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UNIVERSIDAD DE LAS FUERZAS ARMADAS-ESPE

DEPARTAMENTO CIENCIAS DELA VIDA Y LA AGRICULTURA


LABORATORIO DE GENTICA
NOMBRES: Aguirre Flores Carlos NRC: 2429
Muoz Jennifer

Panchana Torres Carolina FECHA DE ENTREGA: 2017/08/02

TEMA: GENES RELACIONADOS CON LA GENOTOXICIDAD Y SISTEMA DE


REPARACIN DEL ADN

OBJETIVOS
Objetivo General
Definir el cocepto de genotoxicidad estableciendo cuales genes se encuentran
relacionados y el sistema de reparacin del ADN.

Objetivo Especfico
Indicar que funcin cumple el gen GSTP1 y XRCC1.
Indicar los mecanismos y sistemas de Reparacin del ADN provocado los
genotxicos

1. Genotoxicidad
1.1 Definicin
Es la capacidad de un agente de ocasionar dao en el material gentico, siendo no solo al
ADN sino tambin a los componentes celulares que estn relacionados con la
funcionalidad y comportamiento de los cromosomas en la clula como enzimas que
actan en la reparacin, condensacin y des condensacin del ADN en los cromosomas,
provocando efectos biolgicos adversos. (Abrevaya, 2008)

Se clasifican en tres categoras de acuerdo a su origen: qumicos, fsicos, en las que se


incluye las radiaciones, y biolgicos. La capacidad de inducir dao vara de acuerdo a la
dosis recibida, el tiempo de exposicin y la forma en la que lo recibi. (Abrevaya, 2008)

Adems pueden clasificarse de acuerdo a los efectos o su forma de actuar: mutgenos,


carcingenos o teratgenos. (Abrevaya, 2008)

1.2 Genes relacionados con la genotoxicidad


1.2.1 Gen XRCC1
Su nombre oficial es reparacin de rayos X cruzada complementaria 1, es un gen con un
tamao de 33kb y est localizado en el brazo largo del cromosoma 19 (19q13.2-13.3) Este
gen se ha encontrado nicamente en los humanos. (National Center for Biotechnology
Information, 2017)

El gen XRCC1 codifica una protena que no presenta actividad enzimtica, pero es
fundamental para la reparacin de rupturas de una sola hebra de ADN por formadas en la
exposicin a radiaciones ionizantes y agentes alquilantes. Posee un dominio de
interaccin con otras protenas como son mltiples glicosilasas que son enzimas
reparadoras de ADN, formando complejos con gran parte de las protenas que cumplen
esta funcin como APE1, POL , poli-ADP-ribosa-polimerasa (PARP 1) y ADN ligasa
tipo III (LIG3) participando en la via de reparacin por Escisin de Bases (BER)
(National Center for Biotechnology Information, 2017)

1.2.2 Gen GSTP1


Su nombre oficial es glutatin S-transferasa pi 1, es un gen con un tamao de 2.8 kb y
est localizado en el brazo largo del cromosoma 11 (11q13.2) Este gen se ha encontrado
nicamente en los humanos. (Weizmann Institute of Science, 2017)
El gen GSTP1 es parte de la familia de enzimas glutatin S-transferasas (GST), las
mismas que actan en la desintoxicacin a travs de la catalizando la conjugacin de
compuestos hidrfobos y electrfilos unidos a un glutatin reducido. De acuerdo a sus
propiedades bioqumicas, inmunolgicas y estructurales, los GST solubles se clasifican
en 4 clases principales: alfa, mu, pi y theta. El gen GSTP1 es un gen polimrfico
codificador de protenas variantes activas y funcionalmente diferentes que son activas en
el metabolismo xenobitico siendo parte importante en la susceptibilidad al cncer y otras
enfermedades. (National Center for Biotechnology Information, 2017) (Sharma &
Pandey, 2014)

2. Sistemas de reparacin del ADN


Los seres vivos tienen el objetivo de preservar su genoma y heredarlo fielmente a travs
de generaciones, la herencia de informacin gentica est constantemente en un equilibrio
selectivo entre el mantenimiento de la estabilidad gentica frente a la eliminacin del
cambio mutacional y la prdida del potencial evolutivo (Torgovnick & Schumacher,
2015).

La molcula de ADN se encuentra bajo el ataque constante de una multitud de efectos


genotxicos endgenos y exgenos, estimndose que cada clula experimenta hasta
105 lesiones de ADN espontneas o inducidas por da (Torgovnick & Schumacher, 2015).
Efectos genotxicos que provocan dao en el ADN

El dao endgeno como la hidrlisis (desaminacin), la alquilacin y las especies


de oxigeno como radicales libres (ROS) puede provocar lesiones en las bases del
ADN (Torgovnick & Schumacher, 2015).
El dao exgeno como fuentes ambientales como luz ultravioleta (UV),
radiaciones ionizantes (IR), frmacos quimioteraputicos, productos qumicos
pueden provocar efectos como la formacin de ciclobutano, rotura de la cadena
simple y doble del ADN mediante (IR), o enlaces intermedios por frmacos
quimioteraputicos (Torgovnick & Schumacher, 2015).

