Cromatografia en Capa Fina A Analisis

UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA
FACULTAD DE INGENIERA PESQUERA
DEPARTAMENTO ACADMICO DE INGENIERA

PESQUERA
TRABAJO ENCARGADO:
CROMATOGRAFIA
CURSO:
ANLISIS DE ALIMENTOS
ALUMNA:
CASAVERDE SIALER MARIANA JAZMIN
DOCENTE:
ING. HUALTER LEYTON MASIAS, M. Sc
INDICE
CROMATOGRAFIA EN CAPA FINA
Pag.
I. INTRODUCCION 3
II. OBJETIVOS 4
III. MARCO TEORICO 4
LA CROMATOGRAFIA
4
i. DEFINICION 4
ii. APLICACION
DE LA MUESTRA 6
iii. OBTENCION DEL
CROMATOGRAMA 7
iv. INTERPRETACION:
FACTOR DE RETENCION Rf 10
v. FACTORES QUE INFLUYEN
EN LA SEPARACIN POR
CROMATOGRAFA 11
vi. APARATOS, MATERIALES
Y GENERALIDADES 12
vii. CROMATOGRAFIA
BIDIMENSIONAL EN
CAPA FINA 16
IV. CONCLUSIONES 17
V. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS 18
ANEXOS
I. INTRODUCCION
2 Ingeniera Pesquera
El botnico ruso Mikhail Tswett estableci las ventajas de la cromatografa y fue el

primero en utilizar este trmino. Es recordado como el Padre de la Cromatografa.
Ismailov y Scraiber utilizaron lminas de vidrio para colocar capas muy delgadas de
almina y luego aplicaron extractos vegetales, dando as la primera forma de
Cromatografa de Capa Fina. Egon Stahl (1956) dio el nombre de Cromatografa de
Capa Fina. Estandariz los procedimientos, equipos y adsorbentes dando un auge a
la tcnica simple, a bajo costo y eficiente.
La cromatografa es una tcnica de separacin extraordinariamente verstil que

presenta distintas variantes. En toda separacin cromatografiar hay dos fases
(slida, lquida o gas) una mvil y otra estacionaria, que se mueven una con
respecto de la otra manteniendo un contacto ntimo. La muestra se introduce en la
fase mvil y los componentes de la muestra se distribuyen entre la fase estacionaria
y la mvil. Los componentes de la mezcla a separar invierten un tiempo diferente en
recorrer cada una de las fases, con lo que se produce la separacin.
Si un componente est la mayor parte del tiempo en la fase mvil el producto se

mueve rpidamente, mientras que si se encuentra la mayor parte en la fase
estacionaria, el producto queda retenido y su salida es mucho ms lenta.
La cromatografa de capa fina, llamada, es un tipo de cromatografa donde la fase

estacionaria es una capa delgada de un material depositado sobre un soporte, a
este conjunto se le llama placa. La fase mvil es un disolvente o mezcla de
disolventes, llamada eluyente, que se mueve por la fase estacionaria por
capilaridad. Generalmente, las placas estn formadas por una capa de gel de slice
u otro material con propiedades adsorbentes.
II. OBJETIVOS
Conocer y aplicar la tcnica de cromatografa en capa fina, c.c.f., sus

caractersticas y los factores que en ella intervienen.
Deducir, a travs del Rf la relacin que existe entre la polaridad de las sustancias
que se analizan y la de los eluyentes utilizados.
Aplicar la tcnica de c.c.f. como criterio de pureza e identificacin de las

sustancias.
III. MARCO TEORICO
Es una tcnica muy utilizada para la identificacin y determinacin de pureza de

compuestos, tambin puede utilizarse como tcnica de separacin (cromatografa
de capa fina TLC preparativa) a muy pequea escala.
En esta tcnica la fase estacionaria es una capa fina de gel de slice u otro soporte
con propiedades adsorbentes dispuesta sobre un soporte de vidrio o aluminio que
denominaremos placa. El eluyente o fase mvil ser la mezcla de disolventes
adecuada.
La cromatografa de capa fina es un procedimiento que se utiliza para separar

