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LIMPIEZA, DESINFECCIN,
ESTERILIZACIN Y ANTISEPSIA

TEMA 14

LIMPIEZA, DESINFECCIN, ESTERILIZACIN Y ANTISEPSIA. Definiciones, criterios de

viabilidad. Factores que influyen en la destruccin de los microorganismos. Importancia de la
limpieza. Mtodos de limpieza. Mtodos de esterilizacin: agentes fsicos, agentes mecni-
cos. Cintica de esterilizacin. Desinfeccin: desinfectantes y antispticos.

OBJETIVOS ESPECFICOS

Al finalizar el tema el estudiante podr:

1. Definir: Esterilizacin, desinfeccin, desinfectante, sanitarizante, antisptico, germicida,

bactericida, fungicida, virucida, bacteriosttico, fungisttico.

2. Citar los factores que influyen en la velocidad de destruccin de los microorganismos.

3. Sealar los principales grupos de agentes utilizados como limpiadores e indicar su me-
canismo de accin y aplicaciones.

4. Sealar los principales grupos de agentes qumicos utilizados como antispticos y/o de-
sinfectantes e indicar su mecanismo de accin y aplicaciones.

5. Sealar la importancia del control de la eficacia de un proceso de limpieza y desinfeccin.

6. Explicar la cintica de destruccin de los microorganismos a travs de un proceso de

esterilizacin.
 LIMPIEZA, DESINFECCIN, ESTERILIZACIN Y ANTESEPSIA

7. Definir tiempo de reduccin decimal, tiempo trmico letal, carga microbiana (bioburden).

8. Clasificar los mtodos de esterilizacin, de acuerdo con el agente empleado.

9. Citar los agentes fsicos y explicar su mecanismo de accin.

10. Citar los agentes mecnicos y explicar su mecanismo de accin.

11. Citar por lo menos dos agentes qumicos esterilizantes y explicar su mecanismo de ac-
cin.

12. Dada una lista de materiales, productos etc. seleccionar el mtodo y las condiciones ms
adecuadas para su esterilizacin, justificando su eleccin.

13. Sealar la importancia del control de la eficacia de un proceso de esterilizacin.

14. Citar algunos mtodos para comprobar la eficacia de un proceso de esterilizacin.

15. Citar algunos mtodos para comprobar la eficacia de un proceso de limpieza y desinfec-
cin.

DEFINICIONES

1. Esterilizacin
Proceso que destruye toda forma de vida microbiana. Un objeto estril (en sentido mi-
crobiolgico) est libre de microorganismos vivos.

2. Desinfeccin
La destruccin, inactivacin o remocin de aquellos microorganismos que pueden causar
infeccin u ocasionar otros efectos indeseables; la desinfeccin no implica necesaria-
mente esterilizacin.

3. Desinfectante
Agente usualmente qumico, que mata las formas en crecimiento de los microorganis-
mos, pero no necesariamente las esporas. El trmino se refiere a sustancias utilizadas
sobre objetos inanimados.

4. Antisptico
Sustancia que impide el crecimiento o la accin de los microorganismos, ya sea destru-
yndolos o inhibiendo su crecimiento y actividad. Se aplica sobre superficies corporales.

5. Sanitarizante
Agente que reduce la poblacin microbiana a niveles seguros, segn los requerimientos
de salud pblica. Se aplica en objetos inanimados de uso diario, por ejemplo utensilios y
equipos para manipular alimentos, vasos, platos y otros objetos de uso similar.

