Arnold

Tesis ini merupakan penelitian tentang pengaruh teknik pembekuan sederhana, penyimpanan
pada suhu 4 C
Dan suhu pencairan yang berbeda pada langkah-langkah pasca-pencairan cairan gajah Asia
kriopreservasi
Sampel Ada pengaruh yang signifikan dari tingkat pembekuan terhadap motilitas post-thaw (P
<0,0001) dan
Integritas akrosom (P <0,005) sedotan beku setelah penyimpanan 0 dan 24 jam pada suhu 4 C.
Pembekuan lebih cepat
Tingkat pengirim kering dan pada 1cm atau 2 cm di atas nitrogen cair secara konsisten diberikan
lebih baik
Kriopreservasi daripada laju pembekuan yang lebih lambat. Suhu rata-rata tidak berpengaruh
pada pasca-pencairan
Kualitas semen Penyimpanan sampel sebelum pembekuan memiliki efek yang merugikan pada
air mani pasca-pencairan
kualitas. Menempatkan sedotan langsung ke pengirim kering untuk membekukan dan
mencairkannya pada suhu 50 C adalah sederhana
Teknik untuk mencekik sperma gajah Asia secara efektif.

1.1 Taksonomi dan Sejarah Evolusioner Gajah

"Gajah" yang berarti "satu lengkungan besar", milik kerajaan Animalia, filum
Chordate, kelas Mammalia, subclass Theria, infraclass Eutheria, urutan Proboscidea dan
Keluarga Elephantidae (International Union for Conservation of Nature (IUCN) 2013).
Sebelumnya
Disebut "pachyderms", "Proboscidea" diciptakan oleh Illigner pada tahun 1811 (Shoshani and
Tassy
1996). Shoshani (2001) menemukan bahwa Proboscidea beraliran asal mulai dari timur laut
Afrika selama periode Palaeosen akhir dan menyebar ke semua benua kecuali Antartica dan
Australia. Selanjutnya, mereka menemukan bahwa pada suatu waktu sekitar 165 spesies
Proboscidea
Ada di lima benua yang berbeda namun saat ini gajah adalah satu-satunya spesies yang tersisa
dari spesies ini
Memesan Proboscidea Gajah adalah mamalia darat terbesar yang hidup saat ini, beratnya
mencapai 7
Ton dan berdiri sampai 4 m tinggi (Shoshani 1998). Dua karakteristik utama pesanan
Proboscidea telah didefinisikan: gading bukan gigi anterior dan peningkatan jumlah baris
Dari cusp, memanjang gigi molar (Aguirre 1969). Tren evolusi gigi, taring, tengkorak
Dan kerangka postcranial dikenali pada gajah dan juga di Proboscidea Tersier,
Seperti nenek moyang gajah: mastodonts (Aguirre 1969). Evolusi proboscidean
Tren terdiri dari: peningkatan ukuran dan panjang tulang tungkai, pertumbuhan tengkorak,
tengkorak dan otik
Perubahan, pemendekan leher, pemanjangan mandibula, pengembangan belalai (pembentukan
Bagasi), gerakan dan pembesaran gigi pipi dan pengurangan jumlah gigi,
Hipertrofi gigi seri tengah untuk membentuk taring, peningkatan laju evolusi di kepala
dibandingkan dengan
Sistem organ lainnya dan peningkatan nilai Excephalization Quotient (EQ) (Shoshani
1998). Aguirre (1969) dan Shoshani dan Tassy (1996) menggambarkan evolusi mastodont di
Indonesia
Afrika, Asia dan Eropa pada akhir periode Tersier. Mereka juga baru saja
Mengenali tiga genera utama keluarga Elephantidae: Loxodonta, Elephas, dan Mammuthus
(Mammoth). Selanjutnya mereka menemukan bahwa Elephas bermigrasi keluar dari Afrika dua
kali dan berevolusi masuk
Asia, sementara Loxodonta tetap tinggal di Afrika dan Mammuthus bermigrasi keluar dari
Afrika dan berevolusi
Di Eropa, Asia dan Amerika Utara. Shoshani dan Tassy 1996), mengaitkan migrasi tersebut
Mammuthus dan Elephas untuk evolusi cepat dari gigi mereka memungkinkan mereka untuk
bermigrasi ke
Benua utara dengan lingkungan dan iklim baru dengan sumber makanan yang berbeda. Yang
terakhir
Glasiasi di belahan bumi utara dihubungkan dengan migrasi Elephas dari Afrika
Dan kepunahan semua garis keturunan lain di Elephas, kecuali Elephas maximus, dan di Holosen
Periode kepunahan semua anggota Elephantidae, kecuali Elephas maximus, Loxodonta
Cyclotis dan Loxodonta africana, terjadi (Aguirre 1969; Shoshani dan Tassy 1996).
