la medicina, la bilogia o la geologia Las especies que se determinan se denominan analitos y pueden ser: © Quimicas: drogas, grasas... * Bioquimicas: aminodcidos, proteinas, enzimas.... + Biolégicas: microorganismos El material a analizar se denomina muestra que puede ser natural o artificial y son: © Quimica: aleacién, preparado farmacéutico.... © Bioquimica: suero, orina... + Biolégicas: tejido animales, tejidos vegetales. La medida es un término aplicable a las propiedades fisicoquimicas, que nos sirve de base para la determinacién del analito. Etapes previas oI Anais quince J+ Proceso analitico general GGionecss t= Ne Interpretation Ge resultacas: Se SI mubiems pisntessa? _ = core se Apuntes descargados de wuolah.comJUL Yere aU) residencia o piso de estudiantes en UniplacesLa quimica analitica se clasifican segtin: > SU FINALIDAD: * Analisis cualitativo: Tiene como objetivo la identificacién de los analitos. Nos dice cules son los elementos o componentes de la muestra a analizar. Origina respuesta binaria (Si/no). 4Qué? * Analisis cuantitativo: Tiene como objetivo determinar la cantidad 0 proporcién de un analito en una muestra. Origina respuesta numérica, Cuanto? * Analisis estructural: Destinado a conocer la estructura de los compuestos. zCémo? > TECNICA EMPLEADA * Métodos dpticos: espectroscopia de absorcién molecular y atémica + Métodos eléctricos: potenciometria, polarografia + Métodos magnéticos: Espectroscopia de masas + Métodos de separacién: Cromatografia > SEGUN EL TAMANO DE LA MUESTRA + Macro: 100-1000mg, 0,010-0.10M * Semimicro: 10-100 mg. 103-10-2M © Micro: 1-10mg. 10-10°M. Plazo de Matriculacién abierto curso 2016-17 Coucke’s English AcademyTEMA 2: TOMA DE MUESTRA Las etapas basicas del proceso analitico es obtener una muestra, realizar las operaciones previas, medicién y transduccién de la sefial analitica y por ultimo la adquisicién y tratamiento de datos para obtener los resultados, Muestra Sélida, liquida 0 gaseosos Analitos Organicos, inorganicos o bioquimicos Matriz muestra Organico, inorganico 0 biolégico Concentracién de analitos Macrocomponentes, microcomponentes 0 trazas *DEFINICIONES > Muestreo: Obtencién de una muestra representativa del material a analizar (lote). Realizar un muestreo correcto es una caracteristica analitica basica en la que se sustenta una propiedad analitica suprema, la representatividad » Preparacién de la muestra: convierte una muestra bruta en una muestra de laboratorio. Son las etapas posteriores al muestreo en la que se realiza la transformacién de la muestra obtenida anteriormente (muestra bruta) en una especie adecuada para el analisis. > Lote: Material completo objeto del analisis del que se toman las muestras. * Homogéneo: Aque! que presenta igual composicidn en todas las partes. Es representativo. La variabilidad de los resultados obtenidos se debe a la destreza y la que viene inherente en el método. * Heterogéneo: Aquel en la que la composicién varia. No es representativo. La variabilidad de los resultados depende de la destreza, inherente al método y seleccién de la muestra y tratamiento, Pueden ser al azar o segregado » Muestra bruta: Se toma del lote para el analisis. Debe ser una parte representativa del lote. » Muestra de laboratorio: Se toma de la muestra bruta. Debe ser homogénea y representativa, > Alicuota: Pequefias porciones tomadas de la muestra para hacer replicados, A partir del lote obtenemos la muestra bruta mediante e| muestreo. Posteriormente preparamos la muestra bruta, transformandola en muestra de laboratorio. Las facetas de la heterogeneidad es: Plazo de Matriculacién abierto curso 2016-17 Coucke’s English Academya) Espacial: El objeto es diferente en extensién, profundidad... (Un camién con arena) b) Temporal: Existen cambios en el objeto variables con el tiempo (Ladera de una montafia helada en invierno y con agua en verano) ©) Espacio/temporal: El objeto varia en el espacio y el tiempo (rio) TECNICAS DE MUESTREO. 1, MUESTREOS DE SOLIDOS > Siel material es homogéneo basta con tomar una muestra suficiente para poder efectuar las determinaciones necesarias. > Siel material es heterogéneo el tamafio de la muestra dependerd de la cantidad de dicho material y de la variacién en el tamafio de sus particulas. A mayor ntimero de masas individuales, mas grande debe de ser la muestra Para el muestreo de sélidos particulados estaticos podemos utilizar cuchara de acero inoxidable 0 espatula. Para el muestreo de los sélidos estaticos utilizamos sondas i A) Muestreo por cuarteo En primer lugar se toman pequefias porciones de diferentes secciones horizontales y verticales del material, que se trituran, se mezclan y se apilan formando un cono que se divide en cuatro secciones verticales. Dos secciones opuestas se descartan, y las otras dos se combinan y tamizan para alcanzar un tamafio uniforme. La operacién se repetira hasta obtener particulas lo suficientemente pequefia ‘como para atravesar un tamiz con un nimero de mallas determinados. a 8) Muestreo de productos farmacéuticos Por ejemplo, con una aspirina en presencia de agua se hidroliza y obtenemos polvo de tamatio de particula uniforme, pero equivalente a un comprimido 2. MUESTREO DE LIQUIDOSEl problema mas dificil suele ser decidir como muestrear el Ifquido. En el caso de los liquidos corporales el problema mas frecuente es decidir el momento en el que se debe muestrear el liquide. A) Liquidos en general > Siun liquido es puro u homogéneo utilizamos la pipeta volumeétrica u otros dispositivos mas complejos > Siun liquido no es homogéneo o es una emulsién o suspensién: + Sila sustancia puede agitarse puede que con una agitacién correcta se convierta en un liquide homogéneo + Sila sustancia no puede agitarse o mezclarse, las muestras deben extraerse de distintos niveles del liquido, trazandose una gréfica en funcién de la profundidad. 8) Liquidos corporales 0 fluidos biolégicos El muestreo de sangre y otros liquidos corporales deben hacerse cuando la muestra sea representativa del estado del organismo que se somete a las pruebas. Por eso, no se debe ingerir alimentos antes de las pruebas, (ya que alteran los niveles de productos quimicos en la sangre) y se toman varias muestras. 3. MUESTREO DE AIRE Y OTROS GASES A) Aire contaminado de las ciudades Debemos poser: Plazo de Matriculacién abierto curso 2016-17 Coucke’s English Academy+ Dispositivo de medicién de flujo exacto para medir el volumen de aire muestreado. ‘* Colector de muestras para atrapar la contaminacién que interese (filtro) + Bomba que asegure un flujo constante de aire a través del colector. Los problemas que podemos encontrar son donde muestrear, cuanto tiempo y en cuantos sitios. 8) Muestreo de gases Muestreamos gases téxicos, peligrosos cuando sus concentraciones alcanzan ciertos niveles. Algunos de estos gases son el CO, el Osy ciertos aldehidos, C) Muestreo de particulas Las particulas sdlidas suspendidas en el aire son potencialmente peligrosas y también deben muestrearse. Algunas de estas particulas son el hollin, los hidrocarburos aromaticos, silices.... Para ello necesitamos un muestreador de aire para obtener una muestra representativa de las particulas suspendidas. El plan de muestreo es la estrategia que hay que seguir para garantizar la representatividad de los resultados analiticos. Procura minimizar el numero de muestras para conseguir el nivel de representatividad marcado, a través de estadisticas. Debemos tener en cuenta que informacién requerimos, muestras, analitos, herramientas disponibles, método de medida, y el tamafio correcto de la alicuota (balance entre nimero de muestras y costes/esfuerzos implicados). Segin la estrategia global que marca el plan, el muestreo puede ser: ‘* _Intuitivo: El analista selecciona por decisién personal la porcién del objeto * Estadistico: La seleccién se basa en reglas estadisticas * Dirigido: Cuando el problema analitico exige un tipo especifico de informacién * De protocolo: Cuando por imperativo legal o del cliente debe seguirse un proceso de muestreo detallado en una norma o en una publicacién oficial Al manejar las muestras debemos tener precauciones con el fin de evitar su deterioro, Para ello debemos protegerio de la luz y la atmésfera, mantenerlas en condiciones adecuadas, congelacién para almacenamieto. Plazo de Matriculacién abierto curso 2016-17 Coucke’s English AcademyTEMA 3 : PREPARACION DE LA MUESTRA Medidas de aCe (Ea) ee eal ea) Peeeietsian) Muestreo presence IVI y Tiabecerel cool) volumen/ CaN egvT aT a1) rrr Estas operaciones previas son altamente variables, lentas, peligrosas y suponen una fuente de errores, ya que se da la participacion humana Los objetivos de la preparacién de la muestra son: > Llevar el maximo porcentaje de analitos posibles desde la muestra origina hasta el paso de determinacién. 