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14 Curso de Sanidade Avcola Fort Dodge

BRONQUITE INFECCIOSA DAS GALINHAS

Jos Di Fbio Lavinia I. Rossini


Mdico Veterinrio Mdica Veterinria
difabio@dglnet.com.br larossini@zipmail.com.br
J.F.Laboratrio J.F.Laboratrio
Campinas - SP Brasil Campinas - SP - Brasil

1. HISTRICO

A Bronquite Infecciosa das Galinhas uma doena altamente infecciosa, de


origem viral, de carter agudo que acomete aves, em ambos os sexos, seja na
criao para produo de carne, seja na criao para produo de ovos, nas mais
diferentes idades, em praticamente todas as regies do mundo onde existe
Avicultura Industrial ou no.
Os sinais clnicos, leses macrocspicas e histopatolgicas so variadas,
dependendo desde as condies ambientais e finalidade das aves, patotipos
envolvidos, associao com outros patgenos, idade das aves, etc.
A Bronquite Infecciosa no uma zoonose, no tendo maior significncia na
sade humana at o momento (1999). Houve uma modificao substancial na
forma de encarar esta enfermidade, na medida em que houve melhoria nas
condies de diagnstico, do melhor conhecimento dos virus deste grupo, da
presso de seleo exercida por diferentes esquemas vacinais com diferentes
cepas e inter-relao com outros patgenos dentro do mesmo processo, ou seja,
as sndromes respiratrias, intestinais, etc.

2. ETIOLOGIA
A Bronquite Infecciosa das Galinhas uma doena viral, de carter agudo,
altamente infecciosa que acomete os tratos respiratrio e genito-urinrio das aves.

FORT DODGE Sade Animal Ltda


Rua Luiz Fernando Rodrigues, 1701 V. Boa Vista CEP 13064-798 Campinas SP Brasil Fone:
(019) 3745.6000 Fax: (019) 3745.6011
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Este virus pertence ao gnero Coronavirus, da famlia Coronaviridae. A esta


famlia tambm pertencem os agentes da enterite transmissvel dos perus,
hepatite viral dos camundongos (MVH), gastroenterite transmissvel dos sunos.
(TGE) e gastroenterite transmissvel dos ces. So descritos ainda, agentes da
diarria neonatal dos bezerros, gastroenterite dos potros, pneumonia dos ratos e
em humanos. um virus que se dissemina rapidamente no organismo e a
permanece por muito tempo.

2.1 Morfologia
um virus envelopado, de cadeia de RNA de fita nica, com simetria helicoidal. A
composio de RNA demonstrada por inibidores de DNA, que no interferem na
multiplicao viral. O virus pleomrfico, com dimetro que varia entre 90 a 200
nm. O envelope possui, externamente, protenas na forma de espculas, que
conferem ao virus um aspecto de coroa. Da o nome de Coronavirus.
Estruturalmente constitudo por trs protenas: nucleocapsdeo, glicoprotena de
membrana e o peplmero (projees superficiais). A seguir:

2.1.1 Projees de membrana: so constitudas de aminocidos, num total de


1160 distribudos em duas subunidades: S1, com 520 aminocidos e, S2 com 625
aminocidos. Estes, esto inseridos na membrana e se projetam como se fossem
espinhos. A frao S1 responsvel pela induo de anticorpos inibidores de
hemaglutinao e anticorpos neutralizantes, relacionados proteo viral. Esta
poro sofre em recombinaes aparentemente de um modo fcil, que resultam
em diferenas detectveis em testes de virus neutralizao (VN). A mutao nesta
poro leva ao surgimento de novos sorotipos.

2.1.2 Nucleocapsdeo: glicoprotena que envolve o genoma viral (RNA). Lquidos


alantide de ovos inoculados com material suspeito so ricos de nucleocapsdeo.

2.1.3 Glicoprotena de membrana: tem importncia no processo de


recombinao natural entre os diferentes sorotipos de BI.

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Colocao da figura e foto

2.2. Caractersticas fsico-qumicas

2.2.1 Termoestabilidade: a maioria das cepas do virus de BI relativamente


termosensvel, sendo inativadas em 15 minutos a 56C, variando no entanto, com
a amostra. O lquido alantide conservado a 30C mantm-se vivo por 24 horas,
permitindo-se tambm sua conservao em glicerina sem necessidade de
refrigerao, o que facilita o seu envio a laboratrio para anlise. Tecidos
infectados, se conservados e refrigerao por 80 dias, conservam o virus.
Exsudato traqueal seco, se conservado a 4C, permanece infectado por 180 dias.
Liquido alantide se submetido a congelao e descongelao, contm um
precipitado solvel a 37C, com alta concentrao viral. Este mesmo lquido, se
conservado a -20C, permanece vivel por muitos mses, no necessitando de
conservante, apesar de alguns pesquisadores fazerem referncia ao uso de
glicerina a 50% e soluo de glicose a 10%.

