162. Adaptasi Fisiologis (fenotipik) sebagai mekanisme intrinsik.

kumpulan mikroorganisme dengan permukaan padat memiliki peranan penting dalam pembentukan
biofilm, yang didefinisikan sebagai kumpulan organisme yang diorganisir dalam exopolymer
exopolysaccharide yang ekstensif. Biofilm dapat terdiri dari monokultur,Beberapa spesies yang beragam,
atau fenotip campuran dari spesies tertentu. Beberapa publikasi bagus yang berhubungan dengan alam,
formasi, dan kandungan biofilm tersedia. Biofilm penting karena beberapa alasan, terutama biokorosi,
berkurangnya kualitas air, dan fokus pada kontaminasi produk higienis. Kolonisasi juga terjadi pada
biomaterial dan peralatan medis implan, yang mengakibatkan tingkat infeksi meningkat dan
kemungkinan kambuhnya infeksi.

Bakteri pada bagian biofilm yang berbeda akan mengalami lingkungan nutrisi yang berbeda, dan sifat
fisiologisnya terpengaruh. Dalam kedalaman biofilm, misalnya, keterbatasan nutrisi cenderung
mengurangi tingkat pertumbuhan, yang dapat mempengaruhi kerentanan terhadap agen antimikroba.
Dengan demikian, fenotipe organisme sessile dalam biofilm sangat berbeda dari sel plankton yang
ditemukan di laboratorium. Bakteri yang tumbuh lambat tidak dapat diserap.

Beberapa alasan dapat menjelaskan berkurangnya sensitivitas bakteri dalam biofilm, (i) berkurangnya
akses desinfektan (atau antibiotik) ke sel-sel di dalam biofilm, (ii) interaksi kimia antara desinfektan dan
biofilm itu sendiri, (iii) modulasi lingkungan mikro, (iv) produksi enzim degradatif (Dan menetralisir
bahan kimia), atau (v) pertukaran genetik antar sel dalam biofilm.

Beberapa contoh diketahui adanya kontaminasi larutan antiseptik atau desinfektan oleh bakteri.
Misalnya, Marrie dan Costerton menggambarkan kelangsungan hidup S. marcescens dalam larutan
klorheksidin 2%. Kesimpulan serupa dicapai oleh Hugo dkk mengenai kelangsungan hidup B. cepacia
pada klorheksidin dan oleh Anderson dkk mengenai kontaminasi antiseptik iodophor dengan
Pseudomonas. Dalam penelitian biofilm Anderson et al Pseudomonas ditemukan pada permukaan
interior pipa polivinil klorida yang digunakan selama pembuatan antiseptik providone-iodine.

Patogen gram negatif dapat tumbuh sebagai biofilm dalam kantung kemih dan mampu bertahan dalam
konsentrasi klorheksidin yang efektif melawan organisme. Menariknya, agen permeabilitas EDTA hanya
memiliki efek potentiating sementara di kateterisasi kandung kemih. B. cepacia yang baru saja diisolasi
dari lingkungan rumah sakit seringkali jauh lebih tahan terhadap klorheksidin dibandingkan saat ditanam
di media kultur buatan, dan glikokaliks dapat dikaitkan dengan resistensi intrinsik terhadap bisbiguanida.
Legionella pneumophila sering ditemukan di sistem distribusi air rumah sakit. Klorinasi yang
dikombinasikan dengan pemanasan terus menerus (60 C) biasanya merupakan ukuran desinfeksi yang
paling penting; Namun, karena produksi biofilm, organisme yang terkontaminasi mungkin kurang rentan
terhadap perawatan ini. Peningkatan resistansi terhadap klorin telah dilaporkan untuk Vibrio cholerae,
yang mengekspresikan amigosakarida amorf yang menyebabkan agregasi sel (Morfologi "rugose") tanpa
kehilangan patogenisitas.

