Anda di halaman 1dari 118

FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS

Ao del Buen Servicio al Ciudadano

ESCUELA : Ingeniera Ambiental

CURSO : Microbiologa

TEMA : Microbiologa del agua

DOCENTE : Dr. Cesar Caceda Quiroz

ESTUDIANTE : Yohan Rodriguez huarcaya

Mauricio Mamani huanca

CODIGO : 2015-178006

2015-178030

AO : V semestre

TURNO : Maana

TACNA PER

2017
MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

DEDICATORIA:

A nuestros padres, por permitirnos lograr


cada cosa propuesta, y por regalarnos una
vida llena de bendiciones.

A nuestro profesor y a nuestros amigos que


nos dan las fuerzas necesarias para seguir
adelante.

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 2


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

INDICE GENERAL

CARATULA .01
DEDICATORIA02

INDICE GENERAL.03

INTRODUCCION05

OBJETIVOS.06

CAPITULO I.07

1.- MICROBIOLOGIA DEL AGUA07

2.- INTRODUCCION AL MUNDO MICROBIANO..08

2.1.-Morfologia bacteriana09

2.2.- Crecimiento bacteriano.11

3.-MICROORGANISMOS PRESENTES EN AGUAS NATURALES.....23

4.-BACTERIAS INDICADORAS DE CONTAMINACION.27

CAPITULO II...30

1.- ANALILIS DEL AGUA SEGN PARAMETROS.30

1.1.-Caracteristicas fsico qumicas del agua33

2.-ANALISIS MICROBIOLOGICO DEL AGUA SEGN PARAMETROS.42

2.1.- Parmetros biolgicos del agua.42

3.-BIONDICADORES COMO HERRAMIENTAS PARA DETERMINAR LA CALIDAL DEL


AGUA ..55

4.-PRODUCTOS FARMACEUTICOS EN EL AGUA POTABLE58

4.1.-Antecedentes y mbitos58

4.2.-Presencia de productos dainos en el agua potable58

4.3.-Evaluacion y riesgos..59

4.4.-Medidas y control59

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 3


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

4.5.-Seguimiento.60

4.6.-Falta de conocimiento61

CAPITULO III..62

1.- ESTANDARES DE CALIDAD AMBIENTAL.62

2.- ESTANDARES DE CALIDAD AMBIENTAL DEL AGUA65

3.-COMENTARIOS DEL REGLAMENTO..73

4.-PROPUESTA DE SOLUCIONES DE ANA...75

CAPITULO IV

1.- HIDRO ECOSFERA78

CONCLUSIONES.109

REFERENCIA BIBLIOGRAFICA110

ANEXO112

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 4


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

INTRODUCCION

El uso de bioindicadores se esta proponiendo como una nueva herramienta para conocer
la calidad del agua, esto no quiere decir que desplace al metodo tradicional de los analisis
sicoquimicos.

Su uso simplica en gran medida las actividades de campo y laboratorio, ya que su


aplicacion solo requiere de la identicacion y cuanticacion de los organismos basandose en
indices de diversidad ajustados a intervalos que califican la calidad del agua.

En Japon, por ejemplo, las dependencias encargadas del monitoreo del agua ya cuentan
con guias ilustradas de los organismos que se pueden encontrar en algunos rios,
incluyendo informacion sobre la tolerancia o susceptibilidad que presentan a cierto tipo de
contaminante, de tal manera que cada una de ellas proyecta informacion sobre el estado
del medio acuatico.

Un organismo se considera bioindicador siempre y cuando se conozca el grado de


tolerancia del mismo, no todos pueden darnos informacion debido a sus habitos
alimentarios o a su ciclo de vida.

Por citar algunos organismos que pueden ser usados como bioindicadores estan los
moluscos, insectos, anelidos, peces y el plancton, tambien es importante considerar la
abundancia con que se les encuentra y la epoca del ao

En la actualidad, el anlisis de los datos disponibles indica que existe un margen de


seguridad considerable entre las bajsimas concentraciones de productos
farmacuticos que se consumiran con el agua potable y las dosis teraputicas
mnimas, lo que sugiere un riesgo exiguo para la salud humana.

De esta conclusin se desprende que, actualmente, en el marco de las Guas de la


OMS para la calidad del agua potable no es necesario desarrollar valores de referencia
formales basados en la salud, en relacin con los productos farmacuticos.
Las preocupaciones concernientes a los productos farmacuticos en el agua potable
no deberan desviar la atencin de los proveedores de agua y de las instancias
normativas, de otras prioridades relativas al agua potable y la salud, especialmente los
riesgos microbianos que entraan las bacterias, los virus y los protozoos patgenos,
as como otros riesgos qumicos tales como el arsnico de origen natural y los
excesivos niveles de fluoruro.

Consciente de que los productos farmacuticos en el agua potable constituyen un


problema incipiente, la OMS seguir examinando las pruebas cientficas pertinentes y,
en caso necesario, actualizar la orientacin proporcionada en la presente hoja
informativa.

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 5


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

OBJETIVOS

Tener conceptos bsicos con respecto a la microbiologa del agua como su ciclo
de vida y dems

Conocer los microorganismos quienes nos ayudan a demostrar la calidad del agua

tener un conocimiento sobre los estndares de calidad ambiental en el Per

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 6


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

CAPITULO I

1.- MICROBIOLOGIA DEL AGUA

El agua, alimento esencial para los animales incluido el hombre, frecuentemente acta
como vehculo de transmisin de microorganismos entricos. La materia fecal puede
accidentalmente alcanzar una fuente de abastecimiento, siendo la forma ms comn el
ingreso a travs de los sistemas de pozo ciego a napas profundas.

El Cdigo Alimentario Argentino (CAA), la Organizacin Mundial de la Salud (OMS) en


sus Guas para la calidad del agua potable, la Directiva 98/83/CE1 y otras normas
internacionales, establecen o recomiendan requisitos de calidad para el agua de consumo
humano.

En general, la normativa establece que el agua es apta bacteriolgicamente para


consumo si se encuentra exenta de microorganismos patgenos de origen entrico y
parasitario intestinal. Ellos transmiten enfermedades tales como salmonelosis
(Salmonella), shigelosis (Shigella), colera (Vibrio Cholerae), amebiasis (Entamoeba
histolytica), alteraciones gastrointestinales (Aeromonas mesfilas, Helicobacter pylori,
Campylobacter); giardiasis (Giardia lamblia), cristosporidiosis (Crystosporidium),
esquistosomiasis (Schistosoma), desrdenes hepticos (virus de hepatitis), etc.

La presencia de microorganismos patgenos en el agua de bebida es un riesgo que se


incrementa en las reas marginales de mayor densidad poblacional o en zonas sin
disponibilidad de agua potable. La seguridad que un agua contaminada puede ser causal
de enfermedades, ha conducido a la necesidad de controlar rutinariamente la calidad
microbiolgica de muestras de diversos orgenes.

Los controles rutinarios de la totalidad de los microorganismos hdricos, potencialmente


riesgosos para la salud, resultan difciles de llevar a cabo debido a la gran variedad de
bacterias patgenas cultivables, a la complejidad de los ensayos de aislamientos y a la
presencia en baja concentracin de varias especies altamente agresivas, sin que el orden
detallado indique prioridad. Por esta razn, los anlisis bacteriolgicos apuntan a la
bsqueda de microorganismos indicadores de contaminacin fecal y se centralizan en la
cuantificacin de coliformes.

Este grupo est integrado por enterobacterias, siendo Escherichia coli el indicador
universal de contaminacin fecal.

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 7


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

2. INTRODUCCIN AL MUNDO MICROBIANO

Para estudiar la relacin que existe entre calidad de agua y salud humana, es necesario
introducir el concepto de microbiologa, y a partir de ello valorar la presencia de
organismos microscpicos en agua potable, los efectos de competencia y/o sinrgicos de
las distintas especies y la posibilidad de aplicar tecnologas de desinfeccin. La
microbiologa es una rama de la biologa que estudia seres vivientes de tamao
microscpico que existen como clulas aisladas o asociadas y tambin incluye el estudio
de virus (microscpicos no celulares).

En general, los microorganismos a diferencia de los macroorganismos, son capaces de


llevar a cabo procesos de crecimiento, generacin de energa y reproduccin,
independientemente de otras clulas sean del mismo tipo o diferentes. Las clulas
estudiadas en microbiologa pueden pertenecer a dos grandes grupos, eucariotas y
procariotas. Las eucariotas constituyen la unidad estructural de protozoarios, hongos y
algas cuyo tamao las incluye en esta especialidad.

Son organismos unicelulares o multicelulares que poseen en su interior estructuras


limitadas por membranas llamadas organelas (ncleo, mitocondrias y cloroplastos
presentes slo en clulas capaces de realizar fotosntesis).

Las clulas procariotas son las bacterias, cuya estructura interna es sencilla.
Etimolgicamente el trmino procariota significa ausencia de membrana nuclear.

En la tabla 1 se indican algunas diferencias y similitudes entre ambas clulas.

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 8


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

2.1. Morfologa bacteriana

Las bacterias son microorganismos unicelulares que se reproducen por fisin binaria,
conocida tambin como biparticin. Su tamao, por lo general es menor que el de una
clula eucariota tpica (por ej. Escherichia coli 0,5 2 m). Sin embargo, existe un amplio
rango de tamaos segn las especies que puede variar desde 0,2 m de dimetro como
en el caso de los micoplasmas hasta 40 m como en la Beggiatoa gigantea.

La rigidez de la pared celular determina la morfologa de una clula bacteriana. Los


principales tipos de formas que presentan las bacterias son: esfrica, bastn alargado o
espiral (figura 1). Las bacterias de forma esfrica se denominan cocos (redondeados,
ovoides o elpticos); las de forma de bastn alargado se denominan bacilos (cilndricos,
fusiformes, etc.) y las de forma de bastn curvado se denominan espirilos.

Aquellas bacterias cuya imagen proyectada sobre el plano tienen forma de coma, se
llaman vibrios. Otras formas que pueden presentar las bacterias son filamentosa
(ramificada o no), anillos y tambin estructuras con prolongaciones.

Si bien la mayora de las bacterias mantienen su forma, algunas pueden presentar


modificaciones y se las denomina pleomrficas. El pleomorfismo est relacionado a veces
a la edad del cultivo y se manifiesta en bacterias sin pared celular (micoplasmas). Las
formas L son bacterias que perdieron la pared celular por una situacin de estrs
(temperatura, presin osmtica, etc.) pero que son capaces de resintetizarla cuando el
estrs cesa.

Siendo la morfologa una caracterstica taxonmica, es importante determinar el


fenmeno de pleomorfismo originado por las condiciones del cultivo, para evitar falsas
identificaciones. Las clulas bacterianas, observadas al microscopio, pueden aparecer
como clulas aisladas o agrupadas. Las agrupaciones de dos clulas de formas cocoides
se denominan diplococos. El o los planos en los cuales tiene lugar la divisin celular,
determina la disposicin caracterstica de especie. As, si existe un solo plano de divisin
se originan cadenas, por ej. Streptococcus (cocos en cadena). Cuando la biparticin tiene
lugar en dos planos perpendiculares, se originan ttradas, por ej. Pediococcus. La divisin
en tres o ms planos ortogonales origina paquetes de 8 clulas o ms, por ej. Sarcina.

Finalmente si ocurre fisin binaria en planos no perpendiculares se observa disposicin de


racimos irregulares, por ejemplo Staphylococcus. Los bacilos pueden presentar otras
disposiciones: en empalizada (por giros de 180o ), en forma de letra V o L (dos bacilos en
posicin angular) y varios bacilos que forman letras chinas. El flagelo, una estructura
celular procariota no constante, est involucrada en la motilidad bacteriana; es de
naturaleza proteica (flagelina) y su composicin qumica es diferente a la del flagelo de
una clula eucariota (estructura microtubular). La disposicin de los flagelos puede ser
polar (localizacin en uno o ambo extremos de la bacteria) o pertrica (distribucin
alrededor de la superficie celular)

Algunos gneros de bacterias, entre ellos Bacillus, Clostridium, Sporolactobacillus,


Sporosarcina, Desulfotomaculum, etc., tienen la capacidad de formar endosporas, que a

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 9


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

diferencia de las esporas fngicas, no son formas de reproduccin sino estructuras de


resistencia frente a agentes fsicos y qumicos.

El fenmeno de esporulacin bacteriana est codificado a nivel gentico, y en presencia


de glucosa los genes responsables se encuentran reprimidos.

Una tcnica de coloracin con valor taxonmico, es la tincin diferencial de Gram que
permite dividir las bacterias en dos grandes grupos.

La respuesta a los reactivos usados, que guarda estrecha relacin con la ultraestructura
de la pared celular (principalmente con el peptidoglicano o murena) logra clasificarlas en
Gram(+) (gruesa capa de peptidoglicano) y Gram() (fina capa de peptidoglicano con
membrana externa de lipopolisacridos).

2.2. Crecimiento microbiano

El crecimiento celular se define como el aumento ordenado de todos los componentes


qumicos que llevan a un incremento de los constituyentes y estructuras celulares. Los
nutrientes, a partir de los cuales los microorganismos sintetizan sus principales
biomolculas y obtienen su energa, estn disueltos en agua, razn por la cual el
crecimiento celular depende de la disponibilidad de agua.

Las distintas especies bacterianas tienen diferentes requerimientos nutricionales (a veces


especficos) y condiciones fisicoqumicas que les permiten permanecer viables. Los

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 10


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

nutrientes requeridos en grandes cantidades son denominados macronutrientes mientras


que los micronutrientes son necesarios en cantidades trazas.

Entre los primeros se encuentran C, H, O, N (los ms abundantes), P, S, K, Ca, Fe y Na, y


entre los segundos podemos citar Cr, Co, Cu, Mn, Mo, Ni, Se, W, V, Zn. Algunos
organismos, adems de los minerales, necesitan muy pequeas cantidades de nutrientes
de naturaleza orgnica llamados factores de crecimiento. stos son vitaminas,
aminocidos, purinas y pirimidinas. Los organismos que tienen tales requerimientos se
denominan auxtrofos para diferenciarse de los prottrofos que son independientes de
tales factores. Estos dos conceptos no son suficientes para caracterizar los distintos tipos
de nutricin existentes en los microorganismos.

Dijimos que la nutricin es el proceso por el cual los seres vivos toman, del medio donde
habitan, los nutrientes que necesitan para crecer. Estos nutrientes se requieren para dos
fines: energticos (reacciones de mantenimiento) y biosintticos (reacciones plsticas o
anabolismo)

Puesto que, como mencionamos, la nutricin presenta un aspecto de aprovisionamiento


de energa y otro de suministro de materiales para la sntesis celular, podemos considerar
dos clasificaciones. Desde el punto de vista de los fines del aprovisionamiento de
energa, las bacterias se pueden dividir en fottrofas cuando utilizan la luz como fuente de
energa (algas y cianobacterias) y quimitrofas si utilizan compuestos qumicos como
fuente de energa.

Dentro de stas, se encuentran las quimiolittrofas que slo requieren sustancias


inorgnicas sencillas como H2 S, S, NH3 , NO2 - , Fe2+, etc. (Nitrosomona, Nitrobacter,
Gallionella) y quimiorgantrofas que requieren compuestos orgnicos como hidratos de
carbono, hidrocarburos, lpidos, protenas, alcoholes, etc. (Enterobacter, la mayora de las
cultivadas en laboratorios).

Desde el punto de vista biosinttico, las bacterias se pueden dividir en auttrofas que
crecen sintetizando sus materiales a partir de sustancias inorgnicas sencillas.
Usualmente el concepto de autotrofa se limita a la capacidad de utilizar el CO2 como
fuente de carbono (clorofitas, cianofitas, Thiobacillus denitrificans, Nitrobacter,
Nitrosomona). En el extremo opuesto se encuentran las hetertrofas cuya fuente de
carbono es orgnica (Lactobacillus, Serratia, etc.).

Existe una gama de situaciones intermedias con respecto a la utilizacin de fuentes de


carbono y nitrgeno. Por ejemplo, las especies pertenecientes al gnero Pseudomonas
utilizan compuestos orgnicos e inorgnicos como fuente de C, y NH3 , N2 , NO2 - y NO3
- como fuente de nitrgeno. Como se mencion en prrafos anteriores, el oxgeno es un
macronutriente y los microorganismos se pueden dividir en cuatro grupos sobre la base
del papel que juega el O2 en su nutricin.

Las bacterias aerobias necesitan O2 para crecer; algunas de ellas requieren presiones de
oxgeno inferiores a la atmosfrica (2 a 10% de O2 , en lugar de 20%) y se conocen como
microaerfilas. Las anaerobias facultativas pueden realizar metabolismo energtico

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 11


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

aerobio (respiracin aerobia) o anaerobio (respiracin anaerobia y fermentacin),


dependiendo del ambiente, la disponibilidad de oxgeno y la concentracin de nutrientes
(por ej. las enterobacterias como E. coli).

Las bacterias anaerobias estrictas son aquellas para las cuales el oxgeno resulta txico
(por ejemplo Clostridium). Las bacterias anaerobias aerotolerantes al igual que las
anteriores, presentan un metabolismo energtico anaerobio (fermentacin), pero soportan
el oxgeno debido a que poseen enzimas detoxificantes (por ej. Streptococcus). El
conocimiento de la nutricin microbiana permite el cultivo de los microorganismos en el
laboratorio.

En general, como se ha mencionado, todos los microorganismos tienen requerimientos de


macro y micronutrientes semejantes, aunque la forma en que cada uno de ellos es
captado y su cantidad relativa pueden variar mucho entre los diferentes gneros. En el
laboratorio, el desarrollo de los microorganismos se realiza en medios de cultivos que son
ambientes artificiales diseados por el hombre para proporcionar todas las sustancias
necesarias para el crecimiento microbiano.

Los medios de cultivo se clasifican en:

a) Sintticos o definidos:

Contienen concentraciones conocidas de sustancias qumicas puras, de


naturaleza orgnica y/o inorgnica. La composicin de un medio sinttico depende
del microorganismo que se quiera cultivar; as un medio definido para una bacteria
con gran capacidad biosinttica ser ms simple que el de otra bacteria con menor
posibilidad de biosntesis.

b) Complejos o indefinidos:

Estn constituidos por ingredientes de alta calidad nutricional, pero de


composicin qumica desconocida ya que son el producto resultante de infusiones
y extractos de sustancias naturales complejas. Se usan digeridos crudos de
casena (protena de leche), hgado, levadura, carne, soja, sangre, etc. Sin
embargo, con ellos no se tiene un control nutricional preciso.

Segn la finalidad para la cual fueron formulados, los medios de cultivo se pueden
clasificar en:

1) Enriquecidos:

Son medios complejos o sintticos con aditivos adicionales para favorecer el


crecimiento de determinados microorganismos (particularmente hetertrofos
exigentes). Se adicionan al medio de cultivo sustancias nutritivas tales como
azcares, sangre, suero, extractos de tejidos de animales y plantas.

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 12


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

2) Selectivos:

Son aquellos que permiten por su diseo el crecimiento especfico de un


determinado microorganismo o grupo de microorganismos e impiden
mayoritariamente el desarrollo de los dems. Estos medios son de gran
utilidad para el aislamiento de microorganismos a partir de poblaciones
microbianas mixtas.
Se incorporan ciertas sustancias que otorgan la selectividad buscada al medio.
Por ejemplo el agregado de lactosa, bilis, NaCl, azida, taurocolato,
antibiticos, permite el desarrollo de un determinado grupo de
microorganismos impidiendo el desarrollo de otros.

3) Diferenciales:

Son aquellos que permiten distinguir a simple vista dos o ms tipos de


bacterias en funcin de su distinto comportamiento respecto de algn nutriente
del medio. Ese comportamiento diferencial se traduce normalmente en un
viraje de color de una sustancia indicadora presente en el medio. Poseen en
su composicin un reactivo o sustancia qumica que al combinarse con algn
producto del metabolismo origina una coloracin caracterstica.

Por ejemplo, el desarrollo de E. coli en medio Endo da colonias rojas ya que


la fucsina decolorada con bisulfito de sodio al combinarse con los aldehdos
provenientes del metabolismo bacteriano de lactosa, imprime coloracin roja a
la colonia.

4) Selectivos-Diferenciales:

Representan una combinacin de los dos ltimos medios. Permiten el


desarrollo de una bacteria o un tipo bacteriano y al mismo tiempo producen
una coloracin caracterstica del organismo en estudio.

5) Electivos:

Favorecen el desarrollo de una especie bacteriana y las restantes crecen


poco y lentamente. Cualquiera sea el tipo de medio, se pueden preparar para
ser usados en estado lquido, slido o semislido.

Los medios de cultivo lquidos se conocen como caldos y a partir de ellos, por
el agregado de un agente solidificante estable (agar), se preparan medios de
consistencia slida o semislida, que se denominan medios slidos o
agarizados.

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 13


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

El gelificante ms usado es el agar-agar en una concentracin de 1,5-2% y


0,7% para el slido y semislido respectivamente. Presenta la gran ventaja
que una vez gelificado, no funde hasta cerca de los 100o C, lo que permite su
uso para la mayora de las bacterias y adems son muy pocos los
microorganismos que lo hidrolizan (agarolticos) como ocurre con la gelatina.
Un medio de cultivo lquido generalmente se fracciona en tubos tapa rosca o
en matraces cnicos con tapn de algodn y el desarrollo de los
microorganismos se observa macroscpicamente por enturbiamiento del
medio.

Los medios slidos se disponen en cajas de Petri de vidrio o plstico con tapa,
donde cada clula microbiana por divisiones sucesivas da origen a masas
visibles denominadas colonias.

Este hecho es el que permite cuantificar los microorganismos presentes en


muestras, a partir de las cuales se realizan diluciones, siembras e
incubaciones, basndose en la premisa que cada colonia se origina de una
clula. El medio de cultivo requiere una esterilizacin, inmediatamente
despus de su preparacin, para eliminar los microorganismos contaminantes;
esto se hace normalmente por calor hmedo a menos que en su composicin,
el medio contenga sustancias termolbiles.

Su manipulacin posterior, para mantener las condiciones de asepsia,


requiere ciertas precauciones, por ejemplo trabajar en flujos laminares o cerca
de llama de mecheros. La transferencia de un cultivo desde un recipiente a
otro se lleva a cabo con pipeta estril o con ansa o aguja previamente
esterilizadas por incineracin a la llama. Los medios de cultivos agarizados
son utilizados para el aislamiento microbiano a partir de muestras donde
coexisten diferentes poblaciones, las que posteriormente se siembran en
medios de cultivos lquidos adecuados para obtener un crecimiento mximo.
Tanto en los medios artificiales de laboratorio como en el ambiente natural, la
nutricin de la clula lleva inicialmente a un aumento de tamao y peso que
precede a la divisin celular.

En la mayora de los microorganismos, el crecimiento contina hasta que la


clula se divide en dos clulas hijas mediante el proceso de fisin binaria, el
cual conduce al crecimiento de las poblaciones. Es difcil estudiar el
crecimiento de la clula individual, especialmente en los microorganismos,
debido a que los mtodos analticos no son los suficientemente sensibles
como para ser aplicados a estructuras tan pequeas. Es por esto que
habitualmente para evaluar el crecimiento se analiza el aumento de la
poblacin microbiana.

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 14


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

El crecimiento de una poblacin tiene lugar en forma exponencial. Una clula


se divide en dos clulas hijas y luego stas se dividen a su vez en dos nuevas
clulas, o sea que en cada perodo de divisin, la poblacin se duplica por lo
que la multiplicacin corresponde a una progresin geomtrica:

20 21 22 23 2n

. El intervalo de tiempo requerido para que una poblacin se duplique se


define como tiempo de generacin o tiempo de duplicacin y se representa
con la letra g. No todas las bacterias tienen el mismo tiempo de generacin.

Para algunas, como E. coli, g es 20 min y para otras, como Nitrosomona y


Nitrobacter, g es mucho mayor (5-10 h). El tiempo de generacin depende de
los nutrientes y de las condiciones fisicoqumicas del medio.
A pesar que las bacterias son capaces de crecer en un amplio rango de
condiciones ambientales y utilizar diversos nutrientes, el crecimiento mximo,
para una dada especie, se lleva a cabo bajo condiciones ptimas de pH y
temperatura.

El mtodo ms usado para determinar el tiempo de generacin consiste en


inocular el medio de cultivo apropiado con las clulas bajo estudio. Al cabo de
determinados intervalos de tiempo, bajo condiciones ptimas, se toman
muestras para el recuento de microorganismos. Si se define a g como el
cociente entre el tiempo transcurrido (t) y el nmero de divisiones (n) que
ocurrieron en ese tiempo:


= (1)

Teniendo en cuenta que luego de n divisiones, el nmero de clulas ser:

= (2)

donde x es el nmero de clulas obtenidas en el tiempo t y x 0 es el nmero de clulas


iniciales.

De las ecuaciones (1) y (2), se puede calcular el tiempo de generacin:

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 15


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017


=
(3)
[ ]

Otro parmetro que permite analizar el crecimiento exponencial es la velocidad de


crecimiento que se representa con la letra k y se define como el nmero de generaciones
que ocurren en un tiempo t:


[, ]

=
= =
(4)

La velocidad de crecimiento k vara con la naturaleza y concentracin de los nutrientes,


pH, temperatura, fuerza inica del medio, etc., adems de factores genticos.

El crecimiento de una poblacin bacteriana durante un dado perodo de tiempo se


representa grficamente como el log del nmero de clulas en funcin del tiempo (figura
2).

