Cara pewarnaan :
~ Buat sediaan pada objek gelas, rekatkan di atas api Bunsen 3x, tunggu
sampai dingin.
~ Pulas dengan karbol gentian violet selama 60 detik.
~ Cuci dengan aquadest, bubuhi lugol selama 30 detik.
~ Cuci dengan aquadest, buang zat warna dengan alkohol (decolorisasi)
sampai tidak ada lagi warna yang dilepaskan dari sediaan. Boleh juga
dicuci lagi dengan aquadest.
~ Pulas dengan larutan safranin (counter stain) kira-kira 30 detik.
~ Cuci dengan aquadest, biarkan kering dalam temperatur kamar dan
periksa dengan mikroskop memakai lensa rendam minyak.
Hasil pewarnaan Gram :
Bakteri Gram positif : Biru-ungu (ungu kebiru-biruan).
Bakteri Gram negatif : Merah kekuning-kuningan.
Catatan :
Sebagai counter-stain dapat juga digunakan karbol fuchsin encer, yaitu
Karbol Fuchsin Z. Neelsen 1 ml + 9 ml aquadest (pengenceran 10x). Jika
karbol fuchsin ini dipakai waktunya dipersingkat, paling lama 1 menit.
Karbol fuchsin encer ini sering digunakan untuk memulas vibrio,
waktunya kira-kira 5-10 detik. Vibrio berwarna merah jambu dan bentuk
koma. Susunan pulasan karbol fuchsin lihat pada pewarnaan tahan asam.