ABSTRAK

titik skala luas sistem diagnostik perawatan menjanjikan besar untuk deteksi dini kanker pada tahap
dapat disembuhkan dari penyakit. ini reviewdiscusses prospek dan tantangan dari biosensor
elektrokimia untuk diagnosa kanker generasi. biosensor elektrokimia telah memainkan peran
penting penting dalam transisi menuju point-of-perawatan perangkat diagnostik. perangkat listrik
tersebut sangat berguna untuk memberikan informasi diagnostik secara cepat, sederhana, dan
murah fashion di koneksi ke kompak analisa (genggam). bioaffinity elektrokimia yang modern
sensor, seperti DNA atau immunosensors, menawarkan sensitivitas yang luar biasa penting untuk
deteksi dini kanker. Kopling elektrokimia perangkat dengan bahan nano menawarkan kemampuan
multiplexing yang unik untuk pengukuran simultan beberapa penanda kanker. The menarik sifat
perangkat elektrokimia sangat menjanjikan untuk meningkatkan efisiensi diagnosa kanker dan
pemantauan terapi. Dengan pembangunan dan sumber daya lebih lanjut, perangkat portable seperti
diharapkan untuk mempercepat diagnosis kanker, membuat hasil analisis yang tersedia di samping
tempat tidur pasien atau kantor dokter dalam beberapa menit.

PENDAHULUAN

pengantar
1.1. Menuju titik diagnosa kanker hati diagnosis dini kanker sangat penting untuk pengobatan yang
berhasil penyakit. metode yang Sangat sensitif diperlukan mendesak untuk mengukur penanda
diagnosis kanker hadir diultra-rendah tingkat selama tahap-tahap awal penyakit ini. metode tersebut
harus memfasilitasi deteksi dini dan pilihan yang memadai dari pengobatan penyakit dan harus
mengarah pada peningkatan tingkat kelangsungan hidup pasien. Ada tes diagnostik (misalnya, ELISA)
tidak cukup sensitif dan mendeteksi protein pada tingkat yang sesuai untuk stadium lanjut dari
penyakit. Lebih kecil, lebih cepat, dan (satu langkah) perangkat yang lebih murah sangat diinginkan
untuk mengganti memakan waktu laboratorium analisis. membuat Hasil analisis tersedia di samping
tempat tidur pasien dalam beberapa menit akan sangat meningkatkan pemantauan kemajuan
kanker dan pasien terapi. Kemajuan dalam biologi molekuler telah menyebabkan pemahaman yang
lebih biomarker potensial yang dapat digunakan untuk diagnosis kanker. Realisasi utama perawatan
diagnostik kanker sehingga membutuhkan perhatian yang tepat untuk tantangan utama deteksi
multitarget. Array dari biosensor, mendeteksi tanda tangan protein pola atau beberapa mutasi DNA,
dapat digunakan untuk membantu screening dan pengobatan panduan. strategi biosensor inovatif
akan memungkinkan pengujian kanker yang akan dilakukan lebih cepat, murah, dan terpercaya
dalam pengaturan desentralisasi. Dalam review artikel ini saya akan membahas penggunaan
biosensor elektrokimia untuk pengujian klinis desentralisasi dan prospek dan tantangan dari
menggunakan perangkat tersebut untuk titik peduli diagnosa kanker.

biosensor mengapa elektrokimia?

