Peningkatan laju pelarutan trimetoprim melalui metode ko-kristalisasi

(Erizal Zaini dan kawan-kawan)

PENINGKATAN LAJU PELARUTAN TRIMETOPRIM

MELALUI METODE KO-KRISTALISASI DENGAN
NIKOTINAMIDA
Erizal Zaini1, Auzal Halim1, Sundani N. Soewandhi2, Dwi Setyawan3
1
Departemen Farmasetika, Fakultas Farmasi Universitas Andalas
2
Sekolah Farmasi ITB Jl. Ganesha 10 Bandung
3
Fakultas Farmasi, Universitas Airlangga Surabaya

Korespondensi: Dr. Erizal Zaini, M.Si.

Departemen Farmasetika, Fakultas Farmasi Universitas Andalas
Padang, 25163, Sumatera Barat, e-mail : erizal@ffarmasi.unand.ac.id

ABSTRACT
Co-crystallization of trimethoprim with nicotinamide had been done using solvent (methanol
as a solvent) and melted technique. Koflers hot contact methode was used to identify the
solid state interaction between these two components. The solid phase was characterized by
microscopic, powder X-ray diffraction, thermal DTA and FT-IR spectroscopy analysis.
Dissolution rate profile was performed by paddle methode (Type II USP), distilled water as a
medium. Solid state interaction between trimethoprim and nicotinamide show a formation of
0
conglomerate (simple eutectic) at eutectical point 125 C. Dissolution rate of co-
crystallization product of trimethoprim and nicotinamide increase significantly compare to
physical mixture and intact trimethoprim.
Keywords: co-crystallization, trimethoprim, nicotinamide, eutectic

ABSTRAK
Telah dilakukan ko-kristalisasi trimetoprim dengan bahan tambahan nikotinamida dengan
metode pelarutan (menggunakan pelarut metanol) dan peleburan. Metode kontak panas
Kofler digunakan untuk identifikasi awal pembentukan interaksi antar kedua komponen.
Padatan hasil ko-kristalisasi dikarakterisasi dengan analisis mikroskopik, difraksi sinar-X,
termal DTA dan spektrofotometer FT-IR. Uji laju pelarutan dilakukan dengan metode dayung
(tipe II USP) dengan medium air. Hasil interaksi menunjukkan pembentukan konglomerat
(eutektikal) antara kedua fase kristalin dalam keadaan padat, dengan titik eutektik pada
0
temperatur 125 C. Laju pelarutan trimetoprim hasil ko-kristalisasi meningkat secara
signifikan dibandingkan dengan campuran fisika dan senyawa tunggal trimetprim.
Kata kunci: ko-kristalisasi, trimetoprim, nikotinamida, eutektik

