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FACULTAD DE CIENCIAS AMBIENTALES

ESCUELA DE INGENIERA AMBIENTAL

Cuantificacin de azcares reductores y protenas totales en


plantas sometidas a estrs
salino

Marilyn Falcon, Ximena Ramn, Daribeth Rubio, Guadalupe Vivas, Katty Carrera, Rosemary
Urbano

LIMA, PER
2017

INTRODUCCIN
La salinidad es considerada una de las causas ms importantes de estrs abitico,
limitando la produccin de los cultivos en las regiones ridas y semiridas, con un
contenido de sal en el suelo alto y precipitaciones insuficientes para su lixiviacin
(Villavicencio, 2010). Las plantas, al tratarse de seres vivos ssiles no tienen la
capacidad de huir ante la presencia del estrs salino, de modo que, ante la
incapacidad de huir y evitar espacialmente solo les quedan evitarlo o modificarse
para vivir en este medio. Las plantas adaptadas al estrs salino se llaman plantas
halfilas, mientras que se denominan glicfitas a las dems plantas que no estn
adaptadas a vivir en ambientes salinos (Boronat, 2012). Las halfitas son plantas
nativas de suelos salinos y completan su ciclo vital en estos ambientes (Ortola,
2002). En races de tomate, por ejemplo, se ha mostrado activacin de la sntesis de
protenas importantes para la gluclisis, ciclo del citrato, metabolismo de
aminocidos, biosntesis de ATP, fotosntesis, as como sntesis de protenas
relacionadas a la defensa y detoxificacin (Mana y col., 2013).
Dos de los problemas medioambientales ms importantes que influencian sobre la
productividad agrcola en el mundo son la sequa y la salinidad; se estima que un
tercio de las tierras del planeta potencialmente arables sufren por un inadecuado
suministro de agua y cerca del 10% de suelos arables son afectados negativamente
por la salinidad del suelo (Snchez et al., 2000). Aproximadamente el 20% del rea
cultivada y casi la mitad de la tierra irrigada a nivel mundial sufren los efectos de la
salinidad, generando una reduccin del crecimiento de la planta por dficit de agua,
toxicidad por iones, desbalance por iones o por combinacin de estos factores
(Sairam, R & Tyagi A, 2004). Este problema ha llevado a algunos campesinos a la
bsqueda de alternativas ms eficientes. En Cabo Verde, por ejemplo, los
agricultores han estado pasando de la caa de azcar, que consume mucha agua, a
cultivos hortcolas de gran valor, como los tomates, que se riegan por goteo. La
produccin hortcola nacional se triplic entre 1991 a 1999, con un volumen de 17
mil toneladas (FAO, 2002).
Los objetivos de la presente prctica es determinar cuantitativamente la
concentracin de azcares reductores y la concentracin de protenas totales en
plantas de tomate sometidas a estrs salino.
MATERIALES Y MTODOS
MATERIALES
Espectrofotmetro UV Visible Marca: Thermo Scientific. Modelo Genesys 10S
Una micropipeta de 100 L. AXYGEN
Una micropipeta de 1000 L. AXYGEN
Una centrfuga. Hettich. Mikro 220R
Balanza
Muestra de plantas de Tomate sometidas a estrs salino
Tubos de centrfuga
Un mortero
Embudo de plstico
Agua destilada
NaCl 0.8%
Solucin salina vegetal
Hidrxido de bario 0,1N (100 ml)
Sulfato de Zinc 0,1N (100 ml)
Reactivo enzimtico para glucosa
Reactivo enzimtico para protenas totales

