Prctica 1

Observacin de grupos microbianos

Introduccin
El trmino micobiologa (de micro=pequeo, bos= vida y logos=estudio o tratado)
fue acuado por el sabio francs Louis Pasteur (1822-1895), para incluir el estudio
de los organismos que slo eran visibles con el auxilio del microscopio y que se
designaron como microorganismos, microbios o grmenes. El grupo incluye a las
bacterias, los hongos (levaduras y mohos [hongos filamentosos]), los protozoos y
las algas microscpicas. Tambin incluye a los virus, entidades no celulares que a
veces se consideran en el lmite entre lo vivo y lo inerte.
En 1969 Robert Whittaker clasific a los microorganismos y a organismos
superiores en cinco reinos: Monera, Protista, Fungi, Plantae y Animalia.
Posteriormente se expuso otra clasificacin para los microorganismos que
considera tres grupos: Archaebacterias, Eubacterias (procariotas de la anterior) y
Eucariotas (hongos y protozoos). En 1978, Carl Woese sugiri hacer una
clasificacin con el rango de Dominios (que est por encima de los Reinos):
Eukarya, Bacteria y Archae.
Protozoarios: Son microorganismos unicelulares y eucariotes, carecen de pared
celular y se alimentan por fagocitosis, se pueden clasificar de acuerdo a los rganos
de motricidad.
Hongos: Son organismos eucariotes, hetertrofos por absorcin. Se clasifican en
filamentosos y levaduras.
Los hongos filamentosos estn formados por filamentos largos de clulas
unidas llamados hifas, y un conjunto de hifas forma lo que se conoce como micelio.
Las hifas de un hongo se pueden clasificar por su funcin o la posicin que ocupen
en el medio donde se encuentran: vegetaivas o frtiles, sumergidas o areas. Su
creciiento puede ser distal o apical. Las levaduras son hongos unicelulares no
filamentosos con una forma esfrica u oval tpica.
Bacterias: Son microorganismos que pertenecen al reino Monera, procariotas,
unicelulares y se reproducen por fisin binaria. Se pueden clasificar de acuerdo a
su morfologa en cocos (esferas), bacilos (alargados con extremos redondeados) y
formas espiraladas (hlices). Los cocos pueden formar agrupaciones en pares,
tetradas, cadenas o racimos. Recientemente se han descrito bacterias en forma de
estrella, piriformes, discoidales, con apncides o yemas y planas cuadrangulares.
Objetivos
Observar diferentes grupos microbianos, detectando forma y agrupacion,
usando microscopia optica
Observar diferentes crecimientos macroscopicos
Conclusin
Se observaron distintas microorganismos como bacterias en forma de bacilos y
cocos, quistes de parsitos, hongos filamentosos y levaduras. Como fueron teidos
con la tincin de Gram (solo las bacterias) presentaban color violeta (Gram +) y color
rojo (Gram -).
La observacion macroscpica de el crecimiento de hongos mostraba un crecimiento
ligeramente parecido en algunos tubos, en cuanto al crecimiento de las colonias de
bacterias en las cajas Petri veiamos colonias diferentes en tamao, color y forma en
cada caja.
Cada microorganismo observado requiere de ciertas condiciones para poder
desarrollarse, y aunque en el laboratorio pareciera que ninguno de ellos causa
problema, en realidad existen microorganismos que son muy perjudiciales para los
seres vivos podiendo causar hasta la muerte, pero tambien existen otros que han
ayudado en la bsqueda de medicinas, mejores alimentos o como miembros de
una cadena alimenticia.
Cuestionario
1.-Qu caracteristicas microscpicas diferencian a los hongos de las
bacterias?
Las bacterias vistas en el microscopio presentan formas redondas (cocos), de barra
(bacilos) y de espiral (espirilos), carecen de membrana nuclear, son unicelulares y
su forma de reproduccin es por fisin binaria.
En los hongos sus clulas se organizan en tubos ramificados llamados hifas, que
juntos forman el micelio, tienen membrana nuclear, pueden ser unicelulares o
pluricelulares, su reproduccin puede ser sexual y asexual (esporas, gemacin y
fragmentacion), son mas grandes que las bacterias.
2.-Cul es el tamao promedio de cocos, bacilos, levaduras y hongos?
La mayoria de las bacterias miden de 0.2 y 2 de diametro y entre 2 y 8 de
largo. Los cocos y bacilos miden 2 .
Las levaduras son hongos unicelulares varian considerablemente en cuanto a
tamao, oscilando entre 1 y 5 de anchura y entre 5 a 30 de longitud.
Los mohos crecen en formas de filamentos pluricelulares o unicelulares llamados
hifas, que conforman el micelio. El tamao de una espora es de 1 a 20 m, y el
tamao del moho, variable segn especie, es de varios centenares de micrmetros
a varios centmetros, siendo lo ms habitual un dimetro de hifa entre 3 y 8 mm. El
