FACULTAD DE MEDICINA
GRADO EN NUTRICIN HUMANA Y
DIETTICA
CURSO 2014/2015
ANLISIS COMPARATIVO DE COMPUESTOS
BIOACTIVOS EN CERVEZA ARTESANAL Y CERVEZA
INDUSTRIAL
RESUMEN .............................................................................................................................. 7
RESUM ................................................................................................................................... 8
ABSTRACT ............................................................................................................................ 9
1. ANTECEDENTES ........................................................................................................... 10
1.1 Historia.................................................................................................................... 10
1.2 Definicin ............................................................................................................... 10
1.3 Tipos de cervezas .................................................................................................... 11
1.4 Diferencias entre una cerveza artesanal y una cerveza industrial ........................... 12
1.5 Materias primas....................................................................................................... 13
1.6 Procesamiento ......................................................................................................... 15
1.7 Variables de elaboracin ......................................................................................... 17
1.8 Compuestos de la cerveza ....................................................................................... 18
2. JUSTIFICACIN ............................................................................................................ 21
3. OBJETIVOS ..................................................................................................................... 22
3.1 Objetivo general ...................................................................................................... 22
3.2 Objetivos especficos .............................................................................................. 22
4. METODOLOGA ............................................................................................................ 23
4.1 CARACTERIZACIN DE LAS MUESTRAS ..................................................... 23
4.1.1 Muestras de cervezas artesanales ............................................................... 23
4.2.2 Muestras de cervezas industriales .............................................................. 27
4.2 MTODOS ............................................................................................................. 29
4.2.1 Protena ....................................................................................................... 29
4.2.2 Fibra............................................................................................................ 30
4.2.3 Fenoles totales ............................................................................................ 31
4.2.4. Capacidad antioxidante ............................................................................. 32
4.3 ANLISIS ESTADSTICO .................................................................................... 32
5. RESULTADOS Y DISCUSSIN .................................................................................... 33
5.1 DIFERNCIAS DE COMPOSICIN ENTRE LAS MUESTRAS ....................... 33
5.1.1 Contenido de protena ................................................................................ 33
5.1.2 Contenido de fibra ...................................................................................... 37
5.1.3. Contenido de fenoles totales y capacidad antioxidante ............................. 40
5.2 EFECTO DE LAS VARIABLES DE ELABORACIN EN EL CONTENIDO DE
COMPUESTOS BIOACTIVOS ................................................................................... 46
6. CONCLUSIONES ............................................................................................................ 50
7. REFERNCIAS ............................................................................................................... 52
NDICE DE TABLAS Y GRFICAS
5
artesanales e industriales, expresado en mg/L de muestra. .................................................... 45
GRFICA 12. Media de la capacidad antioxidante en las muestras de cerveza artesanal e
industrial, expresado en M de Trolox................................................................................... 45
GRFICA 13. Relacin inversamente proporcional entre la densidad inicial y el contenido
de protena de las cervezas. .................................................................................................... 47
GRFICA 14. Relacin proporcional entre la densidad final y el contenido de fibra de las
cervezas. ................................................................................................................................. 48
GRFICA 15. Relacin proporcional entre los grados de amargor y el contenido en fenoles
totales. .................................................................................................................................... 49
GRFICA 16. Relacin proporcional entre los grados de amargor y la capacidad
antioxidante de las cervezas. .................................................................................................. 49
6
RESUMEN
7
RESUM
La cervesa es una de les begudes ms consumides arreu del mn. La producci i consum de
cervesa artesana presenta una tendncia alcista, intentant recuperar la tradici en
lelaboraci, mentre que la cervesa industrial est associada a buscar una major producci,
podent comprometre la qualitat del producte final. Per aquest motiu, es va analitzar la
quantitat de protena, fibra, fenols totals i la capacitat antioxidant, en diferents tipus de
cerveses artesanes i industrials, per tal destablir una comparaci quantitativa i relacionar-los
amb les matries primes que sutilitzen, amb els processos delaboraci i amb diverses
variables que influeixen durant el processat.
Es va obtenir una major quantitat de compostos bioactius en les mostres de cervesa artesana
que en les mostres de cervesa industrial. Aquestes diferencies s atribueixen a les matries
primes i a les diferents etapes del processat. En aquest sentit, algunes cerveses artesanes,
proporcionen fins a un 26% de les recomanacions de fibra i un 5% i un 13% de la ingesta
total de fenols i capacitat antioxidant de la dieta espanyola. En relaci a les variables
delaboraci, a major densitat final, sobtenen cerveses amb una major quantitat de protena,
mentre que a major densitat final, el contingut en fibra augmenta i, a majors graus
damargor, sobtenen cerveses amb un major contingut en fenols i capacitat antioxidant.
8
ABSTRACT
Beer is one of the most consumed drinks in the world. Both production and consumption of
crafted beer show an upward trend, trying to recover the brewing tradition, whilst the
industrially produced beer is aiming at a bigger production, thus ensuring the quality of the
final product. This is why the quantity of protein, fiber, total phenols and antioxidant
capacity were calculated for different types of both crafted and industrial beers, in order to
establish a quantitative comparison and to be able to relate them to the raw ingredients
which have been used, the production process and other different variables which influence
during the process. A larger quantity of bioactive compounds has been obtained from the
craft beer samples tan from the industrially produces ones. The differences are attributed to
aforementioned raw ingredients and also to the different stages of the production process. In
this regard, some craft beers provide up to 26% of the recommended fiber and 5% and 13%
of the total phenol ingestion and antioxidant capacity of the Spanish diet. Regarding the
production variables, the larger the initial density, the bigger the protein count is, whilst the
larger the final density, the fiber content rises and, the bigger bitterness levels, the larger
phenol content and antioxidant capacity beers are produced.
9
1. ANTECEDENTES
1.1 Historia
La cerveza fue producida por primera vez por los sumerios en el sur de Babilonia a finales del
4.000 a.C. La cerveza fue uno de los alimentos ms importantes de la dieta de dicha sociedad,
usndose como moneda de cambio en distintas transacciones.