Interaksi bakteri dengan permukaan biasanya reversibel dan kemudian ireversibel. Adhesi ireversibel
disebabkan oleh pengikatan bakteri ke permukaan melalui polimer eksolysacchari deglycocalyx. Sel
induk kemudian muncul oleh pembelahan sel dan terikat dalam matriks glikocalyx. Bakteri dalam biofilm
ini berada di lingkungan mikro spesifik yang berbeda dengan sel yang tumbuh dalam kondisi
laboratorium dan dengan demikian menunjukkan variasi respons terhadap antiseptik dan desinfektan.

Epidemi nosokomial baru-baru ini disebabkan oleh M. chelonae, M. tuberkulosis dan HCV menggaris
bawahi pentingnya pembentukan pseudobiofilm dalam kontaminasi ruang fiberoptic yang fleksibel.
Wabah ini dikaitkan dengan pembersihan ruang yang tidak memadai, yang kemudian disterilisasi dengan
glutaraldehida. Sementara organisme ini tidak membentuk biofilm sejati, tindakan cross-linking
glutaraldehida dapat menyebabkan penumpukan residu yang tidak larut.

Biofilm memberikan contoh paling penting tentang bagaimana adaptasi fisiologis (fenotipik) dapat
berperan dalam memberikan resistensi intrinsik. Sebagai contoh, sel ganas S. aureus yang diproduksi
dengan subkultur berulang dalam media yang mengandung gliserol lebih tahan terhadap alkil fenol dan
benzilpenisilin daripada jenis lainnya. Subkultur sel-sel ini dalam media kultur rutin menghasilkan
pemulihan sensitivitas. Kultur planktonik tumbuh di bawah kondisi keterbatasan nutrisi atau tingkat
pertumbuhan yang rendah memiliki sel dengan sensitivitas yang berubah terhadap desinfektan. Selain
itu, banyak mikroorganisme aerobik telah mengembangkan sistem pertahanan intrinsik yang memberi
toleransi terhadap tekanan peroksida (khususnya H2O2) secara in vivo. Respon oksidatif atau respons
SOS yang telah diteliti telah dipelajari dengan baik di E. coli dan Salmonella dan mencakup produksi
enzim penetral untuk mencegah kerusakan sel (termasuk peroksidase, katalase, glutathione reduktase)
dan untuk memperbaiki lesi DNA (misalnya eksonuclease III ). Pada kedua organisme tersebut,
peningkatan toleransi dapat diperoleh dengan perlakuan awal dengan dosis subinhibit hydrogen
peroksida. Namun, tingkat toleransi yang meningkat terhadap H2O2 selama respons stres oksidatif
mungkin tidak memberi perlindungan signifikan terhadap konsentrasi yang digunakan pada antiseptik
dan desinfektan (umumnya 0,3%). Sebagai contoh, mutan B. subtilis telah dideskripsikan lebih tahan
pada 0,5% H2O2 dibandingkan strain wild type; 0,34% H2O2.
164. Mekanisme Perlawanan Bakteri

Seperti antibiotik dan obat kemoterapi lainnya, resistensi yang didapat terhadap antiseptik dan
desinfektan dapat timbul baik mutasi atau perolehan bahan genetik dalam bentuk plasmid atau
transposon. Penting untuk dicatat bahwa "resistensi" sebagai istilah sering dapat digunakan secara
longgar dan dalam banyak kasus harus secara hati-hati. Hal ini terutama berlaku dengan analisis MIC.
Tidak seperti antibiotik, "resistensi", atau peningkatan MIC biosida, tidak harus berkorelasi dengan
kegagalan terapeutik. Peningkatan antibiotik MIC dapat memiliki konsekuensi yang signifikan, yang
sering mengindikasikan bahwa organisme target tidak terpengaruh oleh tindakan antimikrobanya.
Peningkatan MIC biosida karena mekanisme yang diperoleh juga telah dilaporkan dan dalam beberapa
kasus disalahartikan sebagai indikasi resistensi. Penting bahwa isu-isu termasuk tindakan pleiotropik
sebagian besar biosida, aktivitas bakterisida, konsentrasi yang digunakan dalam produk, aplikasi produk
langsung, efek formulasi, dan lain-lain, dipertimbangkan dalam mengevaluasi implikasi klinis dari
laporan ini.