2.2.2 pH: o Virus resistente ao tratamento com pH cido (2,0) por 1 hora/37C, o
que o diferencia de outras amostras virais. pH 30,0 diminui a infectividade de 1 log
at 5 log.

2.2.3 Desinfetante: o virus da BI sensvel maioria dos desinfetante. Tripsina


no tem efeito sobre ele. sensvel ainda radiao UV.

2.2.4 Liofilizao: conserva o virus por um perodo de 30 anos se conservado em


geladeira. Se submetido a 37C perde sua infectividade aps um perodo d 180
dias (forma de diferenciao de outros virus, p.ex. DNV e Influenza Aviria).

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2.2.5 Propriedade hemaglutinante: o lquido alantide infectado com virus de BI


no apresenta atividade hemaglutinante em condies naturais, somente quando
tratado com neuraminidase.

2.2.6 Sobrevivncia em meio ambiente: tm-se feito estudos sobre sua


sobrevivncia em gua, dado o seu uso para a administrao de vacinas. Nela, a
concentrao de cobre a 0,2 mg/l e 5 ppm de Cloro a 25C, diminuem
drasticamente o tempo de sobrevivncia. Ions Cloro a 1 ppm no tem efeito sobre
o virus. Nas estaes do ano: primavera, 12 dias e inverno 56 dias.

3. TRANSMISSO
O virus da BI talvez, o virus que se dissemina mais rapidamente entre as aves,
no necessitando de vetores para sua transmisso, dando-se de ave doente ave
sadia, por contato direto ou indireto, em qualquer estgio respiratrio. O local
primrio de replicao, independente da cepa, no tecido epitelial do trato
respiratrio superior.
Em geral, os portadores podem transmitir o virus at 2 mses depois da infeco
inicial e as aves recuperadas da infeco permanecem susceptveis a uma outra
infeco por outro sorotipo.

Resumo da Transmisso:
1-Via aerossol: trato respiratrio , 4 semanas em mdia
2-Via fezes: muitas semanas
3-Dentro de um lote: 18 a 96 horas, sendo que a transmisso por aerossol, 18 a
36 horas j existem sinais respiratrios.
4-Entre lotes: depende das condies de isolamento entre eles (idem a granjas)
5-Em granjas de mltipla idade a transmisso rpida (2 a 5 dias). Lotes grandes
podem apresentar aves em diferentes estgios de imunidade , em diferentes
estgios de infeco.

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4 - CLASSIFICAO VIRAL
As amostras do virus de BI podem ser classificadas atravs dos diferentes
sistemas sorolgicos, como virusneutralizao, anis de traquia, anticorpos
monoclonais, HI e PCR.
Inicialmente as cepas variantes eram bem distintas dos sorotipos conhecidos. A
capacidade de mutao e recombinao do virus, alm da presso de seleo
atravs do uso prolongado de vacinas vivas, contribuiu para o aparecimento
atravs dos anos, de uma grande variedade de sorotipos e subtipos.
Uma classificao so os patotipos, ou seja, as amostras so classificadas
segundo os rgos mais lesados pelo virus. Em mdia, dois ou mais sistemas so
afetados, j que as amostras tm diferenas entre elas com relao virulncia e
ao tropismo. A variao nos sorotipos deve-se a variaes na seqncia do gene
S1, localizadas nas regies chamadas de hipervariveis.
Muitos sorotipos so conhecidos e tm um significado prtico para o seu controle,
devido ao fato de a imunidade a uma infeco ou vacinao estar relacionada ao
sorotipo e no ter reao cruzada com outro sorotipo. Os mais conhecidos so os
relacionados abaixo. Outras variantes antignicas tm sido relatadas. Dentre as
identificadas temos:
1- BEAUDETTE 66579: tambm conhecida por "Beaudette embryo lethal".
Considerada como uma cepa mutante derivada da cepa Massachussetts. Em ovos
frteis mata os embries em 48 horas, sendo apatognica para aves. uma
amostra usada como antgeno no teste de virusneutralizao. Possui reao
homloga somente com o sorotipo Mass.
2- MASSACHUSSETTS 82828: tambm conhecida como M41, IBV41 e VR21.
Primeiro sorotipo a ser descrito. Acomete trato respiratrio, reprodutivo e em
menor grau o urinrio. Altamente patognica para o sistema reprodutivo de
fmeas, mas no para o trato urinrio, mesmo estando presente em casos agudos
de infeco.
3- CONNECTICUT: tambm chamada de IBV46, VR817. a primeira descrio
de sorotipo diferente do Mass, no tendo reao cruzada com este.