Saat ini ada tiga spesies gajah yang berbeda: gajah hutan Afrika (Loxodonta
Cyclotis), gajah Afrika Savannah (Loxodonta africana) dan gajah Asia (Elephas
Maximus) (lihat review: Hildebrandt et al 2006 dan IUCN 2013). Shoshani (2001),
dipertimbangkan
Gajah Afrika lebih primitif dibanding gajah Asia. Pertimbangan ini
Dikonfirmasi oleh bukti berikut: Gajah Afrika memiliki gigi pipi dengan mahkota rendah, lebih
sedikit
Piring per gigi, tengkorak mereka diratakan dari atas ke bawah, mandibula lebih panjang, kurang
pneumatik
Crania, lebih banyak rusuk, telinga yang lebih besar, punggung cekung dan berbagai
karakteristik skelet lainnya yang ada
Tidak berevolusi sampai tingkat gajah Asia. Shoshani (2001) juga menggambarkan perbedaan
Gading antara spesies gajah. Di gajah Afrika, baik pria maupun wanita
Gading tidak seperti gajah Asia dimana hanya jantan yang memiliki taring. Loxodonta cyclotis
tinggal di
Hutan dan jauh lebih kecil dan lebih ramping, dengan taring downpointing dan mandibula yang
lebih panjang
(Shoshani 1998).
Kedua spesies gajah Afrika tersebut dianggap "rentan" menurut IUCN Red
Daftar kriteria dan gajah Asia diklasifikasikan sebagai "terancam punah". Statistik berikut adalah
Disediakan oleh informasi daftar Merah IUCN untuk gajah Afrika dan Asia. Gajah Afrika
Ada di 37 negara di sub-Sahara Afrika, dengan distribusinya menjadi terfragmentasi
benua. Gajah Asia pernah ditemukan dari Asia Barat sampai ke anak benua India dan
Ke Asia Tenggara dan China, mencakup lebih dari 9.000.000 km2. Namun hari ini, gajah Asia
Ada di 13 negara bagian, Bangladesh, Bhutan, India, Nepal, Sri Lanka, Kamboja, Cina,
Indonesia, Lao PDR, Malaysia, Myanmar, Thailand dan Viet Nam, dengan total sekitar 500.000
Km2, yang hanya 5% dari jangkauan sebelumnya. Gajah Asia betina berkisar di atas area hingga
326 km2 dan jantan berkisar area hingga 407 km2. Karena kebutuhan area yang luas
Gajah mereka dianggap sebagai "spesies payung", yang berarti konservasi mereka
memungkinkan untuk
Konservasi sejumlah spesies di daerah yang sama. Gajah Asia pertama diklasifikasikan sebagai
Terancam punah pada tahun 1986. Populasi gajah Asia telah menurun 50% selama tiga terakhir
Generasi (60-75 tahun) karena berkurangnya ketersediaan lahan dan kualitas habitatnya. Itu
Populasi global gajah Asia liar dan tawanan diperkirakan antara 41.410-
52.345 dan lebih dari 50% populasi liar yang tersisa tinggal di India (26.000-28.000)
(Baskaran et al 2011; IUCN 2013). Ada sekitar 16.000 gajah Asia di Indonesia
Penangkaran di dunia, termasuk gajah peliharaan di Asia (Sukumar 2006).