Civilizaciones como los babilonios y los egipcios, heredaron el arte de elaborar cerveza y le
dieron otras utilidades. Los babilonios la utilizaban como sustancia protectora para evitar el
contagio de la peste, mientras que los egipcios fueron perfeccionando las tcnicas de
elaboracin, aumentando el grado alcohlico para que la cerveza resistiese la venta ambulante
(1).
Con la llegada de la religin cristiana, la fabricacin de cerveza pas a los monasterios.
Disponan de informacin sobre tcnicas ancestrales de elaboracin y controlaban el mercado
de plantas aromticas. En el siglo XII, la cerveza lleg a las ciudades de la mano de los
seores feudales, con el fin de comercializar con ella y usando el lpulo como aromatizante.
Con ellos, apareci la Ley de Pureza de Baviera (2), en la que se recogen los reglamentos para
la fabricacin de cerveza, as como del personal que poda intervenir, dejando de lado a los
monasterios (1).
La revolucin industrial provoc un avance de la tecnologa utilizada, aumentando la
eficiencia y el mercado. Con el descubrimiento de la levadura en 1876 por Luis Pasteur, junto
con el uso de la pasteurizacin, disminuyeron enormemente las infecciones microbianas de la
cerveza, evitando las prdidas (1).
1.2 Definicin
Segn el BOE, la cerveza industrial es una bebida fruto de una fermentacin alcohlica. Se
fabrica mediante el uso de agua, levaduras seleccionadas, de un mosto procedente de malta de
cebada, slo o mezclado con otros productos amilceos transformables en azcares por
digestin enzimtica, lpulo y/o sus derivados y aditivos y coadyuvantes tecnolgicos,
sometidos a un proceso de filtracin y pasteurizacin. En la cerveza artesanal, en cambio, no
se aaden aditivos ni coadyuvantes tecnolgicos y no se somete a procesos de filtracin ni
pasteurizacin, sufriendo una fermentacin secundaria en botella (1,3).
10
Las diferencias que existen entre las cervezas industriales y las artesanales, en cunto a
procesos de elaboracin, se ilustran en la Figura 1.
FIGURA 1. Diagramas de flujo de una cerveza industrial y una cerveza artesanal. Sus
diferencias recaen en el proceso de filtrado y pasteurizacin, a la adicin de aditivos y
coadyuvantes y a la fermentacin secundaria en botella.
Las cervezas se clasifican en tres grandes estilos segn su fermentacin y, por tanto, por las
cepas de levaduras que intervienen. Se denominan Ale, Lager o Lmbicas. (1)
Las levaduras que dan origen a cervezas de estilo ale son del gnero S. cerviciare. Se
denominan levaduras de fermentacin alta porque suben a la superficie del tanque al final de
la fermentacin y realizan su actividad entre 14-25C. Este estilo es originario de Gran
Bretaa, Alemania y Blgica. En Gran Bretaa encontramos los estilos Ale, Stout y Porter;
en Blgica el estilo Trapista, y en Alemania los estilos Weissbier, Weizenbier, Altbier y
11
Klsch. Las levaduras que dan origen a cervezas de estilo lager son del gnero S.
carlsbergensis o S. uvarum. Se designan de fermentacin baja porque se depositan en el
fondo del tanque en las etapas finales de la fermentacin, realizando su actividad entre 4-
12C. En este estilo se encuentran los estilos Pilsener o Pils, Mnchner, Dortmunder, Viena
(Oktoberfest o Mrzen) y Dry (tambin llamadas light). Las levaduras que dan origen a
cervezas de estilo lmbicas son las llamadas levaduras silvestres, ya que no se usan
levaduras altas o bajas, sino que se usan levaduras que hay presentes en el ambiente, dejando
los fermentadores abiertos y produciendo una fermentacin espontnea a temperaturas
inferiores de 15C. Son originarias de Blgica y son propios los estilos Lambic, Gueuze y
Krieken-Lambic (1, 5,6).
Todas las cervezas se elaboran con cuatro ingredientes bsicos, agua, levadura, lpulo y
malta de cebada u otros cereales. No obstante, existen diferencias entre una cerveza artesana
y una industrial. Estas residen en la tecnologa utilizada, la calidad de las materias primas, la
receta del maestro cervecero y sobretodo, en los procesos de elaboracin. Las cervezas
industriales se producen en base a una frmula bsica que busca ingredientes y procesos
econmicamente viables, para ello se utilizan equipos de grandes dimensiones, que
producen cerveza a gran escala en menor tiempo. La cerveza artesana es modificada cuantas
veces sea necesario por el maestro cervecero para dar con un sabor y un aroma
caracterstico, utilizando equipos ms tradicionales que permiten un trato ms lento y atento
(4).
En cuanto a los ingredientes, la cerveza artesana solo se elabora con productos naturales y
nada diferentes de agua, malta de cebada, trigo o centeno, lpulo y levadura. Se elabora en
pequeas cantidades para evitar almacenamientos prolongados ya que no se aaden aditivos
ni coadyuvantes tecnolgicos. La cerveza industrial se elabora con agua, lpulo, levadura y
malta de cebada junto con otros cereales ms econmicos como el arroz, incluso se aaden
azcares sintticos o jarabes para acelerar el proceso fermentativo. Adems se aaden
aditivos y coadyuvantes en los procesos de produccin del mosto y despus de la filtracin,
como colorantes, antioxidantes, estabilizantes, filtrantes y clarificantes, y preparados
enzimticos (3, 4,6).
12
En el procesado de las cervezas artesanales e industriales, existen algunas diferencias
importantes. Por ejemplo, las cervezas artesanales no se pasteurizan, de modo que los
aromas y sabores propios de la receta utilizada se conservan, as como la vida de la levadura
que sigue produciendo modificaciones (vida til corta). Tampoco sufren un proceso de
filtrado, por lo que no se eliminan partculas en suspensin y se obtienen cervezas ms
turbias. Al no realizarse estos dos procesos, sufren una segunda fermentacin en la botella,
ya que la levadura sigue teniendo sustrato que fermentar. Con esto se consigue saturar a la
cerveza de gas carbnico y etanol, originando cervezas fuertes con una graduacin
alcohlica normalmente superior a las cervezas industriales.