MTODOS
El proyecto se llev a cabo en el invernadero de la Universidad Cientfica del Sur
entre los meses de abril y Junio. Se realiz un cultivo de plantas de tomate cherry
de la variedad Naomi ( Lycopersicon esculentum cv. Naomi F1). Se dise un
arreglo aleatorio de cinco por cinco, es decir, un control con cuatro repeticiones y
cuatro tratamientos con el mismo nmero de repeticiones. Donde los cuatro
tratamientos consistan de niveles de salinidad (NaCl) de 30mM (T1); 60mM (T2);
125mM (T3) y 250mM (T4). Interdiariamente se aadi 5 mL de las soluciones
mencionadas a las macetas correspondientes hasta el ltimo da del tratamiento.
Fuera de dichas concentraciones de sales, las plantas crecieron en condiciones
uniformes de invernadero hasta el da del anlisis.
Para la determinacin de protenas totales se cortaron hojas jvenes incluyendo el
tallo, se lavaron, se secaron y se pes 1 gr. Se colocaron en el mortero y con 10 mL
de solucin salina vegetal se tritur hasta conseguir una muestra lquida, se verti
en un tubo de centrfuga, se coloc en la centrifuga a 5000 rpm por diez minutos,
con su peso equivalente en agua destilada, como contrapeso. Se extrajo 100 L de
la muestra, se verti en un tubo de microcentrfuga y se agreg 1000 L de reactivo
enzimtico. Luego se midi la absorbancia a 505 nm en el espectrofotmetro
Thermo Scientific.
Por otro lado, para la determinacin de azcares reductores se cortaron hojas
jvenes incluyendo el tallo, se pes 1gr, se lavaron y se secaron. Se colocaron en el
mortero y con 10 mL de solucin salina vegetal se tritur hasta conseguir una
muestra lquida, se verti en un tubo de centrfuga, se coloc en la centrfuga a 3000
rpm por quince minutos, con su peso equivalente en agua destilada, como
contrapeso. Se extrajo 100 L de la muestra, se verti en un tubo de
microcentrfuga, se agreg 700 L de agua destilada y 100 L de hidrxido de bario,
se homogeneiz durante treinta segundos. Luego se agreg, 100 L de sulfato de
zinc, se agit y se dej reposar durante cinco minutos, se centrifug a 6000 rpm
durante diez minutos, se tom 100 L del sobrenadante y se coloco en tubos de
microcentrfuga, despus se agreg 1000 L de reactivo enzimtico, se dej reposar
y se midi las absorbancias a 505 nm.
Finalmente, se examin la raz de cada planta con el fin de descartar presencia de
necrosis radicular provocada por el estrs salino e hdrico al que fueron sometidas.

RESULTADOS
Como se observa en la tabla 1, existe diferencia significativa entre los elementos
evaluados (sig=0,000) a nivel de significancia de 0.05, por lo tanto se rechaza la
hiptesis nula de que no existe diferencia de concentraciones de glucosa entre
plantas sometidas a estrs salino y las del bloque control. Al utilizar la prueba de
Dunnett, (tabla 2) se encuentra evidencia suficiente para afirmar que las
concentraciones de glucosa son significativamente diferentes a la media del control.
La tabla indica que todos los tratamientos presentan significancia ya sea (sig=0,001)
o (sig=0,000). Tambin se pudo determinar que el promedio de la concentracin de
azcares de los tratamientos representa el 27% de los azcares presentes en la
media de los controles. Lo que indica que hubo una reduccin de glucosa debido al
estrs que enfrentan.
Con respecto al tratamiento para cuantificar protenas totales, al analizar las medias
del control y los tratamientos se encontr significancia estadstica (sig= 0.033) lo que
indica el rechazo de la hiptesis de nulidad, es decir, lo que indica que al menos
una de las medias de concentracin de protenas es diferente del control (C). Esto
se puede apreciar en la tabla 4, al no encontrar significancia alguna entre los
tratamientos y el control, concluyendo que todas las concentraciones son diferentes
entre s. Debido a ello, se procedi a determinar las medias tanto del control como
de cada uno de los tratamientos, de esto se destaca que el bloque que presenta una
mayor concentracin de protenas es el T2 (456.25 g/mL) seguido del T3 (455.25
g/mL), mientras que se encuentra menor concentracin en T1 (254,75 g/mL) y el
control presenta 349,25 g/mL. Se puede apreciar que existe un factor que induce a
los tratamientos destacados a aumentar sus concentraciones de protenas, lo que
en este informe se le atribuye al estrs salino.
En el caso de las races, no se encontraron casos de necrosis radicular. La raz ms
larga, registrada, present una longitud de 52cm (T1-4) con un ancho de 11cm,
mientras que la ms corta (T3-3) present 25,1cm de largo y 6,4cm de ancho.

