Vol. 14 (36), pp 2662-2671 9 de septiembre de 2015 DOI:.

10.5897 / AJB2015.14785 Nmero de artculo: E52037055410

ISSN 1684-5315 Copyright 2015
African Journal of Biotechnology
Autor (s) conservan los derechos de autor de este artculo
http://www.academicjournals.org/AJB

Trabajo de Investigacin de cuerpo entero

composicin de aceite esencial de diferentes fracciones de Piper

guineense Schumach. et Thonn de Camern usando espectrometra y
su cromatografa de masa de gas
en efecto insecticida Sitophilus oryzae ( L.)
Esther Obi Oben *, Robyn McConchie, Kim Phan-Thien y Nelson Neba Ntonifor

Laboratory de Zoologa del Departamento de Biologa Animal y Fisiologa de la Facultad de Ciencias, Universidad de Yaound 1,
Camern.
Department de Ciencia de los Alimentos, Facultad de Agricultura y Medio Ambiente, Universidad de Sydney, Australia. Department de
Zoologa y Fisiologa Animal de la Facultad de Ciencias, Universidad de Buea, Camern.

Recibido 09 de junio 2015; Aceptado el 2 de de septiembre de, el ao 2015

fracciones aceite esencial de polvo de semilla seca de Piper guineense se analizaron por cromatografa-espectrometra de masas (GC-MS) de gas
y evaluado por sus efectos insecticidas en Sitophilus oryzae anlisis L. La GC-MS mostr diferencias cuantitativas y cualitativas entre las
fracciones de aceite. resultados cromatogrficos revelaron constituyentes qumicos como el eugenol, piperanol, pineno, careno, copaeno con
propiedades insecticidas. Nuevos quimiotipo se observaron en las diferentes fracciones. En lugar de caryophyllene reportado en la literatura,
-cariofileno se encontr en todas las diferentes fracciones. xido de cariofileno, un sesquiterpeno que contiene oxgeno estaba presente en
todas las fracciones excepto n-hexano. Adems de a-felandreno presente en todos, -felandreno, un hidrocarburo monoterpeno se encontr en
la fraccin n-hexano. Contacto toxicidad en los granos de trigo mostr que todas las fracciones causadas significativa (P <

0,001) la mortalidad de los gorgojos. Las fracciones de aceite tambin mostraron toxicidad contacto variable sobre papel de filtro impregnado. Todas las
dosis de la fraccin n-hexano eran muy txico para el insecto de prueba que en el control, provocando una mortalidad del 100% despus de cinco das de
exposicin. Todas las fracciones produjeron una actividad repelente fuerte contra el insecto de prueba. Estos resultados sugieren que P. guineense tiene
potenciales para el desarrollo como un insecticida orgnico contra S. oryzae y otras plagas de granos almacenados.

palabras clave: Piper guineense Schum. et Thonn., fracciones de aceite esencial, quimiotipos, toxicidad, repelencia,
Sitophilus oryzae ( L.).

INTRODUCCIN

prdidas (Ndemah, 1999). Gorgojos han sido descritas como causantes de daos
almacenado el maz es infestado por varios importantes plagas cosmopolitas como gorgojos
que causan econmica considerable de hasta el 30% del grano en Camern, donde

* Autor correspondiente. Correo electrnico: estherobio1@yahoo.com, estherbesong@gmail.com. Tel: (+237) 677427933, 697799121.

Autor (s) de acuerdo en que este artculo sigue siendo el acceso abierto permanentemente bajo los trminos de la Licencia Creative Commons Atribucin 4.0 Licencia Internacional

