PROBLEMAS DE CINETICA ENZIMATICA.

1. Una enzima cataliza una reaccin con una velocidad mxima de 5 moles por
minuto, siendo su Km para el sustrato de 0,5 mM. Si la ponemos en presencia de
una concentracin 500 mM de sustrato, Qu cantidad de sustrato se lograr
transformar en 10 min? Sol.: 50 moles
2. La Km de una hexoquinasa para la glucosa es 10-4 M. Si la concentracin de
glucosa en el medio de reaccin es 1,8 g/ml, cul ser la relacin [E]/[ES]? (Pm
glucosa= 180). Sol.: 10.
3. La Km para el etanol del alcohol deshidrogenasa de levadura es de 1,3 x 10-2
M. Si la concentracin de alcohol en el medio de reaccin es de 59,8 g/ml, qu
proporcin de enzima estar libre y qu proporcin estar combinada con el
sustrato? (Pm etanol= 46). Sol.: [ES]= 9,1%; [E]= 90,9%
4. Calcular qu velocidad se obtendr en una reaccin enzimtica si la velocidad
mxima es igual a 100 y la concentracin de sustrato es igual: a) 10 Km y b) Km/3.
Sol.: a) v= 90,9; b) v= 25
5. Calcular qu concentracin de sustrato, expresada en funcin de la Km, nos
dar una velocidad de reaccin enzimtica igual al 60% de la velocidad mxima.
Sol.: [S]= 1,5 Km.
6. Calcular la relacin entre la concentracin de sustrato necesaria para una
velocidad 90% de la velocidad mxima y la requerida para una velocidad 10% de
la velocidad mxima, es decir [S]90/[S]10, para una enzima cuya cintica de
saturacin sigue una hiprbola. Sol.: [S]90/[S]10= 81.
7. Una enzima cuya Km= 2,4 x 10-4 M se ensaya con las siguientes
concentraciones de sustrato:
a) 2 x 10-7 M
b) 6,3 x 10-5 M
c) 10-4 M.
La velocidad medida en la reaccin con 5 x 10-2 M de sustrato fue de 0,128
moles/min. Calcular las velocidades iniciales en los otros casos. Sol.: a) 0,107
moles/min; b) 26,61 moles/min; c) 27,6 moles/min.
8. Una enzima cataliza una reaccin a una velocidad de 35 moles/min cuando la
concentracin de sustrato es 0,01 M. La Km para el sustrato es 2 x 10-5 M. Cul
ser la velocidad inicial a las concentraciones de sustrato:
a) 3,5 x 10-3 M
b) 4 x 10-4 M
c) 2 x 10-4 M
d) 2 x 10-6 M
e) 1,2 x 10-6 M
Sol.: a) 34,8 moles/min; b) 33,3 moles/min; c) 31,8 moles/min; d) 3,18
moles/min; e) 1,98 moles/min.
9. A partir de los siguientes datos obtenidos para una reaccin catalizada
enzimticamente, calcular grficamente la Km y la Vmax de dicha enzima
Sustrato (mM) Velocidad
(moles/min)
0,5 1
1 1,67
1,5 2,4
2 2,5
2,5 2,78
3 3