molculas relativamente pequeas. La separacin de mezclas de molculas
mediante la cromatografa de capa fina se basa en el principio del reparto entre dos
fases. Al igual que otras cromatografas, consiste de una fase estacionaria y una
fase mvil y el principio es el mismo: la sustancia de inters se adherir a la fase
estacionaria o se mover con la fase mvil, viajando una distancia que es
inversamente proporcional a la afinidad por la fase estacionaria. La fase
estacionaria puede ser variada. Puede ser de papel, de celulosa o de un gel de
silicato (vidrio molido bien fino) unido a una superficie slida (una placa de vidrio,
aluminio, plstico o papel). Esta superficie slida puede ser rgida o flexible. El tipo
de fase estacionaria que se utilice en un experimento depender del tipo de
molculas que se quieran separar. Incluso vienen algunas placas con indicadores
fluorescentes.
La fase estacionaria consiste de un solvente que puede ser agua, un solvente

orgnico o una mezcla de ambos.
El procedimiento es sencillo: Se colocan las muestras a un centmetro del borde en

uno de los extremos de la placa, se deja secar, se coloca la placa en un envase
(tanque de desarrollo) que ya contiene una pequea cantidad del solvente, se tapa
y se deja correr por un rato. El solvente subir por capilaridad e ir arrastrando las
molculas, las cuales se movern segn la afinidad que muestren por la fase
estacionaria. Si la mezcla de muestras que se est analizando presenta color, se
vern los distintos colores migrando a distintas velocidades. Si son incoloras hay
que someter la placa a algn tratamiento con una sustancia desarrolladora para
poder determinar la presencia de sustancias sobre el silicato. El tipo de
desarrollador depender del tipo de molculas que se analizan.
La separacin de mezclas complejas de productos y el aislamiento y purificacin de

los componentes individuales es de gran importancia en la qumica orgnica. La
cromatografa constituye una importante herramienta en este sentido,
complementaria con las tcnicas clsicas: cristalizacin, destilacin, etc.
Proceso de Adsorcin: La muestra aplicada en la capa es adsorbida en la superficie

del material por la accin de fuerzas electrostticas (fuerzas de Van der Waals,
puentes de Hidrgeno, efectos inductivos, etc.).
Luego, cuando la capa es expuesta a un flujo por accin capilar, se inicia una
competencia de enlaces entre los sitios activos del adsorbente y la sustancia con el
solvente. Los adsorbentes ms utilizados en la Cromatografa de Capa Fina son:
Slica gel (se utiliza en el 80% de las separaciones)

xido de Aluminio Almina (cida, neutra bsica)
Tierra Silcea Kieselguhr
Celulosa (Nativa o micro-cristalina)
Poliamidas
Estos adsorbentes deber tener las siguientes caractersticas:
Tamao de Partcula
Volumen de Poro
Dimetro de Poro
rea Superficial
Homogeneidad
Pureza
3.1 Aplicacin de la muestra
La introduccin de la muestra se realiza utilizando un tubo capilar. Para ello se ha

de disolver una pequea cantidad de la muestra a analizar en un disolvente voltil.
A continuacin, el extremo del tubo capilar se introduce en la disolucin. La
disolucin ascender por el tubo por capilaridad. En uno de los lados de la placa,
aproximadamente a 3 mm del borde, se ha de trazar a lpiz una lnea recta, lnea
base, y sobre ella unos puntos de referencia. Sobre dichos puntos se pincha con el
tubo capilar, de modo que una pequea cantidad de la disolucin pase a la placa.
De esta manera, la muestra queda adsorbida por el soporte slido en la placa.
3.2 Obtencin del cromatograma
La muestra se disuelve en muy poca cantidad de un disolvente voltil. Si se va

a utilizar patrones de alguna sustancia se preparan de la misma manera. A
continuacin se dibuja una lnea base con lpiz y unos puntos de referencia
donde se pincharn las muestras con un capilar.
Se debe preparar la cubeta en la que se va a realizar la cromatografa. Esta

cubeta es un simple recipiente de vidrio en donde se aade el eluyente que se
va a utilizar, siempre en un nivel inferior a la lnea base que se ha dibujado en
la placa.
En la cubeta se introduce una tira de papel de filtro para que el vapor del
eluyente est por toda la cubeta.
En este momento se introduce con cuidado la placa en la cubeta y se tapa,

esperando a que el nivel del eluyente ascienda por la placa.
Cuando el nivel se encuentra casi en el borde superior, se extrae la placa y se

dibuja una nueva lnea en este nivel.
El disolvente al ser voltil se evapora en poco tiempo dejando la placa seca.
Ahora se debe buscar un mtodo para visualizar el resultado del cromatograma

y ver la separacin de los componentes pinchados en la placa.
En el caso de que la sustancia sea coloreada no habra ningn problema ya

