INSTITUTO TECNOLGICO

SUPERIOR DE XALAPA
Requerimiento: 8.3 MANUAL DE PRCTICAS

Asignatura (Clave y nombre)* AEM-1050 Microbiologa

Carrera* Ing. Bioqumica Unidad* 2
Elaboracin de medios de cultivo
Bibliografa Brooks, G.F., Jawetz, E., Butel, J.S., Melnick, JL, Orston, L.N. y
Adelberg, E.A. (1991). Microbiologa Mdica de Jawetz, Melnick y
Adelberg. Manual Moderno. 14a Ed. Mxico.

1 INTRODUCCIN:

Un medio de cultivo es un conjunto de nutrientes, factores de crecimiento y otros

componentes que crean las condiciones necesarias para el desarrollo de los
microorganismos. La diversidad metablica de estos es tan grande que la variedad de
medios de cultivo es enorme, no existiendo un medio de cultivo universal adecuado para
todos ellos, ni siquiera refirindonos a las bacterias con exclusividad.
Los medios de cultivo, en concentraciones adecuadas y en condiciones fsicas ptimas,
permiten el crecimiento de los microorganismos. Estos medios son esenciales en el
Laboratorio de Microbiologa por lo que un control en su fabricacin, preparacin,
conservacin y uso, asegura la exactitud, confiabilidad y reproducibilidad de los resultados
obtenidos.
En los laboratorios de microbiologa se utilizan diferentes tipos de medios de cultivo que
pueden ser preparados en forma lquida o en forma slida. Usualmente para preparar un
medio slido, se parte de un medio lquido al que se le aade un agente solidificante como
el agar, la gelatina o la slicagel.
Los medios de cultivo se pueden clasificar de acuerdo a la naturaleza de sus constituyentes
en:
Medios naturales o complejos: constituidos por sustancias complejas de origen animal o
vegetal, las que son usualmente complementadas por la adicin de minerales y otras
sustancias. En ellos no se conocen todos los componentes, ni las cantidades exactas
presentes de cada uno de ellos.
Medios definidos o sintticos: son los medios que tienen una composicin qumica
definida cualitativamente y cuantitativamente. Generalmente se usan en trabajos de
investigacin.
De acuerdo al uso del medio de cultivo, stos se clasifican en:
Medios de enriquecimiento: son medios lquidos que favorecen el crecimiento de un tipo
de microorganismo en particular. Permiten aumentar el nmero de microorganismos de ese
tipo. Usualmente contienen una o ms sustancias inhibidoras del crecimiento de los
microorganismos con excepcin de los que se quieren cultivar.
Medios selectivos: son parecidos a los de enriquecimiento, se diferencian por ser medios
slidos y estn diseados para el aislamiento de microorganismos especficos.
Medios diferenciales: son medios que contienen indicadores de productos derivados de la
actividad microbiana de los microorganismos. No contienen ningn tipo de sustancia con
actividad antimicrobiana. Permiten revelar caractersticas fisiolgicas de los
microorganismos.

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Los medios de cultivo deshidratados se deben almacenar en envases sellados bajo las
condiciones que seale el fabricante. Generalmente se almacenan en un lugar fresco (entre
15 y 25), con poca humedad y protegidos de la luz solar directa. Nunca se deben
almacenar cerca de autoclaves, hornos, ni otra fuente de calor o vapor.
Una vez que el medio de cultivo ha sido preparado y esterilizado, puede almacenarse a
temperatura ambiente por un periodo mximo de 2 semanas protegido de la luz, o por
periodos mayores a 12 -15C. Sin embargo, almacenados bajo refrigeracin entre 2 y 8C
se prolonga la vida til de los mismos, Los medios de cultivo se deben mantener en
recipientes bien cerrados para evitar su deshidratacin y cuando se usa tapn de algodn, se
debe colocar por encima una envoltura de papel

2 OBJETIVO:
Conocer la clasificacin, preparacin, esterilizacin y distribucin (servido) de los medios de cultivo

3 MATERIAL Y EQUIPO REQUERIDO

Matraz Erlenmeyer de 500 mL
Vaso de precipitado de 250 mL
Probeta graduada de 500 mL
Pipeta graduada de 1mL
Pipeta graduada de 10 mL
Parrilla de calentamiento
Parrilla de agitacin
Autoclave
Estufa de incubacin
Bao mara
Tubos de ensaye
Gradillas
Cajas Petri
Perilla
Lmpara de alcohol
Magnetos
Caldo nutritivo
Agar verde brillante
Pipeta pasteur
Bulbo para pipeta pasteur