granos almacenados constituyen el cultivo alimenticio ms importante (Nukenine
et al., 2010). El control de estas plagas de insectos depende principalmente de
aplicaciones de insecticidas sintticos (Bekele et al., 1996). A veces, los
insecticidas pueden parecer eficaz, pero la aplicacin repetida ha interrumpido el
control biolgico de enemigos naturales, dando lugar a brotes de otras especies
de plagas y tambin el desarrollo de la resistencia (Park et al., 2003). Los
problemas causados por los pesticidas sintticos y sus residuos han aumentado
la necesidad de pesticidas biodegradables eficaces de origen vegetal con una
mayor selectividad y la historia de uso tradicional. plantas Botanicals han tenido
xito contra una serie de plagas en frica (Bekele et al, 1997;. Ogendo et al.,
2008).
productos botnicos se basan en polvos, extractos o sustancias purificadas de
origen vegetal y son prometedores alternativas a los pesticidas residuales
sintticos en frica, en donde predomina la prctica la agricultura de
subsistencia. En muchas partes de Camern, los agricultores usan diferentes
tipos de productos vegetales para el control de insectos (Tapandjou et al, 2000;..
Ngamo et al, 2007). Aunque, muy poco uso es conocido por los agricultores de la
regin Suroeste de Camern sobre los productos vegetales de las plagas de
insectos "de control. productos vegetales se sabe que tienen efectos
insignificantes sobre los insectos beneficiosos y menor impacto ambiental. Son
fcilmente asequibles, disponible y juegan til
papel en el control integrado de plagas
programas de MIP de gestin en los pases en desarrollo. Como la mayora de
las naciones en desarrollo sufren de alto costo de los materiales sintticos,
productos de proteccin de cultivos con una eficacia modesta se prefieren si son
fcilmente disponibles y menos costosos que los pesticidas convencionales.
Plantas polvos o extractos podran ser producidos con las habilidades y
conocimientos limitados y su uso implica poco o ningn gasto financiero.
De las 700 especies de Gaitero, slo tres son reconocidos como indgenas a
Camern (Hutchinson y Dalziel,
1963). El ms ampliamente distribuida, Piper guineense, es originario de frica
tropical, que van desde Guinea a Kenia y el sur de Zambia. Es un bejuco bosque
con ramillas en espiral hasta arbustos a unos 10 m. Las hojas son de forma
elptica y tienen un aroma agradable cuando se aplastan. El esfrica
frutos (bayas) son de color amarillo
naranja devenir, rojo y negro, finalmente, (Iwu, 1993). Los frutos son
comnmente llamados frica Occidental pimienta Negro o Poivrie en francs.
Los frutos se venden en el mercado como plantas medicinales o los aditivos
alimenticios comestibles debido a su fuerte, penetrante aroma y sabor. En la
regin del Suroeste de Camern, las hojas (frescas o secas) se comen como
verduras en Sopas", mientras que el polvo molido se utiliza como aditivos en la
salsa. Los polvos obtenidos a partir de semillas molidas se utilizan como
estimulantes (Sofowora, 1982).
P. guineense ha demostrado ancho potenciales contra las principales plagas
de insectos nocivos de cultivos herbceos (Ukeh et al, 2008;. Ntonifor, 2011).
Una evaluacin de laboratorio de las propiedades repelentes y anti feedant de
ambos extractos acuosos y polvos de P. guineense en contra
Callosobruchus maculatus y xylostella Putella revelado
Oben et al. 2663
potente repelente y las actividades de lucha contra feedant de esta planta (Ajayi
y Wintola, 2006;. Ntonifor et al, 2010). actividades insecticidas del aceite esencial
se han probado (Asawalam et al., 2007). Varios estudios se han realizado sobre
la composicin del aceite esencial de P. guineense
semillas de diferentes orgenes geogrficos (. Amvam et al, 1998; Jirovtez et al.,
2002). Muchos investigadores han trabajado en polvo entera fruto de P.
guineense de Camern (Jirovtez et al, 2002;.. Tchoumgougnang et al,
2009). Su composicin aceite esencial dependa de las ubicaciones geogrficas
y las condiciones climticas donde se tomaron las semillas. No se inform
composicin de aceite esencial de las diferentes fracciones de esta planta por
GC-MS. Por lo tanto, el propsito del presente estudio fue: (1) identificar los
compuestos de aroma de diferentes fracciones de esta planta responsables del
olor y sabor caractersticos, (2) para evaluar la actividad insecticida de las
diferentes fracciones contra Sitophilus oryzae, una plaga de granos almacenados
se encuentran en Camern.
MATERIALES Y MTODOS
Material vegetal y la preparacin del extracto
frutas secas (bayas) de P. guineense fueron adquiridos de un mercado local en Yaounde,
Camern. Las especias se autentican mediante la comparacin con muestras de herbario
en el Limbe Botanic Garden (Limbe, Camern). Las muestras fueron durante 3 das a
temperatura ambiente y triturado hasta un polvo fino usando un mezclador mecnico se
sec al aire. El polvo se envasa en bolsas hermticas y se exporta a la Facultad de
Agricultura y Medio Ambiente (Universidad de Sydney, Australia). Los extractos de la
especia se prepararon de una manera secuencial como sigue: se disolvi 100 g de polvo
de semilla en 200 ml de metanol, vrtex durante 15 min y se sonic durante 1 h en alta
frecuencia en un disruptor de clulas ultrasnico (Microson ). Este proceso era romper e
interrumpir las clulas de plantas para la extraccin fcil. El proceso se repiti 3 veces. La
solucin resultante se filtr con Whatman No. 1 papel de filtro utilizando una bomba de
vaco. La solucin filtrada se evapor en un BUCHI (R-114) rotavapor a presin reducida a
una temperatura de 60 C para concentrar las muestras. La muestra se volvi a disolver
en 50 ml de metanol y se transfiri a un embudo de separacin y se eluy sucesivamente
en hexano, cloroformo, acetato de etilo y metanol. Cada disolvente se evapor en un
rotavapor BUCHI bajo presin reducida a una temperatura de 60 C. Los residuos
resultantes se re-disolvi en acetona, para dar un volumen de stock de 10 ml para cada
fraccin. Las soluciones se refrigeran antes de la aplicacin y el anlisis GC-MS.
anlisis espectros de masas de gas Cromatografa
Las fracciones de aceite esenciales de P. guineense se analizaron por GCMS y la
identificacin de sus constituyentes se logr basa en sus ndices de retencin
determinados con referencia a las normas y mediante la comparacin con los reportados
en la literatura (Jirovtez et al, 2002;. Adams, 2007; Tchoumbougnang et al., 2009). Los
analitos fueron identificados tentativamente por referencia a la biblioteca de espectros de
