Maderas.

Ciencia y Tecnologa
ISSN: 0717-3644
ananias@ubiobio.cl
Universidad del Bo Bo
Chile

lvarez Godoy, Esther; de Carvalho Rodrigues, Jos Carlos; Martins Alves, Ana Maria; lvarez Lazo,
Daniel
Estudio del contenido y la calidad de la lignina mediante pirlisis analtica en madera de Pinus
Caribaea.
Maderas. Ciencia y Tecnologa, vol. 9, nm. 2, 2007, pp. 179-188
Universidad del Bo Bo
Concepcin, Chile

Disponible en: http://www.redalyc.org/articulo.oa?id=48590208

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ISSN 0717-3644 Maderas. Ciencia y tecnologa 9(2): 179-188, 2007
ISSN online 0718-221X

ESTUDIO DEL CONTENIDO Y LA CALIDAD DE LA LIGNINA

MEDIANTE PIRLISIS ANALTICA EN MADERA DE PINUS CARIBAE

CONTENT AND QUALITY STUDY OF THE LIGNIN BY ANALYTICAL

PYROLYSIS IN PINUS CARIBAEA

Esther lvarez Godoy1; Jos Carlos de Carvalho Rodrigue

Ana Maria Martins Alves3; Daniel lvarez La

RESUMEN

En este trabajo se presentan los resultados alcanzados en la determinacin del contenido de lign
as como de su calidad (relacin H/G) en muestras de madera de Pinus caribaea var caribaea de t
localidades en la provincia de Pinar del Ro, Cuba. El estudio se realiz en el Instituto de Investigac
Cientfica Tropical de Lisboa, Portugal, en el marco del Proyecto GEMA. La tcnica utilizada fue
Pirlisis analtica. Los resultados que se muestran representan el promedio de tres corri
experimentales y se obtuvieron valores cercanos al mtodo Klason utilizado como referencia.
encontr una correlacin aceptable entre los contenidos del lignina-pirlisis y lignina Klason para e
especie, lo cual permite calcular el contenido de lignina Klason a travs del contenido de ligni
pirlisis. La pirlisis analtica es de gran utilidad en los programas de mejoramiento gentico, en
es necesario el anlisis de muchas muestras, ya que la introduccin de parmetros como la composic
qumica de la madera, induce al desarrollo de mtodos expeditos de caracterizacin, reproducible
de bajo costo, una vez que los mtodos tradicionales son lentos, requieren mucha mano de obra y
de elevado costo.

Palabras claves: Pirlisis analtica, Pinus caribaea, lignina-pirlisis, lignina Klason, relacin H/G

ABSTRACT

This work shows the lignin content determined as well as its quality (H/G ratio) in wood samp
of Pinus caribaea var caribaea from three sites at Pinar del Ro Province, Cuba. The study was carr
out at the Tropical Scientific Investigation Institute, Lisbon, Portugal (Project GEMA). The Analyti
pyrolysis was used as analytical method. The results represent the average of three repetitions and w
obtained similar values to Klason method used as reference. An acceptable correlation was obtain
between the Py-lignin contents and Klason lignin for this species. This may be possible to calcul
the Klason lignin through the content Py-lignin content. The Analytic pyrolysis is of great utility in
programs of genetic improvement, in which it is necessary the analysis of many samples, since
introduction of parameters like the chemical composition of wood, induce to the development of exped
methods of characterization, reproducible and low cost, once the traditional methods are slow, requ
a lot of manpower and have a high cost.

Keywords: Analytical pyrolysis, Pinus caribaea, Py-lignin, Klason lignin, H/G ratio.

1
Profesor. Centro de Estudios Forestales de la Universidad de Pinar del Ro. Cuba.
 Maderas. Ciencia y tecnologa 9(2): 179-188, 2007 Univ er sidad del Bo -

INTRODUCCION

La creciente bsqueda de madera de elevada calidad, con menor variabilidad de sus propiedade
mayor rendimiento, coloca una gran presin al nivel del desarrollo sustentable del bosque, que p
entre otros por el mejoramiento cualitativo del leo. En este sentido se desarrollan actualmente proyec
de mejoramiento gentico, esencialmente orientados para la obtencin de materia prima de me
calidad para la industria de pasta para papel.

En estos programas de mejoramiento, en que es necesario el anlisis de muchas muestras

introduccin de parmetros como la composicin qumica de la madera induce al desarrollo de mtod
expeditos de caracterizacin, reproducibles y de bajo costo, una vez que los mtodos tradicionales s
lentos, requieren mucha mano de obra y son de elevado costo (Rodrigues, 1998).

