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PRACTICA No.

SIEMBRA DE HONGOS POR EL MTODO DE MICROCULTIVO Y

CUADRANTE

Objetivos:

Practicar mtodos de siembra para hongos.

Relacionar morfologa macroscpica y microscpica de hongos

Fundamento terico:

Los hongos, son microorganismos eucariotas, aclorofilados, heterotrficos, clasificados

dentro del reino Fungi, poseen diversidad de estructuras microscpicas que los diferencian

unos de otros y por medio de las cuales se pueden clasificar en gnero y especie. En general

los hongos crecen en forma unicelular (levaduras) y en colonias filamentosas multicelulares

llamados mohos, quienes tienen como estructura principal de crecimiento vegetativo a la hifa.

Para el anlisis de su morfologa microscpica se requiere arrancar la muestra del sustrato

pues ellos se pegan como costras, en esta operacin las estructuras sufren rupturas que

dificultan su anlisis al microscopio, una forma de corregir este problema es utilizando la

tcnica de microcultivo. Con este protocolo el hongo se siembra directamente sobre la lmina

que se va a montar al microscopio, sin tener que tocar las estructuras.

En un anlisis de morfologa microscpica de hongos encontramos diversidad de estructuras:

micelio cenocticos o con septos transversos, estructuras de reproduccin asexual como los

esporangios y sus esporangioesporas, conidiforos con sus esterigmtas y conidios. Tambin

se pueden encontrar estructuras de reproduccin sexual como zigosporangios, oogonios y

anteridios, peritecios, cleistotecios, apotecios, esporas como clamidias, odios, artrosporas,

ameroconidios y muchas otras estructuras.


Materiales y Mtodos

1. Siembra por cuadrante:

Corte con el asa micolgica caliente un cuadrante de agar de aproximadamente 1 cm2 de un

cultivo de los hongos aislados en las practicas anteriores y colquelo en la superficie, en el

centro de una caja de PDA. Terminado el tiempo de incubacin realice una descripcin

morfolgica de la colonia y una coloracin con azul de lactofenol, el inoculo se debe tomar

con el asa micolgica y de las areas mas distales del centro de la colonia, asegurndose de

no daar las estructuras. Ver video sistemas de siembra

2. Microcultivo:

Con las indicaciones del tutor ensamblamos el contenido de la caja como se muestra en la

figura:

Lamina
Agar porta
objetos
Papel absorbente varilla de vidrio
Caja de petri Laminilla

MICROCULTIVO

Cortamos tozos de agar PDA de aproximadamente 1 cm2 y coloque dos trozos en posicin

excntrica sobre la lmina porta objetos y siembre por puncin dos inculos de hongos
diferentes, uno en cada trozo de agar, seguidamente coloque sobre cada uno de los trozos

sembrados una laminilla. Mantenga la caja boca arriba e incbela a 25C por 5 a 7 das.

Terminado el tiempo de incubacin, Saque la lmina porta objetos de la caja y squela por

debajo con papel absorbente, monte al microscopio cuidando de no hablar para evitar esparcir

las esporas, observe hasta 40X las estructuras y dibuje lo observado.

Conteste las siguientes preguntas:

Por qu se debe coger el inoculo del hongo de las partes ms distales del centro de la

colonia?

-Investigue sobre protocolos de montaje y coloracin de muestras de tejidos animales o

humanos en bsqueda de hongos, lo mismo para tejidos vegetales

-Investigue sobre las morfologa microscpica de los propgulos sexuales de hongos,

macroconidios,