masas NIST 2008. Un GC serie Agilent 7890A con 5975C detector triple eje MSD inerte
(Agilent Technologies, EE.UU.) se utiliz para el anlisis de GC-MS. Se utiliz un sistema
ultra-unidad Series Markes 2 (Markes International Ltd., Reino Unido) para la desorcin
trmica automatizada. Extract (3 l) se inyect en tubos de muestreo que contienen Tenax
TA (Supelco Inc., Bellefonte, PA, EE.UU.) de resina adsorbente a travs de una corriente
2664 AFR. J. Biotechnol.
de cero de aire (100 ml / min). Las muestras se desorben por calentamiento de los tubos de muestras
durante 6 minutos a 300 C y se centr en una trampa fra Tenax TA a - 30 C durante 6 min. La trampa de
fro se entonces flash calent a 300 C durante 5 min y la muestra se inyecta en una columna de HB5 (30
m x 250 m 0,25 m ID) a travs de un conducto de transferencia calentado mantenido a 260 C. El horno
del GC se llev a cabo inicialmente a 40 C durante 2 min, se calent a 160 C a 5 C min -1, 320 C a 10
C min- 1, a continuacin, se mantuvo durante 2 min.
La actividad insecticida de las fracciones de aceite contra S. oryzae
la cultura de insectos
S. oryzae adultos se obtuvieron de una accin mantenida en la Facultad de Agricultura y
Medio Ambiente (Universidad de Sydney) y criados en los granos de trigo integral en una
temperatura constante y cmara de humedad (26 C, 65% HR) en la oscuridad.
Los bioensayos
Los bioensayos se realizaron con un mes de edad de los adultos S. oryzae.
Las dosis de 0, 0,5, 1 y 2 ml de la solucin madre de cada fraccin de aceite se diluyeron en
serie en acetona para compensar 10 ml, dando una serie de diluciones de 0, 0,05, 0,1 y 0,2 de
cada solucin.
toxicidad contacto Grain
Un milmetro de la nueva preparacin se mezcl con 40 g de granos de trigo y se agit a
fondo durante 5 minutos para permitir la distribucin uniforme sobre los granos. Los granos
de control se trataron slo con acetona. granos tratados se mantuvieron durante 20 min
para permitir la evaporacin del disolvente. Veinte (20) adultos de un mes, de edad, a partir
del cultivo de laboratorio se introdujeron a los granos en un vial de vidrio de 250 ml con
tapas perforadas. Cada tratamiento y control se repiti cuatro veces. La mortalidad se
evalu despus de 24 h hasta por cinco das.
Filtro de toxicidad por contacto de papel
Contacto efecto de las fracciones de extracto se evalu en papel de filtro, 7 cm no.1
Whatman. El papel de filtro se coloc en placas de Petri y
Se aplicaron 0,5 ml de las fracciones de extractos diluidos en serie en el disco de papel de
filtro. Los papeles de filtro de control se pulverizaron con solamente acetona. La acetona se
dej evaporar durante 20 min, despus de lo cual, 20 eunucos uno meses de edad insectos
adultos se introdujeron en el centro de cada disco. Esto se mantuvo en condiciones de
laboratorio (25 1 C, 60% HR). Los tratamientos y el control se replicaron 4 veces. mortalidad
de los insectos se registr despus de 24 h hasta por cinco das. El porcentaje de mortalidad
se calcul usando la frmula de correccin de Abbott para la mortalidad natural en los controles
no tratados (Abbott, 1925) (PT), como sigue:
PT = (PO-PC) / (100-PC) x 100
Cuando, PO = mortalidad de adultos tratados (%), PC = mortalidad de control observado.
bioensayo repelencia
A efecto de repelencia se evalu usando el mtodo de preferencia rea modificada de
McDonald et al. (1970) (Tapondjou et al.,
2005). reas de prueba consisti de 7 cm Whatman no. 1 papel de filtro cortado en mitades. Las
soluciones de ensayo se prepararon por series de diluciones de las fracciones de extracto en acetona
como arriba indicado. Cada solucin (0,5 ml) se aplic de manera uniforme a un disco de papel
media-filtro utilizando una micropipeta. los
otro disco medio se trat con acetona sola y sirvi como control. Tratados y los discos sin
tratar se secaron al aire durante 10 min para evaporar el disolvente completamente. discos
completos se rehicieron uniendo mitades tratadas a mitades no tratados con cinta adhesiva
transparente. Cada disco rehecha se coloc en un plato de 7 cm Petri y 20 insectos adultos
no sexado de un mes, de edad, fueron puestos en libertad en el centro del disco de papel
de filtro y las placas de Petri fueron cubiertos. Cada tratamiento y control se repiti 4 veces.
Se registr el nmero de insectos presentes en el control (Nc) y se trat zonas (NT) de los
discos despus de 3 h. repelencia Porcentaje (PR) se calcul como sigue:
PR = [(Nc-Nt) / (Nc + Nt)] x 100
Y se asigna a las clases de repelencia (0 - V) de acuerdo con Talukder y Howse (1993)
como sigue: Clase 0 (PR <0,1%), clase I (PR =
,1 - 20%), clase II (20,1 - 40% de), clase III (PR = 40,1 a 60%), clase IV (PR = 60.1 - 80%),
clase V (PR = 80,1 - 100% de).
anlisis estadstico
Los resultados de los experimentos se analizaron mediante anlisis unidireccional de la varianza
(ANOVA) usando el Linear Procedimiento General Modelo (GLM) de GenStat 13 edicin. Los
datos fueron log-transformados antes del anlisis. pruebas de rangos mltiples de Duncan se
utilizaron para comparar los medios. porcentaje de mortalidad se calcularon a partir del nmero
total de insectos muertos. Los importantes niveles se fijaron en 0,05.
RESULTADOS
Composicin qumica de los frutos secos de P. guineense
Los resultados de cribado de la planta revelaron la presencia de diversos grupos
qumicos tales como terpenos y flavonoides (Tabla 1). El aceite esencial de fruta
de las diferentes fracciones tena colores que van del amarillo plido (cloroformo)
para de color amarillo oscuro (n-hexano) con el olor acre y aromtico
caracterstico de Gaitero plantas. Estos aceites esenciales fueron compuestas
(90%), principalmente de terpenos (mono- y sesquiterpenoides) con las ms
importantes que se identificaron como copaene (99%), cariofileno (99%), eugenol
(98%), -cubebene (98% ), -elemene (94%). En la fraccin n-hexano los
componentes ms abundantes fueron longifoleno (91%), copaeno (97%),
cariofileno (99%), cariofileno (97%) y alfa -cubebene (96%). Adems de estos,
el metanol fraccin tambin tena
piperanol (97%), alcanfor (94%), y eugenol (98%). La fraccin de cloroformo
contena cido oleico (78%), mientras que todas las fracciones contenan
-mirceno en lugar de mirceno como se ve en la literatura.
actividades insecticidas de P. guineense fracciones de aceite esenciales
Contacto toxicidad por el tratamiento de grano
mortalidad de los insectos por el tratamiento de grano de las diferentes fracciones de
aceite difera significativamente (P <0,05) (Tabla 2). La fraccin de n-hexano produjo
100% de mortalidad de S. oryzae
 Oben et al. 2665