A las cervezas industriales se les realiza una pasteurizacin, lo que garantiza una vida til
ms larga, pero hace que se pierdan caractersticas organolpticas de la cerveza, adems de
eliminar las levaduras, por lo que no se producen modificaciones qumicas. Sufren un
proceso de filtrado, de modo que se eliminan todos los microorganismos y partculas en
suspensin, originando cervezas ms claras. Con estos procesos, es poco probable que se
produzca una segunda fermentacin en botella, ya que no existen levaduras que puedan
seguir fermentando. La generacin de gas carbnico es dbil, por lo que se debe inyectar de
forma artificial. La produccin de etanol reside en la cantidad de azcar que contiene la
cebada o en los aadidos (1, 4,6).
La cerveza est elaborada con cuatro elementos bsicos: agua, malta de cebada con o sin
aditivos de otros carbohidratos, lpulo y levadura.
El 95% del peso de la cerveza es agua. Para la elaboracin de la cerveza, hay que tener en
cuenta la presencia de iones calcio, magnesio y bicarbonato del agua (6). El bicarbonato
hace elevar el pH cuando hierve el mosto; los iones calcio interaccionan con el cido
fosfrico que contiene la malta, ste precipita y disminuye el pH del mosto, obtenindose
cervezas menos astringentes y menos coloreadas, mientras que el magnesio tambin reduce
en menor grado el pH debido a su solubilidad. Un desajuste en el pH provocara, entre otras
cosas, una sacarificacin peor, un rendimiento ms dbil, el amargor del lpulo sera ms
agrio y las cervezas seran ms sensibles al desarrollo de fermentos lcticos. En una cantidad
adecuada de iones calcio, las levaduras floculan mejor, favoreciendo la clarificacin del
mosto y de la cerveza. Tambin eliminan el exceso de oxalato durante el almacenamiento,
13
que podra originar turbidez (1,6).
La cebada es el cereal que ms se utiliza debido a que produce menos problemas tcnicos.
Botnicamente, la cebada es una planta perteneciente a la familia de las Gramneas, del
gnero Hordeum del que existen varias especies. La parte importante en cervecera es el
grano. Son redondeados y gruesos, tienen una cascarilla fina y rizada y su color es amarillo
claro, sntoma de buena maduracin en condiciones secas. Contiene protenas, compuestos
fenlicos, fosfatos, vitaminas y, sobretodo, almidn. Del almidn se obtiene el extracto
cervecero, que durante el procesado se transforma en azcar por accin de las enzimas
fosforilasa, -glucosidasa y - y -amilasa (1). Es necesario que los granos sean grandes,
sanos, que no estn partidos, sin pre-germinacin y sin moho u otras infecciones para
obtener un buen producto final. Entre otros granos, el maz normalmente no se maltea
porque su grasa se enrancia y el trigo se usa ms comnmente a escala comercial, pero
durante su germinacin, se desarrollan ciertos microorganismos, dificultando el proceso. Sin
embargo, dependiendo del cervecero o por razones econmicas, es comn el empleo de
adjuntos como arroz, jarabes, smolas o azcares de maz, entre otros (1,7).
El lpulo o Humulus lupulus es una planta de la familia de las Cannabinaceas pero que no
posee propiedades alucingenas. La parte til de esta planta es el cono femenino, que guarda
la glndula lupulina. Estas glndulas contienen todas las resinas y aceites esenciales que
proporcionan el amargor y el aroma que necesita el cervecero. Los lpulos que tienen
semilla (fertilizados) contienen ms resinas que los lpulos vrgenes, por lo que el amargor
es ms intenso cuando se usan lpulos fertilizados. Los lpulos vrgenes tienen una relacin
mayor de aceites, proporcionando a la cerveza caractersticas bsicamente aromticas. Para
poder ser almacenado, se seca con aire caliente para reducir su contenido en humedad. Es
importante evitar el sobrecalentamiento porque causa cambios de coloracin y prdidas de
resina. Una vez concluido el secado, los conos se empaquetan a presin elevada para prensar
las flores y eliminar el aire, evitando oxidaciones (7,8).
Las levaduras son organismos unicelulares y se reproducen por gemacin. En cervecera se
usan las pertenecientes al gnero Saccharomyces por su capacidad de fermentar
energticamente en condiciones de anaerobiosis o semianaerobiosis uno o ms azcares
produciendo etanol y dixido de carbono en menor proporcin (1). Adems de diferenciarse
en el tipo de fermentacin (alta, baja o espontnea), tambin presentan un comportamiento
de floculacin distinto. Las levaduras altas no tienen capacidad de floculacin y tienden a
ser algo hidrofobias, por lo que suben a la superficie del tanque de fermentacin. Las
levaduras bajas se diferencian entre floculantes y no floculantes. Las levaduras no
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floculantes quedan ampliamente distribuidas y descienden lentamente al final de la
fermentacin, y las floculantes, se aglomeran formando flculos que descienden
rpidamente al final del tanque. Finalmente, las fermentaciones espontneas, dependen de
los microorganismos que entren en contacto con el mosto. La formacin de flculos
permiten obtener una cerveza ms clara pero no fermentada tan intensamente, mientras que
las levaduras no floculantes y las de alta fermentacin dan como resultado unas cervezas
ms turbias pero con un grado de fermentacin ms alto (9,10).
1.6 Procesamiento
La elaboracin de cerveza requiere que la cebada o los cereales que vayan a ser utilizados
sean sometidos a un proceso de malteado. El malteado consiste en remojar los granos en
agua potable para aumentar su contenido de humedad, con el fin de que germinen. Si el agua
es demasiado escasa, los granos desarrollan un embrin dbil y, si est en exceso, se produce
una desagregacin y altas prdidas en el malteado o la muerte del germen. Despus del
remojo, es necesario un proceso de secado con aire caliente para frenar la germinacin de
los granos, aumentando as la actividad de los diferentes enzimas presentes en la cebada. En
las etapas finales del secado, el grano se tuesta, produciendo la condensacin del grupo
amino de las protenas presentes. La intensidad del secado/tostado depende de la cerveza
que se quiera obtener. Finalmente, se produce una desgerminacin para eliminar sustancias
que perjudicarn al mosto (sabor amargo) y se almacena. En la industria cervecera el
proceso de malteado se realiza in situ, ya que cuentan con los equipos necesarios para
llevarlo a cabo, pero las microcerveceras, carecen de ellos, por lo que es necesario obtener
la materia prima ya malteada (1, 7,8)
El primer paso del procesado de la cerveza es la produccin del mosto. Se realiza una
molienda de la malta para facilitar la extraccin el proceso. La extraccin se utiliza para
obtener un lquido que contenga todas las substancias solubles necesarias para la produccin
de la bebida. En este proceso se degradan compuestos nitrogenados, casi totalmente el
almidn y los compuestos fenlicos presentes sufren reacciones de oxidacin y precipitan
junto con protenas. Para poder obtener un mosto que contenga el mximo posible de
extracto y que posea un nivel bajo de turbidez, se realiza un filtrado y un lavado del mosto.