PENDAHULUAN seringkali menunjukkan ketersediaan

hayati rendah dan kecepatan disolusi
Kelarutan merupakan salah satu
merupakan tahap penentu (rate limiting
sifat fisikokimia senyawa obat yang
step) pada proses absorpsi obat (1-3).
penting dalam meramalkan derajat
Berbagai metode untuk
absorpsi obat dalam saluran cerna.
meningkatkan kelarutan dan laju
Obat-obat yang mempunyai kelarutan
disolusi obat telah banyak dilaporkan
kecil dalam air (poorly soluble drugs)
seperti pembuatan dispersi padat,
205
Jurnal Farmasi Indonesia Vol. 5 No. 4 Juli 2011: 205 -212
pembentukan prodrug, kompleks inklusi
obat dengan pembawa dan modifikasi
senyawa menjadi bentuk garam dan
solvat (4-5). Salah satu metode
menarik dan sederhana yang baru-baru
ini dikembangkan dalam bidang ilmu
bahan dan rekayasa kristal untuk
meningkatkan laju pelarutan dan
ketersediaan hayati obat-obat yang
sukar larut adalah teknik kokristalisasi
untuk menghasilkan kokristal (senyawa
molekular) dengan sifat-sifat fisika dan
fisikokimia yang lebih unggul. Kokristal
merupakan material padat yang terdiri
dari dua atau lebih molekul padat yang
membentuk satu kisi kristal yang
berbeda dan dihubungkan oleh ikatan
antar molekul seperti ikatan hidrogen
dan Van der Waals (6).
Penelitian ini bertujuan untuk
meningkatkan laju pelarutan obat yang
sukar larut melalui teknik kokristalisasi
dan karakterisasi sifat fisikokimia dan
kristalografik senyawa kokristal yang
terbentuk. Dalam penelitian ini
digunakan trimetoprim sebagai model
obat yang sukar larut air, merupakan
senyawa sintetik antibakteri spektrum
luas yang bekerja menghambat enzim
reduktase dihidrofolat. Sedangkan
nikotinamida (vitamin B3) digunakan
sebagai pembentuk kokristal (cocrystal
former) yang bersifat inert, dan
mempunyai toksisitas yang rendah.
Dari studi terdahulu telah dilaporkan
peningkatan kelarutan dan pelarutan
trimetoprim melalui pembentukan
kompleks inklusi dengan -siklodekstrin
(7).
METODE PENELITIAN
Bahan dan Alat Percobaan
Alat-alat yang digunakan: mikroskop
polarisasi dilengkapi kamera,
difraktometer sinar-X, DSC/DTA,
spektrofometer FT-IR, spektrofotometri
UV-Vis, oven vakum, alat uji Disolusi,
pH meter, timbangan analitik.
Bahan-bahan yang digunakan:
trimetoprim (Shouguang Fukang Pharm
Co. Ltd) No. batch 200703342,
206
nikotinamida, trimetoprim baku
pembanding FI (BPFI) dari PPOM,
pelarut metanol, etanol, air suling,
kertas Whatman.
Pembuatan ko-kristal dengan
berbagai teknik
Ko-kristalisasi dari pelarut (solvent
technique): Sejumlah trimetoprim dan
nikotinamida dalam perbandingan
molar 1:1 dilarutkan dalam metanol.
Larutan diuapkan sampai diperoleh
padatan dan disimpan dalam desikator
selama 48 jam.
Kokristalisasi dari leburan (melted
technique): Kokristal trimetoprim dan
nikotinamida dibuat dalam
perbandingan molar 1:1. Nikotinamida
dilebur dalam cawan penguap,
kemudian sedikit demi sedikit
ditambahkan trimetoprim ke dalam
leburan nikotinamida. Campuran
dibiarkan memadat pada temperatur
ruang dan disimpan dalam desikator.
Karakterisasi Sifat Fisikokimia dan
Kristalografik
Metode Kontak Panas: Metode kontak
dilakukan dibawah mikroskop polarisasi
yang dilengkapi meja pemanas elekrik
(Hot Stage). Sejumlah tertentu
trimetoprim (suhu lebur 200 oC)
diletakkan pada kaca objek dan ditutup,
kemudian dipanaskan sampai lebur,
biarkan mengkristal kembali. Letakkan
serbuk nikotinamida tepat pada batas
sisi gelas penutup. Sistem dipanaskan
kembali sampai seluruh nikotinamida
melebur dan leburannya kontak dengan
permukaan kristal Trimetoprim. Amati
terjadinya pertumbuhan kristal pada
bidang kontak tersebut (8).
Analisis mikroskopik dengan mikroskop
polarisasi: Serbuk trimetoprim,
nikotinamida dan senyawa hasil
interaksi diamati habit dan morfologis
kristal dengan mikroskop polarisasi
yang dilengkapi kamera digital.
 Peningkatan laju pelarutan trimetoprim melalui metode ko-kristalisasi
(Erizal Zaini dan kawan-kawan)