Karanth dan DeFries (2010) menggambarkan ancaman utama bagi gajah Asia sebagai habitatnya
Kehilangan, degradasi dan fragmentasi akibat bertambahnya populasi dan penyebab manusia
Konflik manusia-gajah Banyak manusia dan gajah terbunuh setiap tahun akibatnya
Konflik. Populasi manusia tumbuh pada tingkat 1-3% per tahun di daerah dimana
Gajah Asia hidup, dan karena daerah yang luas dan kebutuhan makanan gajah mereka adalah
Pertama yang terkena dampak pertumbuhan penduduk (IUCN 2013). Selanjutnya, 1,2 miliar
orang tinggal
Di India dan pada tahun 2020 diperkirakan bahwa populasi akan meningkat menjadi 1,4 miliar
orang (PBB
2009). Di India bagian timur laut, lebih dari 3000 km2 wilayah untuk gajah Asia hilang dalam
rentang waktu tertentu
Hanya 10 tahun karena perambahan dan penggundulan hutan (Bisht 2002). Menurut Bank Dunia
(2001), di tahun 1960-an tutupan hutan India mencapai 44%, namun pada tahun 1985 jumlahnya
menurun menjadi kurang
Dari 20%, dan pada tahun 1997 tutupan hutan sekitar 10,8% karena penebangan yang tidak
terkendali dan
Keinginan untuk lahan untuk pertanian Pembangunan jalan baru dan jalur kereta api serta
Pertambangan, juga mengancam gajah Asia di India (Baskaran et al 2011). Dari tahun 2006-
2011, 44
Gajah mati akibat tabrakan kereta api (Baskaran et al 2011). Di Nepal pada tahun 1950an, 80%
dari
Habitat alami gajah Asia diserang oleh pemukim, yang menyebabkan fragmentasi mereka masuk
Kelompok kurang dari 100 hewan (Mishra 1980; Pradhan et al 2011). Perburuan liar adalah
ancaman lain bagi gajah Asia. Gajah direbus untuk gading, daging dan
kulit. Seperti yang dinyatakan sebelumnya, hanya gajah Asia jantan yang memiliki gading, yang
mengindikasikan hal itu
Perburuan bisa membuat rasio seks jantan: betina. Dari tahun 1969 sampai 1989 rasio jantan:
betina
Menurun dari 1: 6 menjadi 1: 122 (IUCN 2013). Dari tahun 1974 sampai 1994 di India bagian
selatan kira-kira
336-388 gajah jantan rebus untuk panen 3256-3334 kg gading (Sukumar et al 1998).
Perburuan sekarang dianggap sebagai ancaman serius bagi kelangsungan hidup gajah Asia
jangka panjang
Populasi (Sukumar et al 1998).

1,2 Gajah Asia di Penangkaran

Saat ini 21-33% populasi gajah Asia di dunia ditemukan di penangkaran
(Taylor dan Poole 1998). Domestikasi berbagai spesies ternak yang berbeda
10.000 SM, namun domestikasi gajah diyakini berasal sekitar
4.500 tahun yang lalu (Sukumar 2003; Fowler dan Mikota 2006). Bukti pertama tawanan
Gajah ditemukan di tepian soapstone yang tertinggal dari budaya Harappan saat ini
Pakistan, bagaimanapun, ada kemungkinan gajah dilatih sebelum bukti ditemukan
(Fowler dan Mikota 2006). Penggunaan gajah telah membentang selama ribuan tahun, dari
Perang gajah ke seremonial gajah untuk bekerja gajah dan gajah tawanan (Sukumar
2003; Fowler dan Mikota 2006). Gajah perang digunakan untuk membantu pertempuran selama
perang dan
Membawa beban berat Diperkirakan 30.000 gajah ditangkap selama satu abad untuk digunakan
di Indonesia
Perang (Sukumar 1989). Gajah digunakan sebagai seremonial karena ukurannya yang besar,
Yang menampilkan kekayaan dan kekuatan (Fowler dan Mikota 2006). Gajah diekspor
Perang dan penggunaan seremonial dari sekitar 200 SM. Dan telah digunakan untuk berkuda
sejak sekitar 400
B.C. (Jayewardene 1994; Sukumar 2003).
Penggunaan gajah untuk tanggal kerja sampai tahun 2000 SM, dengan penggunaan gajah di
Konsesi kayu dimulai pada abad ke-19 (Wylie 1992; Daniel dan Datye 1995).