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Tambm acomete o trato respiratrio, porm tida como menos patognica do


que esta. Apresenta as mesmas alteraes microscpicas do que a Mass. No
so relatadas infeces no trato genito-urinrio.
4- AMOSTRAS NEFROTRPICAS: as amostras pertencentes a este grupo so
Gray and Holte, isoladas nos EUA e Holland (H). Esta ltima tem sua
patogenicidade diminuda quando inoculada sucessivamente em ovos
embrionados, o que permite sua aplicao em vacinas. No perde no entanto, a
afinidade pelo tecido renal. Nela identificam-se a H52 e H120, que fazem
referncia ao nmero de passagens em OE.
5- ARKANSAS: variante antignica. Acomete trato respiratrio e reprodutivo. No
relata infeco no trato urinrio.
Existem descries na literatura de novas cepas, com diferente tropismo e
patogenicidade.
No existe correlao entre sorotipo e patotipo, podendo estes, por vzes, serem
sorologicamente distintos entre si. A imunidade cruzada produzida por alguns
sorotipos do virus de BI contra cepas antigenicamente distintas conhecida.
Atualmente no existe nenhuma amostra ou combinao de amostras vacinais de
diferentes sorotipos que reproduzam proteo cruzada completa contra variantes
emergentes.
Alguns trabalhos sugerem a possibilidade de uma nova classificao do virus, no
em sorotipos, mas em Protectotipos. Estes seriam amostras de virus capazes de,
atravs do teste de imunidade cruzada em anis de traquia ou aves SPF, conferir
proteo contra sorotipos do mesmo grupo ou de grupos sorologicamente
distintos. Essa idia provm do fato que, somente algumas alteraes de
aminocidos na glicoprotena S pode gerar o aparecimento de um novo sorotipo
de BI. Portanto, a maior parte da estrutura viral permanece inalterada acarretando
em reaes cruzadas entre os sorotipos.
Uma avaliao prtica da ocorrncia desta reao cruzada pode ser feita atravs
do teste de ciliostase em anel traqueal e recuperao do virus a partir de aves
vacinadas e posteriormente desafiadas com um virus de BI. Pelo teste de anel
traqueal a persistncia do movimento ciliar comprova identidade entre as amostras
virais.
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Isto poderia reduzir significativamente o grande nmero de sorotipos, subtipos,


agrupando-os em nmero muito menor. H estreita correlao do teste "in vitro" e
experimental "in vivo": (aves SPF), com imunoprofilaxia dos plantis no campo
permitindo uma melhor eficincia dos programas vacinais elaborados a partir
deste sistema (produo de vacinas autgenas, p.ex)

5. SINTOMAS E LESES MACROSCPICAS


Mortalidade dificilmente ocorre. Se presente e, em nveis elevados, deve-se a
infees bacterianas secundrias, principalmente E.coli, que ocasiona um quadro
septicmico. Mortalidade devida somente ao virus da BI ocorre quando a infeo
d-se nos primeiros dias de vida das aves ou, quando se do por um virus que
tem tropismo pelo tecido renal. Em aves mais velhas dificilmente ocorre
mortalidade, observando-se mais comumente quadros reprodutivos ou
respiratrios.

5.1 Aves jovens


5.1.1. Sintomas respiratrios: se a infeo por virus de BI no sofre
complicao, os sintomas tendem a desaparecer entre 10-15 dias. Alteraes
patolgicas variveis ocorrem,como edema e exsudato catarral ou mucoso na
traquia e brnquios, congesto pulmonar, inflamao catarral ou fibrinosa nos
sacos areos, pericardite e pleurite. Pintos muito novos apresentam inflamao
catarral nas vias areas e dos seios , causando descarga nasal e lacrimejamento.
Em alguns casos a coagulao do exsudato produz pus nos brnquios que levam
morte. O quadro de Sndrome de Cabea Inchada, caracterizado por edema de
barbela, sinusite, conjuntivite, pode estar associado ao virus de BI. A mortalidade
nestes casos depende da evoluo dos sintomas, do nmero de partculas virais,
cepa, e interao com agentes bacterianos como E.coli, O. rhinotracheale,
Bordetella, Pasteurella. A aplicao de amostras vacinais pouco atenuadas
inadequadamente aplicadas podem levar ao mesmo quadro da doena.

