En el presente anlisis fitoqumico preliminar del romero perteneciente a la especie
Rosmarinus officinalis se parti de tres extractos: acido, acuoso y etanlicos a los cuales se realizaron distintas pruebas para poder determinar la presencia cualitativa de metabolitos secuandarios relacionado con la medicina tradicional. La metodologa seguida para este anlisis hace referencia al manual del curso experimental de fitoqumica. El anlisis fitoqumico a travs del extracto acido fue utilizado para la deteccin de alcaloides, se realizaron pruebas de precipitacin, basadas en la capacidad que tienen sustancias nitrogenadas como los alcaloides, en estado de sal (extractos cidos) para combinarse con el el yodo y metales presentes en los diversos reactivos formando as precipitados (Arango GJ. 2008). La adicin de cido HCl, tena como objetivo disolver los alcaloides (HCl 10%) para que con la adicin de sales de metales pesados pudiera formarse los precipitados. En la Tabla 1 se observa que mediante la adicin del reactivo de Sonnenschain se presenta un precipitado azul-verde que manifiesta la presencia de alcaloides. Sin embargo, es necesario tener en cuenta que estas reacciones, no son especficas y pueden darse falsos positivos debido a la contaminacin con protenas, cumarinas, alfa- benzopironas y otros compuestos nitrogenados que dan positivo con estos reactivos; as como falsos negativos porque algunos alcaloides forman complejos que no precipitan (Martnez A. 1997). El anlisis fitoqumico a travs del extracto etanlico se utilizo para poner de manifiesto la existencia o no, de metabolitos secundarios como flavonoides, cumarinas, saponinas, glucsidos cardiotnicos, quinonas y sesquitenperlactonas. En el caso de los flavonoides en general, los son solubles en agua y alcohol, insolubles en solventes orgnicos. Estos se pueden precipitar en medio cido, siendo solubles en medio bsico con una coloracin amarilla. En la Tabla 2 se observa que mediante la reaccin de Shinoda la cual es una acidificacin no se observa ningn cambio en la coloracin. Sin embargo con la reaccin de hidrxido de sodio al 10% se puede comprobar la presencia de flavonoles al basificar el medio. En el caso de las cumarinas, para llevar a cabo su deteccin, se tiene en cuenta el hecho de que son fluorescentes a la luz ultravioleta y en este caso para aumentar su intensidad se tratan previamente con amoniaco o hidrxido de amonio en este caso. Tambien se pueden determinar mediante la prueba o reactivo de Ehrlich en el cual se utiliza una solucin al de p-dimetilaminobenzaldehdo en etanol, esta solucin se utiliza como agente revelador del grupo furano, es decir, revela furanocumarinas. En la Tabla 3 se observa observar que da positivo a ambas pruebas. En el caso de las saponinas se sabe que son glicsidos cuya aglicona consiste en un ncleo esteroidal o triterpnico; esta caracterstica estructural les confiere un carcter anftero que les permite actuar como tensoactivos. Aprovechando esta propiedad, una prueba muy usada es la formacin de espuma cuando la solucin es agitada, al realizar esa prueba da negativa al no producir espuma. Se emplearon pruebas adicionales como son la de Libermann Buchard y Rosenthaler, siendo la primera la nica que dio positivo para saponinas triterpenoides al mostrar una coloracin rosa-rojo-violeta como se observa en la tabla 1. Las pruebas para poner de manifiesto a los glucsidos cardiotnicos todas dieron negativos para el romero. En el caso de las quinonas son compuestos aromticos oxigenados producto de la oxidacin de los fenoles. Para la deteccin de este tipo de metabolitos secundarios se emple la reaccin de Borntrger apartir del extracto etanlico, reaccin que se obtiene de la disolucin de quinonas en un medio alcalino, en donde se hidrolizan los enlaces glicosdicos y se oxidan las antronas y los antranoles hasta antraquinonas esta disolucin se torna de un color vivo que puede variar, segn la estructura y los constituyentes de la quinona, siendo el resultado un color rojo el cual nos indica un derivado de antraquinonas, corroborado por la reaccion de acido sulfrico especifica para identificar antraquinonas. En el caso de la identicacion de sesquitenperlactonas mediante la reaccion de hidroximato ferrico, da positivo debido a la reduccin del ion ferrico a ferroso, favorecido por la disminucin del pH que da como resultado coloracin roja. El anlisis fitoqumico a travs del extracto acuoso fue utilizado para la identificacin de azucares reductores y taninos. Los azucares reductores se pueden poner de manifiesto mediante dos reacciones a travs del reactivo de Fehling y de Benedict respectivamente. Para el reactivo de Fehling el romero da una prueba negativa para este tipo de azucares, sin embargo la prueba se basa en el poder reductor del grupo carbonilo de los aldehdos el cual se oxida a cido y se reduce la sal de cobre en medio alcalino a xido de cobre, formando un precipitado de color rojo. El reactivo de Benedict es otra de las reacciones de oxidacin, que como conocemos, nos ayuda al reconocimiento de azcares reductores, es decir, aquellos compuestos que presentan su OH anomrico libre, como por ejemplo la glucosa, lactosa o maltosa o celobiosa, en la reaccin de Benedict, se puede reducir el Cu2+ que presenta un color azul, en un medio alcalino, el in cprico (otorgado por el sulfato cprico) es capaz de reducirse por efecto del grupo aldehdo del azcar (CHO) a su forma de Cu+. Este nuevo ion se observa como un precipitado rojo ladrillo correspondiente al xido cuproso (Cu2O), que precipita de la solucin alcalina con un color rojo-naranja, a este precipitado se lo considera como la evidencia de que existe un azcar reductor, siendo este prueba positiva para el romero. En el caso de taninos se utilizo la prueba de cloruro ferrico para determinar derivados del acido galico, catecol y compuestos fenolicos siendo estos ltimos los nicos en mostrar una prueba positiva al formar una coloracin azul que determina la presencia del grupo fenol, cuando se agrega a una porcin del extracto acuoso gotas de solucin de cloruro de hierro (III) diluido. Ya que los compuestos fenolicos forman un complejo con Fe (III) el tetrafenol-hierro que es intensamente coloreado. La reaccion de Gignad que pone de manifiestio a los glucsidos cianogeneticos da una prueba negativa.
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