6. Germicida
Agente que mata a los microorganismos, pero no necesariamente a sus esporas.

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 LIMPIEZA, DESINFECCIN, ESTERILIZACIN Y ANTESEPSIA

7. Bactericida
Agente que mata a las bacterias.

8. Bacteriosttico
Agente que inhibe el crecimiento de las bacterias, mientras permanece en contacto con
ellas.

9. Fungicida
Agente que mata a los hongos.

10. Fungisttico
Agente que inhibe el crecimiento de los hongos, mientras permanece en contacto con
ellos.

11. Virucida
Agente que destruye los virus.

CRITERIOS DE VIABILIDAD PARA EVALUAR LA EFICACIA DE UN AGENTE

El trmino muerte, desde el punto de vista microbiolgico, se define como la prdida irrever-
sible de la capacidad de reproducirse, as microorganismos viables son aquellos capaces de
multiplicarse, y microorganismos muertos son aquellos que no pueden hacerlo. La determi-
nacin de la muerte de los microorganismos requiere de tcnicas de laboratorio que revelen
si el microorganismo crece cuando se inocula en medios de cultivo lquidos o slidos ade-
cuados. Dependiendo del agente usado, las clulas no viables pueden o no mostrar cambios
en propiedades tales como: morfologa, coloracin, motilidad y actividades enzimticas, por
esto los criterios microscpicos o bioqumicos indirectos no se pueden considerar como una
manera definitiva de evaluar una accin germicida, a menos que se alternen con pruebas
directas de la viabilidad de los grmenes, como seran la produccin de turbidez en medios
lquidos o la formacin de colonias en medios de cultivo slidos.

FACTORES QUE INFLUYEN EN LA VELOCIDAD DE DESTRUCCIN DE LOS MI-

CROORGANISMOS

1. Temperatura:
Las temperaturas elevadas tienen efectos dainos sobre los microorganismos y se debe
tener en cuenta que cuando, adems de la temperatura, tambin se utiliza un agente an-
timicrobiano, los incrementos en la temperatura aceleran la destruccin de los microor-
ganismos. Por ejemplo, la muerte de una suspensin bacteriana por fenol es mucho ms
rpida a 42C que a 30C.

2. Tipo de microorganismos:
Las especies de microorganismos difieren en su susceptibilidad a los agentes fsicos y
qumicos. En las especies formadoras de esporas, las clulas vegetativas son mucho
ms susceptibles que las formas esporuladas.

3. Estado fisiolgico de las clulas:

El estado fisiolgico de los microorganismos puede influenciar la susceptibilidad a un
agente antimicrobiano. Las clulas jvenes, metablicamente activas, son ms fcilmen-

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te destruidas que las clulas viejas cuando el agente acta interfiriendo con el metabo-
lismo. Los cambios que ocurren en la membrana por el envejecimiento, que afectan las
caractersticas de permeabilidad, pueden ser responsables de las diferencias en resis-
tencia.

4. Ambiente.
Las propiedades fsicas y qumicas del medio o sustancia donde se encuentran los mi-
croorganismos, tambin tienen una profunda influencia sobre la eficacia de la destruc-
cin microbiana, por ejemplo, el calor es mucho ms eficaz en materiales cidos que en
materiales alcalinos. La consistencia del material influye notablemente en la penetracin
del agente. La presencia de material orgnico puede reducir significativamente la eficacia
de un agente qumico, ya sea inactivndolo o protegiendo de l a los microorganismos.

Los microorganismos normalmente se encuentran en el ambiente y en muchos casos, su

presencia puede favorecer la transmisin de enfermedades o la contaminacin de los pro-
ductos. Por este motivo, en las instituciones de salud, donde se manipulan y/o preparan ali-
mentos, en las industrias de alimentos, medicamentos y cosmticos y en la oficina de farma-
cia, se deben aplicar procedimientos que permitan controlar la presencia de estos microor-
ganismos en el ambiente, equipos y materiales, con el propsito de evitar la transmisin de
microorganismos patgenos y la contaminacin de los productos por microorganismos que
posteriormente pueden producir su deterioro o afectar la salud de la persona que lo utiliza.

LIMPIEZA Y DESINFECCIN

Limpieza

La limpieza se define como el proceso de remover, a travs de medios mecnicos y/o fsicos,
el polvo, la grasa y otros contaminantes de las superficies, equipos, materiales, personal, etc.
Este proceso, junto con un adecuado proceso de desinfeccin, es indispensable para contro-
lar la presencia de los microorganismos en el ambiente.

Para realizar una limpieza adecuada se deben considerar el tipo de accin del agente utiliza-
do (remocin mecnica, disolucin o detergente), las condiciones requeridas para aplicar la
solucin limpiadora y el tiempo de contacto necesario para que sta ejerza su efecto.

Las soluciones limpiadoras generalmente contienen agentes alcalinos o cidos, con o sin
detergentes, por ejemplo, agentes tensoactivos no inicos. stas deben ser compatibles con
la superficie que va a ser limpiada, tener buena capacidad de humectacin y emulsificacin y
ser capaces de remover el tipo de sucio presente sin dejar ningn tipo de residuo.

Para cada rea se debe establecer la frecuencia de limpieza requerida de acuerdo al volu-
men de trabajo, personal y material que se utiliza. Tambin se debe establecer el momento
ms apropiado para realizar el proceso, y seguir un procedimiento cuya eficacia haya sido
determinada previamente.