Tabla 1: Distintos sistemas de reparacin de ADN especializados en la reparacin de


diversos tipos de lesiones de ADN.

Mecanismo de reparacin Caracterstica de la lesin Fuente genotxica

Reparacin de la escisin Lesiones oxidativas Las especies reactivas del


base (BER) oxgeno (ROS)

Reparacin de la escisin de Lesiones que causan Radiacin UV


nucletidos (NER) distorsin de la hlice

Reparacin incorrecta Errores de replicacin Replicacin


(MMR)

Reparacin de la rotura del Rupturas de la cadena simple Radiacin ionizante, ROS


soporte (SSBR)

Recombinacin homloga Rupturas de doble filamento Radiacin ionizante, ROS


(HR)

Uniones no homlogas Rupturas bicatenarias Radiacin ionizante, ROS


(NHEJ)

Obtenido de: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4407582/?report=reader

3. Mecanismos de Reparacin

3.1 Reparacin de la escisin base (BER)


Este tipo de sistema de reparacin predomina en las clulas de mamferos, el mtodo de
reparacin consiste en remover las bases daadas mediante enzimas glicosilasas ADN,
seguido por una endonucleasa (apurnica/apirimidnica (APE1)), obteniendo como
resultado una base con una desoxirribosafosfato (dRP) en el extremo 5y un OH en el
extremo 3, la ADN polimerasa mediante sntesis polimeriza las bases faltantes
eliminando el sitio APE1, y finalmente la ligasa I o III sella la va (Hernndez et al, 2009).
Figura 1: Reparacin por escisin de bases - BER (Base Excision Repair)
Obtenido de: (Tafurt & Marin, 2014).
3.2 Reparacin por escisin de nucletidos (NER)
De los diversos mtodos este es el ms verstil debido a la alta eficiencia en reconocer y
reparar una amplia gama de lesiones del ADN, como el dao generado por la radiacin
ultravioleta (UV), y por productos qumicos. Existen dos vas alteras en NER:

i. Reparacin Global del Genoma (CGR): la cual detecta y remueve las lesiones
provocadas en todo el genoma
ii. Reparacin Acoplada a la Transcripcin (TCR): realiza una reparacin rpida de
todas las lesiones cuando la cadena est en proceso de transcripcin.

Las lesiones provocan distorsiones en la cadena de ADN, estas distorsiones se reconocen


por un complejo, (XPC-HR23B), el cual estabiliza la cadena y recluta al factor de
Transcripcin II H (TFIIH), mediante la fosforilacin de ATP, TFIIH desenrolla el ADN
con enzimas helicasas XPD y XPB para formar una estructura en forma de burbuja (RPA,
XPA y XPG) estas estructuras son reclutadas para formar el complejo de preincisin.
ERCC1-XPF realizando el corte 5 y XPG realiza el corte en 3, mientras que RPA
permanece unida a la cadena facilitando la sntesis de la polimerasa o , que est
sostenida por RFC y PCNA, finalmente la ligasa I sella los huecos (Hernndez et al,
2009).
Figura 2: Reparacin por escisin de nucletidos - NER (Nucleotide Excision Repair)
Obtenido de: (Tafurt & Marin, 2014).

3.3 Mecanismo de reparacin del mal apareamiento de bases (MMR).


La reparacin del mal apareamiento de bases, es una compleja reaccin que implica
mltiples protenas, estas reconocen los apareamientos errneos de las bases, dividen el
ADN que contiene el error y vuelven a sintetizar la cadena de ADN, el proceso de
correccin inicia por la unin de la protena MutS en el sitio del apareamiento errneo,
formando el dmero de MutL y de MutH q y genera un rompimiento de la cadena, esto
debido a que MutH reconoce una secuencia hemimetilada, la protena UvrD, que es una
helicasa, desenrolla la cadena de ADN desde el rompimiento y la cadena desplazada es
degradada por una exonucleasa, la cadena restante es protegida por la protena Ssb,
finalmente la ADN polimerasa III se encarga de polimerizar, mientras que la ADN ligasa
sella los huecos restantes (Hernndez et al, 2009).
Figura 3: Reparacin por apareamiento errneo - MMR (Mitsmach Repair)
Obtenido de: (Tafurt & Marin, 2014).

4. Artculo cientfico
Evaluation of Glutathione-S-Transferase P1 Polymorphism and its Relation to Bone
Mineral Density in Egyptian Children and Adolescents with Beta-Thalassemia Major.

4.1. Objetivo
Evaluar la relacin existente entre el polimorfismo de glutatin S-transferasa pi (GSTP1)
y la densidad mineral sea en nios y adolescentes con beta-talasemia.