que se veran los componentes.
Para otros compuestos, las placas comerciales suelen llevar una sustancia
fluorescente que si se irradia con luz UV, se pueden ver los componentes como
manchas oscuras circulares. Estas manchas se deben marcar sobre la placa
con lpiz.
Otro mtodo puede ser hacer reaccionar los componentes con alguna
sustancia que coloree esos compuestos para dar una seal visual.
Factores que influyen en la elucin
El factor que ms influye en la separacin de los componentes en este tipo de

cromatografa es la polaridad de estos componentes.
La placa est formada por una capa de gel de slice, una sustancia muy polar, y
por lo tanto, atraer en mayor medida a componentes ms polares.
Al realizar el cromatograma, las sustancias ms polares interaccionarn ms

con el soporte y su velocidad de desplazamiento ser menor, esto significa que
al revelar la placa cromatogrfica, el componente ms polar se encontrar en
un lugar ms cercano a la lnea base que hemos dibujado, y por el contrario, el
componente menos polar se mover ms rpidamente y se encontrar ms
alejado de la lnea base.
La polaridad del eluyente es un factor que consigue que los componentes se

muevan ms rpido o ms lento en una cromatografa.
Es decir, para un eluyente con mayor polaridad, ste estar ms atrado por el
soporte y los componentes sern ms libres para moverse mejor, por lo que, al
revelar la placa, los componentes saldrn ms alejados de la lnea base.
Por la misma razn, con un eluyente menos polar, ste casi no interacciona con
el soporte polar, y los compuestos tendrn una mayor interaccin con el
soporte, por lo que su velocidad ser ms pequea y al terminar la

cromatografa, se habrn desplazado muy poco a partir de la lnea base.
Por estos factores, es recomendable la eleccin de un buen eluyente para la

separacin de los compuestos que queremos. Para cada experiencia ser
distinto el tipo de eluyente que necesitemos, dependiendo de los componentes
a separar, por lo tanto, lo mejor ser realizar varias pruebas con distintos tipos
de eluyentes para as considerar el ms ptimo para nuestra cromatografa.
Aplicaciones
La cromatografa de capa fina es un mtodo muy til, rpido y barato que se

puede utilizar principalmente para:
Identificacin de alguna sustancia conocida en una mezcla por su

comparacin con un patrn de la sustancia pura.
Medir el grado de pureza de una muestra, si existen varias manchas en el

cromatograma, es seal de que existen varios componentes en la muestra.
Obtener una medida semicuantitativa de algn componente. Pichando la
misma cantidad en la placa cromatogrfica, cuanto mayor sea la mancha
obtenida en el cromatograma, la concentracin de esa sustancia ser
mayor.
3.3 Interpretacin: factor de retencin R f
Una vez que la placa ha sido revelada nos encontramos con una serie de manchas
circulares. Si la separacin ha sido buena cada una de ellas se corresponder a un
nico compuesto de la mezcla inicial.
Es importante tener en cuenta que un mismo compuesto corre siempre de la misma

forma en cromatogramas realizados en las mismas condiciones (mismo soporte y
mismo eluyente). Para describir las propiedades cromatogrficas de cada
compuesto se define el factor de retencin Rf.
El factor Rf es el cociente de la distancia recorrida por el compuesto (d c) entre la

distancia recorrida por el eluyente (d e). Obviamente el Rf toma valores entre 0.0 y
1.0. Siempre ha de indicarse el eluyente y el soporte en el que se ha determinado.
3.4 FACTORES QUE INFLUYEN EN LA SEPARACIN POR CROMATOGRAFA:
Polaridad
La mayor o menor velocidad de desplazamiento a lo largo de la columna depende

directamente de la estructura de cada molcula as como de los grupos funcionales
que pueda poseer. El motivo principal es su diferente polaridad. Molculas ms
polares quedan ms retenidas en la fase estacionaria, es decir "corren menos",
mientras que las molculas menos polares se ven menos retenidas y avanzan a
mayor velocidad arrastradas por eluyente.
Eleccin del eluyente
La polaridad de la mezcla de disolventes - eluyente - utilizado es clave para obtener

una buena separacin.
Eluyentes ms polares arrastran ms fcilmente a los compuestos, es decir los

compuestos "corren ms" en eluyentes ms polares. Por el contrario, mezclas de
disolventes con poca polaridad desplazan los compuestos a travs de la columna
con mayor lentitud.
La polaridad relativa de los disolventes ms usuales se encuentra relacionada en