Tabla 1. composicin en porcentaje comparativo de las fracciones principales de aceite esencial a partir de semillas
secas de Piper guineense comprado a Yaounde, Camern.

fraccin n-hexano
Compuesto Tiempo de retencin de peso (min) Calidad Molecular
a-felandreno 10.06 83 136
4-Carene 10.06 50 136
(+) - 4-Carene 20.21 83 136
-felandreno 10.06 38 136
3-Carene 13.12 58 136
-pineno 13.12 49 136
-pineno 13.12 43 136
-mirceno 13.12 38 136
copaene 21.36 97 204
a-Cubebene 21.36 96 204
Ylangene 21.36 18 204
cariofileno 21.75 99 204
a-cariofileno 23.584 97 204
(Z, Z) -farneseno 22,58 46 204
I-Neoclovene 22,58 42 204
gamma-Elemene 22.83 58 204
longifoleno 24.44 91 204
thujopseno 24,61 53 204
Seychellene 24.60 41 204
Aromadendrene 26.24 47 204
3-fenil-piperidina 27.03 25 161
canfeno 28.88 42 136
alfa-santalol 28.88 42 220
a-Bisalolol 28.88 41 222
Cis- -Bisabolene 28.88 42 204
piperidina 31.6 33 161
2-mehtyl-piperazina 33.18 36 100

