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Manual de Prcticas de Biologa de Hongos

TCNICAS DE ESTUDIO DE LOS HONGOS: MEDIOS DE


CULTIVO.

INTRODUCCIN
Para el estudio de los hongos es muy til el uso de medios de cultivo, ya
que en ellos se pueden obtener y conservar especies de hongos por
mucho tiempo y son bsicos para la investigacin en fisiologa,
biotecnologa y sistemtica en particular de los hongos microscpicos,
aunque tambin son una herramienta importante en la industria, la
medicina humana y veterinaria as como tambin en los estudios de
Fitopatologa. Los estudios en hongos macroscpicos en ocasiones
requieren del uso de estos medios.

Un medio de cultivo es una mezcla de nutrientes que, en


concentraciones adecuadas y en condiciones fsicas ptimas permiten el
crecimiento de los microorganismos como los hongos. Estos medios son
esenciales en el Laboratorio de Micologa por lo que un control en su
elaboracin, fabricacin, preparacin, conservacin y uso, asegura la
precisin, confiabilidad y reproducibilidad de los resultados obtenidos y
facilita tambin la elaboracin de experimentos.

Los componentes de un medio de cultivo para hongos generalmente son


carbohidratos, sales minerales, agua, en ocasiones se agregan protenas
o vitaminas y si es slido se emplea un agente solidificante llamado agar
el cual es obtenido de algas marinas y que no puede ser degradado por
los microorganismos.

Existen diferentes tipos de medios de cultivo dependiendo de su estado


slido, del contenido de nutrientes, de la naturaleza u origen y de su

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uso. Los medios de cultivo se pueden preparar en el laboratorio a partir


de cada uno de sus constituyentes bsicos, o por simple rehidratacin
de productos asequibles comercialmente (medios de cultivo
deshidratados). Generalmente se prefiere el uso de estos ltimos, ya
que simplifican el trabajo y se tiene una mayor probabilidad de obtener
resultados reproducibles.

Para su preparacin se deben tener en cuenta varios aspectos como el


utilizar agua destilada o desmineralizada, usar cristalera limpia, seguir
las instrucciones de preparacin indicadas en la etiqueta del fabricante y
controlar el tiempo de su esterilizacin.

Generalmente los medios de cultivo una vez preparados se esterilizan en


autoclave con fuente de gas o elctrica a 120C o 15 libras de presin
durante 15 o 20 minutos, para matar a todos los microorganismos que
puedan originar contaminacin o resultados errneos.

Una vez que el medio de cultivo se ha preparado y esterilizado, puede


almacenarse a temperatura ambiente aunque es mejor en refrigeracin,
ya que se prolonga su vida til. Deber conservarse perfectamente
cerrado con un tapn de algodn, gasa y cubierto por papel aluminio,
deber etiquetarse con nombre de quien lo elabor, fecha y siglas del
medio de cultivo elaborado.

Los medios de cultivo deshidratados deben ser almacenados en envases


perfectamente cerrados para evitar la entrada de humedad ya que son
altamente higroscpicos, protegidos de la luz solar directa para evitar
que los compuestos que los constituyen se desnaturalizen y en lugares
frescos entre 15 y 25C.

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OBJETIVOS
1) Practicar las tcnicas bsicas en Micologa para la elaboracin
adecuada de medios de cultivo, esterilizacin y llenado de cajas de
Petri.
2) Valorar la importancia que tiene el empleo de medios de cultivo en
la Micologa como herramientas de estudio.

MATERIAL
Cuestionario previo traerlo resuelto, algodn, gasa, hilo, tijeras,
matraces, pipetas, probetas, vaso de precipitado, guante de cocina o de
asbesto, cubrebocas, alcohol, masking tape, cinta diurex, papel
aluminio, plumn indeleble, lienzo o trapo, papel sanitario o papel
secante, balanza granataria, diversos medios de cultivo, agitador, 1
paquete de 10 cajas de Petri desechables, mecheros, campana de flujo
laminar, autoclave, agua destilada, cuaderno de notas (bitcora).

DESARROLLO
1. Agregue agua destilada en el autoclave u olla de presin en el nivel
indicado y enchfela a la electricidad presione el botn de encendido o
encienda los mecheros (segn sea el caso), para calentarla.

2.Tome 2 medios de cultivo proporcionados por la profesora que sean


diferentes en cuanto a componentes, elabore el necesario para 5 cajas
de Petri de cada medio, lea las instrucciones de la etiqueta y realice una
regla de 3, es necesario revisarlo por la maestra antes de agregarlo al
agua. Elabore tapones con algodn rodeados por una gasa y amarrados
con un hilo, el tapn deber quedar firme en el matraz de tal manera
que podamos cargar el matraz con el tapn, no debe irse para adentro
del mismo, ya que se corre el peligro de que los matraces al esterilizarse
con el medio se destapen y se contaminen. Una vez hecha la mezcla del

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medio con el agua, coloque el tapn y posteriormente cbralo con papel


aluminio. Etiquete el matraz con las siglas del medio de cultivo que
prepar, el nombre del equipo o de algn integrante del mismo.

3. Depostelo dentro del autoclave u olla de presin y espere a que


todos los equipos lo hagan; posteriormente cirrela girando las
mariposas (llaves de la tapa) en cruz para que sea homogneo el cierre,
espere a que salga el vapor y cierre la vlvula. Enseguida empezar a
subir la aguja del reloj indicando la presin y temperatura. Una vez que
llegue a 15 o 20 libras, mantngala constante durante 15 o 20 minutos,
una vez transcurrido este tiempo apague la autoclave y espere a que la
aguja baje a 0.

4. Mientras tanto, limpie perfectamente con alcohol la campana de flujo


laminar, o incluso puede someterla 1 hora a luz uv al inicio de la clase,
tener cuidado de apagarla antes de llevar los medios de cultivo.
Enjuague tambin con alcohol sus manos.

5. Una vez que se ha enfriado el autoclave, abrirla cuidadosamente y


tener sumo cuidado de que el vapor no nos llegue a la cara para evitar
quemarnos. Con el guante de asbesto o de cocina sacar los medios y
transportarlos a la campana de flujo laminar, encender los mecheros, la
campana (luz blanca y ventilador), abrir la bolsa de plstico con las
cajas de Petri y servir el medio. En el momento de hacerlo se puede
colocar un cubrebocas o no hable ni se ra, para evitar la contaminacin
del medio, una vez que se cubre la caja de Petri con el agar, cerrar la
caja y esperar que solidifique, no mover por ninguno motivo las cajas.
Cuando haya solidificado el medio, se etiquetan las cajas indicando la
fecha, medio de cultivo y nombre del equipo. Dependiendo del tiempo

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podr usarlas para sembrar el material que haya trado o se guardarn


en el refrigerador.

Fig. 1. Autoclaves. Arriba olla de


gas, abajo autoclave
elctrica.

RESULTADOS
Elabore esquemas de lo que haya
realizado o tome fotografas y explique
qu medios de cultivo elabor. Seale las
partes de los esquemas anteriores.
Complete el siguiente cuadro
comparativo.
Nombre del Medio de
Cultivo

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Carbohidratos

Protenas

Vitaminas

Agua

Uso

Utilidad

Cuadro 1. Comparativo entre los medios de cultivo empleados.

CUESTIONARIO
1. Investiga qu es un medio de cultivo, cuntos tipos existen, para
qu se utiliza cada uno y da ejemplos para hongos.
2. De los medios de cultivo que elaboraste a qu tipo pertenecen? Ve
el contenido de nutrientes (mezcla) y qu esperas obtener?
3. Define qu es esterilizacin, tipos y qu uso se le da a cada uno?
4. Qu es un cepario y cul es su importancia?
5. Significado de asepsia, inoculacin, siembra (microbiana), cultivo
axnico, cepario.
6. Cul es la importancia de los medios de cultivo para la
Microbiologa y en particular para la Micologa?
7. Si quisiera esterilizar una substancia que se desnaturaliza con el
calor qu mtodo utilizara?

BIBLIOGRAFA

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EL MICROSCOPIO

INTRODUCCIN
El microscopio es un instrumento bsico que permite hacer visible la
estructura fina de los objetos a una escala no apreciable a simple vista.
En Biologa se emplea comnmente el microscopio de luz para el estudio
de clulas (Citologa) y tejidos (Histologa), su poder resolutivo es la
capacidad de hacer que aquellos objetos que estn muy juntos
aparezcan separados; los ms comunes son el de tipo ptico o
compuesto y el estereoscpico o de diseccin; existen una gran variedad
de modelos en su construccin.

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El desarrollo del microscopio fue posible gracias al descubrimiento de las


propiedades de las lentes (del latn lentcula que significa lenteja, por la
forma doblemente convexa de las primeras lentes que usaron los
romanos). El lente ms antiguo que se conoce, un plano convexo de
roca cristalina, se encontr al excavar las ruinas del Nnive, capital de la
antigua Asiria sobre el ro Tigris; se calcula su origen en ms de 700
aos A. C. En el ao 65, el filsofo romano Sneca anot que una vasija
esfrica llena de agua ayuda a ver las cosas pequeas que comnmente
escapan a la visin. Plinio el viejo, antes de morir a causa de su
curiosidad cientfica durante la erupcin del Vesubio en el ao 79,
experiment con las propiedades inflamantes de lentculas de vidrio.
Posteriormente se invent el telescopio por Nicols Coprnico y despus
el microscopio, en el que tuvieron destacada participacin Galileo, los
hermanos Janssen, Robert Hook y Leeuwenhoek entre otros.

