Reaksi biokimia

Kuman ini dapat mencairkan gelatin dan tidak membentuk H2S. Indol (-) dan kadang-
kadang terjadi false indol (+). Hal ini, terjadi bila dipakai reagensia Erlich dan sebaiknya
memakai reagensia dari Kovac. Tidak memecah urea.
Pseudomonas aeruginosa merupakan organisme yang sangat mudah beradaptasi dan dapat
memakai 80 gugus organik yang berbeda untuk pertumbuhannya dan amonia sebagai sumber
nitrogen.
Dapat tumbuh pada perbenihan yang dipakai untuk isolasi kuman Enterobacteriaceae dan
mempunyai kemampuan untuk menolerir keadaan alkalis, jiuga dapat tumbuh pada perbenihan
untuk kuman fibrio. Meskipun, pseudomonas merupakan organisme aerob, tetapi ia dapat
mempergunakan nitrat dan arginin sebagai aseptor elektron dan tumbuh secara an aerob.
Suhu pertumbuhan optimum ialah 35C tetapi dapat juga tumbuh 42C. Hasil isolasi bahan
klinik sering memberikan beta hemolisis pada agar darah.

Pseudomonas aeruginosa adalah satu-satunya spesies yang menghasilkan :

1. piosianin
Suatu pigmen yang larut dalam kloroform. Strain lainnya menghasilkan pigmen fenazin.
2. fluorezen
Suatu pigmen yang larut dalam air. Beberapa strain menghasilkan pigmen darah.

Isolasi Identifikasi
Pseudomonas aeruginosa
1. Penanaman pada media Braint Hert Infision ( BHI )
Sampel yang telah dihomogenkan, diambil 1 mL dengan pipet voloumesteril, kemudian dituang pada
media BHI secara aseptis di inkubasi 37Cselama 24 jam.2. Pembiakan pada media Mac Conkey Agar secara
aseptis diinokulasikan biakan kuman dar i media BHI ke media MacConkey dengan cara diambil 1 ons mata lalu
ditanam secara gores kuadran.Diinkubasi 37C selama 24 jam. Koloni Pseudomonas aeruginosa
dilakukanpurifikasi untuk masing masing koloni ke media Mac Conkey diinkubasi 37C selama 24 jam. Koloni
Pseudomonas aeruginosa pada media ini koloni berbentuk bulat, warna transparan, tepi tidak rata,
konsistensi smooth, diameter 2 3 mm, elevasi cembung bersifat non laktosa ferneter.
2. Pengecatan Gram
 Koloni tersangka dari media Mac Conkey 1 dilakukan pengecatan Gram dengan cara diambil koloni
dengan ose mata secara aseptis, Diletakan pada obyek glass yang sebelumnya telah di bersihkan dengan alkohol
70%,diratakan dan dikeringkan lalu difiksasi, genangi cat gentian violet 2 3 menit, cuci dengan air mengalir,
gengangi cap lugol 1 menit, cuci dengan airmengalir, gengangi alkohol absolut 45 detik, cuci dengan air mengalir,
genangi safranin 3 4 menit, cuci dengan air mengalir, keringkan dan dilihat dibawah mikroskop dengan
perbesaran 1000 kali. Pseudomonas aeruginosa berbentuk batang, bersifat gram negatif

3. Uji Biokimiaa.
Uji Produksi H2S pada media TSIA ( Triple Sugar Iron Agar ) Secara aseptis diinokulasikan biakan
kuman dari media Mac Conkey kemedia TSIA, diambil 1 ons mata ditanam dengan cara digoreskan pada lereng
media dan ditusuk pada dasar media, Inkubasikan selama 24 jampada suhu 37C. Pseudomonas aeruginosa
menghasilkan K/K H2S dangas
4. Uji Indol
Secara aseptis diinokulasikan biakan kuman dari media Mac Conkey ke media Trypthopan borth,
inkubasikan 370 C kemudian ditambah 34 tetes reagen Kofac's melalui dinding tabung reaksi. Hasil positif
ditandai terbentuknya cincin merah. Pseudomonas aeruginosa Pada uji indol negative.
5. Uji MR ( Metyl Red )
Secara aseptis diinokulasikan biakan kuman dari media Mac Conkey kemedia Metyl red, diinkubasikan
37C selama 24 jam, kemudian ditambah3 4 tetes reagen Metyl Red. Hasil positif berwarna merah.
Pseudomonas aeruginosa pada Uji Metyl Red hasil positif
6. Uji VP ( Voges Proskaeur )
Secara aseptis diinokulasikan biakan kuman dari media Mac Conkey kemedia Voges Proskaeur Broth,
inkubasikan 37C selama 24 jam, kemudian tambah3 4 tetes regen naftol 5% dan 3 tetes KOH 40%.
Pseudomonas aeruginosa pada uji VP hasilnya negatif.e. Uji Citrat, motilitis dan Urea Secara aseptis
diinokulasikan biakan kuman dari media Mac Conke y ke media Simon Citrat, Senisolit, Urea Agar, dengan cara
digores kuadarandan ditusuk untuk motilitas, inkubasikan 37C selama 24 jam. Pseudomonas aeruginosa uji
Citrat dan Motil hasilnya positif sedangkan urea hasilnya negatif.
7. Uji Fermentasi Gula gula
 Secara aseptis diinokulasikan biakan kuman dari media Mac Conkey kemedia gula gula seperti glukosa,
sukrosa, laktosa, maltosa, dan manitol inkubasikan pada 37C selama 24 jam. Pseudomonas aeruginosa pada
uji gula gula semuahasil negatif
8. Uji Katalase
Koloni dari media Nutrient Agar dilakukan uji katalase dengan caramengambil koloni tersebut dengan ose
mata secara aseptis, letakan pada obyek glass yang sebelumnya dibersihkan dengan alkohol 70%, ratakan,
kemudian tambah 1 tetes reagen H2O2 3% . Hasil positif ditandai dengan terbentuknya gelembung -gelembung
udara, warna putih. Pseudomonas aeruginosa uji katalase hasilnya positif
9. Uji Oksidase
Koloni Pseudomonas aeruginosa dari media Nutrient Agar dilakukan ujioksidase dengan cara
mengambil koloni tersebut dengan ose mata secara aseptis, letakan pada kertas saring yang terletak pada obyek glass
kemudian ditambah 1 tetes 1 1 Dimethyl Para-phenil Hidroklorida 1%. Hasil positif dintandai dengan
terbentuknya warna hitam pada koloni dikertas saring. Pseudomonas aeruginosa pada uji oksidase hasil
positif.