Ctedra de Farmacognosia y Medicina Tradicional UNMSM | 2017

MARCHAS ANALTICAS, SEPARACIN Y PURIFICAION DE CONSTITUYENTES

QUMICOS EN Origanum vulgare organo
ANALYTICAL MARKS, SEPARATION AND PURIFICATION OF CHEMICAL
CONSTITUENTS IN Origanum vulgare "organo"
2 4
Acua Leiva R.1; Cndor Pariona M. ; Huillcahuaman Delgado G.3* Mendizbal Rojas J.
Laboratorio de la Ctedra de Farmacognosia y Medicina Tradicional, Facultad de Farmacia y
Bioqumica, UNMSM
Docente asesor: Gorriti Gutirrez A.5

RESUMEN
Se han desarrollo numerosos mtodos para la deteccin preliminar de los
constituyentes qumicos basados en la extraccin de stos, con solventes apropiados
y en la aplicacin de prueba de coloracin denominada comnmente como la marcha
fitoqumica.
De acuerdo a la OMS la evaluacin fitoqumica consta de aspectos como: seleccin,
manejo de drogas vegetales, calidad, eficacia y seguridad del producto final.
El propsito del presente trabajo fue determinar los metabolitos secundarios en la
especie vegetal aplicando tcnicas de extraccin: marcha fitoqumica preliminar.

Palabras clave: marcha fitoqumica, Origanum vulgare, constituyente qumicos

ABSTRACT

Developing have been numerous methods for preliminary screening of the appropriate
chemical extraction with solvent-based constituents and in the application of so-called
staining test commonly as the March phytochemistry.

According to who assessment phytochemical consists of aspects such as: selection,

management of vegetable drugs, quality, efficacy and safety of the final product.

The purpose of the present work was to determine the secondary metabolites in the
plant species by applying techniques of extraction: March preliminary phytochemical.

Key words: March phytochemistry, Origanum vulgare, constituent chemical

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1,2,3,4
Alumno de la E.A.P. Farmacia y Bioqumica UNMSM *Correo de correspondencia:gloria.huillcahuaman@gmail.com
5 Profesor principal de la E.A.P. Farmacia y Bioqumica UNMSM

I.-INTRODUCCIN Las pruebas fitoqumicas preliminares son

Los fitoqumicos son los qumicos que se
presentan naturalmente en las plantas.
Hoy en da, estos Fitoqumicos se
vuelven ms populares debido a sus
incontables usos medicinales.1
Para determinar la composicin qumica
de las plantas medicinales y conocer sus
constituyentes biolgicamente activos
puede seguirse metodologas que van
desde un anlisis fitoqumico preliminar
hasta estudios qumicos sistemticos
bioguiados.
Puesto que este ltimo tipo de estudio
requiere una inversin considerable de
tiempo y recursos, lo ideal es iniciar con
estudios fitoqumicos preliminares que
permitan hacer una discriminacin de las
plantas a estudiar en trminos de su
composicin qumica, con el fin de
seleccionar nicamente aquellas ms
interesantes para posteriores estudios
sistemticos.
El objetivo de un estudio fitoqumico
preliminar es determinar la presencia o
ausencia de los principales grupos de
metabolitos en una especie vegetal, a
saber: alcaloides, antraquinonas y
naftoquinonas, esteroides y triterpenos,
flavonoides, taninos, saponinas,
cumarinas, lactonas terpnicas
cardiotnicos.
Dado que cada uno de estos grupos de
compuestos est relacionado con
actividades biolgicas especficas,
partiendo de los resultados obtenidos en
el estudio fitoqu- mico preliminar es
posible orientar investigaciones
posteriores para determinar la actividad
biolgica de las especies en cuestin y
los principios activos involucrados.2
realizadas para determinar diferentes
grupos qumicos presentes en los
extractos.3
Test para alcaloides:
a. Mayer
b. Wagner
Test para aminocidos:
a. Ninhidrina
Test para carbohidratos:
a. Molish
b. Benedict
Test para Glicosidos:
a. Borntragers
b. Legals
Test para compuestos fenolicos y taninos:
a. FeCl3
b. Gelatina
Test para fitoesteroles:
a. Libermann-Burchard
Test para proteinas:
a. Millon
b. Biuret
Test para saponinas
Test para antocianinas
Son algunos de los test para la marcha
fitoqumica.3
El presente artculo tiene como objetivo
conocer la importancia del analisis
y fitoquimico, conocer los procesos para
realizar el anlisis fitoquimico y el
reconocimiento de los constituyentes
qumicos presentes en la especie vegetal.