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5.1.2. Sistema urinrio: as amostras predominantemente nefrotrpicas como a


amostra T, produzem de moderada a severa diarria, desidratao e graves
leses renais como nefrite, nefrose e urolitase. Neste caso, a mortalidade um
sinal clnico relevante.

5.2.Aves de postura (postura comercial e reprodutoras)


5.2.1 Sistema respiratrio: no ocorrem ou, se ocorrem, de forma discreta. Em
casos de complicao bacteriana, os sintomas so os mesmos descritos para
aves jovens.
5.2.2 Sistema urinrio: as leses vo de discretas ( ligeiro aumento renal) a um
quadro de urolitase, que uma condio de degenerao renal seguida de atrofia
renal, fibrose, clculos renais formados nos dutos coletores e ureteres de aves
afetadas. Frangas de reposio so potencialmente afetadas com mortalidade
variando de 2 a 50% ou mais. Aves mortas geralmente apresentam um quadro de
gota rica visceral.
Aves em produo em gaiola apresentam queda acentuada de produo, sendo
que, muitas aves afetadas continuam a ser produtivas, se pelo menos 1/2 da
massa renal permanecer funcional. Aves recuperadas podem apresentar gota
rica articular. Amostras nefrotrpicas como as amostras Gray and Holte e, mais
recentemente a amostras Mw34, tm sido correlacionadas a estes quadros.
Algumas cepas Mass podem causar esta condio de maneira moderada a
severa. Especula-se que a urolitase no seria uma interao de um virus de BI,
mas dietas altas em Ca e baixas de P. Restrio de gua tambm no pode ser
descartada.
5.2.3 Sistema reprodutor: fase de viremia. Algumas cepas podem atingir e lesar
o sistema reprodutor e, associando infeo bacteriana, observa-se uma
produo de ovos com alterao de casca (fina e porosa) ou alterao no formato
dos ovos. As quedas na produo podem ser representadas por oscilaes na
postura diria (lotes grandes, p.ex).
Altera-se tambm a qualidade da albumina do ovo, que pode se mostrar aquosa,
com baixa viscosidade. Dependendo da idade de infeo das aves, o quadro
lesional reprodutivo irreversvel, com o aparecimento de falsas poedeiras.
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5.2.4 Sistema digestivo: amostras de Bronquite enterotrpica como a IBVG


(amostra G), tm sido isoladas de plantis com processo entrico associado
intensa diarria, sintomas respiratrios como sem queda acentuada da produo
de ovos. Nestes casos, a amostra Mass tem sido ineficiente no sentido de
proteger as aves contra sinais e sintomas descritos. Uma vacina inativada
fabricada a partir do sorotipo descrito tem sido eficiente na proteo dos plantis
acometidos.

6. LESES HISTOPATOLGICAS
No existem leses patognomnicas para o virus de BI. No se observam
corpsculos de incluso. O exame histolgico pode ser um recurso para se avaliar
a virulncia, a patogenicidade e avaliao de respostas imunes.
A nvel de trato respiratrio, seja em situaes de desafio de campo ou
inoculao, o que se nota a ocorrncia de diminuio dos clios, descamao do
epitlio, presena de clulas inflamatrias e presena de edema na poro da
mucosa e submucosa. Observa-se ainda congesto vascular. Na submucosa v-
se vacuolizao e hemorragia. O lmen traqueal pode conter exsudato sero-
mucoso, que pode ou no conter clulas inflamatrias.
A ausncia de clio e a descamao ocorrem nos primeiros dois dias de infeo,
seja qual for a idade em que esteja ocorrendo a infeo. Em aves jovens o edema
de submucosa proeminente, com discreto infiltrado inflamatrio. Em aves mais
velhas, esse infiltrado j se apresenta mais intenso, talvez pela resposta imune da
ave ser mais eficiente. Esse infiltrado celular, bem como a presena de edema,
tambm tem relao com a amostra de virus, pelo fato de ser mais ou menos
virulenta. Infees secundrias tambm podem ter interferncia na presena de
infiltrado.

No trato reprodutivo o que se pode observar uma reduo localizada ou


generalizada de clios, fibroplasia e edema, presena de focos de infiltrado celular
mononuclear. No trato urinrio observa-se como, leso bsica, nefrite intersticial.