En la figura 2 se distinguen cuatro fases: fase de latencia o fase lag (a); fase exponencial
o fase logartmica (b); fase estacionaria (c) y fase de muerte (d). Entre cada una de estas
fases existe un perodo de transicin que representa el tiempo requerido para que todas
las clulas entren en una nueva fase.

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 16


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

Al inicio del crecimiento, los microorganismos requieren un perodo de adaptacin al


nuevo ambiente. Esta es la fase de latencia o fase lag. En ella, las clulas sintetizan
enzimas involucradas en el metabolismo de los nutrientes disponibles, se incrementa la
sntesis de macromolculas como RNA y protenas.

Sin embargo, la sntesis de DNA permanece constante y las clulas no se dividen (k = 0).
La longitud de la fase lag depende del estado fisiolgico y gentico del microorganismo al
ser introducido en el medio de crecimiento.

Si las clulas provienen de un medio de cultivo diferente, o de un cultivo agotado (viejo)


con acumulacin de metabolitos txicos para las clulas, stas requerirn mayor tiempo
para reiniciar el crecimiento activo y presentarn una fase lag larga. En contraposicin, si
las clulas provienen de un medio idntico y han sido obtenidas de un cultivo joven, la
fase de latencia ser corta o inexistente.

Existen otros factores que pueden influir sobre la fase de latencia: cantidad de
microorganismos sembrados (inculo), dao que pudieron sufrir las clulas por la accin
de radiaciones, calor, sustancias antimicrobianas, etc.

En la fase logartmica o fase exponencial, las clulas se dividen regularmente segn el


tiempo de generacin de cada especie. Por ejemplo, E. coli en un determinado medio de
cultivo puede dividirse cada 20 min durante la fase exponencial, mientras que si el
crecimiento se produce en un medio ms pobre, la divisin puede suceder cada 30 min o
ms.

En esta fase, y en condiciones apropiadas, la velocidad de crecimiento es constante y


mxima, y de esta manera el valor de k para esta fase es el adecuado para estudiar el
efecto de los factores ambientales, la utilizacin de distintos sustratos, etc.

Durante esta fase, la poblacin total es casi uniforme en lo que se refiere a composicin
qumica de las clulas, actividad metablica y otros caracteres fisiolgicos. Las clulas
son viables y su tamao constante.

Como consecuencia del agotamiento de nutrientes o la acumulacin de productos txicos


del metabolismo, disminuye la velocidad de crecimiento hasta que llega a detenerse (k =
0). En este punto, se dice que el cultivo est en fase estacionaria.

La transicin entre la fase log y estacionaria, implica una etapa de crecimiento


desequilibrado (crecimiento no balanceado) durante el cual los componentes celulares
son sintetizados a diferentes velocidades. En consecuencia, las clulas en fase
estacionaria tienen una composicin qumica diferente a la de las clulas en fase
exponencial.

El nmero de clulas viables permanece constante, porque mientras algunas de ellas se


dividen, otras mueren. Las clulas viables continan produciendo cidos y productos
txicos. Algunas clulas muertas se lisan y liberan enzimas (proteasas, nucleasas y

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 17


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

lipasas) que degradan las macromolculas a molculas ms pequeas, las que a su vez
sern usadas por las clulas vivas.

Esta fase puede extenderse desde horas hasta varios das dependiendo de la especie
bacteriana. Si la incubacin del cultivo se prolonga varias horas despus que la poblacin
ha alcanzado la fase estacionaria, las clulas alcanzarn la fase de muerte que se
caracteriza porque k es constante, indicando que el nmero de clulas vivas decrece con
el tiempo en progresin geomtrica.

La velocidad de muerte y la duracin de esta fase varan en las distintas especies


bacterianas. En ciertos casos, la muerte se acompaa de lisis celular que se manifiesta
por una disminucin del nmero de clulas viables y masa celular. Cuando no hay lisis,
decrece el nmero de clulas viables mientras que la masa celular permanece constante.

La medicin del crecimiento microbiano implica distinguir entre el nmero de clulas


viables y el nmero de clulas totales.

El segundo incluye clulas vivas y muertas, mientras el primero incluye slo las clulas
vivas. Para distinguir entre ambos tipos de clulas se utilizan mtodos fsicos y qumicos.

Frecuentemente pueden correlacionarse los datos obtenidos a partir de ms de un


mtodo. Algunas de las tcnicas empleadas se muestran en la tabla 2. A ttulo
informativo, se resumen dos de los mtodos ms empleados.

Recuento en medio slido:

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 18


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

El recuento de colonias es la forma ms prctica para distinguir clulas viables y no


viables en una suspensin bacteriana. Cada bacteria viable da lugar a la formacin de
una colonia despus de la incubacin en un medio agarizado apropiado. Se diluye la
muestra, se toma un volumen determinado y se siembra en un medio agarizado contenido
en cajas de Petri. Se incuba y una vez desarrollado el cultivo, se cuenta el nmero de
colonias expresndose el resultado como UFC mL-1 (unidades formadoras de colonia por
mL).

Turbidimetra:

Las bacterias poseen un elevado ndice de refraccin que permite la dispersin de la luz
que incide sobre ellas y el crecimiento queda determinado por el enturbiamiento originado
en un medio lquido. Debido a los colores de los medios de cultivo, generalmente se usan
longitudes de onda entre 490 y 660 nm. Esta tcnica es de fcil ejecucin y da resultados
inmediatos, y se la conoce vulgarmente como mtodo DO (densidad ptica).

El desarrollo de un microorganismo en un ambiente, sea ste su ambiente natural o un


medio de cultivo de laboratorio, est determinado por los nutrientes disponibles y las
condiciones fsicoqumicas. Son muchos los factores fsicoqumicos que pueden afectar el
crecimiento microbiano, entre los cuales los ms importantes son: temperatura, pH,
biodisponibilidad de agua, presin osmtica, disponibilidad de O2 , tensin superficial y
radiaciones.

Ellos modifican la velocidad de crecimiento de los microorganismos, provocando cambios


que, a determinados valores de dichos factores pueden llegar a ocasionar la detencin del
crecimiento e incluso su muerte. Ninguno de los factores ambientales acta
independientemente y un cambio en uno de ellos puede afectar la accin del otro. As
como los requerimientos nutricionales son diferentes para los distintos microorganismos,
tambin lo son las condiciones fisicoqumicas adecuadas para su desarrollo, as se
explica la variada distribucin de los mismos en la naturaleza.

Conocer la respuesta de los microorganismos a su medio ambiente es importante para


darles condiciones ptimas de desarrollo o, por el contrario, para inhibir su crecimiento. Es
decir, permite ejercer un control del crecimiento microbiano.

La temperatura es uno de los factores ambientales ms importantes por su amplia


aplicacin. Temperaturas extremadamente bajas y extremadamente elevadas, se utilizan
de manera corriente para la conservacin de microorganismos o para provocar su muerte
respectivamente. La razn para ello es que a temperaturas extremadamente bajas, tanto

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 19


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

la membrana plasmtica como el citoplasma microbiano pierden fluidez disminuyendo o


deteniendo completamente el transporte de nutrientes desde el medio externo y las
reacciones enzimticas propias del metabolismo que permitiran la utilizacin de estos
nutrientes.

Por el contrario, temperaturas demasiado elevadas, inactivan sistemas enzimticos,


desnaturalizan protenas y daan las envolturas celulares llevando a la lisis trmica.
Existe, entre ambos extremos, un intervalo de temperatura de crecimiento en el cual un
dado microorganismo es capaz de incorporar nutrientes del medio ambiente, conducirlos
por los caminos catablicos y anablicos necesarios para el crecimiento y divisin celular,
que da como resultado el crecimiento de una poblacin.

Dentro de este intervalo, se distingue una temperatura ptima en la que tanto el transporte
como el metabolismo alcanzan la mxima velocidad en el ambiente en el que se
encuentra el microorganismo. Los tres valores de temperatura, mnima, ptima y mxima,
se conocen como temperaturas cardinales.

En base a ellas podemos clasificar los microorganismos en grupos compuestos por


organismos muy diferentes entre s pero que presentan gran similitud en su
comportamiento frente a la temperatura (tabla 3).

El efecto letal, de temperaturas superiores al mximo tolerado para el crecimiento, se


determina calculando la tasa de muerte trmica o punto de muerte trmica que se define

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 20


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

como la menor temperatura que mata a toda la poblacin en 10 minutos. Otro factor
importante para el crecimiento microbiano es la concentracin de iones hidrgeno.

En general, los ambientes naturales tienen un pH comprendido entre 5 y 9, y la mayora


de los microorganismos crecen dentro de esos valores. Sin embargo, algunos pueden
desarrollar a valores de pH inferiores o superiores a los indicados.

De acuerdo al rango de pH en el que es posible su desarrollo, se los clasifica en tres


grupos, como muestra la tabla 4.

Los valores de pH superiores e inferiores al rango que corresponde a un dado


microorganismo son nocivos, ya que afectan la estabilidad de la membrana plasmtica,
inhiben enzimas, y alteran el transporte de solutos y la nutricin. Muchos nutrientes
ingresan a las clulas atravesando la membrana plasmtica por transporte pasivo, el que
slo puede llevarse a cabo si los nutrientes estn en su forma no ionizada.

El pH del ambiente puede tener un efecto nocivo indirecto sobre los microorganismos,
produciendo ionizacin de algunos nutrientes e impidiendo su utilizacin. Todos los
microorganismos poseen mecanismos de regulacin del pH citoplasmtico que les
permite mantener su valor constante.

El mantenimiento de un pH constante en el citoplasma es muy importante para la


supervivencia de los microorganismos ya que la acidificacin o alcalinizacin del mismo
lleva a la desnaturalizacin de componentes vitales de la clula (protenas a pH bajo y
cidos nucleicos a pH elevado).

ste es el efecto nocivo directo del pH del ambiente. Todos los microorganismos
requieren agua para vivir; y la disponibilidad de agua se expresa como actividad de agua
(aw). La actividad est dada por la presin de vapor de agua en el aire que se encuentra
en equilibrio con una solucin o sustancia, con relacin a la presin de vapor del agua
pura.

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 21


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

Su valor vara de 0 a 1, siendo ms alto cunto ms agua libre tiene el ambiente. En el


ambiente en el que desarrollan los microorganismos, no toda el agua est disponible. La
actividad de agua es alterada por dos efectos: el osmtico (interaccin con solutos) y el
mtrico (adsorcin a superficies). Por ambos efectos, la disponibilidad de agua puede ser
baja, y en ese caso, los microorganismos tienen dificultades para incorporar nutrientes,
limitando esto su desarrollo.

Segn el rango de aw al que crecen, los microorganismos se clasifican en: normales


(aw=1-0,95) como Streptococcus, osmotolerantes (aw=0,95-0,80) como Staphylococcus,
osmfilos (aw=0,80-0,75) y osmfilos extremos (aw=0,75-0,63).

Los ambientes de alta osmolaridad contienen principalmente altas concentraciones de


cloruro de sodio o azcares.

Los microorganismos que toleran o requieren NaCl se pueden clasificar en halotolerantes


(toleran elevadas concentraciones de ClNa pero no lo requieren, por ej. Staphylococcus
aureus), halfilos moderados (suelen ser bacterias marinas que viven en concentraciones
NaCl igual a 0,5 M y tienen requerimientos concretos de aw equivalente a la de agua de
mar, as como concentraciones determinadas de iones Na+ ), halfilos extremos o
hiperhalfilos (por ej. Halobacterium y Halococcus que requieren concentraciones
saturantes de sales, 4 a 7 M de NaCl).

La naturaleza de las paredes celulares favorece la ubicacin de las bacterias en la


superficie del lquido, para optimizar la energa superficial. En esas condiciones, la
deplecin local de nutrientes puede ocurrir rpidamente; se establecen gradientes
pronunciados de nutrientes y de oxgeno, en direcciones opuestas. Para evitar estos
efectos se utiliza, en los medios de cultivo, tensoactivos o surfactantes que reducen la
tensin superficial y permiten el desarrollo de los microorganismos de manera uniforme en
todo el medio. Al reducir la tensin superficial, el O2 difunde ms fcilmente llegando
hasta el fondo de los tubos con medio lquido.

Los grumos o agregados que forman algunos microorganismos durante el crecimiento,


tambin desaparecen con el uso de estos agentes, favoreciendo la nutricin. El
surfactante ms comnmente usado es un detergente no-inico, el Tween 80. En su
molcula tiene un cuerpo carbonado (hidrofbico) y una cabeza polar (hidroflica) que
recuerda a los fosfolpidos de membrana.

Usados en concentracin adecuada favorecen el desarrollo de los microorganismos, pero


en exceso, producen daos en la membrana celular intercalndose entre los fosfolpidos.

Las radiaciones UV y las radiaciones de menor longitud de onda (ionizantes) tienen


fuertes efectos sobre los sistemas biolgicos, tanto mutacionales como letales.

El efecto letal de estas radiaciones es dosis dependendiente, relacionada con el tiempo


de exposicin y con las condiciones experimentales; adems depende del estado del
organismo (siendo ms efectivas en fase exponencial que en fase lag o estacionaria) y de
las condiciones ambientales durante la exposicin

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 22


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

3. Microorganismos Presentes en Aguas Naturales

La variabilidad microbiolgica de las aguas naturales abarca numerosos organismos e


incluye clulas eucariotas (algas, protozoarios y hongos), clulas procariotas (bacterias) y
virus (microorganismos con capacidad de sntesis nula).

Algas

Estos microorganismos contienen necesariamente clorofila para la actividad fotosinttica,


sin embargo el color verde puede estar enmascarado por otros pigmentos (carotenoides)
presentes. Son aerobias, y en ambientes con poco oxgeno, mueren, flotan y se
descomponen produciendo mal olor.

Podemos encontrar las siguientes familias de algas:

Chlorophyta o algas verdes que huelen a pescado o hierba.

Cyanophyta o algas verdes azuladas con olores desagradables que pueden


producir sustancias txicas.

Chrysophita son de color amarillo verdoso y a menudo generan olores aromticos


(geranios) o huelen a pescado, por ej. Aulococeira y Cyclotella.

Protozoarios

Frecuentemente en el agua contaminada con heces se encuentran dos protozoarios


parsitos con incidencia en salud humana, responsables de epidemias:

Giardia lamblia:

es flagelado con un tamao de 15 m y se transmite al hombre a travs de agua


contaminada con materia fecal. Las clulas del protozoario producen un estado de reposo
denominado quiste.

Los quistes al ser ingeridos germinan y causan giardiasis, enfermedad caracterizada por
diarreas, calambres intestinales, flatulencia, nauseas, sntomas que pueden ser agudos o

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 23


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

crnicos. La giardisis es una de las enfermedades parasitarias de origen hdrico ms


comunes.

Cryptosporidium parvum:

es un parsito del hombre y animales de tamao muy pequeo (2-5m), redondeado que
crece en el interior de las clulas del epitelio mucoso de intestino y estmago. Los quistes
infecciosos producidos por este protozoario poseen una pared muy gruesa.

Los quistes de Cryptosporidium son mucho ms resistentes a la cloracin que los de


Giardia. La criptoposiosis es una infeccin que se caracteriza por dolores estomacales,
nauseas, diarrea y deshidratacin.

Virus

El 87% de las enfermedades virales transmitidas por el agua son causadas por el virus
de la hepatitis (adenovirus y rotavirus).

Bacterias

Ms del 80% de las bacterias descriptas en el Manual de Bergey pueden aislarse del
agua. Teniendo en cuenta la respuesta a la tincin de Gram, a continuacin se mencionan
y describen algunas de las ms importantes. Bacterias Gram negativas Entre las especies
que se han aislado de aguas, podemos mencionar a las pertenecientes a los gneros
Pseudomonas, Flavobacterium, Gallionella, Enterobacteriaceae, Aeromonas, Vibrio,
Achromobacter, Alcaligenes, Bordetella, Neisseria, Moraxella y Acinetobacter.

Las pseudomonas son las ms comunes en napas freticas debido a su versatilidad


respecto a fuentes de carbono, y a sus bajos requerimientos nutricionales. Ellas son
bacilos psicrfilos, presentan flagelos pertricos, producen pigmentos (verde, azul
verdoso, rojo, marrn) y no forman esporas. La morfologa y el hbitat de muchas
pseudomonas coincide con el de bacterias entricas como Escherichia coli pero se
diferencian en que no fermentan azcares.

Segn el Manual de Bergey este grupo admite 7 especies, siendo Pseudomonas


aeruginosa la de mayor relevancia sanitaria, es un patgeno oportunista por excelencia y
el agente etiolgico principal de infecciones en vas urinaria, intestino, odo y heridas. Por
su relativa resistencia al cloro es considerada un indicador de eficiencia de la cloracin.
Su presencia en sistemas de almacenamiento, tanque, y cisternas, responde a un estado
deficiente de dichas instalaciones.

El control de pseudomonas, al igual que el de bacterias aerbicas, debe intensificarse en


redes expuestas a contaminacin o cuando se comprueba cloracin deficiente.
Flavobacterium es un gnero ampliamente distribuido en aguas y suelos. No ha sido
encontrado en sedimentos de acuferos profundos pero si en las aguas que se extraen de
ellos. Por esta razn, se duda si las flavobacterias se encuentran naturalmente en un

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 24


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

acufero o simplemente colonizan el pozo luego de su perforacin. Son bacilos que se


caracterizan por falta de movilidad y produccin de pigmentos de color amarillo.

Los bacilos del gnero Gallionella se caracterizan por ser quimiolittrofas, obtienen
energa por oxidacin de Fe2+ a Fe3+ y la precipitacin usualmente de hidrxidos de (III),
en o sobre las colonias, les otorga una coloracin marrn caracterstica.

Ellas crecen en lugares donde existen mezclas de aguas aerobias y anaerobias, y donde
abunda el ion Fe2+. As, en pozos donde existe una interfaz aero-anaerbica, su
desarrollo causa obstruccin por la precipitacin de oxihidrxidos de hierro (III).

Las enterobacterias o Enterobacteriaceae son las ms importantes dentro de los


anaerbicos facultativos y su presencia en agua est asociada a contaminacin fecal.
Este grupo de bacterias habita naturalmente el intestino de los animales. Son bacilos no
esporulados, no mviles y si lo son es por flagelos de insercin pertrica, con
requerimientos nutricionales relativamente simples.

Generalmente se identifican por su capacidad para fermentar glucosa por va glucoltica


dando cidos como producto final. Escherichia coli, habitante normal del intestino
humano, es utilizada como indicador de contaminacin fecal de aguas. Las cepas
patgenas de E. coli causan infecciones del tracto intestinal (generalmente agudas y no
presentan mayores complicaciones, excepto en nios y adultos con deficiencias
nutricionales).

Otros ejemplos de patgenos humanos de este grupo son Shigella, Salmonella y


Klebsiella. Shigella dysenteriae es causante de la disentera bacilar, Salmonella
typhimurium y typhi producen gastroenteritis y fiebre tifoidea respectivamente. El grupo
Vibrio est integrado por bacilos curvados, anaerobios facultativos, poseen flagelos
polares aunque algunos son pertricos.

Se diferencian de las Pseudomonas en su metabolismo no fermentativo. Estn presentes


en aguas dulces o marinas. Vibrio cholerae, especie ms representativa de este gnero,
es patgeno para humanos y responsable del clera. Su transmisin es casi
exclusivamente por va hdrica. Otras especies patgenas importantes para el hombre que
se pueden encontrar en muestras de agua pertenecen a los gneros Neisseria, Moraxella
y Acinetobacter.

Los cocos del gnero Neisseria, aislados de sedimentos de acuferos aerbicos, son
causantes de gonorrea (Neisseria gonorrhoeae) y meningitis (Neisseria meningitidis). Las
especies de Moraxella y Acinetobacter son bacilos y se transforman en cocos solamente
en la senectud, y por ello se las propone como cocobacilos.

Algunas especies de Moraxella han sido aisladas de aguas profundas originadas de


acuferos aerbicos y representantes del gnero Acinetobacter se encuentran
frecuentemente tambin en aguas subterrneas aerbicas.

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 25


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

Bacterias Gram positivas

No representan un grupo muy difundido en agua, sin embargo incluye algunos patgenos
humanos aislados especialmente de aguas subterrneas. Los cocos ms comunes
pertenecen a los gneros Micrococcus, Staphylococcus y Streptococcus. Los micrococos
y estafilococos son aerobios y tolerantes a altas concentraciones salinas que permite
diferenciarlos de los estreptococos.

Varias especies de los dos primeros son importantes patgenos humanos; aunque no
existe certeza acerca de su habitat original, la bibliografa las considera procedentes de
aguas subterrneas.

El gnero Streptococcus incluye a Enterococcus faecalis, patgeno humano que habita


normalmente en el intestino de hombres y animales por lo que es un indicador de
contaminacin fecal de aguas.

Las bacterias esporulantes, pertenecientes a los gneros Bacillus y Clostridium presentan


metabolismo aerbico y anaerbico respectivamente. A partir de suelos y acuferos
aerbicos se aslan especies incluidas en el gnero Bacillus; y a partir de suelos,
sedimentos, aguas subterrneas anaerobias y ltima porcin del tracto intestinal de
animales se pueden encontrar especies de Clostridium.

Algunas especies son patgenos para animales, generalmente debido a la produccin de


poderosas exotoxinas:

la del Bacillus anthracis, conduce al desarrollo de antrax, enfermedad de animales que


puede transmitirse a humanos (zoonosis) y la del Clostridium tetani que ocasiona una
enfermedad en humanos caracterizada por tetanizacin de msculos, razn por la cual
recibe el nombre de ttano.

4. Bacterias Indicadoras de Contaminacin

Las condiciones bacteriolgicas del agua son fundamentales desde el punto de vista
sanitario. La norma bacteriolgica de calidad establece que el agua debe estar exenta de
patgenos de origen entrico y parasitario intestinal que son los responsables de
transmitir enfermedades como salmonelosis, shigelosis, amebiasis, etc.

Los microorganismos indicadores de contaminacin deben cumplir los siguientes


requisitos: fciles de aislar y crecer en el laboratorio; ser relativamente inocuos para el
hombre y animales; y presencia en agua relacionada, cuali y cuantitativamente con la de
otros microorganismos patgenos de aislamiento ms difcil.

Tres tipos de bacterias califican a tal fin:

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 26


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

Coliformes fecales:

Indican contaminacin fecal.

Aerobias mesfilas:

Determinan efectividad del tratamiento de aguas.

Pseudomonas:

Sealan deterioro en la calidad del agua o una recontaminacin. Desde el punto de vista
bacteriolgico, para definir la potabilidad del agua, es preciso investigar bacterias aerobias
mesfilas y, coliformes totales y fecales. La gran sensibilidad de las bacterias aerobias
msfilas a los agentes de los agentes de cloracin, las ubica como indicadoras de la
eficacia del tratamiento de potabilizacin del agua.

Las bacterias coliformes habitan el tracto intestinal de mamferos y aves, y se


caracterizan por su capacidad de fermentar lactosa a 35C. Los gneros que componen
este grupo son Escherichia, Klebsiella, Enterobacter, Serratia, Citrobacter y Edwardsiella.
Todas pueden existir como saprofitas independientemente, o como microorganismos
intestinales, excepto el gnero Escherichia cuyo origen es slo fecal. Esto ha llevado a
distinguir entre coliformes totales (grupo que incluye a todos los coliformes de cualquier
origen) y coliformes fecales (trmino que designa a los coliformes de origen
exclusivamente intestinal) con capacidad de fermentar lactosa tambin a 44,5C.

La existencia de una contaminacin microbiolgica de origen fecal se restringe a la


presencia de coliformes fecales, mientras que la presencia de coliformes totales que
desarrollan a 35C, slo indica existencia de contaminacin, sin asegurar su origen. Los
enterococos fecales cuyo desarrollo ocurre a 35C se usan como indicadores
complementarios de contaminacin fecal.

La validez de todo examen bacteriolgico se apoya en una apropiada toma de muestra


(recipiente estril de boca ancha y metodologa precisa), y en las adecuadas condiciones
de transporte desde el lugar de la fuente de agua hacia el laboratorio (refrigeracin,
tiempo)

El sistema de conservacin de la muestra debe ser confiable, y la misma analizada


inmediatamente o al cabo de un corto perodo entre extraccin y anlisis.

El anlisis cuantitativo de bacterias indicadoras de contaminacin en una muestra de


agua puede realizarse por dos metodologas diferentes:

Recuento directo de microorganismos cultivables por siembra de la muestra sobre o en


un medio de cultivo agarizado.

Recuento indirecto (basado en clculos estadsticos) despus de sembrar diluciones


seriadas de la muestra en medios de cultivos lquidos especficos. Se considera, al cabo
de una incubacin adecuada, los nmeros de cultivos positivos y negativos.

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 27


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

Esta metodologa se denomina Tcnica de los Tubos Mltiples y los resultados se


expresan como nmero ms probable (NMP) de microorganismos. Adems de otros
mtodos, se puede recurrir a aquellos en los que se aplica biologa molecular como por
ejemplo, la tcnica de hibridacin in situ por fluorescencia (FISH) utilizando sondas
marcadas en base a secuencia nucleotdica del gen 16S.

En este captulo slo se describir el primer mtodo en el cual la muestra se concentra


por filtracin sobre membrana, denominada Tcnica de la Membrana Filtrante. En ella,
se procede a filtrar un volumen determinado de muestra (normalmente 100 mL) a travs
de membranas de steres de celulosa generalmente con dimetro de poros de 0,45 m y
en algunos casos de 0,22 m.

