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Pesq. Vet. Bras.

30(6):479-483, junho 2010

Carcinoma bronquolo-alveolar em leo-africano


(Panthera leo)1
Ricardo B. Lucena2, Rafael A. Fighera3, Adriano B. Carregaro4, Maria Andria
Inkelmann2 e Claudio S.L. Barros3*

ABSTRACT.- Lucena R.B., Fighera R.A., Carregaro A.B., Inkelmann M.A. & Barros C.S.L.
2010. [Bronchioloalveolar carcinoma in an African Lion (Panthera leo).] Carcinoma
bronquolo-alveolar em leo-africano (Panthera leo). Pesquisa Veterinria Brasileira 30(6):479-
483. Departamento de Patologia, Universidade Federal de Santa Maria, Camobi, Santa Maria,
RS 97105-900, Brazil. E-mail: claudioslbarros@uol.com.br
A case of diffuse bronchioloalveolar carcinoma of the mixed type was diagnosed in the
lung of an adult female African lion (Panthera leo) with presenting signs of progressive dyspnea
and weight loss. In all pulmonary lobes there were multiple 0.2-0.5cm in diameter soft and
homogenous white nodules. Histologically, these nodules consisted of neoplastic cells with an
alveolar and papillary disposition, a pattern reminiscent of the preexistent pulmonary structure.
The cytoplasms of numerous neoplastic cells were positive in the periodic acid-Schiff (PAS)
stain. At immunohistochemistry examination, all neoplastic cells reacted strongly and uniformly
to pancytokeratin; focal reactivity for thyroid transcription factor 1 (TTF-1) was observed in the
nucleus of neoplastic cells mainly in those at the margins of the nodules. Positive reaction for
surfactant A was observed in multifocal areas, both in the cytoplasm and plasma membranes
of neoplastic cells. The diagnosis of diffuse bronchioloalveolar carcinoma of the mixed type
was made based on histological, histochemistry and immunohistochemistry findings. This
seems to be the first report of a primary malignant neoplasm in the lung of the African lion.
INDEX TERMS: Felid, Panthera leo, oncology, pathology, pulmonary carcinoma.

RESUMO.- Um caso de carcinoma bronquolo-alveolar difuso (PAS) foi observada marcao positiva no citoplasma de
do tipo misto foi diagnosticado em um leo-africano numerosas clulas neoplsicas. Todas as clulas neoplsi-
(Panthera leo), hospitalizado com sinais de dispnia e ema- cas demonstraram forte e uniforme imunorreatividade cito-
grecimento progressivo. Em todos os lobos pulmonares plasmtica para pancitoceratina. A marcao para o fator 1
havia mltiplos ndulos esbranquiados, macios e homo- de transcrio da tireide (TTF-1) foi observada em focos
gneos, de 0,2-0,5cm em dimetro. Histologicamente, os nos ncleos das clulas neoplsicas das margens dos n-
ndulos eram constitudos por clulas neoplsicas arranja- dulos. Nas seces avaliadas para surfactante A, a marca-
das em alvolos e papilas sustentados por moderado estro- o foi observada em mltiplas reas focais, tanto no cito-
ma fibrovascular, um padro que lembrava a estrutura pul- plasma como na membrana citoplasmtica das clulas ne-
monar pr-existente. Na reao pelo cido peridico de Schiff oplsicas. O diagnstico de carcinoma bronquolo-alveolar
difuso do tipo misto foi feito com base nos achados
1
histolgicos, histoqumicos e imuno-histoqumicos. Essa
Recebido em 16 de novembro de 2009.
parece ser a primeira descrio de um neoplasma pulmonar
Aceito para publicao em 20 de abril de 2010.
2 Programa de Ps-Graduao em Medicina Veterinria, rea de primrio maligno em leo-africano.
concentrao em Patologia Veterinria, Centro de Cincias Rurais TERMOS DE INDEXAO: Doenas de lees, oncologia, pa-
(CCR), Universidade Federal de Santa Maria (UFSM), Camobi, Santa tologia, carcinoma pulmonar.
Maria, RS 97105-900, Brasil.
3 Departamento de Patologia, Centro de Cincias da Sade, UFSM,
INTRODUO
Santa Maria, RS. *Pesquisador 1A do CNPq. Autor para correspondn-
cia: claudioslbarros@uol.com Neoplasmas primrios de pulmo so pouco comuns em
4 Departamento de Clnica de Pequenos Animais, CCR, UFSM, San- animais, diferentemente do que ocorre em humanos, em
ta Maria, RS. que so descritos mundialmente como os mais frequentes