Una vez finalizado este proceso, se lleva a cabo una coccin y un lupulado. La coccin se
realiza para inactivar y esterilizar el mosto, para la coagulacin de protenas y taninos y
formacin del color. El lupulado aporta los sabores amargos, mejora y suaviza la espuma de
la cerveza y aade aceites esenciales y taninos. Despus, se procede a su clarificacin,
15
enfriamiento y aireacin. Para disminuir la turbidez del mosto se clarifica mediante distintos
procesos como centrifugacin o filtracin. Una vez clarificado, el mosto debe enfriarse para
evitar oxidaciones y sabores indeseables, y ser aireado para que las levaduras puedan tener
el suficiente oxgeno para crecer (1).
Es en este perodo cuando el mosto est listo para que se lleve a cabo la fermentacin.
La fermentacin alcohlica es el proceso por el cual las levaduras transforman el mosto en
alcohol, dixido de carbono y otros subproductos que contribuyen a las caractersticas de la
cerveza (8). Durante las primeras fases de la fermentacin, el mosto debe contener suficiente
oxgeno disuelto para permitir a las levaduras sintetizar los lpidos esenciales para la
membrana celular, ya que la falta de oxgeno provoca fermentaciones deficientes (9). Otros
factores que pueden afectar a la fermentacin son la calidad y el tipo de levadura, dosis de
siembra y crecimiento celular, temperatura y equipos usados.
Durante este proceso, a parte de la formacin de alcohol y en menor grado CO2, se forman
otros metabolitos como steres, aldehdos, cetonas, cidos orgnicos, compuestos azufrados
y fenlicos.
Una vez finalizada la fermentacin, el producto obtenido no es del todo cerveza, ya que
contiene partculas en suspensin, poca carbonatacin, sabor inmaduro e inestable
microbiolgicamente. Para ello, la cerveza se somete a una maduracin (guarda o
fermentacin secundaria) y a un filtrado (solo en el caso de un procesamiento industrial).
Durante la maduracin, se busca un sabor agradable, saturar la cerveza con dixido de
carbono, madurar la cerveza en ausencia de aire y permitir a las materias en suspensin
poder ser eliminadas por decantacin. El momento en el que hay que transferir la cerveza a
los tanques de maduracin, se conoce gracias a la presencia de diacetilo, un compuesto que
se origina durante la fermentacin principal. Para poder ser transferida, la cerveza requiere
unos niveles de diacetilo de <0,1mg/L. El tiempo en el que la cerveza estar madurando,
depende del maestro cervecero y de la receta utilizada (8). Despus de la maduracin, debe
realizarse un proceso de filtracin para eliminar microorganismos y partculas en
suspensin, para conseguir una cerveza limpia y clara, mediante filtracin.
Los procesos finales de procesado de la cerveza son el envasado (en cervezas artesanas, el
proceso final es la segunda fermentacin en botella) y la estabilizacin biolgica o
pasteurizacin (slo en cervezas industriales). Los materiales que se utilizan normalmente
para el envasado son el vidrio y el metal, por ser qumicamente inertes. La pasteurizacin se
realiza en el mismo envase final aunque tambin es posible pasteurizar la cerveza y realizar
a continuacin el envasado, el cual tiene que ser totalmente asptico. Con esto, se reduce la
posibilidad de que existan grandes niveles de microorganismos que puedan alterar el
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producto final (1). En las cervezas artesanales, se elimina la pasteurizacin, de modo que se
mantiene la actividad de la levadura, producindose una segunda fermentacin en la botella.
Para la fabricacin de cerveza hay que tener en cuenta ciertos parmetros para obtener un
buen producto con las caractersticas organolpticas que se esperan con su receta. Cada
cervecero los estudia, utiliza y modifica. Estas variables son la densidad inicial y densidad
final, tiempo y temperatura de fermentacin primaria, maduracin y fermentacin
secundaria en botella y grados de amargor o IBU.
Densidad inicial y densidad final: La densidad inicial es la cantidad de azcar que est
disuelta en el mosto antes de que empiece su fermentacin, mientras que la densidad final es
la cantidad de azcar disuelto que presenta la cerveza cuando la fermentacin ha finalizado.
La densidad puede medirse mediante el uso de un densmetro, basndose en el hecho que
todo cuerpo sumergido en un lquido, desplaza un volumen de lquido de igual peso que el
propio. La densidad puede expresarse en grados plato (P), Brix o en densidad especfica. La
densidad especfica es relativa al peso de un litro de lquido con el azcar disuelto. La
densidad especfica del agua pura es 1,000, por lo que cuando se indica que un mosto tiene
una densidad especfica de 1,045 significa que hay 45 gramos de azcar disueltos en un litro
de lquido, ya sea al inicio o al final de la fermentacin (7). Estas variables estn
estrechamente ligadas con el grado alcohlico de la cerveza. El grado alcohlico es el
nmero de volmenes de etanol disueltos en 100 volmenes de bebida. Conociendo la
densidad inicial del mosto, se puede calcular el grado alcohlico del que va a disponer
nuestra cerveza, porque se conoce la cantidad de azcar que va a estar disponible para las
levaduras y que va a ser transformado en alcohol y por consecuencia, conocer tambin la
densidad final (4). Normalmente, las cervezas artesanas tienen ms grados que las cervezas
industriales, se cree que es debido a la cepa de levadura utilizada, a la temperatura de
fermentacin primaria, aireacin, dosis y condiciones de siembra de la levadura y a la
calidad de las materias primas (11,12).
