CUESTIONARIO

1. Cul es su concepto sobre la cromatografa?

La cromatografa es un excelente mtodo de separacin de sustancia, cuando nos

encontramos ante una mezcla compleja; es un mtodo fsico que utiliza una fase estacionaria y
otra fija, adems se basa en la diferencia del coeficiente de particin de las sustancias frente a
la fase estacionaria.

2. Por qu la cromatografa en capa fina es una cromatografa de adsorcin?

La cromatografa en capa fina es una cromatografa de adsorcin puesto que utiliza sustancias
adsorbentes como fase estacionaria. Estas sustancias suelen ser por lo general gel de slice
SiO2 y almina Al2O3 ambos de carcter polar. El gel de slice se utiliza para separar sustancias
algo polares o polares como alcoholes, cidos carboxlicos o aminas; en cambio, la almina
anhidra es ms activo y se utiliza para separar compuestos relativamente apolares

3. Cul es la diferencia entre la adsorcin y absorcin?

La absorcin implica el paso de una sustancia, inicialmente en suspensin, a la parte interna

del material absorbente. Por ejemplo: el agua en una esponja. En cambio la adsorcin es
diferente en el sentido de que el material removido se adhiere fsicamente o qumicamente a
la superficie del material adsorbente, sin penetrar en su estructura fsica.

4. Por qu la cromatografa en papel es una cromatografa de reparto o particin?

La cromatografa de reparto o particin es donde la fase estacionaria es un lquido impregnado

sobre un slido inerte, en el caso de la cromatografa en papel, la humedad del aire se
impregna en el papel filtro, de esta manera la fase estacionaria lo constituye el agua de la
humedad

5. Seale los pasos a seguir para preparar una cromatografa en columna

Cromatografa en columna
A. Preparacin del soporte y fase estacionaria.
Equilibrado de la columna.
B. Aplicacin de la muestra.
C. Elucin:
a) Lavado de componentes no retenidos.
b) Liberacin, desplazamiento o elucin propiamente dicha de los componentes
retenidos.
D. Recoleccin de fracciones o anlisis del efluente en continuo.
E. Anlisis, cuantificacin o revelado.
F. Regeneracin de la fase estacionaria G.
 6. Existe alguna relacin entre la cromatografa en columna y la cromatografa a escala
preparativa?

Bsicamente se aplica el mismo mtodo salvo que la cromatografa a escala preparativa se

aplica en columnas muy grandes ya que el objetivo principal es aislar grandes cantidades de
sustancias

7. El vapor de yodo es un revelador fsico o qumico?

El vapor de yodo es un revelador fsico que colorea las sustancias incoloras para que puedan
ser visibles en la cromatografa. Por ejemplo si en una cromatografa de capa fina tenemos dos
sustancias que han recorrido una distancia y no pueden ser vistas por que son incoloras (como
la acetanilida) usamos vapor de yodo para que queden reveladas

8. La luz ultravioleta de 254 nm es un revelador fsico o qumico Cmo actua frente a las
sustancias incoloras?

La luz ultravioleta es un revelador fsico que permite visualizar las sustancias incoloras en una
cromatografa. Por ejemplo en una cromatografa de capa fina con slica como fase
estacionaria, los rayos UV emitidos son reflejados por la sustancia, mientras que la slica
adsorbe estos rayos con longitud de onda de 254 nm, este es el motivo de su uso como
revelador

9. Qu funcin cumplen los adsorbentes y reveladores en un sistema cromatogrfico?

Los adsorbentes cumplen la funcin de separar las sustancias de la fase mvil para ello debe
interaccionar con las sustancias con las que trabajamos pero sin reaccionar con ellas y
tampoco actuar como catalizador. Por otro lado los reveladores tato qumicos, como el vapor
de yodo o los fsicos como la luz UV de 254 nm cumplen la funcin de hacer visibles las
sustancias incoloras despus de hacer la cromatografa

10. Qu es el Rf y en qu tipo de cromatografa se utiliza?

La relacin entre las distancias recorridas por el soluto y por el disolvente desde el origen de la
placa se conoce como Rf, y tiene un valor constante para cada compuesto en unas condiciones
cromatogrficas determinadas (adsorbente, disolvente, tamao de la cubeta, temperatura,
etc.). Este parmetro se utiliza en la cromatografa de capa fina y se calcula: Rf = distancia
recorrida por el compuesto / distancia recorrida por el disolvente
 11. Presente las figuras correspondientes de los tipos de cromatografa desarrolladas en el
laboratorio

Cromatografa en capa de Cromatografa en columna

Cromatografa en capa fina sustancias incoloras (revelador
luz ultravioleta de 254 nm)