La invencin del microscopio origin el nacimiento de varias ciencias, la


Microscopia, Microbiologa (Virologa, Bacteriologa, Micologa,
Protozoologa), Biologa Celular o Citologa, Histologa, entre otras. En
esta prctica conocer los microscopios ms comunes, sus
componentes, uso, cuidado y manejo.

OBJETIVOS
1) Reconocer cada sistema del microscopio, sus componentes, funcin,
manejo y cuidados.
2) Comparar los microscopios compuesto y estereoscpico para
diferenciar su utilidad.
3) Realizar observaciones correctas en el microscopio con diferentes
aumentos.
4) Valorar la importancia que ha tenido el microscopio para el hombre y
la ciencia.

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MATERIALES
Microscopio ptico, estereoscpico o de diseccin, portaobjetos y
cubreobjetos, caja de Petri, preparaciones fijas de tejidos, agujas de
diseccin, esquemas o diagramas de los dos tipos de microscopios,
tallos, hojas, insectos, recorte de peridico, tijeras, cinta adhesiva, papel
sanitario, papel seda, franela.

DESARROLLO
La actividad se realiza en dos sesiones y se requiere hacer una
investigacin previa y contestar un cuestionario sobre el tema (Trabajo
individual).

SESIN I
1. Comenten su investigacin o cuestionario por equipo, as como
tambin identifiquen las partes y funcin que componen a cada
microscopio proporcionado (ptico y estereoscpico) y concluyan
2. Realice un esquema de cada microscopio, o en las Figuras 1 y 2
nombre las partes sealadas, indique al lado de cada una si pertenecen
al Sistema Mecnico (SM), al Sistema ptico (SO) o al Sistema de
Iluminacin (SI).
3. Concluya en la plenaria de todo el grupo.

Figura 1. Esquema de Microscopio ptico (Compuesto).

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Figura 2. Esquema de Microscopio Estereoscpico.

SESIN II
4. Elabore una preparacin con una palabra recortada de papel
peridico (elija letra pequea), pguela al portaobjeto con cinta
adhesiva y observe en ambos microscopios. Realice movimientos hacia
arriba y abajo; derecha e izquierda y describa que sucede con la
imagen.

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5. Tome la preparacin fija proporcionada y observe con el microscopio


ptico en los aumentos de 10 x, 40 x y 100 x (no olvide usar el aceite
de inmersin en 100x con ayuda del profesor).
6. Realice lo mismo en el estereoscpico; tambin observe en sus
diferentes aumentos los insectos, hojas o tallos.

RESULTADOS
Realice esquemas de todo lo observado, indicando el tipo de microscopio
y aumentos. En esta parte incluir los esquemas de ambos microscopios
sealando cada uno de sus componentes. Complete el cuadro 1 que ser
transcrito en el pizarrn.

ANLISIS DE RESULTADOS
Usted lo realizar conforme a los resultados obtenidos y al contestar el
siguiente cuestionario.

CUESTIONARIO
1. Qu es el microscopio y cul es su importancia?
2. Quin invent el microscopio y en qu ao?
3. Cuntos tipos de microscopios existen? Descrbalos.
4. Cules sistemas constituyen el microscopio ptico y qu partes
forman a cada uno incluyendo su funcin?
5. Mencione los cuidados que se deben tener con el microscopio.
6. Cmo se realiza una observacin correcta al microscopio?

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Cuadro 1. Comparacin entre El Microscopio ptico y Estereoscpico.

MICROSCOPIO DE
CARACTERSTICA MICROSCOPIO DISECCIN O
PTICO ESTEREOSCPICO
TIPO DE
MICROSCOPIO
PODER DE
RESOLUCIN
AUMENTOS

IMAGEN OBSERVADA

DIMENSIONES
OBSERVADAS
SISTEMA MECNICO

SISTEMA PTICO

SISTEMA DE
ILUMINACIN
FUNCIN

CONCLUSIONES
Usted las realizar junto con sus compaeros, tomando en cuenta todas
las actividades realizadas.

BIBLIOGRAFA
Aguilar Ortigoza C.; Laguna H. G., Mrquez G. J. y A. M. Mena.
2000. Manual de Prcticas de Biologa Celular. Laboratorio de Citologa y

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Laboratorio de Microscopa y Microcine. Departamento de Biologa.


Facultad de Ciencias, UNAM. 76P.
Audesirk, T.; Audesirk, G. y B. Byers. 2003. Biologa. La Vida en la
Tierra. Pearson Educacin. Mxico. 980 p.
Baker, J. y G. Allen. 1970. Biologa e Investigacin Cientfica. Fondo
Educativo Interamericano, S. A. Mxico. 666 p.
Bernis M. F. J. 2001. Microscopia. Atlas temtico. Idea Books.
Barcelona, Espaa. 117 p. ISBN 84-8236-069-8
French, E. y T. Hebbert. 1982. Mtodos de Investigacin
Fitopatolgica. Instituto Interamericano de Cooperacin para la
Agricultura. Costa Rica. 289 p.
Mrquez, J. 1985. Biologa Celular. Manual de Prcticas 2. Laboratorio
de Citologa. Departamento de Biologa. Facultad de Ciencias,
Universidad Nacional Autnoma de Mxico. 113 p.
Wallace, R. 1995. Biologa El Mundo de la Vida. Harla S. A. de C. V.
Mxico. 932 p.

http://www.danival.org/notasmicro/_madre_micro.html
http://www.microbiologia.com.ar/microscopia/index.html
http://www.microinmuno.qb.fcen.uba.ar/SeminarioMicroscopia.htm
http://pegasus.udea.edu.co/~undheim/CursoMicroscopias.pdf

AISLAMIENTO Y PURIFICACIN DE HONGOS

INTRODUCCIN
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Sembrar o inocular es introducir artificialmente una porcin de muestra


(inculo) en un medio adecuado, con el fin de iniciar un cultivo
microbiano, para su desarrollo y multiplicacin. Es una tcnica necesaria
para obtener cepas puras y tambin para realizar experimentos. Una vez
sembrado el microbio en el medio de cultivo, se incuba a una
temperatura adecuada para el crecimiento.

Las reglas fundamentales para efectuar la siembra exigen que se


realicen aspticamente, que los medios de cultivo y el instrumental a
utilizar estn esterilizados, que se trabaje fuera de toda corriente de
aire, de ser posible utilizando un mechero, lmpara de alcohol o
campana de flujo laminar.

Existen diferentes tipos de siembra dependiendo del tipo de


microorganismo o de lo que se pretende hacer, es decir de la finalidad
del estudio que se realice, de tal manera que existen la siembra por
picadura, punto, estra, placa invertida, etc.

Si lo que vamos a evaluar es el crecimiento de una colonia de hongos a


travs del tiempo, lo conveniente es utilizar un medio de cultivo slido
en cajas de Petri y sembrar en punto; si lo que deseamos es aislar una
sola especie de hongo, entonces convendr realizar la siembra por
estra, para que las colonias que crezcan, lo hagan separadas al final de
la estra y as facilitar un posterior aislamiento, para obtener puro el
microbio deseado.

El aislamiento de hongos a partir de muestras naturales se realiza, en la


mayora de los casos, mediante la produccin de las colonias aisladas en
cultivos slidos. La inoculacin en ellos permite el crecimiento rpido
durante el perodo de incubacin, es decir en condiciones ambientales
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favorables, esta tcnica se puede emplear para hongos saprobios


(aquellos que se desarrollan en materia orgnica en descomposicin ya
sea de origen vegetal o animal) y tambin para los hongos parsitos
facultativos (viven como saprobios o como parsitos en algn momento
de su vida). Los que necesitan forzosamente otra especie para vivir y le
ocasionan dao, reciben el nombre de parsitos obligados y son
incapaces de desarrollarse en medios de cultivo.

Una vez que se obtiene el crecimiento de un microbio en medio de


cultivo, es necesario purificarlo por medio de siembras continuas en
otras cajas de Petri hasta obtenerlo completamente puro (axnico). Los
cultivos puros se inician a partir de colonias aisladas, de manera que
todos los individuos del mismo tengan composicin gentica similar. Los
cultivos puros son esenciales para poder estudiar las caractersticas de
los microorganismos y poder identificarlos con seguridad. Sin embargo,
un cultivo puro supone unas condiciones no naturales ya que no se
encuentran as en el ambiente, por lo que la fisiologa de los hongos en
ambientes naturales puede ser diferente de la que presentan en
condiciones de cultivos puros en el laboratorio.

OBJETIVOS
1) Practicar diferentes tipos de siembra de hongos en medios de
cultivo para estimar su utilidad.
2) Observar las caractersticas macroscpicas de las colonias
obtenidas en los diferentes medios de cultivo empleados para diferenciar
las especies aisladas.
MATERIAL
Cultivos preparados en la prctica 1, microscopios ptico y
estereoscpico, asa de siembra, campana de flujo laminar, estufa,

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lmpara de alcohol, algodn, alcohol, plumn indeleble, cuaderno de


notas (bitcora).

DESARROLLO
1. Disee el experimento que va a realizar un mismo tipo de hongo
para diferentes medios de cultivo, ya sea que siembre en punto o en
estra.
2. Realice una hiptesis de acuerdo con el tipo de medio de cultivo
empleado y el hongo sembrado.
3. Limpie perfectamente con alcohol la campana de flujo laminar con
un algodn con alcohol y encienda la luz uv. durante media hora.
4. Saque del refrigerador las cajas de Petri con los medios de cultivo
preparados y llvelos a la campana de flujo laminar, encindela y prenda
las lmparas de alcohol.
5. Tome el asa de siembra y esterilcela en la flama de la lmpara de
alcohol hasta que se torne rojo vivo, posteriormente squela y
mantngala cerca del fuego hasta que se enfre, tome un poco de la
muestra contaminada con hongos (fruta, semillas, gelatina, etc.) y
simbrela suavemente sobre la caja de Petri, ya sea en punto o en
estra.
6. Tome los datos de los hongos que sembr, coloracin, substrato.
7. Incbela en la estufa a 27C. observe y registre el crecimiento y las
colonias al menos 2 veces en una semana.
8. Resiembre la colonia deseada en otras cajas de Petri con medio de
cultivo hasta obtenerla pura totalmente.