7 Obtener los analitos en el estado de agregacién mas adecuado para los instrumentos que utilizaremos, asegurandonos de que los compuestos sigan siendo estables Llevar sélo algunos de los componentes de la muestra original al paso de determinacién. Obtener el analito a una concentracién apropiada para la deteccién y medida vv No afiadir nuevas interferencias. Los resultados de un analisis cuantitativo (medicién) se da generaimente en términos relativos, es decir, cantidad de analito por cantidad de muestra. ‘* Los slidos 0 liquidos no volatiles se pesan en balanza analitica * Los gases 0 liquidos volatiles se mediran con un material volumétrico adecuado. Pipeta automética Granatario Balanza analitica Plazo de Matriculacién abierto curso 2016-17 Coucke’s English Academy*Pulverizacién de fa muestra Cuando la muestra es un sélido, la primera operacién que hay que realizar es la pulverizaci6n de ste, Para la pulverizacién se utiizan morteros 0 mol La razén es que las muestras finamente divididas son mas homogéneas, haciendo posible que se mezclen con mayor precisién y exactitud. Ademas, de esta manera pueden disolverse mas facilmente, ya que presentan mayor superficie expuesta al disolvente. en *Secado de la muestra, Las muestras sélidas contienen cantidades variables de agua. Su contenido depende de factores ‘como la humedad del ambiente, temperatura y estado de subdivisién Para almacenar una muestra hay que evaporar y absorber el agua que contenga. Para ellos ‘debemos determinar el contenido de agua y eliminarla. Los resultados analiticos se refieren a muestras secas ( ya que tiene en cuenta las posibles descomposiciones y la pérdida de volatiles) Para secar la muestra utilizamos estufas, desecadores, liofilizacién, rotavapor... Algunos agentes desecantes son el BaO, CaCl, AlzOa... Estufa Rotavapor *Disolucién de fa muestra La mayoria de las técnicas analiticas requieren que la muestra esté en disolucién. Las técnicas ‘que pueden aplicarse a sélidos son mas costosas y sofisticadasMuestras gaseosas Muestras s6lktas Muestras liquidas Espectrometria IR Fluorescencia Rayos X Cromatografia liquida Espectrometria Raman Espectrometria IR Cromatografia de gases Espectrometria UV-vis Analisis térmico Cromatografia de fluidos supercriticos Cromatografia de gases Métodos de superficie Volumetria Espectrometria de gases Espectrometria Raman RMN Los procedimiento de disolucién pueden ser destructivos o no destructivos. Las muestras pueden ser de origen inorganicas (Acidos minerales) u organicas/biolégicas (disolventes organicos) La dlsolucién simple de una muestra inorganica consiste en disolver esta sustancia en agua u otro disolvente. No tiene lugar ninguna reaccién quimica o descomposicién La disolucién en dckdos de una muestra inorganica se realiza cuando la muestra es insoluble en agua. Pueden utilizarse tanto acidos diluidos como concentrados. Se produce una reaccién entre el Acido y la muestra para formar una sal soluble del metal y otros productos dependiendo de la naturaleza quimica de la muestra Los metales refractarios, como el Aluminio y el Cromo son pasivos ante el ataque de acidos, y forman una capa de éxido insoluble. La disolucién puede llevarse a cabo en frio 0 en caliente. Plazo de Matriculacin abierto curso 2016-17 Coucke’s English AcademyTEMA 4: ANALISIS CUANTITATIVO La metrologia es la ciencia de las mediciones que incluye todos los aspectos tanto teérico como practicos que se refieren a las mediciones, La trazabilidad (incertidumbre, exactitud) se emplea como atributo para caracterizar diversas facetas analiticas. Medir es comparar con una referencia. Cada comparacién contribuye con una incertidumbre. El resultado obtenido mediante una cadena de comparaciones tiene una incertidumbre que es igual a la combinacién de las medidas intermedias. Es mas adecuado utilizar el término “incertidumbre” para referimos al intervalo dentro del cual podemos encontrar (con gran probabilidad) el valor real de aquello que se mide, Se expresa como un intervalo y engloba tanto errores aleatorios como los sistematicos. Los patrones con los que comparamos el objeto a analizar pueden ser: * Primarios: patrén con la cualidad metrolégica mas alta y cuyo valor es aceptado sin referencia a otros patrones * Secundarios: patron cuyo valor es asignado por comparacién con una patron primario * Material de referencia: material con propiedades bien establecidas y se usa para: calibrar un aparato, validar un método o asignar valores a un material o sistemas. Para que un material sea considerado como material de referencia debe ser homogéneo, estable y exacto. Pueden ser: ¥ CRM: certificado. Tiene certificados los valores de sus propiedades por un organismo competente. IRM; interno. Preparado por un laboratorio para su uso exclusiva ERM: externo. Suministrado por un laboratorio ajeno al propio usuario. SRM: estandar. Material certificado por el NIST C488 Sustancia patrén: material de referencia cuya pureza esta garantizada por la firma que lo expende. La sensibilidad es la concentracién minima de la especie que podemos analizar. Es el cociente entre la sefial medida y la concentracién a determinar. *Callbraclin Plazo de Matriculacién abierto curso 2016-17 Coucke’s English AcademyLa calibracién instrumental se realiza con estandares que no contienen el analito y se utiliza para asegurar el funcionamiento del instrumento empleado. La calibracién metodotogica se realiza con estandares que contienen el analito para establecer una relaci6n entre las caracteristicas del analito y las sefiales del instrument. Los tipos de calibracion existentes son: > Externa: Se obtiene la recta de regresién con disoluciones patrén de concentracién conocida. > Adicién estandar: se aplica cuando existe un efecto en la matriz que no es posible corregir y puede interferir en la determinaci6n. Consiste en afiadir a la muestra problema cantidades crecientes conocidas de analitos. v Patrén interno: Se aplica cuando entre medidas sucesivas es dificil mantener algunos de los parémetros operativos 0 reproducir la cantidad de muestra sometida al proceso. Consiste en afiadir a la muestra una cantidad fija y conocida de una sustancia de propiedades parecidas al analito. Este patron interno afiadido no debe estar presente en las muestras, poseer un comportamiento andlogo al del analito y no debe reaccionar con los componentes de la muestra *Valldaclén Consiste en comprobar que el método funciona. Esta validacién se realiza antes de su introduccién como método de rutina, al cambiar las condiciones en las que fue validado 0 cuando el método se ha modificado. La repetttividad evaltia la desviacién estandar del método sobre N medidas en un mismo laboratorio y por la un mismo individuo La reproduelbilidad evaltia la desviacién estandar de! método sobre N medidas realizadas por distintos individuos en distintos laboratorios. La precision Intermedia evaliia la desviacién estandar del método sobre N medidas realizadas en un mismo laboratorio durante tiempo prolongado. Plazo de Matriculacién abierto curso 2016-17 Coucke’s English AcademyTEMA 7: INTRODUCCION A LAS SEPARACIONES CROMATOGRAFICAS Y NO CROMATOGRAFICAS El objetivo de las separaciones es mejorar la selectividad y la sensibilidad. Se clasifican en: > Métodos de separacién no cromatograficos ‘+ Métodos extractivos: Extraccién Iiquido-liquido, sélide-liquido, microextraccién en fase sélida, extraccién con fluidos supercriticos y extraccién en fase de vapor. + Electroforesis capilar > Métodos de separacién cromatograficos + Cromatografia de gases + Cromatografia liquida y de fluidos supercriticos ‘+ Cromatografia plana > Otros = Precipitacién = Filtracién + Destiiacion 1. Separacién por precipltacl6n Las reacciones de precipitacién son aquellas que dan como resultado la formacién de un producto insoluble, llamado preciptado. La incorporacién de una sustancia ajena a la disolucién de la muestra o la alteracién de ésta, provocan la precipitacién del analito, logrdndose asi los dos objetivos de las técnicas de separacién. La precipitacién la conseguimos con la adiccién de un reactivo precipitante, ajuste de pH, cambio de temperatura. Muestra (A) Especie B+ reactvo Reactivo precipitante de 8 precipitante r Disouelen precipitado AR Precipitado RB (A) Disolucién Disohente | Dicer = _ a izEs un método fisico de separacién en el que los componentes de la muestra se distribuyen entre dos fases, una de las cuales es fija 0 estacionaria y la otra es mévil. La velocidad de desplazamiento es funcién del coeficiente de distribucién de cada componente entre las dos fases cw Alpate exectnaria (Al se mont La fase estactonaria pueden ser sélidos, liquidos o geles, mientras que la fase mévil pueden ser gases, liquidos 0 fluidos supercriticos. Los procesos cromatograficos pueden dividirse segin: + Fundamento del proceso cromatogréfico: Es decir el tipo de cromatografia. La naturaleza de la fase mévil y la fase estacionaria y la clase de equilibrios implicados en la transferencia de los solutos entre las fases, es decir, el mecanismo de interaccién + Formas de realizar dicho proceso: Es decir la técnica cromatografica empleada. Existe la cromatografia en columna, cromatografia plana, cromatografia en papel y cromatografia en capa fina, Depende de la naturaleza de la fase estacionaria y de la fase mévil utilzaremos un tipo de cromatografia u otra: Plazo de Matriculacién abierto curso 2016-17 Coucke’s English Academy> Seguin la naturaleza de la fase estacionaria: + Sies un sélido: Cromatografia de adsorcién, de cambio iénico, de exclusién, de afinidad * Si es un liquido soportado en un sélido inerte: cromatografia de particién, > Seguin la naturaleza de la fase mévil + Cromatografia liquida: liquido-liquido 0 liquido-sélido + Cromatografia de gases: gas-liquido 0 gas-sélido + Cromatografia con fluidos supereriticos A) Cromatografia de adsorci6n Se basa en Interacclones entre el soluto y lugares activos fjados sobre un sélido adsorbente como gel de silice o alimina, que se utiliza como fase estacionaria (Fuerza de Van der Wals). B) Cromatografia de afinidad Es un tipo especial de cromatografia de adsorcién utilizado especialmente en bioquimica, en la que un sélido tiene enlazado a un ligando llamado Ilgando de afinidad que puede ser por ejemplo un inhibidor enzimatico o un anticuerpo. Muy selectiva. Interaccjones altamente especificas entre el soluto y la fase estacionaria sees” weg o 2 = Je = S| tsa sees ce at entn eis te Ki Set ss pias ees A Pasar anes "5_ | fotein coretonida en a supercede J | Betons eimendose ts comes Para eli ta proteinaretenica por afinisad Solscon de solerte 0 inci en eto el Tganaa soluse sata concentracin de forme que compits co el que ests urd figs bolas eel porta unn a proteina, ‘hype soverte « C) Cromatografia de cambio iénico La fase estacionaria es un cambiador de jones, normalmente una resina con grupos aniénicos (SOs) y catiénicos (N(CHs)*) unidos covalentemente. Los solutos de carga opuesta son atraidos por la fase estacionaria mediante fuerzas electroestaticas. Plazo de Matriculacién abierto curso 2016-17 Coucke’s English AcademyPRINCIPIO DE LA CROUATOGRAFIA OE INTERCAMBIO IONICO Las panicuas cargacas negatwamente Pesibvamente,y som retenidas. Las