2007
RESUMEN
El objetivo de esta investigacin fue la evaluacin microbiolgica, fsico-qumica y sensorial, as como la determinacin de la
degradacin de pigmentos y vida til de productos ctricos acondicionados con pulpas con alto contenido de betalanas. Se
elaboraron seis bebidas ctricas pasteurizadas a base de naranja (N), toronja (G) y dos fuentes de betalanas: pulpa de la tuna (T)
Opuntia elatior Miller y races de remolacha (R) Beta vulgaris L. Se emplearon las siguientes formulaciones: F-I con
5 % T, 15 % N, 15 % G y agua sin adicin de cido ascrbico (AA); F-II con 5 % T, 15 % N, 15 % G y agua con adicin de 1 %
AA; F-III con 5 % R, 15 % N, 15 % G y agua sin adicin de AA; F-IV con 5 % R, 15 % N, 15 % G y agua con adicin de 1 %
AA; F-V con 15 % N, 15 % G y agua sin adicin de AA; y F-VI con 15 % N, 15 % G y agua con adicin de 1 % de AA. Todos
los parmetros fsico-qumicos presentaron diferencias significativas (P0,05) durante las cuatro evaluaciones realizadas con
intervalo semanal. Segn la prueba no paramtrica de Friedman se determin que la formulacin con remolacha result con la
mayor aceptacin en cuanto al color y la formulacin con pulpa de tuna y cido ascrbico la mejor con respecto al sabor. Se
concluye que las betalanas en las bebidas mostraron estabilidad qumica durante el tiempo de estudio y que existe factibilidad
tcnica de elaborar bebidas ctricas pasteurizadas pigmentadas fuentes naturales tales como pulpa de tuna y raz de remolacha.
Palabras clave adicionales: Beta, Opuntia, Cactaceae, pigmentos, bebidas
ABSTRACT
Stability evaluation of citric beverages pigmented with natural sources of betalains: tuna pulp and beetroot
The objective of this research was to conduct microbiological, physicochemical and sensorial evaluation of pasteurized citrus
beverages prepared with vegetal sources of high betalain content, along with determination of the half life and pigment
degradation. Six citrus beverages were formulated with orange (O), grapefruit (G), and two sources of betalains: tuna (T, Opuntia
elatior Miller) and beetroot (B, Beta vulgaris L.). The following formulations were used: F-I with T 5 %, O 15 %, G 15 % plus
water without addition of ascorbic acid (AA); F-II with T 5 %, O 15 %, G 15 % plus water with 1 % AA addition; F-III with B
5 %, O 15 %, G 15 % plus water without AA addition; F-IV (B 5 %, O 15 %, G 15 % plus water with 1 % AA addition; F-V (O
15 %, G 15 % plus water without AA addition; and F-VI (O 15 %, G 15 % plus water with 1 % AA addition. All physicochemical
parameters showed significant differences (P0.05) in the four evaluations performed at weekly intervals. According to the
Friedman non-parametric test it was found preference by color of formulation with beetroot while formulation with tuna and AA
had more acceptance by taste. It was concluded that betalains in the beverages showed chemical stability during the evaluation
period and that it is technologically feasible the production of pasteurized citrus beverages pigmented with natural sources such as
tuna pulp and beetroot.
Additional key words: Beta, Opuntia, Cactaceae, pigment, beverages
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150
Volumen 19 (2007) BIOAGRO N 3
oxgeno y otros agentes (Odoux y Domnguez- rojo remolacha, producido por deshidratacin y
Lpez, 1996; Delgado-Vargas et al., 2000). Las pulverizacin de B. vulgaris (Moreno-lvarez et
betalanas pertenecen a los cinco aditivos al., 2002a).