RESULTADOS
Elabore esquemas de lo que haya observado o tome fotografas y
explique sus resultados.
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Complete el siguiente cuadro comparativo.

EXPERIMENTO: EFECTO DEL MEDIO DE CULTIVO EN EL


AISLAMIENTO
CAJ SUBSTR DE HONGOS
COL TIPO MEDIO DE CULTIVO 1 MEDIO DE CULTIVO 2
A ATO OR DE OBSERVA OBSERVA OBSERVA OBSERVA
FECHA DE SIEMBRA ___________________________
DE DEL CIN 1
SIEMB CIN 2 CIN 1 CIN 2

PET HON RA
RI GO
1

Cuadro 1. Experimento
CUESTIONARIO
1. Cul fue tu hiptesis y se cumpli en sus resultados?
2. Qu efectos tuvo la composicin de los medios de cultivo en el
crecimiento de los hongos? Explique.
3. Cul es la parte ms vieja de la colonia de los hongos y la ms
joven? Y cmo la identificas?
4. Cules son las condiciones favorables para incubar hongos?

BIBLIOGRAFA

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TIPOS DE TALO, FASES SOMTICAS Y REPRODUCTORAS


LOS HONGOS

INTRODUCCIN

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Los hongos son considerados un reino aparte, debido a que presentan


caractersticas muy particulares como el crecimiento apical, clulas con
pared constituida por quitina, se nutren por medio de absorcin de
materia orgnica y digestin "externa", es decir producen enzimas al
exterior de su cuerpo para que sean degradadas grandes molculas y las
transformen en pequeas, para ser absorbidas posteriormente.
Generalmente se encuentran formados por clulas alargadas
filamentosas llamadas hifas, que en conjunto forman el micelio, las hifas
son cenocticas o septadas y en su mayora multinucleadas. Los hongos
son microscpicos y macroscpicos de acuerdo con la presencia o
ausencia de tejidos en su cuerpo fructfero, sus tejidos son conocidos
con el nombre de plectnquima.

Los hongos microscpicos pueden ser filamentosos, constituidos por


hifas o levaduriformes ya sea unicelulares o formando cadenas de
clulas unidas en sus extremos (pseudomicelio). Las hifas se adaptan a
diversas condiciones ambientales y se especializan como respuesta a
ellas, por lo que se encuentra una gran diversidad de las llamadas
modificaciones hifales: rizoides, estolones, haustorios, apresorios,
rizomorfos, esporangifotos y conidiforos entre otras.

Tienen la capacidad de reproducirse asexual y sexualmente por medio


de esporas, que son las estructuras de propagacin de la especie. Las
esporas asexuales son de origen endgeno como las esporangiosporas y
aquellos exgenos son las conidiosporas. Las esporas sexuales son muy
diversas en forma y origen las endgenas como la zigospora es diploide
y considerada cigoto en el ciclo de vida del Phylum Zygomycota
"hongos inferiores amantes del azcar"; las ascosporas haploides que se
forman en nmero de 8 por asca (estructura en forma de saco) (Phylum
Ascomycota); tambin las hay exgenas haploides como las
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basidiosporas que se forman cuatro por cada basidio generalmente, son


producto de la meiosis (Phylum Basidiomycota). La importancia de este
Reino es amplia y diversa, los hay comestibles, venenosos,
fitopatgenos, patgenos de humanos causante de enfermedades como
las tias del pie, de la cabeza, de la piel, entre otros, mutualistas como
los lquenes y las micorrizas, de importancia industrial como las
levaduras en el proceso de bebidas alcohlicas y el pan, productores de
metabolitos secundarios como antibiticos y cidos orgnicos, a partir
de algunos de ellos ya se elaboran biopesticidas, otros se utilizan en
rituales msticos de origen prehispnico, sus usos son muy diversos de
acuerdo con cada cultura mexicana.

OBJETIVOS
1) Caracterizar al Reino Fungi con base en observaciones de diferentes
estructuras reproductoras y somticas.
2) Distinguir las fases somticas de reproductoras para identificar si son
sexuales o asexuales.
3) Determinar si son hongos eucrpicos y holocrpicos.
4) Reconocer la importancia de los tipos de talo y estructuras
reproductoras en la clasificacin de los hongos.

MATERIAL:
Microscopio ptico y estereoscpico, agujas de diseccin, navaja de
afeitar nueva, lienzo, cubre y portaobjetos, cajas de petri de plstico,
material contaminado con hongos (pan, tortilla, papel, granos, queso,
fruta, plantas), 1 camote con mohos negros, 2 frascos con boca ancha
lavados y secos, 2 gasas, hilo, champin, seta, cuerpos fructferos de
hongos comestibles que los puede adquirir en el mercado, pulque o
levadura de pan, preparaciones fijas, 2 vasos desechables. Cajas de
Petri con los cultivos obtenidos en la prctica anterior.
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MTODO
a) Obtencin de hongos en diferentes condiciones de humedad y
substratos.

Esta parte se realiza una semana antes de iniciar la prctica. Tome


los dos frascos lavados y en cada uno deposite material orgnico
como tortilla, pan, papel, etc. En un frasco humedezca diariamente
con un atomizador los diferentes substratos, en el otro solo coloque
el material orgnico sin humedecerlo. Cubra ambos frascos con una
gasa y el hilo, para impedir que entren mosquitas u otros insectos.
Ubquelos en un lugar que tenga perodos de luz y obscuridad,
durante 7 das, registre en su libreta las observaciones diarias que
haya realizado de cada frasco (si aparecen mohos o no, el color de
ellos, como se observa el substrato, olor del mismo, etc.). El da que
se inicie la prctica lleve los frascos al laboratorio.

b) Hongos microscpicos (Phylum Zigomycota, Deuteromycota).

Observacin de colonias de hongos en el substrato

1. En el microscopio de diseccin, observe las colonias que haya


obtenido en el substrato y dibjelas, registre sus caractersticas, forma,
color, etc.

Preparacin de hongos microscpicos

2. Realice preparaciones del material contaminado por hongos, o de sus


cultivos, tome un poco de micelio con unas pinzas o agujas de diseccin,

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depostelo en un portaobjetos limpio, agregue una pequea gota de


agua o de colorante, deposite suavemente el cubreobjetos y si hay
restos del colorante o del agua, limpie cuidadosamente con un papel
secante, solamente acercndolo a la orilla del cubreobjeto, sin frotar.
Observe en 10x, 40x. Trate de identificar estructuras somticas (hifas,
rizoides, estolones, esporangiforos, conidiforos) o reproductoras
(esporas sexuales o asexuales). Recuerde que en la mayora de los
casos el color de las colonias es dado por las esporas, no tome su
muestra de partes blanquecinas.

hifas
cenocticas
haustorios
hifas
septadas

Preparacin de Pulque

3. Efecte una preparacin de pulque o solucin de levadura preparada


previamente con agua y azcar en un vaso de precipitados. Tome una
gota y colquela sobre el portaobjeto y cbrala. Observe en 10x, 40x si
es necesario en 100x. Observe el talo unicelular, pseudomicelial y
biparticin o gemacin en las levaduras.

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Preparacin de Moho negro del Pan,


Moho de la fresa, Moho del camote

Rhizopus sp. Observe en el microscopio ptico


e identifique: rizoides, estoln, micelio
cenoctico, esporangiforo, esporangio, pared
del esporangio, columnilla, esporangiosporas.

Rhizopus nigricans
esporangios,
esporangiosporas,
esporangiforos,
columella, rizoides y
estolones.

Preparacin moho
negro o verde del pan o de la tortilla

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Aspergillus clavatus. Identifique micelio septado, conidiforo, vescula,


clula conidigena, esporas catenuladas (en cadena).

Preparacin del moho verde de la naranja o de la tortilla

Conidiforos, vescula y conidiosporas

Penicillium sp. Identifique micelio septado, conidiforo, vescula, clula


conidigena, esporas catenuladas (en cadena).

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Penicillium sp. Moho verde de la tortilla o de la naranja.

c) Hongos macroscpicos (Phylum Ascomycota y Basidiomycota).

En esta sesin ser necesario traer diversidad de cuerpos fructferos


que compren en el mercado, entre ellos championes, setas, clavitos,
escobetas, panzas, huitlacoche, etc.

Diversidad de cuerpos fructferos.


Observe detenidamente todos los cuerpos fructferos que hayan
trado en cuanto a forma, consistencia, color, olor y determinen si son
ascocarpos o basidiocarpos (por medio de preparaciones temporales
del himenio). Realicen dibujos de todo lo observado, identifique el
pleo, himenio y estpite, escriba su nombre comn y busque el
nombre cientfico.
Preparacin de Ascoma o Ascocarpo

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Tome el ascocarpo de Morchella (panza o


colmena) o Helvella (silla de montar o
gachupn) y con una navaja de rasurar
nueva realice cortes lo ms delgado

posible del himenio, agregue


agua y observar
plectnquima con ascas y
ascosporas.

Ascocarpo o Ascoma de Morchella sp. Observe el estpite, apotecio en


forma de cerebro y a la derecha el himenio con ascas y ascosporas.