Selama tiga dekade terakhir kita telah menyaksikan luar biasa jumlah aktivitas di bidang biosensor.
Biosensor adalah perangkat kecil yang mempekerjakan pengakuan molekul biokimia sifat sebagai
dasar untuk analisis selektif. proses Utama yang terlibat dalam sistem biosensor adalah pengakuan
analit, transduksi sinyal, dan pembacaan. Karena kekhususan mereka, kecepatan, portabilitas, dan
biaya rendah, biosensor menawarkan menarik peluang untuk berbagai aplikasi klinis desentralisasi,
mulai dari alternatif-situs pengujian (misalnya, kantor dokter),skrining ruang gawat darurat,
pemantauan samping tempat tidur, atau diri rumah pengujian. perangkat elektrokimia secara
tradisional menerima utama share dari perhatian dalam pengembangan biosensor (Turner et al.,
1986; Wang, 2000a). Perangkat tersebut menghasilkan hasil sederhana, murah dan belum akurat
dan platform sensitif bagi pasien diagnosa. Nama biosensor elektrokimia diterapkan pada perangkat
penginderaan molekul yang erat pasangan biologis Pengakuan elemen transduser elektroda. Tujuan
transduser adalah untuk mengkonversi acara pengakuan biologis menjadi sinyal listrik yang berguna.
Amperometri dan potensiometri transduser yang paling sering digunakan dalam hubungannya
dengan biosensor elektrokimia. Dalam perangkat potensiometri, analitis Informasi diperoleh dengan
mengkonversi biorecognition yang Proses menjadi sinyal potensial sehubungan dengan penggunaan
ion selektif elektroda (ISE). biosensor amperometri beroperasi dengan menerapkan potensi konstan
dan pemantauan saat ini terkait dengan pengurangan atau oksidasi elektroaktif spesies yang terlibat
dalam proses pengakuan. sebuah amperometri biosensor mungkin lebih menarik karena sensitivitas
yang tinggi dan berbagai linear lebar. Penelitian elegan penginderaan konsep baru, ditambah dengan
inovasi teknologi banyak, telah membuka pintu untuk aplikasi klinis luas perangkat amperometri
(Wang, 1999). sensitivitas Tinggi, spesifisitas, kesederhanaan, dan miniaturisasi yang melekat
modern bioassay listrik mengizinkan mereka untuk menyaingi paling maju optik protokol.
miniaturisasi tersebut memungkinkan kemasan dari berbagai transduser elektroda mikroskopis ke
footprint kecil dari perangkat biochip, dan karenanya desain kepadatan tinggi array.
2.1. biosensor elektrokimia untuk desentralisasi klinis pengujian biosensor elektrokimia telah
memainkan peran utama dalam bergerak menuju pengujian disederhanakan, termasuk perangkat
digunakan di rumah. Memang, mudah digunakan strip diri pengujian glukosa, berdasarkan layar
dicetak elektroda enzim, digabungkan ke ukuran saku amperometri meter, telah mendominasi
pemantauan diabetes $ 5 miliar / tahun pasar selama dua dekade terakhir (Newman dan Turner,
2005). elektroda enzim sekali pakai seperti menghasilkan informasi analitis dalam waktu 5-10 dalam
koneksi ke 0,5-10? L fingerstick sampel darah. Genggam analisa klinis dioperasikan dengan baterai,
menggabungkan biosensor amperometri berbeda dan potensiometri ISE (pada cartridge sekali pakai
tunggal) telah ditunjukkan sangat berguna untuk point-of-perawatan pengukuran cepat beberapa
elektrolit dan metabolit (Erickson andWilding, 1993). Genggam perangkat elektrokimia, dengan
akurasi yang sama dengan yang analisis benchtop, telah dikembangkan untuk darah samping tempat
tidur pemantauan gas (Wahr et al., 1996). Sementara tes terkait kanker lebih kompleks daripada
rumah sendiri pengujian glukosa, modern elektrokimia sensor bioaffinity, seperti DNA atau
immunosensors, baru-baru ini menunjukkan potensi besar untuk memantau terkait kanker penanda
protein dan mutasi DNA. Meskipun masih pada tahap penelitian dasar, itu dibayangkan bahwa
pengembangan lebih lanjut harus mentransfer ini tes elektronik ke kartrid tes kecil. contoh
perwakilan contoh kemampuan dan peluang dibahas di berikut bagian.