Las alteraciones, tanto de la estructura macroscpica, como de la composicin qumica, pued

resultar de condiciones anormales de crecimiento, y pueden estar tambin asociadas a la formacin
leo juvenil y adulto, de leo de inicio y de fin de estacin, etc. (Rodrigues, 1998).

Las ligninas de las maderas de las resinosas (gimnospermas), de las frondosas (angiosperm
dicotiledneas) y de las gramneas (angiospermas, monocotiledneas) difieren en su contenido
unidades precursoras guaiacilo (G), siringilo (S) y p-hidroxifenilo (H) (Fengel y Wegener, 19
Pereira et al., 2003). A pesar de la variabilidad observada en la composicin de las ligninas, las made
de las resinosas, frondosas y gramneas presentan, tendencialmente, ligninas de los gneros G, G
HGS, respectivamente (Fengel y Wegener, 1984).

Poco se conoce sobre la variabilidad de la composicin estructural de la lignina en trminos de

relacin H/G (p-hidroxifenilo/guaiacilo) en resinosas, y de pino en particular, y menos an se sa
sobre el impacto de esta variabilidad en la produccin de pastas para papel. Se sabe, no obstante, q
las frondosas son ms fciles de deslignificar debido a la composicin estructural de la lignina.
desconocimiento en relacin a la composicin estructural de la lignina resulta, en gran parte,
hecho de que los mtodos qumicos (hmedos) ms frecuentemente usados para el anlisis de
composicin de la lignina (tioacidlisis y oxidacin por permanganato), resultan ms adecuados p
el anlisis estructural cualitativo que para el anlisis cuantitativo.

Para estudios de este tipo se estn aplicando tcnicas modernas, no destructivas, como es el caso
la Pirlisis analtica. Slo recientemente ha tenido algn desarrollo esta tcnica para el anli
cuantitativo (Rodrigues et al, 1999; Kuroda et al, 2002). Tambin es muy reciente que comienza
compararse estos resultados obtenidos mediante pirlisis, con los mtodos de referencia, particularme
con el contenido de lignina obtenido por pirlisis analtica y por el mtodo Klason (Alves, 2004). P
otro lado, esta tcnica puede ser empleada como referencia en el estudio de las ligninas cuando el
son cuantificadas por otro mtodo fsico- qumico como es la Espectroscopa Infrarroja (Alves et
2006).

Pirlisis es un trmino de origen griego que significa descomponer por el calor y consiste
quebrar trmicamente y en ausencia de oxgeno, los enlaces de macromolculas, de modo que
obtengan molculas de menor masa, que van a ser separadas por cromatografa gaseosa (GC
identificadas por espectrometra de masa (MS). Normalmente, esto es conseguido por intermedio
un calentamiento rpido en una atmsfera inerte o al vaco (Galletti, 1995). Generalmente, la pirl
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La pirlisis analtica presenta las siguientes ventajas (Meyer y Faix, 1992):

1. la cantidad reducida de muestra necesaria (aproximadamente 75 g);
2. la simplicidad de preparacin de las muestras, una vez que slo tienen que ser sometidas a secad
molida;
3. el reducido perodo de tiempo que el anlisis requiere (de escasos minutos hasta una hora y trei
minutos);
4. la fcil identificacin de los productos de la pirlisis, una vez que ya existen compilacio
disponibles.

Pinus caribaea var caribaea es la especie maderera ms abundante en la provincia de Pinar

Ro, mostrando diferencias en distribucin y crecimiento para los distintos sitios de plantacin. P
establecer un mejor manejo de la especie y la utilizacin de este recurso maderero con fines industria
es importante conocer de la variacin de las propiedades qumicas, referidas a los contenidos
polisacridos y lignina y la variacin de estos segn las localidades de procedencia.

Objetivo
Con el presente trabajo se pretende dar a conocer resultados novedosos en la aplicacin de mto
no destructivos al estudio de la madera, particularmente la aplicacin de la pirlisis analtica par
determinacin del contenido y la calidad de la lignina de Pinus caribaea var caribaea en tres localida
de la provincia de Pinar del Ro, Cuba.

MATERIALES Y MTODOS

Para el estudio se utilizaron muestras de madera de Pinus caribaea var caribaea, de plantacio
de 29 aos de edad, provenientes de tres localidades de la provincia de Pinar del Ro, Cuba:
Cajlbana, Marbajita y Malas aguas (figura 1). Fueron derribados 15 rboles, 5 para cada localida
En cada tronco fueron separados discos con 5 cm de espesor a 1,30 m de altura (5 x 3 = 15
muestras).