fraccin de metanol
3-Carene 10.12 78 136
1R -pineno 10.12 42 136
1S -pineno 12.20 70 136
-pineno 13.44 43 136
4-Carene 10.45 95 136
-felandreno 10.89 90 136
a-felandreno 10.89 72 136
-mirceno 13.44 46 136
Alcanfor 14.66 94 152
isoborneol 15.17 58 154
endo-borneol 15.17 47 154
borneol 15.45 53 154
ocimeno 20.29 89 136
Piperanol 20.39 97 150
a-Cubebene 20.62 98 204
copaene 21.47 99 204
eugenol 20.85 98 164
Ylanglene 21.78 80 204
a-Muurolene 21.79 62 204
Seychellene 22.31 87 204
2666 AFR. J. Biotechnol.

Tabla 1. Cont.

cariofileno 22.74 99 204

a-Caryophellene 23.66 96 204
alfa-farneseno 22.74 52 204
canfeno 22.91 38 136
-humuleno 23.99 49 204
-guaieno 24.79 64 204
(E, Z) -farneseno 25.06 66 204
cis- -bisaboleno 25.06 38 204
a-Calacorene 25.91 91 200
xido de cariofileno 27.69 50 220
Spathulenol 28.19 90 220
-Panasinsene 28.55 93 204
gamma-Elemene 33.53 15 205

fraccin acetato de etilo

3-Carene 13.18 70 136
(+) 4-Carene 20.25 91 136
-pineno 13.18 64 136
-mirceno 13.18 58 136
ocimeno 20.25 93 136
a-Cubebene 20.58 98 204
copaene 20.58 98 204
Ylanglene 20.58 68 204
a-Muurolene 21.44 45 204
alfa-farneseno 22.46 58 204
cariofileno 22.68 99 204
a-cariofileno 23.61 97 204
xido de cariofileno 31.51 64 220
gamma-Elemene 22.88 96 204
Cubenol 23.02 38 222
thujopseno 23.02 30 204
canfeno 23.61 42 136
a-Muurolene 23.95 43 204
-humuleno 23.95 43 204
longifoleno 24.54 95 204
gamma-Neoclovene 24.82 72 204
a-Calacorene 25.82 94 200
guaieno 28.34 83 204
Spathulenol 30.38 90 220
Limoneno cis xido 31.90 25 152

fraccin cloroformo
-mirceno 13.19 49 136
-pineno 13.19 48 136
-pineno 13.19 43 136
1S--pineno 13.19 43 136
3-Carene 13.19 30 136
4-Carene (1S, 3S, 6R) 13.19 30 136
(+) - 4-Carene 20.24 94 136
ocimeno 20.24 93 136
a-Cubebene 20.58 98 204
Ylanglene 21.78 83 204
 Oben et al. 2667

