QUMICA 4

Prctica 9.- Separacin de los componentes de una mezcla mediante

cromatografa en capa fina

En esta prctica se pretende familiarizar al alumno con la tcnica de separacin mediante cromatografa plana
en capa fina. Para ello se va a realizar un experimento de separacin de los componentes de una mezcla
binaria formada por colorantes utilizados como indicadores qumicos (azul de metileno y naranja de metilo).

1) Conceptos previos:
Es fundamental que el alumno tenga claros los siguientes conceptos antes de comenzar la prctica en el
laboratorio, por lo que deber consultar la bibliografa disponible en el moodle para esta prctica:
- Qu es la cromatografa?
- Dentro de la cromatografa en capa fina: Qu es la fase estacionaria? y qu es la fase mvil?
- El concepto de polaridad
- Qu es y cmo se calcula el factor de retencin (Rf)
Estos conceptos sern evaluados durante la realizacin de la prctica.

2) Procedimiento Experimental:
Se parte de una disolucin problema que contiene dos componentes (azul de metileno y naranja de metilo). Se
dispone tambin de dos disoluciones que se utilizarn como patrones o referencias: una disolucin que
contiene slo azul de metileno y otra disolucin que contiene slo naranja de metilo. Y se emplear una placa
de capa fina de gel de slice.
Los pasos a seguir son los siguientes:
1.- Preparacin de la Cubeta de Desarrollo:
- Recortar una tira ancha de papel de filtro de tal forma que cubra toda la pared de la cubeta de desarrollo (o en
un frasco con tapa que haga las veces de cubeta), excepto una pequea parte que se usar como ventana
(segn el dibujo).
- Aadir unos 15 mL de eluyente (etanol:acetona,
1:2) hasta que cubra aproximadamente 1 cm del
fondo. Cerrar el frasco sin que se caiga el papel y
dejar que el eluyente ascienda por aquel, para
favorecer que el interior de la cubeta se sature
Papel de con vapores de eluyente. La cubeta debe de
filtro mantenerse siempre cerrada para evitar la
evaporacin de eluyente y, consecuentemente, la
alteracin de la composicin.
ventana
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2.- Preparacin de la placa cromatogrfica:

-Recortar una placa cromatogrfica de 4-5 cm de ancho y 10 cm de largo. A continuacin trazar con un lpiz
blando suavemente una lnea paralela al borde inferior a una distancia aproximada de 1,5 cm de dicho borde.
Marcar tambin tres puntos finos sobre la lnea, separados entre ellos como mnimo 1 cm
- Con ayuda de un capilar depositar en el primer punto varias gotas de la disolucin problema. Repetir la
operacin con otro capilar para depositar en el segundo punto la disolucin de azul de metileno y en el tercer
punto la disolucin de naranja de metilo. Se deja secar al aire.
3.- Desarrollo Cromatogrfico:
- Introducir en la cubeta la placa cromatogrfica con cuidado para que quede recta, de tal forma que el eluyente
avance paralelo a la lnea base. Cerrar inmediatamente la cubeta.
- Cuando el eluyente llegue prximo el borde superior de la placa, retirarla con las pinzas y marcar con un
lpiz el nivel hasta donde ascendi el eluyente
- Dejar secar la placa al aire o con la ayuda de una pistola de aire caliente.
- Cuando la placa est seca dibujar con el lpiz el contorno de todas las manchas coloreadas que se observen
sobre la placa.
- Se debe dibujar el desarrollo cromatogrfico obtenido en tu cuaderno lo ms detalladamente posible.
- Calcula los factores de retencin de los componentes de la muestra y compralos con los correspondientes a
los patrones.

4.- Separacin de Componentes de una tinta:

- Prepara una nueva placa cromatogrfica igual que en el apartado 2, pero la muestra a depositar ser la tinta
de varios rotuladores diferentes.
- Emplea la misma cubeta y fase mvil que has usado en el apartado anterior para llevar a cabo la separacin
cromatogrfica.
- Se debe dibujar el desarrollo cromatogrfico obtenido en tu cuaderno lo ms detalladamente posible.

Nota: Pueden realizarse otros experimentos variando la polaridad de eluyente (utilizando distintas proporciones
de disolventes) para ver cmo influye en la separacin. Cada alumno podra utilizar una mezcla diferente.

3) Cuestiones de evaluacin
1. De la prctica que has realizado, cul ha sido la fase mvil, la fase estacionaria y el eluyente?
2. Razona cul de los dos componentes (naranja de metilo o azul de metileno) ha quedado ms retenido en la
placa y por qu.
3. Y si fuese una mezcla de 3 componentes cmo tendras que llevar a cabo la separacin?
4. Si se variase la temperatura a la que se lleva a cabo este experimento, se vera afectada la separacin
cromatogrfica?
5. Por qu no se puede utilizar tinta para marcar la lnea de aplicacin de muestras en
una placa cromatogrfica?
6. Segn la siguiente placa de cromatografa, indica si las siguientes
afirmaciones son ciertas o falsas, justificando las respuestas:

a) El Rf del compuesto A es menor que el Rf del compuesto B

b) El compuesto B queda menos retenido que el compuesto A

7. Sabiendo que el tiempo de retencin de una sustancia en una placa de capa fina es Rf = 0,65 al emplear
como eluyente una mezcla de ter dietlico:hexano en proporcin 1:1, y teniendo en cuenta que el ter dietlico
es ms polar que el hexano, responde de manera razonada a la siguiente pregunta: De qu disolvente habr
que aumentar su proporcin en la mezcla para usarla como eluyente si queremos obtener un Rf = 0,30.