Gajah Asia digunakan sebagai mesin hidup untuk bangunan, penebangan dan pengangkutan
karena ganja mereka
Ukuran dan kekuatan dan kemudahan bergerak melalui medan yang sulit tanpa merusak hutan
(Fowler dan Mikota 2006). Daniel dan Datye (1995) mencatat bahwa sampai 1977, gajah

1.4.3 Teknik Pengumpulan Semen

Mendapatkan sampel semen yang layak adalah salah satu aspek yang paling penting dari buatan
inseminasi. Metode pengumpulan semen yang paling umum digunakan pada hewan piaraan
adalah
Vagina buatan (AV) dan electroejaculation (Garner 1991).
Buatan vagina meniru kondisi vagina pada betina, namun memungkinkan
Suhu dan tekanan yang harus dikontrol sesuai dengan preferensi masing-masing hewan (Senger
2003). Buatan vagina digunakan hampir secara eksklusif untuk sapi jantan di pusat AI dan juga
digunakan
Dengan kuda jantan, bucks, domba jantan dan kambing (Dowsett dan Pattie 1980; Faulkner dan
Pineda 1980;
Baracaldo dkk. 2007; Lihat review: Faigl et al. 2012). Dua orang biasanya dibutuhkan untuk
penggunaan
Dari AV: satu untuk memegang banteng dan satu untuk memegang dan mengumpulkan dengan
AV, dan itu memerlukan pelatihan
Dari banteng untuk menggunakan gunung (Gomes 1977; Baracaldo et al 2007). AV diisi dengan
hangat
Air pada 42-50 C. Setelah banteng telah menaiki sapi dengan panas, atau dummy mount, maka
Kolektor kemudian akan memandu penis dan mengarahkannya ke AV, sedangkan banteng akan
disodorkan dan
Menghasilkan sampel air mani (Baracaldo et al 2007). Mengumpulkan dari kuda jantan sama
persis
Teknik, meskipun kuda jantan memakan waktu lebih lama sebelum ejakulasi dapat dikumpulkan
(Dowsett dan
Pattie 1980). Dowsett dan Patti (1980) menggambarkan proses pengisian AV sesuai dengan
Preferensi individu Mereka menemukan bahwa AV diisi dengan tingkat air yang terukur (antara
2-4 liter tergantung ukuran penis kuda jantan) pada suhu 50-52 C. Mereka menemukan bahwa
Suhu air di AV dan jumlah air di AV (yang mengubah ukurannya
Dan tekanan daripadanya) adalah faktor penting mengenai apakah kuda jantan tersebut akan
menghasilkan atau tidak
Contoh yang layak melalui penggunaan AV. Rams dapat dikumpulkan oleh AV (suhu yang sama
Dan tekniknya seperti sapi, tapi lebih kecil) dan bisa dengan mudah dilatih untuk memasang
boneka atau domba betina (Salamon 1976; Faulkner dan Pineda 1980). AV juga telah
dikembangkan untuk mengumpulkan
Sampel semen dari unta (Hemeida et al 2001). Hemeida et al. (2001) menemukan AV
Preferensi unta untuk AV sampai sekitar 30 cm dan memiliki suhu air 60
Sampai 70 C untuk membuat suhu di dalam 40 sampai 42 C. Mereka juga menggambarkan
proses pengumpulan
Unta Seekor unta betina dibawa ke tempat berkembang biak unta yang dirancang khusus
Laki-laki kemudian diijinkan untuk memasang betina saat sudah siap. Begitu dia naik, AV-nya
Dimasukkan ke dalam parasut dan unta jantan masuk ke AV dan dorong sampai dia mengalami
ejakulasi. Oleh
Membentuk platform koleksi mereka sendiri dan AV, air unta dikumpulkan dengan mudah dan
AI lebih lanjut
Studi dapat dilakukan di masa depan (Hemeida et al 2001).
Electroejaculation telah menjadi metode "last-resort" mengumpulkan dari bovids hampir 50
Tahun (Hill et al, 1956). Electroejaculation digunakan untuk meniru aktivasi pusat ejakulasi
Di otak yang menyampaikan impuls motor melalui pleksus mesenterika posterior
Ganglia parasimpatis dan nervus skiatik dan lumbal melalui daerah pelvis. Listrik
Rangsangan melalui rektum merangsang saraf perifer ini (dengan stimulasi langsung dari
Ampullae dan vesikula seminalis) yang memungkinkan terjadinya ejakulasi (Barker 1958). Pada
sapi jantan, domba jantan, dan
Bucks electroejaculation terutama digunakan bila metode AV tidak bekerja untuk hewan, atau
Ketika seekor binatang tidak dapat dengan mudah dilatih, misalnya dalam kasus di mana seorang
pria tidak akan menonjol
Penisnya atau bukan kandidat yang layak dipasang karena luka, mutasi genetik atau perilaku
Masalah yang tidak memungkinkan pemasangan atau ejakulasi (Barker 1958; Foote 1974; Ball
1976;
Faulkner dan Pineda 1980).