DISCUSIN
El cultivo del tomate en reas con problemas de salinidad provoca en las plantas un
sin nmero de efectos fisiolgicos, morfolgicos y bioqumicos, tales como
disminucin de la fotosntesis (Singh y Chatrath, 2001), un menor peso de los frutos
(Del Rosario et al., 1990; Prez-Alfocea et al., 1996) y cambios cuantitativos y
cualitativos en la sntesis de protenas por cambios en la expresin de genes a
causa de la salinidad, entre otros (Singh y Chatrath, 2001).
A nivel de races, las sales alteran la absorcin de agua afectando el crecimiento de
estos rganos; tambin actan produciendo efectos txicos. La magnitud de las
respuestas de las plantas se encuentra estrechamente relacionada a la
concentracin de las sales, a la duracin del estrs a que estn expuestas y a la
especie o cultivar de que se trate. La parte area de las plantas de tomates
igualmente es afectada por la salinidad: las plantas alcanzan una menor altura, las
hojas se presentan en menor nmero y a la vez manifiestan una disminucin en su
densidad estomtica en la cara adaxial (Romero, 2001), presentan clorosis y
necrosis principalmente en los bordes de las hojas. El rea foliar tambin disminuye
(Romero, 2001; Al-Karaki, 2000). Los resultados de la concentracin de otros
trabajos cientficos demostraron que la concentracin de sales no fue afectado en
los cultivos de tomate como: en cuanto a la tolerancia a salinidad entre distintas
especies, investigaciones que evaluaron diferentes muestras especmenes de L.
peruvianum, L. pimpinellifolium y de L. esculentum empleando una solucin de
NaCl, reportaron que L. peruvianum fueron ms tolerantes a la salinidad, al
presentar stas una mejor germinacin y crecimiento de la plmula/radcula hasta
una CE de 10,2 dS/m, mientras que el resto mostraron efectos perjudiciales, y por lo
tanto una menor tolerancia, a niveles de CE superiores a 4,95 dS/m (Srinivas,
2001). Es por eso que las espcimen de L. naomy, tambin demostraron los mismos
resultados, en el crecimiento de las plantas ya que se not una insignificancia en no
ser afectado por la solucin salina.
Los resultados nulos correspondientes al porcentaje de necrosis radicular
demostraron ausencia de dicho parmetro en las muestras en cuestin, pese a que
el efecto de la salinidad est estrechamente relacionada a las condiciones de los
pelos radiculares (Cramer et al.,1985). La necrosis es una situacin irreversible que
se da cuando un determinado tejido pierde su vitalidad (Munns & Temaat, 1986); y
de manera especfica, las ms frecuentes y vulnerables, segn la especie vegetativa
son necrosis apical o marginal en lechuga y necrosis apical en el fruto de tomates
(Sonneveld & Ende, 1975). El poco tiempo de exposicin de las plantas de tomate al
medio salino, fueron, probablemente, el factor que impidi que se vieran afectadas
por la necrosis (Mesa, 2003), sobre todo considerando que la especie trabajada,
Solanum lycopercum L, es medianamente tolerante a la salinidad (Rick, 1982;
Goykovic & Saavedra, 2007), evidenciada, en este caso, respecto a los efectos de la
salinidad en las races. En un tratamiento sometido a 250mM de solucin salina, se
pudo observar necrosis apical, deduciendo que esto se puede deber al estrs salino.
Para identificar la necrosis, primeros se debe observar la clorosis en hojas (Ronen,
2000) u otros mecanismos, previos, de defensa y proteccin como reduccin de
crecimiento, aumento de protenas especficas, entre otros (Nez et al. 2007). En
los tratamientos se observ conforme pasaba el tiempo en el cual fueron tratados
con diferentes concentraciones de solucin salina, cada tratamiento, comenzando
desde el T1 hacia el T5 fueron creciendo menos que el control, y que no
presentaban necrosis.
Para el estudio, se apreci el engrosamiento de races secundarias, causadas por
altas concentraciones de sales que retienen el agua en la solucin suelo y hace
difcil la extraccin de agua por parte de las races, ocasionando la modificacin de
su propia estructura (Santamara- Cesar et al. 2004).
Los frutos se afectan adversamente en su rendimiento (Prez-Alfocea, 1996;
Grainferberg et al., 2000; Faiz-SMA et al., 1994; Carvajal et al., 2006), pero
positivamente en cuanto a algunos atributos organolpticos o de inters para la
agroindustria, puesto que presentan un mayor contenido de compuestos solubles,
slidos totales, acidez titulable y carotenoides. Esto se pudo observar en las
muestras sometidas a estrs, ya que, los controles estaban empezando a dar frutos
mientras que los tratamientos no presentaban dicha condicin.
La salinidad afecta negativamente la germinacin de las semillas de tomates, sean
estas las formas silvestres como las cultivadas. Estos efectos inciden en el
porcentaje de germinacin y el tiempo en que este proceso se lleva a cabo. A la
fecha se han detectado al interior del gnero Lycopersicon varias especies con un
grado de tolerancia a salinidad mayor que otras, incluyendo a L. esculentum, hecho
importante ya que demuestra que no slo al interior de las especies silvestres es
posible detectar germoplasma con mayor tolerancia a salinidad. Estos resultados
dan cuenta de la existencia de variabilidad gentica en tomate y por tanto de
germoplasma importante para el mejoramiento gentico a estrs salino, de modo
que los esfuerzos en identificar germoplasma resistente a este estrs son vlidos,
especialmente en aquellas especies silvestres que presentan compatibilidad
gentica con los cultivares comerciales como L. pimpinellifolium y L. pennellii (Real,
2007).