bioaffinity elektrokimia tes untuk asam nukleat dan protein

3.1. deteksi elektronik DNA hibridisasi dan kerusakan DNA

Wide-skala pengujian genetik memerlukan pengembangan dengan respon yang cepat, sangat
sensitif dan spesifik, murah, penggunaan yang mudah perangkat analisis miniatur. Metode
tradisional untuk mendeteksi DNA hibridisasi terlalu lambat dan padat karya. Biosensor menawarkan
alternatif yang menjanjikan untuk lebih sederhana, lebih cepat, dan tes DNA lebih murah. biosensor
hibridisasi umumnya bergantung pada lampiran dari probe (ss) oligonukleotida untai tunggal ke
permukaan transduser untuk mengenali - melalui basis pasangan - yang gratis Target urutan (Wang,
2000b).
perangkat elektrokimia telah menerima banyak perhatian dalam pengembangan urut-
specificDNAhybridization biosensor (Mikkelsen, 1996; Gooding, 2002). perangkat tersebut
menawarkan rute elegan untuk interfacing, pada tingkat molekuler, Pengakuan DNA dan sinyal-
transduksi peristiwa. biosensor elektrokimia DNA hibridisasi mengandalkan konversi DNA pengakuan
pasangan basa acara menjadi sinyal listrik yang berguna (Gambar. 1). acara hibridisasi seperti
biasanya terdeteksi melalui peningkatan sinyal arus dari indikator electroactive (yang istimewa
mengikat ke duplex DNA), sehubungan dengan penggunaan enzyme atau redoks label, atau dari
lainnya hibridisasi-induced perubahan parameter elektrokimia (misalnya, konduktivitas atau
kapasitansi). pertimbangan cermat harus diberikan ke permukaan kimia dan terkait permukaan-
blocking kimia, yang diperlukan untuk mengendalikan efisiensi mengikat dan untuk meminimalkan
nonspesifik adsorpsi. mutasi tertentu pada gen p53 diukur dengan kopling asam nukleat peptida
yang sangat spesifik (PNA) pengakuan lapisan dengan transduksi elektronik chronopotentiometric
(Wanget al., 1997). Kelompok Gao dilaporkan baru-baru ini di ultrasensitif deteksi gen penanda
kanker pada mRNA diekstraksi dari jaringan payudara manusia (tanpa langkah RT-PCR), berdasarkan
oksidasi katalitik dari nucleobase guanin oleh threading redoks interkalator (Tansil et al., 2005). Tim
Willner dikembangkan deteksi diperkuat aktivitas telomerase, diekstrak dari 1000 sel kanker HeLa,
sehubungan dengan hibridisasi dari biotin-berlabel oligonukleotida ke unit telomere berulang dan
selanjutnya mengikat dari avidin-alkaline phosphatase, bersama dengan chronopotentiometric
transduksi sinyal (Parlov et al., 2004). transductionwas Chronopotentiometric juga digunakan untuk
labelfree (Guanin-based) deteksi listrik mutasi dikenal terkait dengan BRCA1 gen kanker payudara
dan BRCA2 (Wang dan Kawde, 2000). Sinyal guanin diperkuat, diperoleh menggunakan tindakan
elektrokatalitik dari Ru (bpy) 3 2 redoks mediator, juga digunakan untuk mendeteksi ekspresi gen
dalam sampel mRNA dari sampel tumor payudara (Armistead dan Thorp, 2002).
sensor elektrokimia juga telah terbukti sangat berguna untuk mendeteksi kerusakan kecil DNA yang
diinduksi oleh berbagai bahan kimia, pencernaan enzimatik, atau radiasi pengion (Fojta, 2002).
deteksi listrik seperti kerusakan DNA mencerminkan fakta bahwa respon elektrokimia DNA adalah
sangat tergantung pada struktur DNA. Selain pemantauan perubahan dalam faradaic intrinsik
(misalnya, oksidasi guanin) atau tensammetric sinyal dari DNA, studi tersebut meneliti respon
agen merusak elektroaktif (misalnya, karsinogen) berinteraksi dengan DNA sehubungan dengan
penggunaan elektroda DNA yang dimodifikasi. elektroda yang sama dapat digunakan untuk
biosensing antikanker obat dalam cairan tubuh (Brett et al., 1996).