Dra. Mara Sol Robledo y MonterrubioPgina 26


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Ascocarpo o Ascoma de Helvella sp.


Observe el estpite, apotecio en forma de silla de montar, himenio,
ascas y ascosporas.
Preparacin de Basidioma o Basidiocarpo de Champn o
Seta
Tome el champin (Agaricus bisporus) o la seta (Pleurotus
ostreatus) y con una navaja de rasurar nueva realice cortes lo ms
delgado posible del pleo y observar pseudoparnquima, del estpite
para ver el prosnquima y en el himenio (laminillas) localice las
basidiosporas y los basidios.

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Manual de Prcticas de Biologa de Hongos

Corte longitudinal de basidioma o basidiocarpo de champin (Agaricus


bisporus)

Preparacin de Huitlacoche (Ustilago maydis)


Tome un poco de la masa negra de esporas del huitlacoche, depostela
sobre el portaobjetos y agregue un poco de agua, coloque el
cubreobjeto y observe en el microscopio ptico a diferentes aumentos.
Observe las esporas (teliosporas).

Teliosporas de Ustilago maydis (huitlacoche)

RESULTADOS

Dra. Mara Sol Robledo y MonterrubioPgina 28


Manual de Prcticas de Biologa de Hongos

1. Elabore esquemas de
todas las observaciones
realizadas, indicando el
nombre de las estructuras
identificadas y clasificacin de
los organismos,as como
tambin si es fase somtica o
talo, fase reproductora
asexual o sexual. .

CUESTIONARIO:
1. Con base en los resultados obtenidos su hiptesis fue aceptada? o
rechazada y por qu?
2. Qu importancia tiene la morfologa de los hongos?
3. Qu ventajas tiene la reproduccin asexual y sexual?
4. Define holocrpico y eucrpico.
5. Qu es el talo quitrdico o quitridial?
6. Complete el siguiente cuadro comparativo.

NOMBRE DE LA REPRODUCCI INFORMACI PRODUC PHYLU


ESPORA N N TO DE M
GENTICA
ZOOSPORA

ESPORANGIOSP
ORA

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CONIDIOSPORA

ZIGOSPORA

ASCOSPORA

BASIDIOSPORA

BIBLIOGRAFA

FUNGOIDES I: MOHOS MUSCILAGINOSOS PHYLUM


DICTIOSTELIOMYCOTA, MIXOMYCOTA Y
PLASMODIOPHOROMYCOTA

INTRODUCCIN

Los mohos muscilaginosos son aquellos que presentan una fase


somtica fagotrfica, es decir se nutre por ingestin de bacterias,
esporas y polen entre otros; carece de pared celular y tiene

Dra. Mara Sol Robledo y MonterrubioPgina 30


Manual de Prcticas de Biologa de Hongos

desplazamiento por medio de pseudpodos, por tanto se considera de


tipo ameboidal, es muy diversa ya que puede ser unicelular y
uninucleada llamada mixamiba, unicelular multinucleada el plasmodio
y la agregacin de mixamibas formando un sinsicio llamado
pseudoplasmodio. Una vez que el talo ha terminado de alimentarse,
se transforma totalmente en la estructura reproductora a este tipo de
talo se le llama holocrpico.

La fase reproductora es muy diversa, en el caso de los


Dictiosteliomycota el pseudoplasmodio se transforma en un sorocarpo,
que generalmente es pedicelado, puede ser ramificado o simple; en los
Mixomycota la variedad es an mayor, las esporas se pueden originar
exgenamente en estructuras columnares como en Ceratiomyxa sp. o
endgenas en el interior de esporangios pedicelados o ssiles, que van a
estar cubiertos por una pared llamada peridio y que es segregada por
las clulas del plasmodio. La clasificacin del Phylum Mixomycota se
basa en el tipo de esporangio y plasmodio. Los esporangios ssiles son
aquellos que no tienen pedicelo y hay dos tipos principales, el etalio
que es globoso, con peridio persistente, pseudocapilico y esporas claras
su representante es Lycogala sp., el plasmodiocarpo de colores
brillantes anaranjados, rojos o amarillos que tiene una forma de
plasmodio pero con peridio, capilicio abundante y brillante y tambin las
esporas se presenta en Hemitrichia serpula.

Los esporangios pedicelados tambin son muy variados, presentan una


base llamada hipotalo, un pedicelo y el esporangio constituido por un
peridio que puede ser persistente o evanescente, unas estructuras
filamentosas escasas, cortas y poco o no ramificadas llamadas
pseudocapilicio y esporas de colores claros; cuando presentan
acumulaciones de Carbonato de Calcio se observan blancos, pero en
realidad las esporas y el esporangio son obscuros, casi negros esto es
caracterstico en Physarum sp., si el capilicio es abundante ornamentado
de colores brillantes y con peridio persistente parte es Arcyria sp. y si
el capilicio es escaso y poco ramificado, el esporangio tiene una
columnella, el gnero es Stemonitis. Son los representantes ms
comunes en el Phylum Mixomycota.

El Phylum Plasmodiophoromycota se caracteriza por su hbitat ya que


son parsitos obligados y endobiticos en plantas, provocando con ello
cnceres y malformaciones en las races, otros sntomas son la

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Manual de Prcticas de Biologa de Hongos

hipertrofia (crecimiento excesivo celular) y la hiperplasia (multiplicacin


excesiva de clulas), dentro de esas grandes clulas se desarrollan
plasmodios endobiticos o esporangios de resistencia. En esta prctica
observars la diversidad de los representantes de estos mohos
muscilaginosos.

OBJETIVOS

1) Identificar las fases somticas y reproductoras de los fungoides


con base en observaciones micro y macroscpicas de ejemplares
representativos.
2) Investigar la importancia que tienen los diferentes Phylum de
fungoides para el hombre y la ciencia.

MATERIAL

Ejemplares herborizados de Myxomycetes, plasmodio en medio de


cultivo, preparaciones fijas, microscopio estereoscpico, microscopio
ptico, franela, papel sanitario, papel seda, aceite de cedro.

DESARROLLO

MORFOLOGA EXTERNA (observaciones macroscpicas)

A) Con el microscopio estereoscpico observe los ejemplares que le


proporcione la profesora, identifique sus partes y realice
esquemas.

PHYLUM MIXOMYCOTA

ORDEN CERATOMYXALES

1. Ceratomyxa sp. Estructuras columnares y esporas exgenas.

Dra. Mara Sol Robledo y MonterrubioPgina 32


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ORDEN
PHYSARALES.

1. Plasmodio en caja de Petri de Physarum en caja de Petri.


Observe las venas formadas por las corrientes de citoplasma.

2. Physarum sp.
Hipotalo, pedicelo,
esporangio, capilicio
escaso y poco
ramificado, esporas de
color obscuro, peridio con
carbonato de calcio (blanquecino).

Dra. Mara Sol Robledo y MonterrubioPgina 33


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ORDEN LICEALES.

3. Lycogala sp. Etalios (globosos y ssiles), peridio persistente,


pseudocapilicio y esporas caf claro.

4. Tubifera ferruginosa. Pseudoetalios (globosos pequeos y con


un pedicelo) peridio persistente, esporas claras.

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ORDEN STEMONITALES

5. Stemonitis sp. Esporangios: peridio evanescente, capilicio escaso


y obscuro, columella, esporas obscuras; pedicelo, hipotalo.

ORDEN

TRICHIALES

6. Arcyria sp. Esporangios: peridio evanescente partes y


persistente parte, capilicio abundante, ornamentado de colores
brillantes, esporas claras; pedicelo, hipotalo.

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7. Hemitrichia sp. Plasmodiocarpo (ssil y en forma de plasmodio),


peridio persistente, capilicio abundante, ornamentado y brillante,
esporas claras.

MORFOLOGA INTERNA (observaciones microscpicas)

B) Con el microscopio ptico tome las preparaciones que le


proporcione la profesora, limpilas con papel sanitario, obsrvelas,
identifique sus partes y realice esquemas.

PHYLUM MIXOMYCOTA

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Manual de Prcticas de Biologa de Hongos

1. Ceratiomyxa sp. Estructuras columnares, esporas exgenas, pedicelo


de las esporas.

2. Plasmodio de Physarum sp. Citoplasma, ncleos, membrana.

3. Esclerocio de Physarum
sp. Citoplasma,
ncleos, membrana y
pared de celulosa
(macroquistes).

4. Stemonitis sp.
Esporangios con capilicio, columnella, esporas, pedicelo, hipotalo;
pedicelo, hipotalo.

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Manual de Prcticas de Biologa de Hongos

5. Dictydium sp. Esporangios con capilicio,


esporas; pedicelo, hipotalo.

6.

Fuligo sp. Corte de pseudoetalio, esporas, peridio, pseudocapilicio,


esporas.
7. Arcyria sp. Esporangio: capilicio abundante, ornamentado y de
colores brillantes, esporas, peridio evanescente partes y
persistente parte; pedicelo e hipotalo.

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Manual de Prcticas de Biologa de Hongos

PHYLUM PLASMODIOPHOROMYCOTA

8. Plasmodiophora brassicae. Plasmodios endobiticos, esporangios de


resistencia endobiticos, clulas vegetales hospederas con
hipertrofia (crecimiento celular excesivo), hiperplasia (divisin
celular excesiva).