Posteriormente, la membrana se deposita sobre un medio de cultivo selectivo y bajo


condiciones favorables (temperatura y tiempo de incubacin) y sobre la membrana
desarrollan colonias aisladas con aspectos caractersticos que permiten la identificacin y
el recuento. Conociendo el volumen de muestra filtrada es posible determinar el nmero
de UFC por unidad de volumen.

La obtencin de resultados confiables requiere un intercambio de nutrientes a travs de


los poros de la membrana, por ello se debe evitar la filtracin de aguas con alto contenido
de material en suspensin que pueden obstruir las membranas.

Adems, el nmero de colonias desarrolladas sobre la membrana debe ser inferior a un


determinado valor (variable segn los microorganismos y la composicin del medio que
condiciona el tamao de las colonias) generalmente comprendido entre 80 y 100. A
valores superiores, la proximidad de las colonias, puede conducir a resultados inexactos.

Los medios de cultivos usados, las temperaturas y tiempos de incubacin, y el color de las
colonias tpicas de bacterias indicadoras de contaminacin se detallan en la tabla 5.

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 28


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

La importancia de conocer las especies presentes en los sistemas acuosos naturales y el


comportamiento en su ambiente, radica en la posibilidad de desarrollar nuevas
tecnologas que logren su eliminacin y de esta manera controlar enfermedades de origen
hdrico.

CAPITULO II

1.- ANLISIS DE AGUAS

El agua es un lquido anmalo porque es una mezcla de 18 compuestos posibles


derivados de los tres istopos que presenta cada uno de los tomos que componen su
molcula, H2O: 1 H, 2 H y 3 H para el hidrgeno y 16O, 17O y 18O para el oxgeno.

En la prctica es el agua ligera, peso molecular 18 g/mol, el componente ms abundante.


su calor especfico es elevado lo que conlleva la absorcin de grandes cantidades de

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 29


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

calor con pequeas variaciones de la temperatura lo que permite la regulacin de sta en


la Tierra. tiene mayor densidad en estado lquido que en estado slido, es decir, se
expande al solidificar alcanzando el mximo valor a 4C aproximadamente.

Este dato, que podra ser una nimiedad, es muy importante ya que el hielo slido flota
sobre el agua lquida y, adems, a partir de un cierto espesor acta como aislante
impidiendo la congelacin total de la masa de agua (los ros se convertiran en glaciares)
y la muerte de los seres vivos, que se congelaran. desde el punto de vista qumico
debera ser un gas a temperatura ambiente.

Esto no es as por la presencia de enlaces por puente de hidrgeno, los cuales tambin
explican el comportamiento sealado en el epgrafe anterior. Adems, tiene

1. elevada conductividad trmica

2. fuerte poder ionizante

3. elevada constante dielctrica (aislante)

4. gran poder disolvente

Finalmente, el agua tiene la propiedad de producir la disociacin electroltica y la


hidrlisis. A todo lo anterior hay que aadir que es la nica sustancia que se encuentra
sobre la Tierra en los tres estados el componente mayoritario de los seres vivos en los
que juega un papel fundamental.

Las propiedades anteriores, unidas a su abundancia y distribucin hacen del agua el


compuesto ms importante de la superficie terrestre. Otros datos de inters El agua es un
compuesto esencial para la vida, hasta el punto de que sta no sera posible sin ella. Se
utiliza en la alimentacin de los seres vivos, en la agricultura, en la industria, etc. El agua
es el medio en el que se producen la mayora de las reacciones fsicas qumicas y
bioqumicas que son fundamentales para la vida.

El volumen de agua presente en los seres humanos depende de la edad y del tipo de
tejido. El contenido de sta es superior en el hombre que en la mujer y el promedio est
en torno al 65%. Este volumen de agua sirve para transportar sustancias y como
regulador de la temperatura corporal. El aporte diario de agua ha de ser de unos 2 L para
compensar la prdida por la orina, a travs de la piel por sudoracin, en el intercambio
respiratorio y por el intestino.

El principal factor de riesgo para numerosas intoxicaciones e infecciones es el


intercambio fisiolgico del agua, siempre que sta se encuentre alterada, mediante
contaminacin, en sus parmetros fsicos, qumicos o biolgicos. Dependiendo del uso
que se vaya a hacer, es de mximo inters controlar analticamente la calidad del agua.
Pequeos cambios en la presencia de algunas sustancias pueden variar sensiblemente
las propiedades del agua, hacerlas inservibles y hasta peligrosas para la salud.
Abundancia Para hacernos una idea he aqu unos datos:

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 30


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

El volumen total de agua del planeta equivale a 1400 millones de km3 . Si esta cantidad
cayese sobre Espaa la cubrira con un espesor de 2800 km. El 90% no es utilizable por
los seres vivos por estar combinada en la litosfera. El 10% restante se distribuye as:
97.6% en los ocanos; 1.9% en los casquetes polares y glaciares y slo el 0.5% como
agua dulce, la mayor parte (94% en los acuferos). Por tanto, slo el 0.03% son aguas
superficiales libres en la corteza terrestre.

Cerca de 12000 km3 de agua, la mayor parte en forma de vapor, se encuentra en


cualquier momento en la atmsfera. Si todo este vapor se precipitase en forma de agua
en toda la Tierra, sta sera cubierta en su totalidad por slo 2.5 cm de altura.

Cada da se evaporan o transpiran 1120 km3 de agua dentro de la atmsfera. Las


aguas subterrneas, que representan el 0,47 % de los recursos totales, juegan un papel
muy importante como reguladoras de las variaciones pluviomtricas de un lugar. Los
acuferos de aguas subterrneas aportan el 30% del caudal de los ros, mientras que los
embalses slo regulan el 15% de los caudales.

Existen dos tipos de acuferos subterrneos:

1. acuferos libres:

cubiertos por terrenos permeables en los que existen fisuras y los niveles que
contienen pueden variar en funcin de la capacidad de recarga, principalmente a
travs de la superficie. Son mejores reguladores de las variaciones en las
precipitaciones.

2. acuferos cautivos:

cubiertos por terrenos casi impermeables en los que el agua se encuentra cautiva
o presurizada, en cantidades poco variables. Son considerados como minas de
agua y su regeneracin requiere cientos de aos. Hoy da, las reservas de agua
explotables son las que estn poco implicadas en el ciclo del agua, acuferos
cautivos. Se descartan las que estn implicadas en el ciclo hidrolgico, como
lagos, ros, embalses y aguas subterrneas poco profundas. La explotacin de los
recursos no renovables se est llevando a cabo en zonas muy ridas con recursos
renovables escasos y muy explotados. El agua de mar constituye el 97.6 % de los
recursos de agua pero su uso est muy restringido para la actividad humana dada
su elevada concentracin en sales: 3.5%.

Los porcentajes de los compuestos ms abundantes son 2.7% de cloruro sdico


0.3% de cloruro magnsico 0.2% de sulfato magnsico 0.1% de sulfato clcico
0.2% de otras sales

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 31


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

. Llama poderosamente la atencin la ausencia de sales de potasio cuando su


solubilidad es igual o superior a la de la mayora de sales presentes en el agua
marina. Hay varios motivos que lo explican, siendo el ms importante su
desaparicin durante el proceso que transcurre desde la disolucin de los
minerales por los agentes atmosfricos hasta su llegada al mar, debido a que es
uno de los principales nutrientes de los vegetales. Las aguas naturales, bien sean
superficiales o subterrneas, presentan unas caractersticas determinadas que
han sido compatibles con la vida vegetal y animal a lo largo de los siglos.

La progresiva contaminacin debida a la industria, la agricultura o a las


aglomeraciones urbanas, cambia sustancialmente las propiedades del agua y
comporta un nivel de exigencia cada vez mayor en los sistemas de control. Las
filtraciones, los vertidos y la contaminacin atmosfrica (la lluvia cida, por
ejemplo) han originado que, en muchos casos, el agua natural no sea agua
potable. Esto ha originado la necesidad de utilizar parmetros de control. Estos
parmetros dependen de la procedencia del agua y de su uso (consumo humano,
uso industrial, vertidos, etc.).

El control de la calidad de las aguas incluye la problemtica del muestreo (nmero


de muestras, frecuencia, lugares de muestreo), la conservacin de las muestras, la
seleccin de los parmetros de control, la eleccin de los mtodos analticos y el
control de calidad de los anlisis.

1.1-CARACTERSTICAS FSICO-QUMICAS DE LAS AGUAS

Las aguas naturales, al estar en contacto con diferentes agentes (aire, suelo,
vegetacin, subsuelo, etc.), incorporan parte de los mismos por disolucin o
arrastre, o incluso, en el caso de ciertos gases, por intercambio. A esto es preciso
unir la existencia de un gran nmero de seres vivos en el medio acutico que
interrelacionan con el mismo mediante diferentes procesos biolgicos en los que
se consumen y desprenden distintas sustancias.

Esto hace que las aguas dulces pueden presentar un elevado nmero de
sustancias en su composicin qumica natural, dependiendo de diversos factores
tales como las caractersticas de los terrenos atravesados, las concentraciones de
gases disueltos, etc.
Entre los compuestos ms comunes que se pueden encontrar en las aguas
dulces estn: como constituyentes mayoritarios los carbonatos, bicarbonatos,
sulfatos, cloruros y nitratos. como constituyentes minoritarios los fosfatos y
silicatos, metales como elementos traza y gases disueltos como oxgeno,
nitrgeno y dixido de carbono. El agua de lluvia presenta los cationes:

Na+ , K+ , Ca2+, Mg2+ los aniones: HCO3 , Cl , Br , I , SO4 2 , NO3 ,


PO4 3 y dixido de carbono, oxgeno, ozono, nitrgeno, argn, etc.

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 32


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

La composicin qumica natural de las aguas puede verse alterada por


actividades humanas: agrcolas, ganaderas e industriales, principalmente. La
consecuencia es la incorporacin de sustancias de diferente naturaleza a travs
de vertidos de aguas residuales o debido al paso de las aguas por terrenos
tratados con productos agroqumicos o contaminados.

Estas incorporaciones ocasionan la degradacin de la calidad del agua


provocando diferentes efectos negativos como la modificacin de los ecosistemas
acuticos la destruccin de los recursos hidrulicos riesgos para la salud
incremento del coste del tratamiento del agua para su uso dao en instalaciones
(incrustaciones, corrosiones, etc.) destruccin de zonas de recreo. Las aguas
contaminadas presentan compuestos diversos en funcin de su procedencia:
pesticidas, tensoactivos, fenoles, aceites y grasas, metales pesados, etc.

La composicin especfica de un agua determinada influye en propiedades fsicas


tales como densidad, tensin de vapor, viscosidad, conductividad, etc. Los
parmetros de control se pueden agrupar de la siguiente manera:

Fsicos

Caractersticas organolpticas Color, olor, sabor Elementos flotantes Temperatura


Slidos Conductividad Radioactividad

Qumicos

pH Materia Orgnica (Carbono orgnico total ,COT) DBO DQO Nitrgeno y


compuestos derivados (amoniaco, nitratos, nitritos, etc.) Fsforo y compuestos
derivados (fosfatos) Aceites y grasas Hidrocarburos Detergentes Cloro y cloruros
Fluoruros Sulfatos y sulfuros Fenoles Cianuros Haloformos Metales Pesticidas

Gases disueltos

Oxgeno Nitrgeno Dixido de carbono Metano cido sulfhdrico

Biolgicos

Coliformes totales y fecales Estreptococos fecales Salmonellas Enterovirus

Parmetros fsicos

Color

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 33


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

Es el resultado de la presencia de materiales de origen vegetal tales como cidos


hmicos, turba, plancton, y de ciertos metales como hierro, manganeso, cobre y
cromo, disueltos o en suspensin.Constituye un aspecto importante en trminos
de consideraciones estticas. Los efectos del color en la vida acutica se centran
principalmente en aquellos derivados de la disminucin de la transparencia, es
decir que, adems de entorpecer la visin de los peces, provoca un efecto barrera
a la luz solar, traducido en la reduccin de los procesos fotosintticos en el
fitoplancton as como una restriccin de la zona de crecimiento de las plantas
acuticas.

Olor

Es debido a cloro, fenoles, cido sulfhdrico, etc. La percepcin del olor no


constituye una medida, sino una apreciacin, y sta tiene, por lo tanto, un carcter
subjetivo. El olor raramente es indicativo de la presencia de sustancias peligrosas
en el agua, pero s puede indicar la existencia de una elevada actividad biolgica.
Por ello, en el caso de aguas potable, no debera apreciarse olor alguno, no slo
en el momento de tomar la muestra sino a posteriori (10 das en recipiente cerrado
y a 20C).

Turbidez

Es una medida de la dispersin de la luz por el agua como consecuencia de la


presencia en la misma de materiales suspendidos coloidales y/o particulados.
La presencia de materia suspendida en el agua puede indicar un cambio en su
calidad (por ejemplo, contaminacin por microorganismos) y/o la presencia de
sustancias inorgnicas finamente divididas (arena, fango, arcilla) o de materiales
orgnicos. La turbidez es un factor ambiental importante en las aguas naturales, y
afecta al ecosistema ya que la actividad fotosinttica depende en gran medida de
la penetracin de la luz. Las aguas turbias tienen, por supuesto, una actividad
fotosinttica ms dbil, lo que afecta a la produccin de fitoplancton y tambin a la
dinmica del sistema. La turbidez del agua interfiere con usos recreativos y el
aspecto esttico del agua. La turbidez constituye un obstculo para la eficacia de
los tratamientos de desinfeccin, y las partculas en suspensin pueden ocasionar
gustos y olores desagradables por lo que el agua de consumo debe estar exenta
de las mismas. Por otra parte, la transparencia del agua es especialmente
importante en el caso de aguas potables y tambin en el caso de industrias que
producen materiales destinados al consumo humano, tales como las de
alimentacin, fabricacin de bebidas, etc.

Slidos en suspensin

Comprenden a todas aquellas sustancias que estn suspendidas en el seno del


agua y no decantan de forma natural.

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 34


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

Temperatura

La temperatura de las aguas residuales y de masas de agua receptora es


importante a causa de sus efectos sobre la solubilidad del oxgeno y, en
consecuencia, sobre las velocidades en el metabolismo, difusin y reacciones
qumicas y bioqumicas.

El empleo de agua para refrigeracin (por ejemplo en las centrales nucleares)


conlleva un efecto de calentamiento sobre el medio receptor que se denomina
contaminacin trmica. Su alteracin suele deberse a su utilizacin industrial en
procesos de intercambio de calor (refrigeracin). Influye en la solubilidad de los
gases y las sales.

Temperaturas elevadas implican aceleracin de la putrefaccin, con lo que


aumenta la DBO y disminuye el oxgeno disuelto.

Densidad

Las medidas de densidad son necesarias en aguas de alta salinidad para


convertir medidas de volumen en peso. Es prctica comn medir
volumtricamente la cantidad de muestra usada para un anlisis y expresar los
resultados como peso/volumen (por ejemplo, mg/L). Aunque ppm y mg/L slo son
medidas idnticas cuando la densidad de la muestra es 1, para muchas muestras
se acepta el pequeo error que se introduce al considerar que 1 ppm es 1 mg/L.

Slidos

De forma genrica se puede denominar slidos a todos aquellos elementos o


compuestos presentes en el agua que no son agua ni gases. Atendiendo a esta
definicin se pueden clasificar en dos grupos: disueltos y en suspensin. En cada
uno de ellos, a su vez, se pueden diferenciar los slidos voltiles y los no voltiles.
La medida de slidos totales disueltos (TDS) es un ndice de la cantidad de
sustancias disueltas en el agua, y proporciona una indicacin general de la calidad
qumica. TDS es definido analticamente como residuo filtrable total (en mg/L) Los
principales aniones inorgnicos disueltos en el agua son carbonatos, bicarbonatos,
cloruros, sulfatos, fosfatos y nitratos.

Los principales cationes son calcio, magnesio, sodio, potasio, amonio, etc. Por otra
parte, el trmino slidos en suspensin, es descriptivo de la materia orgnica e
inorgnica particulada existente en el agua (aceites, grasas, arcillas, arenas,
fangos, etc.). La presencia de slidos en suspensin participa en el desarrollo de

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 35


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

la turbidez y el color del agua, mientras que la de slidos disueltos determina la


salinidad del medio, y en consecuencia la conductividad del mismo. Por ltimo, la
determinacin de slidos voltiles constituye una medida aproximada de la materia
orgnica, ya que a la temperatura del mtodo analtico empleado el nico
compuesto inorgnico que se descompone es el carbonato magnsico.

Conductividad

La conductividad elctrica de una solucin es una medida de la capacidad de la


misma para transportar la corriente elctrica y permite conocer la concentracin de
especies inicas presentes en el agua. Como la contribucin de cada especie
inica a la conductividad es diferente, su medida da un valor que no est
relacionado de manera sencilla con el nmero total de iones en solucin. Depende
tambin de la temperatura. Est relacionada con el residuo fijo por la expresin
conductividad (S/cm) x f = residuo fijo (mg/L) El valor de f vara entre 0.55 y 0.9.

Radiactividad

La contaminacin radiactiva puede ser originada por los radioelementos naturales,


principalmente uranio, torio y actinio, y sus productos de descomposicin,
procedentes tanto de fuentes naturales, como por las actividades humanas:
pruebas de armamento nuclear, operaciones relacionadas con la obtencin de
energa atmica, extraccin de minerales, generacin de energa, usos industriales
o en medicina, etc. La mayora de los compuestos radioactivos tienen muy baja
solubilidad en agua y son adsorbidos en las superficies de las partculas, por lo
que los niveles de radiactividad en aguas naturales son normalmente bajos.

Por otra parte, las aguas superficiales presentan unas concentraciones de estos
compuestos ms bajas que las aguas subterrneas.

Parmetros qumicos

pH

Se define como el logaritmo de la inversa de la concentracin de protones: pH =


log 1/[H+ ] = - log [H+ ] La medida del pH tiene amplia aplicacin en el campo de
las aguas naturales y residuales. Es una propiedad bsica e importante que afecta
a muchas reacciones qumicas y biolgicas. Valores extremos de pH pueden
originar la muerte de peces, drsticas alteraciones en la flora y fauna, reacciones
secundarias dainas (por ejemplo, cambios en la solubilidad de los nutrientes,
formacin de precipitados, etc.). El pH es un factor muy importante en los sistemas

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 36


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

qumicos y biolgicos de las aguas naturales. El valor del pH compatible con la


vida pisccola est comprendido entre 5 y 9. Sin embargo, para la mayora de las
especies acuticas, la zona de pH favorable se sita entre 6.0 y 7.2. Fuera de este
rango no es posible la vida como consecuencia de la desnaturalizacin de las
protenas. La alcalinidad es la suma total de los componentes en el agua que
tienden a elevar el pH del agua por encima de un cierto valor (bases fuertes y
sales de bases fuertes y cidos dbiles), y, lgicamente, la acidez corresponde a
la suma de componentes que implican un descenso de pH (dixido de carbono,
cidos minerales, cidos poco disociados, sales de cidos fuertes y bases
dbiles). Ambos, alcalinidad y acidez, controlan la capacidad de tamponamiento
del agua, es decir, su capacidad para neutralizar variaciones de pH provocadas
por la adicin de cidos o bases.

El principal sistema regulador del pH en aguas naturales es el sistema carbonato


(dixido de carbono, in bicarbonato y cido carbnico).

Materia orgnica

La materia orgnica existente en el agua, tanto la que se encuentra disuelta como


en forma de partculas, se valora mediante el parmetro carbono orgnico total
(TOC, total organic carbon). Los compuestos orgnicos existentes en el medio
acutico se pueden clasificar en dos grandes grupos atendiendo a su
biodegradabilidad, es decir, a la posibilidad de ser utilizados por microorganismos
como fuente de alimentacin y para su medida se utilizan los parmetros
denominados DQO (Demanda Qumica de Oxgeno) y DBO (Demanda Bioqumica
de Oxgeno), que exponemos a continuacin.

Demanda qumica de oxgeno DQO

Es la cantidad de oxgeno consumido por los cuerpos reductores presentes en el


agua sin la intervencin de los organismos vivos. Efecta la determinacin del
contenido total de materia orgnica oxidable, sea biodegradable o no.

Demanda bioqumica de oxgeno DBO

Permite determinar la materia orgnica biodegradable. Es la cantidad de oxgeno


necesaria para descomponer la materia orgnica presente, por la accin
bioqumica aerobia. Esta transformacin biolgica precisa un tiempo superior a los
20 das, por lo que se ha aceptado, como norma, realizar una incubacin durante 5
das, a 20C, en la oscuridad y fuera del contacto del aire, a un pH de 7-7.5 y en

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 37


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

presencia de nutrientes y oligoelementos que permitan el crecimiento de los


microorganismos. A este parmetro se le denomina DBO5.

Nitrgeno y derivados

Las formas inorgnicas del nitrgeno incluyen nitratos (NO3 ) y nitritos (NO2 ),
amonaco (NH3) y nitrgeno molecular (N2). De forma natural, en el medio
acutico, tambin se producen compuestos orgnicos nitrogenados que contienen
nitrgeno amnico o amdico, constituyendo compuestos heterocclicos tales como
purinas y piridinas.

El amonaco es un gas incoloro a presin y temperatura ambiente, con un olor


picante caracterstico, que es altamente soluble en agua. Cuando se disuelve en
agua se forman iones amonio (NH4 + ), establecindose un equilibrio qumico
entre ambas formas, la no ionizada (amonaco) y la ionizada (amonio). El trmino
amonio total se refiere a la suma de ambas especies. El amonaco es txico para
los peces. La presencia de nitratos proviene de la disolucin de rocas y minerales,
de la descomposicin de materias vegetales y animales y de efluentes industriales.
Tampoco puede descartarse la contaminacin proveniente del lavado de tierras de
labor en donde se utiliza profusamente como componente de abonos y
fertilizantes. En aguas residuales, su presencia es mnima habida cuenta del
estado reductor de este medio.

Por el contrario, la produccin de NO3 en depuradoras de aguas residuales debe


tenerse en cuenta, pues se convierte en factor limitante del crecimiento en
sistemas hdricos si existe abundancia de fsforo, promoviendo fenmenos
indeseables como la eutrofizacin. El nitrgeno Kjeldahl (NTK) mide la cantidad de
nitrgeno amoniacal y de nitrgeno orgnico. Indica el contenido protenico del
agua.

Fsforo y derivados

El fsforo elemental no se encuentra habitualmente en el medio natural, pero los


ortofosfatos, pirofosfatos, metafosfatos, polifosfatos y fosfatos orgnicamente
unidos s se detectan en aguas naturales y residuales. El fsforo es considerado
como un macronutriente esencial, siendo acumulado por una gran variedad de
organismos vivos.

Aceites y grasas

En este grupo se incluyen los aceites y las grasas que se encuentren en estado
libre, ya sean de origen animal, vegetal o mineral, destacando entre estos ltimos
por su especial importancia los derivados del petrleo. La mayora de estos
productos son insolubles en el agua, pero pueden existir en forma emulsionada o

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 38


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

saponificada. Segn su mezcla con los hidrocarburos, dan un aspecto irisado al


agua, as como un sabor y un olor particulares.

Hidrocarburos

Bajo la denominacin de hidrocarburos se encuentran agrupados una serie de


compuestos cuya caracterstica comn es el presentar en su estructura tomos de
carbono y de hidrgeno. Entre todas estas sustancias, se pueden diferenciar dos
grupos que presentan una mayor importancia, los hidrocarburos derivados del
petrleo y los hidrocarburos aromticos policclicos (PAHs).
Estos ltimos son cancergenos.

Detergentes

Como detergentes se designan a las sustancias que poseen unas importantes


propiedades limpiadoras. Se trata de productos complejos constituidos por uno o
varios agentes surfactantes, compuestos minerales (carbonatos, fosfatos,
polifosfatos, perboratos), frecuentemente asociados a materias orgnicas
mejorantes, a enzimas y a secuestrantes.

De todos ellos, los ms caractersticos son los surfactantes, productos qumicos


orgnicos que reducen la tensin superficial del agua y de otros lquidos.

Cloro y cloruros

El cloro elemental es un gas amarillo-verdoso altamente soluble en agua. Cuando


se disuelve en ausencia de sustancias nitrogenadas (con la materia orgnica
nitrogenada forma cloraminas) u otros productos que puedan interferir, el cloro es
rpidamente hidrolizado a cido hipocloroso (HOCl) y cido clorhdrico (HCl). A su
vez el cido clorhdrico se disocia fcilmente a iones hidrgeno y cloruro, mientras
que el cido hipocloroso, que es un cido dbil, se disocia parcialmente en iones
hidrgeno e iones hipoclorito (OCl ). Las proporciones relativas de Cl2, HOCl y
OCl en equilibrio (especies que en conjunto se denominan cloro libre disponible)
se encuentran controladas por el pH, la temperatura y la fuerza inica. El cloro en
agua reacciona fcilmente con las sustancias nitrogenadas para producir mono-,
di- y triaminas, N-cloraminas y N-cloramidas y otros compuestos N-clorados
(conocidos en conjunto como cloro disponible combinado).

