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Citoesqueleto
Es un sistema crtico para la motilidad celular. Est formado por 3 tipos de fibras:
microfilamentos (filamentos de actina), filamentos intermedios y microtbulos. Adems de la
motilidad est involucrado en el soporte y organizacin de los contenidos celulares, as como en las
interacciones con protenas de membrana y relaciones entre clulas. Todas estas fibras estn
construidas por monmeros proteicos que estn unidos entre s por uniones no covalentes. Tanto
lo filamentos intermedios como los microfilamentos estn unidos a protenas de la membrana
celular, a pesar de esto slo los microfilamentos estn involucrados en los movimientos celulares.

Los microfilamentos estn formados por actina; los microtbulos por tubulina y ; los
filamentos intermedios por una diversa familia de protenas que depende segn el tipo de clula. En
las clulas eucariotas por lo general estn presentes los 3 tipos de filamentos. Durante la evolucin
el citoesqueleto se ha conservado muy bien, y esto da idea a la importancia en muchas funciones
crticas. Es tanto as que incluso se han encontrado protenas similares en procariotas; excepto para
los filamentos intermedios que son propios de eucariotas.

Todos los movimientos celulares necesitan ATP y protenas que transformen esa energa
del ATP en movimiento. Existen dos mecanismos para generar movimiento. El primero involucra el
ensamblaje y desensamblaje de de microfilamentos y microtbulos, es responsable de muchos
cambios en la forma celular. El otro mecanismo necesita de protenas motoras, que utilizan ATP
para caminar a lo largo del microfilamento o microtbulo y transportar orgnulos o vesculas sobre
ellos. Pocos movimientos requieren ambos mecanismos. La principal protena transportadora es la
miosina que interacta con la actina.

Microfilamentos
La actina es la protena ms abundante de la clula y presenta 3
isoformas principales la , y . La -actina se encuentra en clulas
musculares, la -actina est en el frente de movimiento donde los
filamentos se polimerizan y la -actina forma parte de filamentos de fibras
de estrs. La actina existe como monmeros globulares llamados G y
otros filamentosos llamados F (es una cadena lineal de actinas G). Cada
molcula de actina tiene un Mg2+ asociado a ATP o ADP.

Est formada por dos lbulos y una hendidura, en la cual se encuentra su actividad ATPasa.
Adems la hendidura acta como una bisagra que le permite a la protena flexionarse. Cuando la
fuerza inica la polimerizacin , y cuando la fuera inica la despolimerizacin . El ensamblaje
de la actina G en F se acompaa por la hidrlisis de ATP ADP + Pi, sin embargo la polimerizacin
no necesita la hidrlisis de ATP para que ocurra. Los monmeros se van uniendo en una especie
de hlice arrollada muy apretada. En esta disposicin cada unidad se rodea de 4 ms.

Todas las subunidades de un filamento de actina apuntan hacia el mismo lado, en

consecuencia tiene polaridad. Por convencin, el extremo con la hendidura de unin a ATP es el
(-) y el opuesto el (+); la hendidura hace contacto entre las subunidades y no est expuesto a la
solucin. La polaridad no es fcilmente detectable y por eso se utiliza la decoracin con miosina, la
cual se une de forma especfica a la actina y da una forma de cadena de puntas de flecha al
filamento. Las puntas de flecha apuntan hacia el extremo (-).

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Existen protenas con dominios CH que organizan a los microfilamentos en haces y retculos.
Estas protenas pueden ser monomricas o multimricas. El ordenamiento de los sistemas de unin
a la actina en estas protenas determinan la organizacin de los filamentos. Cuando los sistemas
se ordenen en tndem, el filamento de actina se empaqueta fuertemente y se alinea en forma de
haces. Sin embargo, si los sitios de unin estn separados se pueden formar uniones cruzadas y
los filamentos se empaquetan ms laxamente. Esta forma de red se encuentra en el citoplasma y
da una consistencia tipo gel, a esta red se unen protenas de membrana por lo cual est en la zona
adyacente a la membrana plasmtica de la clula.