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7. IMUNIDADE
Para a preveno e diagnstico do virus da BI necessrio se conhecer um pouco
dos tipos de imunidade envolvidas. As classes de Ig envolvidas na resposta imune
a uma infeo por virus de BI so IgM, IgG e IgA.
1- IgM: o primeiro Ac a aparecer aps uma infeo atingindo uma alta
concentrao por volta do 7dia ps-infeco. Podem persistir por 20 a 90 dias.
indicativo de infeo recente ou vacinao.
2- IgG: Ac de maior presena no soro aps uma infeo, permanecendo por longo
perodo. So os Ac que se medem na sorologia para diagnstico de BI e em
monitorao de plantis.
3- IgA: Ac produzidos em secrees tais como secreo lacrimal ou salivar. Atua
como primeira linha de defesa do organismo infeo, principalmente no trato
respiratrio superior.
Os tipos de imunidade envolvidas so:
1- Imunidade de origem maternal: Ac IgG e IgM, na traquia e circulantes.
Protegem aves contra infees precoces, porem de curta durao.
2- Imunidade local ou de mucosa: pelo estmulo da glndula de Harder nos
rgos linfides paranasais, paraoculares e traquia. Do tipo IgA e IgG. Protegem
contra infeo respiratria primria.
3- Imunidade mediada por clula: parece ser to ou mais importante quanto a
imunidade local na proteo contra a doena.
4- Imunidade humoral: produzida por Ac associados proteo contra viremia e
consequentemente o envolvimento de outros rgos como oviduto, ovrio e rim.
Ao se falar em sistema imune no se pode deixar de mencionar o efeito
imunossupressor que determinados agentes tm sobre ele. Aves infectadas por
agentes imunossupressores apresentam uma diminuio da resposta imunolgica,
com diminuio da produo nestas Ig, exacerbando os efeitos provocados pelo
virus da BI, p.ex. Interao com agentes como o virus da Doena de Gumboro e
Cryptosporidium, que atuam diretamente sobre a Bursa de Fabricius, virus da
Anemia Infecciosa das Galinhas, que atua sobre o timo, causam
imunossupresso.

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Tem-se relatado em frangos de corte, o isolamento de cepas patognicas de


Reovirus Avirio, que agiriam indiretamente como agentes imunossupressores.
Isto pela interferncia sobre a vacina de Marek aplicada ao primeiro dia, que por
sua vez, tem efeito imunossupressor pela atrofia de rgos linfides primrios (BF
e timo). Substncias antimicrobianas, tais como cloranfenicol, neomicina,
estreptomicina, sulfonamidas podem ter o mesmo efeito, ou ainda agir diretamente
sobre vacinas, diminuindo sua atividade imunognica.

8. DIAGNSTICO
8.1 Presuntivo: baseado no histrico do lote e sinais clnicos. Feito mais no
estgio inicial da doena, quando se mortalidade do lote, da queda nos nveis de
produo de ovos. Torna-se um diagnstico difcil pois, no incio pode-se confundir
com outras enfermidades respiratrias ou reprodutivas, ou ainda, com reaes
vacinais.
8.2 Diagnstico direto: atravs de microscopia eletrnica e provas de
imunofluorescncia onde se observa o virus em tecidos infectados.
8.3 Diagnostico indireto:
8.3.1 Isolamento viral: feito a partir de rgos infectados, sejam eles pulmes,
rins, traquia, tonsilas cecais. No incio da doena respiratria pode-se optar pelo
swab de muco traqueal. Pela afinidade do vrus com o trato intestinal, o isolamento
de algumas amostras virais pode ser realizado a partir deste material, aps
algumas semanas do desaparecimento dos sintomas, o que faz com que no se
considere o seu isolamento um processo infeccioso recente. Para o sucesso do
isolamento, ele deve ser feito o mais breve possvel, quando o lote manifesta
sintomatologia clnica, tendo-se maiores concentraes virais. Alm do momento
da coleta, deve-se atentar tambm, ao adequado acondicionamento dos rgos,
seja por congelamento ou em soluo de glicerina a 50%. Em casos de infeo de
trato urinrio opta-se pela coleta de fragmentos de traquia , pulmo e rins. Para
infeo do trato reprodutivo opta-se alm de fragmentos de oviduto, tonsilas
cecais e rins.
8.3.1.1 Inoculao em ovos embrionados: inoculao de macerado de rgos
em cavidade alantide de ovos SPF, com idade entre 9 e 11 dias de incubao.
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Observam-se alteraes morfolgicas nos embries como nanismo, enrolamento