una tabla denominada "serie eluotrpica" (polaridad creciente de izquierda a
derecha): hexano, ciclohexano, tolueno, ter, cloroformo, diclorometano, THF,
acetato de etilo, acetona, etanol, metanol, agua.
De nuevo, es importante recordar que en la eleccin adecuada de la mezcla de

disolventes radica el xito de la separacin en la cromatografa de revelado.
Las placas de cromatografa comerciales portan un agente fluorescente inorgnico

en la fase estacionaria. Ello permite visualizar el cromatograma iluminando la placa
con una lmpara de luz ultravioleta UV. Los diferentes compuestos aparecen en la
placa como manchas circulares. Las distintas manchas
Por su simplicidad y rapidez, la cromatografa de capa fina es una herramienta muy

valiosa en el anlisis en el laboratorio de qumica orgnica. Algunas de sus
aplicaciones son:
La identificacin de compuestos conocidos en una mezcla por comparacin del

cromatograma de la mezcla con el del compuesto conocido.
La determinacin del final de una reaccin qumica: la desaparicin de la mancha
correspondiente al producto de partida indica la conclusin de la reaccin.
Criterio de pureza: la existencia de una o varias manchas en el cromatograma
indica la presencia de uno o varios productos.
3.5 Aparatos y materiales. Generalidades
- Cubeta cromatogrfica (con tapa hermtica); la mayora de las veces se trata

de la cubeta Normal (profundidad del espacio para el gas: 3mm)
- Placas de cromatografa: preparadas por uno mismo o ya fabricadas.

- Pipetas de microlitro
- Recipiente de vidrio con pulverizador
- Probeta o matraz Erlenmeyer con tapn (para preparar y mezclar la fase
mvil)
- Secador
- Plantilla para TLC o regla
- En caso necesario: lmpara UV para comprobar la fluorescencia o la
disminucin de la misma.
Placas cromatogrficas y sorbentes

Las placas constan de un soporte liso, inerte (placas de vidrio, laminas de
aluminio o de fibra) sobre las que se dispone el sorbente formando un espesor
lo ms homogneo posible (por lo general 0,25 mm); dependiendo de la
separacin a realizar, se tratar de silicagel, xido de aluminio, poliamida,
celulosa, etc.
En tanto que en el HPLC se utilizan principalmente materiales de fase inversa,

en la cromatografa en capa fina predominan los materiales para fase normal,
como por ejemplo el silicagel.
Hay placas de TLC que tienen la denominada zona de concentracin (zona de
carga). Se trata de una zona de unos 2 cm de anchura de barro de diatomeas o
de un gel de slice de tamao de poro muy grande, de manera que durante el
desarrollo de la placa de TLC en esa zona prcticamente no hay separacin
cromatogrfica. La ventaja especfica es que los componentes cargados se
concentran en una estrecha banda en la lnea de partida (lnea divisoria entre la
zona de concentracin y sorcin). As resulta posible cargar grandes
volmenes y obtener una buena separacin.
Los volmenes recomendables dependen de la concentracin de las

disoluciones. Por lo general, se cargan 1-10 microgramos de sustancia por
mancha. Si la concentracin de la sustancia a analizar fuera de un orden de
magnitud desconocido, la muestra debera cargarse varias veces en volmenes
crecientes y claramente diferentes.
Los volmenes mayores se cargan en varias veces, secando entre una y otra
(con aire fro o caliente, aire a presin o con nitrgeno), para evitar que las
manchas se extiendan.
Para realizar determinaciones cuantitativas con placas convencionales, se

cargan volmenes aproximados de 0.5-1.0 microlitros por mancha. Los
volmenes mayores de 5.0 microlitros deben evitarse salvo en casos
excepcionales, donde se cargaran en varias veces.
Desarrollo
El eluyente, cuya composicin depende de cada problema concreto, se pone
en la cubeta cromatogrfica por lo menos 30 minutos antes del principio de la
separacin hasta una altura de 0.5 cm. La cubeta se cerrar con su tapa para
que se sature con los vapores del disolvente y se coloca en un lugar adecuado.
Para que la saturacin sea mejor, se recubre la cubeta con papel secante (se
indicar en el protocolo en el caso que sea necesario).
Para desarrollar la placa, su extremo inferior se introduce en el diluyente y se
vuelve a cerrar la cubeta inmediatamente. Para evitar eluciones, las manchas
cargadas debern estar completamente por encima del nivel de eluyente.
El eluyente se ve impelido hacia arriba por capilaridad a travs del