Evidentemente, para la realizacin de dichas actividades, es necesario la


participacin de las protenas (factores de transcripcin, protenas de control
osmtico y, sobre todo, enzimas que participan en la activacin de vas de
sealizacin intracelular); lo que permite suponer que el contenido de protenas
sintetizadas en una planta expuesta a la salinidad debe ser diferente al de una
planta que no se encuentra en estrs salino (Kosov, Pril y Vtmvs, 2013).
Con respecto a las protenas totales en un estudio se evaluaron el contenido de
protenas totales en plantas de tomate comercial (Lycopersicon esculentum) y de
tomate silvestre (Lycopersicon pimpinellifolium) mantenidas en diferentes niveles de
NaCl, observando que a mayores concentraciones de sal el contenido de protena
disminua. (Daz & Salas ,2007). Esto se pudo comprobar en nuestro estudio, sin
embargo, la diferencia entre el control y la muestra fue significativa y esto lo
comprobamos con estudios estadstico, adems tambin se puede comprobar que a
mayor absorbancia mayor es la concentracin de protenas en ambas casos la
muestra y el control. Se observ que en plantas de tomate en el estrs salino
generaba la acumulacin de inhibidores de protena y la activacin de la expresin
de otros genes relacionados a la reparacin de daos. Sin embargo, no se debe
dejar de pensar que tambin el reajuste fisiolgico y estructural implicara el bloqueo
de la expresin de muchos otros genes, lo que se traducira en una disminucin del
contenido de protenas, en la cual se muestra que a concentraciones mayores de
NaCl en la solucin de riego, el contenido de protenas totales disminuye en hojas,
tallos y raz, aunque a concentraciones bajas de sal se puede observar un
incremento en tallo y raz, lo que podra significar que habra una movilizacin de
protenas para mantener elevado el contenido de protenas, sobre todo en tallo.
(Dombrowsky, 2003). Por cual en los resultados de L.naomi soportaron la
concentracin salina, produciendo una mayor cantidad de protenas para poder
mantener en equilibrio el nivel de salinidad en las races, tallos y hojas que no se
observ que fueron afectados por esta concentracin.
Segn Yokoi et al., (2002), en cuanto al componente osmtico, para superar los
problemas de absorcin de agua las plantas requieren acumular solutos compatibles
a nivel de citosol y organelos sin afectar la actividad de las enzimas. Algunos de
stos son iones esenciales como el K+, pero la mayora son solutos orgnicos como
azcares simples (principalmente glucosa y fructosa), alcoholes derivados de
azcares (glicerol e inositoles metilados) y azcares complejos (trialosa, resinosa y
fructanos). Tambin se incluyen derivados de aminocidos cuaternarios (prolina,
glicina betana, -alanina betana, prolina betana), aminas terciarias (1,4,5,6-
tetrahidro-2 -metil 1-4 carboxil piramidina) y compuestos sulfnicos (o-sulfato de
colina, propironato dimetil sulfnico). Con ello las plantas logran disminuir el
potencial osmtico, hecho que facilita el movimiento del agua hacia el interior de las
clulas de las races. Lo que quiere decir que a mayor concentracin salina a la que
la planta es expuesta la concentracin de glucosa ser mayor. Sin embargo, Vazan
y Torabi (2013) estudiaron cultivos hidropnicos de dos genotipos, uno tolerante y
otro sensible a la salinidad, observando que la acumulacin de sodio fue mayor en
el genotipo sensible (lo que indicaba que estas plantas no eran capaces de
exclusin de sal) y que el estrs salino causaba una disminucin de glucosa en
races de las plantas sensibles, mientras que aument en el cultivo tolerante. En
nuestros estudios estadsticos, la concentracin de glucosa fue menor que la
salinidad. La salinidad en forma natural se encuentra ampliamente distribuida en el
globo terrqueo donde se presentan mayores cambios climticos. Es por esto que
confirmamos que existe una posible correlacin con nuestros resultados puesto que
segn Flores (1993) los lugares donde es posible encontrar suelos con problemas
son los cercanos al mar, lagunas y pantanos. De igual manera, son las regiones
semiridas las que presentan mayor nivel de salinidad debido a que la evaporacin
es mayor a las precipitaciones (Kovda, 1964).
Finalmente, se puede afirmar que el sistema utilizado para cultivar estas plantas
tiene un capacidad tampn relativamente alto siendo necesario monitorear el pH
regularmente. (Garca, 1999).