colorantes de origen natural ms ampliamente El objetivo de esta investigacin fue el
utilizados en alimentos, principalmente en formular bebidas ctricas con dos fuentes de
productos crnicos a base de soya, embutidos y betalanas: pulpa de la tuna Opuntia elatior
productos lcteos (Barrera et al., 1998). Estos Miller (especie distribuida en los ecosistemas
metabolitos son beneficiosos para la salud ya que ridos y semiridos en forma silvestre y sin
presentan efectos antimicrobianos, antioxidantes, ninguna aplicabilidad industrial) y races de
anticancergenos, intervienen en la disminucin remolacha. A este respecto se evaluaron
de los triglicridos, control de la glucemia y parmetros fsico-qumicos, microbiolgicos,
contribuyen a combatir la arteroesclerosis sensoriales y la cintica de degradacin de las
(Joubert, 1993; Kanner et al., 2001; Butera et al., betalanas con el fin de establecer la factibilidad
2002). Poseen adems un valor importante para la tcnica de elaboracin de este tipo de bebidas, de
industria como pigmentante natural, en especial valores nutricionales importantes, y con poca
porque los colorantes sintticos son cada vez ms explotacin en el pas.
cuestionados por su vinculacin con numerosos
efectos negativos a la salud, aparte de los costos. MATERIALES Y MTODOS
Las principales fuentes vegetales de betalanas son
la races de Beta vulgaris, el tallo de Amaranthus Se seleccionaron frutos de O. elatior (3 kg) en
y los frutos de las especies del gnero Opuntia. el municipio Miranda, sector Sabaneta, del estado
Odoux y Domnguez-Lpez (1996) sealan que el Carabobo, Venezuela, los cuales cumplan los
contenido de betalanas Opuntia ficus indica criterios de madurez de consumo y color rojo
es de 4,1 mg100 g-1 y el de O. robusta robusta es homogneo, sin rastros de deterioro. Los frutos
86,1 mg100 g-1, lo cual indica la presencia de presentaron un peso promedio de 20 g y fueron
estos metabolitos en importantes concentraciones. envasados en un contenedor de poliestireno de
Dentro de las Cactaceae diversas especies del 10 L de capacidad al cual se le incorpor CO2(s),
gnero Opuntia han sido objeto de estudio, con la para garantizar una temperatura cercana a 7 C
finalidad de no slo aprovechar las betalanas por durante el transporte desde el sitio de colecta hasta
sus beneficios a la salud, sino de encontrarles el laboratorio. En el laboratorio las muestras
aplicabilidad en la confeccin de diferentes fueron lavadas con agua corriente y se
productos alimenticios (Senz, 1997; Senz et cortaron en trozos pequeos para someterlos a un
al., 1998; Seplveda et al., 2000), permitiendo la extractor de zumo (Eastern Electric mod. JX
utilizacin de especies con poca utilidad 5000) previa remocin manual de las espinas,
comercial. separando cscara y semilla de la pulpa. Las
Las bebidas pasteurizadas de jugo de naranja y races de remolacha fueron adquiridas en un
nctares de diferentes frutas solas o en mezclas establecimiento comercial considerando que
presentan una gran demanda en el mercado tuviesen un grado de madurez adecuado para el
(COVENIN, 1995). Moreno-lvarez et al. (2003) consumo, color homogneo y sin rastros de
establecieron la factibilidad tecnolgica de la deterioro (Moreno-lvarez et al., 2002a); stas
utilizacin de pulpa O. boldinghii en la confeccin fueron lavadas, cortadas en trozos y procesadas
de bebidas pigmentadas tratadas con diferentes mediante un extractor de pulpa (Dixie Canner
concentraciones de cido ascrbico. mod. 17 con malla de 0,60 mm). Las races de
Las races de remolacha (Beta vulgaris L.) remolacha y los frutos de tuna fueron escaldados
contienen pigmentos del grupo de las betalanas, a una temperatura de 75 1 C por 2 minutos,
que han sido consideradas de gran inters antes del proceso de obtencin de la pulpa y la
alimentario, destacando las betacianinas y las remocin de las espinas en el caso de la tuna.
betaxantinas, los cuales tienen utilidad como Los frutos de naranja (Citrus sinensis L.)
sustitutos de colorantes artificiales en diversos variedad Valencia y toronja (Citrus paradise L.)
