UNIVERSIDAD NACIONAL

PEDRO RUIZ GALLO

FACULTAD DE INGENIERA QUMICA E

INDUSTRIAS ALIMENTARAS
Escuela Profesional de Ingeniera Qumica

OBTENCIN DE GOMA XANTANA APROVECHANDO LA

CSCARA DE PIA DESECHADAS DE LAS JUGUERAS
DEL MERCADO DE LAMBAYEQUE

INFORME FINAL

CURSO: TRABAJO DE INVESTIGACIN

PROFESOR: ING. RUBEN D. SACHUN GARCIA

INVESTIGADORES: CAMPOS BAUTISTA MILSER ROEL

CIEZA CASTILLO MARVIL RAUL

AO: 2017

1
 CODIGO DEL PROYECTO:
Palabra claves: Gomas, Polisacridos, Geles, residuos orgnicos
I. GENERALIDADES

1. Ttulo
Obtencin de goma de xantana empleando cascaras de pia.
2. Personal Investigador
Autores:

Campos Bautista Milser Roel

Cieza Castillo Marvil Raul

Estudiantes de Ingeniera Qumica, Universidad Nacional Pedro Ruiz Gallo.

Dirigido por:
M.A. Ruben D. Sachun Garcia Ing.Industrial

3. rea de investigacin
Ingenieria y tecnologia
4. Fecha de inicio
10-07-2017
5. Fecha de trmino
24-07-2017
6. Resolucin de aprobacin

7. Objetivos

General
Obtener goma xantana a partir de cascaras de pia.
Especficos
Reducir la contaminacin y malos olores por parte de los
desechos de la cascara de pia.
Determinar las propiedades qumicas de la goma obtenida.

8. Fecha
Semestre acadmico 2017-I

NDICE

2
I. GENERALIDADES...........................................................................................2
1. Ttulo.............................................................................................................2
2. Personal Investigador...................................................................................2
3. rea de investigacin....................................................................................2
4. Fecha de inicio..............................................................................................2
5. Fecha de trmino..........................................................................................2
6. Resolucin de aprobacin............................................................................2
7. Objetivos.......................................................................................................2
8. Fecha............................................................................................................2
NDICE....................................................................................................................3
RESUMEN..............................................................................................................3
ABSTRACT.............................................................................................................4
INTRODUCCION....................................................................................................5
II. MATERIALES Y MTODOS.........................................................................6
9. MATERIALES:...........................................................................................6
10. MTODOS.................................................................................................7
III. RESULTADOS............................................................................................11
IV. DISCUSIONES...........................................................................................16
V. CONCLUSIONES.......................................................................................17
VI. RECOMENDACIONES...............................................................................18
VII. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS...........................................................19
VIII. ANEXOS.....................................................................................................21

RESUMEN

3
La goma xantana es un exopolisacrido (EPS) de origen
microbiano, producida por las bacterias del gnero
Xanthomonas. Este EPS genera a bajas concentraciones, un
amplio rango de temperatura y de pH soluciones
pseudoplsticas, por lo tanto, es un aditivo industrial muy
importante y de gran aplicacin en la industria alimentaria,
cosmtica y petrolera. Como materia prima se utiliz cascaras
de pia con el fin de reducir la contaminacin por parte de
materias orgnicas y darles a estas un mejor uso (un
subproducto).
Se realiz la produccin de goma de xantano por fermentacin
aerobia empleando Xanthomonas campestris en dos medios
diferentes de sustrato: cscara de pia y cscara de pia
hidrolizada con H2SO4, la fermentacin se realiz durante dos
das, a temperatura de 28C y a un pH de 7.2. Se cuantific la
viscosidad en el tiempo, como medida indirecta del
biopolmero. Se obtuvo una viscosidad final de 1.12 cp y 1.19
cp. Cuando se emple como sustrato cscara de pia y
cscara de pia hidrolizada respectivamente. Los resultados de
la produccin de la goma de xantano, empleando en la
fermentacin glucosa como sustrato, alcanzaron una
viscosidad de 6 cp. (Ricardo A. Sierra Tobn, Jose D. Zapata
Arcila y Margarita Enid Ramrez)