CONCLUSIN
De esta prctica se puede determinar que el tomate con el que trabajamos, es muy
resistente a los cambios que ocurren en su ambiente de desarrollo; ya que se
observa cambios en el aumento de la proteccin de protenas; ya que como se sabe
es un mecanismo para hacer frente a los cambios en el suelo, adems podemos
afirmar que debido al no constante riego de las plantas, no se pudo obtener mejores
resultados.
Asimismo las plantas estresadas no presentaron necrosis; por lo que, como ya se
dijo son bastantes resistentes.
Toda planta cuenta con un mecanismo de respuesta ante cualquier efecto adverso a
su funcionamiento o metabolismo, en muchos de los casos neutralizando el efecto y
en algunos solo reducindolo, sin embargo de una y otra forma, ya sea positiva o
negativa el intento que esta hace, siempre buscara como nica solucin un
equilibrio funcional. Por lo que las plantas de tomates han sido alteradas por el
estrs salino teniendo como sustento su incremento de cuantificacin de protena.
Una de las formas de poder apreciar los efectos de la salinidad es el crecimiento
interrumpido de la planta, ya que la fotosntesis se ve interrumpida, principalmente
en lo que llamamos el intercambio gaseoso ya que a nivel fisiolgico uno de los
mecanismos fundamentales de tolerancia al estrs por dficit hdrico es el cierre de
estomas, ya que estos son los responsables de la mayor proporcin de prdida de
agua en las plantas los estomas se cierran.

RECOMENDACIONES
Regar a las plantas con las soluciones respectivas, con las cantidades
exactas en los das programados para no tener errores en la prctica.
Tener la misma cantidad de suelo para todas las plantas de tomate puesto
que la variacin de este puede generar errores en los resultados de las
prcticas.
Regar diariamente las plantas para no generar diversos tipos de estrs
Se debe tener cuidado a la preparacin de soluciones para no reducir sus
concentracin.
El cultivo hidropnico favorece a conocer los resultados con mayor velocidad
y en tolerancia mxima de vida a que en comparacin con el cultivo
convencional este es ms rpido.

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CUESTIONARIO
1. Cul es la importancia fundamental de las protenas en el ambiente?
Las protenas juegan un papel esencial en todos los procesos biolgicos por las
distintas funciones que realizan (Navas, 2008), como la:
Funcin enzimtica: que cataliza reacciones qumicas de organismos.
Funcin estructural: que da soporte, como en las membranas celulares.
Funcin transporte: como las tubulinas dentro de la clula.
Funcin hormonal: que ayuda a coordinar las funciones del organismo.
Funcin de proteccin: como los anticuerpos que luchan contra las bacterias y
virus que ingresan al organismo.
Funcin de recepcin de informacin, como las glucoprotenas.
Funcin de movimiento, que se da en los msculos.

2. Por qu algunas plantas elevan considerablemente la concentracin de


monosacridos y disacridos dentro de cada clula en respuesta a la salinidad
en el ambiente?
En condiciones de salinidad, las plantas sintetizan osmolitos tales como azcares
(sacarosa, glucosa, trehalosa), polioles (pinitol, mioinositol, ononitol, sorbitol,
manitol), aminocidos (prolina, glicina betana) (Hasegawa et al., 2000) para
mantener el ajuste osmtico y la turgencia celular, evitar la deshidratacin celular,
estabilizar y proteger la estructura terciaria de protenas y de membranas (Rhodes
et al., 2002).
Segn Ingram y Bartels (1996) los azcares pueden ser usados como solutos en
sequa leve mediante homeostasis para de esta manera poder conservar agua. El
incremento de sntesis de sacarosa y sntesis de sacarosa-fosfato no solo est
presente en plantas halfitas sino tambin en plantas que no soportan mucha
sequedad. El azcar forma cristales para prevenir que la clula se colapse donde se
elevan las concentraciones de monosacaridos y disacaridos para servir como
proteccin a la planta.