Sol.: Km= 2 mM; Vmax= 5 moles/min

10. 25 l de una preparacin enzimtica se llevan a ensayo a un volumen de
reaccin estndar de 1 ml y a temperatura y pH ptimos, pero con distintas
concentraciones iniciales de sustrato, obtenindose las velocidades iniciales que
se indican:
Sustrato (mM) Velocidad (nmol/min) -3 303 x10 120,0 149 x10-3 98,0 128 x 10-3
92,6 100 x10-3 83,3 -3 80 x 10 74,6
a) Determnese la Km de la enzima y la velocidad mxima que se puede conseguir
con la concentracin de enzima utilizada. b) Qu cantidad de enzima, expresada
como U/ml, contiene nuestra preparacin enzimtica? Sol.: a) Km= 0,083 mM y
Vmax= 153,8 nmoles/min; b) 6,152 U/ml.
11. La descarboxilacin enzimtica de un -cetocido procede con las velocidades
iniciales para las concentraciones que se citan: [cetocido] (mM) Velocidad
(moles CO2/2 min) 2,500 0,588 1,000 0,500 0,714 0,417 0,526 0,370 0,250 0,252
A partir de estos datos calcular Vmx y Km de esta reaccin enzimtica. Sol.:
Vmx= 0,35 moles/min; Km= 0,4 mM.
12. Un sustrato fue hidrolizado por una enzima y la velocidad inicial de
desaparicin fue medida para distintas concentraciones del mismo. Calcular la Km
y la Vmx a partir de los datos que se resumen a continuacin: Sustrato (mM)
Velocidad (moles/min) 2,3 0,95 3,0 1,13 4,5 1,42 12,0 2,14 38,0 2,64 Sol.: Km= 5
mM; Vmx= 3 mol/min.
13. A partir de los siguientes valores determinar grficamente Km y Vmx para
una reaccin enzimtica: Sustrato (mM) Velocidad (moles P/2 min) 5,000 0,392
2,000 0,330 1,420 0,278 1,052 0,246 0,500 0,170 Sol.: Km= 1 mM; Vmx= 0,48
moles/2 min
14. Qu informacin puede obtenerse a partir de una representacin de
LineweaverBurk cuando la recta obtenida, convenientemente extrapolada, corta al
eje de abscisas en -40 litros/mol? Sol.: Km= 25 mM
15. Qu informacin puede obtenerse de una representacin de Lineweaver-Burk
sabiendo que cuando (1/[S]) x 10-2= 2,5 M-1, 1/v=0. Sol.: Km= 4 mM.
16. Al representar por el mtodo de Lineawer-Burk una cintica enzimtica se
obtienen una recta que corta al eje de ordenadas en 1/v= 3 x 105 min/mol. Qu
informacin podra obtenerse de este dato? Sol.: Vmax= 3,33 moles/min
17. Calcular la Km y Vmax de una enzima sabiendo que la recta obtenida en una
representacin de Lineweaver-Burk corta al eje de ordenadas en 5 x 103
(moles/min)-1, y que la pendiente de dicha recta es 120 min/litro Sol.: Km= 24 mM;
Vmax= 2 x 10-4 moles/min.
18. A partir de una representacin de Lineweaver-Burk para una reaccin
enzimtica cuya recta corta al eje de ordenadas en 1/v= 25 h/mol y extrapolando
al eje de abcisas en 1/[S]= -1,3 x 102 (moles/l)-1, calcular Vmx y la Km. Sol.:
Vmx= 4 x 10-2 moles/h; Km= 7,69 mM.
19. Al representar por el mtodo Lineweaver-Burk los datos obtenidos con una
determinada enzima se encontr que las rectas cortaban los ejes de coordenadas
en los puntos indicados a continuacin: Sin inhibidor Con inhibidor (1mM) -1 Corte
0Y (mol/min) 0,2 0,2 -1 Corte 0X (mM) -2,0 -0,5 Se pide: a) Calcular la Vmax y
Km de dicha enzima en ausencia y presencia de inhibidor; b) De que tipo de
inhibidor se trata?; c) En ausencia de inhibidor y con una concentracin inicial de
sustrato de 0,1 M Qu cantidad de sustrato se habr consumido al cabo de 4
minutos de reaccin? Sol.: Vmax= 5 moles/min; Km= 0,5 mM; Km'= 2 mM; b)
Inhibicin competitiva; c) 19,9 moles.

