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Clase Terica 14:

Papel del Laboratorio en el


diagnostico de Tuberculosis
Objetivos
Introduccin a las bases del diagnstico de
las enfermedades producidas por
Mycobacterium tuberculosis.
Precisar el rol del Laboratorio en el
Diagnstico de las enfermedades
producidas por Mycobacterium tuberculosis.
El diagnstico de certeza de la
tuberculosis es microbiolgico
Cadena Epidemiolgica
Agente causal
Complejo Mycobacteriun tuberculosis
Depende de pH y O2
Replicacin Lenta
Reservorio: fuente de Infeccin:
Hombre sano infectado hombre enfermo
Transmisin
La transmisin de los bacilos
de la tuberculosis se produce
por medio de ncleos
suspendidos en pequeas
gotas que son expulsadas al
hablar, cantar o toser.
Estas pequeas gotas
permanecen infectantes en el
aire por horas, por lo que
pueden ser inhaladas por otras
personas.
Infeccin - Enfermedad
No todas las personas
infectadas enferman, slo una
de cada diez, las ms
susceptibles.
M.tuberculosis se disemina por SNC

todo el organismo
Sin embargo, la enfermedad
pulmonar es la ms frecuente
(80-85% de todos los casos
diagnosticados) debido a que
el bacilo necesita abundante
oxgeno para multiplicarse.
Bases del diagnstico
Sospecha Clnica
Tos (sintomtico respiratorio: SR)
Baja de peso
Sudoracin Nocturna
Anorexia
Obtencin de la muestra

Muestras respiratorias: esputo, LVA, jugo gstrico


Orinas
Lquidos biolgicos
Biopsias
Hemocultivos
Bases del diagnstico
Tcnicas diagnsticas: Demostrar la presencia
del Mycobacterium

Microscopia: Baciloscopia
Cultivo
Tcnicas moleculares
Tcnicas Diagnosticas
Baciloscopia
Coloracin Ziehl neelsen
Aureamina
Cultivo
Medios a base de huevos:
Lowenstein Jensen -
Ogawa
Medios Lquidos:
Middlebrook
Automatizados: Bactec
Tcnicas de Biologa
Molecular
BACILOSCOPIA
Primera prioridad Nacional
para el control de la
Tuberculosis en Pases de alta
prevalencia.
Tcnica de eleccin para el
Diagnostico de
Tuberculosis
Pulmonar.
Monitoreo y respuesta del
tratamiento.
Importancia en Salud Pblica:
Indica mayor capacidad de
transmisin

Baciloscopia Directa. Un programa para Laboratorios.CDC.UICTER.OMS 2000


BACILOSCOPIA
VENTAJAS DESVENTAJAS
Depende de la calidad de la muestra: Difcil deteccin en pacientes en
Esputo/ saliva. estadios iniciales de la enfermedad
(no expectoran)
Tcnica sencilla, rpida, reproducible,
accesible a laboratorios de 1er nivel y
barata
Alta especificidad en pases de alta
endemia.
Sensibilidad alta en sintomaticos Necesitan gran carga bacilar para que
respiratorios. la baciloscopia sea positiva
Vara de acuerdo al cuadro clinico Baja sensibilidad en TBC
extrapulmonar.
Baciloscopia: Sensibilidad
Vara de acuerdo al cuadro clnico

TB cavitaria80 90%
TB Infiltrado50 80%
Miliar 5 - 10%
Baciloscopia: Toma de Muestra
La muestra debe recogerse en frasco
ancho con tapa rosca, de material
plstico y descartable, cierre
hermtico.
La muestra debe ser llevada al
Laboratorio lo mas rpido posible,
sobretodo las de Jugo gstrico.
No deben ser recolectada de 24
horas.
De no ser trabajada el mismo da de
su recoleccin, deber ser refrigerada
a 4 C y protegidas de la Luz
Lectura de la Baciloscopia
Informe de la Baciloscopia:
No BAAR / 100 campos:

(-)
1 9 BAAR / 100 campos:
Informar el N
( + ) : 10 99 BAAR / 100
campos
( ++ ) : 1 10 BAAR / Campo
(50 c)
( +++ ): >10 BAAR / campos
(20c)
Baciloscopia: Especificidad