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Desinfeccin

De acuerdo a su definicin, la desinfeccin se emplea cuando se tratan los instrumentos de

uso mdico, utensilios, lencera, paredes y pisos de las habitaciones de los enfermos, etc.,
con el propsito de evitar una posible infeccin. Para realizar este proceso se usan agentes
qumicos (desinfectantes) o procesos fsicos como el calor.

El trmino sanitarizacin usualmente se refiere al proceso empleado para reducir el conte-

nido de microorganismos viables remanentes en una superficie limpia. En la industria se em-
plea este trmino cuando se tratan, con agentes qumicos o fsicos, las reas de produccin
y los equipos empleados en la elaboracin de productos, con el propsito de reducir el con-
tenido microbiano hasta niveles insignificantes.

CARACTERSTICAS DE UN DESINFECTANTE IDEAL

1. Actividad antimicrobiana
Debe ser capaz de matar a los microorganismos. A baja concentracin debe tener un
amplio espectro de actividad antimicrobiana.

2. Solubilidad
Debe ser soluble en agua u otros solventes, en la proporcin necesaria, para su uso
efectivo.

3. Estabilidad
Durante el almacenamiento los cambios en sus propiedades deben ser mnimos y no
deben causar una prdida significativa de su accin germicida.

4. No debe ser txico para el hombre ni los animales.

5. Homogeneidad
La preparacin debe ser uniforme en composicin, de manera que los ingredientes
activos estn presentes en cada aplicacin.

6. No se debe combinar con materiales orgnicos extraos.

7. Debe ser txico para los microorganismos a la temperatura ambiente, para que al
usar el agente no sea necesario elevar la temperatura ms all de la que se encuen-
tra normalmente en el lugar donde se va a utilizar.

8. Capacidad para penetrar

Esto no es necesario si se requiere slo una accin superficial.

9. No debe ser corrosivo, ni teir el material que se trate.

10. Capacidad desodorante

Desodorizar mientras desinfecta es una propiedad deseable. Idealmente el desinfec-
tante debe ser inodoro o tener un olor agradable.

11. Capacidad detergente

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Un desinfectante que sea a la vez detergente cumple 2 objetivos: limpieza y desinfec-

cin: la accin limpiadora mejora la efectividad del desinfectante.

12. Disponibilidad
Debe estar disponible en grandes cantidades a un precio razonable.

13. Actuar en un tiempo relativamente corto.

CARACTERSTICAS DE UN ANTISEPTICO IDEAL

Debe tener las mismas caractersticas de un desinfectante, excepto la capacidad de pene-

trar.

PRINCIPALES GRUPOS DE AGENTES QUMICOS UTILIZADOS COMO ANTISPTICOS,

DESINFECTANTES, Y/O PRESERVATIVOS

1. Compuestos fenlicos

Activos contra bacterias vegetativas pero inactivos contra esporas. Son fungicidas y
tambin virucidas. Actan por desnaturalizacin de las protenas y daan las mem-
branas celulares. El. Fenol, cresol, hexaclorofeno, etc.

USO: Desinfectantes, los menos irritantes se usan como antispticos.

Preservativos: Fenol al 0,5%

Cresol al 0,3%

Limitaciones: Irritantes y corrosivos.

2. Alcoholes

Desnaturalizan las protenas, actan tambin disolviendo los lpidos por lo que pue-
den daar las membranas celulares. Activos contra bacterias vegetativas pero no so-
bre esporas. Ej.: Alcohol etlico, alcohol isoproplico.

USO: Antisptico de la piel, desinfectantes. Se usan en solucin al 70-80% en agua.

Preservativos: Clorobutanol al 0,5%

Alcohol benclico al 2%

3. Halgenos

a. Yodo

Altamente efectivo como agente bactericida y es el nico que es efectivo contra

todos los tipos de bacterias.Tambin posee cierta actividad esporocida. Es un
agente oxidante dbil, su accin antimicrobiana parece ser debida a la combina-
cin del yodo molecular con protenas celulares.

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USOS: Se usa como antisptico en solucin hidroalcohlica al 2% (tintura de yo-

do). Tambin se usa en forma de yodforos, que son mezclas de yodo con agen-
tes tensoactivos que liberan el yodo cuando se diluyen en agua.

