UNIVERSIDAD NACIONAL FEDERICO VILLARREAL

FACULTAD DE CIENCIAS NATURALES DE MATEMATICA

ESCUELA PROFESIONAL DE BIOLOGIA

FECUNDACIN In vitro DEL ERIZO DE

MAR (Tetrapigus niger)

CURSO:

Embriologia

DOCENTE:

lvarez lvarez Javier

ALUMNO:

Ochoa Cueva Fiorella Patricia

HORARIO:

2:40 A 4:20
 FECUNDACIN In vitro DEL ERIZO DE MAR
(TETRAPIGUS NIGER)

Introduccin
Los estudios en erizos de mar proporcionan informacin sobre la fecundacin y el
desarrollo embrionario, siendo un modelo de desarrollo del embrin. El tamao de
los gametos en erizo es muy similar al de los gametos humanos.
El erizo de mar Tetrapygus niger es muy utilizado en estudios reproductivos ya
que es fcil obtener sus gametos y realizar fecundaciones, adems las etapas de
desarrollo pueden ser identificadas claramente. A travs de esta actividad los
alumnos pueden realizar una fecundacin in vitro del erizo de mar y observar las
diferentes fases del desarrollo hasta llegar a la larva pluteus.
Fecundacin en organismos marinos
El proceso de la fecundacin comienza con la interaccin del espermatozoide con
el ovocito maduro. La primera interaccin consiste en el contacto del
espermatozoide con la cubierta ms externa del ovocito, esto desencadena una
serie de reacciones, entre ellas la reaccin del espermatozoide, lo que permite
finalmente la incorporacin y dispersin del material gentico al Interior del
ovocito. En los erizos la primera interaccin de los gametos ocurre en la cubierta
de gelatina externa del ovocito. Esta cubierta posee receptores especie-
especficos, que interactan con los receptores de la membrana celular de los
espermatozoides, gateando la reaccin del acrosoma. Con esto se desencadena
una serie de eventos que llevan a la fusin de la membrana plasmtica del ovocito
con la membrana interna del acrosoma. Luego se forma una capa de fecundacin,
la que evita la poliesperma. Posteriormente el espermatozoide penetra hacia el
interior del ovocito para terminar en la fusin de ambos proncleos
Tipos de Fecundacin
a. Fecundacin Externa: cuando tanto el macho como la hembra liberan sus
gametos al medio externo,que es el agua, de manera que los espermatozoides
nadan en el agua hasta encontrar a los vulos. Es lo tpico de todos los animales
invertebrados acuticos, y en los vertebrados se da en los peces y en los anfibios.
b. Fecundacin Interna: cuando el macho deposita sus espermatozoides en el
interior de la hembra, y se mueven por el organismo de la hembra hasta encontrar
al vulo. En el erizo de mar no hay dimorfismo sexual de modo que externamente
no se les puede diferenciar a las hembras de los machos. Las gnadas femeninas
son de color rojo vinoso y las gnadas masculinas son de color amarillo grisceo.
En ambos casos se encuentran en las zonas interambulacrales (celoma) ubicado
en el interior del hemisferio superior. A travs de las glndulas genitales. Las
gnadas se comunican al exterior mediante el poro genital, por donde son
derramados los huevos. La fecundacin es externa porque los gametos se
encuentran fuera de la cavidad genital y el vulo se fecunda externamente.

OBJETIVOS
Estudiar el proceso de fecundacin y primeras etapas del desarrollo embrionario
en erizo de mar (Segmentacin y Gastrulacin).

MATERIALES
- Placa Petri
- Pipeta
- Bagueta
- Hipodrmica de 1ml
- Solucin de KCl al 0.5M
. Agua de mar limpia
- Portaobjetos
- Cubreobjetos
- Goteros
- Balde de plstico de 5 litros
- Materiales de diseccin: tijera, pinza, estilete.
- Erizos de mar vivos mantenidos en agua de mar oxigenada.
PROCEDIMIENTO
A. Obtencin de gametos
Mtodo 1:
1. Inyectar a travs de la membrana oral (peristoma, zona oral) 1 ml de 0,5 M
de KCl en agua de mar

2. Colocar el espcimen sobre un recipiente de vidrio que contiene unos mililitros de

agua salina sobre la cara aboral, lado puesto a la zona oral.
 3. Pocos minutos despus aparece un lquido espeso en la cara aboral, donde
se localizan los gonadoporos. Si el lquido es blanquecino se trata de
esperma, mientras que si es rojizo corresponde a vulos (no existe forma
alguna de distinguir los sexos por caracteres externos).

4. Observar al microscopio en lminas portaobjetos sin cubreobjetos el aspecto y

movimiento de los ovocitos y espermatozoides recin eyaculados y despus de
diluir con agua de mar (1:10). Los espermatozoides slo adquieren movilidad
despus de contactar con el agua salina

B. Fecundacin
I. Colocar sobre una porta excavada una gota de agua con ovocitos (1 gota de suspensin
+ 5 ml de agua).
II. Enfocar en el microscopio a 10X con cuidado de que el objetivo no entre en contacto
con el agua salina.
III. Aadir una gota de esperma (1 gota de semen diluido en 10 ml de agua).
IV. Remover y observar a los espermatozoides en direccin a los ovocitos.
V. Observar la membrana de fecundacin que se forma en menos de 5 minutos.

C. Desarrollo embrionario
Observar en el microscopio los principales cambios morfolgicos que suceden despus
de la fecundacin y que llevan a la formacin de la larva Pluteus.
RESULTADOS

A. OBTENCIN DE GAMETOS

Ovocitos

G.A: 10 X