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e mortais tipos de cncer (Parkin et al. 2004). O carcino- RESULTADOS


ma bronquolo-alveolar (CBA) um neoplasma pulmonar Na necropsia foi confirmado o pssimo estado corporal. Em
caracterizado pela proliferao celular ao longo dos alvo- todos os lobos pulmonares havia mltiplos ndulos de 0,2-
los pulmonares e junes bronquolo-alveolares pr-exis- 0,5cm de dimetro. Ao corte, os ndulos eram macios e
tentes, o que mantm a arquitetura do pulmo. Em medici- apresentavam-se homogeneamente esbranquiados. His-
na veterinria, o CBA o neoplasma primrio de pulmo tologicamente, os ndulos eram constitudos por clulas
mais prevalente em ces e gatos, mas incomum em neoplsicas arranjadas em alvolos e papilas com modera-
outras espcies. Tumores bronquolo-alveolares geralmente do estroma fibrovascular, um padro que lembrava a estru-
ocorrem como ndulos isolados ou na forma de mltiplas tura pulmonar pr-existente (Fig.1). As clulas neoplsicas
massas na periferia do pulmo; raramente tais tumores eram cuboides ou colunares baixas, mas variavam de ta-
podem ocorrer de forma difusa (Wilson & Dungworth 2002). manho e forma em algumas reas (pleomorfismo modera-
Histologicamente, neoplasmas primrios de pulmo podem do). Essas clulas tinham citoplasma eosinoflico e abun-
ser confundidos com metstases pulmonares de outras dante; o ncleo era grande, redondo, disposto basalmente e
formas de cncer. Nesses casos, a avaliao imuno- formado por cromatina agregada com nuclolo nico e
histoqumica imprescindvel para confirmar a verdadeira inconspcuo. Ocasionais clulas com ncleo excntrico,
origem pulmonar (Ramos-Vara et al. 2005). citoplasma abundante e com um nico e grande vacolo
Neoplasmas so pouco descritos em lees (Panthera (clulas em anel de sinete) foram observadas. Em mlti-
leo); quando relatados se restringem ao tegumento e aos plas reas dos ndulos havia corpos de psammoma no
sistemas alimentar, hematopotico, reprodutor, nervoso e interstcio (Fig.2). Mitoses eram pouco frequentes. Em ex-
esqueltico (Dorso et al. 2008, Owston et al. 2008, Tucker tensas reas do pulmo havia espessamento dos septos
et al. 2008, Taylor et al. 1976). No conhecimento dos auto- alveolares por macrfagos e tecido conjuntivo (Fig.3). Gran-
res, at o momento, no h descrio na literatura de de quantidade de fluido proteinceo, associado com fibrina
neoplasma primrio maligno afetando o Sistema Respirat- e neutrfilos ntegros, era visto no interior dos alvolos.
rio em leo-africano. Foi descrito apenas um adenoma pul- Na reao com o PAS foi observada marcao positiva
monar como um achado incidental em um leo submetido no citoplasma de numerosas clulas neoplsicas, o que per-
eutansia em decorrncia de um oligodendroglioma mitiu interpretar essas clulas como secretoras de mucina.
enceflico (Tucker et al. 2008). Este relato tem como obje- Nas clulas em anel de sinete o vacolo observado na HE
tivo descrever os aspectos clnicos, patolgicos e imuno- reagia fortemente com o PAS (Fig.4). Nas reaes com
histoqumicos do carcinoma bronquolo-alveolar em um leo. tricrmico de Masson houve marcao de extensas reas
de colgeno, demonstrando a marcada fibrose (desmopla-
MATERIAL E MTODOS sia).
Um espcime de leo-africano (Panthera leo), fmea, adulto, Todas as clulas neoplsicas demonstraram forte e uni-
com histrico de dispneia e emagrecimento progressivos foi forme imunorreatividade citoplasmtica para pancitoceratina
atendido no Hospital Veterinrio Universitrio da Universidade (Fig.5). Na avaliao para vimentina, a expresso foi nega-
Federal de Santa Maria (HVU-UFSM) e necropsiado no Labora- tiva nas clulas neoplsicas e positiva no tecido conjuntivo
trio de Patologia Veterinria da UFSM (LPV-UFSM). Fragmen-
associado ao neoplasma. As seces testadas com anti-
tos de diversos rgos foram fixados em formol a 10%, embebi-
dos em parafina, seccionados a 3m, corados com hematoxili-
na e eosina (HE) e submetidos a tcnicas histoqumicas que
incluram o cido peridico de Schiff (PAS) e o tricrmico de
Masson (TM). Avaliao imuno-histoqumica foi realizada pela
tcnica da estreptavidina-biotina-peroxidase (LSAB Kit Peroxi-
dase Universal, DakoCytomation5) em diferentes seces do
pulmo. A imunomarcao foi visualizada com o uso de 3-3di-
aminabenzidina (DAB). As seces foram contracoradas com
hematoxilina de Harris; utilizaram-se controles positivos e ne-
gativos para cada anticorpo. Inicialmente utilizou-se anticorpo
anti-pancitoceratina (policlonal, DakoCytomation5), na diluio
de 1:2000, e anti-vimentina (clone V9, DakoCytomation5), na
diluio de 1:100. As seces foram testadas tambm com anti-
protena S-100 (policlonal, DakoCytomation5), na diluio de 1:5000,
e anti-cromogranina A (clone DAK-A3, DakoCytomation5), na
diluio de 1:600. Para confirmar a origem pulmonar das clu-
las neoplsicas, as seces foram avaliadas para a presena
do TTF-1 (clone 8G7G3/1, DakoCytomation5), na diluio de 1:50, Fig.1. Pulmo, carcinoma bronquolo-alveolar. As clulas neo-
e da apoprotena surfactante A (clone PE10, DakoCytomation5), plsicas esto arranjadas em alvolos, que, por vezes, pro-
na diluio de 1:800. jetam-se como papilas, e so sustentadas por escasso es-
troma fibrovascular. Observe que o padro pulmonar pr-
5 Dako Cytomation, 6392 Via Real, Carpinteria, CA, USA. existente foi preservado. HE, obj.10x.