Figura 1:. Toma de las muestras

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Adicionalmente, para estudiar la variabilidad entre rboles y a diferentes alturas de un mis

rbol, se derribaron otros cinco rboles de la localidad de Marbajita y se obtuvieron discos a s
alturas del fuste, excepto en un rbol que origin solamente cinco discos (5 x 6 = 30; 30 -1 =
muestras).

As se obtuvo un total de 44 muestras. (15 + 29 = 44). De cada disco se retir una pieza cent
midiendo 2 cm a cada lado de la mdula y fueron trasladadas al Instituto de Investigacin Tropical
Lisboa. Las muestras fueron posteriormente cortadas como se muestra en la figura 2.

Figura 2:. Corte de las muestras

Una seccin triangular se utiliz para el anlisis qumico. Las muestras fueron molidas en
molino de cuchillas Retsch modelo SM 2000 y posteriormente en un molino Thomas, obtenind
partculas < 1mm.

La madera molida fue extrada en un sistema de tres disolventes con aumento de gradiente
polaridad (diclorometano, etanol, agua), en equipos de extraccin Soxhlet. Despus de la extracc
se secaron las muestras en estufa durante aproximadamente 12 horas a 60C y se mantuvieron en
desecador con pentxido de difsforo al vaco hasta que volvieran a ser molidas, en mol
ultracentrfuga de la marca Retsch ZM-100 con tamiz de malla 0,12 mm, siendo nuevamente coloca
en un desecador con pentxido de difsforo al vaco.

Se pesaron 75 2 g de cada muestra en una barqueta de cuarzo, usando una balanza Met
AT21 con una precisin de 1 g.

La pirlisis fue efectuada en una cmara de pirlisis de marca Chemical Data System (CDS) 10
acoplada a un cromatgrafo gaseoso modelo HP 5890 serie II, a travs de una interface calentad
270 C. El pirolisado fue separado en una columna capilar DB1701 de 60 m con 0,25 mm de dime
interno y 0,25 m de espesor. La temperatura de pirlisis fue de 650 C durante 10 s, con tiempo
subida de aproximadamente 800 ms. Las condiciones del cromatgrafo gaseoso fueron las siguient
inyector a 270C, detector a 270C y una razn de separacin (split) de 1/20; programa de temperat
- 45C durante 4 min, seguido de una tasa de calentamiento de 4C/min hasta alcanzar 270 C, don
permaneci durante 6 min. Los productos de la pirlisis fueron detectados por un detector de lla
(Py-GC-FID).

La cuantificacin de los productos de la pirlisis se bas en el clculo de las reas de sus pic
donde h representa la sumatoria de las reas de los picos derivados de grupos p-hidroxifenilo, g
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ni a hexosas (Rodrigues et al., 1999). La informacin que proporcion la pirlisis analtica se obtu
en forma de pirogramas a travs de los cuales se realizaron los clculos, utilizando el software HP
ChemStation (1990 1996).

El contenido de lignina Klason se realiz segn Schwanninger et al., 2002. La hidrlisis se ini
con la adicin de 5 mL de cido sulfrico al 72% a 333 mg de madera molida, libre de extractiv
durante dos horas en un bao de agua a 20C. A continuacin, sigui una segunda hidrlisis diluyen
el cido a 3% y colocando la mezcla en una autoclave a 120C durante 1 hora. El residuo insoluble
cido, filtrado en filtro G3 correspondi a la lignina Klason.

Fue utilizado el software STATISTICA 6.0. para el anlisis estadstico de los resultados.

RESULTADOS Y DISCUSION

En la figura 3 se muestra un pirograma tpico de los que fueron obtenidos para la especie Pi
caribaea var caribaea donde estn sealizados los picos ms importantes con la informacin que el
ofrecen. Todos los pirogramas obtenidos presentan los mismos picos, vara nicamente la proporc
relativa entre ellos.

Los resultados derivados del anlisis de todos los pirogramas se tradujo en los clculos de
contenidos de los grupos de compuestos ms importantes como se explic anteriormente. Se obtuvie
pirogramas semejantes a los obtenidos para otras especies de conferas (Alves, 2004). El contenido
lignina fue calculado como el cociente entre la sumatoria de las reas de los productos h y g y
sumatoria de las reas de todos los productos identificados (c+cP+cH+g+h).