3. Los factores ambientales afectan el metabolismo de los carbohidratos?


Los factores ambientales afectan, ya sea de manera positiva o negativa, a la planta
en el metabolismo de los carbohidratos. El CO2 es usado en el proceso de la
fotosntesis para producir compuestos orgnicos que ser usado por la planta para
su desarrollo y crecimiento.En el estudio realizado por Yepes y Buckeridge (2011)
se evaluaron los siguientes factores: temperatura, estrs hdrico y atmsfera
enriquecida por CO2 Temperatura: La temperatura es un factor que afecta
negativamente a las plantas, ya que estas tienen una temperatura ptima para
desarrollarse. Las plantas terrestres estn adaptadas a temperaturas entre 5C y
40C.Las especies tropicales y subtropicales, las temperaturas ptimas estn entre
15C y 35C. Al superar los 5C de su temperatura ptima, la planta en encuentra
en estrs por calor. Estrs Hdrico: La ausencia de agua limita el crecimiento y
desarrollo de la planta, ya que no se puede realizar correctamente la fotosntesis,
impidiendo la produccin de polisacridos. Atmsfera Enriquecida por CO2 : es
beneficioso para la planta, ya que presentan mayores tasas de asimilacin de CO2 y
mayor produccin de almidn.

4. Cal es la relacin entre las lectinas y los carbohidratos?


Las lectinas son protenas que se enlazan a los carbohidratos sin modificarlas
(Garca y Hernndez 1999).
Los carbohidratos han evolucionado para servir como etiquetas de identidad celular.
Son las lectinas la que estn especializadas para descifrar la informacin
transportada por las molculas de carbono, complementando la superficie donde los
enlaces pueden encajar de manera especfica y fuerte. Las lectinas presente en las
plantas han sido usadas para la purificacin y caracterizacin de los
glicoconjugados (Bhattacharyya y Brewer 1988).
Se han encontrado lectinas presentes en plantas que son usadas para purificar la
caracterizacin de los glucoconjugados.
Las lectinas vegetales se caracterizan por reconocer especficamente carbohidratos
por enlaces tipo puente de hidrgeno, iones, interacciones hidrfobicas entre otras.
Las lectinas presentan una baja afinidad hacia las estructuras oligosacardicas que
reconocen, debido a esta caracterstica se les utiliza en cromatografa de afinidad
para purificar receptores celulares, donde un exceso de mono-sacrido que inhibe
su actividad hemaglutinante, permite la liberacin del receptor. Estructuralmente
existen caractersticas comunes entre las lectinas de una familia determinada, lo
que ha permitido el estudio de la interaccin lectina-carbohidrato. Las lectinas
vegetales suelen clasificarse de varias maneras, por ejemplo: la especificidad hacia
el monosacrido que inhibe su actividad hemaglutinante y hacia las estructuras
oligosacardicas que reconocen, clasificndolas en lectinas que reconocen N-
glicanos, que son oligosacridos unidos a un residuo de asparagina en las protenas
mediante una N-acetil-glucosamina y lectinas que reconocen a los O-glicanos, que
son oligosacridos unidos a un residuo de serina o treonina en las protenas
mediante una N-acetil-galactosamina (Hernndez Cruz Pedro, 2005).