4.2. Resumen
La beta-talasemia se caracteriza por ser un tipo de anemia que tiene una mayor proporcin
de hierro, y es tratada con transfusin de sangre y con quelacin de hierro que han
incursionado en varias complicaciones como la osteoporosis (baja densidad mineral sea-
DMO). El glutatin S-transferasa pi (GSTP1) pertenece a la familia de enzimas
metablicas de fase II y cuya funcin trata de proteger los daos que causan los endgenos
y exgenos, cuando hay la presencia de un polimorfismo, provoca que la actividad
enzimtica disminuya lo que conlleva un desintoxicacin ineficiente.

En el estudio se tomaron a 35 individuos (nios y adolescentes) afectados y 30 para el


control, para evaluar el DMO se realiz rayos X, para la genotipificacin de GSTP1 se
obtuvo sangre perifrica y se realiz una PCR, y para detectar Ile105Val del gen se realiz
polimorfismo de longitud de fragmento de restriccin.

Es una investigacin que se da por primera vez en pacientes con beta-talasemia, donde el
alelo Ile105Val se encontr en el 50.77 % de los nios, con frecuencia allica de 0.51 de
individuos afectados y 0.31 normales, lo que indica que prevalece individuos afectados
con respecto a controles. En tanto ara la distribucin de genotipos se encontr Ile/Ile,
Ile/Val y Val/Val con valores de 49.23, 33.85 y 16.92 %, respectivamente. Al compararlo
con estudios realizados en Egipto, se encontraron grandes diferencias, esto se debe a que
el tamao de la poblacin no era el mismo o la enfermedad no se relacionaba.

Para el polimorfismo se obtuvo que posee una mayor proporcin en los individuos
afectados; como GSTP1 regula la sealizacin celular que est presente en la respuesta
de estrs, al tener un polimorfismo Ile105Val que est en el centro activo de un enzima,
disminuir la actividad de esta, por lo que se razona que es uno de los factores que se
asocian a enfermedades asociadas con ROS (osteoporosis). Mientras que para talasemia
no hay estudios centrados con el gen GTPS1, pero se ve que el polimorfismo prevalece
en los pacientes.

Existe una gran relacin entre el polimorfismo y la predisposicin en la reduccin de


osteoporosis, en tanto para talasemia el polimorfismo es prevalente; en si el estudio indica
que existe una ineficiencia en la eliminacin del ROS, lo cual es perjudicial en la
reduccin de osteoporosis. Por otro lado es un estudio limitado, debido a que la poblacin
es pequea, y se aconseja seguir los estudios con muestras grandes y en distintas
poblaciones.

4.3. Conclusiones
Las vas que causan el dao al ADN son variadas; las mismas pueden ser
qumicas, fsicas o biolgicas. Estos daos pueden ser reparados por medio de
protenas sintetizadas por genes que se han encontrado en el ADN humano, las
mismas que trabajan conjuntamente con las protenas reparadoras del ADN
llamadas glicosilasas.
El glutatin S-transferasa pi (GSTP1) tiene como funcin proteger los daos que
causan los endgenos y exgenos, mientras que el gen XRCC1 es fundamental
para la reparacin de rupturas de una sola hebra de ADN cuando se da una
exposicin a radiaciones ionizantes o agentes alquilantes.
Existe una variablilidad de mecanismos o sistemas de reparacin para el dao
endgeno y exgeno del ADN provocado los genotxicos,
Bibliografa

Abrevaya, X. (20 de Agosto de 2008). Intramed. Obtenido de


http://www.intramed.net
Hernndez, P., Valverde , M., & Rojas, E. (2009). Los metales como inhibidores
del sistema de reparacin del ADN. Revista Especializada en Ciencias
Qumicas-Biolgicas, 12(2):75-82.
National Center for Biotechnology Information. (30 de Julio de 2017). U. S.
National Library of Medicine. Obtenido de https://www.ncbi.nlm.nih.gov/
Ragab, S., Bard, E., & Ibrahim, A. (2016). Evaluation of Glutathione-S-
Transferase P1 Polymorphism and its Relation to Bone Mineral Density in
Egyptian Children and Adolescents with Beta-Thalassemia Major.
Mediterranean Journal of Hematology and Infectious Diseases, 8(1).
Sharma, A., & Pandey, A. (2014). Genetic polymorphism of glutathione S-
transferase P1 (GSTP1) in Delhi population and comparison with other global
populations. Meta Gene, 134-142.
Tafurt, Y., & Marin Morales, M. A. (2014). Principales mecanismos de
reparacin de daos en la olcula de ADN. Revista Biosalud, 95-110.
Torgovnick, A., & Schumacher, B. (2015). Mecanismos de reparacin del ADN
en el desarrollo y la terapia del cncer. Frontiers in Genetics, 6-157. Obtenido
de http://doi.org/10.3389/fgene.2015.00157
Weizmann Institute of Science. (31 de Julio de 2017). Human Gene Database.
Obtenido de http://www.genecards.org