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Cultivos Tropicales 21(2):79-82, 2000

EFECTO DE EXTRACTOS VEGETALES SOBRE EL CRECIMIENTO


In Vitro DE HONGOS FITOPATGENOS
Aida T. Rodrguez, Daysi Morales y M. A. Ramrez
ABSTRACT. Many botanical species show a regulatory action RESUMEN. Muchas especies botnicas muestran una accin
on a wide range of pests and diseases. This effect has been reguladora sobre un gran nmero de plagas y enfermedades.
associated to the presence of a group of secondary metabolites Este efecto se ha atribuido a la presencia de un grupo de
at the different parts of plants. These substances provide them metabolitos secundarios en las diferentes partes de las plan-
with a natural antimicrobial protection. So, the possibility to tas que les confieren una proteccin natural; por ello se estu-
use these substances in the integrated pest management is dia la posibilidad que sean utilizados en el manejo integrado
studied in this paper. Hydroalcoholic plant extracts of Acacia de plagas y enfermedades. En este trabajo se obtuvieron ex-
farnesiana, Parthenium hysterophorus and Pluchea tractos hidroalcohlicos de las especies vegetales: aroma
carlinensis were obtained. The corresponding qualitative amarilla (Acacia farnesiana), escoba amarga (Parthenium
chemical analysis was performed by a phytochemical screening hysterophorus) y salvia cimarrona (Pluchea carlinensis). Se
and the antifungal effect of each extract was also determined les realiz el correspondiente anlisis qumico cualitativo me-
on four phytopathogenic fungi by means of micelial growth diante un tamizaje fitoqumico y se determin el efecto
inhibition percentage through time. Results showed that the antifngico de cada extracto sobre cuatro hongos
three plant extracts have a high antifungal activity on fitopatgenos mediante el porcentaje de inhibicin del creci-
Pyricularia grisea and Phytophthora parasitica var. miento micelial en el tiempo. Se encontr que los tres extractos
nicotianae. Its effect on other fungi depends upon the kind of tienen elevada actividad antifngica sobre el hongo
plant extract and evaluative time. Besides, all extracts proved Pyricularia grisea y Phytophthora parasitica var. nicotianae
to have renowned antimicrobially active metabolites in their y la actividad para el resto de los hongos depende del tipo de
chemical composition. extracto y el tiempo de evaluacin. Adicionalmente, se com-
prob que todos los extractos tenan en su composicin qu-
mica metabolitos de reconocida actividad antimicrobiana.

Key words: bioplaguicides, crop extracts, antifungal Palabras clave: bioplaguicidas, extractos vegetales,
activity actividad antifngica

INTRODUCCIN alimentaria, ya que tienen la propiedad de ser menos


txicos y ms fcilmente degradables (4).
El empleo de extractos vegetales para el control de El uso de plantas consideradas malezas, tales como
plagas y enfermedades en el marco de una agricultura la aroma amarilla (Acacia farnesiana) y la escoba amarga
sostenible constituye una alternativa promisoria, debido (Parthenium hysterophorus), las cuales compiten con los
a su elevada efectividad, bajo costo y no ser contaminan- cultivos por el espacio, los nutrientes y la luz solar, resulta
tes del ambiente. una fuente econmica e interesante para la obtencin de
Estos bioproductos se caracterizan por la presencia extractos vegetales con actividad antimicrobiana (5).
de determinados compuestos de origen natural, los cua- Esta alternativa contribuye adems a la explotacin
les forman parte de las estrategias defensivas de las plan- y disminucin de estas especies que, de lo contrario,
tas (1) y son agrupados en compuestos nitrogenados, deben ser eliminadas de los campos sin ningn provecho
fenlicos y terpenoides (2). Dichos compuestos le pro- para la economa.
porcionan importantes caractersticas a los extractos, No solo extractos de algunas malezas han recibido
como son antiapetitivos (3), antivirales, antimicrobianos la atencin de los investigadores sino los provenientes de
o repelentes, que permiten su utilizacin para proteger algunas plantas medicinales poco estudiadas como la
los cultivos e incrementar la calidad y su produccin salvia cimarrona (Pluchea carlinensis), de los que se han
encontrado aplicaciones importantes.
Teniendo en cuenta lo anteriormente expuesto, en el
presente trabajo se determin la actividad inhibitoria de
Aida Tania y M. A. Ramrez, Investigadores de la Estacin Experimen-
extractos vegetales sobre algunos hongos fitopatgenos
tal de Arroz Los Palacios; Daysi Morales, Especialista del Departa-
mento de Fisiologa y Bioqumica, Instituto Nacional de Ciencias Agr- y se realiz el anlisis qumico cualitativo de los extrac-
colas, Gaveta Postal 1, San Jos de las Lajas, La Habana, Cuba. tos obtenidos.