Limitaciones: Irritante para las mucosas.

b. Cloro y compuestos clorados

Mata a la mayora de las clulas vegetativas, algunos virus y hongos. Acta por
oxidacin de los componentes celulares.

USOS: Desinfeccin de agua. Las soluciones de hipoclorito se usan para desin-

fectar objetos y superficies.

Limitaciones:Inactivado por materia orgnica, irritante a los tejidos y corrosivo pa-

ra los metales.

4. Metales pesados

Inactivan enzimas unindose a ciertos grupos de las protenas particularmente grupos

SH.

Ej.: mercuriales: Bicloruro de mercurio, mercurocromo y merthiolate.

Compuesto de plata: nitrato, lactato y picrato de plata.

Compuestos de cobre: sulfato cprico.

USOS

Cloruro mercrico como antisptico en ungentos.

Mercurocromo: Antisptico.

Nitrato o acetato de fenilmercurio como preservativo al 0,02%.

Merthiolate: Antisptico. Preservativo al 0,01%.

Nitrato de plata: Unas pocas gotas de una solucin al 1% en los ojos de los recin
nacidos previene la conjuntivitis del recin nacido (ophtalmia neonatorum), una infec-
cin gonocccica de los ojos.

Limitaciones:
Algunos son irritantes y txicos, su efectividad es reducida por la presencia de mate-
ria orgnica.

5. Compuestos cuaternarios de amonio

Son agentes desinfectantes por su accin detergente, rompen la membrana citoplas-

mtica debido a que disuelven las capas lipdicas, adems desnaturalizan las prote-
nas. Ej. Cetrimida, cloruro de benzalconio, etc.

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USOS: Limpieza y antispsis de la piel y de las heridas. Desinfeccin de instrumentos

y sanitarizacin de ambientes.

Preservativos: Ej. Cloruro de benzalconio al 0,01%

Limitaciones: No son esporocidas y su efecto puede ser neutralizado por otros com-
puestos.

Cuando se va a llevar a cabo un proceso de desinfeccin o sanitarizacin, es necesario que

toda la superficie a tratar se encuentre bien limpia, de lo contrario, la presencia de materia
orgnica e inorgnica puede inactivar el efecto de la sustancia qumica utilizada. General-
mente la solucin desinfectante o sanitarizante se puede aplicar utilizando paos, cubriendo
la superficie con la solucin, por nebulizacin o por inmersin.

Es importante tener en cuenta que cuando se manipulan materiales impregnados con sus-
tancias posiblemente contaminadas (heces, sangre, orina, etc.), es necesario realizar un
proceso de desinfeccin antes de su limpieza, para ello se debe agregar directamente el de-
sinfectante sobre el material. En estos casos es necesario emplear una cantidad abundante
del producto, para evitar que ste sea inactivado por la presencia de la materia orgnica pre-
sente.

Cuando se usan los agentes qumicos en los procesos de sanitarizacin es necesario que se
establezca un programa de rotacin de los mismos, ya que el uso de un solo tipo de agente
en forma continua, puede provocar la seleccin de cepas resistentes de ciertos microorga-
nismos.

El calor es un agente fsico que se puede utilizar en los procesos de desinfeccin y sanitari-
zacin, sin embargo, a pesar de que este procedimiento tiene la ventaja que no deja resi-
duos y no permite la seleccin de cepas resistentes, tiene como principal inconvenientes que
puede deteriorar ciertos materiales.

En resumen es importante resaltar que todos los procedimientos de limpieza y desinfeccin

deben:

Ser realizados por un personal adecuadamente entrenado quien debe seguir exacta-
mente las instrucciones escritas que incluyan las instrucciones para la preparacin de las
soluciones, tiempo de tratamiento necesario para lograr el efecto deseado, agentes de-
tergentes, desinfectantes y/o sanitarizantes a emplear.

Ser realizados con una frecuencia determinada por el tipo de actividades que se llevan a
cabo en cada rea. Deben existir cronogramas de limpieza y desinfeccin.

Los equipos y materiales utilizados para la limpieza deben ser seleccionados y manteni-
dos cuidadosamente, y stos no deben transferirse de un rea a otra.

Evaluar la efectividad de los procesos de limpieza y desinfeccin mediante la evaluacin

microbiolgica de las superficies tratadas.

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Para ello se emplean mtodos microbiolgicos que permiten determinar la presencia de

microorganismos viables en las superficies. Entre los mtodos ms utilizados estn las
placas de contacto (RODAC) y el mtodo del hisopo.