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II.- MATERIALES Y MTODOS Tabla N1: Reactivo para observar

2.1.-Material y equipos presencia de aminocidos
Beaker (50 ml, 150ml, 400ml) AMINOACIDOS
Pipetas de 1ml, 5ml Reaccin Procediendo Reaccin positiva
Pipetas Pasteur Ninhidrina 0.5ml de M.P. Coloracin violeta
Micro pipetas +III gotas de
Tubos de ensayo reactivo de
Ninhidrina
Bagueta
Balanza Tabla N2: Reactivos para observar
Bao mara presencia de carbohidratos
CARBOHIDRATOS
2.2.-Reactivos Reaccin Procediendo Reaccin positiva
Molish Molish 0.5ml de M.P. +V
Antrona gotas de reactivo Anillo violeta en
de Molish A + V interface
Fehling gotas de reactivo
FeCl3 de Molish B
Gelatina Antrona 0.5ml de M.P. +V Anillo verde azulado
gotas de reactivo en interfase
Shidona de antrona
Rosenheim
Bomtrager Tabla N3: Reactivos para observar
Lieberman-Burchardat presencia de flavonoides
Ninhidrina FLAVONOIDES
Reaccin Procediendo Reaccin positiva
Dragenddorff 0.5ml de M.P. +III Coloracin verde
Mayer FeCl3 gotas de reactivo
Bertrand FeCl3
0.5ml de M.P.
Sonnenschein Shinoda +mg de magnesio Coloracin rojo
Vainillin-Sulfrico metlico + III salmn
Magnesio metlico gotas de HCl cc
0.5ml de M.P. +III
Agua destilada
Rosenhein gotas de reactivo Precipitado rojo
de Rosenhein pardo
2.3.-Material biolgico
Hojas de Origanum vulgare
"oregano" Tabla N4: Reactivos para observar
presencia de estoroides y triterponoides
2.4.-Lugar de ejecucin
Laboratorio de la Ctedra de PRUEBA DE LIEBERMAN-BURCHARDAT
Farmacognosia y Medicina Reaccin Procediendo Reaccin
Tradicional, Facultad de Farmacia y positiva
Bioqumica, UNMSM 0.5ml de M.P.
Esteroides +x gotas de Coloracin verde
reactivo de o azulada
2.5.-Metodolga
Lieberman-
Las marchas analticas, se realizaron con el BurchardatA Coloracin pardo
Triterponoides anaranjao
filtrado extrado por el mtodo de decoccin + X gotas de
y se utilizaron mltiples reactivos para anhdrido
observar la presencia o usencia de actico y
constituyentes qumicos (ver tablas del 1- hotas de
11) H2SO4

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Tabla N5: Reactivos para observar

presencia de alcaloides Tabla N10: Reactivo para observar
ALCALOIDES presencia de glucsidos
Reaccin Procediendo Reaccin
positiva GLICSIDOS
0.5ml de M.P. +III Reaccin Procediendo Reaccin
Dragendorff gotas de reactivo de Precipitado positiva
Dragendorff naranja 0.5ml de M.P. +V
0.5ml de M.P. +III Vainillin- gotas de reactivo
Mayer gotas de reactivo de Precipitado sulfrico de Vainillin- Anillo violceo
Mayer blanco sulfrico A + V en la interface
0.5ml de M.P. +III Precipitado gotas de reactivo
Bertrand gotas de reactivo de blanco de Vainillin-
Bertrand lechoso sulfrico B
0.5ml de M.P. +III
Sonnenschein gotas de reactivo de Precipitado
Sonnenschein verde azulado Tabla N11: Reactivo para observar
presencia de azucares reductores
Tabla N6: Reactivos para observar
presencia de taninos AZCARES REDUCTORES
TANINOS Reaccin Procediendo Reaccin
Reaccin Procediendo Reaccin positiva
positiva Fehling 0.5ml de M.P. +V
FeCl3 0.5ml de M.P. +III Coloracin azul gotas de reactivo Precipitado rojo
gotas de reactivo de Fehling A + V ladrillo
FeCl3 gotas de reactivo
Gelatina 00.5ml de M.P. +III Precipitado de Fehling B
gotas de reactivo de blanco lechoso
gelatina