alimentos, siendo aceptados por la Comunidad se cosecharon en una plantilla agrcola ubicada en
Econmica Europea, donde se les clasifica como el municipio Montalbn, estado Carabobo,
151
Moreno et al. Tuna y remolacha como fuentes de betalanas
considerando criterios de no presentar daos mesfilos (COVENIN, 1978a), mohos
fsicos aparentes, madurez de consumo y sin (COVENIN, 1978b), levaduras (COVENIN,
rastros aparentes de clorofila (Moreno-lvarez et 1978b) y coliformes totales (COVENIN, 1984).
al., 1999). A los frutos se le eliminaron partculas
extraas e indeseables mediante un lavador Formulacin de los jugos
rotatorio (Sinclear-Scott mod. DR-400) para luego Se elaboraron seis formulaciones de jugos
efectuar la extraccin del jugo. (Cuadro 1). Se aadi sacarosa comercial para
un valor final de 11 Brix en cada tratamiento,
Caracterizacin fsico-qumica y microbiolgica independientemente de la presencia de tuna o
de los frutos remolacha. Las formulaciones II, IV y VI
La determinacin de pH y acidez total fueron acondicionados con cido ascrbico. La
titulable se realiz segn mtodo de la concentracin de pulpa de frutos utilizada se
AOAC (1990) usando un potencimetro con bas en una investigacin previa desarrollada
precisin de 0,01 unidades de pH. Los slidos por Moreno-lvarez et al. (2003) con pulpa
solubles totales (SST) fueron ledos en un de O. boldinghii utilizada en la pigmentacin
refractmetro Baush y Lomb mod. Abbe-3L de de bebidas ctricas.
precisin 0,01 Brix. La concentracin de
carotenoides totales se calcul mediante curva Proceso de pasteurizacin
patrn (Y=0,029+38,138X) a 440 nm con Las diferentes formulaciones se procesaron en
espectrofotmetro Baush y Lomb. Las betalanas un equipo pasteurizador de tacho abierto (Dover
se determinaron a 540 nm en pH 6,1 segn mod. TDB/7-20) con capacidad para 18 L, a una
procedimiento establecido por Sapers y Hornstein temperatura de 60 0,1 C por 30 minutos;
(1979). La vitamina C fue cuantificada culminado el proceso los productos se envasaron
mediante el mtodo volumtrico del 2,6 dicloro en botellas esterilizadas de vidrio color mbar
indofenol (COVENIN, 1977). Se efectuaron de 250 mL de capacidad. Los productos se
determinaciones de microorganismos aerobios almacenaron a 7 0,1 C durante 21 das.
Cuadro 1. Composicin de las formulaciones de las bebidas ctricas evaluadas en este ensayo
Pulpa de tuna Pulpa de remolacha Jugo (%) Agua cido ascrbico
Formulacin
(%) (%) Naranja Toronja (%) aadido (%)
I 5 - 15 15 65 -
II 5 - 15 15 65 1
III - 5 15 15 65 -
IV - 5 15 15 65 1
V - - 15 15 70 -
VI - - 15 15 70 1
Caracterizacin fsico-qumica y microbiolgica valoracin fue: (1) le gusta, (2) no le gusta y (3)
de los productos terminados indeciso. El nmero de consumidores fue de 40
Las bebidas ctricas pasteurizadas se personas (con edades comprendidas entre 19 y
evaluaron semanalmente mediante anlisis de 23 aos), todos estudiantes del ncleo Canoabo de
SST, pH, acidez total titulable, carotenoides la Universidad Nacional Experimental Simn
totales, betalanas, vitamina C, mesfilos, mohos, Rodrguez, en el estado Carabobo. Los parmetros
levaduras y coliformes totales mediante los se evaluaron durante cuatro semanas continuas
mismos mtodos y equipos antes sealados. (paralelamente a las evaluaciones fsico-qumicas
y microbiolgicas) para determinar cul de las
Evaluacin sensorial bebidas resultaba con la mayor aceptacin.