recubrimiento. El recorrido ser, dependiendo de la separacin, de 5 a 15 cm
mximo, y el tiempo necesario depender del sorbente, del espesor del mismo y
de la composicin del eluyente. El recorrido ptimo es por lo general de 10 cm.
Clculos
Tras el desarrollo del cromatograma, se saca la placa de la cubeta y (despus
de marcar el frente) se seca cuidadosamente al aire o con un secador. La
posicin de las manchas se determina:
-por su color propio
-por su fluorescencia
-por la disminucin o amortiguacin de la fluorescencia
-por reaccin qumica: la placa una vez seca se roca parcial o totalmente con
un determinado reactivo, de manera que aparecern coloraciones
caractersticas o una fluorescencia particular.
La identificacin de cada una de las manchas se realiza de acuerdo con su

color y denominado valor rf (factor de retencin, llamado tambin factor R f o hRf
(Rf x 100), es decir, el cociente entre el recorrido de la sustancia (l s) y el del
eluyente (lL).
rf = ls (cm)
lL (cm)
Para conseguir la identificacin, los colores propios o consecuencia del

revelado y los rf se comparan con los de sustancias de referencia, obtenidos en
las mismas condiciones de desarrollo y tincin (si es posible en el mismo
cromatograma). Como control se realizan adicionalmente los denominados

cromatrogramas mixtos (la disolucin problema y la de la sustancia de
referencia se cargan en una misma mancha).
3.6 Cromatografa bidimensional en capa fina
Para mejorar una separacin incompleta, se combinan dos pasos de

cromatografa mono dimensional de la manera siguiente:
1 paso: cargar la muestra en una esquina de la placa y desarrollarla en sentido
ascendente.
2 paso: girar 90 la placa desarrollada y seca, de manera que la mezcla ya
separada parcialmente se encuentre en el borde inferior, a continuacin se
desarrolla en sentido ascendente con un segundo eluyente.
Aplicaciones
En la mayora de los casos la TLC se realiza cuando se quieren hacer
evaluaciones cualitativas rpidas. Las determinaciones cuantitativas son
posibles por acoplamiento del equipamiento necesario (unidades de
carga,scanner); en estos casos, es mejor recurrir a las placas de HPTLC,
porque son ms efectivas.
IV. CONCLUSIONES
En este informe se logr conocer y como aplicar la cromatografa por capa

fina, sus caractersticas y los factores que influyen en la separacin por
cromatografa
Se aprendi a como calcular los valores del factor de retencin de las

sustancias para poder deducir la relacin que existe entre la polaridad de las
sustancias que se analizan con la de los eluyentes que se utilizan con ellas y
as mismo poder aplicar un criterio para identificar la pureza de sustancias de
acuerdo con la pigmentacin (es) que estas presenten al realizar la
cromatografa.
V. REFERENCIA BIBLIOGRAFICAS
LIBROS
Rojo Callejas F., Manual de Qumica Analtica Instrumental II, Anexo III,
Facultad de Qumica UNAM, Mxico 2002
Principios de Anlisis Instrumental. 5 ed. (2001). Douglas A. Skoog,
F.J. Holler, T.A. Nieman. Mc Graw-Hill Interamericana.
Anlisis Instrumental. (2001). K.A. Rubinson, J.F. Rubinson. Prentice
Hall.
Anlisis de los Alimentos. (1992). Matissek, Schnepel, Steiner. Ed.
Acribia, S.A.
Composicin y Anlisis de los Alimentos de Pearson. 2 ed. (1996).
R.S. Kirk, R. Sawyer, H. Egan.
Qumica Analtica. 6 ed. (1997). Skoog, West, Holler. Mc Graw-Hill.
PGINAS WEB
www.dq.fct.unl.pt/qof/hplcts.html
www.relaq.mx/RLQ/tutoriales/cromatografa/hplc.html
www.merck.com.pe/MPSA%5csite%5cwmsp.nsg/contents/cromatografa
www.hplc.co.uk/homeframe.htm
www.shu.ac.uk/virtual_campus/courses/241/hplc.htm
www.dicdoc.ucv.cl/lab_sibyl
www.lafaw.com
www.aldbot.com/HPLC-Analysis.htm
www.richardscientific.com
http://ull.chemistry.uakron.edu/chemsep/
http://biologa.med.ub.es:8080/curso/curso.html
ANEXOS