parscuas catgadas postvamente Son fechazadas por la mats sauce, egatwamerte se consigue 4.Tlempo de retenclén: La selectividad esta relacionada con la capacidad del sistema para proporcionar te diferente para los compuestos analizados. Cuando tenemos una mezcla de dos o mas componentes si los ta, estén muy préximos el sistema no sera selectivo y no tendra capacidad de distinguir entre ellos. Cuanto mayor sea la retencién relativa mejor ‘separacion. > 2. Anchura de pico o de banda: La eficiencia esta relacionada con la capacidad del sistema para provocar picos estrechos. Cuando tenemos una mezcla de 2 0 mas componentes cuanto mas anchos sean los picos peor seré la eficiencia, ya que podrian solaparse, Entre menos ensanchamiento, mas eficaz. Plazo de Matriculacién abierto curso 2016-17 Coucke’s English AcademyLa resolucién permite medir la calidad de una separacién. Es un factor que se refiere a la capacidad de un sistema cromatografico para separar dos sustancias teniendo en cuenta no sdlo Ja separacién entre picos (selectividad) si no también los anchos de banda (eficiencia). R > 15 = picos bienresueltos; RR < 1.5 = picos solapados El objetivo de la optimicacién del proceso cromatografico tiene como objetivo conseguir picos bien definidos y separados en el menor tiempo posible y se hace a través de la variacién de las condiciones experimentales (velocidad de flujo, temperatura de la columna, tamafio de particulas en el soporte...) La cromatografia es el principal método de separacién para especies quimicas estrechamente relacionadas. Ademds puede utiizarse para la determinacién analitica cualitativa y cuantitativa. > Analisis cualitativo ‘+ Identificar una sustancia desconocida comparando su tr con el de un patrén conocido 0 determinar |a presencia o ausencia de un analito en una muestra + Dividir la muestra en dos alicuotas, cromatografiando una de ellas directamente y a la otra aftadiéndole una cantidad de una sustancia patron que se sospecha existe en la muestra > Analisis cuantitativo Nos da informacién cuantitativa de las especies quimicas separadas. Si las condiciones empleadas estan perfectamente controlada, la altura y area de los picos nos da su concentracién. ‘+ Altura de los picos: Se obtiene conectando la linea de base de cada lado del pico por medio de una linea recta y midiendo la distancia perpendicular entre la linea y el pico. Sélo puede usarse cuando los picos sean agudos, estrechos y estén bien separados + Area de los picos: Mayor precisién independiente de los efectos de ensanchamiento debido a las variables experimentales, El planimetro es un aparato utilizado para seguir el perimetro del pico. Una vez registrados es integrado, Puede emplearse para picos no gaussianos. Plazo de Matriculacién abierto curso 2016-17 Coucke’s English AcademyPlazo de Matriculacién abierto curso 2016-17 Coucke’s English AcademyTEMA 8: SEPARACIONES NO CROMATOGRAFICAS 41.PROCESOS DE MEMBRANA ‘Técnicas que emplean una membrana (barrera fisica) entre dos fases para separar especies en funcién de su diferente tamaffo, forma o estructura qulmica, Es decir, la membrana sélo va a dejar pasar las sustancias que tengan una determinada caracteristica. A. Mlcrofitrackin Filtracién en membrana mIcroporosa que permite la retencién de particulas sélidas entre 0,025 y 100 micras. Es por tanto ineficaz para retener sustancias disuetas en la disolucién a fitra. Se utiliza para clarficar o esterilizar fluidos y eliminar microorganismos. (esterilizacion en frio de bebidas, aclaramiento de zumos...) B. Uttraftractén Es un proceso de separacién en el que macromoléculas coloides, virus y bacterias disuekas en Un fluldo se separan de la disoluctén por fitrackin bajo presién a través de membranas selectivas. Sales e iones atraviesas la membrana. La base de la separaciin es e| tamafio molecular, ‘Se utlza para separar prote{nas y otras macromoléculas sin necesklad de utllzar procesos de preclpttacién, permitlendo el empleo de pequefios volimenes de muestra. Algunos ejemplos donde se usa es en industrias de productos lacteos, alimentaria. C. Osmosis Eldlsolvente de la dlsoluctén llukda pasa a la més concentrada a través de la membrana hasta ‘que el potenctal quimico se Iguale en ambas dlsoluctones. Es un proceso de dilucién. La Eliminacién de interferencias: de proteinas, grasas de alimentos > Preconcentracién de analitos: Enriquecimiento de cafeina, de drogas de abuso en orina...) > Cambios de fase: Una vez que el analito ha sido retenido en fase sélida se eluye con un disolvente adecuado. > Conservacién y transporte de la muestra: Muestreo de campo, Se utiliza para el muestreo de gases y contaminantes organicos en aguas medioambientales. Los adsorbentes de la SPE pueden ser: ‘+ Adsorbentes apolares: Se utllzan los alqultsilicas. S+O-S| (CHs)-R. Los analitos organicos interaccionan con la fase sélida mediante fuerzas de Van der Waals e interacciones hidrofébicas. ‘+ Adsorbentes polares: Se utiliza gel de silice, (SiO2,H20). Los lugares activos de adsorcién (polares) son los grupo silanol (Si-O-H) superfioiales y la altimina (AlbOs.H;0) + Los intercambiadores iénicos son adecuados en la preconcentracién de compuestos orgénicos iénicos o facilmente ionizables. Pueden ser aniénicos 0 catidnicos. La preconcentracién se realiza a un pH en el que un analito se encuentra totalmente en su forma iénica para se retenida por el sorbente. ‘+ Los adsorbentes de exclusién molecular permiten la separackin de compuestos organics en funclin de su tamafio molecular. Las particulas del adsorbentes tienen una red de poros a través de la cual pueden difundir las moléculas. Se utiliza el Sephadex y el Blo-Gel P * Adsorbentes de afinidad: son capaces de extraer especificamente o al menos selectivamente un determinado compuesto o una misma familia de compuestos. Estan constituides por un soporte inerte (resina, gel, silice...) sobre el cual se encuentra una enzima Inmovilzada, un anticuerpo o una hormona, capaces de reconocer o Interacclonar con su correspondiente sustrato, antigeno o receptor. Los més utlizados son los constituidos por anticuerpos Inmovllzados denominados Inmunoadsorbentes. La extraccién en fase sélida se pueden acoplar en continuo a las técnicas cromatograficas, tanto a la cromatografia liquida como a la de gases. Plazo de Matriculacin abierto curso 2016-17 Coucke’s English Academyen 5. Microextracclén en fase séllda (SPME) Fibra larga de lice fundida recubierta de adsorbente. Esta unida a un pistén de acero inoxidable ‘cubierto por una aguja protectora adaptada a un cuerpo de jeringuilla, pero el émbolo no va a ‘aspirar la muestra, sino que se encarga de hacer salir la fibra al exterior o de introducira en el interior del dispositivo. La extraccién se pue llevar a cabo tanto er ‘+ Espacio de la cabeza: sélo para volatiles en muestras liquidas 0 sélidas + Por extraccién directa: También llamado por inmersién de la fibra en la muestra. Para muestras liquidas 0 extractores organicos de muestras sdlidas. En primer lugar se atraviesa el septum del vial de la muestra, exponiendo la fibra a ésta Posteriormente se retrae la fibra y se extrae el dispositive. La desorcién puede ser térmica (en el inyector) 0 con disolvente ( en vial o en la interfase HPLC; SPME) émbote tornitte retardador del Emble Soin nwe de tibes fibra 6. Extraccl6n con fluldos supercriticos Un fluido supercritico es aquel que se encuentra a una temperatura y presién por encima de sus valores criticos, La curva que representa el equilibrio iquido-gas se interrumpe bruscamente en el punto critico. A partir de este punto no se consigue liquido aumentando la presién ni gas ‘aumentando la temperatura. Tiene caracteristicas intermedias entre gas y liquido. Las propiedades de un fluido supercritico son: ‘+ Densidad: Se aproxima a la de los liquidos y mas alta que la de los gases. El poder de solvatacién es similar a la de los liquidos, Se ve muy influenciada por presién y temperatura. Pequefios cambios de presién aumentan enormemente la densidad. + Viscosidad y ditusividad: La viscosidad se aproxima a la de los gases, es mas baja que la de los liquidos y esta influenciado por la presién. Mas presién, mas viscosidad, menosdifusividad, Los coeficiente de difusién de un soluto en el seno de un fluido supercritico son més alto que en el liquido * Constante dieléctrica: A mayor constante dieléctrica, mayor disolucién de los compuestos polares. En la zona supercritica el valor de esta constante cambia dependiendo de la naturaleza del fluido. El agua tiene mayor constante dieléctrica en estado liquido (disolvente universal) pero disminuye mucho en la zona supercritica (disolvente de compuestos apolares). Para el CO2 la constante dieléctrica en estado supercritico en mas alta que en estado de gas. Por lo tanto, un fluido supercritico posee propiedades de liquido (alta densidad, elevado poder solubliizante) y propiedades de gases (baja viscosidad, alta difusividad). Las caracteristicas de la extraccién con fluidos supercriticos son: * Solubilizacién de analltos * Alta Influencia de la P sobre el poder solubllizante * Alta penetracién dentro de la matriz + Eficacia en el transporte de analitos Uno de los fluidos supercriticos mas utilizados es e! COz, quimicamente inactivo, inocuo, no inflamable, de elevada pureza y que se vaporiza a P atmosférica. Debido a que se evapora a P atmosférica hay que aislar los analitos y acogerlo a cromatografia de fluidos supercriticos, de gases y HPLC. Como inconveniente, presenta un marcado cardcter apolar que limita sus aplicaciones. Puede modificarse con un disolvente organico polar (metano...) que se afiade en poca cantidad. Para la extraccién con fluidos supercriticos necesitamos: ‘+ Tanque de aluminio para almacenar el fluid supercritico + Bomba capaz de bombear el FS hasta la camara de extraccién donde esta la muestra Bomba auxiliar para el modificador © Camara de extraccién donde se encuentra la muestra A t* por encima de la critica ‘© Restrictor para disminuir la P ala atmosférica Sistema