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MATERIALES Y MTODOS RESULTADOS Y DISCUSIN
Obtencin de los extractos. El material vegetal empleado
El efecto de los extractos vegetales sobre el creci-
consisti en hojas adultas de las especies: aroma amarilla
miento del hongo Pyricularia grisea se observa en la Fi-
(Acacia farnesiana), escoba amarga (Parthenium
gura 1. Como puede apreciarse todos los extractos
hysterophorus) y salvia cimarrona (Pluchea carlinensis), las
hidroalcohlicos de las diferentes especies vegetales
que se recolectaron en horas tempranas de la maana,
mostraron total inhibicin sobre el crecimiento micelial
encontrndose las plantas en la fase fenolgica vegetativa.
del hongo desde la primera evaluacin. Todos los trata-
Las hojas se lavaron con agua, se secaron a una
mientos difirieron significativamente del control, pero no
temperatura de 30 a 35oC, durante tres das, segn la
as entre ellos. Se ha encontrado efecto similar sobre el
metodologa descrita en la Direccin de Ciencia y Tcni-
mismo hongo (6), pero con extractos de albahaca y li-
ca. Posteriormente se pulverizaron en molino foliar; se
mn persa, lo cual sugiere que existen compuestos en
mezclaron 30 g del material vegetal con 30 mL de alco-
todos estos extractos que afectan considerablemente el
hol etlico al 35 % (v/v) que se macer durante cuatro
crecimiento del hongo.
das.
Ensayo de actividad antifngica. Para este ensayo se % Inhibicin
crecimiento micelial
emplearon las siguientes cepas: Es= 0.003***
Stemphylium solani Weber 100 a a a a a a a a a
Fusarium oxysporium var. lycopersicum
Pyricularia grisea 80
Phythophthora parasitica var. nicotianae.
Todos los hongos se cultivaron sobre el medio de 60
cultivo papa-dextrosa-agar (PDA) a pH=5.7, con alter-
nancia de luz y oscuridad (16 y 8 horas respectivamente) 40
y a una temperatura de 26 a 28oC durante siete das.
Tratamientos. Estos consistieron en: 20
extracto hidroalcohlico de escoba amarga b b b
extracto hidroalcohlico de aroma amarilla 0
3 5 7
extracto hidroalcohlico de salvia cimarrona Das
control (etanol al 35 %).
Aroma Escoba amarga Salvia Control
El ensayo se llev a cabo envenenando 20 mL del medio
papa-dextrosa-agar (PDA) con 1 mL de cada extracto. El medio Figura 1. Efecto de los extractos sobre el crecimien-
envenenado fue distribuido en placas Petri que posteriormente to micelial del hongo Pyricularia grisea
se inocularon con un disco de micelio de 0.8 cm de dimetro.
Las evaluaciones se realizaron al tercer, quinto y sp- En la Figura 2 se muestra el efecto de los tratamien-
timo das posteriores a la inoculacin, en las que se de- tos sobre el hongo Phytophthora parasitica var. nicotianae.
termin el crecimiento micelial midiendo el dimetro de Los tres extractos utilizados no tuvieron diferencias sig-
cada colonia y determinando el promedio de los micelios. nificativas entre ellos en su efecto sobre el hongo, en
Se realiz un diseo completamente aleatorizado y ninguna de las evaluaciones realizadas, pero s en todos
con tres repeticiones por tratamiento. Para realizar el los casos con el tratamiento control.
anlisis estadstico, los datos originales se transforma- % Inhibicin
crecimiento micelial
ron por la frmula arcsen%. Las medias de los trata-
mientos se compararon por la prueba de rango mltiple Es=3.21***
80
de Duncan con un nivel de significacin de 0.05. a a a
a
a a
Anlisis qumico cualitativo de los extractos. Se sigui el
procedimiento descrito por la Direccin de Ciencia y Tc- 60
nica para el anlisis fitoqumico, con el objetivo de cono- b b b

cer la composicin qumica de los diferentes extractos. 40


Los ensayos realizados a los materiales vegetales
fueron los siguientes:
20
Ensayos Compuestos determinados
c c c
Shinoda Flavonoides 0
Cloruro Frrico Fenoles 3 5 7
Gelatina Taninos Das
Ninhidrina Aminocidos Aroma Escoba amarga Salvia Control
Lieberman-Burchard Triterpenos
Borntrger Quinonas Figura 2. Efecto de los extractos sobre el crecimien-
Mayer Alcaloides to micelial del hongo Phytophthora
Espuma Saponinas
parasitica var. nicotianae

