Trabajo científico

Patrones de sensibilidad
de Staphylococcus
pseudintermedius aislados de
infecciones cutáneas en el perro

Escribano C. 1, Ordeix L. 1, 2
, Pol G.1, Puigdemont A.1, Brazis P.1
1
Univet S.L. Servicio de Diagnóstico Veterinario. Edificio Astrolabio. Av Cerdanyola nº 92. 08172. Sant Cugat del Valles.
Barcelona
2
Ars Veterinaria, Servei de Dermatologia. c/ Cardedeu 3, Barcelona.

Introducción croorganismos implicados. En concreto, la aparición de

Staphylococcus sp es un género de microorganismos
constituido por cerca de 40 especies diferentes, de mor-
fología cocal de un diámetro aproximado de 1µm, que
se aíslan a partir de mucosas y piel en mamíferos. A pe-
sar de que forman parte de la flora normal de la piel,
bajo determinadas condiciones pueden comportarse
como patógenos. Las principales especies patógenas
en el hombre y en los animales de compañía, S. aureus,
S. pseudintermedius y S. hyicus, son capaces de sinteti-
zar el enzima coagulasa (especies coagulasa positivas).
Las especies coagulasa negativas, S. epidermidis, S. sa-
prophyticus, se comportan como comensales, llegando a
causar infecciones de forma muy ocasional en animales
de compañía.
En dermatología veterinaria, Staphylococcus pseudinter-
medius es el microorganismo más frecuente, causante
de piodermas. El tratamiento de estas infecciones cu-
táneas, conlleva un uso creciente de antibióticos, que
está provocando la aparición de resistencias en los mi-
cepas de Staphylococcus pseudintermedius resistentes a la
meticilina y, por lo tanto, a todos los antibióticos beta-
lactámicos, supone un serio problema, no sólo para los
animales sino también para el hombre debido al poten-
cial riesgo de zoonosis.
En Univet hemos querido cuantificar la prevalencia
de éstas cepas resistentes, observando además, cuales
son los antibióticos con mayor actividad in vitro fren-
te a ellas.
Objetivo
El objetivo del presente trabajo fue estudiar los patro-
nes de sensibilidad de Staphylococcus pseudintermedius,
aislados en el laboratorio de microbiología de Univet,
a partir de infecciones cutáneas del perro. Para ello, se
testaron diferentes grupos de antibióticos, así como la
oxacilina, como principal antibiótico marcador de la re-
sistencia a la familia de los beta-lactámicos.

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 Patrones de sensibilidad de S. pseudintermedius - Escribano C., Ordeix L. , Pol G., Puigdemont A. y Brazis P.
Foto nº 1. Aislamiento en medio de cultivo rico, agar sangre, de una cepa de Staphylococcus sp.
Material y métodos
Cultivo y aislamiento de Staphylococcus
pseudintermedius
El estudio retrospectivo se realizó a partir de 268 ais-
lamientos de Staphylococcus pseudintermedius cultivados
en Univet durante el periodo comprendido entre enero
de 2009 y abril de 2010. Los aislamientos se obtuvieron
de perros que presentaban infecciones de piel (pio-
dermas superficiales y profundas), en muchos casos
cronificadas.
Para la recogida de las muestras se utilizaron hisopos
con medio de cultivo Stuart- Amies (OXOID), aplicados
sobre la superficie cutánea (a partir de pústulas o colla-
retes epidérmicos). En los casos de infecciones cutáneas
profundas, las muestras se recogieron mediante biopsia
y en condiciones de esterilidad para su posterior cultivo.
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El envío de las muestras desde los centros veterina-
rios hasta el laboratorio de Microbiología de Univet
se realizó en menos de 24h y a temperatura am-
biente.
Las muestras fueron procesadas para el aislamiento e
identificación de las cepas de Staphylococcus pseudin-
termedius. Para ello, se sembraron en medio de cultivo
rico en nutrientes como es el Agar sangre (OXOID).
(Foto 1).
Las colonias compatibles con Staphylococcus sp, fueron
identificadas como Staphylococcus intermedius utili-
zando galerías comerciales de identificación específicas.
(ID 32 Staph. Biomerieux) (Foto 2).
En base a ello y según las recomendaciones de diferen-
tes autores 1, las cepas aisladas fueron re-clasificadas
como Staphylococcus pseudintermedius.
Trabajo científico

Foto nº 2. Identificación de una cepa de Staphylococcus pseudintermedius. mediante la galería comercial ID 32 Staph (OXOID).