MTODOS DE ESTERILIZACIN

AGENTES FSICOS

1. Calor

a. Calor hmedo

Destruye a los microorganismos por coagulacin de las protenas. La presencia de

agua facilita el proceso de destruccin de los microorganismos.

Vapor a presin (autoclave):

El calor en forma de vapor saturado a presin proporciona temperaturas mayo-

res que la de ebullicin. La esterilizacin en autoclave emplea vapor saturado a
15 lbs. de presin cuya temperatura es de 121C, por 15 minutos contados a
partir del momento en que el material alcance los 121C.

USOS: Esterilizacin de material contaminado, medios de cultivo y lquidos

termoestables.

Limitaciones: No es efectivo en medios impermeables al agua, ni en materiales

sensibles al calor o a la humedad.

Existen otros mtodos que utilizan el calor hmedo, que aunque no permiten la eliminacin
total de los microorganismos viables, se usan para controlar los microorganismos presentes
en un material o una preparacin.

Entre ellos estn:

Tindalizacin: Es un mtodo de esterilizacin fraccionada, consiste en calentar el ma-

terial a la temperatura seleccionada (entre 60 y 100C) por perodos aproximados de
30 minutos a 1 hora, por 3 das consecutivos con perodos de incubacin intermedios,
las formas vegetativas se destruyen por el calentamiento y las esporas germinan du-
rante el perodo de incubacin intermedio y son eliminadas en el siguiente calenta-
miento.

USO: Esterilizacin de materiales lbiles a ms de 100C pero estables a tem-

peraturas entre 60 y 100C.

Limitaciones: Proceso muy largo (3 das). Puede que no se logre la esteriliza-

cin.

Agua hirviente: Consiste en poner el contacto el material con agua hirviendo por un
periodo no menor a 10 minutos. Se usa para la destruccin de microorganismos pa-

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tgenos no formadores de esporas en ropas, platos, etc. Tambin se puede emplear

en el control de microorganismos presentes en el agua de consumo.

Pasteurizacin: utilizado en la eliminacin de microorganismos patgenos en

productos lcteos, vinos, cerveza y jugos.

b. Calor seco

Deshidrata las clulas y destruye los microorganismos por oxidacin de sus constitu-
yentes.

b.1. Aire caliente

La esterilizacin se realiza en hornos, usualmente a 160-170C por un perodo

de 2 a 4 horas.

USOS: Esterilizacin de materiales termoestables impermeables o que son da-

ados por la humedad y por lo tanto no pueden esterilizarse en autoclave. Ej.
grasas, vidrios, metales, polvos, etc.

Limitaciones: Destruye materiales que no soportan temperaturas elevadas por

largos perodos.

b.2. Incineracin

USOS: Destruccin de animales de laboratorio y otros materiales infectados a

ser desechados. Esterilizacin del asa de platino y el filamento en el laboratorio.

Limitaciones: Contaminacin ambiental.

2. Radiaciones

a. No ionizantes

a.1 Radiacin ultravioleta

Los cidos nucleicos y las protenas absorben la radiacin ultravioleta, esa absorcin
causa modificaciones qumicas, entre ellas, la formacin de dmeros de timina los
cuales ocasionan lecturas errneas del cdigo gentico, produciendo mutaciones que
impiden funciones vitales de los microorganismos, por lo tanto, stos mueren.

La longitud de onda ms efectiva para matar los microorganismos es 253,7 nm.

USOS: Desinfeccin de superficies y de aire.

Limitaciones: Escaso poder de penetracin, sus efectos pueden ser revertidos, puede
causar quemaduras en la piel y en los ojos.

a.2. Luz visible

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Aunque no se puede considerar como un agente esterilizante, la luz visible, de sufi-

ciente intensidad, puede causar dao celular y muerte. Hay dos mecanismos por los
cuales la luz visible mata a las clulas, uno de ellos requiere de oxgeno molecular y
ambos requieren de la presencia en la clula de fotosensibilizadores, los cuales son
sustancias que absorben luz. Cuando esas sustancias absorben luz son activadas y
llevadas a un nivel de mayor energa, en algunos casos retornan al estado normal
emitiendo luz, pero tambin puede ocurrir que le transfieran la energa a otro compo-
nente celular, esta transferencia de energa ocasiona el dao en las clulas.

b. Radiaciones ionizantes

Estas incluyen los rayos (alfa), (beta), (gamma), X y protones y neutrones de al-
ta energa. Al absorber estas radiaciones, el agua y otras sustancias se ionizan,
crendose radicales libres los cuales ocasionan diferentes tipos de dao en las clu-
las.