colector para recoger los analitos extraidos. Existe un método estatico, donde la muestra se pone en contacto con el fluido durante cierto tiempo, y un método dindmico, donde una determinada cantidad de fluido pasa a través de la muestra a un caudal determinado. Plazo de Matriculacién abierto curso 2016-17 Coucke’s English AcademySe puede aplicar a > Muestras sélidas: Muestras liquidas 0 gaseosas se adsorben en un soporte sélido antes de ser sometida al proceso de extraccién. Por ejemplo la descafeinizacion del café o el tratamiento de residuos > Extracclén en fase de vapor: Se utlllza para separar los compuestos volatiles del resto de la muestra, SI Ia presién de vapor de los analitos es alta implica que pueden ser volatilizados faclimente, y por lo tanto separados de la mattiz. Los analitos se reparten entre la muestra sélida o liquida y una fase gaseosa. Se utiliza para la separacién de com| puestos organicos volatiles que se cuantificaran con una técnica acoplada (aromas en alimentos, esencias en perfumes...). Existen dos técnicas Espacio de cabeza (estétlco): La muestra se coloca en un vial dejando un espaclo (espaclo de cabeza) suflclente entre la misma y el septum, que clerra herméticamente el vial, Después se termostatiza el sistema a la temperatura adecuada para que los analitos volatiles pasen a la fase gaseosa hasta alcanzar el equilibrio. Finalmente con la ayuda de una jeringuilla de cromatografia de gases se toma una alicuota de la fase gaseosa y se inyecta en cromatégrafo de gases. En el cromatégrafo los analitos son separados, identificados y cuantificados. Cuanto mas alta sea la temperatura mas se favorece la transferencia de analitos a la fase gaseosa, pero también de los compuestos parcialmente volatiles que interfieren. Se trabaja a las temperaturas mas bajas posibles Espacio de cabeza (dinamico): Un gas inerte (No, argén, helio...) pasa por el espacio de cabeza arrastrando de forma continua los analitos. Se retienen en una trampa criogénica o adsorbente adecuado. Posteriormente son separados termicamente o con un disolvente adecuado e inyectado en un cromatégrafo de gases. Al renovarse constantemente la fase gaseosa, el sistema intentard alcanzar el equilibrio transfiriendo de forma continua los analitos volatiles desde la muestra a la fase gaseosa Método de purga: Es una técnica empleada para conseguk un mayor aumento de la sens[bllidad. El gas Inerte arrastra los compuestos volatiles porque se burbujean en el seno de la muestra, La superficie de contacto entre el liquido y el gas aumenta considerablemente, favoreciendo [a transferencia de analito a la fase gaseosa. Posteriormente se lleva a un cromatégrafo de gases. La electroforesis es la migracién de los iones presentes en una disolucién por influencia de un campo eléctrico. Plazo de Matriculacin abierto curso 2016-17 Coucke’s English AcademyLa electroforesis capilar es un método de separacién basado en las diferentes velocidades de migracién de especies cargadas (analitos) al aplicarles un campo eléctrico. Se realiza en un tubo capllar de silice fundida de unos 50 cm de longitud y un didmetro interior de 25 a 75 mm, con una pared Interna de grupos silanol, mediante la aplicacién de un voltaje (30 kv). El capilar presenta su superficie Interna cargada negativamente, haciendo posible que los iones positivos de la disolucién se aproxime a dicha superficie creando una doble capa. (cross-section) inside of expiry, ext along engi) Lo distintos solutos tienen diferentes movilidades y por consiguiente migran a través del capilar a diferentes velocidades. Los cationes se dirigen al terminal - y los aniones se dirigen al terminal +. Algunas modificaciones permiten separar moléculas neutras. El fundamento tedrico de la electroforesis capilar se basa en la produccién de dos fenémenos que acttian sobre la migracién de los analitos: + Electroforesis: Migracién de especies cargadas por accién de un campo eléctrico + Electroésmosis: Flujo de disolvente por accién de un campo eléctrico. “Factores que influyen en la migracién La velocidad de migracién depende entre otros factores de| campo eléctrico aplicado, E. E v Ti Siendo V el potencial y L la longitud del capilar Esta dependencia se expresa segiin: v= Geo tHE Velocidad aparente Donde: Heo = contribucién a la movilidad del flujo electroosmético He = contribucion electroforética (+para cationes y — para aniones) Plazo de Matriculacién abierto curso 2016-17 Coucke’s English Academyen Por lo tanto, la movilidad de un ién es la suma de la movilidad electroosmética de la disolucién, mas la movilidad electroforética de n, Pata un catién (analito) que se mueve en la misma direccién que el flujo osmético, Heo y He tienen ‘el mismo signo. = (Heo + HeJE Velocidad aparente Si la electroforesis transporta los aniones en sentido opuesto a la electrodsmosis, leo y He tienen (eo HeJE— Velocidad aparente Otros factores que influyen en la migracién son la temperatura, las dimensiones del capilar, el voltaje aplicado, Elelectrofito de fondo suele ser una disolucién reguladora. Para la inyeccién de la muestra usamos hidrodinémica (diferencia de presiin entre los extremos del capliar) o electrocinética (un ‘campo eléctrico fuerza a la muestra a entrar en el capliar). Para detectar los resultados utlBzamos ultravioleta, fluorescencia, conductividad... Los aniones pueden tardar mucho tiempo en detectarse. Al invertir la carga de la pared del capilar recubriéndolo con surfactante catiénico se invierte la polaridad del instrumento, quedando el ‘orden de elucién de la siguiente manera (inverso a antes): 1.Aniones; 2.M. neutras; 3.Cationes. Esta técnica tiene su aplicacién en analisis organico (cationes, aniones), orgénico (ADN), medioambientales...TEMA 9: CROMATOGRAFIA DE GASES Se ha desarrollado espectacularmente. Gran poder de resolucién para compuestos organicos volatiles (lablikdad térmica de los solutos, es decir estables a la t* requerlda para su volatllizacién.) Técnica utllizada para la separaciin y andllsis de mezclas de sustancla volitlles y térmicamente estables que fluyen en una corente gaseosa a través de una fase estaclonarla fijada a un tubo. La fase mévil es un gas de arrastre que no interacciona con el analito La fase estacionaria puede ser: ‘+ Sélido que offece gran superficie sobre el que se adsorbe el analito (Adsorcién). Se usa la cromatografia gas-sélido, que se aplica casi exclusiamente para la separacién de especies gaseosas de bajo peso molecular como el N, 0.6 C. ‘+ Liquido no voléttl Inmovilizado por adsorcién o enlace quimico sobre la superficie de un soporte sélido (particién). La cromatografia gas-lfquido es muy utllizada y posee gran resolucién. “instrumentacion Un cromatégrafo debe poser: Cilindro de gas portador con un sistema de control de gas v V Portan de inyeccién de la muestra ¥ Columna y horn v Detector y sistema de registro de datos Control Inyector de de flujo muestra AN Detector Homo de la Gas de arrastre columna Plazo de Matriculacién abierto curso 2016-17 Coucke’s English Academy“Sistemas de inyec > Split/splittess: Divisor de flujo. Reduce el volumen de la muestra (0.1-10% del volumen Inyectado). E! 80% de la muestra entra en la columna. Deriva en compuestos de baja presién de vapor. > Inyeccién “on colum”: Muestras que pueden descomponerse al ser calentadas. “ Gaede Araste leesde arasve nea saree ‘Agua cde laeringa Colurmna Superfcle Callente Lana de Vidrio colon apie Septum "Columnas > Empacadas: Rellenas de pequefias particulas de soporte recublertas de una delgada pelicula de fase estaclonarla liqulda, Tubos de acero Inoxidable, vidrio o teflén, > Capilares: La FE recubre el interior de la columna. Tubos capilares abiertos de vidrio. Poseen mayor resolucién, menor tiempo de andlisis, mayor sensibilidad y es necesario menor cantidad de muestra “Temperatura: Homo Debe existir una temperatura lo suficientemente alta para volatilizar una porcién de moléculas de la muestra. La columna se sitéa en un homo termostatizado para que la separacién se pueda realizar a una temperatura reproducible y para que se pueda ampliar en un amplio intervalo de temperaturas Existen dos modalidades de trabajo: ‘+ Anéllsls [sotérmico: A temperatura constante ‘+ Andlisis a T* programada: Aumento lineal de la T* con el tiempo. Para mezclas de analitos con puntos de ebullicién muy distintos. Plazo de Matriculacién abierto curso 2016-17 Coucke’s English AcademyEl efecto mas significativo de los cambios de T® es sobre la posicién del equilibrio en distribucién Un aumento de la temperatura aumenta la presién de vapor de los componentes, mucho mas que su solubilidad en la FE. Los hornos son pequefios, ctibicos y con circulacién de aire. “Detectores y sistemas de registro y tratamiento de datos Los detectores son dispositivos cuya funcién es poner de manifiesto el paso de los analitos originando una sefial eléctrica, que debidamente amplificada, es registrada y enviada al microprocesador. Esta sefial eléctrica es proporcional a la concentracién de analito en el gas portador eluldo en cualquler instante. Mide de forma continua una propiedad fisica o quimica del gas que circula permanentemente a su través. Indica el momento en que pasa un soluto definiendo los tiempos de retencién y genera una sefial eléctrica proporcional a la concentracién. Existen distintos tlpos de detectores: Y Detector de conductividad térmica Y Detector de lontzacién de llama (FID) V Detector de captura de electrones (ECD) El sistema de registro proporciona el ta y el area total de cada componente medido. “Aplicaciones de la cromatografia de gases Medlante fa seleccién de Ia fase estaclonaria adecuada pueden separarse casi todos los compuestos que puedan ser volatilizados o convertidos en algtin derlvado volatil (derivacién) ‘Ademés permite Kientificar y cuantificar fos componentes de la mezola de forma simulténea, + Industria petroquimica * Ciencia de los alimentos © Anilisis de drogas Plazo de Matriculacién abierto curso 2016-17 Coucke’s English AcademyTEMA 10: CROMATOGRAFIA