CUESTIONARIO

1. Investiga los medios de cultivo y tcnicas adecuadas para


aislar Dictiostelyomycota o Acrasiomycota, Mixomycota y
Plasmodiophoromycota.
2. Elabora un cuadro comparativo entre los Phylum de
fungoides: Dictiostelyomycota, Acrasyomycota, Myxomycota
y Plasmodiophoromycota, que comprenda hbitat,

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alimentacin, tipo de talo, fase reproductora, gametas,


estructuras de resistencia, importancia, ejemplos.
3. Elabora un esquema del ciclo de vida de Dictiosteliomycota,
Mixomycota y de Plasmodiophoromycota.
4. Cul es la importancia de cada Phylum con ejemplos.

MOHOS ACUTICOS

FUNGOIDES II: PHYLUM OOMYCOTA

FUNGALES I. PHYLUM QUITRIDIOMYCOTA.

INTRODUCCIN

Los hongos acuticos del Phylum Oomycota se consideran fungoides, es


decir falsos hongos, ya que presentan sus paredes de celulosa y

Dra. Mara Sol Robledo y MonterrubioPgina 40


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glicano, por lo que se clasifican dentro del Reino Protoctista de acuerdo


con Whitaker; sin embargo, al observar su fase somtica es muy similar
a los hongos verdaderos, ya que se encuentra constituida por hifas
cenocticas multinucleadas diploides a diferencia de los fungales que son
haploides tienen constituida la pared celular de quitina. Antiguamente se
consideraban en el Reino Fungi, con el paso del tiempo se ubicaron en el
Reino Protoctista y actualmente se consideran en el Reino Chromista de
Cavalier. El trmino Oomycota significa hongo huevo debido a que en
su reproduccin sexual presenta un gametangio femenino esfrico
donde ocurre la meiosis para originar clulas globosas haploides
llamadas oosferas que tendrn que ser fecundadas por ncleos de los
anterozoides, que al llevar a cabo la fecundacin y originarn dentro del
oogonio de una a cuatro esporas diploides llamadas oosferas (cigotos).
Su reproduccin asexual es caracterstica por la formacin de
zoosporangios (hbitat acutico) o esporangios (hbitat terrestre) que
originaran esporas mviles llamadas zoosporas, las cuales son
biflageladas, presentando un flagelo tipo ltigo (amastigonemado)
posterior y un flagelo ms corto tipo plumoso (mastigonemado) en
posicin anterior. Son saprobios, degradadores en ambientes
dulceacucolas y los hay parsitos de insectos, plantas y animales
acuticos como peces y larvas de insectos.

El Phytlum Quitridiomycota ya pertenece a los verdaderos hongos, se


encuentran en la base del Reino Fungi. Su talo es muy variado, en su
mayora es quitridial, formado por una parte globosa (centro) y rizoides
o si es abundante recibe el nombre rizomicelio; si hay varios centros en
considerado policntrico, en ocasiones es unicelular y pueden formar
hifas comnmente cenocticas, sus paredes celulares son de quitina,
algunos son formadores de micelio. Origina esporas asexuales
(zoosporas) uniflageladas, con un flagelo tipo ltigo (amastigonemado)
en posicin posterior; la ultraestructura de estas zoosporas, que vara
sobre todo en cuanto a posicin de las mitocondrias son la base de la
clasificacin para los rdenes. Se reproducen sexualmente por medio de
contacto gamentangial: isogamia, anisogamia y oogamia; originando
oosporas como producto de la fecundacin. Solo en Allomyces presenta
en su ciclo de vida alternancia de fases, en donde alterna una fase
sexual haploide formadora de gametas llamada gametotalo y una
diploide asexual formadora de esporas llamada esporotalo El hbitat es
variado, los hay dulceacucolas, marinos, parsitos de plantas y

Dra. Mara Sol Robledo y MonterrubioPgina 41


Manual de Prcticas de Biologa de Hongos

animales tanto vertebrados como invertebrados, degradadores de


quitina y queratina.

OBJETIVOS

1) Identificar las fases somticas y reproductoras, sexuales y


asexuales de hongos acuticos (fungoides y fungales).

2) Distinguir las caractersticas principales del Phylum OOmycota y


Chitridiomycota por medio de observaciones macro y miscroscpicas
de ejemplares representativos.

3) Aislar hongos acuticos saprobios por medio de diferentes


carnadas.

4) Investigar la importancia evolutiva, filogentica y econmica de


este grupo de organismos.

MATERIAL

Muestras de agua estancada, frascos limpios hervidos, moscas muertas,


granos, gasa, hilo, plumn indeleble, cubre y portaobjetos, colorantes,
agujas de diseccin, pinzas, caja de Petri, preparaciones fijas,
microscopios pticos, estereoscpicos, franela.

DESARROLLO

I. AISLAMIENTO DE HONGOS ACUTICOS

Realizar de una semana a quince das antes del inicio de la prctica.

a. Lave dos frascos de vidrio medianos tipo Gerber y desinfctelos con


alcohol, posteriormente colecte dos muestras diferentes de agua
estancada de un estanque, pecera, charco, etc. No las mezcle y
depostelas en los frascos desinfectados.
b. Agregue solo un tipo de las siguientes carnadas a los frascos con
agua recolectada: moscas muertas u otros insectos, semillas,

Dra. Mara Sol Robledo y MonterrubioPgina 42


Manual de Prcticas de Biologa de Hongos

cabellos, uas, pequeos pedazos de papel celofn. No mezcle las


muestras de agua, ni tampoco carnadas.
c. Cubra los frascos con gasa y un hilo, no tape hermticamente
porque no obtendr desarrollo alguno de estos organismos.
d. Etiquete cada frasco y con el plumn indeleble anote los siguientes
datos: Fecha de colecta del agua, lugar, fecha de inoculacin de
carnada y tipo. Nombre del equipo.
e. Depostelos en el saln y observe cada tercer da las carnadas, en
cuanto empiece a aparecer una masa algodonosa alrededor de ellas
significar que el hongo se ha desarrollado y est listo para ser
observado con el microscopio.
f. Cuidadosamente tome con unas pinzas la carnada con algodoncillo
y depostela en una caja de Petri de vidrio con un poco de agua de
la muestra.
g. Obsrvelo con el microscopio estereoscpico y con una aguja de
diseccin retire un poco de ese algodoncillo colquelo en un
portaobjeto, agregue una gota de agua y si lo requiere azul de
algodn, cbrala y observe en el microscopio ptico, tratando de
identificar fases somticas y reproductoras (lo ms comn es
encontrar micelio cenoctico, zoosporangios, oogonios, anteridios y
oosporas de los gneros Saprolegnia, Achlya, as como tambin
talos quitrdicos).
h. Tome fotografas y elabore esquemas de lo observado con los
nombres de sus respectivas estructuras.

Tambin puede ir a algn acuario y adquirir algn pez muerto o enfermo


que presente alrededor de su cuerpo gran cantidad de algodn o pelusa
y realizar lo mismo a partir del inciso f.

II. PHYLUM OOMYCOTA (FUNGOIDES)

ORDEN SAPROLEGNIALES (MOHOS ACUTICOS)

1. Saprolegnia fase asexual. Micelio cenoctico (fase somtica),


zoosporangios (fase asexual).

Dra. Mara Sol Robledo y MonterrubioPgina 43


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2. Saprolegnia fase
sexual. Micelio
cenoctico
(fase
somtica),
oogonios
en
diferentes
estados de

maduracin, oosferas,
anteridios, oosporas (fase
sexual).

3. Achlya sp. Micelio cenoctico (fase somtica), oogonios con


oosferas y oosporas, anteridios (fase sexual).

ORDEN PERONOSPORALES (MOHOS


TERRESTRES FITOPATGENOS)

1. Albugo candida. Roya blanca de


crucferas. Esporangiforo, esporangios
uniesporados formando cadenas, haustorios.

Dra. Mara Sol Robledo y MonterrubioPgina 44


Manual de Prcticas de Biologa de Hongos

2. Plasmopara vitcola. Mildi o


Cenicilla de la Vid. Hacia afuera de la
epidermis de la hoja hay
esporangiforos ramificados con
esporangios. Observe los haustorios
dentro del parnquima.

Dra. Mara Sol Robledo y MonterrubioPgina 45


Manual de Prcticas de Biologa de Hongos

3. Peronospora.
Moho azul del
tabaco. Dentro del
hospedero, observe
haustorios, hifas
cenocticas; hacia
afuera de la
epidermis
esporangiforos
ramificados,
esporangiolos.

Dra. Mara Sol Robledo y MonterrubioPgina 46


Manual de Prcticas de Biologa de Hongos

III. MORFOLOGA EXTERNA (observaciones macroscpicas)

EJEMPLARES HERBORIZADOS ENFERMOS POR OOMYCOTA

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Manual de Prcticas de Biologa de Hongos

Tome cada ejemplar proporcionado, obsrvelo detenidamente al


microscopio estereoscpico tomando principal atencin en los sntomas
presentados por la planta, signo, hospedera, patgeno y enfermedad
ocasionada; tome una fotografa o elabore un esquema y complete el
siguiente cuadro comparativo.

Elabore esquemas de todo lo observado en la prctica.

IV. PHYLUM CHITRIDIOMYCOTA (FUNGALES ACUTICOS)

Dra. Mara Sol Robledo y MonterrubioPgina 48


Manual de Prcticas de Biologa de Hongos

1. Synchitrium endobioticum. Sarna verrucosa de la papa. Observe la


hiperplasia, hipertrofia, en el parnquima de la hospedera; dentro de las
clulas parenquimatosas se encuentran chitridios, esporangios y esporas
de resistencia (endobiticos).

2. Allomyces. Hongo saprobio


nico con alternancia de fases.

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Manual de Prcticas de Biologa de Hongos

Gametotalo: gametangios apicales, el masculino piriforme est en el


pice; debajo de l de mayor tamao y de elongado a ovoide se
encuentra el gametangio femenino; observe el micelio cenoctico.