tamao de estos organismos depende del crecimiento de la unidad formadora de
colonia que posea el hongo.
Existen otros hongos macroscpicos (setas) que pueden alcanzar un tamao hasta
de 15 cm y un dimetro de 25 cm.
3.- Menciona 5 beneficios de los microorganismos para la humanidad.
Las bacterias se utilizan para hacer productos como pan, cerveza y queso.
Las bacterias consumen animales o plantas muertas y fabrican nutrientes de
otros seres vivos.
Las bacterias se utilizan para producir vacunas, antibiticos y medicamentos
que combaten infecciones y sintetizan vitaminas como la biotina, la vitamina
K y el cido flico.
Los protozoos son considerados como bioindicadores en el proceso de
tratamiento de aguas residuales.
Los virus son importantes para el estudio de la biologia celular y molecular,
por ser sistemas sencillos.
4.- Menciona 5 consecuencias perjudiciales de los microorganismos para la
humanidad.
Las bacterias son causantes de muchas infecciones estomacales y de vas
urinarias.
Existen bacterias y parsitos que tienen como hospedadores a animales de
granja, los cuales despues son consumidos por el humano, stos transmiten
enfermedades como la cisticercosis.
Las Xanthomonas son un genero que incluye muchos patgenos importantes
de plantas, causan pudricin en stas.
Existen virus responsables de muchas muertes a nivel mundial los cuales
an no tienen cura (VIH).
Existen algunas bacterias que se encuentran en alimentos enlatados que son
mal transportados (latas deformadas se encuentra Clostridium botulinum).
5.- Mencionan en forma ascendente, los horganismos observados.
Cocos Gram () y Gram (+), bacilos Gram () y Gram (+), levaduras, quiste de
parsito, hongo filamentoso (hifas), colonias de bacterias, hongos macroscpicos
(Penicillium sp, Microsporum canis, Trichophyton mentagrophytes) y el parsito
Ascaris lumbricoides.
Bibliografia
Montoya, V. H. H. (2008). Microbiologia basica para el area de la salud y afines.
Medellin: Editorial Universidad de Antioquia.
Tortora, G., Funke, B. R., & Case, C. L. (2007). Introduccion a la microbiologia.
Buenos Aires: Medica Panamericana.
Garca, V. (s.f.). Introduccin a la Microbiologa. Editorial Universidad Estatal a
Distancia.
 Prctica 2
Microscopio
Introduccin
Podramos considerar que la Microbiologa tuvo su origen cuando el hombre
aprendi a fabricar lentes de aumento a partir de pedazos de vidrio; esto permimti
la construccin de instrumentos como el telescopio y el microscopio, con los cuales
pudo magnificar los objetos observados.
La invencin del microscoio se le atribuye a los fabricantes de anteojos holandeses,
quienes habran construido los primeros alrederor de 1590. Otros han atribuido a
Galieo quien, en 1610, ofreci un ejemplar, construido por l, al rey de Polonia. Sin
embargo, se puede decir que el verdadero descubridor del mundo microscpico fue
el holands Antony van Leeuwenhoek. A diferencia de sus predecesores, l recurri
a una lupa o microscopio simple en el que las aberraciones pticas son menos
acentuadas. Leeuwenhoek consigui tallar lentes convexas de un aumento y de
calidad muy superiores a los que se haba alcanzado hasta entonces. Construy
microcopios sencillos, capaces de aumentar alrededor de 200 a 300 veces el
tamao original, pero manipulndolos cuidadosamente pudo observar
microorganismos tan pequeos como las bacterias.
Los microscopios son, bsicamente, de dos tipos: pticos y electrnicos, segn el
principio en que se basa su poder de magnificacin. En los microscopios de luz, el
aumento se obtiene por medio de un sistema de lentes pticos; en los electrnicos
se emplea un rayo de electrones, en ves de la luz, y campos electromagnticos en
lugar de lentes, para lograr la imagen aumentada.
Tanto el microscopio de luz como el electrnico requieren de la adecuacin de la
muestra para ser observada, para lo cual se han desarrollado diversas tcnicas.
El microscopio consta de tres sistemas: mcanico, ptico y de iluminacin.
La parte ptica est constituida por las lentes, que son los oculares y los objetivos.
La funcin del objetivo es proporcionar una imagen agrandada del objeto en
observacin; imagen que a su vez es aumentada por el ocular. El paso de la luz se
regula mediante el sistema de iluminaci que genralmente est formado por una
pequea lmpara incorporada a la base, un diafragma y un condensador.
El microscopio posee, adems, dos tipos de mandos mecnicos (tornillos): uno
macromtrico y el otro micromtrico. Estos tienen como funcin regular la distancia
entre el objetivo y el objeto de estudio. Con el macromtrico se obtienen grandes