Tabla 1. Cont.

copaene 21.44 99 204

Neoisolongifolene 22.26 93 204
Seychellene 22.26 89 204
Patchoulene 22.26 86 204
-guaieno 22.26 86 204
-Panasinsene 22.26 64 204
(Z, Z) -farneseno 22.47 89 204
Trans--Bergamotene 22.47 87 204
cariofileno 22.68 99 204
(-) - Aristolene 23.02 89 204
(+) - Epi-bicyclosesqui-phallendrene 23.42 30 204
a-cariofileno 23.61 96 204
a-Phallendrene 23.61 43 136
canfeno 23.61 38 136
a-Muurolene 23.98 52 204
Longifoleno - (V) 24.54 94 204
Thujepsene- (12) 24.54 64 204
-humuleno 24.54 46 204
gamma-Elemene 26.32 55 204
Aromadendrene 26.32 35 204
gamma-Himachelene 26.32 70 204
xido de cariofileno 26.84 87 220
Bergamotol- (Z) --trans 26.84 25 220
Epizonarene 27.13 80 204
-selineno 28.32 90 204
cis--bisaboleno 28,89 90 204
Cis--santalol 28,89 38 220
a-Bisabolol 28,89 38 222
Spathulenol 31.00 50 220
Trans-Longipinocarveol 31.63 60 220
cido oleico 35.12 78 282

Tabla 2. Resumen del anlisis de la toxicidad de contacto mediante el tratamiento de granos.

la desviacin desviacin
Fuente df la desviacin Aprox. PR chi.
media proporcin

Regresin 3 387,74 129,25 129,25 <0,001

Residual 256 693,81 2.71
Total 259 1081.55 4.18

despus de cinco das de tratamiento de granos, mientras que la fraccin de porcentajes de eugenol y piperanol que indujeron una alta mortalidad en el aceite
metanol acuoso produjo% de mortalidad de menos de 50 despus de cinco das esencial. El 0,2 ml / cm del metanol
de tratamiento. Las fracciones de cloroformo y acetato de etilo mostraron muy fraccin mortalidad inducida por ms de 30%
poco mortalidad y no fueron significativamente (P <0,05) diferente del control diferente del control.
(Figura
1). Todas las diferentes dosis de la fraccin de n-hexano del aceite esencial
indujeron 100% de mortalidad despus de cinco das de exposicin. Esta Filtro de toxicidad por contacto de papel

mortalidad podra haber sido debido a los altos porcentajes de sesquiterpenos

hidrocarburos presentes en esta fraccin. fraccin de metanol, por el contrario, Los porcentajes de mortalidad de los insectos registrados despus de cinco das de la
tena exposicin a concentraciones crecientes de voltiles
2668 AFR. J. Biotechnol.

100
20
0ml / grano 40g
80 0ml / grano 40g
0,05 ml / 40 g de grano
15
0,05 ml / 40 g de grano
60 0,1 ml / 40 g de grano
% mortalidad

segundo

% mortalidad
0,1 ml / 40 g de grano 10 0,2 ml / 40 g de grano
40
0,2 ml / 40 g de grano
UN 5
20

0 0

1 2 3 4 5 12345
Tiempo de exposicin (das) Tiempo de exposicin (das)

20 0ml / grano 40g 50 0ml / grano 40g

0,05 ml / 40 g de grano 0,05 ml / 40 g de grano

40
15 0,1 ml / 40 g de grano 0,1 ml / 40 g de grano
do
0,2 ml / 40 g de grano 30
% mortalidad
% mortalidad

re 0,2 ml / 40 g de grano
10

20

5
10

0 0

12345 1 2 3 4 5

Tiempo de exposicin (das) Tiempo de exposicin (das)

Figura 1. el porcentaje de mortalidad de Sitophilus oryzae expuestos a diferentes fracciones de Piper guineense aceite esencial recubierto en los granos de trigo (fraccin de
hexano A-; B- fraccin cloroformo; fraccin de acetato de etilo C- y la fraccin de metanol D-).