Analisis pola difraksi sinar- X: mikroskop polarisasi. Perbedaan warna

Penetapan pola difraksi sinar X serbuk
kokristal dilakukan dengan
menggunakan difraktometer. Kondisi
pengukuran sebagai berikut, sumber
Cu K, voltase 45 kV, arus 25 mA dan
kecepatan scanning 0,05o per detik.
Analisis termal diferensial: Analisis
dilakukan menggunakan alat DTA.
Suhu pemanasan dimulai 20 sampai
150 o C, dengan kecepatan pemanasan
10 o C per menit.
Analisis spektroskopi FT-IR:
Pembuatan spektrum infra merah
serbuk trimetoprim, nikotinamida dan
senyawa hasil interaksi dilakukan
dengan mendispersikan sampel pada
pelet KBr yang dikempa dengan
tekanan tinggi. Kemudian diukur persen
transmitan dari bilangan gelombang
400 4000 cm.
dan intensitasnya dipengaruhi oleh
orientasi fragmen, ketebalan dan sinar
yang diabsorbsi atau diteruskan oleh
fragmen kristal. Hasil leburan
nikotinamida dan trimetoprim yang
mengkristal kembali mempunyai bentuk
khas pada masing-masing kristalnya.
Nikotinamida memiliki bentuk habit
kristal mozaik sferulit (Gambar 1A),
yang tersusun dari kristal berbentuk
jarum dan membentuk satu pusat
pertumbuhan. Sedangkan habit kristal
trimetoprim berbentuk sulur yang
memanjang (Gambar 1B).
A

Penetapan profil disolusi

trimetoprim
Penetapan disolusi serbuk
trimetoprim murni, dan trimetoprim
hasil interaksi dengan nikotinamida B
dilakukan dengan menggunakan alat
tipe I, medium asam klorida 0,1 N
sebanyak 900 ml, kecepatan putaran
100 rpm, serta suhu 37 + 0,5 0C.
Sampel diambil setelah 5, 10, 20, 30,
45, dan 60 menit. Setiap pemipetan
diganti dengan sebanyak medium yang
diambil pada suhu yang sama sehingga
volume medium disolusi tetap. Masing-
masing larutan yang dipipet diukur
Gambar 1. Mikrofoto habit kristal
serapannya dengan menggunakan
nikotinamida (A) dan
spektofotometer UV-Vis derivatif
trimetoprim (B).
pertama pada panjang gelombang zero
(perbesaran 200x).
crossing nikotinamida. Lalu hitung
konsentrasi trimetoprim terdisolusi
Idenfikasi interaksi dengan metode
dengan menggunakan kurva kalibrasi
kontak panas Kofler
Identifikasi awal untuk mengungkap
HASIL DAN PEMBAHASAN interaksi fisika antar dua komponen
dilakukan dengan dua metode yaitu
Analisis mikroskopik
metode kontak panas Kofler dan
Kristal hasil rekristalisasi leburan
metode reaksi kristalisasi (8,9,10,11).
nikotinamida dan trimetoprim terlihat
Metode kontak panas pertama kali
beraneka warna ketika diamati dibawah
207
Jurnal Farmasi Indonesia Vol. 5 No. 4 Juli 2011: 205 -212

diperkenalkan oleh Lehman dan Kofler
(9). Metode ini merupakan teknik yang
sederhana untuk mengidentifikasi
perilaku fase dalam suatu sistem biner
(dua komponen). Pada metode ini,
salah satu komponen (yang memiliki
titik lebur yang lebih tinggi yaitu
trimetoprim dilebur, lalu dibiarkan
memadat kembali (rekristalisasi),
komponen kedua nikotinamida (titik
lebur lebih rendah) ditempatkan pada
sisi lainnya pada gelas objek,
dipanaskan dengan menggunakan alat
pemanas (hot stage) yang dihubungkan
dengan mikroskop polarisasi. Pada
saat komponen kedua nikotinamida
(NCT) melebur, fase leburan komponen
NCT akan berdifusi kedalam komponen
padatan trimetoprim (TMP) dan
melarutkan sebagian padatan TMP
pada zona kontak antara sistem biner
TMP dan NCT. Davis et al, (10),
menyebutnya sebagai zona
pencampuran (mixing zone), yang
paling menarik untuk diamati. Sampel
dibiarkan memadat (rekristalisasi) pada
temperatur ruang. Setelah kedua
komponen (TMP dan NCT) memadat,
zona kontak diamati kembali pada
mikroskop polarisasi. Pada Gambar
2.A-D, sisi A.1 merupakan hasil
rekristalisasi leburan NCT dan sisi A.3
adalah rekristalisasi leburan TMP.
Kedua komponen menunjukkan habit
kristal yang khas. Zona A.2 adalah
zona kontak antara padatan TMP dan
NCT. Pada awal pembentukan zona
kontak, belum teramati adanya habit
kristal baru, melainkan masih dalam
keadaan fase cair (amorf) (Gambar
2A). Setelah didiamkan beberapa saat,
mulai terbentuk pertumbuhan habit
kristal baru pada zona B.2, yang
berbeda dari kedua habit TMP dan
NCT (Gambar 2B). Preparat sampel
metode kontak dipanaskan kembali,
fase padatan NCT melebur kembali
pada 131 0C, zona kontak melebur
pada 124 0C dan diikuti oleh padatan
TMP pada 199 0C (Gambar 2C dan
2D). Perbedaan habit kristal dan
perilaku termal, mengindikasikan
adanya interaksi padatan antara kedua
komponen NCT dan TMP (9,10).