5. Por qu son importantes los glucosaminoglucanos?


Los glucosaminoglucanos son cadenas de polisacridos constituidas por la
repeticin de unidades idnticas de disacridos. Los Glucosaminoglucanos tambin
llamados GAGs son los heteropolisacridos que ms abundan en el cuerpo, estas
molculas son polisacridos largos sin ramificaciones que contienen repeticiones de
disacridos, las unidades de disacridos contienen uno de dos azcares
modificadas que es el N-acetilgalactosamina (GalNAc) o el N-acetilglucosamina
(GlcNAc) son molculas negativamente cargadas con una conformacin extendida
que brinda una alta viscosidad a una solucin. Los GAGs estn ubicados en la
superficie de las clulas cuya funcin principal en la clula es la de formar el
material extracelular, muy importantes si estas clulas se encuentran formando el
tejido conjuntivo, generalmente se unen a protenas y forman los proteoglicanos que
tienen una morfologa parecida a la de una escobilla, en la que los pelillos seran los
GAGs (Michael, 1996).
Voet y Voet (2006) sealan que las disoluciones de los glucosaminoglucanos
poseen una consistencia pegajosa, mucosa que es consecuencia de su viscosidad y
su elasticidad elevadas. Est presente en tejidos conjuntivos (cartlago, tendn, piel,
paredes de vasos sanguneos), en donde sirve para brindar la elasticidad necesaria.
muchos glucosaminoglucanos estn constituidos por unidades repetitivas de un
disacrido que contiene un derivado de aminoazcar, su conformacin es no
ramificada constituidas por restos de un cido urnico y de hexosamina que se
alternan, se encuentran asociados con otras sustancias, en particular protenas y
agregados de protenas y lpidos.
6. Describa cuatro polisacridos que tengan importancia relevante en los
ecosistemas peruanos.
Los polisacridos son esenciales para los ecosistemas por su participacin en
procesos tales como el intercambio de cationes, elaboracin de mallas para la
filtracin de nutrientes durante la tensin del agua, tratamiento de aguas residuales
y en el ciclo de carbono. En el suelo los polisacridos se estabilizan unindose al
cido hmico, a los cationes de los metales pesados y a las arcillas, penetrando en
la uniones de las partculas de arcillas (Paul y Clark 1996). El Per, al ser
considerado privilegiado por su abundante diversidad de recursos que posee,
encontramos que en las regiones ridas donde la cubierta vegetal es discontinua,
los microorganismos del suelo forman lo que se conoce como costras biolgicas del
suelo (Johansen 1993, Eldridge y Green 1994); puesto que el adhesivo que
mantiene el suelo agregado lo constituyen organismos como polisacridos
pegajosos. Adems, un gran nmero de microorganismos, principalmente bacterias
y protozoarios, estn concentrados alrededor de la superficie de las races de las
plantas, estos al ser atrados a la superficie de las races gracias a los compuestos
de carbono exudados por las races vivas. Mucigel es uno de los compuestos
llamados exudados o secreciones radicales el cual es un material gelatinoso, siendo
la mezcla de polisacridos, protenas, lpidos, vitaminas, y fitohormonas que rodean
especialmente el extremo de las races (Jackson, 1993). Asimismo, la Diatomea
crece en el fondo rocoso de ros y lagos, adhirindose a travs de pednculos
ramificados, los cuales estn qumicamente compuestos por polisacridos altamente
resistentes a la descomposicin. Debido a su aspecto, las colonias se han venido a
conocer como moco de roca aunque la consistencia no es mucosa sino ms bien
esponjosa-fibrosa (Morales et al., 2012). La produccin de mucopolisacridos de las
bacterias del suelo, y en parte, por el crecimiento de hifas fngicas se debe a que
las bacterias producen mucosidades, bien como mucus extracelulares o capsulares,
o bien como mucosidades de la pared, haciendo probable que la mayor parte de los
polisacridos sean de origen bacteriano (Black, 1968). Y, finalmente la quitina el
cual es un polisacrido estructural que constituye el exoesqueleto de los artrpodos,
zooplancton marinos, formando parte de la pared celular de algunas familias de
hongos y levaduras as como en las alas y cutculas de algunas especies de
insectos (Kumar et al., 2000).
7. Por qu se elevan considerablemente las concentraciones de protenas
cuando las plantas se encuentran en estrs salinos?
El grupo 2 de protenas LEA (abundantes en la embriognesis tarda), llamados
deshidrinas, se encuentran principalmente en las plantas. Se localizan tambin en
diferentes tejidos vegetativos durante el crecimiento bajo condiciones normales, y se
acumulan sustancialmente en las clulas de todos los tejidos aunque normalmente
bajo condiciones de estrs que conducen a la deshidratacin celular se acumulan
en los tejidos vegetales deshidratados tales como en las semillas en desarrollo
durante su maduracin, o en tejidos vegetativos sometidos a un estrs ambiental
tales como la sequa, la baja temperatura y la salinidad y durante los procesos de
deshidratacin naturales que se producen durante la maduracin de la semilla. La
acumulacin de estas protenas hidroflicas es uno de los componentes importantes
de adaptacin de las plantas a condiciones ambientales severas. Las deshidrinas se
distribuyen en una amplia gama de organismos, incluyendo plantas superiores,
algas, levaduras y cianobacterias (Cano, 2001).
Muchos estudios informaron una correlacin positiva entre la acumulacin de
transcritos de deshidrina o protenas y la tolerancia a la congelacin, la sequa, y
salinidad. Las plantas transgnicas y expresiones heterlogas en genes de levadura
sobreexpresados tambin se han utilizado para elucidar el papel potencial de las
deshidrinas en la tolerancia al estrs. La sobreexpresin del gen de Citrus en el
tabaco provoc una ligera disminucin de la fuga de iones durante la refrigeracin y
la congelacin. Recientemente se obtuvieron datos sobre la sobreexpresin de
mltiples genes que codificaban para deshidrinas en Arabidopsis y se vio que
producan un aumento de la tolerancia a la congelacin y la mejora de la
supervivencia en exposicin a bajas temperaturas, lo que demuestra que las
deshidrinas contribuyen a la tolerancia a la congelacin (refuerza la funcin
mencionada anteriormente). Tambin en condiciones de deshidratacin celular
durante la maduracin de la semilla, pueden proteger tambin a molculas contra la
prdida de agua por eso en este caso se acumulan en las clulas embrionarias de
las semillas (Cano, 2001).
Las deshidrinas son protenas especficas expresadas en plantas y cuya cantidad
aumenta de forma considerable cuando desciende el contenido hdrico de la misma.
Se han detectado en plantas superiores, tanto en gimnospermas como en
angiospermas. Son protenas hidroflicas con alta proporcin en glicina. Se
encuentran tanto en el citoplasma como en el ncleo. Las deshidrinas pertenecen a
la familia de protenas LEA (Late Embryogenesis Abundant), un grupo heterogneo
de protenas descritas por primera vez por su acumulacin durante el desarrollo de
la semilla en algodn. Se cree que las protenas LEA estn involucradas en el alivio
del impacto negativo del estrs ambiental ( Arancn, 2001).