17
empezando a 15-17C y aumentando progresivamente hasta 20-22C durante 3 o ms das, y
para levaduras bajas de 6-14C durante 8-20 das (1).
Maduracin (guarda o fermentacin secundaria): Es el proceso despus de la
fermentacin primaria, al que debe someterse la cerveza para obtener las caractersticas
organolpticas y de composicin propias, una gasificacin ms fuerte, mejor espuma, mejor
sabor y estable fsica y microbiolgicamente.
Tiempo y temperatura de maduracin: Depende de la receta utilizada pero comnmente
7- 30 das a temperaturas bajas de 7C (1).
Fermentacin secundaria en botella: Es la que tiene lugar una vez se ha envasado la
cerveza, la cual contiene levaduras metablicamente activas y carbohidratos an
fermentables. Normalmente este tipo de fermentacin se realiza en botella o en barriles,
siendo propia de las cervezas artesanas (9).
Tiempo y temperatura de fermentacin secundaria en botella: Depende de la levadura y
del grado de alcohol que se haya producido en la fermentacin primaria, pero normalmente
se realiza a 12-17C durante una o ms semanas.
Grado IBU o grado de amargor: Los grados IBU son indican la cantidad de -cidos
extrados del lpulo y convertidos en sustancias amargas solubles durante la ebullicin del
mosto. Los -cidos se determinan por medio de titulacin conductimtrica con una
solucin de acetato de plomo. Normalmente, las cervezas artesanas presentan grados de
amargor superiores debido a la cantidad de lpulo usado y su origen, mtodo de adicin, de
la coccin, el pH, tiempo de permanencia en el tanque (7).
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COMPUESTOS CONCENTRACIN
Agua 918/1000g
Carbohidratos 33,8g/L
Las materias primas que son fuente principal de compuestos fenlicos, los cuales ejercen
capacidad antioxidante, son la cebada y el lpulo. En la cebada, y por consiguiente la
malta, contiene estos compuestos en forma de polmeros. Sus funciones no se conocen
claramente, pero se cree que colaboran en la regulacin de la contaminacin por
microorganismos y como reguladores endgenos de crecimiento. Pero para el cervecero, la
caracterstica ms importante de los compuestos fenlicos de la malta es su capacidad para
actuar como taninos o sus precursores, los cuales precipitan junto a las protenas. Esta
interaccin es importante en la formacin de precipitados durante el hervido de la malta con
el lpulo y el subsiguiente enfriamiento, y en la formacin de enturbiamientos en la cerveza
(1). En el lpulo, los compuestos fenlicos residen en sus resinas y aceites esenciales. Esta
materia prima contiene un compuesto llamado xanthohumol, que durante el proceso de
19
elaboracin de la cerveza es transformado en su forma isomrica y representa la mayor parte
de compuestos fenlicos de la cerveza. Este compuesto tiene capacidad antioxidante y se
sugiere que posee actividad antiinflamatoria, previniendo el cncer de prstata, reduciendo
los sntomas de la menopausia y reduciendo el riesgo de padecer osteoporosis (13, 14).
Existen estudios que defienden que el consumo moderado de cerveza disminuye el riesgo de
padecer enfermedades cardiovasculares, cncer, diabetes tipo 2 e hipertensin, aumenta los
niveles de colesterol HDL y disminuye los niveles de LDL, atribuyndose a la capacidad
antioxidante que poseen los compuestos fenlicos de la cerveza y a su contenido en alcohol
(15, 16, 17).
La cerveza es rica en minerales como calcio, magnesio, sodio, potasio, hierro zinc y silicio,
y vitaminas del grupo B, proveniente de la cebada, el agua y el lpulo. En particular, la
cebada contiene cantidades importantes de silicio (aproximadamente 20 mg/L), el cual est
involucrado en el crecimiento y desarrollo de los huesos (18,19).
El contenido de fibra diettica en cerveza es bajo, aproximadamente de un 2 g/L, la cual
proviene bsicamente de la cebada y del lpulo. La cerveza aportara entre 1,6-5% de la
ingesta diaria recomendada. La fibra de la cerveza retarda la evacuacin gstrica, generando
una mayor sensacin de saciedad y haciendo ms eficiente la digestin y absorcin del
alimento. Llega intacta al colon donde es fermentada totalmente por las bacterias colnicas y
produce hidrgeno, metano, dixido de carbono, cidos grasos de cadena corta, cido
actico, butrico y propinico. Al ser muy fermentable favorece el crecimiento de la flora
bacteriana, aumentando el volumen y consistencia de las heces. Adems, la fibra soluble es
capaz de disminuir la absorcin de grasas y azcares de los alimentos, lo que podra
contribuir a regular los niveles de colesterol y de glucosa en sangre (20, 21).
El contenido de protena en una cerveza es bajo y proviene de la cebada (o cereales). Las
protenas son esenciales porque ejercen actividad enzimtica, aseguran el crecimiento de las
levaduras y juegan un papel clave para la calidad y estabilidad de la espuma, formando una
pelcula visco-elstica alrededor de las burbujas de gas (9). Sin embargo, niveles altos de
protena (>13%), producen menor mosto fermentable, debido a que la protena reemplaza al
almidn en el grano, siendo ms difcil de degradar y, niveles bajos comprometen la
suavidad y la estabilidad de la espuma (1). No obstante, durante el proceso de malteado las
protenas pasan al germen, por lo que en la etapa de desgerminacin, el contenido en
nitrgeno disminuye. El etanol mejora la formacin de espuma pero disminuye su
estabilidad, por eso es importante que cervezas con una graduacin alcohlica alta, tengan
una buena proporcin de protena (23, 24, 25).
20
2. JUSTIFICACIN
Existen numerables estudios que recogen los efectos beneficiosos del consumo moderado de
cerveza, asociados a su composicin nutricional. Por ello, este anlisis trata de determinar el
contenido en protena, fibra, fenoles totales y capacidad antioxidante que contienen distintas
muestras de cervezas artesanales e industriales, para averiguar en qu proceso se puede
intervenir para conseguir mayores niveles. Con esto, se podran potenciar las propiedades
funcionales de la cerveza y ofrecer a la poblacin un producto ms recomendable.