Cromatografia en Capa Fina A Analisis

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Cromatografia en Capa Fina A Analisis

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA

FACULTAD DE INGENIERA PESQUERA

DEPARTAMENTO ACADMICO DE INGENIERA

CASAVERDE SIALER MARIANA JAZMIN

ING. HUALTER LEYTON MASIAS, M. Sc

III. MARCO TEORICO 4

El botnico ruso Mikhail Tswett estableci las ventajas de la cromatografa y fue el

La cromatografa es una tcnica de separacin extraordinariamente verstil que

Si un componente est la mayor parte del tiempo en la fase mvil el producto se

La cromatografa de capa fina, llamada, es un tipo de cromatografa donde la fase

Conocer y aplicar la tcnica de cromatografa en capa fina, c.c.f., sus

Aplicar la tcnica de c.c.f. como criterio de pureza e identificacin de las

III. MARCO TEORICO

Es una tcnica muy utilizada para la identificacin y determinacin de pureza de

La cromatografa de capa fina es un procedimiento que se utiliza para separar

La fase estacionaria consiste de un solvente que puede ser agua, un solvente

El procedimiento es sencillo: Se colocan las muestras a un centmetro del borde en

La separacin de mezclas complejas de productos y el aislamiento y purificacin de

Proceso de Adsorcin: La muestra aplicada en la capa es adsorbida en la superficie

Slica gel (se utiliza en el 80% de las separaciones)

Estos adsorbentes deber tener las siguientes caractersticas:

3.1 Aplicacin de la muestra

La introduccin de la muestra se realiza utilizando un tubo capilar. Para ello se ha

3.2 Obtencin del cromatograma

La muestra se disuelve en muy poca cantidad de un disolvente voltil. Si se va

Se debe preparar la cubeta en la que se va a realizar la cromatografa. Esta

En este momento se introduce con cuidado la placa en la cubeta y se tapa,

Cuando el nivel se encuentra casi en el borde superior, se extrae la placa y se

El disolvente al ser voltil se evapora en poco tiempo dejando la placa seca.

Ahora se debe buscar un mtodo para visualizar el resultado del cromatograma

En el caso de que la sustancia sea coloreada no habra ningn problema ya

Factores que influyen en la elucin

El factor que ms influye en la separacin de los componentes en este tipo de

Al realizar el cromatograma, las sustancias ms polares interaccionarn ms

La polaridad del eluyente es un factor que consigue que los componentes se

soporte, por lo que su velocidad ser ms pequea y al terminar la

Por estos factores, es recomendable la eleccin de un buen eluyente para la

La cromatografa de capa fina es un mtodo muy til, rpido y barato que se

Identificacin de alguna sustancia conocida en una mezcla por su

Medir el grado de pureza de una muestra, si existen varias manchas en el

3.3 Interpretacin: factor de retencin R f

Es importante tener en cuenta que un mismo compuesto corre siempre de la misma

El factor Rf es el cociente de la distancia recorrida por el compuesto (d c) entre la

3.4 FACTORES QUE INFLUYEN EN LA SEPARACIN POR CROMATOGRAFA:

La mayor o menor velocidad de desplazamiento a lo largo de la columna depende

Eleccin del eluyente

La polaridad de la mezcla de disolventes - eluyente - utilizado es clave para obtener

Eluyentes ms polares arrastran ms fcilmente a los compuestos, es decir los

La polaridad relativa de los disolventes ms usuales se encuentra relacionada en

De nuevo, es importante recordar que en la eleccin adecuada de la mezcla de

Las placas de cromatografa comerciales portan un agente fluorescente inorgnico

Por su simplicidad y rapidez, la cromatografa de capa fina es una herramienta muy

La identificacin de compuestos conocidos en una mezcla por comparacin del

3.5 Aparatos y materiales. Generalidades

- Cubeta cromatogrfica (con tapa hermtica); la mayora de las veces se trata

- Placas de cromatografa: preparadas por uno mismo o ya fabricadas.

Placas cromatogrficas y sorbentes

En tanto que en el HPLC se utilizan principalmente materiales de fase inversa,

Los volmenes recomendables dependen de la concentracin de las

Para realizar determinaciones cuantitativas con placas convencionales, se

El eluyente se ve impelido hacia arriba por capilaridad a travs del

La identificacin de cada una de las manchas se realiza de acuerdo con su

Para conseguir la identificacin, los colores propios o consecuencia del