Tanto las formas de cloro libre como las de cloro combinado participan en diversas
reacciones con compuestos orgnicos para generar productos clorados. El cloro
que permanece en agua despus de un tratamiento se denomina cloro residual. El
conjunto de cloro libre y cloro combinado se nombra como cloro residual total
(TRC total residual chlorine). La medida de TRC se considera suficiente para
definir las toxicidad sobre los organismos acuticos de agua dulce. El in cloruro

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 39


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

se encuentra ampliamente distribuido en el medio ambiente, generalmente en


forma de cloruro sdico, potsico o clcico.

El gran inconveniente de los cloruros es el sabor desagradable que comunican al


agua. Son tambin susceptibles de ocasionar una corrosin en las canalizaciones
y en los depsitos, en particular para los elementos de acero inoxidable. Fluoruros
La mayora de los fluoruros asociados con cationes monovalentes son solubles en
agua, pero aquellos formados con cationes divalentes son normalmente
insolubles. Sulfatos El in sulfato (SO4 2 ) es la forma oxidada estable del azufre,
siendo muy soluble en agua. Sin embargo, los sulfatos de plomo, bario y estroncio
son insolubles. El sulfato disuelto puede ser reducido a sulfito y volatilizado a la
atmsfera como H2S, precipitado como sales insolubles o incorporado a
organismos vivos. Los sulfatos sirven como fuente de oxgeno a las bacterias, en
condiciones anaerbicas, convirtindose en sulfuro de hidrgeno. Pueden ser
producidos por oxidacin bacteriana de los compuestos azufrados reducidos,
incluyendo sulfuros metlicos y compuestos orgnicos.

Fenoles

Los compuestos fenlicos pueden afectar a las especies pisccolas de diversas


formas: por toxicidad directa tanto a los peces como a los organismos que les
sirven como alimento (son extremadamente txicos) y por disminucin de la
cantidad de oxgeno disponible por la elevada demanda de oxgeno de los
compuestos.

Cianuros

Como cianuros se incluyen una serie de diversos compuestos orgnicos


caracterizados por el grupo CN. Los grmenes aerobios responsables de la
depuracin y los peces son sensibles a un contenido de 0,1 mg/L de HCN.

Haloformos

Los derivados orgnicos de halgenos (C1, F, Br, I) presentes en el agua se


clasifican con el nombre de haloformos. Los compuestos que se han identificado
ms a menudo en agua son los trihalometanos, as como tambin el tetracloruro
de carbono y el dicloroetano.

Metales

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 40


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

Bajo este epgrafe se agrupan los compuestos constituidos por los diferentes
elementos metlicos, por lo cual las caractersticas de los mismos dependen, entre
otros factores, del metal que est incorporado. Desde la perspectiva de los
potenciales efectos que pueden generar, quizs los de mayor importancia son los
compuestos de mercurio y de cadmio. El mercurio puede formar numerosas
especies, algunas con una apreciable solubilidad mientras que otras son bastante
insolubles. La concentracin de mercurio en medios acuosos es relativamente
pequea, encontrndose normalmente unido a materia particulada y al sedimento.
El mercurio presenta una elevada toxicidad potencial, principalmente como
consecuencia de los procesos de bioacumulacin. En las aguas naturales el
cadmio se encuentra normalmente en la forma divalente, formando compuestos
orgnicos e inorgnicos, principalmente como in libre, cloruros y carbonatos. Los
carbonatos, sulfuros, e hidrxidos de cadmio presentan una baja solubilidad en
agua, mientras que la solubilidad del in cadmio disminuye con el incremento de
pH porque se favorece la formacin del hidrxido. El cadmio presenta una
toxicidad elevada con efecto acumulativo. Pesticidas Se clasifican segn sus usos,
en insecticidas, fungicidas, herbicidas, acaricidas, nematocidas, rodenticidas, etc.
Tambin pueden clasificarse atendiendo a sus caractersticas qumicas. Adems
de sustancias minerales (azufre, sulfato de cobre, arseniato de plomo y de calcio),
se emplean particularmente los compuestos orgnicos clorados, como son los
insecticidas: DDT, lindano, aldrn, dieldrn, etc; o los herbicidas derivados de
fenoxicidos. Entre los dems compuestos orgnicos se encuentran
principalmente los steres fosforados utilizados como insecticidas (paratin,
malatin, etc). Pero existen tambin compuestos orgnicos u organometlicos,
cuyas molculas llevan incorporadas grupos funcionales muy variados: derivados
de la urea, de las triacinas, empleados como herbicidas, carbamatos y
ditiocarbamatos utilizados como fungicidas, etc. En el medio acutico, la toxicidad
de los pesticidas vara en funcin de su naturaleza y segn las especies y su
estado de desarrollo (huevo, alevn, adulto), as como dependen del medio en el
que viven las especies pisccolas (contenidos en gases disueltos, temperatura y
pH). Para los peces, los insecticidas clorados son mucho ms txicos (aprx. 100
veces) que los derivados organofosforados. Los herbicidas son mucho menos
txicos que los insecticidas (2000 a 3000 veces menos). Considerados en su
conjunto, los pesticidas fosforados son mucho ms txicos para el hombre y los
mamferos que los pesticidas clorados.

Oxgeno disuelto

Es necesario para la vida de los peces y otros organismos acuticos. El oxgeno


es moderadamente soluble en agua, dependiendo la solubilidad de la temperatura,
la salinidad, la turbulencia del agua y la presin atmosfrica: disminuye cuando
aumenta la temperatura y la salinidad, y cuando disminuye la presin atmosfrica.
La solubilidad del oxgeno atmosfrico en aguas dulces, a saturacin y al nivel del
mar, oscila aproximadamente entre 15 mg/L a 0C y 8 mg/L a 25C.

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 41


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

2.- ANALISIS MICROBIOLOGICO DEL AGUA

2.1.- Parmetros biolgicos del agua:

El agua es un recurso natural necesario para el desarrollo de un gran nmero de


actividades humanas. Su creciente degradacin por disminucin de su calidad implica la
reduccin del nmero de usos que se le da; es por ello, lo que se hace necesario la
realizacin de estudios que permitan determinar la calidad de ese agua. Los anlisis que
se pueden realizar al agua para controlar su calidad son: fsicos, qumicos y
microbiolgicos, en esta ocasin se har una determinacin microbiolgica.

Todos los organismos que se encuentran en el agua son importantes en el momento de


establecer el control de la calidad de la misma sin considerar si tienen su medio natural de
vida en el agua o pertenecen a poblaciones transitorias introducidas por el ser humano; si
su crecimiento lo propician los nutrientes presentes en el escurrimiento natural y en aguas
residuales municipales o lo frenan los venenos procedentes de la actividad agrcola o
industrial; y si tienen capacidad para intoxicar a las personas y a los animales superiores.
Se debe conocer la forma de los patgenos hdricos y determinar su presencia y origen, la
magnitud y oscilacin de su nmero, el curso de su ciclo vital y el ndice de su
supervivencia.

Los parmetros biolgicos en las aguas potables son de mucho inters, los
microorganismos que puede haber en el agua son virus, bacterias, hongos, algas y
protozoos.

Aquellos que son inocuos para el hombre no tienen significacin sanitaria, por lo que el
control microbiolgico del agua se va a centrar en las especies patgenas para el hombre.

Dado que buscar todo tipo de microorganismos patgenos, por su diversidad, es costoso
y complicado y como la relacin patgenos/no patgenos es muy pequea, se realiza un
control del agua a travs de indicadores microbiolgicos de contaminacin.

Hay muchos seres vivos que se emplean como indicadores de la calidad de un agua. As,
segn predominen unos organismos u otros, podremos saber el estado de un agua. Para que
un microorganismo sea considerado como indicador microbiolgico ha de reunir unas
condiciones que son:

Debe ser incapaz de desarrollarse en el agua.

Debe tener una supervivencia en el agua superior a los organismos patgenos.

Debe soportar mejor a los desinfectantes.

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 42


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

Deben ser fciles de aislar, identificar y contar.

Deben ser muy abundantes en heces y escasos en otros medios.

La normativa recoge una serie de anlisis microbiolgicos segn se efecte sobre el agua un
anlisis mnimo:

Coliformes Totales y Fecales; uno normal: los anteriores ms: bacterias aerobias a 37 C,
Estreptococos Fecales y Clostridios Sulfito-Reductores; o completo: los anteriores ms
aerobias a 22 C, microoganismos parsitos y/o patgenos; el anlisis realizado ha sido el
normal.

El agua problema procede de un manantial, vamos a realizar un anlisis microbiolgico normal


y el objetivo va a ser determinar la contaminacin microbiolgica que puede existir, buscar las
causas de esa contaminacin y proponer soluciones al problema

a) Determinacin de microorganismos aerobios mesfilos:

Se determinarn estos microorganismos que son los que se encuentran a temperatura


ambiente en el agua.

Procedimiento:

El mtodo consiste en filtrar a vaco una determinada cantidad de agua que va a ser de 100
mL sobre una membrana filtrante estril depositada con la cuadrcula hacia arriba.

Una vez filtrada el agua, se retira la membrana y se deposita con pinzas estriles sobre una
placa Petri con medio P.C.A., se incuba 37 C 24 -48 horas.

Tras la incubacin se realiza un recuento de las colonias aparecidas, expresndose el


resultado en u.f.c. en 100 mL.

Resultados obtenidos:

recuento de colonias:

Al transcurrir el perodo de incubacin establecido se saca la placa de Petri de la estufa y se


recuentan las colonias crecidas. El nmero de colonias aparecidas es 270 u.f.c. por cada 100
mL de agua problema.

b) Determinacin de Coliformes Totales y Fecales:

Los Coliformes Fecales son un subgrupo de los Coliformes totales, capaz de fermentar la
lactosa a 44 C en vez de 37 C como lo hacen los totales. Aproximadamente el 95% del
grupo de los Coliformes presentes en heces estn formados por Escherichia Coli y ciertas
especies de Klebsiella. Ya que los Coliformes Fecales se encuentran casi exclusivamente en
las heces de los animales de sangre caliente, se considera que reflejan mejor la presencia de

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 43


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

contaminacin fecal. stos ltimos se denominan termotolerantes por su capacidad de


soportar temperaturas ms elevadas. Esta es la caracterstica que diferencia a Coliformes
Totales y Fecales.

La capacidad de los Coliformes fecales de reproducirse fuera del intestino de los animales
homeotrmicos es favorecida por la existencia de condiciones adecuadas de materia orgnica,
pH, humedad Desde hace mucho tiempo se han utilizado como indicador ideal de
contaminacin fecal. Su presencia se interpreta como una indicacin de que los organismos
patgenos pueden estar presentes y su ausencia indica que el agua se halla exenta de
organismos productores de enfermedades.

Procedimiento:

Vamos a seguir el mismo mtodo para la determinacin de los dos tipos de Coliformes, lo
nico que variar ser la temperatura de incubacin de cada determinacin, que para los
Coliformes Totales ser de 37 C y para los fecales ha de ser de 44 C.

Prueba presuntiva:

Para determinar estos Coliformes se va a utilizar el medio de cultivo BGBB (dispuesto en


tubo), que es un medio selectivo y de enriquecimiento ya que inhibe el crecimiento de
microorganismos distintos de los del grupo de los Coliformes a la vez que permite que stos
crezcan sin restriccin, se distribuye el medio en nueve tubos (tres series de tres tubos) con
diez mililitros cada uno de medio de cultivo y echando 10 ml de el agua a la primera serie de
tubos, 1 ml de agua a la segunda serie, y 0,1 ml a la tercera.

Colocaremos en cada tubo una campana Durham para recoger el gas producido y al medio
de cultivo se le habr aadido un indicador cido-base. Estos tubos se incuban a la
temperatura correspondiente segn se trate de Coliformes Totales Fecales durante 24
horas.

Los Coliformes son lactosa positiva, es decir, son capaces de fermentar a la con produccin
de cido y gas, estos signos sern los que buscaremos. La reaccin ser positiva cuando se
produce desprendimiento de gas en la campana Durham por lo menos en un 10% de su
capacidad, y el medio vira a color amarillo debido a formacin de cido. Una reaccin positiva
por dbil que sea, indicar la presencia y coliformes y habr que hacer las pruebas
confirmativas de IMViC. Se aplicar la tcnica del nmero ms probable (NMP).

c) Prueba confirmativa: siembra en EMB Levine:

En los tubos donde se introdujo 0,1 ml de agua problema, o resultados positivos en la prueba
presuntiva ,se introduce un asa de siembra estril y se toma una porcin que va a sembrarse
en estra en una placa Petri con medio EMB Levine.

El EMB Levine contiene eosina y azul de metileno que inhiben parcialmente el crecimiento de
los microorganismos Gram negativos, adems la combinacin de azul de metileno y eosina
permitirn diferenciar microorganismos lactosa positiva de los negativos.

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 44


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

Se incuban los tubos 24 - 48 horas a la temperatura correspondiente segn se trate de


Coliformes Totales Fecales. Los Coliformes apareceran como violetas oscuros y si hubiera
microorganismos lactosa negativos apareceran como colonias incoloras.

d) Pruebas IMViC:

Las bacterias pertenecientes a la familia Enterobacteriaceae, pueden identificarse a travs de


una serie de pruebas bioqumicas, que permiten determinar la presencia o ausencia de ciertas
enzimas y a veces incluso permiten determinar la existencia de una secuencia metablica.
Con este fin se han desarrollado diversos esquemas de clasificacin, uno de los ms
conocidos y utilizados corresponde al IMViC que se desarroll para clasificar especies de la
familia antes mencionada y correspondientes al grupo de bacterias coliformes (bacterias
aerbicas o anaerbicas facultativas, Gram negativos, bacilares, no esporgenas que
producen cido y gas durante la fermentacin de la lactosa).

Consiste en las siguientes pruebas:

- Indol:

El triptfano, aminocido suministrado por una peptona adecuada, se descompone en indol


por accin de algunos microorganismos.

La prctica va a consistir en observar si el microorganismo es capaz de producir indol cuando


est en presencia de agua de peptona. El indol producido es detectado por indol de kovacs
que produce una coloracin al reaccionar con l. Se coge con un asa de siembra, colonias de
la placas de EMB y se siembra en un tubo con agua de peptona.

Se incuba horas a la temperatura correspondiente segn se trate de Coliformes Totales


Fecales, 24-48 horas, pasado el tiempo de incubacin se sacan los tubos de la estufa y se les
aade 1 mL de reactivo indol de Kovacs y se deja reposar.

Si aparece una coloracin roja indica que la prueba es positiva, el microorganismo produce
indol.

- Rojo de metilo:

Esta es una prueba cualitativa de la acidez producida por el crecimiento de una bacteria en
agua de peptona glucosa con tampn fosfato.

Debido a la acidez producida, el medio virar de amarillo a rojo considerando la prueba


positiva al aadir un reactivo.

El procedimiento es el mismo que el del indol, con la diferncia que, en vez de aadir indol de
kovacs, aadimos Rojo de Metilo

- Voges Proskauer:

Algunas bacterias producen acatilmetilcarbimol (producto intermedio en la degradacin de la


glucosa de los hidratos de carbono), que en presencia de KOH y aire, se oxida para dar

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 45


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

diacetilo, que reacciona con -naftol y un producto de descomposicin de la arginina de la


peptona, para producir un color rojo.

En un tubo con agua de peptona y glucosa se siembran colonias aparecidas en las placas
EMB Levine. Se incuba a 37 44 C 24-48 horas, luego se aade 1 mL de reactivo de Voges
Proskauer,que contiene -naftol y KOH, se aade seis gotas de reactivo omehara y dos de
reactivo de Barry, se agita, se deja reposar 10-15 minutos y si aparece una coloracin roja la
prueba es positiva.

- Citrato:

Esta prueba determina la capacidad que presenta el microorganismo problema para utilizar el
citrato como nica fuente de carbono. En un tubo con agar inclinado con Citrato de Simmons,
se siembra una colonia de las aparecidas en EMB en picadura y estra.

Si aparece crecimiento en el slam y si el medio vira de verde a azul (debido a la produccin de


amonaco que lo alcaliniza), el microorganismo es citrato positivo.

Tincin de Gram:

La coloracin de Gram tiene fundamental importancia en la diferenciacin morfolgica y


taxonmica de las bacterias. Las bacterias se clasifican en dos grandes grupos segn
retengan o no el colorante de base usado en la tincin, que es el violeta de genciana o el
cristal violeta:

Las bacterias Gram positivas aparecen con el citoplasma teido uniformemente de color azul
o violeta.

Las bacterias Gram negativas se tien de rojo por el colorante usado como contrastador,
fuchina, safranina.

La diferencia entre unas y otras radica en la composicin qumica de la pared celular y su


permeabilidad. La pared de las Gram negativas es ms delgada y presenta un contenido en
lpidos, grasas, diez veces superior que el de las Gram positivas, lo cual dificulta la tincin y la
retencin del colorante en el citoplasma.

Tomamos una colonia de las aparecidas en EMB Levine y realizamos una tincin diferencial, a
continuacin observamos con el microscopio.

Resultado de la determinacin:

Se han obtenido idnticos resultados tanto en la determinacin de coliformes totales como


fecales y stos han sido: Prueba presuntiva: En los tubos ha aparecido un viraje del color del
medio de cultivo de violeta a amarillo debido a la produccin de cido y en la campana Durhan
puede apreciarse con bastante gas en su interior. Los resultados son positivos en 2 de los 3
primeros tubos,2 de los 3 sundos y 1 de los 3 ltimos (viraje del medio y gas); con estos datos
vamos a las tablas del nmero ms probable (NMP) y tenemos:

Ms de 20 u.f.c. por cada mL de agua problema.

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 46


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

Como sta prueba ha sido positiva, realizaremos las pruebas confirmativas, de haber
resultado negativas las primeras, daramos por terminado el anlisis.

Prueba confirmativa: siembra en EMB Levine:

Tras la incubacin han aparecido colonias de color violeta, tal y como se esperaba. Se pasa a
las pruebas de IMViC para determinar el microorganismo existente.

Pruebas IMViC:

- Indol:

Aparece un anillo rojo bordeando al tubo: Indol positivo:el microorganismo produce indol. En la
figura aparecen de izquierda a derecha: tubo sin inoculacin de bacterias, resultado negativo y
resultado positivo a la derecha.

- Rojo de Metilo:

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 47


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

Tras la incubacin de cuatro das, se aade el reactivo y el tubo se colorea de rojo: Rojo de
metilo positivo; el microorganismo produce acidez en su crecimiento. En la figura aparecen de
izquierda a derecha: tubo sin inoculacin de bacterias, resultado negativo y resultado positivo
a la derecha.

- Voges-Proskauer:

El microorganismo no produce acetilcarbimol al aadirle el reactivo que se detecta con la


aparicin del color rojo, en este caso el resultado es negativo, (tubo del medio). En la figura
aparecen de izquierda a derecha: tubo sin inoculacin de bacterias, resultado negativo y
resultado positivo a la derecha.

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 48


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

- Citrato:

Tras la incubacin se observa que el microorganismo no ha crecido en el slam del tubo (tubo
del centro) y el medio no ha virado de color, por lo que no es capaz de obtener su fuente de
carbono del citrato.

El viraje del color del medio se debera a una produccin de amonaco que alcalinizara el
medio y se habra detectado este aumento de pH con el viraje del color del indicador que
incorpora el medio de cultivo. En la figura aparecen de izquierda a derecha: tubo sin
inoculacin de bacterias, resultado negativo y resultado positivo a la derecha.

El resultado de las pruebas IMViC son:

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 49


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

++--; con esta combinacin vamos a una tabla y como resultado tenemos que el
microorganismo presente en nuestro agua es la Escherichia Coli

Tincin de Gram:

Con esta prueba, hemos observado bacterias bacilares Gram negativas con lo que podemos
confirmar la presencia de Escherichia Coli que responde a estas caractersticas y es el mayor
indicador de contaminacin fecal en el agua.

e) Determinacin de Streptococcus Fecales:

Los Streptococcus Fecales son bacterias anaerbias o aerbias facultativas, conocidas como
bacterias del cido lctico, integrantes de la flora normal de los animales homeotrmicos.
Actualmente se considera que pertenecen al gnero Enterococcus .

Todos los Enterococos presentan alta tolerancia a condiciones ambientales adversas altas o
bajas temperaturas, deshidratacin, salinidad, luz solar), por lo que se suelen emplear para
determinar la contaminacin fecal en aguas de bao martimas, pues son las que mejor
soportan esas condiciones de salinidad.

Los Streptococcus son abundantes en heces de animales, por lo que son muy utilizadas en
zonas donde sea abundante la cra de ganado. Nuestra muestra de agua problema est
tomada en este ambiente por lo que es importante realizar esta prueba.

Procedimiento:

Prueba presuntiva:

Para determinar los Streptococcus Fecales se va a utilizar el medio de cultivo KAA caldo
(Canamicina-Esculina-Azida), que es un caldo de enriquecimiento para Streptococcus D de
Lancefield.

En ese medio de cultivo el sulfato de Canamicina y la Azida sdica inhiben el crecimiento de


la flora acompaante, mientras que los Streptococcus crecen sin restriccin. A su vez los
Streptococcus hidrolizan la Esculina produciendo glucosa y esculetina la cul reacciona con el
NH4 + que lleva el medio y Fe+3 para dar un complejo verde negruzco.

Vamos a sembrar en dos tubos con nueve mL de KAA 1 mL de muestra problema y lo


incubamos 24 horas a 37 C. Si aparece ennegrecimiento, la prueba presuntiva es positiva y
se pasar a las confirmativas.

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 50


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

Prueba confirmativa:

Siembra en KAA Agar:

De los tubos positivos de las pruebas presuntivas se hace una siembra en estra mltiple en
placas KAA Agar, las que se incuban a 37 C 24-48 horas. Si pasado el periodo de incubacin
aparecen colonias rodeadas de halos negros debido a la hidrlisis de la esculina
confirmaremos la presencia de Streptococcus Fecales.

Otras pruebas confirmativas:

- Tincin de Gram:

En el caso de la presencia de Streptococcus Fecales se observarn cocos Gram positivos.

- Crecimiento de colonias crecidas en KAA agar en caldo de cultivo BHI:

Se trata del caldo Cerebro-corazn que tiene la caracterstica que contiene una concentracin
en NaCl de 6,5%. Los Streptococcus crecen en medios con elevada concentracin en sales
minerales, es por lo que son ndice de contaminacin fecal en agua marina, como ya se ha
comentado anteriormente.

- Prueba de la catalasa:

Consiste en observar si un microorganismo es capaz de descomponer el agua oxigenada


(H2O2) produciendo agua (H2O) y oxgeno (O2). Los Streptococcus Fecales son catalasa
negativos luego no metabolizan el H2O2 y no se produce burbujeo debido al desprendimiento
de oxgeno lo que nos indicara que se ha reaccin se ha producido.

Para realizar esta prueba se efectuar un frots con las colonias aparecidas en el caldo BHI
con Streptococcus, en un portaobjetos y nunca con colonias de medios que contengan Azida
sdica. Una vez fijada la extensin se aade H2O2, si aparece un burbujeo, la prueba de la
catalasa ser positiva.

Resultado de la determinacin:

Prueba presuntiva:

Aparece un ennegrecimiento en el tubo, la prueba es positiva. Los Streptococcus han


hidrolizado la esculina produciendo glucosa y esculetina, la cul reaccionan con el NH4 + que
lleva y Fe+3 para dar un complejo verde negruzco.

Prueba confirmativa:

Siembra en KAA Agar:

La prueba resulta positiva: Aparecen colonias rodeadas de halos negros debido a la hidrlisis
de la esculina por ello confirmaremos la presencia de Streptococcus Fecales.

Otras pruebas confirmativas:

- Tincin de Gram:

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 51


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

Se observan cocos Gram positivos que aparecen con el citoplasma teido uniformemente de
color azul o violeta.

- Crecimiento de colonias crecidas en KAA agar en caldo de cultivo BHI:

La prueba es positiva, aparece en el medio de cultivo, los Streptococcus han crecido en este
medio rico en NaCl.

- Prueba de la catalasa:

La prueba ha resultado negativa, es decir, los Streptococcus no tienen la enzima catalasa que
consigue metabolizar el H2O2 a H2O y O2.

f) Determinacin de Clostridios Sulfito Reductores:

Los Clostridios son un gnero de bacterias que se caracterizan por producir esporas
terminales que deforman los bacilos. Son anaerobias y Gram positivos.

Estos microorganismos son importantes por los daos que pueden provocar en las personas y
por los beneficios econmicos que reportan. Los gneros pertenecientes al gnero Clostridium
tienen la caracterstica comn de poder reducir el sulfito a sulfuro, los Clostridios sulfito
reductores se usan en ocasiones como ndice de contaminacin fecal, sobretodo para apreciar
la calidad higinico-sanitaria del agua y productos animales de origen animal.

Este tipo de microorganismos pueden esporas, lo que les confiere una gran resistencia.

La deteccin se basa en el crecimiento de este tipo de bacterias en medios que contienen


Na2SO3 y en su capacidad para reducicirlo a sulfuro, dando lugar, en presencia de hierro,
sulfuro de hierro que es de negro, con lo que la aparicin de este color nos indica que existen
Clostridios Sulfito reductores.

La deteccin y recuento de Clostridios Sulfito reductores se puede hacer de dos formas: -


Investigando la presencia de formas de vida vegetativas y esporuladas conjuntamente. -
Investigando la presencia de formas esporuladas.

Se va a determinar la presencia de formas de vida vegetativas y esporuladas conjuntamente.