8. Cmo se sintetizan los aminocidos en las plantas ?


Las distintas protenas estn constituidas por series definidas de aminocido y
poseen propiedades fisiolgicas muy especficas. Las plantas sintetizan los
aminocidos a travs de reacciones enzimticas por medio de procesos de
aminacin y transaminacin. El primero de ellos se produce a partir de sales de
amonio absorbidas del suelo y cidos orgnicos, producto de la fotosntesis. La
transaminacin permite producir aminocidos a partir de otros preexistentes. la
sintesis de proteinas por la planta se realiza a partir de los aminocidos, siendo
imprescindible la presencia de todos y cada uno de los constituyentes de la protena
en cuestin. El disponer de una disolucin que contenga un elevado contenido en
aminocidos libres, permite aportar a la planta la fuente directa para que sta
sintetice las protenas. Esta fuente de aminocidos libres se puede obtener
mediante el proceso de hidrlisis de sustancias proteicas de origen animal o vegetal.
la materia prima (protena) se somete a un proceso de hidrlisis controlada, hasta
obtener u8n lquido pardo fcilmente miscible en agua (Saboro, 2002).

Tabla 1. Resultados obtenidos mediante la prueba de hiptesis ANOVA para la


concentracin de glucosa
ANOVA

tratamientos

Suma de
cuadrados gl Media cuadrtica F Sig.

Inter-grupos 68369,002 4 17092,250 8,784 ,000

Intra-grupos 38916,911 20 1945,846


Total 107285,913 24

Tabla 2. Resultados obtenidos mediante la prueba Dunnett para la comparacin de


medias de concentracin de glucosa.

Tabla 3. Resultados obtenidos mediante el anlisis de prueba de hiptesis de

ANOVA para la concentracin de protenas totales.

ANOVA

tratamientos

Suma de
cuadrados gl Media cuadrtica F Sig.

Inter-grupos 198725,000 4 49681,250 3,256 ,033

Intra-grupos 305162,500 20 15258,125

Total 503887,500 24
Tabla 4: Resultados obtenidos mediante la prueba Dunnett para la comparacin
de medias de concentracin de protenas totales.

Comparaciones mltiples

tratamientos
t de Dunnett (>control)a

Intervalo de
confianza al
95%
Diferencia
de medias Lmite
(I) r (J) r (I-J) Error tpico Sig. inferior

T1 C -94,500000 78,123300 ,986 -274,52950

T2 C 107,00000 78,123300 ,240 -73,02950


0

T3 C 106,00000 78,123300 ,244 -74,02950


0

T4 C -91,000000 78,123300 ,984 -271,02950

a. Las pruebas t de Dunnett tratan un grupo como control y lo comparan con todos los dems grupos.