La escala hednica utilizada en este estudio
fue propuesta por el CIEPE (1984) y se Degradacin de betalanas y vida til de las
evaluaron los parmetros de color, sabor y olor, bebidas
mediante escala ordinal de aceptacin, cuya Para determinar la degradacin de las
152
Volumen 19 (2007) BIOAGRO N 3
betalanas (pigmento mayoritario) en el tiempo, se evaluacin microbiolgica de la materia prima,
midi la absorbancia mediante el respectivamente. Los valores de pH, slidos
espectrofotmetro a 540 nm y posteriormente se solubles, betalanas y acidez total titulable para la
grafic la concentracin de betalanas totales en pulpa de tuna son similares a los sealados por
funcin de los das de almacenamiento Domnguez-Lpez (1996) y Senz (1997) para
refrigerado. Se determin el orden de la Opuntia ficus indica. Los contenidos de vitamina
degradacin de las betalanas en base a los C y carotenoides totales no presentan mayores
criterios de Cantillo et al. (1994). Una vez diferencias con los sealados por Moreno-lvarez
calculado el orden de degradacin de los et al. (2003) para Opuntia boldinghii. En la
pigmentos se determinaron los valores de las remolacha los valores obtenidos son similares a
constantes de velocidad (k), calculados como las los indicados por el INN (2001). En lo que
pendientes de las grficas anteriormente descritas, respecta al zumo de naranja y toronja, los valores
y los tiempos de vida media del pigmento segn el de pH, acidez titulable, slidos solubles y
orden de reaccin, en cada formulacin. carotenoides son similares a los sealados por
otros autores para muestras colectadas en reas
Anlisis estadstico de los parmetros fsico- geogrficas comunes (Moreno-lvarez et al.,
qumicos y sensoriales 2003; Moreno-lvarez et al., 2004a). El valor de
Los resultados de cada uno de los tratamientos vitamina para ambas frutas difiere de los
fsico-qumicos se evaluaron mediante anlisis de sealados por Vlez y Vlez (1990), diferencia
varianza mediante el paquete estadstico SAS que puede estar relacionada con factores como el
versin 6.0 (Cary, NC). El anlisis sensorial se ndice de madurez o la poca de colecta. El
evalu mediante la prueba no paramtrica de recuento de aerobios mesfilos, levaduras y
Friedman utilizando el mismo paquete estadstico. mohos es similar a los sealados por diferentes
autores para frutos en pocas de recoleccin;
RESULTADOS Y DISCUSIN estando dentro de los estndares considerados
como aptos para ser utilizados como materias
En los Cuadros 2 y 3 se presentan los primas (Moreno-lvarez et al., 2002b; Frazier y
resultados de la caracterizacin fsico-qumica y la Westhoff, 2003; Moreno-lvarez et al., 2004b).
Cuadro 2. Caracterizacin fsica y qumica de la materia prima utilizada para preparar las bebidas ctricas
evaluadas en este ensayo (n = 3)
Parmetro Tuna Remolacha Naranja Toronja
pH 5,62 0,20 6,05 0,01 3,90 0,01 3,63 0,01
Acidez total titulable (g de cido ctrico100 g-1 de pulpa) 0,11 0,02 0,16 0,03 0,72 0,04 0,37 0,04
Slidos solubles ( Brix) 1,2 0,1 10,0 0,1 9,0 0,1 11,0 0,1
Vitamina C (mg de cido ascrbico100 g-1de pulpa) 13,01 0,06 29,11 0,02 57,20 0,09 69,04 0,03
Betalanas (mg100 g-1de pulpa) 6,70 0,01 6,92 0,01 ND ND
Carotenoides (mg100 g-1 de pulpa) 0,250 0,001 0,430 0,01 1,3500,001 0,9120,003