4
 ABSTRACT

Xanthan gum is an exopolysaccharide (EPS) of microbial origin,

produced by bacteria of the genus Xanthomonas. This EPS
generates at low concentrations, a wide range of temperature
and pH pseudoplastic solutions, therefore, it is a very important
industrial additive and of great application in the food, cosmetic
and oil industry. Pineapple shells were used as a raw material
in order to reduce contamination by organic materials and give
them the best use (a by-product).
Xanthan gum production was performed by aerobic
fermentation using Xanthomonas campestris in two different
media of substrate: pineapple peel and pineapple husk
hydrolyzed with H2SO4, the fermentation was carried out for
two days, at 28 C and at a pH of 7.2. The viscosity was
quantified over time as an indirect measure of the biopolymer. A
final viscosity of 1.12 cp and 1.19 cp was obtained. When
pineapple peel and hydrolyzed pineapple peel were used as
substrate respectively. The results of the production of xanthan
gum, using in the fermentation glucose as substrate, reached a
viscosity of 6 cp

5
 INTRODUCCION
El xantano o goma xantana, es un polisacrido extracelular
producido por la bacteria Xanthomonas campestris B-1459. El
aspecto fsico del xantano es el de un polvo color crema que se
disuelve en agua caliente o fra produciendo soluciones de
viscosidad relativamente alta a concentraciones bajas. La
viscosidad es alta en un amplio intervalo de concentraciones y
las soluciones son estables en un amplio rango de pH,
concentracin de sales y temperaturas. Estas caractersticas
son muy favorables para la economa de operaciones donde se
la usa como espesante.
El descubrimiento del xantano fue el resultado de un programa
de bsqueda sistemtica o screening iniciado por el
departamento de agricultura de EEUU. Como consecuencia del
xito comercial del dextrano en la dcada de 1940, el
departamento inici un programa exhaustivo de bsqueda de
microorganismos capaces de producir polisacridos solubles
en agua en cultivos sumergidos. El resultado de este programa
fue el descubrimiento del xantano en la dcada de 1950 en los
laboratorios del Northern Regional Research Laboratories
(NRRL).
Durante la dcada de 1960 se llevaron a cabo investigaciones
a escala piloto en varios laboratorios industriales y la
produccin comercial comenz a principios de 1964. El
conocimiento acumulado en la poca sobre los requerimientos
nutricionales de X. campestris era amplio por tratarse de un
importante fitopatgeno, causante de enfermedades en plantas
crucferas.
El xantano se convirti en el primer producto biopolimrico de
una fermentacin a base de azcar de maz que tuvo
importancia comercial. A raz de su xito comenzaron a
estudiarse otros polisacridos microbianos, pero a la fecha el
xantano es el que posee mayor volumen de produccin, rango
de aplicaciones y el nico aprobado para uso en alimentos.
A fines de 1992 la capacidad mundial de produccin de
biopolmeros (principalmente xantano) exceda las 30000
toneladas anuales a precios de 10 a 20 us$/kg y en 1996
constitua el segmento de las industrias de polisacridos de
mayor crecimiento, con un 7% anual, desplazando a otras
gomas naturales

II. MATERIALES Y MTODOS

6
9. MATERIALES:

Insumos
300g de cascara de pia
Cepa de Xanthomonas campestris.
Reactivos y soluciones
cido sulfrico
Agua destilada

Instrumentos y equipos
Phmetro
Vasos de precipitacin
Pipetas de 10 ml
Cronmetro
Placas Petri
Termmetro
Autoclave

10. MTODOS
El siguiente esquema muestra el procedimiento de la

obtencin de goma xantano

7
 Materia prima
(cascaras de pia)
Pesado
(600g)
Licuado 500 ml de
H2O
Filtrado

Muestra sin hidrolizar Muestra hidrolizada

(H2SO4)

Adicin de la cepa Accin de la cepa

(Xanthomonas campestris) (Xanthomonas campestris)

Fermentacin Fermentacin

Figura 1: Diagrama de la obtencin deGoma xantanade goma xantano

la obtencin
Fuente: creacin propia

Para la produccin de goma de xantano, se emple el cultivo de

Xanthomonas campestris, esta bacteria fue aislada en el laboratorio de Micro

Biologa de la facultad de Biologa de la Universidad Nacional Pedro Ruz

Galio. Esta cepa se cultiv en medio YM y se conserv a una temperatura de

30C.