80
Se observ, adems, que la inhibicin de los extrac- % Inhibicin
tos al quinto y sptimo das fue superior al tercer da des- crecimiento micelial
pus de la inoculacin con respecto al control.
100 Es=0.59***
Los resultados encontrados sugieren que en estos a
extractos tambin existen compuestos que afectan el b b
80 c
crecimiento del hongo Phythophthora parasitica, llegn- d
e
dose a alcanzar un porcentaje de inhibicin de 63 %. f f f
Por su parte en el anlisis del efecto en el tiempo de 60
los diferentes extractos sobre el hongo Fusarium
oxysporium, que se presenta en la Figura 3, se aprecia 40
que todos los extractos tuvieron mayor inhibicin que el
tratamiento testigo. En todos los casos, el porcentaje de 20
inhibicin aument en todas las evaluaciones a medida g g g
que transcurri el tiempo y se observaron algunas dife- 0
rencias significativas entre los tratamientos. 3 5 7
Das
% Inhibicin
crecimiento micelial Aroma Escoba amarga Salvia Control
100 Es=0.54***
b a b Figura 4. Efecto de los extractos vegetales sobre el
c c d
e e crecimiento micelial del hongo Stem-
80 f
phylium solani Weber
60 Al quinto da, el extracto de salvia exhibi un mayor
efecto inhibitorio que el resto de los extractos y mientras
40 el extracto de aroma tuvo una inhibicin superior que el
correspondiente a la escoba amarga. Por su parte al sp-
20 timo da se aprecia que la salvia mantuvo su efecto
fungitxico, pues su inhibicin fue superior a la encontra-
g g g
0 da en las anteriores evaluaciones estadsticas, adems
3 5 7 de ser su efecto superior al resto de los extractos que no
Das mostraron diferencias entre s.
Aroma Escoba amarga Salvia Control Se ha publicado acerca de la actividad antimicrobiana
de una variedad de salvia (8), que est en corresponden-
Figura 3. Efecto de los extractos sobre el crecimien-
cia con los resultados obtenidos.
to micelial del hongo Fusarium oxysporium
Anlisis qumico cualitativo. Este estudio comprende un
var. Lycopersicum
conjunto de ensayos y tcnicas sencillas, que aunque
Al tercer da los extractos de escoba amarga y sal- no brinda un resultado concluyente debido a los factores
via cimarrona provocaron mayor inhibicin respecto al que pueden influir como la poca de recoleccin, el esta-
extracto de aroma. En la segunda evaluacin al quinto do vegetativo de la planta, las caractersticas del suelo,
da despus de la inoculacin, fueron la escoba amarga y el clima, la calidad de reactivos, entre otros, s nos da
la aroma los mejores tratamientos, encontrndose dife- una idea general sobre la composicin qumica de las
rencias significativas con la salvia; sin embargo, al spti- plantas.
mo da el extracto de escoba amarga result mejor que el Los compuestos encontrados en cada uno de los
resto de los tratamientos y no se encontraron diferencias extractos se muestran en la Tabla I.
entre la aroma y la salvia.
Se ha demostrado (7) que el gnero Parthenium tie- Tabla I. Anlisis qumico cualitativo de los extractos
ne actividad fungisttica, por lo que este resultado corro-
bora este planteamiento. Compuestos Aroma Salvia Escoba amarga
En la Figura 4 se representa el efecto de los extrac- Flavonoides + + +
tos en el tiempo sobre el crecimiento micelial del hongo Fenoles + + +
Stemphylium solani Weber, patgeno de cultivos tales Taninos + + +
como la lechuga y el tomate. Aminocidos + + +
Triterpenos + + +
Todos los extractos mostraron inhibicin del creci- Quinonas + + -
miento del hongo, con diferencias significativas respecto Alcaloides + + -
al tratamiento control. Saponinas + + +
Al tercer da despus de la inoculacin, el extracto
(+) - Resultado positivo
de aroma provoc mayor efecto que el correspondiente a (-) - Resultado negativo
la escoba amarga y la salvia cimarrona, no existiendo
diferencias entre ambos.