ND Valores no determinados
Cuadro 3. Caracterizacin microbiolgica de la materia prima utilizada para preparar las bebidas ctricas
evaluadas en este ensayo
Anlisis Tuna Remolacha Naranja Toronja
Aerobios mesfilos (UFCmL-1) 20610 21810 15 20
-1
Levaduras (UFCmL ) 540 1500 30 100
Mohos (UFCmL-1) 160 62500 900 260
Coliformes totales (NMPmL-1) <3 <3 <3 <3
NMP: nmeros ms probable
UFC: Unidades formadoras de colonias
Cuadro 4. Evolucin durante tres semanas de las caractersticas fsicas y qumicas de seis formulaciones
de bebidas ctricas acondicionadas con pulpa de tuna y remolacha (n = 3)
Formulacin
Parmetro Semana
I II III IV V VI
0 3,68 a 3,42 a 3,68 a 3,35 a 3,56 a 3,53 a
1 3,67 b 3,40 b 3,67 b 3,34 b 3,54 b 3,51 b
pH
2 3,66 c 3,38 c 3,65 c 3,33 b 3,52 c 3,50 b
3 3,65 d 3,37 d 3,63 d 3,32 c 3,50 d 3,48 c
Cuadro 5. Evolucin microbiolgica durante tres semanas de las diferentes formulaciones de bebidas
ctricas acondicionadas con pulpa de tuna y remolacha
Formulacin Semana Aerobios* mesfilos Mohos* Levaduras* Coliformes**
0 304 <50 <100 <3
1 550 >50 >100 <3
I
2 560 >50 >100 <3
3 800 >50 >100 <3
El Cuadro 6 indica los resultados de la indicando que las pruebas fueron instrumento de
evaluacin de los parmetros sensoriales, juicio para evaluar la preferencia de los
aplicando el mtodo no paramtrico de Friedman consumidores. En la primera semana se detectaron
y el valor de probabilidad (P) utilizando la diferencias significativas slo para el sabor.
aproximacin de Chi2 para los diferentes atributos Para las semanas 2 y 3 se lograron evidenciar
evaluados. En relacin a la evaluacin sensorial, diferencias significativas en los atributos sabor
para el primer da de evaluacin se determinaron y color. De acuerdo con los puntajes obtenidos
diferencias significativas en todos los atributos, en la categorizacin del anlisis de la
155
Moreno et al. Tuna y remolacha como fuentes de betalanas
evaluacin sensorial se infiere que la formulacin de las bebidas pigmentadas con pulpas contentivas
III result con la mayor aceptacin en cuanto al de betalanas, independientemente de la fuente.
color y la formulacin II en cuanto al sabor, Por otro lado, la presencia del cido ascrbico en
mientras que en la variable olor no hubo la formulacin II fue una variable discriminativa
discriminacin. Estos resultados indican una en la seleccin de los panelistas en relacin
preferencia marcada de los panelistas por dos al sabor.
Cuadro 6. Evaluacin sensorial durante tres semanas para detectar diferencias entre las formulaciones de
bebidas ctricas acondicionadas con pulpa de tuna y remolacha (Prueba de Friedman)
Semana 0 1 2 3
F P>F F P>F F P>F F P>F
Color 38,8760 0,0000 * 6,8648 0,2309 32,9190 0,0000 * 13,7410 0,0173 *
Aroma 13,6080 0,0183 * 3,9704 0,5537 0,2505 0,0095 3,6395 0,6024
Sabor 29,5660 0,0000 * 16,3750 0,0026 * 14,4350 0,0131 * 13,2740 0,0209 *
F: Estadstico de Friedman
P: Valor de probabilidad utilizando la aproximacin de Chi2
* Significativo al 95% de confianza
Con relacin a la cintica de degradacin de las con tuna permiten inferir que la degradacin de las
betalanas, en las Figuras 1 y 2 se presentan las betalanas en estos productos no es afectada por la
variaciones de la concentracin del pigmento en adicin de cido ascrbico.