Estudio de la sensibilidad de
Tabla 1. Antibióticos incluidos en el Staphylococcus pseudintermedius.
antibiograma, para el estudio de la
sensibilidad de las cepas de Staphylococcus Una vez realizadas las identificaciones, se llevaron a ca-
pseudintermedius aisladas a partir de
muestras cutáneas. bo las pruebas de sensibilidad de las diferentes cepas
AMINOGLUCÓSIDOS frente a 15 antibióticos. Para ello, se utilizó el método
de difusión en Agar Mueller Hinton (OXOID) o semi-
Amikacina
cuantitativo de Kirby-Bauer siguiendo la normativa
BETA- LACTÁMICOS marcada por el National Committee for Clinical Laboratory
Amoxicilina-clavulánico Standards (NCCLS) a tal efecto 2. (Foto 3).
Cefadroxilo
Cefalexina Tal y como puede observarse en la tabla 1, todos los aisla-
Cefovecina mientos se testaron frente a una batería de 15 antibióticos
diferentes, entre los que se incluyeron representantes
Oxacilina
de antibióticos quinolónicos, beta-lactámicos, sulfonami-
QUINOLONAS das, aminoglucósidos y macrólidos. Además, se probaron
Ciprofloxacina otros antibióticos como la rifampicina y el ácido fusídico.
Enrofloxacina Finalmente, se incluyó un antibiótico marcador de resis-
Marbofloxacina tencia a los beta-lactámicos, la oxacilina, para la detección
MACROLIDOS de los Staphylococcus meticilina-resistentes. (Foto 4).
Clindamicina
Para cada aislamiento de Staphylococcus pseudinterme-
Claritromicina dius, se midió el diámetro del halo de inhibición, en
TETRACICLINAS Doxiciclina milímetros, de cada uno de los antibióticos testados, y
SULFONAMIDAS se contrastó con los valores de referencia presentes en
Trimetoprim- las tablas estandarizadas del NCCLS, a fin de determi-
Sulfametoxazol nar la sensibilidad o resistencia del microorganismo.
OTROS
Acido fusídico
Resultados
Rifampicina
De las 268 cepas de S. pseudintermedius aisladas en
Univet durante el período de estudio, el 70% fue-

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 Patrones de sensibilidad de S. pseudintermedius - Escribano C., Ordeix L. , Pol G., Puigdemont A. y Brazis P.

Tabla 2.Resultados de sensibilidad para cada uno de los antibióticos utilizados en el

estudio. Se muestran los porcentajes de aislamientos resistentes para cada uno de de los
antibióticos, en relación al número total de cepas testadas (ntotal= 268).
AMINOGLUCÓSIDOS
Amikacina 1.1 % (n= 3)
BETA –LACTÁMICOS
Amoxicilina-clavulánico 38.4% (n= 103)
Cefadroxilo 44.7% (n= 120)
Cefalexina 50% (n= 134)
Cefovecina 39.1% (n= 105)
Oxacilina 35.8% (n= 96)
QUINOLONAS
Ciprofloxacina 38% (n= 102)
Enrofloxacina 40.3% (n= 108)
Marbofloxacina 40.3% (n= 108)
MACROLIDOS
Clindamicina 41.8% (n= 112)
Claritromicina 39.9% (n= 107)
TETRACICLINAS
Doxiciclina 38% (n= 102)
SULFONAMIDAS
Trimetoprim-Sulfametoxazol 56.3% (n= 151)
OTROS
Acido fusídico 8.2% (n= 22)
Rifampicina 4.8% (n= 13)

Foto nº 3.Test de sensibilidad frente a diferentes antibióticos en Agar Mueller Hinton (OXOID) para una cepa de Staphylococcus pseudintermedius.