depsito de urato nos mesonefrons e mortalidade embrionria. Constitui um
mtodo caro, laborioso e demorado, pois necessita da adaptao do virus ao meio
atravs de passagens sucessivas no substrato. O exame do embrio d-se 7 dias
aps a inoculao. H ainda, a possibilidade de isolamento de outros agentes que
tambm podem ocasionar mortalidade embrionria, requerendo um teste
diferencial.
8.3.1.2 Cultivo celular: inoculao em cultura de clulas renais de embrio de
galinha, dispostas em monocamada, com a observao de efeito citoptico e, em
anis traqueais (AT) onde se verifica o efeito de ciliostase. O nmero de
passagens que se exige para a produo de efeito citoptico em clula vai
depender da cepa de virus e da sua concentrao no inculo. Esta metodologia
tambm requer uma adaptao do virus, que pode ser feita inicialmente em OE. O
efeito citoptico visto a formao de sinccios e picnose nuclear.
O isolamento viral em AT uma prova mais rpida em relacao aos OE, com leitura
no 3 dia ps inoculao. Permite uma melhor tipificao do virus. Constitui-se em
uma cultura preparada a partir de traquia de embries de galinha com 20 dias de
idade, com a manuteno individual de traquia em tubos, movimentados a uma
velocidade constante, que permite a manuteno do movimento ciliar.
Microscopicamente v-se uma ciliostase (parada do movimento ciliar) em um
perodo de 72 horas ps-infeccao. O grau de ciliostase vai de 0 (ausncia de
leso) a 4 (ciliostase total). um mtodo que tem demostrado ser muito eficiente
no isolamento, titulao de amostras de campo.
Um ponto importante que, seja qual for a metodologia empregada, o isolamento
de virus pode recuperar amostras de virus provenientes de campo ou de vacina,
no havendo distino entre elas, o que feito a partir de sorologia, confrontando-
se com soros especficos ou atravs de biologia molecular.
8.3.1.3 Ensaio molecular (PCR): mtodo baseado em biologia molecular, que
utiliza princpios de hibridizao e replicao de cidos nucleicos, identificando
microorganismos patognicos, obtidos a partir de homogeneizados de rgos de
aves doentes ou de lquido alantide de OE ou cultivo celular inoculados com
material suspeito. um mtodo rpido e sensvel para identificar sorotipo e
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variantes de virus de BI. O valor da prova de PCR que ela traz a possibilidade de
diferenciao futura entre virus vacinais e virus de campo. Hoje utilizado como
mtodo auxiliar no diagnstico de BI junto com outras provas.
8.3.1.4 Virusneutralizao: neste teste h neutralizao do virus a partir de Ac
conhecidos. Pode ser realizada tanto em OE como em cultivo celular. uma
tcnica utilizada para identificar sorotipos de virus conhecidos ou sorotipos
diferentes de virus conhecidos, pela variao na poro S1 do virus.
O resultado dado em ndice de neutralizao, que o quociente do titulo do
virus-diluente pelo ttulo-soro. O resultado baseado no resultado obtido em aves
1,5
sadias que 10 . Assim, ndices que tm como resultado at 1,5 so
considerados como negativos. De 1,5 a 1,9 so considerados como suspeitos.
Amostras que apresentarem resultados com ndices de neutralizao igual ou
superior a 102 so considerados como positivos.
8.3.2 Sorologia: o mtodo mais utilizado para diagnstico de BI, feito atravs de
diluies seriadas do soro avaliando a ausncia, presena e aumento no ttulo de
Ac em sorologias comparadas, propiciando com isso, o monitoramento de
programas de vacinao ou possveis infees de campo. Identifica tambm,
sorotipos existentes do virus dependendo da tcnica sorolgica utilizada. Alguns
dos procedimentos no se correlacionam devido a diferena entre os Ac
detectados e medidos em cada um deles. P.ex.: todas as amostras de virus de BI
induzem produo de Ac precipitantes e os detectados por ELISA. Com relao
prova de virusneutralizacao, existem variaes que so induzidas pelas unidades
S1 (subunidades de glicoprotena S). Para analise sorolgica importante
considererar o momento da coleta e, como j foi dito, o tipo de anlise solicitada,
pois dependendo do estgio da doena, a resposta do sistema imune produzir
um tipo de Ig.