La forma distintiva de una clula depende de la organizacin de los filamentos de actina y

de las protenas que conectan a los microfilamentos con la membrana. Estas protenas actan como
soldaduras puntuales que fijan el armazn del citoesqueleto con la membrana, tomando as la forma
que dicta el citoesqueleto. Las conexiones ms simples son mediante protenas integrales de
membrana directamente a la actina, otro tipo de conexin es aquella que involucra a protenas
integrales que interactan con protenas perifricas que sirven como adaptadores para el
citoesqueleto.

Dinmica de ensamblaje
La reaccin de polimerizacin se puede monitorear mediante viscosimetra, sedimentacin
y por espectroscopia y microscopia de fluorescencia. La primera, se mide mediante la disminucin
de la velocidad de flujo en un viscosmetro; la segunda, mediante ultracentrifugacin (solo permite
obtener actina F); el tercero, con un colorante fluorescente unido covalentemente a la actina G,
cuando se polemiza cambia el espectro; y el ltimo, se ve el crecimiento de un filamento marcado
al microscopio.

La polimerizacin se realiza en 3 fases: nucleacin, elongacin y estado estacionario. La

nucleacin se caracteriza por un perodo de letana en el que la actina G se agrega para formar
oligmeros cortos e inestables, una vez que el oligmero alcanza cierta longitud puede actuar como
una semilla estable o ncleo. En la fase de elongacin, se alarga el ncleo con rapidez para formar
un filamento por el agregado de monmeros a ambos extremos. A medida que los filamentos de
actina F crecen, disminuye la concentracin de actina G hasta alcanzar un equilibrio con los
filamentos. La tercera fase, o estado estacionario, consiste en el intercambio de las subunidades de

los extremos del filamento pero no hay un cambio en la masa total.

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Una vez alcanzado el estado estacionario, la concentracin de unidades no ensambladas
se denomina Concentracin crtica (Cc). ste parmetro es la constante de disociacin, o sea, el
cociente entre las constantes cinticas de ensamblaje y desensamblaje. Por lo general en
condiciones in vitro, Cc = 0,1 M. Por encima de este valor, la solucin de actina G se polimeriza; y
por debajo se despolimeriza.

El extremo (+) se polimeriza entre 5 y 10 veces ms rpido que el (-), esto se demuestra
mediante el uso de ncleos decorados (con miosina) luego se favorece la polimerizacin sin
decoracin mediante un Fuerza inica. Se observa como el extremo (+) polimerizado es mucho
ms largo que el (-) para un tiempo dado. Mediante el bloqueo de uno de los extremos para la
polimerizacin permite conocer una concentracin crtica para el inicio de la polimerizacin de cada
extremo, siendo el CC- > CC+. Con estos resultados de puede determinar que:
[actina G-ATP] < CC+ : no se produce elongacin del filamento.
CC+ < [actina G-ATP] < CC- : la elongacin ocurre solo en el extremo (+).
[actina G-ATP] > CC- : ocurre elongacin en ambos extremos.
Si llegue a la fase de estado estacionario y tengo CC+ < [actina G-ATP] < CC- ocurrir la
elongacin del extremo (+) y la disociacin del extremo (-). En esta situacin la longitud del
filamento es constante y las subunidades recin agregadas se desplazan a lo largo del
filamento, como una cinta rodante, hasta el extremo (-), donde se disocian.

Existen toxinas que afectan la polimerizacin de la actina G. Entre stas estn las que
favorecen la disociacin de filamentos y las que inhiben la disociacin. En la primer categora, la
citocalasina D se une al extremo (+) inhibiendo el agregado de ms monmeros y por ende
favoreciendo la disociacin; otra toxina es la latrunculina que se une a la actina G evitando que
pueda adicionarse a los filamentos. En la segunda categora, la principal toxina es la faloidina que
se une a la interfaz entre subunidades de actina F, donde bloquea subunidades adyacentes y
previene la despolarizacin de los filamentos.

