Coloraciones

Tricrmicas
Seminario de Histoqumica
Especial
Definicin
Coloraciones Tricrmicas
Coloraciones Tricrmicas
Las tcnicas tricrmicas se crean por la
necesidad de detectar colgeno y msculo.
Implican el uso de 3 colorantes, uno
generalmente nuclear y otros dos
citoplasmticos y/o extracelulares.
Permiten como ventaja observar detalles que
con las tcnicas corrientes no se distinguen
(granulaciones, etc.) y dan colores intensos
con contrastes muy marcados.
Coloraciones Tricrmicas
Se plantea que stas
tinciones actan en base
al tamao molecular del
colorante.
En funcin de la porosidad
de los tejidos que permite
el pasaje de las molculas
del colorante tendremos
mayor o menor
penetracin del mismo.
Coloraciones Tricrmicas
Tienen
funcin de
Sostn, transporte,
proteccin y tejidos
conectivos especializados
en su funcin, como la
sangre, el tejido seo,
cartlago y adiposo.
Tinciones especiales
que permiten visualizar
son
claramente las fibras
de colgeno tipo I.
Las fibras de colgeno son componentes
de los tejidos conectivos, caracterizados
por poseer diferentes tipos de fibras y
clulas contenidas en una sustancia
fundamental.
Clulas:
fibroblastos, fibrocitos, adipocitos,
linfocitos, plasmocitos, etc
Matriz extracelular:
fibras:
colgenas, elsticas,
sustancia fundamental:
agua, electrolitos, glucosaminoglicanos,
proteoglucanos.
 Coloraciones Tricrmicas El fundamento de estas
tinciones depende de
varios factores.
1. Permeabilidad: el colgeno y los otros
elementos acidfilos del tejido tienen
distintos grados de permeabilidad al paso
del colorante.

Colorantes nucleares: laca de

hematoxilina frrica

por ello los colorantes

Colorantes citoplasmticos: cido utilizados para las
pcrico, orange G, escarlata Biebrich. diferentes tinciones
tricrmicas se clasifican
en:
Colorantes del conectivo: derivados
del anillo trifenilmetano: fucsina cida,
azul de anilina, verde luz SF.
 Coloraciones Tricrmicas
2. Afinidad: Debido a los grupos
catinicos presentes en las
estructuras . por ello estas fibras tienen
afinidad por los colorantes cidos que
estn cargados negativamente.

3. Valor del pH a que se utiliza los

colorantes: tienen mejor apetencia
por las fibras colgenas.

4. Fenmenos de mordiente: estas sustancias

actan como un vnculo entre el tejido y el
colorante acrecentando la unin especfica
entre ambos. Existen numerosos mordientes
de distinta naturaleza, entre los ms
importante: cidos: fosfotngstico, molbdico,
crmico, pcrico.
Tricrmica de
Masson
Tricrmica de Masson
Coloracin utilizada en el tejido conectivo,
para identificar clulas (fibroblastos,
adipocitos, condrocitos, etc.) o fibras
Principio: (colgeno, reticulina, elastina) y en
algunas coloraciones hematolgicas
seleccionadas.

Fijacin: Lquido de Bouin o formol al 10%.