Amperometri immunosensor berdasarkan elektrokimia langsung dari enzim label horseradish

peroksidase untuk mengukur tingkat rendah karsinoma antigen 125 (Dai et al., 2003). Kelompok gen
dijelaskan sebuah elektroforesis kapiler enzim non-kompetitif immunoassay dengan deteksi
elektrokimia untuk mengukur penanda tumor CA125 (Dia et al., 2003). Mikofluida perangkat,
melaksanakan enzim kapiler-elektroforesis seperti immunoassay dengan deteksi amperometri pada
platform microchip (Wang et al., 2001a), harus sangat menarik untuk diagnosa kanker di masa
depan. Integrasi tambahan (Pengolahan sampel / manipulasi) langkah ke ini Lab-on perangkat
Chipharus memfasilitasi tes biologis cairan yang kompleks. Hal ini sekarang diakui juga bahwa
pengukuran simultan dari kombinasi penanda tumor (yaitu, pola protein yang berbeda) dapat
memainkan peran utama dalam diagnosis kanker (Weisner, 2004). pola protein tanda tangan, yang
mencerminkan berbagai tahap penyakit, dapat langsung dideteksi menggunakan chip immunosensor
berdasarkan beberapa transduser antibodi-difungsikan. elektroda array, memiliki beberapa
transduser elektrokimia dialamatkan individual, dapat segera dibuat untuk memenuhi persyaratan
array protein multi-analit. Penggunaan label enzim tunggal dengan array tersebut memerlukan
pemisahan spasial yang tepat dari individu transduser untuk menghilangkan masalah cross talk
karena difusi spesies electroactive enzimatis dihasilkan dari satu elektroda ke yang tetangga.
Misalnya, Kelompok Karube ini array protein dirancang elektrokimia yang terdiri dari 36 platinum
elektroda bekerja, dengan antibodi capture yang berbeda, dan dioperasikan dalam modus
immunoassay enzim Sandwich (Kojima et al., 2003). Seperti yang ditunjukkan pada Gambar. 2, untuk
deteksi AFP (? -1-fetoprotein) dan? 2 mg (? 2-mikroglobulin), tidak ada reaktivitas silang jelas diamati
menggunakan interelectrode jarak 700? m. Wilson (2005) dijelaskan baru-baru dualelectrode sebuah
immunosensor enzim untuk amperometri simultan pengukuran dari dua penanda tumor
Carcinoembryonic antigen (CEA) dan? -fetoprotein (AFP). Sensitivitas tinggi turun ke 1 ng / mL
tingkat dilaporkan, bersama dengan tidak adanya efek cross-talk. ligan asam nukleat, yang dikenal
sebagai aptamers, juga menawarkan janji besar untuk penginderaan elektrokimia protein. deteksi
label bebas dari interaksi aptamer-protein telah didokumentasikan baru-baru ini sehubungan
dengan elektrokimia impedansi spektroskopi transduksi acara mengikat (Rodriguez et al., 2005).
Satu dimensi (1D) struktur nano, seperti semiconductor- atau kawat nano melakukan-polimer (NW),
sangat menarik untuk merancang high-density array protein. Karena mereka rasio tinggi permukaan-
ke-volume dan transpor elektron Novel sifat, konduktansi elektronik mereka sangat dipengaruhi
oleh gangguan permukaan minor (misalnya, pengikatan biomolekul), maka menunjukkan janji besar
untuk real-time protein label bebas deteksi. Karena kecilnya ekstrim Nanomaterials ini, adalah
mungkin untuk membawa sejumlah besar antibodi-difungsikan NW ke tapak sungguh kecil
perangkat array yang (Melosh et al., 2003). bahan 1D seperti demikian menawarkan prospek
redundansi besar-besaran di array nanosensor dan menyarankan besar berjanji untuk tes dari
beberapa penanda penyakit dalam sampel ultrasmall volume. Beberapa studi sudah menunjukkan
potensi difungsikan NW untuk sangat sensitif real-time biodetection. Sebagai contoh, laboratorium
Lieber ini menunjukkan sangat sensitif protokol untuk hibridisasi pemantauan DNA (Hahm dan
Lieber, 2004) atau satu virus (Patolsky et al., 2004) sehubungan untuk tipe-p silikon NW (SiNW)
difungsikan dengan PNA probe atau antibodi untuk influenza, masing-masing. konduktansi diskrit
perubahan, karakteristik dari acara mengikat, yang diamati pada konsentrasi sasaran yang sangat
rendah (misalnya, Gambar. 3). Sebuah kontribusi yang sangat terbaru dari laboratorium yang sama
ditunjukkan penggunaan sebuah nanowire silikon antibodi-difungsikan sensor array untuk
pemantauan real-time label bebas multiplexing penanda kanker dalam sampel serum diencerkan
(Zheng et al., 2005). The biosensing utilitas Nanomaterials 1D lainnya, seperti melakukan polimer
NW atau karbon-nanotube, memiliki juga telah digambarkan (Ramanathan et al, 2005;. Katz dan
Willner,2004)
4. berbasis Nano Partikel tes bioelectronic