Regulacin de la polimerizacin in vivo

1. Inhibicin de ensamblaje de actina por timosina 4:
La timosina es una molcula pequea que se une a actina G-ATP (no a actina F) y
bloquea el siti de unin al ATP de la actina G y previene as su polimerizacin. sta protena
representa un amortiguador de la cantidad de actina G libre en la clula. Si timosina 4,
actina G actina F.
2. Estimulacin del ensamblaje por profilina:
Tambin se une a los monmeros de actina G-ATP, pero en lugar de secuestrarla ayuda a
estabilizar el ensamblaje de los filamentos. La profilina se une a la actina G en el sitio opuesto
de intercambio de ATP por lo que no inhibe esa actividad. Como deja la hendidura libre, la
actina G-ATP es libre de unirse a un extremo (+). Cuando se une al filamento la profilina se
disocia de la actina G.

Hay protenas que se relacionan con los filamentos de diferente forma. Entre las cuales
estn:
Protenas seccionadoras (gelsolina y cofilina): se unen al filamento y cambian su conformacin
lo que lo distorsiona generando as el corte y la generacin de dos extremos nuevos. Estas
protenas se unen al extremo (+) evitando su polimerizacin, como el extremo (-) nuevo queda
libre se empieza a disociar. En consecuencia el corte favorece el recambio de los filamentos de
actina a travs de la creacin de nuevos extremos (-) y produce la desintegracin del retculo de
actina. Estos cortes son necesarios para la lomocin de la clula y la citocinesis.
Protenas estabilizadoras de actina F: pueden recubrir los extremos pero no pueden romper los
filamentos. Si se unen al lado (+), como la CapZ, se evita el agregado o perdida de ms
monmeros en ese extremo; si ocurre en el lado (-), como la tropomodulina, que evita la
disociacin. Los filamentos recubiertos en ambos extremos son muy estables y se utilizan en
regiones donde la organizacin es invariable, como en el sarcmero del msculo.

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Protenas ensambladoras (Arp): generan ramificaciones por unin de un ncleo a un filamento
madre. Como resultado los nuevos extremos se elongan y proveen la fuerza para empujar la
membrana hacia adelante.

Movimientos celulares impulsados por miosina

La miosina pertenece a una superfamilia de protenas motoras, de las cuales la miosina I, II
y V estn presentes en casi todas las clulas eucariotas. Todas las miosinas estn compuestas de
una o dos cadenas pesadas y varias cadenas livianas, que suelen tener funciones reguladoras. Las
cadenas livianas por lo general son calmodulina, una subunidad reguladora fijadora de Ca2+. Todos
los dominios cabeza de miosina tienen actividad ATPasa, y en conjunto con los dominios ellos
acoplan la hidrlisis del ATP con el movimiento de ellas a lo largo del filamento de actina. El papel
in vivo de la miosina se relaciona con el dominio cola; pueden desarrollar papeles en membrana o
con el movimiento.

Fijando en un cubreobjetos a molculas de miosina a las que se le agrega filamentos actina

se observa que en presencia de ATP las filamentos se deslizan a lo largo de la superficie y en
ausencia no se observa movimiento alguno. Este movimiento es realizado por la cabeza de miosina
que marcha hacia el extremo (+) del filamento y ste se mueve con el extremo (-) hacia adelante.
Se cree que la miosina hidroliza un molcula de ATP por cada paso que da y avanza una subunidad
de actina por vez. Aunque dependiendo del tipo de miosina, a mayor longitud de cuello mayor
distancia recorre en un paso.

Tipos de movimiento por miosinas:

1. Transporte de vesculas miosina I, V y VI. Por lo general, en la clula los filamentos estn
fijos y las miosinas libres, por lo que si en la cola de stas protenas est unida una vescula
se puede pensar que las miosinas son capaces de transportar vesculas como si fueran una
carga.
2. Corrientes citoplasmticas miosina XI. La generacin de corrientes es un mecanismo de
distribucin de metabolitos celulares. En algas y amebas, cerca de la membrana se
encuentra una red de actina inmvil a la cual se le unen miosinas que estn adheridas al
retculo endoplasmtico. El caminar de las miosinas sobre la red hacen que el citoplasma
empiece a girar y genera una corriente.
3. Haces contrctiles miosina II. En clulas no musculares se pueden forma de forma
permanente o transitoria haces contrctiles. stos haces son sensibles a ATP, cuando est
presente se contraen. Existen varios tipos: cinturn circular, fibras de estrs y anillo
contrctil. ste ltimo tipo es til para la
citocinesis en el ciclo celular.
4. Contraccin muscular. En los
sarcmeros (citoplasma empaquetado
de forma de formar haces de filamentos
repetidos regularmente) ocurre la
contraccin de la clula mediante el
avance de las cabezas de miosina,
presentes en un filamento grueso, por
los haces de actina hacia la direccin
(+). Las clulas musculares mantienen
una [Ca2+] interna baja para que con el
ingreso de ste a la clula o mediante
liberacin del Ca2+ almacenado en el
retculo sarcoplasmtico se desarrolle
serie de reacciones frente a un
estmulo. En presencia de Ca2+ la
miosina puede deslizarse por el filamento ya que el complejo troponina-tropomiosina no est
interfiriendo con los sitios de unin de la miosina en la actina.

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Locomocin celular
Todas las clulas mviles tienen polaridad, esto es que ciertas estructuras siempre se
forman en la parte frontal mientras que otras en la parte posterior de la clula. La migracin celular
se inicia con la formacin de una protrusin grande y ancha e el borde director, en vertebrados los
filamentos de actina en el borde director se enlazan rpidamente en forma de haces y retculos en
la regin de la protrusin, llamada lamelipodio. Cuando las protrusiones son delgadas se llaman
filopodios. Estas estructuras forman contactos estables con la superficie subyacente y previenen la
retraccin de la membrana.

El movimiento consta de 4 etapas comunes en diversas clulas: extensin de la protrusin

de membrana, adhesin al sustrato, flujo del citosol hacia adelante y retraccin de la parte posterior
de la clula.
1. La primera consiste en que el retculo de filamentos de actina del borde director empuja la
membrana hacia adelante mediante un mecanismo basado en la polimerizacin de actina.
La fuerza se genera por la adicin de subunidades de actina en los extremos de los
filamentos prximos a la membrana, luego el complejo Arp crea nuevos extremos mediante
las ramificaciones; posteriormente protenas de cubierta recubren los extremos (+) y la
cofilina y gelsolina fragmentan los filamentos que se van quedando atrs en el movimiento;
la profilina regenera los monmeros de actina-ATP para sintetizar nuevos filamentos.
2. Cuando la membrana se moviliz y el citoesqueleto fue ensamblado la membrana empieza
a adherirse firmemente al sustrato formando adhesiones focales. La fijacin tiene dos
finalidades: impedir la retraccin de las laminillas directoras y acta como anclaje de la
clula, lo que permite a la clula empujar hacia adelante.
3. En la translocacin del cuerpo celular, se cree, que la contraccin cortical dependiente de
miosina II es lo que desplaza el citosol.
4. Finalmente, se rompen las adhesiones focales en la parte posterior de la clula y la parte

liberada se dirige hacia adelante.

Las clulas no pueden moverse si estn unidas muy fuertemente al sustrato o no estn
adheridas al a superficie. La migracin ms rpida ocurre a un nivel intermedio de adhesin. La
locomocin entonces surge de las fuerzas de traccin ejercidas por la clula al sustrato subyacente.
Estmulos externos (por ejemplo factores de crecimiento y molculas quimotcticas) inducen el
ensamblaje y organizacin del citoesqueleto y el establecimiento de un gradiente interno de
protenas G y calcio. La polarizacin resultante conduce a la locomocin.

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Filamentos Intermedios
Se encuentran en casi todas las clulas
animales, pero no as en plantas u hongos. Se
asocian por lo general al ncleo y la membrana
plasmtica, de donde surge su principal funcin que
es dar estructura a la clula. No participan en la
movilidad celular, a diferencia de los filamentos de
actina y microtbulos. Son muy estables, no tienden
a disociarse con tanta facilidad. Las subunidades no
generan estructuras huecas, si no que una especie
de bastones helicoidales; no son polares; tampoco
se asocian a nucletidos y su polimerizacin no
necesita ATP o GTP.