funcin del tiempo de almacenamiento para las Las bebidas pigmentadas con remolacha
bebidas acondicionadas con tuna (formulaciones I (formulaciones III y IV) mostraron diferencias
y II) y remolacha (formulaciones III y IV). De significativas (P0,05) en los valores de k y por lo
acuerdo al valor del coeficiente de determinacin tanto la gran diferencia observada en los valores
R2 para cada caso se estableci que en todas las de vida media para este caso (Cuadro 7) debi
formulaciones el descenso en la concentracin de estar ms influenciada por la constante cintica
las betalanas totales sigui un modelo de reaccin que por la diferencia existente en la concentracin
de orden cero. inicial de betalanas. La formulacin III present
Las constantes cinticas (k) no mostraron la constante de velocidad ms alta (0,0181
diferencias significativas (P>0,05) para las mg100 mL-1d-1), lo que evidencia que en ella la
bebidas pigmentadas con tuna (Cuadro 7), por lo degradacin de las betalanas fue ms rpida y por
que las rectas representativas de la variacin en lo tanto su vida media fue inferior a la mostrada
los contenidos de betalanas totales de las por la formulacin IV, la cual contena cido
formulaciones I y II resultaron paralelas y la ascrbico); estos resultados permiten inferir que
velocidad de degradacin en estas bebidas puede en las bebidas con remolacha la adicin de cido
considerarse similar; en cambio, los valores de ascrbico si actu como un agente protector de las
vida media presentaron diferencias significativas betalanas.
(P0,05), mostrando el mayor tiempo la El comportamiento cintico establecido para
formulacin II. Sin embargo, en reacciones de las betalanas en las bebidas ctricas pigmentadas
orden cero la vida media es directamente con tuna y con remolacha (orden cero) difiere al
proporcional a la concentracin inicial del sealado para estos pigmentos en diversos
reaccionante, por lo tanto, la diferencia observada sistemas alimentarios por otros autores, quienes
en este parmetro puede ser una consecuencia de han establecido que la degradacin de las
las diferencias presentadas por los productos en la betalanas es una reaccin de primer orden
concentracin inicial de betalanas totales, donde (Delgado-Vargas et al., 2000; Moreno-lvarez et
la formulacin II (contentiva de cido ascrbico) al., 2002a) lo cual podra estar influenciado por la
mostr el mayor valor (0,93 mg100 mL-1 de composicin qumica de las especies empleadas,
jugo) en comparacin con la formulacin I las cuales son de naturaleza distinta y pueden
(0,86 mg100 mL-1 de jugo). En tal sentido, los contener diferentes sustancias qumicas. A este
resultados exhibidos por las bebidas pigmentadas respecto, Delgado-Vargas et al. (2000) hacen
156
Volumen 19 (2007) BIOAGRO N 3
referencia a investigaciones que establecen que la comparacin con los productos que contenan
cintica de degradacin de algunos pigmentos remolacha y, adems, en la remolacha el cido
puede ser afectada por la presencia de especies ascrbico mostr una accin protectora mientras
moleculares y otros agentes como la actividad del que en las bebidas con tuna no modific la
agua y el pH. La diferencia en la naturaleza de la cintica.
tuna y la remolacha como factor influyente en la Los anlisis fsico-qumicos y microbiolgicos
degradacin de las betalanas se evidencia en el determinados a las seis formulaciones, indican que
hecho de que en las bebidas pigmentadas con tuna la vida til de todos los productos fue de tres
se degradaron con una velocidad de reaccin, semanas bajo las condiciones de refrigeracin
establecida a travs del valor de k, menor en establecidas en esta investigacin.
1,4
Formulacin I
1,2
Betalanas totales (mg100 mL-1)
Formulacin II
y = -0,0122x + 0,9739
1 R2 = 0,9158
0,8
0,2
0
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22
Tiempo de almacenamiento (das)
Figura 1. Degradacin de betalanas en dos formulaciones de bebidas ctricas pigmentadas con tuna
1,4
Formulacin III
y = -0,0133x + 1,1583
Betalanas totales (mg100 mL-1)
1,2 Formulacin IV
R2 = 0,8162
0,8
y = -0,0181x + 1,0742
0,6 R2 = 0,9355
0,4
0,2
0
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22
Tiempo de almacenamiento (das)
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