3. Allomyces esporotalo. Hifas cenocticas,


esporangiforos, esporangios de dos tipos, los
claros con papilas son zooporangios
(mitosporangios), los obscuros son esporangios
de resistencia (meiosporangios).

IV. MORFOLOGA EXTERNA (observaciones macroscpicas)

EJEMPLARES HERBORIZADOS ENFERMOS POR OOMYCOTA

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Manual de Prcticas de Biologa de Hongos

Tome cada ejemplar proporcionado, obsrvelo detenidamente al

microscopio estereoscpico tomando principal atencin en los sntomas


presentados por la planta, signo, hospedera, patgeno y enfermedad
ocasionada; tome una fotografa o elabore un esquema y complete el
siguiente cuadro comparativo.

Elabore esquemas de todo lo observado en la prctica.

GLOSARIO

Dra. Mara Sol Robledo y MonterrubioPgina 51


Manual de Prcticas de Biologa de Hongos

Agente causal, anteridio, aplantico, clamidospora, contancto


gametangial, copulacin gametangial, diplantico, enfermedad, epifitia,
eucrpico, Fitopatologa, heterotlico, homatlico, hospedero, inculo,
monoplantico, Oogamia, oogonio, oosfera, oospora, patgeno,
reproduccin heterogametngica, signo, sntoma, zoospora.

CUESTIONARIO

1. Investiga las tcnicas bsicas para el aislamiento de Oomycetos


fitopatgenos. Todos se pueden aislar en medio de cultivo?

2. Elabora un cuadro comparativo entre Oomycota y Chitridiomycota que


comprenda hbitat, talo, reproduccin asexual, esporas asexuales, tipo
de reproduccin sexual, gametas, esporas sexuales, ejemplos de
importancia.

3. Elabora otro cuadro comparativo entre los rdenes de Oomycota,


Saprolegniales y Peronosporales en cuanto a hbitat, estructuras
somticas, reproductoras asexuales y sexuales, sexualidad. Da dos
ejemplos de importancia para cada uno de estos rdenes.

4. Esquematiza las zoosporas de los rdenes de Chitridiomycota y seala


sus estructuras, con base en esto explica cules son las principales
diferencias entre cada orden?

5. Menciona al menos 6 ejemplos de los dos Phylum a nivel de especie


que sean importantes para el hombre, indicando el por qu.

6. Esquematiza el ciclo de vida de Saprolegnia, Phytophtora, Allomyces,


Chytriomyces y Monoblepharis. Indica las estructuras somticas,
sexuales, asexuales, n, 2n, mitosis, plasmogamia, cariogamia y meiosis.
Qu hongos son holocrpicos y eucrpicos, cules son homotlicos y
heterotlicos, monoplanticos o diplanticos?

7. Hay especies que pueden germinar directamente los esporangios o en


zoosporas. Qu factores ambientales determinan esto?

MOHOS TERRESTRES INFERIORES

Dra. Mara Sol Robledo y MonterrubioPgina 52


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FUNGALES II: PHYLUM ZIGOMYCOTA

PHYLUM GLOMEROMYCOTA

INTRODUCCIN

Los hongos terrestres inferiores, corresponden a dos Phylum, entre ellos


se encuentra el Zigomycota que se caracteriza por presentar micelio
cenoctico, reproduccin asexual por medio de esporangiosporas y la
sexual por cigotos llamados zigosporas y que son endgenas.

Son conocidos con el nombre de hongos amantes del azcar, ya que


son potentes degradadores de azcares y almidones, presentan un
micelio cenoctico muy abundante, e hifas especializadas como rizoides,
esporangiforos, estolones, apresorios entre otros.

Su reproduccin asexual se caracteriza por la presencia de esporas


endgenas llamadas esporangiosporas, que se originan al interior de una
estructura en forma de saco llamada esporangio, el cual puede ser de
tres tipos en cuanto a nmero de esporas que origina y la forma, entre
ellos se encuentran el esporangio multiesporado (con cientos de
esporas), el merosporangio (esporangio cilndrico) y el esporangiolo (con
una a cuatro esporangiosporas).

Su reproduccin sexual es por medio de copulacin gametangial, los hay


homotlicos y heterotlicos, como producto final de la fecundacin
originan un cigoto llamado zigospora, la cual es endgena y se origina
dentro de un esporangio de pared muy gruesa con ornamentaciones
diversas llamado zigosporangio.

Los hay de vida libre, como hongos del suelo, parsitos de animales de
plantas y el hombre. En un substrato en descomposicin son especies
pioneras en la sucesin ecolgica fngica.

Actualmente se conocen diez rdenes, de los cuales los ms comunes y


abundantes y que vamos a observar en el laboratorio son: Mucorales,
Zoopagales y Entomophthorales.

El Phylum Glomeromycota se encontraba anteriormente clasificado


dentro de Zigomycota como orden Glomales, estudios de ADN han

Dra. Mara Sol Robledo y MonterrubioPgina 53


Manual de Prcticas de Biologa de Hongos

mostrado que son independientes y actualmente ya se han separado


como un Phylum aparte, considerando que estn emparentados con
Ascomycota y Basidiomycota, de los que se separaron hace 600 a 620
millones de aos. Su registro fsil data del Ordovcico, hace 460
millones de aos aproximadamente.

Se caracterizan por ser mutualistas obligados de plantas terrestres


formando micorrizas tipo endomicorriza y vesculo-arbusculares (VA), se
han encontrado en los registros fsiles ms antiguos de las plantas
vasculares; forman micelio cenoctico y esporas asexuales muy grandes
multinucleadas, no se ha observado reproduccin sexual. Se conocen
cuatro rdenes: Archaeosporales, Diversisporales, Paraglomerales y
Glomerales.

OBJETIVOS

1) Identificar las fases somticas y reproductoras, sexuales y


asexuales del Phylum Zigomycota.

2) Distinguir las caractersticas principales del Phylum Zigomycota y


Glomeromycota por medio de observaciones miscroscpicas de
ejemplares representativos.

3) Caracterizar algunas familias del Orden Mucorales con base en


observaciones de la morfologa de cepas tpicas.

4) Investigar la importancia evolutiva, filogentica y econmica de


este grupo de organismos.

MATERIAL

Muestras de vegetales en descomposicin (fresa, papa, camote, etc.)


cultivos puros de diferentes gneros (Rhizopus, Mucor,
Sincephallastrum, Thamnidium y Cunninghamella), cubre y
portaobjetos, colorantes, agujas de diseccin, pinzas, caja de Petri,
preparaciones fijas, microscopios pticos, estereoscpicos, papel seda,
franela.

DESARROLLO

Dra. Mara Sol Robledo y MonterrubioPgina 54


Manual de Prcticas de Biologa de Hongos

I. PHYLUM ZIGOMYCOTA ORDEN MUCORALES

a) Observe en el microscopio estereoscpico los cultivos puros y de cada


uno tome especial atencin en las
caractersticas de la colonia, color,
aspecto, etc.

b) Elabore una preparacin de cada cultivo


que se le proporcionado y de los
materiales biolgicos contaminados y
agregue una gota de lactoglicerol o
agua. Tome las precauciones debidas de
asepsia para no contaminar los cultivos.

c) Elabore esquemas de las cepas


observadas, sealando sus estructuras
somticas, reproductoras sexuales y
asexuales:

1. Mucor sp. Observe la fase


somtica formada por micelio
cenoctico, rizoides, estolones; fase
reproductora asexual constituida por
grandes esporangios multiesporados
pared del esporangio, columella y
esporangiosporas.

Dra. Mara Sol Robledo y MonterrubioPgina 55


Manual de Prcticas de Biologa de Hongos

2. Mucor (+) y (-). Con el microscopio


estereoscpico observe el micelio abundante,
las colonias blancas y en medio una lnea
obscura que es donde se forman los
zigosporangios cuando se encuentran las
colonias de Mucor + y Mucor - . En el
microscopio compuesto, observe la fase
somtica: micelio cenoctico abundante,
rizoides, estolones; fase reproductora
asexual: esporangios, pared del esporangio,
esporangiosporas, y

columnela. Fase
reproductora sexual:
copulacin gametangial,
gametangios, clulas
suspensoras, zigforos y
Zigosporas.

Dra. Mara Sol Robledo y MonterrubioPgina 56


Manual de Prcticas de Biologa de Hongos

3. Rhizopus
nigricans
moho negro
del pan.
Observe las

colonias en el microscopio estereoscpico y posteriormente la


preparacin con el microscopio ptico.
Identifique fase somtica: micelio cenoctico,
rizoides, estolones, esporangiforos,
esporangios, pared del esporangio,
columnella, esporangiosporas.

Dra. Mara Sol Robledo y MonterrubioPgina 57


Manual de Prcticas de Biologa de Hongos

4. Syncephalastrum sp.
Micelio cenoctico,
esporangiforo, vescula,

esporangios cilndricos que naces


alrededor de la vescula,
esporangiosporas.

5. Thamnidium sp. Micelio cenoctico, esporangiforo, esporangiolos


triesporados.

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6. Cunninghamella. Micelio cenoctico, esporangiforo, vescula,


esporangios uniesporados alrededor de la vescula.

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7. Zygorrhynchus. Micelio cenoctico, esporangiforos, fase sexual,


copulacin gametangial, clulas suspensoras, zigforos, zigosporangios
ornamentados y zigospora.

II. PHYLUM ZIGOMYCOTA ORDEN ENTOMOPHTORALES

8. Entomophtora muscae. Preparacin fija. Observe el exoesqueleto


del insecto roto por los esporangiforos abudantes y cortos que portan
los esporangiolos uniesporados llamados por otros autores conidios.