LIQUIDA Y DE FLUIDOS SUPERCRITICOS 4.CROMATOGRAFIA LIQUIDA La cromatografia liquida posee una fase mévilliquida. Puede ser liquido-sélido 0 liquido- Existen dos tipos de cromatografia liquida: > Cromatografia convencional: En colimna o plana > Cromatografia de alta resolucién (HPLC): Cromatograffa en fase Iiquida en cohimna a la cual se apiica una sobre presién que acelera el proceso de separactin, disminuyendo el tlempo de andlisls, Aumenta la resolucién cromatografica, pero requiere una alta presién (70 2.400 atm, hasta 1000 atm) para forzar el paso del liquido a través de la columna, ya ue las particulas muy finas ofrecen mayor resistencia al flujo. Es el método mas sofisticado y moderno de la cromatografia liquida. La cromatografia liquida de alta resolucién no necesita de la evaporacién de las muestras para su andlisis. Cualquler muestra puede ser potenclalmente anallzada por esta técnica. Permite la separacién de: Y Mezclas liquidas con baja volatiidad Y Productos termolables. Esta técnica es utiizada en la separacién, identificacién y cuantiicacién de cualquier muestra que pueda ser disuelta en un disolvente, Permite Identificar compuestos a concentraclones muy bajas, ‘También se utiliza como técnica preparativa y en productos farmacéutices, alimentos 0 nutracéuticos (alimento o parte de un alimento que proporciona beneficios médicos o para la salud, incluyendo la prevencién ylo tratamiento de enfermedades) "Proceso de la cromatografia liquida de alta resolucin Una muestra en estado liquido es arrastrada por una corriente liquida llamada eluyente. Como fase estactonarla actiia un sélklo fihamente dividkio (3 a 10 um de diémetro) o una pelicula a é! adherida,Dependiendo de la retencién de los componentes de la muestra por la fase estacionaria y de su solubliklad en el eluyente se provocard su migracién diferenclal. Las caracteristicas de la cromatografia liquida de alta resolucion son: Y Selectividad ¥ Reproducibilidad Y Sensibilidad v Rapidez La fase mévil iquida (disolvente adecuado) se bombea a través de un sistema de separacién compuesto por un prefitro y una columna, contenendo esta titima la fase estaclonarla, a una elevada prestén. Por su distinta Interacclin entre las dos fases, la muestra es retenida con Intensidad variable, eluyéndose de forma separada por la columna El volimen Inyectado de muestra debe ser lo mas pequefio posible, para que Ios resultado aparezean mas nitkdos En la cromatografia de liquido, la fase mévil no sélo sirve para el transporte de los solutos, sino que tamblén Interacclona con ellos modificando los factores de selectividad. Los disolventes deben desgastficarse antes de su empleo en HPLC. La desgasificacién reduce el rlesgo de formacién de burbujas en la columna o en el detector. ¥ Alta pureza V Inactividad frente a la fase estaclonarla ¥ Baja viscosidad Y Faciltar la recuperacién de la muestra Segiin si su composicién varia 0 no con el tiempo podemos distinguir: + Eluci6n isocrética: La composkcién de la fase mévil ya sea pura o mezcla, permanece constante, Plazo de Matriculacin abierto curso 2016-17 Coucke’s English Academy‘+ Elucién en gradiente: Se utilizan dos o tres disolventes de distinta polarldad y se varia la composicién de forma continua o mediante etapas escalonadas, Muy util para aquellas muestras con componentes con diverso grado de polaridad Un gradiente normal en cromatografia podria ser comenzar con un 5% en acetonitrilo y progresar de forma lineal hasta un 50%. Columnas de cromatografia liquida de alta resolucién La muestra no debe contener séildos para que no se atasque la columna, sl es necesarlo deberd filtrarse por un filtro de membrana o precolumuna. (el famoso prefiltro) Rellenos mas uniformes y de menor tamajio. Al disminuir el tamafio del relleno aumenta la eficlencia pero también la presién de trabajo. Utliza particulas de fase estaclonarla para el Interlor de la columna con dlémetro muy pequefio para aumentar [a eflelencla, en tomo a 3-10 jum. Asi se reduce el tamafio de columna (10-30 cm de largo y 4-10 mm de dlémetro) y se reduce el tlempo nacesarlo para la separacion. de ffa liquida de alta resolucién (HPLC) rec ake eee ea eke Ges) Cromatografia en fase Polar Apolar No polar mas normal rapido Cromatografia en fase Apolar Polar Polar mas rapido reserva La més utiizada es la cromatografia en fase de reserva (75% de los procedimientos) y las fases méviles més utlizadas son el agua, el metanol o el acetonttrilo. Plazo de Matriculacién abierto curso 2016-17 Coucke’s English AcademyEn general, para seleccionar el tipo de fase estacionaria: + Siel soluto es no polar, usamos cromatografia en fase normal + Siel soluto es polar, usamos cromatografia en fase reserva Detectores de cromatografia I de alta resolucién Cualquier propiedad fisicoquimica que se pueda medir en la disolucién podria usarse como método de deteccién, Los detectores de HPLC no son destructivos, Se pueden clasificar como: ‘+ Detectores que miden una propiedad en la fase mévil ‘+ Detectores que miden una propledad en los solutos Factores que influyen en el rendimiento del andlisis v Didmetro intemo de la columna: A menor didmetro, mayor sensibilidad Presiém. A mayor presién, mayor separacién Tamafio de la muestra Mientras menos cantKlad mejor Polaridad de la muestra, del disolvente y de la columna empleada 7 vv v Temperatura: A mayor temperatura mayor separacién Rete nae [ene ine Se requiere poca cantidad de muestra Instrumentos sofisticados y personal cualificado Gran exactitud y precision Consumo de disolventes organicos La muestra no se destruye en el proceso 2. CROMATOGRAFIA DE FLUIDOS SUPERCRITICOS Como ya hemos visto, un fluido supercritico posee propiedades de liquidos (alta densidad, elevado poder solubilizante) y propiedades de gases (baja viscosidad y alta difusividad) La cromatograffa de fluldos supercriticos es una técnica hibrida entre la cromatografia de gases y la HPCL, Permite separar mezclas en la que no es adecuada la cromatografia de gases nila HPCL: ‘+ Compuestos no volatiles o térmicamente Inestables que no pueden ser separados mediante CG ‘© Aquellos que contienen grupos funcionales que imposibilitan su deteccién en HPCL Plazo de Matriculacién abierto curso 2016-17 Coucke’s English AcademyDebido a las caracteristicas de la fase méul (alta P y T) se emplean equipos parecidos a los de la HPCL. Con respecto a la fase estactonarla, se pueden emplear al igual que en la HPCL columnas capilares 0 de relleno, sobre todo capilares: + De 10.a 20 mm de longitud y didmetro entre 0.05 y 0.10 mm metro entre 0.5 y 4.6 mm y grosor de la particula de relleno 3.a 10 ym “Fase mévil La fase mévil més uflizada en CFS es el didxido de carbono, debido a sus propiedades: Apolar, dlsuelve gran cantkiad de moléculas orgénicas Transparente a la radiacién uttravioleta ¥ Inodoro ¥ No téxko Y Barato ¥ Nolnflamable EI. CO2 se puede obtener facilmente como fluido supercritico. Su temperatura critica es de 31°C y ‘su presién critica de 72,9 atm.*Detectores > Detector de jonizacién de llama: También se usa en CG. Permite determinar casi cualquier compuesto organico. Espectrémetro de masas > Detector espectrofotométrico: infrarrojos, ultravioletas, fluorescencia. v TEMA 12: METODOS VOLUMETRICOS La cantidad de analito se determina midiendo el volumen de una disolucién, de concentracién exactamente conocida, que se necesita para que reaccione estequiométricamente con el analito 0 una sustancia quimicamente equivalente. 1. Valoraci6n La valoracién es un proceso de adicién de volumen medido de la disolucién valorante de concentracién conocida para que reaccione con el constituyente deseado. La disolucién valorante es un reactivo de concentracién exactamente conocida usada en una valoracién. Para realizar una valoracién necesitamos: * Una disolucién valorada de reactivo. * Material adecuado para la medida del volumen * Un sistema indicador de final de reaccién. y Punto de equivalencia: Punto de la valoracién en el que hemos afiadido una cantidad de disolucién valorante quimicamente equivalente a la sustancia con la que reacciona 7 Punto final: Punto de la valoracién en el que se maniflesta algtin cambio fisico asociado al punto de equlvalencla Error de valoracién: Surge cuando se presentan diferencias entre el punto final y el punto de equivatencla Deteccién del punto final: Basado en la observacién de alguna propiedad de la disolucién que cambie de manera caracteristica cerca o en el punto de equivalencia v v Erlenmeyer 0 matraz Plazo de Matriculacin abierto curso 2016-17 Coucke’s English AcademyPara detectar el punto final necesitamos de un sistema indicador, eligiendo conocer los equilibrios iénicos 0 el fundamento fisico-quimico del indicador: A) Indicadores quimicos 0 visuales Compuesto quimico que corresponde al cambio brusco de concentracién de alguna de las especies mediante la valoracién de alguna propiedad fisica. Existen distintos tipos: Y Indicadores coloreados v Indicadores de adsorcién Y Indicadores turbidimétricos v Indlcadores de fluorescencla B) Indkcadores fiskco-quimlcos (curvas de valoraclén). Representacién gréfica de las vartaclones de concentracién de cada uno de los reactlvos en funclén de las cantldades creclentes (volumen) adiclonadas de agente valorante, Existen valoraciones potenclométricas, conductimétricas, fotométricas.... Las curvas de valoracién son representaclones gréficas de la propledad que varia durante la valoracién en funcién del reactivo valorante Y Logaritmicas: Existe una relacién directa entre la propiedad que se mide (que depende del logaritmo de la concentracién de las especies que varia durante la valoracién) y el reactivo afiadido. Tienen forma de ~'S”. El punto final coincide con el punto de maxima pendiente de la curva. (punto de inflexién). A través de métodos gréficos, Antes del punto exceso de analito, después de valorante Y- Lineales: Existe una proporcionalidad directa entre ambas variables. (conducimétricas fotométricas.. representan como dos rectas que se cortan en forma de V,L... La interseccién de las rectas nos da el punto final de la valoracién. Una mejor localizacién se consigue mediante la representacién gr éfica de la valoracién del incremento de la variable medida er funcién del volumen afiadido (P/V curva diferencial) Plazo de Matriculacién abierto curso 2016-17 Coucke’s English AcademyEl agente valorante debe tener una concentracién exactamente conocida; > Disoluciones patrén primarias, Tienen una concentracién exactamente conocida de sustancia activa (reactivo). Se preparan por pesada de una fraccién conocida de una sustancia, Debe tener: Y pureza absoluta Y estable a la T° de secado Y Inalterable al alre Y No higroscépico ¥ alto peso molecular Y solubles en el medio de valoracién Con los patrones primarios podemos preparar disoluciones valoradas, estandarizar un agente valorante... > Disoluciones patrén secundarias: Disolucién de concentracién conocida. Se obtuvo tras la valoracién o estandarizaci6n frente a un patron primario. El proceso mediante el cual se determina la concentracién de una disolucién valorante valorando con un patrén primario se conoce como estandarizacién. 