Para determinar la concentracin del inculo se prepar un medio, el que se

identific como Medio 0, la composicin de este medio, para un volumen de

250 mL, se registra en la Tabla 1.

8
 Compuestos Cantidad (g)
Peptona 0.5

Glucosa 0.5

Extracto de levadura 0.5

Tabla 1. Composicin Del Medio 0.

Fuente: creacin propia

Esta solucin, se llev a un reactor de 1 L, el cual se esteriliz en

autoclave por un periodo de 30 minutos. Luego de esterilizar se inocul la

bacteria en el medio.

Posteriormente se realiz la fermentacin, a condiciones aerobias, a

Temperatura de 25C. La toma de muestras se realiz durante el segundo

da cada 3 horas, cada una fue centrifugada durante 5 minutos a 4000 rpm,

para separar sobrenadante y biomasa, esta ltima fue llevada a peso

constante.

Posteriormente, se realizaron dos fermentaciones, las cuales fueron

inoculadas con Xanthomonas campestris, a una temperatura de 25C y con

una concentracin de 0.006 g/L

Para la preparacin del Medio1 y el Medio2 se utilizaron 300 g de cscara de

pia la cual fue licuada con 250mL de agua destilada, para ser filtrada. La

composicin del Medio 1, para un volumen de 500mL, se muestra en la Tabla

Compuestos Cantidad (g)

Peptona 0.9

Solucin filtrada de cascara de pia 0.9

Extracto de levadura 0.9

Tabla 2. Composicin Del Medio 1.

9
Fuente: creacin propia

El medio 1, contiene la siguiente composicin de sales en (gr/L).

Sal Concentracin(g/L)
NaCl 4

KH2PO4 1

K2HPO4 1

MgSO4.7H2O 0.2

Extracto de Levadura 0.1

Tabla 3. Composicin de sales para el Medio 1

Fuente: creacin propia

Para la preparacin del Medio 2, el caldo producto de la filtracin fue

hidrolizado con H2SO4 concentrado, en una proporcin del 1% del volumen

total del medio, posteriormente se le adicionaron los mismos componentes,

sales y traza de sales, tal y como se realiz en el Medio 1.

Luego de que ambos medios estuvieran esterilizados, se les adicion a cada

uno 50 ml el inculo que se prepar anteriormente y se procedi a realizar el

montaje de la misma manera que para el Medio 0.

La toma de muestras que se efectu en el Medio 1 (sin hidrolizar) y el Medio

2 (hidrolizado), se realizaron cada 3 horas en dos das de fermentacin

La cuantificacin de la biomasa se desarroll con el mismo mtodo que se

emple en el Medio 0.

Al sobrenadante se le cuantifica la cantidad de producto, por mtodo

indirecto, determinando la viscosidad con el viscosmetro

10
III. RESULTADOS
Las pruebas fueron realizadas en el laboratorio de Microbiologa de la

Universidad Nacional Pedro Ruiz Galio y arrojo los siguientes resultados

La concentracin de inoculo se determin realizando un seguimiento de la

biomasa al medio 0, el cual se muestra en la Fig. 2.

11
Fig. 2. Curva de Biomasa para el Medio 0

Fuente: creacin propia

Los medios 1 y 2 fueron inoculados a una concentracin de 0.006 g/mL. En

la Figura 3 se presenta el cambio de concentracin con el tiempo para los

medios 1 y 2.

En la Fig. 3 se observa que no hay periodo de adaptacin debido a que el

microorganismo fue inoculado en su fase de mayor crecimiento. Adems, se

observa que se alcanza una mayor concentracin utilizando como fuente de

carbono la cscara de pia sin hidrolizar.

12
Fig. 3. Curva de Biomasa para los dos Medios

Fuente: creacin propia

Algunos estudios han demostrado incluso que los niveles ms altos de goma

xantano y de biomasa pueden ser producidos con el aumento de la agitacin

y los valores de tiempo de fermentacin, con el valor mximo en la zona de

72 horas y el ajuste de la temperatura de fermentacin a cerca de 25 o 35

C, pues la produccin sinttica de goma de xantano es eficiente con alta

conversin (Psomas et al., 2007).