III. PHYLUM ZIGOMYCOTA ORDEN KICKXELLALES

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9. Linderina sp. Hifas cenocticas o septadas, reproduccin asexual:


esporangios cilndricos (merosporangios) uniesporados en grupos sobre
esporocladios (rama frtil septada o no).

IV. PHYLUM GLOMEROMYCOTA ORDEN GLOMERALES

10. Glomus sp. en raz de Rubus sp. (zarzamora). Preparacin fija.


Observe la hifas entre el parnquima de la raz, los arbsculos dentro de
las clulas parenquimatosas y las vesculas, hacia afuera esporas
grandes.

GLOSARIO

Aplanospora,
zigospora,

zigosporangio, copulacin gametangial, homotlico, heterotlico,


merosporangio, esporangiolo, anemocoria, fototropismo, clamidospora,

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azigospora, mucormicosis, artrospora, progametangio, arbsculo,


vescula.

CUESTIONARIO

1. Cules son las principales caractersticas de los Zigomycota y


Glomeromycota?

2. Elabora un cuadro comparativo entre Zigomycota y Glomeromycota


que comprenda hbitat, talo, reproduccin asexual, esporas asexuales,
tipo de reproduccin sexual, gametas, esporas sexuales, ejemplos de
importancia.

3. Elabora otro cuadro comparativo entre los siguientes rdenes de


Zigomycota: Mucorales, Entomophtorales y Zoopagales, en cuanto a
hbitat, estructuras somticas, reproductoras asexuales y sexuales,
sexualidad. Da dos ejemplos de importancia para cada uno de estos
rdenes.

4. Menciona los medios de cultivos y explica las tcnicas bsicas para


aislar Zigomycota.

5. Qu importancia tienen los Glomeromycota para la evolucin vegetal?


Explica y fundamenta.

6. Esquematiza el ciclo de vida de Rhizopus Indica las estructuras


somticas, sexuales, asexuales, n, 2n, mitosis, plasmogamia,
cariogamia y meiosis. Qu hongos son heterotlicos y homotlicos.

7. Menciona 10 especies de importancia de estos dos Phyla indicando el


por qu.

HONGOS IMPERFECTOS O ANAMORFOS

FUNGALES III: ANTES PHYLUM DEUTEROMYCOTA

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INTRODUCCIN

Este grupo antes se consideraba como Phylum Deuteromycota,


actualmente se conocen como las fases asexuales de los Phyla
Ascomycota y Basidiomycota; varios de ellos no se conocen an su
reproduccin sexual.

Presentan micelio cenoctico y las levaduras con talo unicelular y


pseudomicelial. Su reproduccin sexual es por medio de conidiosporas,
gemacin y biparticin. Las conidiosporas son muy diversas,
unicelulares (amerosporas), pluricelulares: septadas transversalmente
(fragmosporas); septadas transversalmente y longitudinalmente
(dictiosporas); bicelulares (didimosporas); las hay de colores variados,
verdes, amarillas, negras, cafs, etc.; y la clasificacin se basa en la
agrupacin de sus conidios y en los tipos de talo. La clase Blastomycetes
corresponde a las levaduras, la Clase Hiphomycetes que son hongos
filamentosos, miceliales, con conidiosporas y conidiforos expuestos
libres, o fusionados en sinemas o esporodoquios (Orden Moniliales) y
Coelomycetes organismos que presentan sus conidiforos cubiertos ya
sea por plectnquima formando una botella microscpica (picnidio
Orden Sphaeropsidales--) o cubiertos por la epidermis de la planta
hospedera (acrvulo Orden Melanconiales). Esta clasificacin ya no es
aceptada, sin embargo existen muchas obras taxonmicas y de claves
basadas en esta, de tal manera que encontrars inclusive monografas
de gneros y especies como Fusarium, Penicillium y Aspergillus
considerados anamorfos.

Estos gneros asexuales, muchos de ellos no presentan o no se conoce


su reproduccin sexual y en otros ya ha sido estudiada, por lo que la
sinonimia para las especies se ha complicado de manera significativa, de
tal forma, una especie se conoce con el gnero de la fase asexual (p. ej.
Aspergillus) y con el gnero de la fase sexual (Talaromyces).

Son saprobios y parsitos de plantas y animales, incluyendo el hombre


ocasionando enfermedades en la piel y en las mucosas as como
tambin en rganos internos. Otros tienen importancia industrial ya que
son productores de antibiticos, cidos orgnicos y bebidas
fermentadas.

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OBJETIVOS

1) Identificar las fases somticas y reproductoras asexuales de


hongos anamorfos.

2) Distinguir las principales caractersticas de las clases y rdenes del


Phylum Deuteromycota con base en observaciones microscpicas de
gneros representativos.

3) Investigar la importancia evolutiva, filogentica y econmica de


este grupo de organismos.

MATERIAL

Cultivos obtenidos en la prctica de aislamiento y purificacin de


hongos, cultivos puros de diferentes gneros (Rhodotorula, Penicillium,
Aspergillus, Trichothecium, Fusarium, Pestalotia, Alternaria,
Doratomyces, Phomopsis, cubre y portaobjetos, colorantes, agujas de
diseccin, pinzas, caja de Petri, preparaciones fijas, microscopios
pticos, estereoscpicos, papel seda, franela, claves dicotmicas de las
Familias del orden Mucorales.

DESARROLLO

a) Observe en el microscopio estereoscpico los cultivos puros y de cada


uno tome especial atencin en las caractersticas de la colonia, color,
aspecto, etc.

b) Elabore una preparacin de cada cultivo que se le proporcionado y de


los materiales biolgicos contaminados y agregue una gota de
lactoglicerol o agua. Tome las precauciones debidas de asepsia para no
contaminar los cultivos.

c) Elabore esquemas de las cepas observadas, sealando sus


estructuras somticas, reproductoras sexuales y asexuales:

I. CLASE BLASTOMYCETES ORDEN CRYPTOCOCCALES

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1. Rhodotorula sp. Observe las colonias rojizas o anaranjadas como


gotas de crema y en el microscopio ptico la fase somtica unicelular y
pseudomicelial, la reproduccin asexual por gemacin y fisin binaria.

II. CLASE BLASTOMYCETES ORDEN SPOROBOLOMYCETALES

2. Sporobolomyces sp. Observe las colonias rojizas o anaranjadas


como gotas de crema y en el microscopio ptico la fase somtica
unicelular y pseudomicelial, la reproduccin asexual por gemacin y
fisin binaria, produce esporas exgenas en la punta de una
protuberancia de la clula y las descarga con fuerza.

III.CLASE HIPHOMYCETES ORDEN MONILIALES

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3. Penicillium sp. Colonias


aterciopeladas, con diferentes tonos
de verde. Micelio septado,
conidiforos libres septados, simples o
ramificados, uniseriados con clula
conidigena o
filide; o

biseriados con mtula y filide,


conidiosporas unicelulares
(amerosporas) en cadena
(catenulada).

4. Aspergillus sp. Colonias


aterciopeladas, con diferentes tonos
de verde, negro, blanquecino.
Micelio septado, conidiforos libres
septados, simples o ramificados,
vescula, uniseriado con clula
conidigena o filide; o biseriado con mtula y filide, conidiosporas
unicelulares (amerosporas) en cadena (catenulada).

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5. Geotrichum sp. Colonias blancas.


Micelio septado, talosporas de tipo
artrosporas.

6.

Trichotecium sp. Colonias rosadas. Micelio septado, conidiforos


simples, conidiosporas bicelulares (didimosporas).

7. Fusarium sp. Colonias rosadas a blanquecinas, micelio septado,


conidiosporas de dos tipos: unicelulares (amerosporas) llamadas
microconidios, y conidios septados transversalmente (fragmosporas) en
forma de media luna llamados macroconidios.

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8. Pestalotia sp. Colonias


obscuras, micelio septado,
conidiosporas pluricelulares,
septadas transversalmente
(fragmosporas), con dos o tres
apndices en ambos extremos.

9. Alternaria sp. Colonia caf a


negro, micelio septado de color caf,
conidiforos septados, conidiosporas
pluricelulares, septadas transversal y
longitudinalmente (dictiosporas).

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10. Stemphyllium sp. Colonia caf a negro, micelio septado de color


caf, conidiforos septados, conidiosporas pluricelulares globosas, cafs,
septadas transversal y longitudinalmente (dictiosporas).

11.

Doratomyces sp. Colonias obscuras, micelio septado


conidiforos fusionados formando
sinemas , amerosporas.

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IV. CLASE HIPHOMYCETES


ORDEN MELANCONIALES

12. Colletotrichum
lindemuthianum. Observe las
amerosporas, conidiforos agrupados y
cubiertos por la epidermis de la hospedera
formando acrvulos.

13. Venturia inaequalis (sarna del manzano). Observe las


amerosporas, conidiforos agrupados y cubiertos por la epidermis de la
hospedera formando acrvulos.

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V.CLASE COELOMYCETES ORDEN SPHAEROPSIDALES

14. Phoma o Phomopsis sp. Colonias obscuras, picnidios formados


por plectnquima, una base ensanchada, un cuello y el ostiolo, en el
interior se encuentran los conidiforos septados con los conidios que son
amerosporas.

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GLOSARIO

Acrvulo, picnidio, sinema, esporodoquio, mtula, filide, blastospora,


vescula, baspeto, acrpeto, anamorfo, teleomorfo, esclerocio, mycelia
esterilia.

CUESTIONARIO

1. Investiga los gneros teleomorfos y clasificacin de cada ejemplar


observado en la prctica.