2. Métodos de valoracién A) Valoracién directa El analito reacciona directamente con el valorante (reactivo) y existe una relacién directa entre la cantidad de analito presente y la cantidad de valorante consumida A+B 5 Productos B) Valoracién por retroceso Adiccién de un exceso conocido de valorante que no se consumen con el analito, se valora posteriormente con otro reactivo C. El analito se determina por diferencia. Realmente, se valora con A+ Boxe = productos + Bro consum ido | Reaccién de valoracién. B no consumido se valora con C C) Valoracién indirecta El analito (A) es reemplazado estequiométricamente por otra sustancia en una reaccién preliminar y ésta es determinada posteriormente por valoracién. Plazo de Matriculacién abierto curso 2016-17 Coucke’s English AcademyAtreactives % Z + productos Z+ valorante ‘ productos; reaccién de valoracién en 3. Clastficaclén de los métodos analiticos 1 Volumetria éelio base Método cuantitativo de determinacién del analito basado en reacciones acido-base (transferencia de protones entre el acido y Ia base). El agente valorante es un dcido o base fuerte y los analitos ‘son acidos o bases fuertes o débiles. La curva de valoracién representa el pH frente al volumen (ml) de valorante adicionado. En el punto de equivalencia existe un cambio brusco y nitido en el valor del pH del medio. Facilitan la seleccién del indicador. Se utiliza en la valoracién de acidos y bases orgénicas e inorgénicas, tanto en medio acuoso como en disolventes orgénicos Los Indleadores dcldo-base son dcidos o bases débiles de colores fuertes. El color de la forma ionizada es muy diferente de la de a forma sin ionizar. Cambian de color en funcién del pH de ta disolucisn, - [producto] i i PH = PK Ancestor +108 Trceraga] Pa = Punto medio entre verde ynaranja [productos] _ 1 [sustrato] ~ 10 1 > naranjaspH = pRAinaicador + 109-55 = PKQing ~ , (Productos) i Teastratoy 2 107 verde: pH = pKainacador + l0g10 = pRAng +1 El indicador cambia de color en un intervalo de dos unidades de pH: rango o intervalo de ‘ranstotin, Plans = PKaigg 21 ~ Cambio de pH minimo que se requiere para que ocurra un cambio de color’ Pata seleccionar un indicador acido-base debemos tener en cuenta: ‘+ LaKa del indicador debe ser cercana al pH del punto de equivalencia ‘+ ElpH del punto de equivalencia se deberd situar al menos en el interior de la zona de viraje del it icador.ll. Volumetrias de formacién de complejos. Usadas en reacciones de formacién de complejos. Al afiadir el valorante se forma un complejo ‘soluble, no disociado estequiométrico. Algunos aspectos importantes son: ‘+ Elecclén del agente complejante adecuado ‘+ Elecclén de las condiciones experimentales (pH, quelatantes que puedan compet...) * Eleccién del método adecuado para detectar el punto final. Plazo de Matriculacién abierto curso 2016-17 Coucke’s English AcademyE! Acido etilendiaminotetracético (AEDT) es el agente quelatante mas empleado en las valoraciones. Forma complejos estables de estequlometria 1:1 con la mayorla de los lones metélloos. Por valoracién directa o indirecta (secuencia de reacciones), virtualmente todo los elementos de la tabla periédica pueden determinarse con AEDT. Se calcula la concentracién del ién metélico libre en el transcurso de la valoracién conforme se adicionan volimenes crecientes de ADEDT. La curva se construye representando graficamente pM** frente a V (ml) de valorante afiadido. Los Indicadores metacrémicos son colorantes organicos que forman complejos con los metales los cuales presentan un color distinto al del indicador libre, Funcionan simulténeamente como indicadores dcido-base y de metales. Para que un indicador sea util debe unirse al ién metélico menos fuertemente que e| AEDT, Kuy > Kor El camblo de color en el punto final es debldo a que el valorante desplaza el Indicador y ‘observamos la coloracién del Indleador Ilbre. MI + VS MV +1 Primero se forma el complejo del metal con el AEDT (mas fuerte) y sélo después tiene lugar la reaccién de desplazamiento. Intervalo de transicién = pM’ trans = logk’ my $1 Ill. Volumetrias de precipltacién. Plazo de Matriculacién abierto curso 2016-17 Coucke’s English AcademySus diversas aplicaciones son: + Determinacién de halogenuros (Ag*) + Determinacién de sulfuro, cianuro y sulfocianuro (Ag*) + Determinacién de sulfatos con Ba‘? Para obtener la curva de valoracién utilizamos una disolucién de v ml de NaCl con AgNOs como agente valorante precipitante (para los dos primeros usos) Nat +Cl- SAgCl 4 Conforme vamos afiadiendo AgNOs el cloruro problema se va consumiendo por formacién de AgCl poco soluble. -Deteccién del punto final A) Indicadores que forman compuestos coloreados con el agente valorante (en exceso) (método de Mohr) (rojo de los ladrillos) Clv + Ag* 2 AgCLL Cromato + 2 Ag* 2 Ag2Cr0, C) Indicadores de adsorci6n: método de Fajans. Un indicador de adsorcién es un compuesto organico que tlende a ser absorbldo en la superficie de un sélldo (precipttado) durante el proceso de valoracién.(se adhlere al preclpttado que se va formando). Idealmente la adsorclén o desorclén deberfa producirse en las cercanias del punto de equlvalencla, y el resultado no es solo un cambio de color, sino también una transferencia de color de la disolucién al sélido. Determinacién de haluros con plata. Un ejemplo es la fluresceina, la eosina. Plazo de Matriculacién abierto curso 2016-17 Coucke’s English AcademyVv. Volumetria redox Las volumetrias de éxldo-reduccién estén basadas en reacclones quimicas en las que se producen transferencia de electrones de unos reactivos a otros. > Agente oxldante; Toma electrones procedentes de otra especie, Elagente oxidante se reduce, Los reactivos oxidantes se emplean para determinar Algunos ejemplos son el permanganato potasico 0 el dicromato potasico > Agente reductor: cede electrones a otra especie. El agente reductor se oxida. Los reactivos reductores se utlizan para determinar - Algunes ejemplos son el tlosulfato s6dico 0 el loduro Ox, + Red, = Red; + Ox, La volumetria redox tiene diversas aplicaciones: + Analitos de naturaleza inorganica: Numerosas especies inorgénicas presentan diferentes, estados de oxidacién estables con utlidad analitica (Fe, Sn...) + Analitos de naturaleza orgénica: Numerosos grupos funcionales organicos se oxidan o reducen cuantitativamente y por tanto se pueden determinar mediante un método de valoracién, Principios activos.La curva de valoracién es una representaci6n del potencial frente al volumen de valorante adicionado. El potencial esta relacionado con la concentracién a través de la ecuacién de nernst. Volumen de Cefanadico (ml) Son autoindicadores, es decir el valorante o el analito actuan como indicador. Un ejemplo es el permanganato de potasio. En el punto final hay un pequefio exceso de valorante KMnOz, que colorea la disolucién, por ello el punto de equivalencia no puede coincidir con el punto final. Es decir, en el punto final aparecera un color pirpura en el medio de valoracién. Los Indicadores especificos reaccionan con el valorante 0 el analito. Un ejemplo es: Almidén + yodo — complejo azul Los Indicadores redox son compuestos organicos que pueden oxidarse o reducirse, presentando distinta coloracién las formas oxidadas y reducidas del indicador. 0.059 Ingy) + 17 & lMyeg; intervalo de transicién = E%in + Para seleccionar el indicador el Ei debe ser cercano al potencial del punto de equivalencia, el cual debe estar Inclukdo en el Intervalo de transicién del Indlcador. Plazo de Matriculacién abierto curso 2016-17 Coucke’s English AcademyTEMA 14: METODOS VOLUMETRICOS EN EL AMBITO FARMACEUTICO 1, Aplicaciones de la volumetria acido-base Los analitos pueden ser acidos y bases fuertes y débiles y los agentes valorantes pueden ser acidos o bases fuertes | Método Kjeldaht Nos sirve para la determinacién de nitrégeno organico. Su aplicacién més generalizada es la determinacién de proteinas en alimentos. EI método consiste en la digestién de la muestra en medio acido sulflirico y en presencia de un catalizador. La totalidad de nitrégeno se convierte en sales de amonio (sulfato y bisulfato de amonlo). El Kén amonlo obtenko se trasforma en medio baslco en amonlaco que se destlla y se procede a su valoracién directa o por retroceso. Las etapas del método son: v Digestién o mineralizacién: Digestién en medio acido sulfurico. Suele usarse como catallzador CuSOx. Se adicciona KzSOz como elevador de la temperatura de ebullicién (no como catalizador). La materia organica se convierte en C > C02; H — H,0;N > NHy. El sulfirico atacante se convierte en SQ2 y SOs, por lo que debemos hacerlo en la campana de extraccién. El material que utilizamos es un matraz Kjeldahl (periformes), acido sulfrico, catalizador, KaSOs y un mineralizador. ¥ Destilacin en medio basico: Neutralizacién del HzS0x y liberacién de amoniaco por adicolén de NaOH. Se callenta el amoniaco llberado y se separa de la mezela por destllaclén Y Valoracién acido base: El amoniaco condensado se recoge en el matraz de valoracién sobre un volumen conocido de disolucién patron de HCl o H2SOx. Se valora por retroceso Plazo de Matriculacin abierto curso 2016-17 Coucke’s English Academyel exceso de Acido con disolucién patrén de base. También se puede hacer la valoracién directa recogiendo sobre acido bérico. HClexe + NH3 > NHgCl + HClyo consumido HClio consumito + NAOH > NaCl + H0 milimoles HCIt = milimoles HClyy3 + milimolesHClyaox milimoles HCly milimoles NH; 1mol NH; = 1mol N %Proteindrora = YNrovar x factor de conversion Es decir: milimoles HCliseai = moles de N + mmoles de NaOH; generalmente 6.25, 6.38 lacteos y 5.70 para cereales 2. Aplicaciones de la volumetria de formacién de complejos: Dureza del agua El contenido salino de las aguas potables es principalmente debido a las sales de calcio y magnesio y, por esta razén, las normativas legales especifican métodos oficiales para la determinacién de Ca(II), Mg (Il) y de la suma de ambos (dureza del agua) La Dureza del agua corresponde a la suma de las concentraciones a la suma de las concentraciones de cationes metalicos ( con excepcién de los metales alcalinos), fundamentalmente Ca y Mg (Fe, Mn, Al...) suma de sales alcalinotérreas ae eros re 0-100 Cae, Nat cl 0-25 Mg?