Seperti yang ditunjukkan pada bagian sebelumnya, munculnya nanoteknologi telah membuka
cakrawala baru untuk elektrokimia biosensor (Wang, 2005). Selain kawat nano, adalah mungkin
menggunakan tag nanopartikel untuk merancang bioaffinity listrik tes dengan sensitivitas yang luar
biasa dan kemampuan multiplexing. Pesatnya kemajuan elektrokimia berbasis nanomaterial
biosensor menunjukkan dampak besar mereka mungkin memiliki pada kanker diagnostik dalam
waktu dekat. The ultrahigh sensitivitas seperti nanopartikel berbasis protokol penginderaan
elektrokimia kemungkinan membuka mendeteksi penanda kanker yang tidak dapat diukur
dengan metode konvensional dan dapat menyebabkan deteksi dini penyakit.
Stripping voltametri telah sangat berguna untuk mendeteksi tag logam nanopartikel, karena yang
akumulasi built-in (Elektrodeposisi) langkah yang mengarah ke sensitivitas yang luar biasa
(Wang, 1985). Sekitar lima tahun yang lalu, dua kelompok (Dequaire et al., 2000; Wang et al., 2001b)
menunjukkan penggunaan pelacak nanopartikel emas untuk pengupasan berbasis elektrokimia
deteksi hibridisasi DNA dan interaksi antigen-antibodi. protokol seperti mengandalkan menangkap
nanopartikel emas dengan target hibridisasi atau antigen ditangkap, diikuti oleh mereka
pembubaran dan elektrokimia stripping pengukuran logam pelacak. Sebuah triple-amplifikasi
bioassay, kopling polimer carrier-bola memperkuat unit (sarat dengan berbagai emas nanopartikel
tag) dengan fitur prakonsentrasi dari elektrokimia pengupasan deteksi dan tanpa listrik katalitik
pembesaran tag emas-partikel beberapa juga ditunjukkan (Kawde dan Wang, 2004).
amplifikasi sinyal Adramatic dapat dicapai dengan menghubungkan unit biorecognition untuk
microbeads polimer membawa sejumlah besar pelacak redoks. Misalnya, ultrasensitif listrik
deteksi DNA dilaporkan atas dasar polistiren manik-manik diresapi dengan redoks
ferrocenecarboxaldehyde penanda (Wang et al., 2003a). Sandwich elektrokimia diperkuat
immunoassay berdasarkan ferrocene polielektrolit berlapis microcrystal juga dilaporkan baru-baru
ini (Mak et al., 2005). Menangkap dari ferrocene microcystal antibodi-terkonjugasi adalah diikuti
oleh rilis dari sejumlah besar penanda redoks melalui dinding kapsul (oleh agen melepaskan), dan
menyebabkan sangat sensitif biodetection amperometri. Sukses klinis realisasi tersebut deteksi
bioelectronic ultrasensitif Skema membutuhkan perhatian yang tepat untuk adsorpsi non-spesifik
masalah yang umum mengontrol pendeteksian dari bioaffinity tes. Ara. 4. pemantauan simultan dari
beberapa protein dalam koneksi ke berbagai tag nanokristal anorganik dan elektrokimia stripping
transduksi [direproduksi dengan dari Liu et al. (2004) dengan izin]. Perubahan nanopartikel diinduksi
di konduktivitas melintasi kesenjangan microelectrode dieksploitasi untuk sangat sensitif elektronik
deteksi hibridisasi DNA (Taman et al., 2002). Menangkap dari target DNA nanopartikel-tag oleh
probe bergerak di celah antara dua microelectrodes berjarak dekat, dan curah hujan perak
berikutnya, mengakibatkan logam konduktif lapisan di celah, dan menyebabkan sinyal konduktivitas
yang terukur. Seperti sinyal konduktivitas hibridisasi-diinduksi, ditawarkan rendah batas deteksi
sampai ke tingkat 12:05. nanocrystals anorganik menawarkan populasi electrodiverse dari
tag listrik yang diperlukan untuk pengujian klinis multiplexing. Kita menunjukkan penggunaan
pelacak anorganik-nanokristal yang berbeda untuk deteksi elektronik multi-target protein (Liu et al.,
2004) orDNA (Wang et al., 2003b). Empat nanopartikel encoding (Kadmium sulfida, seng sulfida,
sulfida tembaga, dan timbal sulfida) dengan demikian digunakan untuk membedakan sinyal dari
empat protein atau target DNA sehubungan dengan sandwich yang immunoassay dan hibridisasi
assay, masing-masing, bersama dengan stripping voltametri dari logam yang sesuai. Setiap acara
yang mengikat sehingga menghasilkan puncak voltametri yang berbeda, yang ukurannya dan posisi
mencerminkan tingkat dan identitas masing-masing, dari yang sesuai antigen atau target DNA
(Gambar. 4). Konsep ini dapat segera ditingkatkan dan multiplexing dengan menggunakan paralel
tinggi-throughput otomatis operasi microwell, dengan masing-masing microcavity mampu
melaksanakan beberapa pengukuran.