20. Una reaccin enzimtica se lleva a cabo a diferentes concentraciones de

sustrato, en ausencia y presencia de dos inhibidores diferentes: (Ia)=(Ib)= 1.5 mM.
La siguiente tabla muestra los datos obtenidos: Sustrato (mM) v (moles/min) va
(moles/min) vb (moles/min) 0.2 1.67 0.625 0.83 0.4 2.86 1.176 1.43 0.8 4.44
2.110 2.22 1.6 6.15 3.480 3.08 3.2 7.62 5.160 3.81 Se pide: a) Determinar todos
los parmetros cinticos de la enzima. b) Qu tipo de inhibidores son Ia e Ib?
Sol.: a) Km=Km'b= 1mM; Km'a= 3 mM; Vmax= Vmax'a = 10 moles/min; Vmax'b =
5 moles/min; Kia = 0.75 mM; Kib = 1.5 mM. b) el inhibidor "a" es competitivo,
mientras que el "b" es no competitivo.
21. Una reaccin enzimtica se lleva a cabo con distintas concentraciones de
sustrato, en ausencia y presencia de un inhibidor. Los datos obtenidos se
representan en unos ejes de coordenadas segn el mtodo de Lineweaver y Burk.
Las rectas obtenidas cortan a los ejes de coordenadas en los siguientes puntos,
en ausencia y presencia de inhibidor, respectivamente, corte en abscisas (mM-1) =
-3,7 y -0,2 y corte en ordenadas (moles/min)-1 = 0,01 y 0,01. a) De qu tipo de
inhibicin se trata? b) Calcular la Km y Vmax en ausencia y presencia de inhibidor
c) Determinar la concentracin de inhibidor sabiendo que Ki = 2,6 10-1 mM Sol.: a)
Inhibicin competitiva; b) Km= 0,27 mM; Km'= 5 mM; Vmax= Vmax'= 100
moles/min; c) [I]= 4,55 mM
22. Al representar por el mtodo de Lineweaver y Burk los resultados obtenidos en
tres experimentos, al emplear una misma cantidad de enzima y sustrato, en las
condiciones que se explican en la tabla adjunta, se encontraron los puntos de
corte con los ejes indicados en la tabla: Sin adiciones + 5 mM A + ? mM B -1 Corte
OY (moles/min) 0,5 0,5 0,8 Corte OX (mM)-1 - 5,0 -2,5 -5,0 Se pide: a) Calcular
Vmax y Km en ausencia y presencia de A. Qu efecto produce este compuesto
sobre la actividad enzimtica? b) Idem que en "a" pero en el compuesto "b". c) En
ausencia de A o B y con una concentracin inicial de sustrato de 0,2 M, calcular la
cantidad de sustrato que se habr consumido al cabo de 5 minutos de reaccin. d)
Calcular la Ki del compuesto A. e) Calcular la concentracin de B en el tercer
experimento, sabiendo que su Ki = 5 mM Sol.: a) Km = 0,2 mM; KmA = 0,4 mM;
Vmax= VmaxA = 2 moles/min; Inhibidor competitivo; b) KmB= 0,2 mM; VmaxB=
1,25 moles/min; Inhibidor no competitivo; c) 10 moles, d) 5 mM; e) 3 mM
23. Al representar por el mtodo de los dobles inversos la cintica de la enzima
fosfatasa alcalina (en una resuspensin de 8 g/ml) y en presencia de p-nitrofenil
fosfato, se obtiene una recta que corta al eje de ordenadas en 1/300 min/M, y
una pendiente de 0,05 min. Calcular: a) Vmax; b) Km; c) Nmero de recambio si el
Pm de esta enzima es de 80000 daltons. Por otro lado, al ensayar en presencia de
60 M de glicerol fosfato, y haciendo la misma representacin grfica, el punto de
corte con el eje de ordenadas es el mismo, mientras que la pendiente es de 0,1
min, d) De qu tipo de inhibidor se trata?; e) Calcular Km', Vmax' y Ki; f)
Determinar el grado de inhibicin en estas circunstancias si estamos en presencia
de 45 M de p-nitrofenil fosfato. Sol.: a) 300 M/min; b) Km= 15 M; c) N de
recambio= 3000 min-1; d) Inhibidor competitivo; e) Km'= 30 M, Vmax'= 300 M y
Ki= 60 M; f) 20%.
24. Al estudiar la cintica de inhibicin de cierto enzima se han obtenido los
resultados de la tabla siguiente: _Sustrato (mM) v (mol/min) - [I]= 0 [I]= 0,1 mM
[I]= 1 mM __________________________________________________________
0,02 2,90 2,52 1,18 0.05 5,00 4,02 1,43 0.10 6,67 5,02 1,54 0.20 8,13 5,72 1,60
0.50 9,09 6,25 1,64
__________________________________________________________
Determinar grficamente: a) el tipo de inhibicin; b) el valor de Km del enzima; c)
la velocidad mxima y d) el valor de Ki Sol.: a)