2. Por qu ya no se considera Deuteromycota como un Phylum?

3. Describe dos tipos de conidiognesis: Tlica y Blstica

4. Investiga la clasificacin que Saccardo propuso para las conidiosporas


y equematiza.

5. Explica brevemente y con un esquema el ciclo parasexual.

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6. Realiza un cuadro comparativo entre las Clases observadas que


comprenda talo, reproduccin asexual (conidiforos libres, sinemas,
esporodoquios, picnidios o acrvulos), tipos de conidiosporas y
ejemplos observados en la prctica.

7. Menciona diez especies de este Phylum con su importancia.

SUCESIN FNGICA EN UN SUBSTRATO EN DESCOMPOSICIN Y

EFECTO DE LA LONGITUD DE ONDA EN LA DISPERSIN DE


ESPORANGIOS DE Pilobolus sp.

INTRODUCCIN

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Los hongos saprobios, son aquellos que se desarrollan en materia


orgnica en descomposicin, tienen un papel muy importante como
degradadores, las enzimas que secretan favorecen su accin para
descomponer los diferentes compuestos que se encuentran en todos los
restos orgnicos, estas generalmente son hidrolasas, es decir necesitan
agua para poder actuar. El tipo de enzima que segregan al exterior y
otras estrategias fisiolgicas como el crecimiento y su esporulacin
determinan la sucesin ecolgica en las diferentes comunidades de los
hongos degradadores, de tal manera que los primeros compuestos que
son aprovechados por los hongos son molculas pequeas,
carbohidratos simples como azcares, una vez que estos son utilizados,
en el substrato quedan compuestos ms complejos como la celulosa y la
lignina que son degradados al final. De tal manera que en un substrato
como el estircol de un herbvoro al ser degradado, las especies
pioneras corresponden a los hongos amantes del azcar, los
Zigomycetes, los que tienen la capacidad de aprovechar estas molculas
aunado a su crecimiento rpido y abundante micelio, posteriormente
invaden el substrato hongos de crecimiento lento con micelio menos
abundante y con enzimas celulolticas capaces de degradar la celulosa y
convertirla en azcares, entre ellos se encuentran gneros del Phylum
Ascomycota y algunos Basidiomycota; al final se desarrollarn aquellos
capaces de degradar la lignina por presencia de enzimas lignolticas en
especies del Phylum Basidiomycota principalmente. El papel que juegan
los hongos en la degradacin de substratos en un bosque es
determinante para la incorporacin de compuestos que enriquecen el
suelo, de tal manera que las ramas, hojas, frutos, heces fecales de
animales y cadveres que se encuentran en el bosque, son incorporadas
al suelo por los hongos y las bacterias degradadoras, sin ellos se
acumularan de manera impresionante.

Uno de los hongos degradadores y pioneros en excrementos de


herbvoros es el gnero Pilobolus del Orden Mucorales, Phylum
Zigomycota, este hongo es llamado el can fngico, ya que su
anatoma y fisiologa se encuentran adaptados para ello. Recibe este
nombre ya que sus esporangios negros son disparados con fuerza al
ser dispersados y pegarse en las hojas de hierbas circundantes a los
excrementos, estas son ingeridas por herbvoros que posteriormente al
defecar, arrojarn en sus heces fecales esporangios de Pilobolus para
posteriormente germinar y degradar el substrato. El proceso de

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dispersin de esporangios de este gnero ha sido ampliamente


estudiado, ya que se ha demostrado que reacciona con la luz. Su
estructura con esporangiforos completamente hialinos y el anillo de
caroteno que presentan en su vescula subesporangial se relaciona
directamente con la reaccin a la luz.

En esta prctica observars la sucesin fngica en excremento de


caballo y la dispersin de esporangios de Pilobolus ante diferentes
longitudes de onda.

OBJETIVOS

1) Determinar la sucesin fngica en heces fecales de caballo en


descomposicin por medio de observaciones macroscpicas y
microscpicas de hongos que se vayan desarrollando.

2) Establecer el efecto que tienen diferentes longitudes de onda en la


dispersin de esporangios del hongo Pilobolus por medio de un
experimento.

HIPOTESIS

Esta ser realizada por los alumnos con base en investigaciones previas
sobre el tema, una para cada objetivo y comntela en el grupo.

MATERIAL

Caja de zapatos, bolsa negra gruesa de plstico, cutter, tijeras, nevaja,


regla, portaobjetos, masking tape, 2 micas tamao carta, sobres,
plumn indeleble, lpiz, papel celofn transparente, azul, verde, naranja
rojo y amarillo, guantes de ltex, estircol de caballo, atomizador, papel
milimtrico.

DISEO EXPERIMENTAL

1. Corte la bolsa de plstico negra del tamao necesario para que cubra
la completamente el interior de la caja de zapatos, dejando libre la zona
de la tapa, pegue perfectamente el plstico en la caja cuidando que no
quede ningn orificio para que no se vaya a humedecer la caja y se
rompa con las heces fecales.

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2. Posteriormente con las manos protegidas con los guantes distribuya


la muestra de heces fecales de caballo en toda la superficie de la caja
deber ser una capa de excremento aproximadamente 3 cm de altura.

3. En la tapa de la caja de zapatos realice orificios del tamao de un


portaobjeto, el nmero de orificios ser de acuerdo con los colores de
papel celofn, transparente, rojo, amarillo, azul, naranja, verde y negro
(plstico).

4. Corte de un tamao mayor a los orificios los papeles celofn


calculando 3 capas de cada uno para fijar el color por donde pasar la
luz, as como tambin plstico negro y varias tiras de mica transparente.

5. En cada orificio pegue con cinta masking en la parte superior de la


tapa de la caja de zapatos 3 capas de cada color elegido, el orden de los
colores ser al azar, de preferencia que no queden juntos los de
longitudes de onda semejantes. El masking no deber tapar los orificios.

6. Debajo de la tapa de la caja de zapatos en cada orificio coloque un


recorte de mica transparente.

7. Humedezca con el atomizar el excremento sin que se llegue a


inundar, esto lo realizar constantemente durante todo para evitar que
las heces fecales se sequen.

8. Coloque la tapa y realice una marca con la tapa y la base de la caja


para evitar que durante el experimento voltee la tapa y afecte sus
resultados.

9. Ubique la caja de zapatos ya con su tapa en un lugar cercano a la luz,


puede ser junto a una ventana.

10. Realice observaciones cada tercer da de su experimento, en cuanto


empiecen a aparecer en las micas unos pequeos puntos negros estos
son los esporangios de Pilobolus, lo cual indicar que la dispersin de
esporangios ha empezado. Retire dos veces por semana las micas del
experimento y las puede colocar en sobres para evitar que se caigan los
esporangios, tendr que marcar con un plumn indeleble el color y
fecha. Estos cambios los realizar hasta que haya terminado la
dispersin

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11. En el laboratorio en el microscopio estereoscpico realizarn conteos


de los esporangios adheridos en las micas, con ayuda del papel
milimtrico o una cuadrcula, contando cuatro cuadros por mica para
obtener un promedio por mica, color y da. Los datos se vaciarn en una
bitcora. En un tabla como se muestra a continuacin:

fecha lectura transpa negro azul rojo Amari verde naranj


rente -llo a
Dia 1
____ 2
3
4
5
Promedio
Dia 1
____ 2
3
4
5
Promedio

12. Cada vez que observe la aparicin de un hongo diferente, incluyendo


Pilobolus, tomar una muestra realizar una preparacin temporal con
una gota de agua y determine a qu Phylum pertenece, anotar en la
bitcora la fecha de aparicin y realizar esquemas de lo que observe y
tomar fotografas. As tendr resultados de la sucesin fngica.

13. Una vez terminado el experimento (duracin aproximada de un mes)


realizar grficas con los promedios obtenidos del no. de esporangios
por da. En el eje de las x la variable independiente que es el tiempo en
das y en el eje de las y el no. de esporangios, deber obtener el no. de
curvas correspondiente al no. de colores que us en una misma grfica.

14. Realizar otra grfica eligiendo los datos en donde se obtuvo mayor
no. de esporangios (igualando el tiempo p. ej. El da 10). En el eje de las
x ubicar las longitudes de onda que corresponde a cada color de
manera secuencial de menor a mayor, en el eje de las y graficar el no.
de esporangios obtenidos ese da para cada longitud de onda.

15. Tome fotografas de las tiras de mica de diferentes das por color.

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RESULTADOS

1. Sern las dos grficas para la dispersin de esporangios de Pilobolus


a travs del tiempo, y de acuerdo a la longitud de onda.

2. Sucesin fngica a travs del tiempo, por medio de fotografas tanto


macroscpicas como microscpicas de los ejemplares observados y el
Phylum al que pertenecen.

3. El reporte ser por equipo a manera de artculo cientfico de acuerdo


con las normas editoriales de la Revista de la Sociedad Mexicana de
Micologa.

Las preguntas que se debern contestar en la discusin de su artculo


sern p. ejemplo: Se cumpli su hiptesis? Si o no y por qu? Influy su
diseo experimental? Por qu Pilobolus dispers ms esporangios en
determinado color? Qu ocurre para que reaccione as? En cul menos y
por qu? Lo que encontr es lo que otros autores han registrado para
Pilobolus?

CITAS RECOMENDADAS,

CONSLTELAS PARA SUS RESULTADOS Y DISCUSIN

http://www.sciencemag.org/content/138/3546/1238.short

http://www.saber.ula.ve/bitstream/123456789/28291/2/art8.pdf

http://www.tandfonline.com/doi/pdf/10.1080/0028825X.1975.1043033
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http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC541165/pdf/plntphys003
52-0064.pdf

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