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Fig.2. Pulmo, carcinoma bronquolo-alveolar. Material anfof-


lico e radiado no interstcio pulmonar (corpos de psammo-
ma). Observe que a direita h trs outros corpos menores
coalescendo no interior de um alvolo. HE, obj.40x.

Fig.4. Pulmo, carcinoma bronquolo-alveolar. Clulas ricas


em mucina fortemente marcadas pela reao com o cido
peridico de Schiff. PAS, obj.40x.

Fig.6. Pulmo, carcinoma bronquolo-alveolar. Foco de mar-


cao positiva para o fator 1 de transcrio da tireide em
uma juno bronquolo-alveolar neoplsica. A marcao
apenas nuclear. Imuno-histoqumica, mtodo da estrepta-
vidina-biotina-peroxidase, contra-colorao com hemato-
xilina de Harris, obj.40x.
2
Fig.3. Pulmo, carcinoma bronquolo-alveolar. No interstcio,
h deposio de tecido conjuntivo fibroso e acentuado
infiltrado inflamatrio constitudo principalmente por ma-
crfagos. HE, obj.40x.

Fig.5. Pulmo, carcinoma bronquolo-alveolar. Marcao forte


e uniforme para pancitoceratina no citoplasma das clulas
neoplsicas. Imuno-histoqumica, mtodo da estreptavidi-
na-biotina-peroxidase, contra-colorao com hematoxilina
de Harris, obj.20x.

protena S-100 e anti-cromogranina A foram negativas. A


marcao para o TTF-1 foi observada em focos, principal-
mente nas clulas neoplsicas das margens dos ndulos,
marcando apenas o ncleo (Fig.6). Nas reas onde o
neoplasma era composto por clulas secretoras de mucina
no houve marcao para o TTF-1. Nas seces avaliadas
para surfactante A, a marcao foi observada em mltiplas
reas focais, tanto no citoplasma como na membrana cito-
plasmtica das clulas neoplsicas (Fig.7). Com base nes-
ses achados o diagnstico definitivo foi de carcinoma
6 bronquolo-alveolar difuso do tipo misto.

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tocolos seguros de diagnstico. Neste caso, a avaliao