aceite en discos de papel de filtro mostr resultados similares. La fraccin de
n-hexano tena un significativamente (P <0,05) mayor mortalidad en S. oryzae y
las dosis de 0,1 y 0,2 ml / cm fueron capaces de inducir% de mortalidad 85 y
100, respectivamente. Los cloroformo, metanol y acetato de fracciones de
acetato eran casi nulas dentro de los primeros tres das, y no fueron
significativamente (P <0,05) diferente del control, provocando una mortalidad
inferior al 50% despus de cinco das de exposicin en disco de papel de filtro
impregnado (Figura 2 ). Hubo una correlacin significativa entre los tratamientos,
la duracin y las concentraciones como se ve a continuacin (Tabla 3).
las pruebas de repelencia
bioensayo de repelencia mediante la prueba de preferencia zona mostr que P.
guineense fracciones del extracto repelidos significativamente S. oryzae con una
repelencia global de 87,5% (Tabla 4). El efecto del aceite voltil en la repelencia
de S. oryzae despus de 3 h de exposicin no fue dependiente de la dosis. La
fraccin de n-hexano produjo el mayor repelencia a
diferentes concentraciones, mientras cloroformo, metanol y acetato de etilo tena
50% de repelencia a las concentraciones ms altas.
DISCUSIN
La composicin de las diferentes fracciones de P. guineense
aceite esencial de frutas en este estudio fue notablemente diferente de los
descritos anteriormente en Nigeria (Oyedeji et al, 2005;.. Owolabi et al, 2013) y
Camern (Jirovetz et al., 2002, Tchoumgougnang et al, 2009 en total.
el
diferentes fracciones, -cariofileno estaba presente en altas cantidades en lugar
de -cariofileno reportados en la literatura. Tal alto contenido no se ha
encontrado en P. guineense
El aceite esencial de Camern hasta ahora. Eugenol era abundante solamente
en la fraccin de metanol. Estos y otros representaban una serie de nuevos
quimiotipos reveladas a partir del anlisis GC-MS. La presencia de
constituyentes tales como aromadendrene, piperazina y piperidina, aunque en
baja cantidad en el n-hexano puede haber contabilizado su
 Oben et al. 2669

100
0ml / cm
0ml / cm
90
0,05 ml / cm
0,05 ml / cm
80 20
0,1 ml / cm 0,1 ml / cm
70 18
0,2 ml / cm 0,2 ml / cm
60 16
% mortalidad

% mortalidad
UN
segundo
50 14

40 12

30 10

20 68

10 24

0 0

1 2 3 4 5 12345
Tiempo de exposicin (das) Tiempo de exposicin (das)

0ml / cm 0ml / cm
0,05 ml / cm 20 0,05 ml / cm
20
0,1 ml / cm 18 0,1 ml / cm
18
0,2 ml / cm 16 re
% mortalidad

16 do 0,2 ml / cm
% mortalidad

14 14

12 12

10 10

68 68

24 24

0 0

1 2 3 4 5 1 2 3 4 5

Tiempo de exposicin (das) Tiempo de exposicin (das)

Figura 2. el porcentaje de mortalidad de Sitophilus oryzae expuestos a diferentes fracciones de Piper guineense aceite esencial impregnado sobre discos de papel de
filtro (fraccin A- hexano; fraccin B- cloroformo; fraccin de acetato de etilo y C- fraccin D- metanol).

Tabla 3. parmetros de correlacin para la toxicidad de contactos por tratamiento de grano y el ensayo de papel de filtro impregnado.

Parmetro 1 2 3 4
Contacto toxicidad por el tratamiento de grano

1 Constante 1,000 -
2 Tratamiento -0,592 1,000 -
3 Las concentraciones -0,558 0,030 1,000 -
4 duraciones -0,554 0,064 -0,006 1,000

ensayo de papel de filtro impregnadas

1 Constante 1,000 -
2 Tratamiento -0,518 1,000 -
3 Las concentraciones -0,547 0,043 1,000 -
4 duraciones -0,612 -0,012 0,003 1,000
2670 AFR. J. Biotechnol.