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Trabajo científico
Foto nº 4. Resultado de un test de sensibilidad a la oxacilina para una cepa de Staphylococcus pseudintermedius meticilina resistente
previamente aislada.
ron resistentes a alguno de los grupos de antibióticos
testados: quinolonas, beta-lactámicos, sulfonamidas,
aminoglucósidos y macrólidos. Así, sólo un 30% de ce-
pas fueron sensibles a todos los antibióticos (datos no
mostrados).
En la tabla 2, se resumen los resultados obtenidos para
cada uno de los antibióticos testados. Se muestran los
porcentajes de cepas resistentes a cada uno de ellos, res-
pecto al total de aislamientos.
Entre los antibióticos frente a los que los microorga-
nismos mostraron una mayor resistencia, destacan la
cefalexina 50% y el cefadroxilo 44.7%, cefalosporinas
de primera generación, utilizadas como antibióticos de
primera elección.
Los datos de este estudio indican que del total de 268
aislamientos de Staphylococcus pseudintermedius estudia-
dos, 96 de ellos (35.8% del total) fueron aislamientos
8
meticilina-resistentes (resistentes a la oxacilina y por
extensión a los diferentes beta-lactámicos testados),
Además, 56 de éstas cepas meticilina resistentes (20.8%
del total de cepas) resultaron ser multiresistentes, es
decir, mostraron resistencia a más de 4 familias de
antibióticos diferentes (quinolonas, macrólidos, amino-
glucósidos, o sulfonamidas).
Finalmente, los antibióticos con mayor actividad in
vitro frente a las cepas multi-resistentes fueron la
amikacina, la rifampicina y el ácido fusídico, con por-
centajes de sensibilidad cercanos al 100% de las cepas
(98,9%, 95,2% y 91,8% respectivamente).
Discusión
Mediante este estudio, se ha podido constatar como
los Staphylococcus pseudintermedius aislados a partir de
 Patrones de sensibilidad de S. pseudintermedius - Escribano C., Ordeix L. , Pol G., Puigdemont A. y Brazis P.
piodermas, muestran de forma frecuente resistencias
frente a antibióticos beta-lactámicos, muy utilizados
en la clínica. Este hecho se hace aun más evidente con
la inclusión en los antibiogramas de la oxacilina como
marcador de resistencia a los beta-lactámicos,
En general, la prevalencia de Staphylococcus sp me-
ticilina-resistentes es muy variable en función del
área geográfica en la que se realice el estudio y la
terapia antibiótica utilizada. Los datos de prevalen-
cia obtenidos en Univet, muestran que en España un
35.8 % de Staphylococcus pseudintermedius son metici-
lina resistentes. Estos datos muestran un porcentaje
significativamente más elevado en comparación con los
obtenidos por otros autores 3 en estudios de 2009, ba-
sados en aislamientos recogidos a partir de perros sanos
no tratados previamente. Se debe al hecho de que la ma-
yor parte de muestras recibidas en Univet e incluidas en
el estudio, corresponde a casos de infecciones cutáneas
crónicas o recurrentes. Por tanto, el incremento en el
porcentaje de Staphylococcus pseudintermedius meticilina
resistentes, podría estar causado por una terapia anti-
biótica no basada en estudios de sensibilidad previos.
porque tu imagen habla de ti
9
Dado que los animales de compañía, se comportan como
un reservorio de cepas de Staphylococcus sp resistentes a la
meticilina y multiresistentes, con el consiguiente riesgo de
zoonosis para el hombre, siempre que la pioderma no res-
ponda a una terapia estándar, se debería realizar un cultivo
y antibiograma. El resultado permitirá saber si estamos
frente a un estafilococo meticilina resistente, y escoger los
antibióticos más adecuados para el tratamiento.
Bibliografía
1. Devriese LA, Hermans K, Baele M, Haesebrouck F. 2009.
Staphylococcus pseudintermedius versus Staphylococcus interme-
dius. Vet Microbiol. Jan 1; 133(1-2):206-7. Epub 2008 Jun 8.
2. Performance Standards for antimicrobial disk and dilution suscepti-
bility tests for Bacteria Isolated From Animals; Approved Standard.
Third Edition. M31-A3. Vol 28. Nº8.
3. Ruscher C, Lübke-Becker A, Wleklinski CG, Soba A, Wieler LH,
Walther B. 2009. Prevalence of Methicillin-resistant Staphylococcus
pseudintermedius isolated from clinical samples of companion ani-
mals and equidaes. Vet Microbiol. Apr 14;136(1-2):197-201. Epub
2008 Oct 31.
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