13
En la Fig. 4 se muestra el cambio de viscosidad con respecto al tiempo para

ambos medios.

Fig. 4. Curva de Viscosidad para Medios 1 y 2

Fuente: creacin propia

De las Figs 3 y 4 se observa que la muerte de los microorganismos est

ligada con el aumento de la viscosidad, puesto que el medio a estas

condiciones no permite una buena transferencia de oxgeno al

microorganismo.

Al comparar los resultados obtenidos con otros estudios realizados (Azuaje y

Snchez, 1999) se encontr que al utilizar la cscara de pia como sustrato

se obtienen resultados aceptables. Esta comparacin se muestra en la Tabla

4. Utilizando diferentes sustratos, la limitacin de los nutrientes no influye en

la estructura de la base primaria, no obstante, s afectan la estructura de las

cadenas de lado, la masa molecular, el rendimiento y en el caso de la goma

de xantano la viscosidad (Rosalam y England, 2006).

14
 Fuentes de carbono Viscosidad (cp)
Glucosa 6.2

Harina de soya 0

Melaza 1.4

Almidn de maz 5

Cascara de pia 1.10

Cascara de pia hidrolizada 1.15

Tabla 4. Comparacin de viscosidad utilizando otra fuente de carbono

Fuente: creacin propia

Adems, la viscosidad que es capaz de producir una goma que es

dispersada en agua, es enormemente variable de una goma a otra. En

algunas gomas fcilmente dispersables como la goma guar, la viscosidad

mxima se alcanza al poco tiempo. Por el contrario, en gomas cuya

dispersin es difcil, es decir, que se hidratan lentamente, como la goma de

tragacanto, el conseguir su mxima viscosidad puede tardar ms tiempo

(Maestre, 1983)

IV. DISCUSIONES
Los resultados obtenidos en la presente investigacin si es viable, ya

15
 que comparado con el trabajo de investigacin de otros investigadores
tales como: La concentracin del inculo fue de 0.006 g/mL, esta se
logr a un tiempo de 19 h. Se encontr que para un tiempo de 22 horas
la concentracin de Medio1 fue 0.0031 g/mL y para el Medio 2 la
concentracin fue de 0.0024 g/mL en un tiempo de 25 horas.
Finalizada la fermentacin, la viscosidad del Medio 1 fue 1.12 cp y para
el Medio 2, 1.19 cp.( Ricardo A. Sierra Tobn, Jos D. Zapata Arcila y
Margarita Enid Ramrez, de Universidad Pontificia Bolivariana- Medelln
Colombia- 2008)
Las viscosidades encontradas con las fuentes de carbono utilizadas son
aceptables debido a que se encuentran dentro del intervalo de estudios
realizados por otros autores.
Este trabajo es vlido por su bajo costo en la obtencin de goma xantana,
ya que la materia prima empleada en dicho procesos es totalmente
desechada.

V. CONCLUSIONES

16
 La concentracin del inculo fue de 0.006 g/mL, esta se
logr a un tiempo de 20 h.

Se encontr que para un tiempo de 24 horas la

concentracin del Medio1 fue 0.003 g/mL y para el
Medio 2 la concentracin fue de 0.0023 g/mL en un
tiempo de 28 horas.

Finalizada la fermentacin, la viscosidad del Medio 1 fue

1.10 cp y para el Medio 2, 1.15 cp Las viscosidades
encontradas con las fuentes de carbono utilizadas son
aceptables debido a que se encuentran dentro del
intervalo de estudios realizados por otros autores

VI. RECOMENDACIONES

17
 Al momento de aislar la bacteria xantomona campesteis tener mucho
cuidado ya que esta esta se puede contaminar con otros microorganismos
no deseados en el proceso de obtencin de xantana.

Durante la fermentacin controlar adecuadamente los parmetros

establecidos para la obtencin de goma xantana, tales como: el exceso
de oxgeno (malogra la fermentacin), disminucin de oxigeno (disminuye
la accin de los microorganismos); ya que estos necesitan una cierta
cantidad de oxgeno para su crecimiento microbiano.