Las subunidades de los filamentos

intermedios varan segn el tejido celular, estas
pueden ser laminas (ncleo), queratinas (tejido
conectivo), de tipo III (fibroblastos, neuronas o
clulas de la gla) y neurofilamentos (neuronas). A pesar de la variedad de protenas como
subunidades todas tienen la capacidad de formar filamentos del mismo dimetro (10nm), tienen un
dominio central conservado que est flanqueado por los dominios N y C terminales. Pueden haber
filamentos homopolimricos o heteropolimricos, segn la naturaleza de los monmeros.

Si bien lo filamentos intermedios son estables, se demostr que las protenas subunidades
se intercambian con el tiempo. Esta estabilidad presenta problemas en la clulas en mitosis, que
deben reorganizar los tres retculos del citoesqueleto. En particular el desarmado de la envoltura
nuclear depende del desensamblaje de los filamentos de lamina que forma la red que sostiene a la
envoltura. Al principio de la mitosis, las quinasas promueven el desensamblaje de los filamentos e
impide su reensamblaje. En la mitosis tarda las fosfatasas promueven el ensamblaje de los
filamentos al eliminar los grupos PO43- de los filamentos, y con eso ayuda a la regeneracin de la
envoltura nuclear alrededor de los cromosomas hijos.

Existen protenas asociadas a los filamentos intermedios (PAFI) que organizan a los
filamentos intermedios en retculos y haces, lo que proporciona estabilidad estructural a la clula.
Las PAFI pueden formar enlaces con las membranas plasmtica y nuclear, los microtbulos y
microfilamentos. Los filamentos intermedios que estn asociados a la membrana plasmtica estn
adheridos por protenas adaptadoras a uniones celular llamas desmosomas y hemidesmosomas.
Las cuales median, respectivamente, la adhesin entre clula y clula, y entre clula y matriz. De
esta forma los filamentos de dos clulas estn conectados indirectamente entre s.

Microtbulos
Los microtbulos participan en cierto movimientos celulares, como los de cilios y flagelos, y
en el transporte de vesculas en el citoplasma. Estos movimientos son el resultado de la
polimerizacin y despolimerizacin de los microtbulos o de los efectos de protenas motoras. Hay
movimientos que necesitan ambos procesos. Tienen un papel importante en la organizacin celular
por medio del centro de organizacin de microtbulos (MTOC), en una clula puede haber uno o
varios centros. El MTOC est localizado cerca del ncleo y dirige el ensamblaje y orientacin de los
microtbulos, la direccin del desplazamiento de vesculas y la orientacin de orgnulos. El MTOC
es el responsable de la polaridad de la clula y la direccin de los procesos citoplasmticos en las
clulas en interfase y en mitosis.

Un microtbulo es un polmero de subunidades de tubulina globular, organizadas en un tubo

cilndrico de 25nm de dimetro. Son mucho ms rgidos que los filamentos intermedios o los

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microfilamentos por su estructura tubular. Pueden generar fuerza sin doblarse, lo que es esencial
para el movimiento de los cromosomas en la mitosis.

Existen dos tipos de poblaciones de microtbulos: los estables, de larga vida; y los
inestables, de vida corta. Por lo general, los primeros se encuentran en clulas que no se dividen,
en axones de neuronas e incluyen al haz de central de microtbulos de los cilios y flagelos, que son
prolongaciones de membrana plasmtica con un movimiento ondulante rtmico destinado a
transportar materiales sobre superficies epiteliales (cilios) y el desplazamiento de la clula (flagelos).
Los microtbulos inestables se encuentran en clulas que necesitan montar y desmontar las
estructuras con rapidez.