Procedimiento:

Determinacin de formas esporuladas y viables:

Se va a utilizar como medio de culltivo el Agar Sulfito-Polimixina- Sulfadiazina (SPS).

Lo primero ser preparar una serie de diluciones decimales.

Se preparan dos tubos con medio, donde se sembrar con pipeta estril en un tubo, un mL de
la dilucin 10-2 y en otro tubo un mL de la dilucin 10-3 .

La siembra se efectuar introduciendo la pipeta hasta el fondo del tubo y depositando el


inculo lentamente hasta antes de llegar a la superficie.

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 52


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

Una vez solidificado el medio de cultivo se aaden 2 mL de ese mismo medio para crear
anaerobiosis. Se incuba a 37 C 48 horas, y pasado el periodo de incubacin se cuentan las
colonias negras aparecidas, ese nmero multiplicado por el factor de dilucin ser el nmero
total de formas vegetativas y esporuladas por gramos mL de muestra.

Resultado de la determinacin:

En el tubo sembrado a partir de la dilucin 10-1 se observa 1 colonia negruzca. En el tubo


sembrado a partir de la dilucin 10-2 no se observa ninguna colonia.

El nmero total de formas vegetativas y esporuladas ser:

1 colonia * 10 (Inverso del factor de dilucin) = 10 formas vegetativas y esporuladas por cada
mL de agua problema.

El color negro de estas colonias es debido a que los Clostridios han reducido el sulfito a
sulfuro, que reacciona con el Fe+2 del medio formando FeS que es negro, por eso las
colonias aparecidas son negras.

g) Conclusiones del anlisis:

El agua constituye un elemento esencial, ya que es indispensable para la vida, por lo que es
necesario llevar un seguimiento de la calidad.

Con este anlisis se ha querido determinar la calidad de un agua tomado de un manantial. El


reglamento que regula la calidad de las aguas (R.D. 140/2003 del 7 de Febrero (B.O.E. n 45
de 21/2/2003)) establece unos lmites de contaminacin que no pueden ser superados y como
puede observarse con los resultados obtenidos, el lmite se supera ampliamente.

BACTERIAS A. M. : 200 u.f.c. / mL

COLIFORMES: 0 u.f.c. / 100 mL.

E. COLI: 0 u.f.c. / 100 mL.

ESTREPTOCOCOS FECALES : 0 u.f.c. / 100 mL.

CLOSTRIDIOS SULFITO REDUCTORES: 0 u.f.c. / 100 mL.

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 53


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

Como resultado hemos obtenido una gran contaminacin microbiolgica del agua, donde no
debera aparecer ningn tipo de contaminacin puesto que se trata de un agua que en
tiempos pasados se ha utilizado para consumo humano, aunque actualmente se conoca la no
potabilidad de la misma.

Durante aos se ha hecho un seguimiento de la calidad del agua analizado y comparando


resultados vemos que los parmetros biolgicos se alejan notablemente de los permitidos a
partir de un determinado momento.

La causa presumible es la ubicacin de unas grandes instalaciones ganaderas, a pocos


metros de distancia, de donde se encuentra el manantial del agua analizado que originaran la
contaminacin. Es normal que aparezca una contaminacin fecal en el agua y la presencia de
Escherichia Coli, que es el mejor indicador de este tipo de contaminacin, as lo confirma.

El problema de la no potabilidad del agua sera solucionado con una buena gestin de los
residuos de las instalaciones ganaderas y someter al manantial a un tratamiento de
potabilizacin.

3.- BIOINDICADORES COMO HERRAMIENTAS PARA DETERMINAR LA CALIDAD


DEL AGUA

Los ecosistemas acuticos mantienen una gran diversidad de organismos, incluso mayor
a los terrestres, por lo que los impactos como la contaminacin inducen a cambios en la
estructura de las comunidades, la funcin biolgica de los sistemas acuticos y al propio
organismo, afectando su ciclo de vida, crecimiento y su condicin reproductiva (Bartra y
Balance, 1996). Por tal motivo, algunos organismos pueden proporcionar informacin de
cambios fsicos y qumicos en el agua, ya que a lo largo del tiempo revelan medicaciones
en la composicin de la comunidad.

La combinacin del rpido crecimiento poblacional humano, la industrializacin y la


urbanizacin son causas directamente asociadas a la contaminacin del agua.

En un inicio la calidad del agua se evalu mediante datos bioqumicos, donde estos
analizan bsicamente los efectos de la contaminacin a corto plazo. Sin embargo, desde
principio del siglo pasado, los mtodos biolgicos para determinar la calidad del agua se
desarrollaron ampliamente en Europa, donde en la dcada de los aos 50 se acelero el
avance de estos estudios, identificando las respuestas que ofrecan plantas y animales
como evidencia directa de la contaminacin.

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 54


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

Por medio de estas investigaciones se encontr que los organismos indicadores de la


calidad del agua determinan los efectos de los impactos en el ecosistema acutico a
travs de un tiempo ms prolongado.

A continuacin se mencionan algunos grupos de organismos que se emplean como


bioindicadores de la calidad del agua:

Bacterias

La presencia de bacterias coliformes son un indicador de contaminacin fecal por


descarga reciente de desechos, a largo plazo son indicadores de la efectividad de
programas de control. Las ventajas que presenta el uso de bacterias como indicadores de
acuerdo con De la Lanza et al. (2000), es que el muestreo de este grupo tiene una
metodologa bien desarrollada y da respuesta rpida a cambios ambientales tales como la
contaminacin, bsicamente por descargas domesticas y municipales

. Fitoplancton

responde rpidamente a los cambios ambientales por su ciclo de vida corto. Estos
cambios alteran la estructura de sus comunidades, repercute en el inters
socioeconmico del sistema acutico en tiempos relativamente cortos, sobre todo por su
papel de productores primarios. Algunas algas microscpicas del fitoplancton muestran
una distribucin amplia, otras, ciertas preferencias ambientales, y unas terceras alta
frecuencia de taxn en aguas fuertemente contaminadas, lo que sugiere su tolerancia o
preferencia por algn compuesto quimico o bioquimico. Si algn taxn se reconoce como
cosmopolita diferenciado, puede evidenciarse cualquier cambio fisico o quimico en las
masas de agua al ocurrir una alteracin por contaminantes. El fitoplancton puede adquirir
mayor resistencia o tolerancia a diversas sustancias, por ejemplo fertilizantes, e
incrementar su desarrollo y abundancia repercutiendo en la eutrofizacin de las aguas.

Macro invertebrados Bentnicos

El conocimiento de las caractersticas y abundancia de los organismos bentnicos en un


sistema acutico es fundamental para relacionarlos con las condiciones del medio. Las
comunidades de macro invertebrados bentnicos en zonas tropicales son muy similares a
las comunidades de zonas templadas. El grupo ms grande de los macro invertebrados
acuticos en aguas continentales son los insectos, los cuales son valiosos indicadores,
considerados los ms diversos en contraste con los peces e insectos terrestres .

De todos los organismos que se encuentran dentro de un sistema acutico, los macro
invertebrados bentnicos ofrecen ventajas para ser usados como indicadores de
contaminacin ya que:

Se encuentran en todos los ecosistemas acuticos, por lo que favorecen los


estudios comparativos.

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 55


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

Su naturaleza sedentaria, permite un anlisis espacial efectivo de los efectos de


las perturbaciones.

Presenta ventajas tcnicas asociadas a los muestreos cuantitativos y anlisis de


las muestras que pueden ser realizados con equipos simples.

La taxonomia de muchos grupos es ampliamente conocida.

Existen numerosos mtodos para el anlisis de datos, como ndices biticos y de


diversidad.

Peces

El primer sistema multimetrico para conocer la calidad del agua fue desarrollado para
aplicarse en peces y se uso como un modelo para utilizarlo en otros organismos como los
macro invertebrados.

Los peces han sido ampliamente utilizados para evaluar la integridad bitica en arroyos y
rios de Norteamrica. Se han adoptado para evaluar la calidad ambiental en lagos y ms
recientemente en estuarios de Norteamrica y Europa.

Numerosos grupos de organismos han sido propuestos como indicadores de la calidad


ambiental en los sistemas acuticos, sin embargo, las comunidades de peces han surgido
como indicadores para los programas de monitoreo biolgico.

En general, los peces son considerados buenos indicadores de la calidad del medio, por
lo que una gran diversidad y abundancia de peces en ros, lagos y mares indican que es
un ambiente sano para todas las dems formas de vida.

Por el contrario una elevada mortandad o un porcentaje alto de peces enfermos podran
ser causados directa o indirectamente por niveles considerables de contaminantes.

Para considerar a un organismo como indicador biolgico, es recomendable que presente


las siguientes caractersticas:

Que sea un organismo relativamente fcil de capturar e identificar.

Que se disponga de una amplia informacin sobre las historias de vida de las
especies

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 56


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

4.- PRODUCTOS FARMACUTICOS EN EL AGUA POTABLE

Resumen de las principales conclusiones y recomendaciones incluidas en el informe


tcnico de la OMS sobre productos farmacuticos en el agua potable y de las
contribuciones de otros expertos que efectuaron la revisin entre homlogos.

4.1.- Antecedentes y mbito


Los productos farmacuticos son sustancias qumicas sintticas o naturales que se
pueden encontrar en medicamentos recetados, de venta libre y veterinarios. Estos
productos contienen ingredientes activos diseados para provocar efectos
farmacolgicos y beneficiar significativamente a la sociedad.
Los frmacos se pueden introducir en las fuentes de agua a travs de aguas residuales
que transportan excretas de personas y pacientes que los hayan utilizado; por
eliminacin inapropiada de medicamentos (por ejemplo, arrojndolos por el inodoro); y
por medio de residuos lquidos agrcolas, incluido el estircol del ganado. Estos

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 57


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

productos se han convertido en una cuestin de creciente preocupacin para el


pblico, debido a que podran llegar a las fuentes de agua potable.

4.2.-Presencia de productos qumicos en el agua potable


El uso generalizado de los productos farmacuticos (tanto recetados como de venta
libre) ha dado lugar a una descarga continua de esos productos y sus metabolitos en
las aguas residuales. Adems, los productos farmacuticos llegan a las fuentes de
agua a travs de los efluentes de instalaciones de fabricacin o produccin
insuficientemente controladas, principalmente las relacionadas con los medicamentos
genricos.
Gracias a las mejoras en la sensibilidad de los mtodos analticos para la medicin de
esos productos qumicos en concentraciones muy bajas, algunos estudios revelaron
concentraciones de trazas de productos farmacuticos en aguas residuales, fuentes de
agua y aguas potables. Por lo general, las concentraciones en aguas superficiales,
subterrneas y parcialmente tratadas eran inferiores a 0.1 g/l (or 100 ng/l), mientras
que en el agua tratada eran inferiores a 0.05 g/l (or 50 ng/l). Estas investigaciones
sugieren que los productos farmacuticos estn presentes, aunque en concentraciones
mnimas, en muchas fuentes de agua que reciben efluentes de aguas residuales.
La presencia de los productos farmacuticos especficos en una fuente de agua puede
variar de un lugar a otro en funcin del tipo de productos farmacuticos y la magnitud
de la descarga en las masas de agua.
Los factores determinantes son los productos farmacuticos recetados, utilizados o
fabricados en la zona, as como el tamao de la poblacin en la cuenca de captacin.
La presencia y la concentracin de productos farmacuticos en las fuentes de agua
receptoras, que son la va principal hacia el agua potable, dependen de la dilucin, la
atenuacin natural y el tipo de tratamiento de aguas residuales aplicado.

4.3.- Evaluacin de riesgos de incorporacin de productos farmacuticos en el


agua potable
Actualmente existen pocos programas de seguimiento sistemtico y estudios
completos sobre la exposicin humana a productos farmacuticos presentes en el
agua potable. Por lo tanto, el limitado nmero de datos disponibles sobre la presencia
de diversos grupos de productos farmacuticos utilizados en la actualidad, as como de
sus metabolitos activos, representa un desafo clave para evaluar el riesgo potencial
para la salud humana derivado de la exposicin a concentraciones muy bajas de
productos farmacuticos en el agua potable.
Sin embargo, en el mbito de la literatura cientfica se han publicado diversos mtodos
de deteccin y priorizacin de productos farmacuticos, que permiten evaluar los
riesgos para la salud humana derivados de la exposicin a esos productos a travs del
agua potable.
Por lo general esos mtodos se rigen por el principio de la "dosis teraputica mnima"
(tambin llamada "dosis mnima efectiva clnicamente") o la ingesta diaria admisible,
junto con factores de seguridad o de incertidumbre relativos a los diferentes grupos de
productos farmacuticos, a fin de deducir un margen de seguridad o de exposicin

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 58


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

entre el peor caso de exposicin observado o previsto, y la dosis teraputica mnima o


la ingesta diaria admisible.
Las observaciones actuales sugieren que es muy poco probable que la exposicin a
niveles muy bajos de productos farmacuticos presentes en el agua potable pueda
suponer riesgos adversos apreciables para la salud humana, ya que las
concentraciones de esos productos detectadas en el agua potable (generalmente en
magnitudes de nanogramos por litro) son varias rdenes de magnitud (por lo general
ms de 1.000 veces y con frecuencia mucho ms an) inferiores a la dosis teraputica
mnima.

4.4.- Medidas de control y gestin de riesgos


Las concentraciones de la gran mayora de productos farmacuticos en el agua se
pueden reducir mediante procesos naturales (por ejemplo, adsorcin sobre los
sedimentos, fotodegradacin solar y degradacin biolgica) o durante los procesos
posteriores de tratamiento de agua potable y aguas residuales. A pesar de sus
propiedades farmacolgicas nicas, la respuesta de los productos farmacuticos al
tratamiento no difiere de la de otros productos qumicos orgnicos, y las tasas de
eliminacin dependen de sus propiedades fsico-qumicas y de la tecnologa utilizada
en el tratamiento.
Los procesos convencionales de tratamiento de agua, por ejemplo, la cloracin,
pueden eliminar aproximadamente el 50% de estos compuestos, mientras que los
procesos de tratamiento ms avanzados, tales como la ozonizacin, la oxidacin
avanzada, el carbn activado, la nanofiltracin y la smosis inversa pueden lograr
mayores tasas de eliminacin; la smosis inversa, por ejemplo, puede eliminar ms del
99% de las grandes molculas de productos farmacuticos.
Como cualquier intervencin de salud pblica, el financiamiento de toda medida para
mejorar la seguridad del agua procede de recursos limitados que se deben asignar
cuidadosamente, teniendo en cuenta sus efectos benficos. Sin embargo, la
introduccin de sistemas adicionales especializados y costosos para el tratamiento de
agua potable, en particular para reducir las concentraciones de trazas de productos
farmacuticos, no se considera necesaria en este momento, dado que el beneficio para
la salud humana sera limitado.
El enfoque ms adecuado para minimizar la presencia de productos farmacuticos en
el agua potable y reducir la exposicin humana consiste en prevenir o reducir su paso
al medio acutico, en la medida que sea razonablemente viable. Esto se puede lograr
mediante una combinacin de medidas preventivas tales como el suministro de mejor
informacin al pblico sobre el uso y la eliminacin racional de los medicamentos y
productos farmacuticos (por ejemplo, evitar arrojar por el inodoro medicamentos no
utilizados); la capacitacin de los prescriptores y la ejecucin sistemtica de programas
de recuperacin de medicamentos.
Sin embargo, en consonancia con el plan para la seguridad del agua basado en el
principio de control de contaminantes en la fuente, sera apropiado tratar de mejorar los
mtodos de tratamiento de aguas residuales con el fin de suprimir de la principal va de
entrada en el medio acutico los productos farmacuticos y otros preocupantes
contaminantes potenciales.

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 59


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

4.5.-Seguimiento de la presencia de productos farmacuticos en el agua


En vista de la falta de disposiciones normativas, el seguimiento regular de la presencia
de productos farmacuticos en las fuentes de agua y el agua potable a escala nacional
no sera conveniente, excepto en casos en los que las circunstancias locales sugirieran
la posibilidad de concentraciones elevadas (por ejemplo, fbricas con descargas de
efluentes en el curso superior de una fuente de agua potable).
En esas circunstancias se puede realizar un seguimiento de investigacin, por ejemplo,
de las aguas superficiales y subterrneas, as como de los efluentes de aguas
residuales, a fin de evaluar los niveles de presencia y exposicin posibles; en caso
necesario, los valores detectados se pueden elaborar junto con una evaluacin de los
riesgos potenciales para la salud humana derivados de la exposicin a los productos
farmacuticos por medio del agua potable.
Sobre la base de los resultados de esa evaluacin de riesgos se podran examinar
posibles medidas de control, como parte de un plan de seguridad del agua. Entre las
dificultades prcticas asociadas con la ejecucin de programas de seguimiento de los
productos farmacuticos se incluyen la falta de protocolos estandarizados de muestreo
y anlisis, los elevados costos y la limitada disponibilidad de los instrumentos de
anlisis necesarios para medir la diversa gama de productos farmacuticos que
podran estar presentes.
Las encuestas de investigacin deberan adaptarse a las circunstancias locales,
teniendo en cuenta los procesos existentes para el tratamiento de aguas residuales y
de agua, y los productos farmacuticos (y sus metabolitos) que se comnmente
prescritos, utilizados o fabricados en la zona de captacin en cuestin. Tales estudios
deberan realizarse con las adecuadas garantas y rigurosas comprobaciones de
calidad, y planificarse con miras a determinar si el agua potable plantea un riesgo
significativo.

4.6.- Falta de conocimientos


Si bien las actuales evaluaciones de riesgos indican que es muy improbable que las
bajsimas concentraciones de productos farmacuticos presentes en el agua potable
planteen un riesgo considerable para la salud humana, existen lagunas de
conocimientos. Entre ellas se incluyen la falta de evaluacin de los riesgos para la
salud humana asociados a la exposicin prolongada a bajas concentraciones de
productos farmacuticos, y los posibles efectos combinados derivados de las mezclas
de productos farmacuticos.
Aunque los mrgenes de exposicin son sustanciales, sera conveniente confirmar que
esos mrgenes son adecuados para potenciales subpoblaciones sensibles, y
caracterizar mejor los riesgos sanitarios, si los hubiere, de las exposiciones de bajo
nivel a largo plazo. Adems, la investigacin futura debera centrarse en el desarrollo
de mtodos o protocolos para priorizar la evaluacin global de todos los riesgos
derivados de productos farmacuticos relacionados con el agua potable.

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 60


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

CAPITULO III

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 61


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

1.- LOS ESTNDARES DE CALIDAD AMBIENTAL

Los Estndares de Calidad Ambiental (ECA) establecidos por el MINAM, fijan los valores
mximos permitidos de contaminantes en el ambiente. El propsito es garantizar la
conservacin de la calidad ambiental mediante el uso de instrumentos de gestin
ambiental sofisticados y de evaluacin detallada.

En la legislacin peruana existen diversos instrumentos de gestin ambiental entre los


cuales se encuentran los denominados estndares de calidad ambiental (ECA) y lmites
mximos permisibles (LMP). Los primeros son de aplicacin general, es decir, para la
sociedad en su conjunto; en tanto los segundos han sido desarrollados para regular
actividades particulares.

Los ECA son indicadores de calidad ambiental. Miden la concentracin de elementos,


sustancias u otros en el aire, agua o suelo. Su finalidad es fijar metas que representan el
nivel a partir del cual se puede afectar significativamente el ambiente y la salud humana.
No son de exigencia legal sino son usados para el establecimiento de polticas
ambientales pblicas. En la medida en que son estndares generales, se deben aplicar a
la sociedad en su conjunto. Es decir, no miden las emisiones de alguien en particular sino
que buscan establecer un nivel aceptable de calidad para las emisiones realizadas por
todos nosotros.

La medicin se realiza directamente en el aire, agua o suelo (conocidos como cuerpos


receptores), dependiendo del caso. As los ECA indican, por ejemplo, que en el aire solo
puede existir una determinada concentracin de partculas por milln (ppm) de CO2
(dixido de carbono), sin importar qu industria, municipio o persona es la que gener la
emisin. Se asume que todos somos responsables de dichas emisiones.

En caso de encontrarse que las emisiones totales superan el valor determinado por el
ECA, la entidad correspondiente, en este caso el Ministerio del Ambiente, se encargar de
investigar y determinar las razones de la excedencia para tomar las medidas correctivas
del caso, en coordinacin con autoridades y otros actores locales.

Los LMP miden la concentracin de ciertos elementos, sustancias y/o aspectos fsicos,
qumicos y/o biolgicos que se encuentran en las emisiones, efluentes o descargas
generadas por una actividad productiva en particular, pues son a travs de ellos que se
puede afectar el aire, el agua o el suelo.

La fijacin de dichos lmites tiene como finalidad proteger al ambiente y la salud humana
de ciertos elementos y/o sustancias que puedan representar un riesgo para ellas, pero a
diferencia de los ECA los LMP establecen un lmite aplicable a las emisiones, efluentes o

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 62


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

descargas al ambiente, individualizando los lmites por actividad productiva. As, los LMP
son exigibles y su cumplimiento es obligatorio para cada una de las personas o empresas
de cada sector.

Por ese motivo, cada una de las personas o empresas debe realizar las acciones
necesarias para que su accionar no implique sobrepasar los LMP establecidos. Entre los
sectores para los que se han establecido LMP tenemos: transportes y comunicaciones,
minera, hidrocarburos, electricidad, construccin y saneamiento, industria cementera, de
curtiembres y papel, as como la industria pesquera, entre otros.

Todas las actividades humanas producen algn tipo de impacto en el ambiente, por lo cual es
importante regular estas actividades, evitando que se produzcan impactos significativos en el
ambiente o en la salud de las personas. Para alcanzar este objetivo, en la legislacin nacional
vigente (Ley General del Ambiente Ley N 28611) se contemplan diversos instrumentos de
gestin ambiental. Entre estos instrumentos podemos encontrar a los llamados Estndares de
Calidad Ambiental (ECA) y los Lmites Mximos Permisibles (LMP).

El artculo 31 de la Ley General del Ambiente Ley N 28611, define el Estndar de Calidad
Ambiental ECA, como la medida que establece el nivel de concentracin o del grado de
elementos, sustancias o parmetros fsicos, qumicos y biolgicos, presentes en el aire, agua
o suelo, en su condicin de cuerpo receptor, que no representa riesgo significativo para la
salud de las personas ni al ambiente. Expresado en palabras sencillas, el ECA establece la
contaminacin mxima que puede recibir un cuerpo receptor (agua, aire, suelo) sin
degradarse o afectarse significativamente.

El artculo 32 de la Ley General del Ambiente, define el Lmite Mximo Permisible LMP
como la concentracin o el grado de elementos, sustancias o parmetros fsicos, qumicos y
biolgicos, que caracterizan a un efluente o una emisin, que al ser excedida causa o puede
causar daos a la salud, al bienestar humano y al ambiente.. Resumiendo, los LMP
establecen el grado mximo de contaminacin que no deben exceder las organizaciones en
sus efluentes o descargas al aire, agua y suelo.

Otras diferencias entre ECA Y LPM

Estndares de Calidad Ambiental (ECA) Lmites Mximos Permisibles (LMP)

La medicin de un ECA se realiza La medicin de un LMP se da en los puntos


directamente en los cuerpos receptores de emisin y vertimiento (de las fbricas,

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 63


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

(agua, aire, suelo). instituciones, viviendas, etc.).

Son instrumentos de aplicacin general. Es


decir, son estndares generales
desarrollados para la sociedad en conjunto. Son instrumentos desarrollados para regular
Buscan establecer un nivel aceptable de actividades particulares, es decir miden las
calidad para las emisiones realizadas por emisiones de alguien en particular.
todos nosotros.
Regulan las emisiones / descargas de las
Permiten mantener un nivel aceptable de organizaciones / vecinos a un cuerpo
calidad ambiental en donde se puede receptor.
desarrollar las sociedades en armona con el
medio ambiente.

El artculo 304 del Cdigo Penal Peruano establece El que, infringiendo leyes, reglamentos
o lmites mximos permisibles, provoque o realice descargas, emisiones, emisiones de
gases txicos, emisiones de ruido, filtraciones, vertimientos o radiaciones contaminantes en la
atmsfera, el suelo, el subsuelo, las aguas terrestres, martimas o subterrneas, que cause o
pueda causar perjuicio, alteracin o dao grave al ambiente o sus componentes, la calidad
ambiental o la salud ambiental, segn la calificacin reglamentaria de la autoridad ambiental,
ser reprimido con pena privativa de libertad no menor de cuatro aos ni mayor de seis aos y
con cien a seiscientos das-multa. Si el agente actu por culpa, la pena ser privativa de
libertad no mayor de tres aos o prestacin de servicios comunitarios de cuarenta a ochenta
jornadas.

Entonces para que proceda el delito de contaminacin ambiental, se tiene que infringir un LMP
y no un ECA.

No olvidar que ambos instrumentos son indicadores, que permiten a travs del anlisis de sus
resultados, establecer polticas ambientales (ECA) y correcciones en al accionar de alguna
actividad especfica (LPM).