desplazamientps entre la muestra y el objetivo, en tanto que, con el micromtrico,
este ajuste es my pequeo. La manipulacin de estos dos mandos permite enfocar
la imagen de manera que se logre la mayor nitidez posible.
Objetivo
a) Realizar una tincion simple de bacterias procedentes de distintas muestras
naturales
b) Realizar dos tipos de fijaciones bacterianas y saber en que casos se
recomienda una u otra.
c) Practicar con el microscopio al mximo aumento y con el correcto empleo del
aceite de inmersin.
Resultados
Conclusion
Complete el siguiente dibujo
Cuestionario
1. Qu tipos de microscopio existen, en que se fundamentan cada uno de
ellos y cul es su utilidad?
Tipo de Caractersticas distintivas
microscopio
Microscopio Utiliza luz visible como fuente de
ptico iluminacin; no puede resolver
De campo claro estructuras con un tamao menor
de 0.2m; la muestra aparece
contra un fondo claro. Su uso es
econmico y sencillo.
Microscopio de Utiliza un condensador especial
campo oscuro con un disco opaco que bloquea la
luz que llega directamente al
objetivo; solo ingresa en el objetivo
la luz reflejada por la muestra y la
Usos principales
Para observar diversas
muestras teidas y contar
microbios; no resuelve
elementos muy pequeos
como los virus.
Para examinar
microorganismos vivos
que son invisibles en la
microscopia de campo
claro, no se tien con
 muestra aparece iluminada contra facilidad o se distorsionan
un fondo negro. con la tincin; se utiliza
con frecuencia para
detectar Treponema
pallidum en el diagnstico
de la sfilis.
De contraste de Utiliza un condensador especial Para facilitar la
fase que contiene un diafragma anula. observacin de las
El diafragma permite que la luz estructuras internas de
directa del condensador pase, se muestras viables.
enfoque la luz sobre la muestra y
en una placa de difraccin en la
lente objetivo. Los rayos de la luz
directos y reflejados o difractados
se unen para formar la imagen. No
requiere tincin.
De contraste por Como el contraste de fase emplea Para proporcionar
interferencia las diferencias en los ndices de imgenes
diferencial refraccin para producir la imagen. tridimensionales.
(MCID) Utiliza dos haces de luz separados
por prismas; la muestra aparece
coloreada como resultado del
efecto prisma. No requiere tincin.
De Utiliza una fuente de luz En tcnicas con
fluorescencia ultravioleta o cercaba a la anticuerpos fluorescentes
ultravioleta que determina que los (inmunofluorescencia)
microbios que emiten luz en una para detectar con rapidez
muestra aparezcan como e identificar microbios en
fluorescentes (teidos de verde). muestras de tejidos o
clnicas.
Confocal Utiliza luz por lser para iluminar Para obtener imgenes
un plano de la muestra por vez. bidimensionales y
tridimensionales de
clulas para aplicaciones
biomdicas.
Acstico de Utiliza una onda sonora de Para examinar clulas
barrido (MAB) frecuencia especfica que vivas adheridas a otra
atraviesa la muestra con una superficie, como clulas
porcin que se refleja cuando la cancerosas, placa arterial
golpea. y pelculas biolgicas
dentro del material.
Electrnico Utiliza un haz de electrones en Para examinar virus o la
De transmisin lugar de luz; los electrones ultraestructura interna en
(MET) atraviesas la muestra; dada la cortes delgados de
longitud de onda ms pequea de clulas (por lo general
los electrones, pueden resolverse
 estructuras menores de 0.2 m. La con un aumento de 10
imagen producida es 000- 100 000x).
bidimensional.
De barrido Utiliza un haz de electrones en Para estudiar las
(MEB) lugar de luz; los electrones se caractersticas de la
reflejan desde la muestra; dada la superficie de clulas y
longitud de onda ms pequea de virus (por lo general con
los electrones, pueden resolverse un aumento de 1 000-10
estructuras menores de 0.2 . La 000 x).
imagen producida es
tridimensional.
De sonda de Utiliza una sonda delgada de metal Proporciona imgenes
barrido (tungsteno) que recorre una muy detalladas de
Por efecto tnel muestra y produce una imagen molculas dentro de las
(MBT) que revela las protuberancias y las clulas.
depresiones de los tomos sobre
la superficie de la muestra. El
poder de resolucin es mucho
mayor que el de un microscopio
electrnico. No se precisa una
preparacin especial.
De fuerza Utiliza una sonda de metal y Proporciona imgenes de
atmica (MFA) diamante que se aplica con una procesos molculas y
fuerza suave a lo largo de la molculas biolgicas en
superficie de una muestra. detalle casi atmico.
Produce una imagen
tridimensional. No se precisa una
preparacin especial