USOS: La principal aplicacin industrial es para la esterilizacin de materiales qui-

rrgicos y otros equipos mdicos sensibles al calor y para la preservacin de ciertos
productos alimenticios.

Limitaciones: Son muy costosas, requieren un riguroso control e instalaciones espe-

ciales para su uso.

AGENTES MECNICOS

1. Filtracin

Consiste en el paso de un lquido o un gas a travs de un material que tiene poros de

tamao lo suficientemente pequeo para retener a los microorganismos.

Existen filtros de superficie y filtros de profundidad.

USOS: Esterilizacin de lquidos termolbiles, tales como soluciones de enzimas, toxi-

nas, extractos de clulas y algunos azcares en solucin. Desinfeccin de aire.

Limitaciones: El material debe estar relativamente libre de material particulado suspendi-

do.

2. Ondas snicas y ultrasnicas

Desnaturalizan las protenas y desintegran las bacterias.

USOS: Son efectivas en la descontaminacin de instrumentos delicados.

AGENTES QUMICOS:

1. Gaseosos

a. xido de etileno

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Mata a las clulas porque acta como un agente alquilante. Destruye rpidamente
clulas vegetativas y esporas.

USO: Esterilizacin de materiales termosensibles, instrumentos y equipos de gran

tamao.

Limitaciones: Inflamable, potencialmente explosivo en forma pura.

b. Formaldehido

Agente alquilante, se combina con grupos NH2, COOH y SH en los cidos nucleicos
y protenas.

USOS: Esterilizacin de instrumentos.

Limitaciones: Poca penetracin, corrosivo, y tiene tendencia a polimerizar como una

delgada pelcula blanca sobre la superficie de los objetos tratados.

2. No gaseosos

a. Glutaraldehido

Cuando se usa al 2% en soluciones alcalinas, acta como agente esterilizante por

sus propiedades alquilantes.

USOS: Esterilizacin de instrumentos.

Limitaciones: La solucin alcalina es inestable.

CONTROL DEL PROCESO DE ESTERILIZACIN

Todos los procesos de esterilizacin se deben controlar para poder asegurar que han sido
efectivos. Para ello se pueden utilizar indicadores fsicos, qumicos y/o biolgicos, los cuales
deben ser colocados en cada carga de esterilizacin. Su seleccin debe hacerse de acuerdo
al mtodo empleado.

Como ejemplos de estos indicadores podemos citar:

Fsicos: medidores de presin, termmetros, termgrafos.

Qumicos: cintas adhesivas impregnadas con sustancias qumicas que cambian de color
despus de haber sido sometidas a un tratamiento trmico.

Biolgicos: preparaciones de esporas de microorganismos altamente resistentes al proceso

de esterilizacin que se quiere controlar.

CINTICA DE ESTERILIZACIN

Carga microbiana (bioburden)

La cantidad de microorganismos contenidos en un material antes de ser sometido a un pro-
ceso de esterilizacin.

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 LIMPIEZA, DESINFECCIN, ESTERILIZACIN Y ANTESEPSIA

Tiempo de reduccin decimal

Tiempo (en minutos) necesario para reducir 10 veces el nmero de microorganismos de una
poblacin dada.

Tiempo trmico letal

Tiempo (en minutos) necesario para destruir por completo una poblacin dada de microorga-
nismos a una determinada temperatura y bajo condiciones especficas.

CURVA DE SOBREVIVENCIA

Si una poblacin de microorganismos se expone a un agente letal, la proporcin de supervi-

vientes en cualquier tiempo, se puede graficar contra el tiempo de exposicin para dar una
curva de sobrevivencia. Esta es a menudo una funcin exponencial o de primer orden, ya
que se obtiene una lnea recta, cuando se grafica el logaritmo de la proporcin de sobrevi-
vientes contra el tiempo de exposicin expresado en unidades aritmticas.

Estas curvas se obtienen slo cuando todas las condi-

ciones se mantienen uniformes incluyendo edad y es-
tado fisiolgico de las clulas.