Prosedur elektroejasi yang digunakan pada spesies non-domestik biasanya modifikasi
Yang dikembangkan untuk spesies dalam negeri. Bulls, domba jantan dan uang biasanya
dikurung dalam posisi berdiri
Posisi dalam parasut untuk koleksi, dengan batas lateral jika diinginkan atau perlu sebagai
stimulasi
Saraf siatik dan lumbal memicu kontraksi otot rangka di daerah ini (termasuk
Anggota badan belakang). Rektum dibersihkan dari kotoran sehingga probe dapat dimasukkan
pada garis tengah menjadi
Agak di atas vesikula seminalis dan ampullae (Barker 1958). Umumnya pendek
Rangsangan yang diikuti dengan stimulasi yang lebih lama akan menghasilkan tonjolan penis
dan ejakulasi
(Barker 1958). Tas koleksi menempel pada penis, setelah sudah menonjol, untuk mengumpulkan
Air mani (Barker 1958). Telah ditemukan pada babi hutan dan sapi jantan yang bisa kaya sampel
sperma
Dikumpulkan dengan baik pijat dubur atau electroejaculation (Barker 1958; Basurto-Kuba dan
Evans
1981). Karena sifat hewan liar yang tidak dapat ditolerir, dan kebutuhan untuk obat penenang
selama
Penanganan, electroejaculation sering satu-satunya pilihan (Howard et al 1984; Schmitt dan
Hildebrandt 1998; Senger 2003; Portas dkk. 2007).
Pada babi hutan, anjing dan unggas, air mani sering dikumpulkan dengan cara merangsang
secara manual
Organ reproduksi (Foote 1969, 1974; Gomes 1977). Pada babi hutan, air mani dikumpulkan
dengan
Metode "sarung tangan" dan memiliki fraksi agar-agar yang dapat dilepas setelah pengumpulan
Filtrasi (King dan Macpherson 1973; lihat review: Barbas dan Mascarenhas 2009). Celemek
adalah
Dilatih untuk memasang dummy sow yang ditempatkan di dalam kandang mereka dan setelah
mereka memasangnya
Kelopak penis meluncur melalui sarung tertutup sebagian, mengepalkan tangan dan memegang
erat (jari-jari
Mensimulasikan punggung serviks betina yang saling berkait saat kawin alami) sedangkan babi
hutan
Ejakulasi (King dan Macpherson 1973). Anjing juga paling mudah menerima jenis yang sama
Rangsangan manual seperti babi hutan (Faulkner dan Pineda 1980). Bulls telah dikumpulkan
oleh
Manipulasi manual, namun ditemukan bahwa kualitas semen diturunkan (Salisbury et al 1978).
Pada unggas, lubang kloak terbalik dan saluran mani dapat distimulasi melalui
Dinding perut dengan jari bersarung (Danau 1962). Pada beberapa spesies, seperti gajah, dubur
Teknik pemijatan telah dikembangkan, lebih dekat kaitannya dengan teknik "tangan bersarung"
di
Babi hutan daripada metode pengumpulan lainnya (Schmitt dan Hildebrandt 1998). Pijat rektal
miliki
Kelebihan tertentu dibanding electroejaculation. Dalam beberapa kasus dengan
electroejaculation, air mani
Sampel mengandung kontaminasi agar-agar dari kelenjar aksesori. Ini juga membutuhkan
pengekangan dan
Sering anestesi, yang memiliki risiko kemungkinan cedera selama induksi dan pemulihan,
membuatnya
Sulit untuk digunakan (Schmitt dan Hildebrandt 1998). Electroejaculation juga menunjukkan
volume yang lebih rendah
Dan kualitas unta yang buruk; Metode AV lebih disukai untuk mengurangi kontaminasi urine
dalam hal ini
Spesies (Hemeida et al 2001).