Gambar 2. Mikrofoto habit kristal hasil interaksi TMP dan NCT dengan metode
kontak panas Kofler A) setelah kontak leburan NCT dan padatan TMP,
B) setelah terbentuk zona kontak, C) peleburan padatan NCT dan
zona kontak dan D) peleburan TMP.

208
 Peningkatan laju pelarutan trimetoprim melalui metode ko-kristalisasi
Analisis termal DTA
Analisis termal DTA merupakan
instrumen analitik yang sangat
bermanfaat dalam karakterisasi
interaksi dalam keadaan padat (solid
state interaction) antara dua atau lebih
material obat. Analisis termal DTA
digunakan untuk mengevaluasi
perubahan sifat termodinamika yang
terjadi saat materi diberikan energi
panas, berupa peristiwa rekristalisasi,
peleburan, desolvasi, dan transformasi
fase padat, yang ditunjukkan puncak
endotermik atau eksotermik pada
termogran DTA.
Termogram DTA nikotinamida dan
trimetoprim murni menunjukkan satu
puncak endotermik yang merupakan
peristiwa peleburan padatan masing-
masing komponen pada 131 0C dan
201,5 0C. Serbuk hasil ko-kristalisasi
nikotinamida dan trimetoprim ekuimolar
(1:1 molar) dari pelarut metanol,
menunjukkan perilaku termal yang
Gambar 3. Termogram DTA serbuk A) nikotinamida, B) trimetoprim dan C) serbuk
hasil ko-kristalisasi antara nikotinamida dan trimetoprim ekuimolar (1:1
molar).
Analisis Difraksi Sinar-X
Difraksi sinar-X serbuk merupakan
metode yang handal untuk
karakterisasi interaksi padatan antara
dua komponen padat, apakah
terbentuk fase kristalin baru atau tidak.
Jika terbentuk fase kristalin baru dari
hasil interaksi antar kedua komponen
maka akan teramati secara nyata dari
difraktogram sinar-X yang berbeda dari
(Erizal Zaini dan kawan-kawan)
berbeda dari kedua komponen
pembentuknya, ada dua puncak
endotermik yaitu pada 125 0C dan agak
melebar pada 183 0C (Gambar 3). Dari
termogram DTA mengindikasikan
penurunan titik lebur sistem biner hasil
ko-kristalisasi, yang diduga
terbentuknya campuran eutektik antara
nikotinamida dan trimetoprim, dengan
titik lebur eutektik pada 125 0C.
Pembentukan eutektikal sejumlah
materi obat dengan nikotinamida juga
telah dilaporkan, antara lain dengan
flurbiprofen dan ibuprofen (12,13).
Pada campuran eutektik, kedua
komponen dapat bercampur sempurna
dalam berbagai komposisi pada kondisi
isotrop (leburan), namun eksistensi
masing-masingnya akan diperoleh
kembali dalam kondisi anisoptrop
(kristalin). Dengan demikian, baik
nikotinamida maupun trimetoprim akan
diperoleh kembali jika kedua komponen
diko-kristalisasi kembali.
campuran fisika kedua komponen.
Gambar. 4, menunjukkan difraktogram
sinar-X serbuk padatan hasil interaksi
kedua komponen dengan metode ko-
kristalisasi pelarut dan leburan,
dibandingkan dengan komponen
tunggal kedua komponen dan
campuran fisika kedua komponen
tanpa perlakuan.
209
Jurnal Farmasi Indonesia Vol. 5 No. 4 Juli 2011: 205 -212

Gambar 4. Difraktogram sinar-X serbuk A) trimetoprim, B) nikotinamida, C)

campuran fisika nikotinamida-trimetoprim ekuimolar (1:1 molar), D)
kokristalisasi nikotinamida-trimetoprim ekuimolar (1:1 molar) dari pelarut
metanol dan E) koristalisasi nikotinamida-trimetoprim ekuimolar (1:1
molar) dari fase leburan.