Tabla N7: Reactivo para observar III.- RESULTADOS

presencia de antraquinonas -Se observ una reaccin positiva para presencia
de carbohidratos, taninos, antraquinonas,
ANTRAQUINONAS flavonoides y alcaloides. (ver tablas 12-22)
Bomtrager 0.5ml de M.P. Coloracin
+III gotas de rojiza
reactivo de
Tabla N12: Resultados para la presencia
Bromtager de aminocidos
AMINOACIDOS
Tabla N8: Reactivos para observar Reaccin Caractersticas Resultado
presencia de antocininas
ANTOCIANINAS Ninhidrina Marrn claro NEGATIVO
Reaccin Procediendo Reaccin
positiva
Rosenhein 0.5ml de M.P. +III Tabla N13: Resultados para la presencia
gotas de reactivo Precipitado de carbohidratos
Rosenhein rojo pardo
Hidroxilamina 00.5ml de M.P. +III
gotas de reactivo Precipitado
CARBOHIDRATOS
Reaccin Caractersticas Resultado
de hidroxilamina rojiza
Molish Marrn claro NEGATIVO
Tabla N9: Reactivo para observar
presencia de saponinas
Antrona Anillo Verde POSITIVO
SAPONINAS
Reaccin Procediendo Reaccin
positiva
Saponina 0.5ml de M.P. + gotas de Espuma por
agua destilada, agitar ms de 1 min.

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Tabla N14: Resultados para la presencia Tabla N20: Resultados para la presencia
de flavonoides de saponinas
FLAVONOIDES
Reaccin Caractersticas Resultado
SAPONINAS
Reaccin Caractersticas Resultado
FeCl3 Coloracin verde POSITIVO
Shinoda Marrn claro NEGATIVO Saponina Marrn claro . NEGATIVO
Rosenhein Precipitado rojo POSITIVO
pardo
Tabla N21: Resultados para la presencia
Tabla N15: Resultados para la presencia de glucsidos
de esteroides y triterponoides GLICSIDOS
PRUEBA DE LIEBERMAN-BURCHARDAT Reaccin Caractersticas Resultado
Reaccin Caractersticas Resultado Vainillin-
Esteroides sulfrico Marrn claro . NEGATIVO
Marrn claro NEGATIVO
Triterponoides NEGATIVO
Tabla N22: Resultados para la presencia
Tabla N16: Resultados para la presencia de glucsidos azucares reductores
de alcaloides
ALCALOIDES
Reaccin Caractersticas Resultado
Dragendorff Precipitado POSITIVO AZCARES REDUCTORES
naranja Reaccin Caractersticas Resultado
Mayer Marrn claro NEGATIVO
Bertrand Marrn claro NEGATIVO Fehling azul verduzco NEGATIVO
Sonnenschein Precipitado verde POSITIVO
azulado
3.1 Coloracin de las reacciones positivas para
Tabla N17: Resultados para la presencia presencia de carbohidratos, taninos,
de taninos antraquinonas, flavonoides y alcaloides (ver
TANINOS figura 1)
Reaccin Caractersticas Resultado
FeCl3 Coloracin azul verde POSITIVO a b c
Gelatina Marrn claro NEGATIVO

Tabla N18: Resultados para la presencia

de antraquinonas
ANTRAQUINONAS
Reaccin Caractersticas Resultado
Bomtrager Coloracin rojiza POSITIVO