Especificidad: 96 99 %
Depende de la endemia del
pas.
En pases de mediana-alta
endemia, mas del 99% de
los BK+ son Tuberculosis.
Falsos Positivos:
Nocardia
Restos de alimentos
Hongos
Ralladuras
Baciloscopia: Especificidad

Una tincin negativa, nunca excluye un caso de


tuberculosis

Siempre efectuar el cultivo de las muestras


clnicas para realizar un diagnstico de certeza de
tuberculosis
Sintomtico Respiratorio

2 Baciloscopias

positiva negativa

Dx TBC Radiografa pulmonar


Algoritmo de Diagnostico

Anormal Normal

2 Baciloscopias

positiva negativa

Cultivo
Dx TBC

Seguimiento diagnostico
Instrumentos Diagnsticos
El Cultivo
Identifica 20% ms que la Desventajas
baciloscopia en SR, en Costo mayor que el de la
reas de gran prevalencia. baciloscopia
Necesita 10 a ms Tcnica ms compleja
bacilos/ ml de muestra. Necesita personal
Ideal para muestras adiestrado
paucibacilares y Adecuada Infraestructura
extrapulmonares
Tiempo de incubacin de
Base de las pruebas de acuerdo a Medio utilizado:
sensibilidad Medios Lowenstein
Jensen / Ogawa de3 a 8
Semanas
Medios Lquidos de 10
das a 4 semanas
Seguimiento Diagnostico
Mientras se espera
resultado de cultivo de 3
a 8 semanas
Dx diferencial con otras
enfermedades
Baciloscopias cada 2
semanas

Actualizacin de la doctrina, Normas y procedimientos para el control de la tuberculosis en el Per.Marzo 2001


Indicaciones del uso de cultivo para
Diagnstico
Sintomtico Respiratorio con Rx anormal y baciloscopa negativa con
cuadro clnico sospechoso de tuberculosis
Baciloscopia paucibacilar:
1 A 9 baar en 100 campos microscpicos observados
Todas las muestras extrapulmonares
Toda muestra pulmonar o extrapulmonar de los pacientes portadores
del virus de la inmunodeficiencia humana (VIH positivos) y sospecha
de tuberculosis.
Todos los menores de 15 aos

Control
Muestras de pacientes en tratamiento con sospecha de fracaso
Baciloscopia positiva en dos controles sucesivos despus de un
perodo de negativizacin.
Prueba de Sensibilidad
Examen auxiliar para determinar la sensibilidad o resistencia a
los frmacos antituberculosos en los casos de fracaso a los
esquemas de tratamiento antituberculosos.

Primera lnea

Segunda lnea
Indicaciones para la Prueba de
Sensibilidad a frmacos de Primera lnea

Cepa del cultivo positivo que sirvi para el diagnstico de


fracaso a los esquemas de tratamiento.
Cepas de cultivos positivos de pacientes con infeccin VIH
o SIDA/TB
Cepas de cultivos positivos de personal de salud con TB
pulmonar baciloscopa positiva.
Mtodos Diagnsticos
Moleculares

Herramientas de Biologa Molecular

Hibridacin por sondas Tcnicas de amplificacin Tecnica de la huella digital


Deteccin directa Deteccin directa Estudios epidemiologicos
Muestras Identificacin Fuentes de infeccin
Cultivo Resistencia antibiotica Recaidas/reinfeccin
Conclusiones
Es errneo pensar en reemplazar los exmenes convencionales
por las tcnicas moleculares.
El valor no debe subestimarse ni sobrestimarse.
El cultivo en medio solidos o liquidos sigue siendo el patrn de oro.
Baciloscopia muy til : bien realizada.
Por ahora no deber sacrificarse una muestra para utilizarla en
PCR como diagnostico de Tuberculosis.
La interpretacin de un resultado de PCR, positivo o negativo,
deber evaluarse muy bien y siempre dentro de anlisis crtico y
juicio clnico adecuado. De acuero a evidencia cientfica
(metanalisis) un resultado de PCR negativo NO descarta el
diagnostico de tuberculosis
Tcnicas moleculares son de PRIORIDAD para diagnostico de
MDR o XDR

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