Se debe realizar una correcta seleccin de los insumos para la

elaboracin de la goma xantana debido a que puede influir tanto en su
aportacin de su viscosidad y pH.

VII. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS.

1.1 BIBLIOGRAFA

18
 AZUAJE, Ricardo y SNCHEZ, Jos. Produccin de xantano por
Xanthomonas campestris en un medio de cultivo no convencional. En:
Acta cientfica Venezolana., no.50 (1999); p.201.
BRAUNEEG, Lefebvre y GENSER, Klaus. Polyhydroxyalkanoates,
biopolyesters from renewable resources: Physiological and engineering
aspects. Citado por OCAMPO LPEZ, Carlos. Ensayos para la
produccin de pha enfocado a la industria textil. Medelln, 2006. p. 3.
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Qumica.
GLAZER, A. et al. Microbial biotechnology. New York, (1998); p 283
KALOGIANNIS, Stavros; LIAKOVIDOU, Gesthimani y LIAKOPOULOU
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campestris grown in molasses. En: Process Biochemistry., no.39 (2003);
p.249
MAESTRE, Joaqun Las gomas en las industrias de conservas vegetales.
En: Revista Alimentacin equipos y tecnologa. Ao 2, no.3 (May-
Jun.1983); p.135
PRASERTSAN, Poonsuk et al., Optimization for biopolymer production by
Enterobacter cloacae WD7. En: Carbohydrate Polymers., no71 (2008);
p.468
PSOMAS, S; LIAKOPOULOU, M y KYRIAKIDIS, D. Optimization study of
xanthan gum production using response surface methodology. En:
Biochemical Engineering Journal., no.35 (2007); p. 273.
ROSALAM, S y ENGLAND, R. Review of xanthan gum production from
unmodified starches by Xanthomonas camprestris sp. En: Enzyme and
Microbial Technology., no.39 (2006); p.197-205.

1.2 LINKOGRAFA
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http://www.bristhar.com.ve/xanthan.html

calvo, m. (16 de 05 de 2009). boquimica de los alimentos. Obtenido de

http://milksci.unizar.es/bioquimica/temas/azucares/xantana.html
19
 cargil. (21 de 10 de 2010). cargill. Obtenido de
http://www.cargillfoods.com/lat/es/productos/los-hidrocoloides/goma-de-
xantano/fabricacion/index.jsp

reasy, c. (04 de 2016). cater. Obtenido de

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xantana-1

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roman, D. (12 de 02 de 2015). uca. Obtenido de

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Tobn, R. A., & Ramrez, J. D. (2008 de 12 de 17). revista investigaciones

aplicadas. Obtenido de
https://revistas.upb.edu.co/index.php/investigacionesaplicadas/article/view
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INFORME de productos Agroindustriales de Colombia en el ao 2005. [en

lnea] http://www.casanare.gov.vo/esp/descarga/bolet in_2005 > [consulta:
16 Feb. 2008

20
VIII. ANEXOS
Aislamiento de la bacteria Xanthomonas campestris

Identificacin de manchas bacterianas causadas por Xanthomas sp.

Siembra del inculo en el medio de cultivo

Crecimiento de Xanthomonas campestris en medio Wilbrink.

21
Inoculacin de pruebas bioqumicas para la identificacin

Positividad de las pruebas de fermentacin de carbohidratos

Prueba de fermentacin de carbohidratos

Bacteria Gluco Arabino Manos Galacto Cellobio Fructo

sa sa a sa sa sa
Xanthomonas
+ + + + + +
campestris

Medio Wilbrink (medio semi-selectivo para Xanthomonas)

COMPONENTES g L-1
Bactopectona 5
Sucrosa 10
K2HPO4 0,5
MgSO4.7H2O 0,25
Na2SO3 0,05
Agar 15
Agua destilada 1000 mL

22
 Proceso de fermentacin de las muestras

Obtencin de la materia prima

Lavado de la materia prima

Pesado 600g

23
Licuado con 500 ml

Filtrado

24
Adicin de la sepa

Montaje del biorreactor (fermentacin aerobia)

25
Adicin de H2SO4(1%) a la muestra 2
Fermentacin por 2 das las muestra M1y M2

Goma xantana despus del segundo da de fermentacin

26
Centrifugacin del mosto fermentado

27