Fase padat nikotinamida dan sebagai campuram eutektik sederhana

trimetoprim menunjukkan derajat (10).
kristalinitas yang tinggi dikarakterisasi
oleh puncak-puncak interferensi khas Analisis spektrofotometri FT-IR
pada pola difraksi sinar-X serbuk Spektrum FT-IR pada Gambar 5,
(Gambar. 4A dan 4B). Trimetoprim menunjukkan bahwa spektrum
memiliki interferensi khas pada 2 theta inframerah campuran fisika sama
= 9,2; 11,7; 15,3; 17,5; 18,6; dan 25,9. dengan spektrum hasil ko-kristalisasi
sedangkan nikotinamida pada 2 theta = nikotinamida dan trimetoprim, yang
14,7; 22,19; 25,8 dan 27,52. menunjukkan tidak terjadi interaksi
Difraktogram sinar-X campuran fisika kimiawi pada saat proses kokristalisasi
(Gambar 4C), merupakan super kedua komponen.
imposisi antara kedua komponen
pembentuknya. Difraktogram sinar-X Uji laju disolusi
padatan hasil interaksi antara Trimetoprim memiliki kelarutan dan
nikotinamida dan trimetoprim memiliki laju disolusi yang rendah dalam air.
pola difraksi yang sama dengan Dengan teknik ko-kristalisasi dengan
campuran fisika nikotinamida- nikotinamida dapat meningkatkan laju
trimetoprim, hanya berbeda dalam disolusi dalam medium air
intensitas puncak interferensi yang dibandingkan dengan campuran fisika
menunjukkan perbedaan derajat dan trimetoprim tunggal (Gambar 6).
kristalinitas. Hal ini mengindikasikan Peningkatan kelarutan dan laju
bahwa ko-kristalisasi antara disolusi trimetoprim dengan
nikotinamida dan trimetoprim tidak kokristalisasi dengan nikotinamida
menghasilkan fase kristalin baru disebabkan berbagai mekanisme,
(senyawa molekular), melainkan diantaranya pembentukan eutektik
konglomerasi kedua fase kristal dalam antara nikotinamida dan trimetoprim
keadaan padat atau seringkali disebut yang memperkecil ukuran partikel

210
 Peningkatan laju pelarutan trimetoprim melalui metode ko-kristalisasi
(Erizal Zaini dan kawan-kawan)

trimetoprim. Efek solubilisasi dari dengan beberapa senyawa obat, yang

nikotinamida yang mudah larut air juga disebut dengan efek hidrotropi (14-17).
ikut berkontribusi terhadap peningkatan Hal ini diduga ikut berperan dalam
laju disolusi trimetoprim, karena peningkatan laju disolusi trimetoprim
trimetoprim terdispersi dalam dari campuran fisika, melalui
nikotinamida. Nikotinamida dilaporkan pembentukan kompleks dengan
dapat membentuk kompleks melalui nikotinamida dalam keadaan larutan.
mekanisme donor-akseptor elektron
.

Gambar 5. Spektrum FT-Infra merah A) nikotinamida, B) trimetoprim, C) campuran

fisika nikotinamida-trimetoprim ekuimolar (1:1 molar), dan D) ko-
kristalisasi nikotinamida-trimetoprim ekuimolar (1:1 molar).

100

90
80

70 A
% terdisolusi

60

50
B
40

30
C
20
10
0
0 10 20 30 40 50 60 70
Waktu (menit)
Ko-kristal NCT-TMP CF-NCT-TMP TMP tunggal

Gambar. 6. Profil disolusi serbuk A) serbuk hasil ko-kristalisasi nicotinamida dan

trimetoprim ekuimolar (1:1 molar), B) campuran fisika nicotinamida dan
trimetoprim ekuimolar (1:1 molar), dan C) trimetoprim tunggal.

