UNIVERSIDAD DE COSTA RICA

ESCUELA DE QUMICA
SECCIN DE QUMICA ORGNICA
LABORATORIO DE QUMICA ORGNICA GENERAL I
QU-0213
Nombre: Gerson Gamboa Campos Carn: B62776
Asistente: Jose Varela Rodrguez Grupo: 08

Prctica # 8. Cromatografa

Resumen
Se elaboraron dos experimentos diferentes de baja dificultad acerca de la
cromatografa. En el primer experimento en el cual se realiz una cromatografa de papel
donde se aplic una gota de la muestra de distintos colores para observar el cambio de la
misma y as poder obtener mediante una formula el Rf. En la cromatografa de capa fina se
sigui los pasos del primer experimento, aplicando diferentes analgsicos, para obtener el
Rf de cada muestra. Tambin se elabor una cromatografa de columna, quizs es el mtodo
ms general, utilizado para la separacin, a la vez que para la purificacin, de diferentes
compuestos orgnicos que se encuentren en estado slido o lquido.

Introduccin
La qumica orgnica posee varias tcnicas de separacin, pero una de las tcnicas
ms usadas para separar los componentes de una mezcla para su posterior estudio es la
cromatografa (Valcrcel, 1988).

La separacin cromatografa es un mtodo fsico de separacin de componentes que

bsicamente se aprovecha de que las sustancias que componen una mezcla viajan a
diferentes velocidades y por ende se van separando (Reyes, 1983).
 La cromatografa es un mtodo de anlisis que permite la separacin de gases y
lquidos de una mezcla por adsorcin selectiva (Costa, 1984) produciendo una especie de
manchas de distintos colores, se utiliza adems para medir la proporcin presente de cada
elemento en la mezcla.

Ll os componentes componentes de una mezcla se separen a travs de la fase mvil, la

cromatografa logra la separacin de diversos compuestos en diferentes estados de
agregacin, ya sea slido-lquido, gaseoso-gaseoso entre otros. La cromatografa es de
suma importancia debido a su gran uso tanto en la industria como en el campo de la salud
y la biologa, por lo que se busca con esta prctica ensear algunos tipos de cromatografa
(como la de capa fina y columna). En la prctica se lograron separar los pigmentos de
extracto de espinaca y, adems de comprobar la afinidad de algunos analgsicos en
diferentes disolventes para la cromatografa de capa fina.

Seccin experimental

El procedimiento se tom del Manual de laboratorio de qumica orgnica general I

(2017), pginas 90-99, experimentos 8, con la variacin que el procedimiento de
cromatografa de tiza no se realiz.

Resultados

Cuadro I. Rf para cada analgsico

Analgsico Rf
Acetaminofn 1
Ibuprofeno 0,775 / 0,925
Cafena 0,525
Aspirina 0,925
CafeAspirina 0,95/0,5
La distancia del punto de inicio hasta el frente del disolvente es de 4 cm
Cuadro I. Rf para la cromatografa de papel

Analgsico Rf
Amarillo 0,5
Rojo 0,171
Caf 0,171/0,33/0,303/0,256
Verde 0,453/0,713
Azul 0,841
La distancia del punto de inicio hasta el frente del disolvente es de 8,2 cm

1
= =

Figura 1. Cromatografa de capa fina y analgsicos

Figura 2. Cromatografa de papel

Figura 3. Cromatografa de columna

Discusin

Se procede a realizar la prueba de cromatografa de capa fina. La cromatografa de

capafina consiste en la separacin de los componentes de una mezcla a travs de la
migracin diferencial sobra cada capa fina de absorbente, retenida sobre una superficie
plana (Sharapin, 2000).

Este tipo de cromatografa tiene aplicaciones similares a las de cromatografa de

lquidos. Se aplica para desarrollar las condiciones para las separaciones en cromatografa
de lquidos en alta resolucin. La cromatografa tiene amplio uso en laboratorios clnicos e
industriales (Skoog, James & Crouch, 2008).

En este mtodo de cromatografa hay dos tipos de fases, una mvil, que es el
disolvente que se colca en la cmara; y otra estacionaria que es donde se agregan las
muestras. La separacin se logra porque algunas sustancias son ms fuertemente retenidas
por la fase estacionaria, mientras que otras se desplazan mejor en la fase mvil (Bolaos,
Herrera &Luts, 2003)

Se toma una placa de cromatografa y se marca con un lpiz la lnea base del nivel
de disolventes a 1cm del extremo inferior y luego otra a 1cm del extremo superior, que va
a ser la lnea de frente de disolvente. En la lnea de abajo se agrega una pequea muestra
de cada sustancia.