Por ser una curva exponencial de primer orden, se

puede aplicar la clsica ecuacin de Arrhenius.
-kt
n = no e o lnn = lnno - Kt

K = 2,303 log no/n

t
logn = logno - Kt/ 2,303
donde:

no = nmero inicial de microorganismos viables.

n = nmero de microorganismos viables al tiempo t.

K = coeficiente que depende de la exposicin y de la sensibilidad del microorganismo.

Esta lnea recta nos indica que se destruye una proporcin constante de microorganismos
viables por unidad de tiempo.

Ejemplo:
8
Se tiene una poblacin de 10 microorganismos, cuyo tiempo de reduccin decimal (D) es
igual a 6 minutos.

Calcule:

a. El valor de la constante de inactivacin de esa poblacin (K).

b. El nmero de microorganismos que fueron inactivados en 10 minutos.

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 LIMPIEZA, DESINFECCIN, ESTERILIZACIN Y ANTESEPSIA

a) K = 2,303 log no/n

t
8 7
K = 2,303 log 10 /10
6

K = 2,303 log 10
6

K = 0,383

b) K = 2,303 log no
t n

log n = log no - Kt/2,303

8
log n = log 10 0,383 x 10
2,303

log n = 8 1,66

log n = 6,34

6,34
n = 10

El nmero de microorganismos inactivados en 10 minutos de exposicin ser 108 106,34

NOTA: ADEMS DE LO CONTEMPLADO EN ESTA GUA DE ESTUDIO ES NECESARIO

REVISAR LO RELATIVO A ESTERILIZACIN EN LA GUA DEL LABORATORIO DE MI-
CROBIOLOGA (CICLO 1)

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 LIMPIEZA, DESINFECCIN, ESTERILIZACIN Y ANTESEPSIA

BIBLIOGRAFA

Clavell Luis; Pedrique de A. Magaly. 1992. Microbiologa. Manual de Mtodos Generales.

Segunda Edicin.

Davis, Dulbecco, Eisen and Ginsberg. Microbiology. 1990. Fourth Edition. J. B. Lippincott
Company.

Ketchum Paul A. Microbiology. 1988. Concepts and Applications. John Wiley and sons.

Madigan M.T, Martingo J. M. y Jack Parker. 2004. Dcima Edicin. Brock Biologa de los
Microorganismos Prentice Hall

Rossi, L. 1998. reas Limpias. Trabajo para optar al ascenso a Profesor Titular. Facultad de
Farmacia. Universidad Central de Venezuela.

The Pharmacopeia of the United States of America. Cap 1211 Sterilization and Sterility Assu-
rance of Compendial Articles. 31 Edition. Rockville: USP; 2008.
na
Tortora G. J., B. R. Funke and Ch. L. Case 2007. Introduccin a la Microbiologa 9 Edicin.
Editorial Mdica Panamericana.

Wistreich and Lechtman. Microbiology. Fifth Edition. 1998. Macmillan Publishing. Co.

Magaly Pedrique de Aulacio

Milagros de Vizcarrondo
Sofa Gutirrez de Gamboa
Enero 2002
Revisin 2008

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 LIMPIEZA, DESINFECCIN, ESTERILIZACIN Y ANTESEPSIA

ACTIVIDADES ACIDIONALES

1. Por qu considera Ud. que es importante la rotacin de agentes desinfectantes o sanita-

rizantes?

2. Investigue en qu consiste la esterilizacin en fro

3. Entre diferentes productos comerciales empleados como agentes desinfectantes o anti-

spticos, seleccione 5 y de acuerdo al principio activo que contengan, seale cul es su
mecanismo de accin.

4. En la lista que se presenta a continuacin seleccione para cada material el mtodo y las
condiciones de esterilizacin ms adecuadas.

MATERIAL A MTODO CONDICIONES

ESTERILIZAR
Vidriera

Tapones de goma

Material quirrgico

Lencera

Medios de cultivo

Soluciones termolbiles

Parafina

Cultivos a descartar

Asa y filamento

Animales contaminados

Lminas
portaobjetos contaminadas

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 LIMPIEZA, DESINFECCIN, ESTERILIZACIN Y ANTESEPSIA

5. Busque en un diccionario de ingls tcnico la traduccin al espaol de las palabras siguien-

tes:

Amount

Autoclaving

Available

Cleaning

Destroyed

Dirty

Dry

Dust

Free

Hazard

Heat

Hot air

Odor

Pathogens

Pound

Prior

Sanitizers

Soap

Survive

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