2.- LOS ESTNDARES DE LA CALIDAD AMBIENTAL DEL AGUA

El Estndar de Calidad Ambiental es legalmente la medida que establece el nivel de


concentracin o del grado de elementos, sustancias o parmetros fsicos, qumicos y biolgicos,

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 64


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

presentes en el aire, agua o suelo, en su condicin de cuerpo receptor, que no representa riesgo
significativo para la salud de las personas ni al ambiente. De manera especfica y conforme
se seala lneas adelante, el ECA de agua es una unidad de medida para determinar el
uso que puede darse a un cuerpo de agua en funcin a la calidad que presenta, ya sea
por sus valores naturales o por la carga contaminante a la que pueda estar expuesta. Un
ECA no es un valor de medicin para una emisin o efluente. As, en el caso de una
autorizacin de vertimiento, esta autoriza el vertimiento de manera tal que no se exceda el
ECA, que est predeterminado en funcin del uso del agua.
Dicho de otra manera, los ECA para agua estn orientados a proteger el ambiente y la
salud y establecen objetivos de calidad que deben ser cumplidos por los diversos titulares
de actividades econmicas de diversos sectores, y contienen parmetros para determinar
el uso que puede darse a un cuerpo de agua.

. En el Per, desde la Ley de Aguas (Decreto Ley N 17752 de 1969) y luego con la Ley
de Recursos Hdricos (Ley N 29338 del ao 2009); se seala que los ECA de Agua
deben fijarse en funcin a las categoras determinadas en relacin al uso que se le va a
dar al cuerpo natural de agua como se detalla a continuacin:

Categora Descripcin Subcategora Descripcin

Agua que puede ser


A1 potabilizada con
desinfeccin

Agua que puede ser


Aguas
potabilizada con
superficiales destinadas A2
Categora 1-A tratamiento
a la produccin de agua
convencional
potable

Agua que puede ser


potabilizada con
A3
tratamiento
avanzado

Aguas B1 Contacto primario


Categora 1-B superficiales destinadas
a recreacin B2 Contacto secundario

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 65


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

Extraccin y cultivo de
C1
moluscos bivalvos

Extraccin y cultivo de
Categora 2: Agua de mar
C2 otras especies
Actividades de
hidrobiolgicas
extraccin y cultivo
marino costeras y
C3 Otras actividades
continentales

Extraccin y cultivo de
Agua continental C4 especies hidrobiolgicas
en lagos o lagunas

Parmetros para riego


Riego de cultivos de
de D1
tallo alto y bajo
Categora 3: vegetales
Riego de vegetales y
bebida de animales Parmetros para bebida
de D2 Bebida de animales
animales

E1 Lagunas y lagos

Ros de costa y sierra


E2: Ros
Conservacin Ros de selva
Categoria 4
del Ambiente Acutico
E3: Estuarios
Ecosistemas
marino
Marinos
costeras

3. Es decir, en cada categora de ECA de Agua se debe establecer un valor en


relacin al uso que se le pretende dar al cuerpo natural correspondiente. Por
ejemplo, si se quiere destinar un cuerpo de agua a la produccin de agua para
consumo humano deben considerarse los valores establecidos en la Categora 1.

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 66


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

En cambio, si se quiere destinar un cuerpo de agua para riego deben considerase


los valores establecidos en la Categora 3

4. Es importante sealar esto porque puede generarse confusin usando categoras


de consumo humano directo cuando el uso pre-determinado y categorizado por la
autoridad competente es de riego de vegetales, como se sealar ms adelante.

5. Asimismo, es importante destacar que los ECA de Agua del Per se han establecido
considerando referentes internacionales. Por ello, la regulacin peruana ha empleado,
para las aguas destinadas a la produccin de agua potable (Categora 1),
preferentemente las actualizaciones de la Organizacin Mundial para la Salud (OMS); en
el caso de aguas para riego de vegetales y bebidas de animales (Categora 3) se han
adoptado las correspondientes a la Organizacin de las Naciones Unidas para la
Alimentacin y la Agricultura (FAO); as como a la Agencia de Proteccin Ambiental de los
EEUU (EPA). Es necesario precisar adems que, estas guas internacionales se
actualizan continuamente en funcin a estudios peridicos de toxicidad. El D.S. N 015-
2016-MINAM que actualiza los ECAs para Agua ha considerado las guas ms recientes.

6. Sobre esta actualizacin de los ECA para Agua han surgido comentarios respecto a
algunos parmetros, que requieren las siguientes precisiones y aclaraciones:

Parmetro Categora 1

Sustento
Antes Ahora
(2008) (2016)

No se ha modificado el ECA, considerando el


A1: 0,01 A1: 0,01
valor recomendado por la OMS versin 2011.
Arsnico
No se ha modificado el ECA, considerando el
A2: 0,01 A2: 0,01
valor recomendado por la OMS versin 2011.

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 67


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

La modificacin se ha
efectuado slo en esta subcategora para permitir que
ms cuerpos de
agua puedan ser sometidos a un tratamiento avanzado
para ser utilizados
para abastecimiento de agua poblacional.Se ha
A3: 0,05 A3: 0,15 modificado el ECA considerando que esta subcategora
se refiere a
aguas destinadas a un tratamiento avanzado, por ello se
adopt el valor
normado por la Agencia de Proteccin Ambiental de
EE.UU. National
Recommended Water Quality Criteria, ao 2009.

No se ha modificado el ECA, considerando el


A1: 0,7 A1: 0,7
valor recomendado por la OMS versin 2011.

La modificacin se ha efectuado slo en esta


subcategora para permitir que ms cuerpos de agua
puedan ser sometidos
a un tratamiento avanzado para ser utilizados para
A2: 0,7 A2: 1 abastecimiento de
Bario
agua poblacional. Por ello se adopt normativa
internacional existente,
tales como la de Colombia (1984) y la de Ecuador
(2002).

No se ha identificado estndar internacional o


A3:
A3: 1 de nivel internacional de referencia que permita
retirado
sustentar el estndar.

Se adopt el valor de la OMS (2011), establecido


como valor gua para consumo humano (criterio
sanitario). Este valor
Antimonio A1: 0,006 A1: 0,02
coincide con el establecido en la norma sanitaria por el
Ministerio de
Salud.

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 68


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

La modificacin se ha efectuado en estas


subcategoras para permitir que ms cuerpos de agua
puedan ser
A2: 0,006 A2: 0,02
sometidos, previo tratamiento, para ser utilizados para
abastecimiento
de agua poblacional.

No se ha identificado estndar internacional o


A3: de nivel internacional de referencia que permita
A3: 0,006
retirado sustentar el estndar
para diferenciarlo de los tratamientos anteriores.

No se ha modificado el ECA,
A1: 0,003 A1: 0,003 considerando el valor recomendado por la OMS versin
2011.

La modificacin se ha efectuado en esta


subcategora para permitir que ms cuerpos de agua
Cadmio puedan ser sometidos
a un tratamiento convencional para ser utilizados para
A2: 0,003 A2: 0,005 abastecimiento de
agua poblacional. Por ello, se adopt normativa
internacional existente
tales como la de Espaa (2003) y Canad (1985, revisado
1994).

Categora 3

Sustento
Parametro Antes Ahora
(2008) (2016)

No se ha modificado el ECA, aunque no se ha


encontrado referencia de organismos internacionales
Mercurio D1: 0,001 D1: 0,001 expertos en la
materia como la FAO para establecer valor; se ha
considerado mantener el
valor de 0,001 mg/L (1 ug/L), similar a la regulacin

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 69


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

chilena.

Se ha modificado el valor slo en esta


subcategora, tomando como referencia FAO (1985,
revisado y reimpreso
D2: 0,001 D2: 0,01
1994), que lo adopta de las Directrices establecidas por
la Academia
Nacional de Ciencias (1972 y 1974)

Se ha actualizado el valor
de las subcategoras tomando como referencia FAO
D1: 0,05 D1: 0,1
(1985, revisado y
Arsnico
reimpreso 1994).

D2: 0,1 D2: 0,2

Se ha actualizado el valor
de la subcategora D1, siendo ms estricto tomando
Selenio D1: 0,05 D1: 0,02
como referencia FAO
(1985, revisado y reimpreso 1994).

Parametro Categora 4

Sustento
Antes Ahora
(2008) (2016)

E1: no se
estableci E1: 0,001
valor
Se ha incorporado valor en todas las
subcategoras considerando las caractersticas de
E2: no se
persistencia y
Malatin estableci E1: 0,001
bioacumulacin. Para ello se adopt el valor de la
valor
Agencia de Proteccin
Ambiental de los EE.UU., actualizado ao 2016.
E3: no se
estableci E1: 0,001
valor

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 70


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

7. En relacin con estas actualizaciones han surgido comentarios basados en


apreciaciones erradas de algunas organizaciones que es necesario aclarar. Se ha
sealado que se estara beneficiando a empresas mineras infractoras debido a las
modificaciones efectuadas en la Categora 1 correspondiente a aguas destinadas a la
produccin de agua potable. Sin embargo, debe precisarse que las presuntas empresas
beneficiadas usan recursos hdricos clasificados en la Categora 3, de acuerdo a la R.J
202-2017-ANA, de la Autoridad Nacional de Agua ANA, tal como se puede ver a
continuacin, a modo de ejemplo:La modificacin se ha efectuado slo en esta
subcategora para permitir que ms cuerpos de agua puedan ser sometidos a un
tratamiento avanzado para ser utilizados para abastecimiento de agua poblacional.
Se ha modificado el ECA considerando que esta subcategora se refiere a aguas
destinadas a un tratamiento avanzado, por ello se adopt el valor normado por la Agencia
de Proteccin Ambiental de EE.UU. National Recommended Water Quality Criteria, ao
2016 .

Empresa Unidad Minera Cuenca Categora

Ticlio Rmac Categora 3

Volcan Carahuacra Mantaro Categora 3

San Cristbal Mahr Tnel Mantaro Categora 3

Andaychahua Mantaro Categora 3


San Luisa
Huanzala Alto Maran Categora 3

Casapalca Rmac Categora 3


Quenuales
Casapalca 7 Rmac Categora 3

Iscaycruz Huaura Categora 3


Caudalosa
Huachocolpa Mantaro Categora 3

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 71


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

8. De otro lado, tambin es importante que no se confundan los ECA de Agua, que
norman la calidad de los cuerpos de agua, con los Lmites Sanitarios de Agua para
consumo humano. Estos ltimos siguen rigindose por el Reglamento de la Calidad del
Agua para el Consumo Humano aprobado mediante Es decir, que aun cuando un cuerpo
de agua se clasifique en funcin al ECA para consumo humano, debe igualmente pasar
por un tratamiento a efectos de cumplir con los lmites sanitarios.

Dicho de otra manera. Cuando el agua va a ser tratada para el consumo humano, se
utilizan los lmites sanitarios de agua para consumo humano que corresponden a la norma
de salud, sin excepcin. Lo que quiere decir que el valor de ECA de la Categora 1 tiene
que convertirse por el tratamiento en el valor de la norma sanitaria de salud.

Es as como en el caso del Arsnico en la Categora 1, de agua superficial destinada a la


produccin de agua potable, no regula el vertimiento ni la aptitud ltima del agua para
consumo humano. Esta ltima se rige por lo establecido. Es decir, la actualizacin
aprobada slo agrega la posibilidad para que cuerpos de agua con arsnico debidamente
tratados, puedan destinarse a consumo humano directo, cumpliendo el tratamiento
respectivo sin afectar el nivel sanitario que sigue vigente .

9. El proceso de consulta y socializacin de la norma que actualiza los ECA del agua se
inici el ao 2017. Ha sido coordinado y aprobado por todos los sectores
gubernamentales. Habiendo sido, adems, sometido a proceso de consulta pblica en el
que se han recibido comentarios de entidades tcnicas, gremios profesionales,
organismos reguladores, organizaciones empresariales, laboratorios especializados y
especialistas en la materia.

10. Finalmente, debe precisarse que la actualizacin de los ECA de agua no contiene
cambio relacionado con aquellos casos de empresas mineras que no presentaron sus
planes oportunamente bajo la norma del 2016, a estos casos se les seguir fiscalizando
con las normas correspondientes sin que exista amnista alguna o prrroga posible.

3.- Comentarios al Reglamento

Recientemente el Ministerio de Salud aprob, mediante Decreto Supremo 031-2017-SA, el


Reglamento de Calidad del Agua para Consumo Humano mediante el cual se establecen las
disposiciones generales para garantizar la inocuidad, prevenir los factores de riesgos
sanitarios as como proteger y promover la salud y el bienestar de la poblacin.

Con este dispositivo, el Per ha dado un paso adelante y se acerca ms a los lineamientos
sealados por la Organizacin Mundial de Salud OMS en las guas bases para la calidad del

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 72


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

agua potable[1]. Adems, se deja de lado la norma de calidad de agua para consumo humano
vigente desde 1946, la cual no slo resultaba obsoleta sino que, adems, se encontraba muy
distante de la realidad del pas y las necesidades de la poblacin.

El Reglamento es de cumplimiento obligatorio para toda persona natural o jurdica, pblica y


privada dentro del territorio nacional que tenga responsabilidades de acuerdo a ley, o participe
o intervenga en cualquiera de las actividades de gestin, administracin, operacin,
mantenimiento, control, supervisin o fiscalizacin del abastecimiento del agua para consumo
humano desde la fuente hasta su consumo.

Las entidades y actores involucrados en la gestin del agua -y/o en su control de calidad-
deben actuar de modo coordinado y articulado pues slo a travs de ello se lograr su
aprovechamiento sostenible, as como la conservacin de sus niveles ptimos de calidad.

Sin embargo, el Reglamento no establece ninguna disposicin que permita asegurar un


trabajo integrado de las entidades involucradas en la gestin del recurso para garantizar, por
ejemplo, que la calidad del agua sea mantenida en los estndares ms ptimos posibles
durante el uso que destinan a ella quienes cuentan con derechos para su uso consuntivo, de
modo tal que, el tratamiento posterior de las aguas utilizadas no implique un esfuerzo
adicional para lograr una calidad adecuada de consumo.

De otro lado, el Reglamento de Calidad de la Prestacin de Servicios de Saneamiento,


aprobado por Resolucin de Consejo Directivo 011-2007-SUNASS-CD, establece que la
Superintendencia Nacional de Servicios de Saneamiento (SUNASS) ejerce potestad
sancionadora sobre las obligaciones de orden operativo de las empresas prestadoras de
servicios de saneamiento EPS.

Debido a esto, a la SUNASS le corresponde iniciar los procedimientos administrativos


sancionadores, determinar las infracciones y aplicar las respectivas sanciones a las EPS.
Pese a ello, en el Reglamento se establece que las sanciones a los proveedores de agua o
entidades que administran sistemas de agua para consumo humano sern impuestas por la
Autoridad de Salud, sin precisarse que esta potestad sancionadora de la Autoridad de Salud
ser ejercida nicamente respecto al control sanitario correspondiente.

Esta indicacin es importante, ya que cualquier interpretacin contraria colisionara con las
competencias otorgadas a SUNASS, como ente regulador, en la medida que esta es la
entidad que ejerce potestad sancionadora de orden operativo sobre las EPS.

Asimismo, queda planteado el reto que significa la implementacin de las disposiciones


establecidas en el Reglamento. Si bien es cierto que el Reglamento establece plazos para la
transferencias de funciones a las Direcciones Regionales de Salud y a las Gerencias
Regionales de Salud -respecto de la aprobacin de instrumentos tales como los Planes
Crticos de Control (PCC), los Programas de Adecuacin Sanitaria (PAS), la Autorizacin
Sanitaria del Sistema de Tratamiento de Agua Potable y el Registro Sanitario Desinfectante-

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 73


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

cabe indicar que en ste no se han establecido los mecanismos de transferencia de estas
funciones, lo cual resulta fundamental a fin de dotar a las nuevas entidades competentes de
las capacidad tcnica y de gestin necesaria para un desempeo eficiente y en especial para
que no se vean afectados los derechos de terceros debido a la incertidumbre en el curso de
sus procedimientos administrativos.

Finalmente, el Reglamento establece que los recursos econmicos, recaudados por multas o
por el pago de los derechos de trmite de los procedimientos administrativos, sern
destinados para las acciones de asesoramiento tcnico especializado, capacitacin e
investigacin as como actividades de vigilancia sanitaria, quedando pendiente el
establecimiento de los mecanismos y criterios que permitan determinar los rubros en funcin
de los cuales se priorizar la asignacin de estos recursos e incluso cmo se llevar a cabo la
supervisin para asegurar una correcta asignacin de estos en cada entidad, todo ello en
busca de una eficiente administracin.

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 74


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

4.- PROPUESTA DE SOLUCION DE ANA

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 75


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 76


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

CAPITULO IV

4.1 Hidro-ecosfera

La hidrosfera es un hbitat ms adecuado que la atmosfera para el crecimiento


microbiano. Por su propia definicin, la hidrosfera contiene agua, que es necesaria
para el metabolismo microbiano. A diferencia de la atmosfera, en la hidrosfera hay
poblaciones microbianas autctonas que comparten un nmero limitado de
caractersticas generales. Los microorganismos del agua pueden crecer a baja
concentracin de nutrientes. En el medio acutico, la mayora presentan movilidad
por flagelos u otros mecanismos. Algunas bacterias acuticas, como las
prostecadas, muestran formas poco habituales que aumentan la proporcin de su
rea respecto al volumen, con lo cual consiguen una absorcin ms eficaz de los
nutrientes que, en las masas de agua dulce, suelen ser escasos.

La hidrosfera se divide en los hbitats de agua dulce y los marinos. Los de agua
dulce comprenden los lagos, los estanques, los pantanos, las fuentes, los arroyos
y los ros. Estos hbitats se designan colectivamente limnticos, y su estudio
corresponde a la simbologa. Los hbitats marinos son los ocanos y mares y los
estuarios, que se sitan en el lmite entre los ecosistemas de agua dulce y
marinos.

4.1.1 Los hbitats de agua dulce

Los hbitats de agua dulce se clasifican de acuerdo a sus propiedades qumicas y


fsicas. Los de aguas tranquilas, como lagos y estanques, se denominan hbitat
lnticos: los de aguas corrientes, hbitat lticos (Wetzel 1975).

El neuston. La parte superior de la hidrosfera, la microcapa de la superficie,


representa la interfase entre la hidrosfera y la atmosfera. Se caracteriza por una

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 77


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

elevada tensin superficial, propiedad que se origina en la interfase del agua con
un gas (Marshall 1976).

En condiciones de calma, los microorganismos forman una pelcula en la


superficie, conocida como neuston (Figura 9-11). Esta capa es un hbitat
favorable para microorganismos fotoautotrofos, debido a que los productores
primarios tienen acceso ilimitado al dixido de carbono atmosfrico y a la radiacin
luminosa. En la superficie de esta microcapa se da un enriquecimiento en algunos
nutrientes minerales y en algunos metales. Los productores secundarios tambin
proliferan aqu, utilizan los compuestos orgnicos no polares que se acumulan
debido a la tensin superficial de esta capa y a la elevada concentracin de
oxgeno atmosfrico disponible. Numricamente, la microcapa superficial
concentra de diez a cien veces ms microorganismos que la columna de agua
subyacente.

Las burbujas que atraviesan la capa de neuston y estallan en la superficie


desempean una importante funcin para la transferencia de bacterias y virus
desde el agua a la atmosfera (Blanchard y Syzdek 1970; Baylor et al. 1977). Se
han desarrollado diversos medios para el muestreo cualitativo y cuantitativo de la
comunidad del neuston, como espumaderas, pantallas de adherencia y tambores
rotatorios (Parker y Barsom 1970; Norkrans 1980).

La microbiota autctona caracterstica del neuston comprende algas, bacterias,


hongos y protozoos (Valkanov 1968). Entre los gneros bacterianos ms
caractersticos se encuentran Pseudomonas, Caulobacter, Nevskia,
Hyphomicrobium, Achromobacter, Flavobacterium, Alcaligenes, Brevibacterium,
Micrococcus, y Leptothrix. Estos gneros bacterianos incluyen Gram positivos y
Gram negativos, pigmentados y sin pigmentos, mviles e inmviles, bacilos y
cocos, formas pedunculadas y sin pednculo. Tambin hay cianobacterias en el
neuston; los gneros ms tpicos son Aphanizomenon, Anabaena y Microcystis. El
hongo filamentoso Cladosporium y levaduras diversas aparecen frecuentemente
asociadas con el neuston. Entre los gneros de algas estn Chromulina,

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 78


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

Botrydiopsis, Codosiga, Navcula, Nautococcus, Proterospongia, Sphaeroeca y


Platychrisis. Nautococcus est especialmente adaptada para vivir en el neuston.

Los protozoos del neuston incluyen Difflugia, Vorticella, Arcella, Acineta,


Clathrulina, Stylonychia, y Codonosigna. Algunos de estos organismos tambin se
han encontrado en la columna de agua subyacente.

a) Humedales

Los humedales son ambientes acuticos de poca profundidad en los que


predominan las plantas emergentes. Estos terrenos se desarrollan en condiciones
climticas diversas en zonas acuticas superficiales con escaso drenaje, a
menudo como resultado de la colmatacin gradual de un lago por materiales como
aluviones y vegetacin. La superficie del agua puede estar muy oscura debido a
las plantas emergentes que sirven como base para la clasificacin de los
humedales (Brewer 1994). Las marismas de agua dulce estn dominadas por
plantas herbceas como carrizos (Phragmites), ramales (Typha) y juncos
(Juncus). Las turberas bajas o de agua dura (fens) son terrenos relativamente
ricos en minerales con un pH que oscila de neutro a alcalino y estn dominados
por carex (Carex). Las formaciones turbosas estn cubiertas por una densa
vegetacin formada por sauces, cornejos y abedules. Algunos humedales
cenagosos estn recubiertos por altas y frondosas conferas o por otros rboles.
En los humedales es caracterstica la elevada productividad de los macrfitos,
pero la biodegradacin de polmeros vegetales, especialmente la lignocelulosa,
est inhibida por el encharcamiento y por la limitacin de oxgeno. Este
desequilibrio conduce a la acumulacin de residuos vegetales parcialmente
humificados. Una vez enterrados y sometidos a transformaciones geoqumicas,
estos residuos forman depsitos de carbn. Si el nivel de agua desciende, los
restos acumulados forman suelos de turba y cieno (histosoles) con bajo contenido
mineral.

Las turberas (bogs) son un tipo especial de humedales. Se desarrollan slo en


climas fros y hmedos, generalmente en depresiones rocosas de poca

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 79


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

profundidad. El vegetal predominante en estas turberas es el musgo Sphagnum,


que forma gruesos tapetes. Comparada con la de otros humedales, la
productividad de las turberas de Sphagnum es baja.

La porcin inferior del tapete de Sphagnum muere, pero la anoxia y la acidez del
terreno limitan enormemente la biodegradacin y la turba se acumula. El tapete de
Sphagnum mantiene el agua mediante fuerzas capilares de manera tan eficaz que
la turbera puede crecer muy por encima del borde de la depresin rocosa. Es
fcilmente visible como una esponja empapada que reposase sobre una superficie
plana o un cuenco. A medida que la turbera emerge, cesa de recibir nutrientes del
agua que recorre su superficie y queda aislada del suelo y del lecho rocoso por
medio de la gruesa capa de turba acumulada. Este tipo de turbera depende
solamente de los nutrientes que le llegan de la atmosfera y de la lluvia; se vuelve
ombrotrfica (alimentada por las nubes).

Los humedales en general y las turberas en particular, presentan un gran inters


porque son ambientes donde el reciclado del carbono est muy limitado. La anoxia
y la acidez del terreno explican en parte la restriccin de este reciclado. Las
sustancias fenlicas y polifenlicas que proceden de la degradacin incompleta de
los tejidos vegetales y, probablemente, otros factores an no identificados,
contribuyen al bajo ndice de reciclado del carbono y a la acumulacin de
combustible fsil.

b) Lagos

Teniendo en cuenta la penetracin de la luz, los lagos estn divididos en tres


zonas (Figura 9-12). La combinacin de las zonas litoral y limntica se conoce
como zona euftica; es aqu donde tiene lugar la actividad fotosinttica. La zona
profunda es la que se encuentra por debajo de la penetracin efectiva de la luz; no
se da en estanques someros. En los lagos profundos, dicha zona se extiende
desde el nivel de compensacin de la luz hasta el fondo.

La zona litoral es la regin del lago donde la luz penetra hasta el fondo; es un rea
de aguas someras, habitualmente dominadas por plantas sumergidas total o

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 80


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

parcialmente, algas epfitas o filamentosas. En la zona limntica, los productores


primarios predominantes son las algas planctnicas.

Esta es una zona abierta, alejada de la orilla, y desciende hasta el nivel conocido
como profundidad de compensacin. Esta profundidad de compensacin se
considera el nivel ms profundo con una penetracin eficaz de la luz, donde la
actividad fotosinttica se equilibra con la actividad respiratoria. Aproximadamente
el 1% de toda la intensidad de luz solar penetra a esta profundidad. Es posible la
fotosntesis por debajo de esta profundidad, pero a una tasa generalmente inferior
a la de la actividad respiratoria.

Los microorganismos muestran diferentes espectros de absorcin que determinan


las longitudes de onda que pueden utilizar para la fotosntesis (Stanier y Cohen-
Bazire 1957) (Figura 9-13). Las bacterias verdes y rojas del azufre crecen
normalmente en la interfase sedimento-agua, como en la porcin anxica de la
columna de agua, por debajo de las capas de algas y cianobacterias que absorben
longitudes de onda corta. Para crecer, las bacterias verdes y rojas del azufre
utilizan una longitud de onda de luz que no ha sido absorbida por los organismos
fotosintticos de las capas superiores. Obtienen electrones reductores del H 2S a
un coste energtico menor que el que supone la rotura fototrfica de la molcula
de agua. Por eso, la intensidad de luz que necesitan para llevar a cabo el proceso
fotosinttico es mucho menor.