21
3. OBJETIVOS
Relacionar el contenido en compuestos bioactivos con las materias primas y las etapas
de filtrado y pasteurizacin que se usan en la elaboracin de cerveza artesanal e
industrial.
22
4. METODOLOGA
23
4. MATA-ELEFANTES: Cerveza artesana de fermentacin
alta y estilo Indian Pale Ale. Elaborada con agua, malta
de cebada, trigo ecolgico de Tarroja de Segarra, lpulo
y levadura. Presenta un aroma intenso a lpulo,
caramelo y malta tostada. De color cobre liviano y
ligeramente turbia. Sabor fuerte a lpulo, la malta
muestra un sabor a pan, bizcocho tostado y toffe, siendo
seco y amargo.
24
7. BLEDER DRAC: Cerveza artesana de fermentacin baja y estilo
European Pale Lager. De estilo europeo, est elaborada con malta de
cebada, agua, lpulos europeos y levadura. Presenta un aroma fresco
y lupulizado. Es de color miel con una espuma blanca, densa y
compacta. El sabor es muy amargo con un final seco.
25
Las caractersticas y variables de elaboracin de cada muestra artesanal quedan recogidas en
la Tabla 2.
1 2 3 4 5 6 7 8
Densidad 1050- 1045- 1040- 1050- 1044- 1044- 1063 1051
inicial 1075+ 1060+ 1052
1075 1052 1056
Densidad final 1010- 1010- 1008- 1010- 1010- 1010- 1010 1010
1022+ 1015+ 1013
1018 1014 1014
26
4.2.2 Muestras de cervezas industriales
27
4. SAN MIGUEL: Cerveza industrial de baja fermentacin y estilo
Blonde Lager (American Standard Lager). De estilo americano
y elaborada con agua, malta de cebada, lpulo y levadura.
Presenta un aroma escaso a malta y a lpulo con un leve toque
frutado. Color pajizo muy plido, con una espuma blanca y
poco resistente. El sabor es fresco y seco, ligeramente amargo.
Los niveles altos de carbonatacin proporcionan una ligera
acidez.
28
Las caractersticas y variables de elaboracin de cada muestra industrial queda recogido en
la Tabla 3.
1 2 3 4 5
Densidad 1063 1040 1040 1040 1040
inicial
Densidad final 1010 1004 1004 1004 1004
Fermentacin 5 das a 13C 5 das a 13C 5 das a 13C 5 das a 13C 5 das a 13C
primaria
Maduracin 30 das a 7C 30 das a 7C 30 das a 7C 30 das a 7C 30 das a 7C
Grado de 25+ 20 20 15 35
amargor
Grado 7,2% 5,4% 5,4% 0,5% 5%
alcohlico
4.2 MTODOS
muestras para desgasificar la cerveza durante cinco minutos a 30 revoluciones fijas. Los
tubos de centrfuga se mantuvieron abiertos durante ste proceso para evitar la evaporacin
4.2.1 Protena
Se basa en la unin especfica del colorante Coomassie blue G-250 (CBBG) o reactivo de
29
Bradford con las protenas disponibles de las muestras a analizar. El CBBG en solucin cida,
existe en dos formas, una azul y la otra naranja. Las protenas se unen a la forma azul para
mientras que el colorante libre tiene una absorbancia mxima de 470 nm.
La determinacin del contenido proteico requiere una comparacin del valor de absorbancia
de la muestra con las obtenidas, a partir de las cantidades conocidas de protenas, con el que
se construye una recta de calibracin; a mayor cantidad de protenas, mayor desarrollo y, por
- 40L utilizando cantidades conocidas de albmina srica (0,1 g/L). Finalmente, se realiz
4.2.2 Fibra
El mtodo que se utiliz para medir la cantidad de fibra existente en los distintos tipos de
TAMPONES ENZIMAS
HCl- KCl 0,2M pH 1,5 Pepsina pH 1,5
Tris-maleato 0,1M pH 6,9 -amilasa pH 6,9
Fosfato 0,1M pH 7,5 Pancreatina pH 7,5
Acetato de Sodio 0,4M pH 4,75 Amiloglucosidasa pH 4,75
Para la digestin in vitro por muestra se pesaron 300 L y se aadi 10 mL de tampn HCl-
KCl. Se ajust el pH a 1,5. Se aadi 0,2 ml de la enzima pepsina (pH 1.5, Merck 7190) y se
incub durante una hora a 40C. Seguidamente, se enfriaron las muestras y se introdujo 4,5 ml
30
de tampn fosfato, ajustando el pH a 7,5. Se agreg 1 ml de la enzima pancreatina (pH 7.5,
Sigma P-1750) y se volvi a incubar durante seis horas a 37C. Una vez terminado este
a este pH. Se agreg 1 mL de -amilasa (pH 6,9 Sigma A-3176) y se dej incubando durante
16 horas a 37C.
Dialysis Tubing Visking Medicell International Ltd., London, U.K.) sumergindolos en agua a
25C, durante 48 horas a un flujo de agua de 7 litros/hora. Una vez concluida esta parte, se
minutos. Para determinar el contenido de fibra soluble, se midi como azcares reductores
utilizando el reactivo DNS o cido 3,5 dinitrosaliclico. Este reactivo tiene la capacidad de
oxidar los azcares reductores que poseen extremos carbonilos fcilmente oxidables dando
resultados colorimtricos que se pueden medir con una longitud de onda de 530nm en el
DNS y una vez mezclado, se aadi 1 mL de agua destilada. Se incub a 100C durante 10
530 nm.
reactivo (oxidante) es de color amarillo y al ser reducido por los grupos fenlicos (reductores)
da lugar al caracterstico color azul propio de las reacciones con estas substancias. Por este
(75 g/L) y 560 L de agua destilada, dejando reaccionar durante una hora. Se construy la
recta de calibracin de 0 a 400 ppm de cido glico, para lo que se disolvi 0,0436 g de cido
El mtodo de medicin de capacidad antioxidante FRAP se basa en el poder que tiene una
sustancia antioxidante, en este caso, la cerveza, para reducir el Fe 3+ a Fe 2+, siendo menos
triazina) porque es un indicador de oxidacin del hierro. EL TPTZ es incoloro pero cuando es
Para la preparacin del reactivo FRAP se mezcl 10 ml de tampn acetato, 1 ml del TPTZ
prepar aadiendo 0.0064 gr de Trolox con 25 ml de agua destilada. Para proceder a la lectura
del reactivo FRAP. Se dej reposar durante 30 minutos y se evalu la absorbancia a 595 nm,
Los resultados se presentan como media +/- desviacin estndar como medida de dispersin
necesario para establecer una relacin lineal entre dos variables cuantitativas, como son los
32
5. RESULTADOS Y DISCUSSIN
33
GRFICA 1. Contenido de protena en las distintas muestras de cervezas artesanales,
expresado en mg/mL de muestra.