8.3.2.1 ELISA: mtodo imunoenzimtico que, pela automao, permite a


deteco e titulao de Ac em uma grande amostragem de soros ao mesmo
tempo. A maioria das provas de ELISA que existe no mercado especfica
para sorogupo, ou seja, no diferencia sorotipos. Isto se deve ao fato de a
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superfcie da placa onde se d a reao Ag-Ac, ser impregnada com suspenso


viral na sua forma completa. A resposta ento, d-se a qualquer amostra de
virus. Detecta IgG e IgM, tornando-se portanto, um indicador de imunidade
humoral, permitindo a anlise de uma resposta ps-vacinao, de infeo
(aves adultas) e de imunidade materna (aves jovens).
Os ttulos obtidos neste teste devem , para pintos de 1 dia, variar entre 3000 e
6000. Para reprodutoras ou PC, variar entre 3000 e 10000. Leva-se em
considerao nestas aves, a idade, o esquema de vacinao utilizado pela
granja e a procedncia do Kit.
8.3.2.2 Soroneutralizao: detecta Ac produzidos pela frao proteica S1,
portanto, prova sorotipo especfica. Pode ser realizada em cultura de clulas ou
em anel traqueal. A leitura tem como princpio o mesmo do isolamento do virus em
OE e CC, ou seja, a comprovao de alteraes embrionrias e efeitos
citopticos. Requer um soro quer no tenha reao cruzada com outro sorotipo.
Os anticorpos neutralizantes so altamente especficos e responsveis pelo efeito
protetor do soro. Esto dirigidos contra determinantes antignicos da superfcie
viral, que intervm no processo de adsorso clula. Portanto, importante na
caracterizao viral. Os ttulos observados so os seguintes:
1:20 - infeo em aves no vacinadas
1:40 a 1:320 - vacinao
1:640- doena
8.3.2.3 Inibio da hemaglutinao: prova sorolgica qualitativa que pode ser
empregada tanto para a identificao sorolgica como no sorodiagnstico do virus.
A identificao sorolgica faz-se mediante a inibio da hemaglutinao de uma
amostra viral por um soro-padro. O sorodiagnstico ao contrrio, a deteco no
soro do animal, de Ac que inibem a hemaglutinao por um virus especfico.
O virus da BI no naturalmente hemaglutinante, como o virus da DNV e da
Influenza Aviria, necessitando de tratamento prvio com a enzima fosfolipase tipo
C, para exposio das hemaglutininas, o que torna esta prova muito trabalhosa e
de difcil padronizao. Os Ac hemoaglutinantes so mais especficos que os

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neutralizantes e tambm permitem a diferenciao de sorotipos. A resposta do


virus da BI por Ac hemoaglutinantes rpida, ocorrendo dentro de 5-7 dias,
atingindo um pique de resposta por volta dos 14 dias. Como ttulo podemos
observar as seguintes respostas:
1- entre 1:32 e 1:256- e reaes cruzadas de diferentes sorotipos
2- ou igual a 1:32- infeo em aves no vacinadas
3- ou igual a 1:512- especficos para o sorotipo testado.
4- entre 1:16 e 1:32 com SN 4 log 2 e 5 log 2 em frango de corte considerado
como vacinao
5- ttulos entre 1:4 e 1:8 (corte) com SN 4 log2, considera-se resposta fraca
vacinao.
6- poedeiras e reprodutoras que receberam vacina viva, com sorologia aps 3
semanas, temos resposta de 1:32 a 1:128
7- poedeiras ou reprodutoras que receberam vacina oleosa aps 3 semanas
observam-se ttulos que variam de 1:128 a 1:512.
8.3.2.4 AGP : prova rpida de baixo custo, qualitativa, baixa sensibilidade, que
permite a visualizao de resposta pela precipitao de complexos Ag-Ac em meio
semi-slido. Detecta principalmente IgM. A aplicao de vacina oleosa ou H 52
permite a reao positiva por at 30 dias. Em infeo natural a reao mantm-se
por at 3 meses. Para a amostra H 120 observa-se uma baixa positividade.
Resultados negativos podem ser falsos. Em lote de produo, resposta menor do
que 33% significa vacinao anterior. Acima de 33% dos soros com resposta
positiva provvel desafio, associando-se a queda na postura ou a resposta
vacinao.

8.3.2.5 ELISA de captura com Ac monoclonais: so tcnicas utilizadas para se


detectar o virus de BI diretamente de tecidos infectados ou a partir de OE ou
cultura celular infectados. Os Ac monoclonais podem ser especficos a um
sorotipo ou detectar o sorogupo. So produzidos por um clone isolado de Ig,
definido quimicamente, que no sofre a variao existente entre animais ou no
prprio animal.