Los productos eluidos en los primeros 29 minutos del pirograma son molculas pequeas de orig
polisacrido, como el formaldehdo, el acetaldehdo, el propanal, la propanona y el cido actico
partir de ese momento, el pirograma es dominado por productos derivados de la lignina, siendo
primer componente el fenol (45,h), un derivado del hidroxifenilpropano. Los productos eluidos en
ltimos 10 minutos tienen origen guayaclico, con excepcin de dos, la levoglucosana (96,cH) (
min.) originaria de la celulosa, y un azcar anhidro (51,c) ( 52 min.). Es de notar que no fue
detectados productos de origen siringulico.

Los contenidos de lignina as determinados se muestran en la tabla 1. Al anlisis estadstico,

existen diferencias significativas entre los contenidos de lignina entre las localidades, determina
por pirlisis analtica (tabla 2).
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Figura 3. Pirograma tipo de madera de Pinus caribaea var caribaea

Con el objetivo de comparar los resultados del contenido de lignina obtenidos por pirlisis analt
se utiliz como referencia el mtodo Klason. Se determin el contenido de lignina a las 15 muest
representativas de las localidades y adicionalmente a 8 de las correspondientes a las diferentes altu
de la localidad de Malas aguas. En la tabla 1 se comparan los valores del contenido de lignina obteni
mediante la pirlisis analtica con los obtenidos por el mtodo tradicional (lignina Klason) para las t
localidades.

Tabla 1. Comparacin del contenido de lignina por Klason y por pirlisis analtica
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Tabla 2. Anlisis de varianza para contenido de lignina

(Diferencias significativas p<0,05)

En la figura 4 se presenta la correlacin entre el porcentaje de lignina Klason y la determinada

pirlisis analtica para 23 muestras por ser el nmero mximo de muestras a las cuales se les realiz
determinacin por Klason. Se obtuvo una correlacin aceptable (R2 = 0,765) lo cual permite estima
contenido de lignina Klason en madera molida de Pinus caribaea var caribaea usando este modelo
regresin simple.

Figura 4. Correlacin entre lignina Klason y lignina- pirlisis

En la tabla 3 se muestran los resultados obtenidos sobre la calidad de la lignina, expresada po

relacin H/G, los cuales se obtuvieron del anlisis de los pirogramas para las tres localidades. L
muestras estudiadas presentan un valor promedio de la relacin H/G de 0,050, cercano al encontra
para Picea abies e inferior al reportado para Pinus taeda (0,140) (Fengel y Wegener, 1984) y p
Pinus pinaster (0,061) (Alves, 2004).

Estos autores han verificado que las muestras con contenido de lignina Klason y relaciones H
ms elevadas, correspondan a muestras que presentaban leo de reaccin; cabe destacar que las mues
de madera de Pinus caribaea utilizadas en este estudio no se encontr presencia de leo de reacci
El leo de reaccin de las resinosas, adems de presentar mayor contenido de lignina que el le
normal, presenta mayores cantidades (70 %) de unidades de p-hidroxifenilo (H), en relacin al
total de los productos de la lignina (Sarkanen, 1971; Fengel y Wegener, 1984).
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Tabla 3. Variacin de la relacin H/G por localidades

Por el anlisis estadstico no se observan diferencias significativas para la relacin H/G entre
localidades como se muestra en la tabla 4.

Tabla 4. Anlisis de varianza para la razn H/G

(Diferencias significativas p<0,05)

En la figura 5 se comparan mediante diagrama de mximos y mnimos, el contenido de la relac

H/G determinado en madera de Pinus caribaea var caribaea con los resultados obtenidos para ot
especies de conferas por Alves (2004).
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CONCLUSIONES

- En el trabajo realizado se aplic la pirlisis analtica para la determinacin del contenido y

composicin de la lignina en madera de Pinus caribaea var caribaea procedentes de tres localida
de la provincia de Pinar del Ro y no se apreciaron diferencias significativas entre las localidades p
las magnitudes estudiadas.
- Este estudio revel que la pirlisis analtica puede usarse para evaluar el contenido de lignina
madera de Pinus caribaea var caribaea con una precisin comparable al mtodo de referencia (mto
Klason).
- La pirlisis analtica, a pesar de ser un mtodo fcil de ejecutar, es muy sensible a pequeas alteracio
del mtodo experimental a aplicar. Este estudio constituye un primer acercamiento a una tcnica m
til para ensayos de grandes cantidades de muestra y especialmente para la industria de pulpa p
papel, donde la relacin H/G puede significar un indicador en el proceso productivo en cuanto a la t
de deslignificacin.

NOTA

Investigacin realizada en: Centro de Estudio de Ingeniera Forestal. Instituto Superior de Agronom
Universidad Tcnica de Lisboa. Portugal.

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