2. En qu objetivo se usa el aceite de inmersin y cul es su funcin?

Se utiliza en el objetivo 100 x. Dado que los ndices de refraccin del vidrio del
portaobjetos y del aceite de inmersin son iguales, los rayos de luz no refractan al
pasar de uno a otro cuando se utiliza el objetivo de inmersin, esto produce
imgenes con una mejor resolucin.
3. Cul es la diferencia entre una preparacin en fresco y una preparacin en
fijo?
Las preparaciones en fresco se permiten observar en los microorganismos su
movimiento, color, tamao, forma y agrupacin en condiciones naturales, cuando
estn vivos, sin alteraciones. Sin embargo la observacin es difcil debido al escaso
contraste, por la poca diferencia entre el ndice de refraccin del medio y delos
microorganismos.
En una preparacin en fijo los microorganismos estn muertos, pero su estructura
se preserva, lo que permite que al aplicarle algn colorante la observacin de sus
estructuras sea mejor, adems de que la muestra que se fijo puede mantenerse por
ms tiempo.
4. Qu fin tiene la fijacin de muestras al realizar un frotis bacteriano?
Su finalidad es inmovilizar clulas bacterianas sobre el portaobjetos para que no
sean arrastradas en los procesos posteriores de teido y de lavado.
5. Investiga las diferentes morfologas que presentan las clulas bacterianas
y sus agrupaciones.
Disposicin de los cocos Disposicin de los bacilos
cocos Bacilo
Diplobacilo
diplococos
Estreptobacilo
Estreptococos

Ttrada Cocobacilo

Sarcinas Bacterias espirilares

Vibrio

Estafilococos Espirilo

espiroqueta

Bibliografa
Alonso-Urmeneta, B., Diaz, R., Gamazo, C., & Lopez-Goni, I. (2005). Manual
practico de microbiologia. Barcelona: Masson.
Garca, V. (s.f.). Introduccin a la Microbiologa. Editorial Universidad Estatal a
Distancia.
Olivas, E. E., Alarcon, L. R., & Universidad Autonoma de Ciudad Juarez,.
(2004). Manual de practicas de Microbiologia basica y Microbiologia de alimentos.
Ciudad Juarez, Chihuahua, Mexico: Universidad Autonoma de Ciudad Juarez.
Tortora, G., Funke, B. R., & Case, C. L. (2007). Introduccion a la microbiologia.
Buenos Aires: Medica Panamericana.