*, K* NOs 04 Otros Noz Alser el calcio y el magnesio elementos mayoritarios los métodos volumétricos proporcionan buenos resultados analiticos. -Métodos tradicionales: AEDT y gravimetrias Los alealinotérreos presentes en el agua forman complejos de tipo quelato de elevadas constantes de formacién con la sal disédica del acido etilendiaminotetracético (AEDT). Tanto el calcio como el magnesio se determinan mediante dos volumetrias de formacién de complejos utilizando el AEDT como agente complejante y un indicador metalocrémico para detectar el punto final. La normativa legal exige expresar las concentraciones en mg de cada ién contenido por litro de agua y la dureza del agua como la suma de las dos concentraciones anteriores expresadas en Plazo de Matriculacién abierto curso 2016-17 Coucke’s English Academymq de carbonato céicico por litro de agua. El método es aplicable a aguas naturales superficiales yy subterrdineas, de uso industrial y humano. El método permite: ‘© Ladeterminacién individual de Ca a pH=13 + Ladeterminacién de Ca y Mg conjuntamente controlando el pH del medio 10-11, en L. Determinacién individual del calcio Utllzamos AEDT como agente complejante y murexida como Indicador metalocrémico. El pH debe estar en 13 ya que es el pH al cual precipita el Mg y asi no Interflere en fa determinackin del alco Calis, + Indicadormurenige 72 Cal + Cai. Callie HY CAV? Keay = 10107 Reaccién de valoracién Youu en exceno + Cal 32 CaY?+ indicadomyy. Reaccién indicadora La constante de formacién de CaY*es mayor que la constante de formacién de Cal ll. Determinacién de calcio y magnesio conjuntamente En medio alcalino el AEDT forma complejos estables con ambos iones, pero la constante de formacién de complejo estables con ambos jones, pero la constante de formacién del complejo Ca-AEDT (Keay) e5 mayor que la del complejo es mayor que la del complejo Mg-AEDT (Kus), por lo que al valorar un agua problema se forma antes el complejo de calcio y después el del magnesio. Cajit,. +¥" = Ca¥ Keay = 10°°7 Malye + Y= MgY Kygr = 107 MGlyojo + Yivqota en exceso * MGY* + Indypre carat) Se realiza a un pH=10, para evitar la precipitacién del Mg y se usa como indicador el negro de Erttocromo T, que hace que pase de un color rojo vino a un azul intenso. 3. Aplicaciones de la volumetria de precipitacién (determinacién de Haluros) METODO DE MOHRHay una gran presencia de cloruros en la naturaleza, de diverso origen, que puede tener repercusiones nocivas para el ser humano. Para la determinaci6n de algunos haluros como los cloruros puede hacerse mediante métodos volumétricos, donde destaca el método de Mohr (aunque hay otros como el méfodo Fajans) 0 mediante electrodo selectivo. El Método de Mohr es un método directo para valorar haluros (cloruros y bromuros) mediante la adiccién de una solucién estandar de AgNOs y utilizando como indicador una disolucién soluble de cromo potasico (KeCrOs) que imparte coloracién amarilla a la disolucién problema. Se basa en las diferentes solubilidades y colores de los precipitados que se forman. En el punto final se produce un viraje de color de amarillo a amarillo-anaranjado por la precipitacién de Ag2CrOx CI” + AGaisotuci 6n vatorada * AGClyrecipitado blanco CrOg + 2Ag 2 AG2CTOs Gprecipitado color rojo ladrillo ) 4. Aplicaciones de los equilibrios éxido-reduccisn METODO KARL FISHER Es un método utilizado en agua. Se puede llegar a determinar cantidades trazas de agua In 2 Oxidante + SO, Esta iodometria ha sido rapida y universalmente aplicada para la determinacién del contenido de agua en muestras de diversas naturalezas. Se ha incorporado a la mayoria de las farmacopeas. Ha sido adoptado como método ASTM. El método se basa en la reaccién que implica la reduccién del yodo por el didxido de azufre en presencia de agua. E! factor limitante de la reaccién serd el agua, a condicién de que los reactivos estén exentos de ella In + S02 + HzO — H,S0, + 2HI También puede hacerse en medio no acuoso utilizando cuatro compuestos: metanol, piridina didxido de azufre y lodo. La piridina y el metanol se adicionan para evitar que se revierta la reaccién, aunque hoy es dia se sabe que la reaccién Karl Fisher es bastante compleja. 32 + ROH + Hy0 + SO,» 3ZH* + ROSOs + 2; Donde R es un grupo alquilo y Z una base Las disoluciones de Karl Fisher se basan en cuatro componentes: el yodoins.s, €! diéxido de azufreincus, la base y el disolvente. Plazo de Matriculacién abierto curso 2016-17 Coucke’s English AcademyLa funcién de la base es tamponar el pH de la disolucién en el rango de 5-8. El ph dptimo se encuentra entre 5,5-7. A pH<4 la reaccién es lenta y a pH>8 las reacciones secundarias no son estiquiométricas. La piridina es téxica y no se usa ya como base, ahora utilizamos Morfolina 0 dietanolamina Los reactivos de Karl Fisher son el Hydranal®. Se usa en mg de agua/1ml de reactivo. (titulo) Para evaluar el titulo vemos los mg de analito que valoran 1 ml del reactivo, Estandarizacion frente a disoluciones patrén de agua frente a sales hidratadas utilizadas como patrones. Los valores tipicos de titulos son de 3 a 6 mg HzO/ml de reactivo para valoraciones en macroescala. Una décima parte para valoraciones en microescala. Para conocer el titulo de un reactivo de Karl Fisher se utiliza una muestr de 0.2005 g de tartrato s6dico deshidratado patron A (Na2C4HsOs . 2H20 PF:230.1). En el procedimiento volumétrico se gastan 14.12 ml de reactivo de Karl Fisher (PF H2O=18) 1 mol de A esta relacionado con 2 moles de H2O. 230.1 mg de A — 2x18 = 36mg H,0 200.5mg—>X; X= 3137mg H,0 31,37 mg — 14,12 ml reactivo KF Y¥—1mldereactivo KF; Y = 2.22 ml H,0 Plazo de Matriculacién abierto curso 2016-17 Coucke’s English AcademyTEMA 15: GRAVIMETRIAS Abarca una gran variedad de técnicas en las que la determinacién final se hace pesando en una balanza analitica. Son muy usados. Las principales farmacopeas vigentes establecen la determinacién de pardmetros de calidad de las materias primas de los férmacos mediante la aplicacién de estos métodos, también algunos ensayos para determinar el contenido de diferentes principios activos en sus materias primas, es decir, su pureza; asi como ensayos de determinacién de formas farmacéuticas y la determinacién de sustancias relacionadas se realizan aplicando el andlisis gravimétrico. Se puede proceder de diversas formas: 1. Método gravimétrico por volatilizaclon Provocar la volatilizacién de un compuesto y observar el cambio de peso en la muestra El componente a determinar es volatil. El analito se volatiliza sometiendo a la muestra a una temperatura adecuada Muestragnatro +Q@— AT Existe un procedimiento directo y un procedimiento indirecto > Procedimiento directo: El producto volatil se recoge sobre un sorbente y se pesa. El incremento de peso de la “trampa’’ se atribuye al contenido de analito en la muestra. Por ejemplo para determinar la humedad de una muestra, se calentaria ésta para posteriormente recoger el aguavapar Sobre un desecante sdlido y su masa se determina a partir del peso ganado por el desecante. Plazo de Matriculacién abierto curso 2016-17 Coucke’s English Academyen > Procedimiento indirecto: La muestra se somete a calentamiento y se asume que sélo se volatiliza el analito, La diferencia de masa antes y después de la volatiizacién nos permite calcular la concentracién de analito en la muestra. Por ejemplo para determinar la humedad de una muestra, la cantidad de agua se determinaria por la pérdida de peso dela muestra después de la calefaccién, Se puede cometer error si hay otros componentes que pueden volatiizarse, 2. Método gravimétrico por precipltacién Un precipitado es un sélido insoluble que se separa de la disolucién. En la gravimetria por precipitacién, el constituyente buscado se separa en forma de sustancia insoluble, 0 sea de precipitado. Una porcién pesada de la muestra que se estudia se solubiliza por algtin procedimiento y luego el lemento a determinar (analito) se precipita en forma de un compuesto poco soluble. Mey +X > Axstito El precipitado se separa del resto de la disolucién por filtracién, se seca, se trata y se converte en lun compuesto de composicién conocida, se pesa y se relaciona estequiométricamente con el analito presente en el mismo. El anaito forma parte de un precipitado, existiendo una relacién estequiométrico entre todos los ‘componentes que forman parte de la reaccién de precipitacién. *Propiedades de los precipitados y de los reactivos precipitantes ‘+ Reacoién especifica selectiva en condiciones adecuados + Precipitado fécilmente fitrable ‘+ Elprecipitado debe tener una solubilidad baja para que las pérdidas del analito durante la fitracién y el lavado sean despreciables. ‘+ Elprecipitado debe ser estable ante agentes atmosféricos. ‘+ Elprecipitado debe de tener una composicién estiquiométrica perfectamente conocida. “Instrumentacién Es muy sencilla y practicamente se requiere de una buena balanza, mufla y crisoles adecuados: |. Material volumétricoI. Balanza analitica lll Crisoles: de placa filtrante (sélo secado) y convencionales (métalicos, porcelana) IV. Mufla (horno): puede alcanzar temperaturas de hasta 1200°C * Qperaciones generales en andilisis gravimétricos > 1.Pesado de la muestra > 2. Adecuar la muestra al método de andlisis (disolver....) 