4 METODOLOGA
Preparacin de medios de cultivo.
1. Realizar los clculos adecuados para conocer la cantidad de medio de cultivo que se necesita
pesar.
2. Pesar el medio de cultivo.
3. Vaciar el medio de cultivo solido en el volumen de agua adecuado y calentar hasta que
ebullicin, dejar ebullir durante un minuto o el tiempo que indique el fabricante del medio.
(Consultar la etiqueta del medio de cultivo utilizado).
4. Esterilizacin de los medios de cultivo a una presin de 1.5 Lb por un tiempo de 20 minutos.
5. Etiquetado correcto de las placas y los tubos.
6. Ajuste de la temperatura de los medios de cultivo.
7. Vaciado de medios de cultivo en las cajas petri y tubos de ensaye. (Acondicionar el rea de
trabajo para conseguir un ambiente apropiado).

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8. Una vez que solidifique el medio de cultivo o en el caso del caldo la temperatura sea
adecuada se puede sembrar el microorganismo que se va a cultivar.

5. RESULTADOS

6. CONCLUSIN
Con la realizacin de la prctica de preparacin de medios para el cultivo , se
lograron los objetivos establecidos en la misma, proporcionando al alumno gran
conocimiento de cmo prepararlo y cules son los nutrimentos necesarios de
acuerdo a la consistencia que el medio de cultivo obtuvo. Es importante mencionar
que se obtuvieron buenos resultados ya que se pudo hacer la preparacin del
medio sin dificultad alguna.
se concluye que es de gran importancia preparar adecuadamente los medios de
cultivo, aadir la cantidad de solucin exacta y disolverla correctamente para
obtener los resultados esperados.

Elabor Verific

ING. XOCHITL ARELLANO ORTEGA ING. OSCAR CARRASCO ORTEGA

Nombre y firma del (la) docente Nombre y firma de la
jefatura de carrera

Las firmas anteriores hacen constar que se ha verificado que la presente prctica es representativa de los objetivos de la
unidad a que corresponda, que las instrucciones y la metodologa son acordes al objetivo de la prctica y est
referenciada en la bibliografa indicada y, que las instrucciones son claras.

INSTRUCTIVO DE LLENADO

El presente formato es utilizado para especificar la forma en que debe ser llevada a cabo la
prctica, y el alumno que realiza la prctica pudiera hacer un reporte como resultado de la
ejecucin de la misma. El reporte que realiza el alumno, ser con base a la estructura o apartados
que indique el docente.

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1. Anotar clave y nombre de la asignatura a la que corresponda la prctica.

2. Nombre de la carrera a la que pertenezca la asignatura.
3. Nmero y nombre de la unidad a la que corresponda la prctica.
4. Nombre de la prctica.
5. Bibliografa de referencia que contenga temas relacionados con la prctica.
6. Nombre y firma del docente que elabora o disea la prctica.
7. Nombre y firma del par acadmico que verifica que la prctica es representativa de los
objetivos de la unidad a que corresponda, que las instrucciones y la metodologa son
acordes al objetivo de la prctica y est referenciada en la bibliografa indicada, adems de
que las indicaciones son claras.
8. Nombre y firma del jefe de carrera que autoriza la realizacin de la prctica.
9. Realizar una breve introduccin terica y referencial sobre la prctica a realizar.
10. Indicar el objetivo que se pretende lograr con la realizacin de la prctica.
11. Especificar la cantidad y el material que se utilizar para realizar la prctica, especificar
tambin el equipo necesario.
12. Indicar los pasos o metodologa que se deber llevar a cabo para obtener los resultados
esperados. Se recomienda ser claros y precisos.
13. Es este apartado se deber indicar los resultados en los cuales puede incluir una
recomendacin o sugerencia para poder llevar a cabo la prctica, evitar errores y/o
accidentes.
14. Escribir el nombre del (la) que realiz la prctica
15. Escribir el nombre del titular de la jefatura de carrera que valida la prctica

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