Tabla 4. efectos repelentes de diferentes fracciones de aceite esencial de Piper guineense en oryzae Sitophylus.

fraccin de extracto Concentracin (ml / cm) % Mean Repelencia clase repelencia

n-Hexano 0.05 80 7,1 IV
0.1 87,5 2,5 V
0.2 72,5 13,8 IV

Cloroformo 0.05 20 14,7 yo

0.1 10 10,8 yo

0.2 50 16,8 III

Acetato de etilo 0.05 45 15,6 III

0.1 28,7 15,6 II
0.2 50 23,8 III

metanol 0.05 22,5 24,3 II

0.1 42,5 9,3 III
0.2 50 18,7 III

Calor" y aroma. P. guineense se ha demostrado que tienen de 5 a 8% piperina
que les da su calor" (Oparaeke, 2006). Tambin contiene alrededor de 31
monosesquiterpenoids que tienen altas propiedades insecticidas debido a su
naturaleza picante (Taponjou et al., 2005). La variabilidad de los diferentes
constituyentes de P. guineense es importante a la luz de su uso como saborizante
efectos de los componentes de este aceite, tales como 1S--pineno, copaeno,
-cariofileno, eugenol, Piperanol y muchos otros (Amvam Zollo et al, 1998;..
Owolabi et al, 2013). Son similares a los reportados por Jirovetz et al. (2002) y
Tchoumbougnang et al. (2009),
en PAG.

y agente medicinal. Por lo tanto la eficacia vara dependiendo de los quimiotipos
utilizados. En el presente estudio, las fracciones de aceite esencial de P.
guineense diferentes niveles exhibidas de txicos y efectos repelentes de S.
oryzae a diversas dosis. Estos efectos pueden ser debido a factores tales como
la composicin qumica de
la planta, as como el insecto
susceptibilidad. Las diferentes dosis de el n-hexano
fraccin caus 100% de mortalidad de S. oryzae en el filtro toxicidad papel
fumigacin y contactos de grano despus de cinco das de exposicin. Los
insectos aparecieron para evitar las zonas tratadas. La mortalidad de los
gorgojos en granos tratados y papel de filtro vari con la dosis de fracciones de
aceite esenciales. Las altas tasas de mortalidad se registraron con la fraccin de
n-hexano a todas las dosis en comparacin con las otras fracciones. La toxicidad
de aceite voltil de P. guineense se atribuye generalmente a la presencia de los
alcaloides, piperina, chavicina y piperidina que se inform de que los principales
componentes activos en P. guineense semillas (Lale y Alaga,
guineense obtenido a partir de Camern y Nigeria. Los resultados demostraron un
fundamento cientfico para la incorporacin tradicional de las semillas secas de
aceites P. guineense en las prcticas de proteccin de granos en las comunidades
rurales de Camern. Sin embargo, existe la necesidad de nuevas investigaciones
sobre este tipo de prcticas para mejorar su eficacia y fiabilidad en las
comunidades rurales. Con las formulaciones de dosificacin adecuadas y correctas
este aceite esencial puede ser explotada en los pequeos agricultores "nivel contra
las infestaciones de insectos en los campos y en el almacenamiento. La mayora de
los aceites son ms eficaces,
menos engorroso y no son
particularmente peligrosos para los consumidores ya que se utilizan en las
preparaciones farmacuticas (Bauer et al., 1990). Tambin son menos caros,
seguro para el medio ambiente e inofensivo para los seres humanos y otros
mamferos. Este estudio concluye que todas las fracciones de las semillas de P.
guineense demostrado efecto txico y repelente en S. oryzae, una plaga de
almacenamiento en Camern. El estudio tambin mostr que la fraccin de
n-hexano del aceite esencial era ms txico para las S. oryzae.

2000). Esto sugiere que la toxicidad de P. guineense no se debi a la ingestin de

granos tratados, pero debido a la asfixia. El aceite
fracciones evocados un muy alto Conflicto de intereses
repelencia contra el insecto, lo que sugiere que los aceites podran haber
contenido una sustancia de olor intenso que caus alta repelencia de los Los autores no declaran ningn conflicto de intereses.
insectos. n-Hexano ms demostr el nivel ms alto de la repelencia
probablemente debido a la presencia de componentes como de piperazina y
piperidina, aunque en muy baja cantidad. Muchos otros investigadores han EXPRESIONES DE GRATITUD
demostrado la toxicidad y repelente
Esta investigacin fue financiada por el liderazgo de Australia

Premios confraternidad ronda 13 y la australiana
Gobierno. Los autores agradecen a la Facultad de Agricultura y Medio Ambiente
de la Universidad de Sydney y todo su personal para proporcionar un espacio de
laboratorio y equipo utilizado. Tambin reconocemos el Dr. Sevilor Kekeunou de
prueba
la lectura de varios proyectos de el
manuscrito.
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