211
 Jurnal Farmasi Indonesia Vol. 5 No. 4 Juli 2011: 205 -212

KESIMPULAN crystal screening: A study of

nicotinamide with seven active
1. Teknik ko-kristalisasi antara pharmaceutical ingredients. Cryst
trimetoprim dan nikotinamida dari Growth and Des 2008; 8(5): 1697-
pelarut metanol menghasilkan 1712.
campuran eutektik sederhana. 10. Davis RE, Lorimer KA, Wilkowski MA,
2. Laju disolusi trimetoprim dari ko- Rivers JH. Studies of relationship in
kristalisasi dengan nikotinamida cocrystal systems. ACA Transactions
dapat meningkat secara signifikan 2004; 39: 41-61.
dibandingkan campuran fisika dan 11. Hornedo NR, Sarah JN, Kurt FS,
Yomaira P, Christopher JF. Reaction
trimetoprim tunggal.
crystallization of pharmaceutical
molecular complexes. Mol Pharm
DAFTAR PUSTAKA 2006; 3(3): 362-367.
12. Varma MM, Pandi JK. Dissolution,
1. Racz I. Drug Formulation. New York: solubility, XRD, and DSC studies on
John Wiley and Sons; 1989. Flurbiprofen-Nicotinamide solid
2. Shargel L, Yu A. Applied dispersion. Drug Dev Ind Pharm 2005;
Biopharmaceutics and 31: 417-423.
th
Pharmacokinetics. 4 Ed. New York: 13. Oberoi LM, Alexander KS, Riga AT.
Appleton & Lange; 1999. Study of interaction between Ibuprofen
3. Leuner C, Dressman J. Improving drug and Nicotinamide using differential
solubility for oral delivery using solid scanning calorimetry, spectroscopy
dispersions. Eur J Pharm Biopharm and microscopy and formulation of a
2000; 50; 47-60. fast-acting and possibly better
4. Chiou WL, Riegelman S. ibuprofen suspension for osteoarthritis
Pharmaceutical Applications of Solid patients. J Pharm Sci 2005; 94: 93-
Dispersion System. J Pharm Sci 1991; 101.
60 (9), 1281-1302. 14. Hamza YE, Paruta AN. Enhanced
5. Abdou HM. Dissolution, Bioavaibility solubility of paracetamol by various
and Bioequivalence. Easton, hydrotropic agents. Drug Dev Ind
Pennsylvania: Mack Publishing Pharm 1985; 11(8): 1577-1596.
Company; 1989. 15. Bogdanova SV, Sidzhakova D,
6. Trask AV, Jones W. Crystal Karaivanova V, Georgieva SV.
engineering of organic co-crystals by Aspects of the interaction between
the solid state grinding approach. Top Indomethacin and Nicotinamide in
Curr Chem 2005; 254: 41-70. solid dispersions. Int J Pharm 1998;
7. Li N, Zhang YH, Wu YN, Xiong XL, 163: 1-10.
Zhang YH. Inclusion Complex of 16. Sanghvi R, Evans D, Yalkowsky SH.
trimethoprim with -cyclodextrin. J Stacking complexation by
Pharma Biomed Anal 2005; 39: 824- Nicotinamide: A useful way of
829. enhancing drug solubility. Int J Pharm
8. Soewandhi SN. Antaraksi Fisik 2007; 336: 35-41.
Padatan Pada Kombinasi Senyawa 17. Agrawal S, Pancholi SS, Jain NK,
Aprobarbital dan Isopropilantipirina. Agrawal LP. Hydrotropic solubilization
Jurnal Matematika dan Sains 1999; of Nimesulide for parenteral
4(1): 20-31. administration. Int J Pharm 2004; 274:
9. Berry DJ, Seaton C, Clegg W, 149-155.
Harrington RW, Coles SJ, Horton PN.
Applying hot-stage microscopy to co-

212

All in-text references underlined in blue are linked to publications on ResearchGate, letting you access and read them immediately.