3. Proceder a formar el precipitado: reaccién de precipitacién vv 4 Separar el precipitado: lavar, secar, etc. v 5. Llevar el precipitado a su forma mas estable v 6. Pesar el precipitado v 7. Calculos gravimétricos ‘Mecanismos de precipitacion Analito + agente precipitante = Precipitado insoluble Se adiciona un ligero exceso del agente precipitante para reducir la solubilidad del precipitado en presencia del ién comin. 1. Sobreprecipitacién: La cantidad de especies en disolucién es superior a la del equilibrio. Formacién de una disolucién sobresaturada. I Nucleactén: Combinacién de los iones para formar particulas diminutas invisibles del precipitado nticleos. Il, Crecimlento de los nticleos: Formacién de depésitos de iones procedentes de la solucién sobre nticleos ya existentes dando lugar a particulas de mayor tamafio hasta formar particulas grandes, insolubles y visibles. El tamafio de las particulas del precipitado es funcién de la naturaleza del precipitado y de las condiciones experimentales bajo las cuales se producen. *Tipos de precipitados segiin el tamafio de particulas > Suspensiones coloidales: El tamafio es del orden de ym. No sedimentan, forman suspensiones coloidales. No se pueden filtrar usando medios comunes de filtracién. > Suspensiones cristalinas: Su tamafio es del orden de mm. Sedimentan con facilidad. Se pueden filtrar usando papel o vidrio filtrante, Son los mas deseables para la gravimetria ‘Factores que determinan el tamario de las particulas * Solubilidad del precipitado en el medio Plazo de Matriculacién abierto curso 2016-17 Coucke’s English Academy+ Temperatura ‘+ Concentracién de reactivos ‘+ Rapidez con que se mezclan los reactivos Estos factores se puede explicar en forma cualitativa asumiendo que el tamafio de las particulas es funcién de una propiedad llamada sobresaturacién relativa. El tamajio de particulas de los precipitados es inversamente proporcional a la sobresaturacién relativa (SSR) en la disolucién de la precipitacién. SSR Q-s ssiendo S: solubilida de solu en equilibrio y Q: concentracién de los reactivos antes precipita Con valores elevados de SSR se incrementa la tendencia a formar coloides (cristales mas pequefios) Con valores decrecientes de SSR se incrementa la tendencia a formar cristales mas grandes y mas perfectos, La disminucién del valor de la SSR se consigue: ‘+ Incrementando el valor de la solubilidad: Elevando la temperatura (precipitacién caliente) 0 controlando el pH ‘* Disminuyendo el valor de Q: Usando diluciones muy diluidas, adicionando lentamente el reactivo precipitante y agitando la disolucién durante el proceso La coprecipitacién es un fendmeno por el que sustancias normalmente solubles se eliminan de la disolucién arrastradas por un precipitado. Hay dos tipos + Ena adsorcién superficial la sustancia se une a la superficie del precipitado y precipita con él. Es un proceso de equilibrio ‘+ Ena oclusién, un ién extrafio es atrapado dentro de un cristal en crecimiento. No es un proceso de equilibrio. El atrapamlento mecénico es un proceso similar al de la oclusién. Se produce cuando los cristales permanecen muy juntos durante el crecimiento. En este caso varios cristales crecen juntos y como consecuencia una porcién de la disolucién queda atrapada en pequefios huecos. Tanto la oclusién como el atrapamiento mecanico son minimos cuando es baja la velocidad a la que se forma el precipitado, es decir, en condiciones de baja saturacién. *Caracteristicas generales de los métodos gravimétricos * Selectividad: Esta vinculada a la selectividad del reactivo precipitante seleccionada Plazo de Matriculacién abierto curso 2016-17 Coucke’s English Academy‘+ Sensibilidad: Sélo puede aplicarse para el andlisis de componentes mayoritarios + Exactitud: calculos estequiométricos ‘* Precisién: precisién de la pesada del precipitado obtenido *Calculos gravimétricos En primer lugar se pesa o se mide el volumen de la muestra que contiene el analito. En segundo lugar se transforma la muestra hasta la obtencién del precipitado. Por ultimo se usa el factor estequiométrico que relaciona el paso del precipitado con el del analito que lo contiene. XAespec tuscata + agente precipitante @ YBeompu que se pesa X moles de A — ¥ moles de B n? gramosA _, ngramos B PFA PFB XPFA YPFB g especie (A) = g compuesto (B)x Plazo de Matriculacién abierto curso 2016-17 Coucke’s English Academyen TEMA 19: INTRODUCCION A LOS METODOS OPTICOS Un método analttic instrumental es aquel que se realiza mediante alguna técnica instrumental en la cual la medicién final no involuera una pesada, o un punto final visual de una valoracién. La absorcién, emisién, dispersién o refraccién de la luz sirven de base a métodos especificos, ‘englobados bajo la denominacién de métodos dpticos. Los métodos épticos son muy usados en la farmacia (Identificacion y desarrollo, formulacién, estructura) Las propiedades que se utiizan para conocer la composicién quimica de la muestra pueden denominarse sefiales analiticas. En los métodos épticos se agrupan las técnicas cuyo fundamento comporta la interrelacién entre la radiacién electromagnética y la materia. En general cuando estos métodos se basan en la absorcién y emisién de energia (radiacion ‘electromagnética) se les asigna también el nombre global de espectroscopia. Los instrumentos espectficos empleados para la espectrometria se denominan, ‘espectrofotémetros 0 espectrometros Los métodos espectroscépicos estén basados en las transiciones que se producen entre los. diferentes estados energéticos de atomos o moléculas como consecuencia de la interaccién de la radiacién de una determinada energia con la materia, Los métodos no espectroscépicos estan basados en la interaccién entre la radiacién electromagneética y la materia produciendo un cambio en la direccién o en las propiedades fisicas. ‘EL fot6n: luz como particulaMuchas de las interacciones entre la radiacién y la materia hay que describirla como constituida por paquetes de energia llamado fotones. xe La energia del fotén viene dada por: E = hv = = La radiacién de menos longitud de onda tiene mayor frecuencia y energia. Cada uno de estos tipos de radiacién se distingue por longitud de onda, la frecuencia o la energia. Para la medida de los fotones como una sefial podemos emplear: eerie Métodos no espectroscépicos Técnicas de absorcién y emision, Procesos en _Refractometria,nefelometria,turbidimetria y los que intervienen transiciones electrénicas __dispersién éptica. La radiacién entre distintos niveles energéticos. A niveles _electromagnética conlleva un cambio en la Inferlores menor energla amplitud, polarizacién o direccién de propagacién de la radiacién electromagnética. TEMA 20: METODOS ELECTRICOS Son reacciones de transferencia de electrones. Las reacciones redox pueden Ilevarse a cabo: * Poniendo en contacto el oxidante y el reductor «En una celda electroquimica Las celdas electroquimicas estan constituidas por una celda electrolitica, electrodos, un puente salino y aparatos de medida. Anedo catedo Ung 4 ZnSOq¢s1) HW CuSOness | Cts La fuerza electromotriz es la diferencia de potencial entre dos electrodos. Epita = Ecétodo — Esnodo Plazo de Matriculacién abierto curso 2016-17 Coucke’s English AcademyMETODOS ELECTR‘ el seno dela KK disolucion =a ermine a potencial cte, itera recente Electrogravimetria preccries La electrélisis es ol proceso que separa los elementos de un compuesto por medio de la electricidad, En olla ocurre la captura de electrones por los cationes en el cétodo (una reduccién) y la liberacién de electrones por los aniones en el anodo (una oxidacién) La conductimetria es un método analitico basado en la conduccién eléctrica de los iones en solucién, que se utiliza para medir la molaridad de una disolucién, determinada por su carga ionica, o salina, de gran movilidad entre dos puntos de diferente potencial. La conductividad eléctrica es un fendmeno de transporte en el cual rones 0 jones) se mueve a través de un sistema. La ley de Ohm: “La unidad de potencial es el volti rio a través de una resisten que es la fuerza electromotriz necesaria para que pase VIR, de un donde R (resistencia), V (potencial) e I (intensidad) Es decir, cuanto mayor sea la carga eléctrica / iénica de nuestra muestra, mas intensidad detectaremos entre los dos puntos de diferente potencial, 0 electrodos, a una resistencia constante. La conductividad eléctrica es un fenémeno de transporte en el cual la carga eléctrica (en forma de electrones 0 jones) se mueve a través de un sistema, La carga fluye porque experimenta una fuerza electromotriz; lo que indica la presencia de un campo eléctrico E en un conductor que transporta corriente. La potenciometria es una técnica roanalitica con la que se puede determinar la concentracién de una especie electroactiva en una disolucién empleando un ia (un electrodo con un potencial conocido y constante con el tiempo) y un electrodo de trabajo (un electrodo sensible a la especie electroactiva) yun potencié rodo de referenc! tro Plazo de Matriculacién abierto curso 2016-17 Coucke’s English AcademyExisten electrodos de trabajo de distinto tipo utiles para distintos cationes o aniones, Cada vez son mas usados los electrodos selectivos de iones (ESI) 0 electrodos de membrana. Uno de los mas empleados, que se comenzé a utilizar a principios del siglo XX, es el electrodo de pH (un electrodo de vidrio).: Plazo de Matriculacién abierto curso 2016-17 Coucke’s English Academy