Tabla N19: Resultados para la presencia

de antraquinonas antocianinas d
ANTOCIANINAS
Reaccin Caractersticas Resultado
Rosenhein Precipitado pardo POSITIVO
rojo
Fig.1. (a) Prueba de FeCl3. (b) Prueba de
Hidroxilamina Marrn claro NEGATIVO Dragendorff. (c) Prueba Bontrager

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IV.- DISCUSION
El tamizaje fitoqumico es una de las
etapas iniciales de la investigacin
fitoqumica, permite la determinacin
cualitativa de los principales grupos
de constituyentes qumicos presentes
en una planta, y a partir de all,
orientar el fraccionamiento de los
extractos para el aislamiento de los
grupos de mayor inters. Si bien
estos resultados constituyen solo una
orientacin deben interpretarse en
conjunto con el screening
farmacolgico. 4 Journal of Pharmacognosy and
En el presente estudio se obtuvo el
extracto de Origanum vulgare,
realizando posteriormente el
screning fitoqumico donde se
observaron resultados positivos para
la presencia de carbohidratos,
taninos, antraquinonas, alcaloides y
compuestos fenlicos.
Segn un estudio Origanum vulgare
presenta compuestos fenlicos con
actividad antioxidante,
antimicrobiana, antiparsita y tecnologa
estrognica, como el carvacrol y
timol.5 El timol es utilizado por va oral
en el tratamiento de la bronquitis, tos
ferina, dolor de garganta, diarrea,
dispepsia, gastritis, desrdenes de la
piel, desinfectante urinario y
antihelmntico.6
De igual forma, en cuanto a la
obtencin de alcaloides y flavonoides
(como apigenina y la luteolina), esto
coincide con el estudio de Esquivel et
al. quien seala que presentan
efecto contra E. coli y Lactobacillus
casei.7
La presencia de antraquinonas en
Origanum vulgare no presenta alguna
fuente de referencia, sin embargo se
seala que son el grupo ms
numeroso de quinonas naturales y
son la base de una importante
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cantidad de colorantes.8
V.- CONCLUSIONES
VI.- REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
1. Sahira Banu, L. Cathrine, General
Techniques Involved in
Phytochemical Analysis, IJARCS.
2015 april; 2(4): pp 25-32
2. Vikrant A., Narender T.,C.P.
Kashyap,Preliminary
Phytochemical Analysis of the
Extracts of Psidium Leaves,
Phytochemistry. 2002 may: 1(1):
pp 1-5
3. Carvajal Rojas Lyndon, Hata Uribe
Yoshie, Sierra Martnez Noralba,
Rueda Nio Diana. ANLISIS
FITOQUMICO PRELIMINAR DE
HOJAS, TALLOS Y SEMILLAS DE
CUPAT (Strychnos schultesiana
Krukoff). Colomb.2009 Dec: 12( 1
): pp 161-170.
4. Sharapin N. Fundamentos de
de productos
fitoteraputicos. Bogot: rea de
Ciencia y Tecnologa del Convenio
ndres Bello & Red
Iberoamericana de Productos
Fitofarmacuticos (RIPROFITO)
del Subprograma X del CYTED;
2000. Pg. 198
5. Chamba Guevara F.
Establecimiento de un proceso de
obtencin y caracterizacin de
flavonoides presentes en organo,
Origanum vulgare . [Tesis para
obtener el ttulo de Ingeniera
Qumica]. Quito: Universidad
Central de Ecuador, Facultad de
Ingeniera Qumica; 2016.Pg. 12
6. Acevedo D, Navarro M, Monroy L.
Composicin Qumica del Aceite
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Esencial de Hojas de Organo

(Origanum vulgare). Inf. tecnol.
2013; 24(4): 43-48
7. Esquivel P, Pedroza G, Sandoval
N, Mata R, Mendoza L, Balderas
I. Ensayo qumico dirigido y
estudio del efecto antimicrobiano
in vitro de algunos condimentos
empleados en la cocina
mexicana. Nuevo Len: UANL,
Facultad de Ciencias Qumicas;
2010.
8. Lock O. Colorantes Naturales.
Lima: Fondo Editorial de la
PUCP; 1997. Pg. 144

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