En la grfica 2, se indican los niveles de protenas que presentan las cervezas industriales
analizadas. Guiness con 0,66 mg/mL, es la que contiene ms protena y San Miguel 0,0% con
0,04 mg/mL la que tiene menos. Las dos muestras estn elaboradas con malta de cebada
(10,6% de protena), pero Guiness sufre un proceso de secado/tostado ms largo que San
Miguel 0,0% , por lo que la coagulacin proteica es ms eficaz.
Las cervezas 0,0% son sometidas a distintos mtodos para poder extraerles el alcohol, como
por ejemplo, el destilado, el dializado y la smosis inversa. El destilado es el mtodo que se
usa para separar el etanol de la cerveza usando calor. Se cree que ste proceso produce pocas
prdidas de compuestos nitrogenados porque no suelen ser voltiles como el etanol,
permaneciendo en la cerveza. En cambio, en el dializado y en la smosis inversa, se realiza la
difusin de molculas a travs de membranas especiales o membranas semipermeables, de
manera que las molculas pequeas cmo el agua y el alcohol pasan a su travs. De modo que
sera posible que determinados compuestos nitrogenados no pudieran pasar a travs de las
membranas, siendo excluidos del producto final. Por este motivo, los niveles bajos de San
Miguel 0,0% se atribuyen ms al dializado o bien, a la smosis inversa, que al destilado. No
obstante, otra de las formas para obtener un producto final con bajo contenido en alcohol, es
frenar la fermentacin mediante el uso de mostos con pocos azcares fermentables o separar
la levadura por centrifugacin o filtracin para producir menores cantidades de etanol. Si esta
34
cerveza hubiese sufrido una parada de su fermentacin, tendra un porcentaje de protena ms
elevado, ya que para conseguir un mosto poco fermentable, sera necesario utilizar cereales
con poco almidn, porque la protena lo sustituye en el grano. De este modo, el porcentaje
proteico seria mayor y se producira menor grado de etanol. Pero segn los resultados
obtenidos, el hecho de que San Miguel 0,0% contenga niveles tan bajos de protena se
atribuyen al dializado o a la smosis inversa, y al proceso de secado/tostado ms largo al que
se somete Guiness (1).
36
5.1.2 Contenido de fibra
37
En la grfica 5, se muestran los niveles de fibra que contienen las muestras de cervezas
industriales. Voll-Damm es la que presenta ms cantidad con 3,85 mg/mL y San Miguel
0,0% la que presenta menos con 1 mg/mL. Voll-Damm est elaborada con malta de cebada,
arroz y maz, mientras que San Miguel 0,0% solo presenta malta de cebada. Las diferencias
en su contenido en fibra, pueden deberse a que, en Voll-Damm, los cereales que se utilizan
para el malteado tienen ms fibra o bien, que se le aade poca cantidad de levadura, de
modo que se produce una fermentacin leve de la fibra, con lo que permanece en la cerveza
en mayor cantidad. Hay que tener en cuenta que San Miguel 0,0% podra sufrir una
dializacin o una smosis inversa para eliminar el etanol, adems del filtrado, lo que podra
disminuir an ms su contenido en fibra (7).
39
5.1.3. Contenido de fenoles totales y capacidad antioxidante
40
GRFICA 7. Contenido de fenoles totales en las distintas muestras de cervezas artesanales,
expresado en mg/L de muestra.
41
En el grfico 9 se ilustra la cantidad de fenoles totales y en la grfica 10 la capacidad
antioxidante de las muestras industriales. Voll-Damm es la que presenta mayores niveles de
fenoles totales con un 418,7 mg/L, mientras que San Miguel es la que presenta menos con
234,6 mg/L. Estas diferencias pueden ser debidas a la calidad del lpulo y no al procesado,
porque es similar. Voll-Damm podra estar elaborado con mayores cantidades de lpulos, con
una mayor cantidad en resinas y aceites esenciales con mayores niveles de compuestos
fenlicos. Debido a esto, se cree que Voll-Damm posee un grado de amargor y aroma muy
superior al que presenta San Miguel. En cambio, San Miguel podra contener lpulos de una
calidad inferior, con menor cantidad de fenoles y con cantidades leves de resinas y aceites,
por ello el grado de amargor es mucho ms bajo y prcticamente carece de aroma.
La muestra que present tener ms capacidad antioxidante fue Voll-Damm con 2907 M de
Trolox y San Miguel 0,0% con 1355 M de Trolox. Estas diferencias pueden ser debidas a la
calidad del lpulo y al proceso de dializado u smosis inversa que recibe San Miguel 0,0%.
No se considera que la cantidad de levadura pueda influir a generar ms capacidad
antioxidante durante los procesos finales de elaboracin, porque las cervezas industriales
son sometidas a una pasteurizacin, eliminando a estos organismos. La menor capacidad
antioxidante que posee San Miguel 0,0% podra atribuirse a los procesos de elaboracin que
sufre y a la calidad del lpulo con la que se elabora (ya que presenta menores niveles de
compuestos fenlicos que Voll-Damm, con 243,6 mg/L). Por el contrario, Voll-Damm
presenta mayores niveles de capacidad antioxidante y tambin, es la muestra de cervezas
industriales que mayor contenido en fenoles totales posee (418,7 mg/L).