inicial demonstrou imunomarcao positiva para pancito-
ceratina e negativa para vimentina nas clulas neoplsi-
cas, confirmando a origem epitelial do neoplasma em ques-
to. Para comprovar a origem primria pulmonar, foram
realizadas anlises para TTF-1 e apoprotena surfactante
A. O TTF-1 uma protena originalmente identificada nas
clulas foliculares da tireoide, mas tambm foi observada
nas clulas respiratrias e em reas do crebro em desen-
volvimento (Lau et al. 2002). O TTF-1 tem sido apontado
como um marcador altamente especfico em adenocarci-
nomas pulmonares de humanos e de ces (Lau et al. 2002,
Ramos-Vara et al. 2005). Na leoa deste relato, a marcao
para TTF-1 foi observada em focos na periferia dos ndu-
los pulmonares. Nos locais de acentuada necrose e infla-
Fig.7. Pulmo, carcinoma bronquolo-alveolar. Foco de mar- mao a marcao foi fraca ou ausente. Nas reas com-
cao positiva para apoprotena surfactante A em um alv- postas por clulas secretoras de mucina no foi observa-
olo neoplsico. A marcao apenas citoplasmtica. do marcao. Em humanos tambm no h expresso para
Imuno-histoqumica, mtodo da estreptavidina-biotina-pe- esse anticorpo em CBA do tipo mucinoso (Lau et al. 2002).
roxidase, contra-colorao com hematoxilina de Harris, Neste caso, a marcao para TTF-1 foi superior a marca-
obj.40x. o para apoprotena surfactante A, essa observao foi
constatada tambm em humanos, no qual apenas 57%
DISCUSSO dos CBA foram positivos para apoprotena surfactante A
As leses neoplsicas observadas no pulmo eram gra- contra 71% de positividade nos casos testados para TTF-
ves o suficiente para explicar a acentuada dispneia apre- 1 (Kaufmann & Dietel 2000). A marcao negativa nas
sentada por esta leoa e foram responsveis pelo atendi- seces testadas com cromogranina A serviu para excluir
mento clnico ao qual o animal foi submetido. As extensas a possibilidade de tratar-se de tumor neuroendcrino ou de
reas de fibrose associadas ao tumor, possivelmente metstases de neoplasmas endcrinos.
induzidas pelas clulas neoplsicas, levaram a um diag-
nstico tentativo inicial de fibrose pulmonar idioptica felina CONCLUSES
espontnea, descrita em gatos (Williams et al. 2004), mas No nosso conhecimento, esta a primeira descrio
esse diagnstico foi posteriormente afastado em razo da de neoplasma pulmonar primrio maligno em leo-africa-
fibrose ser, neste caso, pouco significativa6. no.
A classificao dos tumores de pulmo em humanos e O neoplasma comprometeu acentuadamente o parn-
animais baseada no stio de origem, no padro histolgi- quima pulmonar e foi responsvel por um quadro respira-
co ou na combinao desses (Wilson & Dungworth, 2002). trio grave.
Neste caso, a avaliao histolgica foi compatvel com De acordo com a distribuio e padro histolgico, o
carcinoma bronquolo-alveolar (CBA), uma vez que reve- neoplasma foi classificado como carcinoma bronquolo-
lou clulas neoplsicas com citoplasma abundante, que alveolar difuso do tipo misto.
foram PAS-positivas, e clulas com moderada quantidade A origem pulmonar foi confirmada atravs da tcnica
de citoplasma, que foram PAS-negativas, caracterizando de imuno-histoqumica (positiva para pancitoceratina, TTF-
um CBA do tipo misto. O CBA um neoplasma originado 1 e apoprotena surfactante A) e o padro histolgico foi
dos pneumcitos tipo II ou das clulas de Clara e o padro estabelecido atravs da HE e da histoqumica (padro misto
misto tem sido descrito em outras espcies animais (Wil- de reao ao PAS).
son & Dungworth, 2002). Agradecimentos.- Aos patologistas do Diagnostic Center for
O pulmo um dos principais stios de metstases de Population and Animal Health, Michigan State University, Lansing, MI,
neoplasmas no pulmonares, o que faz com que muitas EUA, Ingeborg M. Langohr, Rebecca Smedleye e Kurt Williams, pela
vezes seja difcil distinguir neoplasmas pulmonares pri- disponibilidade em dar sua opinio acerca dos aspectos histopatolgi-
mrios de metstases (Ramos-Vara et al. 2005). Estudos cos do caso aqui relatado.
imuno-histoqumicos em neoplasmas primrios de pulmo
REFERNCIAS
so imprescindveis para posterior estabelecimento de pro-
Dorso L., Risi E., Triau S., Labrut S., Nguyen F., Guigand L., Wyers M.
& Abadie J. 2008. High-grade mucoepidermoid carcinoma of the man-
6 Lminas dessa leso foram examinadas pelo Dr. Kurt Williams, dibular salivary gland in a lion (Panthera leo). Vet. Pathol. 45:104-108.
patologista norte-americano do Diagnostic Investigation, College of Veteri- Kaufmann O. & Dietel M. 2000. Thyroid transcription factor-1 is the superi-
nary Medicine, Michigan State University, que descreveu a fibrose pul- or immunohistochemical marker for pulmonary adenocarcinomas
monar idioptica felina espontnea em gatos. O Dr. Williams afastou a and large cell carcinomas compared to surfactant proteins A and B.
possibilidade se tratar dessa condio pela falta de fibrose significativa. Histopathology 36:8-16.

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