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9. DIAGNSTICO DIFERENCIAL:
Existem outros agentes infecciosos que podem ocasionar os mesmos quadros
clnicos observados na BI tais como: Doena de Newcastle (DN), Laringotraquete
(LT) e Coriza Infecciosa (IC). Dentre estas existem sinais caractersticos que
permitem diferenci-las da BI. Na DN tem-se um quadro mais severo, com
mortalidade elevada e ainda, por v6ezes,sinais nervosos. A sua disseminao no
plantel mais rpida. Na LT a disseminao mais lenta. Na IC observa-se um
edema facial com descarga nasal serosa que, raramente ocorre na BI. Quadros
reprodutivos, tais como queda na psotura e alterao na qualidade dos ovos
podem ser vistos na Sndrome da Queda da Postira (EDS). A diferena entre elas
reside no fato de na EDS no se ter alterao da qualidade da albumina, o que
ocorre na BI.
Ainda h que se considerar as interferncias ambientais que podem ocasionar
quadros respiratrios. Nos distrbios reprodutivos, alm de causas infecciosas,
existem as causas nutricionais e as ambientais.

10. PREVENO E CONTROLE


O controle da BI est relacionado com preveno da infeo dentro do lote.
Impedir a transmisso para outros lotes e para outras granjas atravs de medidas
de manejo e vacinao, j que este virus, quando presente, altamente invasivo,
disseminando-se rapidamente no organismo da ave.
No aspecto de manejo, como a principal via de transmisso a via area e o
virus se espalha rapidamente dentro do lote, podemos tentar impedir a
transmisso para outros galpes atravs do controle do fluxo de pessoas, banho,
troca de roupa, impedir o acesso de veculos de rao, ovos de rea no infectada
para reas infectadas. Isto vlido para outras granjas prximas tambm. No
caso de granjas de mltipla idade, em algumas reas intensamente povoadas,
este trabalho de manejo para impedir a transmisso fica quase impossvel.
Outra forma de preveno a vacinao. Para selecionarmos uma cepa vacinal, o
ideal seria isolar e tipificar as cepas que esto causando problemas de campo.
Infelizmente no Brasil este trabalho no rotineiro e existem apenas tentativas
isoladas neste sentido. O problema que o procedimento para isolamento e,
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principalmente para tipificao do virus, demandam tempo e dinheiro para


adaptao de um virus em embrio de galinha ou em sistemas celulares e ainda,
um banco de soros contra cepas conhecidas tambm torna-se complicado. Com o
uso de Ac monoclonais e da tcnica de PCR este procedimento deve ser
simplificado.

11. VACINAS
11.1 Vacinas atenuadas: derivam da baixa virulncia do virus e tm a funo de
prevenir e controlar infees em frango de corte e sensibilizar poedeiras
comerciais e reprodutoras jovens. Vacinas muito atenuadas no se replicam nas
aves, vacinas pouco atenuadas podem provocar reaes severas ou doena
(salpingite, ooforite), dependendo do ttulo do virus na vacina, via de aplicao
(oral, ocular, pulverizao, gua de bebida), do nvel de Ac no momento da
aplicao, sanidade do plantel, etc.
11.2 Vacinas inativadas: no provocam reao ou doena. Conferem um
estmulo antignico com ttulos altos e uniformes para proteger a produo e a
qualidade dos ovos, porm no impedem infeo das vias respiratrias superiores.
Necessitam de prvia sensibilizao por vacina viva. Sorotipos Mass. Arkansas,
D274.

12. CONCLUSO
de suma importncia tambm, a perfeita adequao de tcnicas de diagnstico.
Bem como o aprimoramento de novas, para deteco de novas cepas variantes.
Ainda, o controle de agentes intercorrentes e das condies ambientais favorveis
a ocorrncia de infees nos planteis.
O controle da doena em plantis reside em se detectar a origem do problema,
quais seus fatores primrios, a existncia de fatores que atuam como
complicantes. O ajuste de programas de vacinao atravs de monitoramento
sorolgico, a obedincia a preceitos de biossegurana, cuidados no manejo, etc.
Todos estes cuidados tem interfer6encia direta sobre a Sndrome da Doena
respiratria por virus de BI e suas associaes.

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Na sndrome respiratria do Brasil, considero este virus ao lado dos


imunossupressores, como sendo um dos agentes desencadeantes de processo
patolgico na imensa maioria dos casos diagnosticados. A presso de seleo
induzida pelo "status" imunitrio em uma determinada regio geogrfica pode
resultar em diferentes sorotipos do vrus e, uma evoluo independente dos
sorotipos de cada regio geogrfica. Porisso, a grande variedade de sorotipos
encontrada em todas as partes do mundo, no havendo necessariamente
identidade antagnica entre elas. Por outro lado, isto no significa que teremos
que utilizar vacinas especficas para cada sorotipo variante encontrado.

13. BIBLIOGRAFIA
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