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Como puede observarse, los tres extractos vegeta- REFERENCIAS
les contienen: flavonoides, fenoles, taninos, aminocidos
y saponinas; excepto el proveniente de la escoba amar- 1. Villalobos, M. J. Plaguicidas de origen vegetal . Estado
ga, en los dems tambin se detectaron quinonas y actual de la investigacin. 1996.
alcaloides. 2. Harborne, J. B. Phytochemical Dictionary. Handbook of
bioactive compound from plants. Taylor and Francis,
La inhibicin del crecimiento micelial exhibida por
1993, p. 791.
los extractos se debe a la presencia de algunos de 3. Domin, M. E., et al. Evaluacin preliminar del efecto
estos metabolitos, como los flavonoides, que son un gru- antiapetitivo de diferentes extractos vegetales. En
po de compuestos de amplio rango de actividad biolgi- Bioplag95. Resmenes. 1995, p. 83.
ca, que incluye la actividad antimicrobiana, antiviral, atra- 4. Funes, F. Experiencias cubanas en agroecologa. Re-
yente de polinizadores, protectora de las plantas contra vista Agricultura Orgnica, agosto-diciembre, 1997, p.
la luz ultravioleta y antioxidantes, entre otras 10-18.
(9)(10)(11)(12). 5. Lara, M. C, et al. Efectos de extractos de Parthenium
Tambin los fenoles y taninos son compuestos de hysterophorus L. contra larvas de Spodoptera frugiperda
(J. E Smith). En Bioplag95. Resmenes 1995, p. 67.
reconocida actividad antimicrobiana, antiviral, repelentes
6. Tewari, R. Plant extract against four phytopathogenic
de insectos (10)(12)(13)(14). fungi; the rice. Indian Perfum, 1995, vol. 39, no. 2.
Por su parte, se ha publicado que los terpenos tie- 7. Maatooq, G. T. Fungistatic sesquiterpenoids from
nen actividad insecticida, acaricida y fungicida al igual Parthenium. Phytochemistry, 1996, vol. 43, no. 1, p. 67-
que las saponinas (9)(15). 69.
Debe sealarse que aunque el extracto correspon- 8. Masterova, I., et al. Royleanones in the root Salvia
diente a la escoba amarga no present quinonas y officinalis of domestic provenance and their antimicrobial
alcaloides en su composicin qumica, mantuvo una ele- activity. Ceska A. Slovenska Farmacie, 1996, vol. 45, no.
vada inhibicin sobre el crecimiento micelial de los dife- 5, p. 242-245.
9. Al Salch, F. S. Flavonoids, saponins, terpenes, tannins
rentes hongos.
have antimicrobial activity. Pharmacogn International
En sentido general, puede plantearse que la activi- Journal of Pharmacognosy, 1997, vol. 35, no. 1, p. 38-42.
dad de los extractos no solo se debe a la presencia sino 10. Peris, J. B. Fitoterapia Aplicada, 1995, vol XII, no. 2.
tambin a la concentracin de algunos metabolitos que 11. Seniader, K. Flavonoids of rare artemisia species and
se han identificado en el anlisis qumico cualitativo y se their antifungal properties. Fitoterapia, 1996, vol. XVII,
les atribuyen propiedades antimicrobianas. no. 1.
Este es uno de los primeros trabajos en Cuba donde 12. Tahiz L. Plant Physiology, 1992, p. 333-336.
se publica la actividad antifngica de estos extractos ve- 13. Ayaiyeoba, E. O. Anthelmintic activity of a root extract of
getales contra los hongos fitopatgenos estudiados. En Ritchiea Capparoides var. Longipedicellata. Phytoterapy
Research, 1996, vol. 10, no. 5, p. 436-437.
prximas investigaciones se continuar con el aislamien-
14. Suzuki, Y. Islation of 5(8- heptadecenyl)-resorcinol from
to de los diferentes grupos de compuestos constituyen- etiolated rice seedlings as an antifungal agent.
tes de estos extractos, con el objetivo de ver cules de Phytochemical, 1996, vol. 41, no. 6.
ellos son los principales responsables de la actividad 15. Favel, A. Screen of triterpenoid saponins for antifungal
antifngica sobre los diferentes hongos, en qu concen- activity. Planta Medica, 1992, p. 635-636.
tracin se encuentra en la planta y cul es la dosis efec-
tiva para su aplicacin. Este hecho abre la posibilidad de Recibido: 12 de julio de 1999
que estos metabolitos puedan ser utilizados como princi- Aceptado: 26 de noviembre de 1999
pios activos en la formulacin de bioplaguicidas.

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