5. Kesimpulan dan prospek masa depan

Penelitian elegan pada konsep penginderaan baru telah membuka pintu ke aplikasi klinis luas
perangkat elektrokimia. Perangkat tersebut sangat berguna untuk memberikan
informasi diagnostik secara cepat, sederhana, dan murah fashion, dan dengan demikian memenuhi
syarat unik untuk memenuhi tuntutan skrining kanker titik perawatan. sensitivitas Tinggi modern tes
bioaffinity elektrokimia harus memfasilitasi deteksi dini dan pengobatan penyakit dan harus
mengarah pada peningkatan tingkat kelangsungan hidup pasien. Sifat-sifat yang menarik dari
elektrokimia perangkat dengan demikian sangat menjanjikan untuk meningkatkan
efisiensi pengujian diagnostik dan pemantauan terapi, dan untuk point-of-perawatan pengujian
kanker, pada umumnya. Tantangan utama adalah untuk membawa teknik elektrokimia ke samping
pasien untuk menggunakan oleh personel non-laboratorium tanpa mengorbankan akurasi
dan kehandalan. Realisasi desentralisasi elektronik pengujian kanker sehingga akan membutuhkan
developmentalwork luas tambahan. Perhatian khusus harus diberikan kepada non-spesifik
masalah adsorpsi yang sering mengontrol batas deteksi dari tes bioaffinity elektrokimia. Diharapkan
bahwa kreativitas electrochemists dan ilmuwan material, ditambah dengan sumber daya yang tepat,
akan merevolusi diagnosa kanker di cara yang analog dengan peran utama mereka saat ini dalam
pemantauan diabetes. cartridge sekali pakai, mengandung elektroda strip (dilapisi
dengan berbagai reseptor) bersama dengan pengolahan sampel terkait, sehingga bisa menawarkan
skrining dini kanker dalam pengaturan point-of-perawatan, dengan mengukur kelainan pada profil
protein dalam beberapa menit. Dengan demikian, tidak ada keraguan bahwa elektrokimia biosensor
akan menjadi alat yang ampuh untuk diagnosa kanker dalam waktu dekat.