Dinmica de los microtbulos

La unidad de construccin, la tubulina, es un
heterodmero de -tubulina y -tubulina. Ambas estn
muy conservadas y se encuentran en todos los
eucariotas. Existe una -tubulina que se cree tiene la
funcin de nuclear la polimerizacin de las otras
subunidades. Cada subunidad de tubulina se una a dos
molculas de GTP, uno a la , donde no se hidroliza; y
otro a la -tubulina, donde se genera GDP. El GTP
unido a la -tubulina queda atrapado entre los
monmeros y no es intercambiable, en cambio el GDP
unido a la -tubulina s es intercambiable.

Las interaccin laterales y longitudinales entre

las subunidades de tubulina son responsables de
mantener la forma tubular. Los contactos longitudinales
forman uniones cabeza-cola entre subunidades para
forma un protofilamento lineal y los contactos laterales
forman estructura cilndrica. Casi todos los microtbulos en una clula estn constituidos por 13
protofilamentos, y se conocen como singuletes de microtbulos. Se pueden formar dobletes o
tripletes por asociacin de singuletes.

Los microtbulos se ensamblan por la polimerizacin de la -tubulina dimrica, este

proceso depende de la temperatura. Si la T(4C) los microtbulos se despolimerizan, cuando T
(37C) en presencia de GTP ocurre la polimerizacin. A [-tubulina] > CC los dmeros se
polimerizan y a [-tubulina] < CC se despolimerizan. Depende el nucletido unido a la -tubulina
(GTP o GDP) a la CC hace que el ensamblaje en los extremos (+) y (-) sea diferente. Si [-tubulina]
> CC los dmeros se agregan en mayor medida al extremo (+). Cada extremo tiene una CC diferente
y si CC- > [-tubulina] > CC+ los microtbulos crecen en una sola direccin, hacia el extremo (+). En
presencia de ncleos ya formados la velocidad inicial de polimerizacin se favorece.

El ensamblaje comprende de 3 pasos:

1. Formacin de protofilamentos a partir de subunidades de -tubulina.
2. Los protofilamentos se asocian para formar la pared del microtbulo.
3. El agregado de ms subunidades a los extremos alarga el microtbulo.

En condiciones de acortamiento, los extremos del microtbulo se encuentran defecados,

como si se hubieran perdido las interacciones laterales entre los protofilamentos. Cuando esto
ocurre se genera la despolimerizacin del protofilamento desde su extremo. Esta prdida de las
interacciones laterales se ve influenciada por una baja concentracin de -tubulina con GTP unido.

Existen protenas asociadas a microtbulos (MAP) que ayudan a organizarlos y a

estabilizarlos. Algunas MAP impiden o estimulan la despolimerizacin de los microtbulos
citoslicos; otras MAP organizan los microtbulos en haces o los juntan por medio de uniones

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cruzadas a las membranas y/o filamentos intermedios. Hay toxinas como la colchicina y el taxol,
que, respectivamente, impiden polimerizacion de tubulina y estabilizan a los microtbulos. Adems
la vincristina y la vimblastina impiden la formacion del microtubulo.

Hay un grupo de MAPs que estn involucradas en el movimiento de protenas, vesculas u

orgnulos; en este grupo se encuentran las quinesinas y dinenas. Las primeras se mueven desde
el extremo (-) (+) (transporte antergrado); y las segundas desde el (+) (-) (transporte
retrgrado). Cuando hay pocos microtbulos, las vesculas se transportan a lo largo de filamentos
de

actina impulsadas por miosina.

Los cilios y flagelos son prolongaciones flexibles de la membrana que se proyectan en

ciertas clulas. Virtualmente todos los cilios y flagelos de los eucariotas poseen un haz central de
microtbulos llamado axonema, que presenta nueve dobletes de microtbulos que rodean a un par
central de singuletes. El extremo (+) se encuentra en la parte distal del axonema, el cual est unido
a la clula por un cuerpo basal. Compuesto por nueves tripletes de microtbulos tiene un papel
importante en la iniciacin del crecimiento del axonema. Los dobletes del axonema contienen
dinenas que los unen entre s y la marcha de stas hacia el extremo (-) genera una curvatura en el
cilio o flagelo que lleva al movimiento.