Cromatografa en papel

12. Presente una serie eluotropica de solventes y adsorbentes utilizados en el anlisis

cromatografa de capa fina y columna

ter etlico
Benceno
Diclorometano Almidn
Cloroformo Carbonato
Polaridad Polaridad
Acetona de calcio
creciente creciente
Etanol Almina
Agua xido de
cido actico zinc

13. En qu consiste la cromatografa de intercambio inico y que aplicaciones tiene?

Se basa en el uso de resinas de intercambio inico. Cuando una muestra inica atraviesa estas
columnas, los iones presentes se separan debido a las diferentes retenciones que sufren al
interactuar con la fase fija de las columnas analticas. Una vez separada, la muestra pasa a
travs de un detector (conductimtrico, amperomtrico, UV...) donde se registra la seal
obtenida respecto al tiempo de retencin. El resultado son unos cromatogramas donde la
posicin de los mximos nos indica el in presente (carcter cualitativo) y su rea nos indica
que cantidad existente de dicho in (carcter cuantitativo). Aguas de consumo, aguas
minerales, bebidas, productos crnicos, productos vegetales, alimentacin infantil

14. Explique en que se fundamenta la cromatografa liquida de alta eficacia High

Performance Liquid Chormatography, HPLC

La cromatografa liquida de alta eficacia es aquella donde la fase mvil es un lquido que fluye
a travs de una columna que contiene a la fase fija. La separacin cromatogrfica en HPLC es
el resultado de las interacciones especficas entre las molculas de la muestra en ambas fases,
mvil y estacionaria. La HPLC es capaz de separar macromolculas y especies inicas,
productos naturales lbiles, materiales polimricos y una gran variedad de otros grupos
polifuncionales de alto peso molecular. Con una fase mvil lquida interactiva, otro parmetro
se encuentra disponible para la selectividad, en adicin a una fase estacionaria activa.

La HPLC ofrece una mayor variedad de fases estacionarias, lo que permite una mayor gama
de estas interacciones selectivas y ms posibilidades para la separacin.

15. En qu consiste la cromatografa bidimensional?

Es empleada para separar mezclas complejas, en este caso para aminocidos. Esta tcnica, se
realiza un cromatograma donde la muestra se aplica en una esquina de una hoja de papel de
filtro y que el cromatograma se corre en forma paralela a uno de los bordes del papel. Luego
de que el cromatograma est completo y el papel se sec, la hoja se rota 90 y se realiza una
cromatografa paralele al segundo borde utilizando otro sistema de disolventes. Dado que
cada compuesto migra a velocidad caracterstica en un sistema de disolventes determinado, la
segunda cromatografa debera incrementar en grado sustancial la separacin de la mezcla en
sus componentes.

16. En qu consiste la electroforesis?

La electroforesis es un mtodo de separacin basado en el movimiento de partculas por

accin de un campo elctrico. Cuando se aplica un campo elctrico a una partcula aparece una
fuerza sobre esta que es directamente a su carga o potencial de superficie. Es as que si se
aplica un campo elctrico a una matriz que contiene una mezcla de macromolculas que
tienen diferente carga o potencial de superficie durante un cierto tiempo, al retirar este campo
elctrico tendremos diferentes distancias recorridas para cada partcula

17. En el anlisis cromatogrfico A qu se refiere la expresin: adsorcin-desorcin?

En la cromatografa mientras ms fuerte se adhiera la sustancia a la fase mvil ms eficiente

ser el aislamiento de las sustancias, para ello los trminos de adsorcin y resorcin son
importantes; es as que cuanto mayor sea la tasa de adsorcin y menor la de desorcin, mayor
ser la fraccin de la superficie disponible que ser cubierta por material adsorbido en el
equilibrio.
Cromatografa en capa fina [Disponible en lnea]. Espaa: Universidad autnoma de Madrid
[citado el 8 de octubre del 2014]. Disponible en:
https://www.uam.es/docencia/jppid/documentos/practicas/actuales/guion-p6.pdf

Bioqumica-electroforesis [Disponible en lnea]. Argentina: Universidad Nacional de Rosario

[citado el 8 de octubre del 2014]. Disponible en:
http://www.fbioyf.unr.edu.ar/evirtual/pluginfile.php/6798/mod_resource/content/0/Electrof
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Tcnicas cromatogrficas. [Disponible en lnea] [citado el 8 de octubre del 2014]. Disponible

en:http://www4.ujaen.es/~mjayora/docencia_archivos/Quimica%20analitica%20ambiental/Te
ma6.pdf

Carrera N. Ozores M. Cromatografa [Pagina web]. Espaa: Laboratorios de Tcnicas

Instrumentales UVA [citado el 8 de octubre del 2014]. Disponible en:
http://laboratoriotecnicasinstrumentales.es/cromatografa