Luego se coloca la placa en una cmara de desarrollo con 15mL aproximadamente

de 95% acetato de etilo 5% cido actico. Adems, previo a colocar la placa se coloca un
papel filtro que va a generar una atmsfera controlada con el disolvente que se adicion.
Se deja la placa dentro de la cmara hasta que el disolvente se desplace hasta el frente de
disolvente.
pasa por una luz ultravioletagy por la cmara de yodo. Las lminas de yodo son sen
sibles a loscompuestos orgnicos que estn en la placa y dan productos oscuros. En cuanto
a la luz fluorescente, los componentes de la muestra amortiguan la fluorescencia del
material de tal forma que toda la placa exhibe fluorescencia, excepto los lugares donde se
encuentran los componentes de la muestra (Skoog, James & Crouch, 2008). Se debe indicar
dnde est la mxima altura que lleg a alcanzar la sustancia aplicada al arrastrarse con el
disolvente.
Con este tipo de cromatografa, aunque posee diversas ventajas como la simplicidad
del equipo, el bajo costo y la rapidez; tambin se presentan ciertos problemas que con
llevan errores y a valores muy variados entre sustancias similares como el hecho de que el
disolvente no migre de manera regular, o el tiempo que transcurre entre el revelado y la
lectura de la placa. La presencia de manchas puede deberse a la aplicacin de sustancias
en baja concentracin que necesitan de la aplicacin de un volumen mayor de la
solucin que se va a analizar (Sharapin, 2000).

Con la cromatografa de columna se bas en la utilizacin de diversos filtros para la

separacin de los diversos pigmentos pertenecientes a la hoja de espinaca. Se utiliz el gel
de slice ya que la filtracin por gel produce una serie de poros de diferentes tamaos, por
lo que las molculas ms pequeas pueden atravesar los
diversos poros y recorrer mucha mayor longitud dentro del tubo que las molculas ms
grandes (Watson, 2005). Para la espinaca se observ (ver Figura 3) que la molcula que
realiz el mayor recorrido es el pigmento amarillo, seguido de diversas tonalidades de
verde. Las hojas de espinaca poseen 4 pigmentos bsicos, las xantofilas (pigmento amarillo),
carotenos (pigmento naranja) y las clorofila A y B (pigmentos verdes, la B es ms oscura que
la A). Por lo que encontramos en el fondo de la columna,
el pigmento amarillo son xantofilas mientras las diversas tonalidades de verde son
mezclas entre las clorofilas A y B, esto ltimo es producto de la distribucin uniforme de los
poros del gel. Las xantofilas son molculas de menor tamao en comparacin con la
clorofila, por lo que se les facilita atravesar los poros y llegar a la parte ms baja de la
columna, cabe destacar que las xantofilas se componen nicamente de cadenas de
carbonos por lo que no poseen polaridad ya que carecen de un
compuesto ms electronegativo que atraiga los electrones. Debido al silanol
presente en la superficie de gel de slice, posee polaridad (Climent, 2004), las xantofilasco
mo son no polares no poseen interaccin con el gel lo que les permite localizarse en la zona
ms baja de la columna. Para el caso de las clorofilas se basan en el grupo funcional que
diferencia la clorofila A de la B, la clorofila A posee un metilo en una posicin donde la
clorofila B posee un aldehdo (Orozco, 2012). Este grupo funcional posee una gran variante
ante la interaccin el gel de slice ya que el aldehdo posee polaridad debido al oxgeno que
posee (Bruice, 2007)

Conclusiones
Es importante la utilizacin de un buen disolvente como fase mvil, en este caso fue
el 95% formato de etilo 5% cido frmico, que generaron mejores resultados.
En la cromatografa de papel al utilizar agua como disolvente la mezcla de colores
va a subir separando los mismos en el proceso.
El sustrato utilizado en la columna, como el gel de silica, puede intervenir la
separacin de pigmentos segn la polaridad de los mismos.
Bibiliografia

Bruice, P. (2007). Qumica Orgnica (5ta. Edicin). Mxico: Pearson Educacin.

Costa, J. (1984). Curso de ingeniera qumica: introduccin a los procesos, las operaciones
y los fenmenos de transporte. Editorial Revert

Herrera, C.; Bolaos, N.; Lutz, G. (2003) Qumica de Alimentos: Manual deLaboratorio.
Editoria Universidad de Costa Rica, 1 edicin, San Jos, Costa Rica

Sharapin, N. (2000). Fundamentos de Tecnologa de Productos Fisoteraputicos. rea de

Ciencia y Tecnologa del Convenio Andrs Bello & Red Iberoamericana de Productos Fito
farmacuticos. Editado por Roberto Pinzn, 1 edicin, Colombia,

Reyes, J. (1983). Anlisis qumico e instrumental moderno. Editorial Revert

Skoog, D.; James, F.; Crouch, S. (2008) Principios de Anlisis Instrumental.Editorial
Cengage Learning S.A., 6 edicin, Mxico

Orozco, M. (2012). Los pigmentos fotosintticos , de Universidad Nacional de Colombia:

http://www.virtual.unal.edu.co/cursos/ciencias/2000051/lecciones/cap02/02_04.htm

Valcrcel, M. (1988). Tcnicas analticas de separacin. Editorial Revert

Watson, J. (2005). Biologa molecular del gen. Madrid, Espaa. Panamericana, D.L.