44
GRFICA 11. Media del contenido de fenoles totales en las muestras de cervezas
artesanales e industriales, expresado en mg/L de muestra.
45
5.2 EFECTO DE LAS VARIABLES DE ELABORACIN EN EL
CONTENIDO DE COMPUESTOS BIOACTIVOS
En la grfica 13, se muestra la relacin que existe entre la densidad inicial y el contenido de
protena. Segn los resultados obtenidos, existe una relacin inversamente proporcional, por
lo que a mayor densidad inicial del mosto, menor contenido proteico o bien, a mayor
cantidad de protena, el mosto presentar una densidad inicial menor. Esto es debido a que a
niveles altos de protena, se sustituye al almidn en el grano, dificultando su extraccin y
reduciendo la cantidad de azcar fermentable que se libera al mosto, ocasionando
densidades iniciales bajas. Adems, provoca una disminucin del proceso fermentativo y la
produccin de etanol y dixido de carbono. Por el contrario, a niveles bajos de protena, la
cantidad de azcar proveniente del almidn ser mayor, con lo que se obtendr un mosto con
mayor extracto fermentable y por consiguiente, una densidad inicial mayor. No obstante, en
cervecera son necesarios niveles ptimos de protena (<13%) para que se pueda obtener un
mosto con el suficiente azcar fermentable y hacer frente a todas las actividades enzimticas
que se van a producir durante el procesado de la cerveza, la nutricin de las levaduras y una
46
buena formacin de espuma (1,10). Si se desea obtener una cerveza con niveles elevados de
protena, seran necesarios mayores niveles de densidad inicial, utilizando cereales con
porcentajes proteicos elevados, aunque al contener poco almidn, habra poco azcar de
forma natural, con lo que se cree que habra que aadirlos de forma sinttica para que las
levaduras pudieran llevar a cabo sus funciones. Es por ello, que debe existir una proporcin
ideal de sustrato fermentable, que permita la baja utilizacin de protenas como fuente de
energa para las levaduras. No obstante, hay que tener en cuenta que las modificaciones, la
utilizacin y las prdidas de estos compuestos durante todo el proceso de elaboracin, es
constante. Tambin es posible que las caractersticas organolpticas de la cerveza, se vieran
comprometidas.
47
necesaria una densidad inicial elevada, aunque no fue significativo). Con esto, se obtendran
cervezas con mayor porcentaje de fibra, pero presentaran mayor turbidez.
GRFICA 14. Relacin proporcional entre la densidad final y el contenido de fibra de las
cervezas.
En la grfica 15 se muestra la relacin que existe entre los grados de amargor y los fenoles
totales y en el grfico 16, se muestra la relacin entre los grados de amargor y la capacidad
antioxidante. Segn los resultados obtenidos, existe una relacin proporcional en los dos
casos, por lo que a mayor grado de amargor, mayor cantidad de fenoles totales y mayor
capacidad antioxidante. Esto es debido a que los compuestos fenlicos y, por consiguiente,
la capacidad antioxidante, provienen del lpulo. Esta materia prima contiene xantohumol, la
sustancia que le proporciona el amargor. Por lo que si se usan mayores cantidades de lpulos
ricos en este compuesto y ricos en resinas, se obtendrn mayores grados de amargor, y la
cerveza tendr ms compuestos fenlicos y capacidad antioxidante. Si se desea obtener una
cerveza con buenos niveles en compuestos fenlicos y capacidad antioxidante, se deben
utilizar lpulos con una buena composicin qumica. No obstante, se debe tener en cuenta
que estos compuestos van modificndose y disminuyendo a medida que se les aplican las
distintas tcnicas de elaboracin y adems, se podran obtener cervezas muy astringentes y
turbias, comprometiendo el sabor de la cerveza.
48
GRFICA 15. Relacin proporcional entre los grados de amargor y el contenido en
fenoles totales.
49
6. CONCLUSIONES
2. Des del punto de vista nutricional, el consumo de una racin de cerveza artesanal
(250ml) aportara 0,66 gr de fibra, teniendo en cuenta que la recomendacin de ingesta
de fibra es de 7,5 gr/da (30% del requerimiento total de 25gr/da). Una racin de
cerveza artesanal aportara, en promedio, alrededor de un 9% de lo recomendado. Con lo
cual, cervezas artesanales con elevados contenidos en fibra como Maltrago (7,9
mg/mL), aportaran alrededor de 2gr de fibra, siendo el 26% de lo recomendado. La
misma racin de cerveza artesanal (250 mL) aportara, en promedio, 106 mg de fenoles
correspondiendo al 4% de la recomendacin de la ingesta Espaola (2800 mg/da). Y,
finalmente, el consumo de la misma racin de cerveza artesanal (250mL) aportara, en
promedio, 564 M de Trolox, siendo el 9,4% de la ingesta de capacidad antioxidante
50
medida por FRAP en la dieta espaola (5953 M de Trolox). Resulta interesante que
cervezas artesanales con elevados contenidos en fenoles totales como Maltrago (562,1
mg/L) puedan aportar (por racin de 250 mL), aproximadamente el 5% de ingesta
recomendada, mientras que cervezas artesanales con una elevada capacidad antioxidante
como Dunkel Dunk (3152 M de Trolox) puedan aportar un 13% de la capacidad
antioxidante de la ingesta recomendada.
3. Para obtener una cerveza con niveles altos de protena es necesaria una mayor densidad
inicial, disminuyendo o eliminando el proceso de filtracin y utilizar cereales con una
composicin proteica ptima (<13%) y un mosto rico en azcares fermentables. En
cambio, para producir una cerveza con niveles altos de fibra, es necesaria una densidad
final elevada, utilizando cereales con un buen porcentaje de fibra (12-18%) y
disminuyendo o eliminando los procesos de filtrado, con lo que la cerveza ser ms
turbia. Finalmente, para obtener una cerveza con mayores cantidades en fenoles y por
consiguiente, con una mayor capacidad antioxidante, sern necesarios mayores grados
de amargor, por lo que se necesitarn lpulos de calidad y ricos en resinas. Con esto, se
podr ofrecer una cerveza con mayor contenido en protena, fibra, fenoles totales y
capacidad antioxidante.
51
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