Cortar secciones de parafina de 6

Microtoma: micrmetro de grosor.
Tricrmica de Masson
1. Desparafinar e hidratar hasta el agua destilada de manera
habitual.
2. En material fijado en soluciones de formaldehdo o alcohlicas
se recomienda hacer un mordentaje previo con lquido de Bouin
durante 1 hora a 56-60 C o toda la noche a temperatura
ambiente.
3. Enfriar y lavar en agua destilada hasta que desaparezca el color
amarillo.
4. Teir con hematoxilina frrica durante 10 minutos. Lavar en
agua corriente durante 10 minutos.
5. Lavar en agua destilada.
6. Teir con la solucin de escarlata-fucsina cida durante 2-5
minutos.
Tricrmica de Masson
7. Lavar en agua destilada.
8. Tratar con la solucin de cido fosfomolbdico-
fosfotngstico durante 10-15 minutos si se va a colorear
con la solucin de azul de anilina, o en la solucin acuosa
de cido fosfotngstico al 5% durante 15 minutos si se
desea teir con verde luz.
9. Teir con solucin de azul de anilina 15 minutos o con
solucin de verde luz 5 minutos.
10.Lavar en agua destilada.
11.Diferenciar en la solucin de cido actico al 1% durante 3-
5 minutos.
12.Deshidratar, aclarar y montar.
Tricrmica de Masson
Resultados:
Fibras de colgeno = Azul.
Por tanto, el tejido conjuntivo se teir
de dicho color.
Estructuras oxidadas + Citoplasma =
Rojo.
Se teirn de rojo la queratina, los
glbulos rojos y el tejido muscular.
Ncleo celular = Lila, marrn.
 Fijacin: Lquido de
Bouin o Formol al
Tricrmica de Masson 10%

Colorante nuclear:
hematoxilina frrica.
Colorante citoplasmtico:
Escarlata de Biebrich-fuscina
cida.
Mordiente:
cido fosfotngstico
Resultados: Coloracin de tejido
Ncleos conectivo:
Negro Light green / azul de anilina
Citoplasma, queratina, fibras
musculares y hemates Glomerulonefritis
Rojo
proliferativa endocapilar
Colgeno y reticulina
difusa aguda.
Azul o verde.
Tricrmica de Masson

Necrosis Hepatica Submasiva

Corte histolgico a bajo aumento de un sector de hgado que
demuestra reas con trabculas hepticas remanentes, una
extensa zona en que se han perdido los hepatocitos (necrosis
confluente) con colapso del retculo e intensa hiperemia. A
partir de esta zona hay prolongaciones de tejido heptico
necrtico y colapso del retculo (necrosis en puente.
Tricrmica de
Mallory
Tricrmica de Mallory

Es una tcnica para el estudio del tejido

conjuntico.

Los cortes se tien con fucsina cida,solucin

de azul-naranja G de anilina y cido
fosfotungstico.

Las fibras de colgeno aparecen en azul, la

fibroglia, neuroglia y fibras musculares
aparecen en rojo y las fibrillas de elastina en
naranja
 Tricrmica de Mallory
Es utilizada para el estudio del tejido conectivo,
glndulas, hongos, piel, lengua, etc. Desarrollada
por Frank B. Mallory est constituida por tres
colorantes.
Fucsina Colorea de rojo a los ncleos.
cida.

Orange G Colorante cido que se fija al tejido conectivo,

citoplasma, msculo, eritrocitos. Tie de color rojo
a amarillo.

Azul de Colorante bsico que en presencia del cido

anilina. fosfotngstico tie la colgena de color azul.
Tricrmica de Mallory

Resultados:
Eritrocitos naranja.
Musculo rojo.
Colgeno azul.
 Fijacin en dicromato de potasio.
Tricrmica de Mallory Mordentaje previo en dicromato.

Soluciones
Fucsina cida
cido fosfomolibdico.
Solucin de Mallory
Resultados Azul de anilina
Ncleos
Orange G
Rojo
Citoplasma, hemates, fibras
musculares estriadas
Naranja rojizo
Msculo liso
Violceo
Tejido conectivo
Azul Tubos colectores de
la mdula renal
Tricrmica de Mallory

Tendn y msculo estriado esqueltico

Se observa el tendn (tejido conectivo denso
modelado) de color azul y el msculo estriado
esqueltico de color rojo oscuro. La coloracin
tricrmica de Mallory sirve para visualizar las fibras
colgenas
 Presentado por:
Gisela
Coronado
Sihuay.
Angel Toralva
Echevarra.
Jorge Prado
Vsquez.

Gracias

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