El fondo del lago, o zona bntica, representa la interfase entre la hidrosfera y la


litosfera. En un lago, la litosfera subyacente se conoce como sedimento y
tradicionalmente ha sido objeto de estudio de microbilogos acuticos y de
geoqumicos. Las condiciones de la zona euftica son favorables para el
crecimiento de los fotoautotrofos. Los organismos de la zona profunda son
principalmente productores secundarios y, en su mayor parte, dependen del
transporte de compuestos orgnicos desde las capas de arriba. El hbitat del
sedimento bntico, favorece la proliferacin de microorganismos. Los nutrientes
particulados sedimentan gracias a la gravedad y se concentran en la superficie del
sediment (Fletcher 1979; Marshall 1980; Paerl 1985). Los sedimentos de la

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 81


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

superficie pueden ser aerbicos, permitiendo as la descomposicin aerbica de


los nutrientes orgnicos acumulados. La descomposicin anaerbica de
compuestos orgnicos ocurre principalmente sobre o bajo la superficie de los
sedimentos del fondo, donde el oxgeno a menudo se agota. El oxgeno se difunde
muy lentamente entre los espacios porosos rellenos de agua del sedimento, y la
oxidacin de materia orgnica utiliza rpidamente cualquier cantidad de oxgeno
disponible. Por esta razn, en los sedimentos donde abunda la materia orgnica,
solamente unos pocos milmetros de la parte superior suelen estar oxigenados.
Adems, en muchos lagos de agua dulce, la porcin inferior de la columna de
agua se hace estacionalmente anxica. Esto sucede porque el agua caliente es
menos densa que la fra. En primavera, a medida que el sol calienta el agua del
lago, se forma una capa caliente en la superficie, el epilimnio. La termoclina
separa el epilimnio del hipolimnio, la zona ms profunda y fra (Rigler 1964)
(Figura 9-14). El epilimnio es la capa superior de agua que descansa encima de la
termoclina. La termoclina es una zona que se caracteriza por un descenso rpido
de la temperatura; y porque el agua apenas se mezcla en dicha zona. El epilimnio
normalmente es caliente y rico en oxgeno durante el verano. La activa produccin
fotosinttica tiende a agotar los nutrientes minerales de esta capa hasta el punto
de limitar la produccin primaria. El hipolimnio es la capa de agua por debajo de la
termoclina y generalmente se caracteriza por tener una baja temperatura y una
concentracin reducida de oxgeno; la escasa penetracin de la luz restringe la
fotosntesis, y la respiracin agota el oxgeno existente. Los nutrientes minerales
suelen ser relativamente abundantes. En otoo, cuando el epilimnio se enfra y
alcanza la temperatura del hipolimnio, la termoclina se deshace; este movimiento
otoal de las aguas produce una completa mezcla en el lago. De esta forma, el
hipolimnio se reoxigena y el epilimnio se reabastece de nutrientes minerales.

El agua posee la anomala trmica de tener la densidad mxima a 4 C. Una vez


que todo el lago se enfra a esa temperatura de 4 C, el agua que est a una
temperatura inferior no se hunde, sino que permanece en la superficie y se hiela.
Esta es una forma eficaz de aislar el lago de un enfriamiento mayor e impedir de
esta manera que la masa de agua ms profunda se hiele hasta el fondo. Se puede

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 82


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

desarrollar una estratificacin invernal dbil con una temperatura en el epilimnion


entre 0 y 4 C que reposa sobre un hipolimnio ms clido de 4 C. Esta
estratificacin se deshace con el movimiento que se produce en primavera,
seguida por el desarrollo de la estratificacin estival. La estratificacin trmica
tiene un potente efecto sobre la disponibilidad estacional de la demanda de
nutrientes minerales. La Figura 9-15 muestra los efectos de la estratificacin en la
concentracin de fosfato y el tiempo de renovacin del agua del lago (Rigler 1964).
En algunas masas de agua, se producen unas condiciones hidrogrficas
especiales que mantienen una termoclina permanente. Esto frecuentemente se
debe a la coexistencia de un hipolimnio salino separado del epilimnio superficial
menos salino y, por tanto, menos denso. Una termoclina permanente, que
frecuentemente se denomina quimioclina, debido a que su naturaleza es qumica
en vez de trmica, mantiene el hipolimnio permanentemente anaerobia), y, en
consecuencia, inadecuado para otras formas de vida no microbiana. U n ejemplo
destacado de una masa de agua con una quimioclina es el mar Negro (Karl 1978).
El nombre probablemente proviene de la coloracin oscura del sedimento debida a
la reduccin anaerbica del sulfato.

Una clasificacin de los lagos de utilidad ecolgica es la divisin en oligotrficos o


eutrficos, en funcin de la productividad y de la concentracin de nutrientes
(Wetzel y Alien 1970). Los lagos oligotrficos poseen una baja concentracin de
nutrientes. Generalmente son profundos, el hipolimnio es mayor que el epilimnio y
la productividad primaria es relativamente baja. Por el contrario, los lagos
eutrficos tienen una elevada concentracin de nutrientes, generalmente son
menos profundos y ms clidos que los oligotrficos y su productividad primaria es
mayor. En los lagos eutrficos, la concentracin de oxgeno experimenta
fluctuaciones diurnas marcadas debido a la intensa descomposicin aerbica de
nutrientes orgnicos durante la noche. Muchas especies de peces trofeo
codiciadas por los pescadores no toleran estos perodos de tan baja concentracin
de oxgeno y son desplazadas por otras especies ms resistentes. Los lagos
oligotrficos no experimentan esos perodos de escasez de oxgeno.

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 83


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

Diversas variables qumicas importantes determinan que un lago sea un hbitat


ms o menos adecuado para el desarrollo de microorganismos (Hutchinson 1957).
La concentracin de nutrientes orgnicos y de oxgeno, como ya se ha
mencionado, son algunos de esos factores. Adems, la concentracin de
nutrientes inorgnicos, especialmente los que contienen nitrgeno y fsforo,
contribuyen a determinar la capacidad del hbitat para favorecer el crecimiento y
el metabolismo microbiano. A menudo, procesos de intercambio que tienen lugar
entre la litosfera circundante y el agua del lago influyen en la concentracin de
esos nutrientes esenciales. Su disponibilidad depende en gran medida de la
capacidad biolgica para secuestrar o movilizar las sustancias inorgnicas.

El pH es otro factor esencial que influye en el tipo de microorganismos que habitan


en un lago determinado. Algunos lagos son alcalinos, otros neutros y los hay que
son cidos. A igualdad de otras condiciones, un pH ms elevado favorece la
produccin primaria debido a la mayor disponibilidad de C 0 2 en las formas H C 0
3~ y CO}2_.

La concentracin de sal tambin influye en el tipo de microorganismos autctonos


caractersticos de un lago. Algunos lagos sin alimentacin superficial poseen una
elevada concentracin salina. El Gran Lago Salado de U tah tiene una
concentracin salina de casi un 28 por ciento, ocho veces ms elevada que la del
agua de mar. En los lagos salinos se desarrollan poblaciones de arqueas halfilas,
como sucede en el Gran Lago Salado y en el mar Muerto, responsables de la
coloracin rojiza que a menudo toman estas aguas. Oren y Gurevich (1996)
examinaron las floraciones de arqueas y algas halfilas que se produjeron en el
mar Muerto durante el verano de 1992, tras la dilucin de la salinidad de la capa
superior de agua debido a las lluvias e inundaciones invernales. Las floraciones
aparecieron asociadas a un nivel elevado del potencial de actividad fototrfica,
segn pudo medirse por la incorporacin de sustratos orgnicos marcados.
Despus del declive de la floracin algal, el nmero de arqueas slo descendi
ligeramente y la mayor parte de la comunidad todava estaba presente un ao ms
tarde. No volvi a producirse ninguna nueva floracin de algas y arqueas tras las

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 84


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

inundaciones invernales de 1992-1993, a pesar de que los valores de salinidad de


la capa superficial eran suficientemente bajos para permitir la proliferacin de las
algas. U n remanente de la floracin de Dunaliella de 1992 se mantuvo por s
misma a profundidades de entre 7 y 13 metros. Presentaba una actividad
fotosinttica escasa y slo una mnima estimulacin del crecimiento y actividad de
arqueas se asoci a esta comunidad de algas.

c) Ros

Son diversas las caractersticas fundamentales que diferencian los ros de los
lagos (Hynes 1970). Los ros se caracterizan por el movimiento de las aguas; hay
zonas donde el movimiento es rpido y remansos donde la corriente se reduce.
Las zonas de movimiento rpido suelen ser ms someras que aquellas donde el
agua est remansada. En los remansos, la lentitud de la corriente permite la
deposicin de sedimento, y no puede hacerlo en zonas donde la velocidad es
elevada; en consecuencia, bajo las zonas de corrientes rpidas subyacen
sustratos firmes y rocosos. Los ros poseen un elevado grado de interfase con la
litosfera a lo largo de la orilla, donde hay una gran actividad de transferencia de
sustancias qumicas procedentes de la litosfera que van al agua del ro arrastradas
por la lluvia y por la erosin en la propia orilla

El curso superior de un ro se caracteriza generalmente por un flujo rpido, una


elevada oxigenacin y una temperatura baja. Resguardado de la luz solar por el
bosque, suele mantener baja la productividad primaria en el curso superior y la
entrada de materia orgnica proviene principalmente de la litosfera circundante. El
curso medio se caracteriza por una disminucin de la velocidad de flujo, una
temperatura ms alta y por tener menos sombra, de lo cual resulta una elevada
productividad primaria intrnseca. El curso inferior se encuentra sujeto a niveles
elevados de deposicin de sedimento; tambin est sometido a la influencia de las
mareas y se produce una sustitucin de microorganismos de agua dulce
estenohalinos por organismos de estuario que toleran la sal.

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 85


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

En los ros, la mayora de los microorganismos y otros seres microscpicos que


estn adheridos a superficies como las rocas sumergidas, absorben rpidamente
los nutrientes disueltos. Cuando esos organismos adheridos se mueren y
degradan, liberan los nutrientes que son consumidos nuevamente a escasa
distancia ro abajo. Como consecuencia, el movimiento de los nutrientes es mucho
ms lento y no se desplazan a la velocidad de la corriente. El reciclado de los
nutrientes en un ro no se produce en un mismo lugar, ms bien implica algn
transporte ro abajo antes de cerrar el ciclo. La ruta de un nutriente puede verse
como una espiral en lugar de un ciclo, un fenmeno conocido como espiral de
nutrientes (Webster y Patten 1979; Newbold et al. 1981) (Figura 9-16). Los ros
suelen recibir grandes cantidades de efluentes industriales y municipales. El
vertido de aguas residuales urbanas a un ro introduce grandes cantidades de
compuestos orgnicos (Figura 9-17). La concentracin de ox geno por lo general
se agota tras la descarga de los vertidos urbanos debido a que se utiliza para la
descomposicin microbiana de los compuestos orgnicos. Los efluentes
industriales tambin introducen sustancias qumicas txicas como los metales
pesados, que pueden afectar negativamente la actividad microbiana y la
supervivencia de los microorganismos. Los ros tambin reciben gran cantidad de
compuestos qumicos procedentes de la agricultura a travs de la escorrenta.
Algunos se comportan como txicos ya que interfieren con la actividad microbiana;
otros, como los abonos, favorecen la proliferacin incontrolada de
microorganismos.

4.1.1.1. Composicin y actividad de las comunidades microbianas de las


aguas dulces
Las poblaciones microbianas de los lagos han sido estudiadas ms
profundamente que las de los ros (Hutchinson 1957; Rheinheimer 1991; Cole
1983; Ford 1993). Son muchas las semejanzas, pero los ros, por su propia
naturaleza, contienen siempre una elevada proporcin de microorganismos
alctonos. Por esta razn, gran parte de lo expuesto a continuacin est
relacionado con los lagos.

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 86


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

Los miembros de los gneros Achromobacter, Flavobacterium, Brevibacterium,


Micrococcus, Bacillus, Pseudomonas, Nocardia, Streptomyces, Micromonospora,
Cytophaga, Spirillum y Vibrio son organismos que se distribuyen ampliamente en
los lagos (Taylor 1942; Rheinheimer 1991). Las bacterias pedunculadas, como
Caulobacter, Hyphomicrobium y otros gneros, son tpicas de superficies
sumergidas (Rheinheimer 1991).

Las bacterias autotrofas son miembros autctonos de la microbiota de los lagos y


desempean una funcin trascendental en el reciclado de los nutrientes (Caldwell
1977). Las bacterias fotoautotrofas que se encuentran normalmente en los lagos
comprenden las cianobacterias y, en las zonas anxicas, las bacterias
fotosintticas anaerobias rojas y verdes (Rheinheimer 1991). Las cianobacterias
Mycrocystis, Anabaena y Aphanizomenon pueden constituir el plancton dominante
en los ambientes de agua dulce. Las floraciones de cianobacterias, que pueden
alcanzar una gran extensin, suelen estar relacionadas con el enriquecimiento
mineral producido por los vertidos de aguas residuales o de abonos. Las
cianobacterias filamentosas pueden formar tapetes superficiales viscosos que
flotan por medio de las burbujas de oxgeno procedentes de su propia actividad
fotosinttica. Adems de los problemas generales que causan estas floraciones y
que se discuten en el Captulo 12, en relacin con la eutrofizacin, algunas
especies de Anabaena y de Microcystis sintetizan pptidos neurotxicos y
alcaloides. Los seres humanos raramente se ven afectados, pero el ganado que
bebe el agua de lagos y estanques con esas floraciones puede intoxicarse y morir
(Falconer 1993). Las bacterias quimiolitotrofas desempean un papel importante
en los ciclos del nitrgeno, del azufre y del hierro en los lagos; algunos miembros
de los gneros Nitrosomonas, Nitrobacter y Thiobacillus son componentes
esenciales de las comunidades microbianas de agua dulce.

Existen grandes diferencias en la distribucin vertical de las poblaciones


bacterianas de los lagos (Rheinheimer 1991) (Figura 9-18). Esas diferencias
reflejan las oscilaciones verticales de variables abiticas, como la penetracin de
la luz, la temperatura y la concentracin de oxgeno. Los microorganismos que

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 87


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

pueden considerarse autctonos de la superficie de los lagos son, en muchos


casos, alctonos en las regiones bnticas. Por ejemplo, las cianobacterias
normalmente son muy abundantes cerca de la superficie, donde la penetracin de
la luz es adecuada para sostener su metabolismo fotoautotrofo. Las cianobacterias
que se establecen por debajo de la profundidad de compensacin de la luz no
pueden competir y se las considera microorganismos alctonos. Los miembros
fotoautrofos de las familias de las clorobiceas y de las cromaticeas son
autctonos de comunidades microbianas de agua dulce a una profundidad mayor,
all donde la luz todava penetra, pero la tensin de oxgeno es baja y hay bastante
cantidad de sulfuro de hidrgeno. Las rodospirilceas ocupan ambientes similares,
pero utilizan donadores de electrones que son compuestos orgnicos reducidos,
en vez de compuestos de azufre. Las poblaciones hetertrofas se distribuyen a
travs de la columna vertical de agua pero generalmente alcanzan la
concentracin mxima cerca de la termoclina y cerca del fondo del lago, donde
hay materia orgnica disponible.

Los microorganismos que se encuentran en el sedimento de los lagos de agua


dulce suelen ser diferentes de los que ocupan las capas superiores del agua. En
estanques y lagos someros, las bacterias anaerobias fotoautotrofas ocupan la
superficie del sedimento, lo que a menudo confiere al agua un color caracterstico.
Los hongos, entre los que se encuentran formas celulolticas, se establecen sobre
los restos de materia que se acumulan en la superficie del sedimento. Las
bacterias con respiracin anaerbica son miembros destacados de la microbiota
del sedimento y entre ellas figuran especies de Pseudomonas que pueden llevar a
cabo la actividad desnitrificadora. En el sedimento, las bacterias anaerobias
estrictas ocupan nichos importantes. Entre ellas se encuentran especies
formadoras de endosporas del gnero Clostridium, bacterias metangenas, que
producen metano, y especies de Desulfovibrio, que producen sulfuro de
hidrgeno.

Los lagos varan en cuanto a los gneros de hongos que albergan; las diferencias
reflejan variaciones en los sustratos orgnicos disponibles para los hongos, y en la

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 88


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

biota susceptible de ser atacada por hongos parsitos (Sparrow 1968). En lagos
de agua dulce, as como en ros y arroyos, numerosos hongos aparecen
asociados a materia orgnica fornea, por lo que se los considera miembros
alctonos de esos ecosistemas. Ejemplo de ello son los ascomicetes y hongos
imperfectos tpicos de la madera y de los restos de plantas muertas que van a
parar a ros y lagos; cuando esos materiales se han degradado, desaparecen los
hongos asociados a ellos. El reemplazo se produce cuando la materia fornea
penetra en la hidrosfera. Se encuentran levaduras en muchas masas de agua
dulce. Los miembros ligeramente fermentativos de Torulopsis, Candida,
Rhodotorula y Crytococcus son las levaduras ms frecuentes en ros, arroyos y
lagos.

Las algas son claramente miembros autctonos de los ecosistemas de agua


dulce. En lagos grandes y profundos, el fitoplancton aporta la mayor parte del
carbono orgnico, que sostiene el crecimiento de los organismos heterotrofos.
Existe una gran cantidad de informacin sobre la distribucin de las algas de agua
dulce, y muchos textos que hacen referencia a su actividad en determinadas
masas de agua (Prescott 1962). Entre las algas de agua dulce se encuentran
clorfitos, euglenfitos, crisfitos, criptfitos y pirrfitos. Las especies de algas
verdes, de dinoflageladas y de diatomeas son dominantes en la mayor parte de
estos ecosistemas. Los fefitos y los rodfitos son principalmente formas marinas
y apenas estn representadas en los ambientes de agua dulce.

Los protozoos se alimentan de fitoplancton y de bacterias en los medios acuticos.


Los flagelados fagotrofos son los principales consumidores de bacterias. Los
protozoos ameboides, ciliados y flagelados se encuentran en arroyos, ros y lagos.
Entre los numerosos gneros propios de los hbitats de agua dulce se encuentran
protozoos corrientes como Paramecium, Didinium, Vorticella, Stentor y Amoeba. El
protozoo flagelado Bodo es frecuente en aguas contaminadas y con poco oxgeno
(Westphal 1976).

Adems de las poblaciones microbianas autctonas, hay muchos


microorganismos alctonos terrestres transportados por la erosin del suelo a los

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 89


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

ambientes acuticos. Dichos microorganismos llegan tambin en las hojas que


caen al agua desde las plantas de la orilla y con los vertidos de aguas residuales
urbanas que contienen gran cantidad de materia orgnica. Las zonas que reciben
un gran aporte de materia orgnica tienen una elevada poblacin de
microorganismos heterotrofos, aunque sta desciende a medida que se reduce el
aporte orgnico (Taylor 1942). Generalmente, los microorganismos alctonos
desaparecen en un espacio relativamente corto de tiempo, ya que son consumidos
por los miembros autctonos del ecosistema. Sin embargo, como son numerosas
las vas de entrada de microorganismos alctonos, es frecuente que las
poblaciones microbianas de las masas de agua dulce presenten una gran
semejanza con las formas terrestres.

En los lagos, los microorganismos desempean un papel clave en la productividad


y en la transformacin de los compuestos orgnicos (Kuznetsov 1959) (Figura 9-
19). Sin embargo, la tasa de actividad metablica microbiana presenta una gran
variedad estacional y temporal, tanto dentro de una misma masa de agua como
entre diferentes hbitat de agua dulce (Overbeck 1966; W right y Hobbie 1966)
(Tabla 9-5). Hay una clara tendencia al aumento de la productividad desde los
lagos oligotrficos a los eutrficos. Los valores anuales de nutrientes en
circulacin muestran una gran variacin en un mismo lago y se solapan entre uno
y otro lago. La comparacin de los valores estivales e invernales, sin embargo,
indica que en verano se produce un reciclado rpido de los nutrientes, cuando la
productividad es tambin alta. El tiempo de reciclado aumenta en invierno con el
declive de la productividad.

La capacidad de los microorganismos, en especial de las bacterias, para utilizar


los compuestos orgnicos disueltos a concentraciones muy bajas es importante en
los lagos oligotrficos, donde su disponibilidad es escasa (Kuznetsov et al. 1979;
Ormerod 1983). Si se comparan las tasas de absorcin de glucosa por parte de
algas y bacterias (Figura 9-20), se comprueba que a concentraciones bajas de
sustrato las bacterias muestran una velocidad mayor de absorcin. En cambio, las
tasas de absorcin de las algas son ms elevadas cuando la concentracin de

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 90


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

sustrato tambin es alta. El tiempo de reciclado para el carbono a concentraciones


muy bajas de sustrato (inferior a 5 pg de C por litro) es mucho ms breve en las
bacterias que en las algas (W right y Hobbie 1966). La capacidad de las bacterias
y de algunos protozoos flagelados nanoplanctnicos para utilizar materia orgnica
en bajas concentraciones, permite la introduccin de carbono orgnico disuelto en
las cadenas alimentarias que sostienen el crecimiento de organismos superiores.
En el nivel trfico inferior, la abundancia de picoplancton est controlada
principalmente por la disponibilidad de nutrientes (Weisse 1993). Las
concentraciones bajas de nutrientes generalmente favorecen al picoplancton
bacteriano, mientras que el picoplancton eucariota se vuelve ms importante al
aumentar la carga de nutrientes. Los valores bajos de pH tambin favorecen
selectivamente a las poblaciones eucariotas, a expensas del picoplancton
bacteriano.

A los hongos y las bacterias de los sistemas de agua dulce se debe en gran parte
la descomposicin de la materia orgnica alctona (Barnes y Mann 1980; Cole
1983). Los microorganismos son los primeros colonizadores de las partculas
detrticas. Ellos inician una red trfica en la que se produce el reciclado de los
nutrientes orgnicos de los detritos en un ecosistema. Los microorganismos
intervienen en la transformacin del carbono orgnico alctono en carbono de la
biomasa celular de los miembros autctonos de los ecosistemas de agua dulce;
tambin desempean funciones clave en la transformacin y reciclado de muchos
otros elementos en diferentes hbitat de agua dulce.

Las principales funciones ecolgicas de los microorganismos de agua dulce puede


resumirse en las siguientes: (1) descomponen la materia orgnica muerta y liberan
los nutrientes minerales tiles para la produccin primaria; (2) asimilan y
reintroducen en la cadena alimentaria la materia orgnica disuelta; (3) participan
en el reciclado de diferentes minerales.; (4) contribuyen a la produccin primaria,
(5) son fuente de alimento para otros organismos (Kuznetsov 1970). En lagos
grandes y profundos, donde casi todo el fondo es disftico y est desprovisto de

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 91


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

plantas superiores, los microorganismos planctnicos son los principales


productores primarios.

4.1.2. Los hbitats marinos

Los ocanos y mares ocupan el 71 por ciento de la superficie terrestre, con un


volumen de 1,46 X 109 km 3, una profundidad media de 4000 m y mxima de
aproximadamente 11.000 m (Rumney 1968). La impresionante masa acutica de
los ocanos ejerce un efecto moderador esencial en el clima terrestre, y constituye
el ltimo reservorio y receptculo en el ciclo global del agua. Se calcula que hasta
el 50 por ciento de la energa solar incidente se consume en la evaporacin del
agua de mar, de las aguas continentales y de la superficie terrestre. El agua
evaporada precipita posteriormente en forma de lluvia y de nieve, liberando en el
proceso la energa calorfica acumulada (Stewart 1969). La precipitacin puede ir
a parar directamente al mar o indirectamente, a travs de ambientes terrestres por
escorrenta. En este ltimo proceso, los minerales se lixivian hacia el mar a una
velocidad mucho mayor que la de su regreso a tierra por aspersin y por
diferentes procesos geolgicos. En consecuencia, los ocanos son el ltimo
sumidero para todos los minerales solubles en agua y son salinos, aunque no en
el mismo grado que algunos lagos cerrados de regiones con climas clidos y
secos.

a) Estuarios

El agua dulce continental en forma de ros y las filtraciones de agua subterrnea


se encuentran con el agua de mar en los estuarios. De manera caracterstica, los
estuarios son ms productivos que el mar y que las aguas continentales (Day
1950) debido a que los nutrientes transportados por los ros de corriente rpida se
depositan en las desembocaduras o en los deltas de los ros. Hay zonas donde se
produce una gran variabilidad de los factores ambientales, como la temperatura, la
salinidad, el pH, y la materia orgnica. Los estuarios estn sujetos al flujo de las

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 92


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

mareas. Los nutrientes que llegan procedentes de los ros oscilan a travs del
estuario debido al flujo de las mareas en un movimiento neto hacia el mar abierto.

En un estuario tpico, hay un gradiente de salinidad que va de 25 partes por mil en


la boca (Perkins 1974) (Figura 9-21). La distincin entre organismos autctonos y
alctonos es particularm ente difcil en estas zonas de transicin (Stevenson et al.
1974). Los organismos mejor adaptados a la supervivencia continua en
esoshbitat tienen que ser euritolerantes a muchos factores ambientales. Tanto
los microorganismos de las aguas continentales como los organismos marinos son
slo miembros transitorios de estuarios.

Tal como sucede en los humedales de agua dulce, la productividad de los


estuarios es alta. La fotosntesis casi siempre supera a la actividad respiratoria
(Wood 1967). Una extensin importante del estuario est ocupada por plantas
superiores semisumergidas. De forma caracterstica se encuentran diversas
especies de Spartina en las marismas saladas de las zonas templadas y los
bosques de manglares en los estuarios tropicales. Las zonas intermareales suelen
estar recubiertas de plantas como Zostera, que forma praderas submarinas en las
regiones templadas y Thalassia, en las regiones tropicales. Los estuarios con
marismas (salt marsh) pueden recibir nutrientes a travs de los afloramientos
(upwelling) de las capas ms fras y profundas de agua de la plataforma
continental. Sin embargo, el principal aporte de nutrientes llega por escorrenta
desde la orilla. La estructura fsica del estuario ocasiona que los nutrientes que
llegan, o se producen all, tiendan a quedar atrapados. Si contienen marismas, es
frecuente el reciclado interno de nutrientes, con una escasa prdida hacia el mar.
Los hongos descomponedores tienen una gran importancia en las marismas
(Newell 1993)- El total de biomasa fngica viva puede aumentar ms del 10 por
ciento de la comunidad total durante la degradacin de los brotes vegetales. La
participacin bacteriana en la degradacin de los brotes ocurre principalmente
sobre las partculas cadas e implica la produccin de enzimas lticas y la captura
de los productos disueltos que se forman por accin bacteriana. El resultado neto
de este sistema de descomposicin es probablemente la retencin de una gran

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 93


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

porcin de carbono. Ese carbono, que procede del material en descomposicin de


la marisma, se convierte en biomasa microbiana y animal.

b) Caractersticas y estratificacin del ocano

Hay una notable uniformidad en las condiciones ambientales de la ecosfera


marina (Sverdrup et al. 1942; Stewart 1969; Tait y DeSanto 1972; Anikouchine y
Sternberg 1973). Esta uniformidad es fruto de la accin combinada de diversos
mecanismos de mezcla, como el flujo de las mareas, las corrientes y la circulacin
termohalina.

El flujo de las mareas causa inundaciones peridicas y la exposicin de los


diversos hbitats que componen la lnea costera de la playa (Figura 9-22). Las
mareas, que se deben a la atraccin gravitatoria de la luna y del sol, siguen un
ciclo que dura unas 12,5 horas; los ciclos alternativos de marea alta (pleamar) y de
marea baja (bajamar) se producen dos veces al da. Las mayores diferencias entre
la pleamar y la bajamar tienen lugar cada dos semanas con las mareas vivas y
las menores, durante las semanas que alternan con aquellas, cuando se producen
mareas muertas.

Las corrientes ocenicas se originan por la friccin que ejerce el viento al barrer la
superficie del agua, y por la rotacin de la Tierra. La fuerza de rotacin (Coriolis)
de la Tierra y los obstculos terrestres determinan un sistema circular de
corrientes. Las corrientes profundas se producen por variaciones en la
temperatura y la salinidad, las cuales crean diferencias en la densidad del agua.
Esas densidades distintas de la masa de agua causan corrientes termohalinas,
que mezclan verticalmente las masas de agua.

Los ocanos y mares contienen casi todos los elementos qumicos que se
producen de manera natural, pero en su mayora estn en concentraciones
extremadamente bajas (Tabla 9-6) (Harvey 1957; W enk 1969; Ross 1970;
Broecker 1974). En el mar, los principales elementos, aparte del hidrgeno y del
oxgeno que componen el agua, son el sodio, el cloro, el magnesio, el azufre, el
calcio y el potasio. Entre los componentes minoritarios se encuentran el carbono,

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 94


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

el bromo, el estroncio, el boro, el silicio y el flor. El nitrgeno, el fsforo y el hierro


son elementos esenciales para el desarrollo microbiano, y estn en el agua de mar
tan slo como elementos traza, a concentraciones inferiores a 1 ppm.

La salinidad de los hbitats marinos se sita entre 3,3 y 3,7 partes por mil, con un
promedio de 3,5 partes por mil. El pH del agua del mar generalmente se sita
entre 8,3 y 8,5. Por debajo de los 100 metros de profundidad, la temperatura se
encuentra generalmente entre 0 C y 5 C; las fluctuaciones estacionales de la
temperatura en cualquier lugar no suelen superar los 20 C, y las variaciones de
temperatura sobre todos los ocanos se sita en los 35 C.

c) Zonas verticales y horizontales de los hbitats marinos:

Aunque las condiciones ambientales en el mar son muy uniformes, se pueden


identificar unas determinadas zonas (Figura 9-23). La zona litoral, o intermareal,
se encuentra junto a la orilla del mar (Figura 9-24). Est sujeta a perodos alternos
de inundacin cuando sube la marea, y sequedad, cuan do baja. La zona sublitoral
se extiende desde el lm ite de la marea baja hasta el borde de la plataforma
continental. Esta regin se conoce tambin como zona nertica, o costera. La
profundidad media de la zona nertica es inferior a los 200 m. La regin oce nica
se extiende mar adentro desde el borde de la plataforma continental. El trmino
pelgico se emplea para designar el mar abierto o la parte superior del mar y
comprende algunas partes de la zona ner tica y la totalidad de las regiones
ocenicas. El b e n tos o regin bntica comprende el fondo, sin considerar
debajo de qu zona se encuentre (Isaacs 1969).

La regin bntica empieza en la zona intermareal y se extiende hacia abajo. La


plataforma continental es una parte del bentos que forma una ligera pendiente
mientras se aleja de la masa terrestre. En el borde de la plataforma, la inclinacin
aumenta abruptamente. Dicha pendiente es la regin batial, que desciende hacia
el fondo marino. Dicho fondo, en las grandes profundidades, es conocido como
llanura abisal, que habitualmente est a unos 4000 metros de profundidad. El
suelo ocenico dista de ser llano, presenta crestas y fosas. Las fosas ms

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 95


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

profundas forman la regin hadal (del griego Hades, infierno). Las fosas
ocenicas pueden llegar a los 11.000 metros de profundidad.

La capa superior de la ecosfera marina es el punto de encuentro con la atmosfera


y, como sucede en los ambientes de agua dulce, es donde se produce la tensin
superficial. Constituye el hbitat para el p leu ston , el equivalente marino del
neuston, que alberga bacterias y algas (Cheng 1975). Pseudomonas y varios
gneros pigmentados como Erythrobacter, Erythromicrobium, Protaminobacter y
Roseobacter son algunas de las poblaciones ms abundantes (Wood 1967;
Kaneko et al. 1979). Las bacterias del pleuston que utilizan carbohidratos lo hacen
en mayor proporcin que las bacterias de las capas subyacentes. Entre los
productores primarios que ocasionalmente se encuentran en la capa del pleuston
hay cianobacterias ('Trichodesmium), diatomeas (Rhizosolena) y fefitos flotantes
(Sargassum).

No se ha encontrado en el pleuston ningn gnero de algas adaptado, equivalente


a Nautococcus del neuston. Representantes de hongos y protozoos aparecen
ocasionalmente en el pleuston, junto con algunos invertebrados macroscpicos.
La intensidad de luz en la superficie de los mares tropicales resulta a menudo
fototxica para las algas. Es ah donde la comunidad del pleuston aparece
dominada por heterotrofos que viven a expensas de la materia orgnica, muy
enriquecida en la capa de tensin superficial (Sieburth et al. 1977). El pleuston
tambin atrae invertebrados, que pueden ser abundantes en perodos de calma.
Los versos S, las peque as criaturas viscosas caminan sobre el viscoso mar,
de poeta Samuel Coleridge (1772-1834) en Rime of the Ancient Mariners, son
una referencia potica a tales condiciones (David 1965)

La ecosfera marina tambin se puede dividir en zonas verticales (Figura 9-24). La


zona euftica es aquella donde tiene lugar una penetracin eficaz de la luz hasta
el nivel de compensacin. Por debajo se encuentra la zona aftica (disftica). La
zona pelgica se divide en epipelgica, de 0-2 0 0 metros, que es tpicamente
euftica y clida; batipelgica, de 200 a 6000 metros, normalmente aftica y fra; y

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 96


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

una zona hadal, por debajo de los 6000 metros, fra y sometida a una presin
extrema.

Algunos factores abiticos son importantes para el crecimiento microbiano a


diferentes profundidades en los hbitats marinos. La intensidad de la luz en el mar
depende en gran medida de la turbidez y de la profundidad; es muy poca luz la
que penetra por debajo de los 25 metros (Figura 9-25). Generalmente, desde la
superficie hasta 50 metros de profundidad la temperatura desciende bruscamente
y por debajo de esos 50 metros suele ser inferior a 10 C. Debido a la
concentracin de sal, la temperatura de congelacin del agua de mar se sita a
1,8 C. La concentracin de oxgeno desciende normalmente debajo de la
superficie alcanzando un mnimo a unos 1000 m de profundidad; luego aumenta
gradualmente hasta los 4000 m de profundidad, hasta alcanzar concentraciones
cercanas a las de la superficie (Figura 9-26). El fsforo alcanza un mximo a los
1000 m y mantiene una concentracin casi constante hasta los 4000 m.

Los sedimentos marinos muestran un perfil con zonas (Fenchel 1969) (Figura 9-
27). El sedimento superficial tiene una concentracin relativamente alta de 0 2, de
NOj" y de Fe (III), y baja de C 0 2. Estos valores cambian ligeramente por debajo
de la superficie a medida que el sedimento pasa desde una zona oxidada, y a
travs de una zona de transicin, hasta otra reducida. En la zona reducida, la
concentracin de 0 2 es prcticamente nula y hay azufre reducido en forma de H
2S. La concentracin de Fe (III) desciende, a la vez que aumenta la de Fe (II); el C
0 2 es reemplazado en parte por CH4; y el N O j- y el N 0 2- son sustituidos por el
N H 4*. Estas alteraciones qumicas al profundizar en el sedimento estn
relacionadas con el cambio de las condiciones aerbicas a anaerbicas del
hbitat.

La disponibilidad de nutrientes es de gran importancia para determinar la


productividad microbiana de los hbitats marinos (Ducklow y Carlson 1992). El
reciclado de los nutrientes minerales es muy lento en el ambiente pelgico. Los
organismos muertos de la zona epipelgica euftica se hunden a grandes
profundidades en las zonas batipelgica y bntica. Estos cadveres arrastran

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 97


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

consigo nutrientes esenciales, principalmente nitrgeno y fsforo, que se liberan


en la oscuridad perenne de la profundidad ocenica. Desde all vuelven a la
superficie muy lentamente empujados por los afloramientos. Como promedio, una
molcula de cualquier nutriente mineral tarda varios miles de aos en ser devuelta
a las clidas aguas de la superficie euftica. En consecuencia, la productividad
primaria en esa zona euftica del medio pelgico est gravemente limitada por la
falta de nutrientes minerales, mientras que las aguas profundas ricas en nutrientes
carecen de la energa luminosa que permite la productividad primaria fotosinttica.
Como resultado, ms del 95 por ciento del mar se caracteriza por una tasa de
productividad extremadamente baja, con una media de fijacin de carbono de 50 g
por me tro cuadrado por ao (Ryther 1969). Adems, la mayora de los
productores primarios del mar abierto son algas planctnicas muy pequeas
(Round 1984). Todo ello ocasiona cadenas trficas pelgicas largas e ineficaces,
que mantienen una cantidad escasa de peces en la masa de agua.

Prcticamente toda la pesca comercial martima est restringida a menos del 5 por
ciento de los mares y ocanos, principalm ente en las regiones costeras y en las
zonas de afloramiento (Ryther 1969). Las aguas ricas en nutrientes de esas reas
permiten unas tasas de produccin primaria ms elevadas. Los organismos
productores suelen ser formas planct nicas grandes y las cadenas trficas son
ms cortas y eficientes. Los fenmenos de afloramiento (Figura 9-28) se dan a
menudo a lo largo del talud continental, y estn causados por el movimiento rpido
de las corrientes de superficie que se alejan de la costa y son reemplazadas por
agua rica en nutrientes de las zonas ms profundas.

A pesar de tener un significado limitado en la productividad marina total, los


arrecifes de coral constituyen islas de biomasa y de productividad
extraordinariamente altas, rodeadas por el desierto biolgico de los mares
tropicales, que son poco productivos. El contraste entre el arrecife de coral,
cargado de peces e invertebrados, y la escasez de vida del mar circundante
impresiona incluso al observador ocasional y contina fascinando a naturalistas y
a eclogos. Las condiciones ideales para la formacin de arrecifes de coral se dan

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 98


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

en los mares tropicales clidos, donde la zona euftica, al menos inicialmente, se


extiende hasta el suelo ocenico. Para el ecosistema coralino es esencial la
asociacin entre las diversas especies de plipos coralinos y sus algas endozoicas
{vase el Captulo 5). Las algas proporcionan los productos fotosintticos (carbono
orgnico) y oxgeno al plipo, a la vez que propician la precipitacin del carbonato
clcico para la construccin del arrecife. Las algas reciben proteccin, C 0 2 y
nutrientes minerales del plancton capturado y del metabolismo heterotrfico del
plipo (Johannes 1967). Si el suelo marino se hunde o el nivel del agua se eleva
lentamente, el crecimiento anual del arrecife lo mantiene en la zona euftica. Si el
crecimiento del arrecife no puede mantener el ritm o necesario y el arrecife se
hunde por debajo de la zona euftica, la asociacin entre el alga y el plipo se
interrum pe y el arrecife muere. Si no se produce hundim iento, crece hacia la
superficie del mar y la erosin de las olas equilibra el crecimiento posterior. U n
cambio en la transmisin de la luz en el agua por ejemplo, debido a la
presencia de sedimento en suspensin tras un dragado puede matar tam bin
al arrecife de coral, ya que interfiere con la fotosntesis algal.

Adems del ciclo cerrado de nutrientes entre p lipos y algas, el arrecife de coral
posee mecanismos adicionales que perm iten la captura y la retencin de
nutrientes minerales fundamentales (DiSalvo 1971). Las algas de vida libre y las
cianobacterias asociadas a la superficie del arrecife extraen nutrientes del agua
marina incluso cuando su presencia se reduce a cantidades traza. Varios
invertebrados se alimentan de dichas algas. Las bolas fecales y los detritos son
retenidos eficientemente en el ecosistema coralino gracias a la accin de
diferentes invertebrados filtradores. El arrecife atrapa los nutrientes, mientras que
alrededor los nutrientes se pierden rpidamente hacia la zona aftica batipel-
gica que es improductiva. La extraordinaria eficiencia del arrecife coralino en la
captura de nutrientes ha podido comprobarse mediante experimentos con
radiotrazadores. El estatus nutricional de los arrecifes coralinos se ve reforzado
por la actividad fijadora de nitrgeno que ejercen las cianobacterias,
esencialmente Calothrix crustacea (Wiebe et al. 1975).

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 99


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

Las regiones de fuentes termales submarinas constituyen unos hbitat marinos


anmalos, donde la productividad depende de las bacterias quimiolitotrofas y no
de los microorganismos fotosintticos (Figura 9-29)- Las aguas clidas que rodean
las surgencias termales son ricas en compuestos reducidos de azufre, que perm
iten un rpido y extenso crecimiento de las poblaciones de bacterias y arqueas
quim iolitotrofas, las cuales, a su vez, sostienen el crecimiento de comunidades de
animales que son exclusivas de estos hbitat (Tunnicliffe 1992). En estos
ambientes se desarrollan masivas comunidades de animales que se alimentan de
los microorganismos quim iolitotrofos. Algunos de ellos comen o filtran directam
ente los microorganismos; otros forman asociaciones simbiticas directas con
microorganismos y m uestran una actividad quimioautotrfica. Los tapetes
microbianos cubren toda la superficie disponible por encima y prxima a las
surgencias, a cuyo alrededor se agrupan en una elevada densidad almejas,
mejillones, gusanos vestimentferos y otros invertebrados, todos exclusivos de
estos hbitat. Las cadenas trficas de las fuentes termales submarinas han
despertado gran inters por estos hbitat tan poco comunes y por las
comunidades microbianas que albergan. En relacin a la energa, toda la
comunidad de la surgencia se sostiene por la oxidacin quim ioautotr fica del
azufre reducido, principalm ente por Beggiatoa, Thiomicrospira y otros oxidadores
del azufre o del sulfuro de gran variedad morfolgica. La oxidacin del H 2, del
CO, del N H 4% del N 0 2~, del Fe2+ y del M n2i se cree que contribuye a la
produccin quimioautotrfica, aunque no se han podido llevar a cabo mediciones
de estos procesos en las propias surgencias. El metano, derivado de la reduccin
de C 0 2 con el hidrgeno producido geotrm icam ente por la especie term fila
extrem a Methanococcus, que ha sido detectada en el fluido hidrotermal anxico,
tambin es oxidado por bacterias metanotrofas, lo cual proporciona otra entrada
de carbono y energa para el ecosistema de la fuente termal.

Composicin y actividad de las comunidades microbianas marinas

El hbitat marino pelgico es un ambiente excepcional para los macroorganismos


y para los microorganismos (Isaacs 1969). Carece por completo de plantas

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 100


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

superiores; toda la produccin primaria est a cargo de bacterias y de algas


microscpicas. En la zona euftica, los invertebrados y los peces no tienen
ninguna posibilidad de encontrar refugio en aquel ambiente homogneo y
transparente. Una transparencia cristalina, una superficie ventral plateada y un
dorso oscuro ofrecen un mnimo camuflaje. Para la mayora de los peces, la
rapidez es el atributo ms valioso, tanto para la huida como para la depredacin.
Los peces de la zona epipelgica son extremadamente hidrodinmicos y de
poderosa complexin. La formacin de bancos confiere proteccin y la practican
muchas especies. Los peces de las profundidades marinas estn protegidos por la
oscuridad y generalmente no estn adaptados a una natacin rpida. Tienen que
enfrentarse a un suministro de alimento escaso e imprevisible y suelen estar
adaptados a la ingestin de comidas copiosas y poco frecuentes (Stockton y
DeLaca 1982). El metabolismo es lento en las condiciones de baja temperatura y
elevada presin de los fondos ocenicos (Jannasch y W irsen 1977; Jannasch
1979).

Los microorganismos son relativamente abundantes cerca de la orilla, en las


zonas de afloramiento y en los estuarios, pero su nmero desciende hasta 1
100/mL en las aguas pelgicas (ZoBell 1946; Oppenheimer 1963; Kriss et al.
1967; Wood 1967; Colwell y Morita 1972; Litchfield 1976; Simidu et al. 1977; Karl y
H olm -Hansen 1978). Ah, las bacterias heterotrofas aparecen asociadas a la
superficie de las algas, o a partculas de detrito, que ofrecen una ventaja
nutricional en comparacin con las concentraciones muy bajas de nutrientes
orgnicos disueltos en el agua de la zona pelgica. En los primeros centmetros de
la mayor parte de sedimentos marinos los microorganismos son relativamente
abundantes (107lOVg), pero su nmero va disminuyendo en las capas ms
profundas (Karl 1978). La razn principal parece ser el agotamiento de los
nutrientes disponibles, ms que las condiciones de anoxia. En el mar, la mayor
parte de la biomasa m icrobiana se sita normalmente cerca de la superficie y
disminuye con la profundidad (Figura 9-30).

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 101


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

Algunos microorganismos que crecen en las aguas de superficie van


descendiendo, a menudo adheridos a las partculas de sedimento. Constituyen
una fuente de alimento para los organismos que viven en los hbitat pelgicos.
Estudios a largo plazo sobre la deposicin en el sedimento, muestran una gran
abundancia de bacterias heterotrofas (hasta 3 X 109 clulas/m2/da) y de
cianobacterias (hasta 3 X 107 clulas/m2/da), que son transportadas a las
grandes profundidades adheridas a partculas de sedimentacin veloz (Turley y
Mackie 19 95). Esos estudios indican un flujo bacteriano anual de 1,1 X 1 0 12
clulas/m2/ao, lo cual equivale a 5 6,3 mg carbono bacteriano/m2/ao, unos 4
mg de DN A, 5 mg de R N A , 27 mg de protena/m2/ao, y 2 7 ,5 X 1 0 12 genes
codificadores de fenotipo e incluidos en plsmidos/m2/ao. Por tanto, el suministro
de D N A y los mecanismos de transferencia estn potencialmente disponibles
para que se produzca un intercambio gentico entre las poblaciones que antes se
supona que estaban aisladas gen ticamente: las bacterias de las aguas de
superficie y las de las grandes profundidades marinas.

Consideraciones sobre las poblaciones microbianas marinas:

El principal problema en los estudios de autoecologa en bacterias marinas reside


en los mtodos empleados para obtener cultivos viables. N o se sabe si los
aislados obtenidos por los mtodos actuales de cultivo representan las principales
poblaciones autctonas. Sigue siendo un enig m a determinar los estudios
fisiolgicos representativos que se pueden realizar sobre un nmero tan enorme
de bacterias marinas que an no se han podido cultivar (Schut et al. 19 93).

Sin embargo, es posible adscribir algunas caractersticas distintivas a los


microorganismos autctonos de los ambientes marinos (Macleod 1965). Los
microorganismos marinos presentan crecimiento a salinidades que oscilan entre 2
0 y 4 0 partes por mil. U na concentracin de sal de 3 3 -3 5 partes por m il es la
ptim a para los microorganismos genuinamente marinos. Segn una definicin
arbitraria adm itida, las verdaderas bacterias marinas no crecen en ausencia de
cloruro de sodio. Dichas bacterias necesitan que los iones de esta sal estn
presentes en el agua de mar para mantener las funciones de membrana

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 102


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

apropiadas; por ejemplo, el cloro y el sodio son necesarios para el transporte


activo. Algunas de estas bacterias tienen mltiples membranas que rodean a la
clula. La exposicin al agua dulce altera estas capas membranosas y causa una
prdida de viabilidad.

Las bacterias marinas tienen que poder crecer a las bajas concentraciones de
nutrientes presentes en el ocano. Sin embargo, muchas de ellas se adsorben a la
superficie de las partculas detrticas y crecen bien en condiciones muy localizadas
relativamente ricas en nutrientes. Entre las caractersticas tpicas de las bacterias
marinas estn su tamao reducido, con ultramicrobacterias cuyos volmenes
celulares son inferiores a 0 ,1 pm 3, su bajo contenido de DNA y su enorme
facilidad de absorcin de sustratos; la mayora parecen ser oligotrofas estrictas, ya
que necesitan bajas concentraciones de nutrientes para el crecimiento (Schut et
al. 1 993 ). D ebido a que el 9 0 95 por ciento del ambiente marino est por
debajo de los 5 C, las bacterias marinas tienen que poder crecer a bajas
temperaturas. Exceptuando las bacterias que viven en las aguas superficiales de
las regiones tropicales y las de comunidades de las fuentes termales submarinas,
la mayora de bacterias marinas deberan ser psicrfilas o psicrotrofas. Las
bacterias de las fosas ocenicas estn expuestas a una gran presin hidrosttica.
En esas zonas, las bacterias barotolerantes y barfilas constituyen los principales
miembros de la comunidad autctona (Yayanos 1995).

En su mayor parte, las bacterias marinas son Gram negativas y mviles (ZoBell
1946). Por lo general son aerobias o anaerobias facultativas; se han encontrado
relativamente pocas anaerobias estrictas. Tambin en trminos relativos, es alta la
proporcin de bacterias proteolticas en comparacin con los hbitat de agua dulce
o del suelo. Muchos gneros de bacterias contienen especies marinas. A menudo,
Pseudomonas o Vibrio han resultado ser los gneros dominantes en los medios
marinos; tam bin se han encontrado especies de Flavobacterium en nmeros
relativamente elevados. En la Baha de Chesapeake, en Maryland (Estados
Unidos), por ejemplo, Lovelace et al. (1967) hallaron que el 56 por ciento de las
especies pertenecan al gnero Vibrio, un 18 por ciento a Pseudomonas, y un 6

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 103


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

por ciento a Flavobacterium. Tambin se han encontrado con frecuencia en las


muestras de agua de mar Spirillum, Alcaligenes, Hyphomierobium, Cytophaga, M
icrocyclus y actinomicetes.

Adems de algunas bacterias Gram negativas, en los sedimentos marinos se


hallan normalmente diversas Gram positivas, como Bacillus. Bajo la superficie de
los sedimentos, los microorganismos autctonos son las bacterias anaerobias. Los
sedimentos marinos reciben gran cantidad de materia orgnica de las aguas que
hay por encima de ellos. Dicha materia orgnica favorece el crecimiento de las
bacterias heterotrofas. En los sedimentos marinos se encuentran especies de
Desulfovibrio, que son anaerobias, y all reducen el sulfato a sulfuro de hidrgeno.
Normalmente, los metangenos anaerobios aparecen en el sedimento por debajo
de la capa de sulfato

El cultivo por dilucin, mediante el cual las poblaciones se diluyen hasta casi
hacerlas desaparecer, es til para estudiar las bacterias marinas, especialmente
las de pequeo tamao (ultramicrobacterias) que forman agrupaciones naturales
(Button et al. 1993; Schut et al 1993). Ms de la mitad de las bacterias marinas
aisladas en latitudes altas del hemisferio norte son ultramicrobacterias que
inicialmente slo podan cultivarse en medios pobres en nutrientes (Button et al.
1993)- La viabilidad media, determinada por comparacin del recuento celular
mediante citom etra de flujo con la recuperacin de las bacterias viables mediante
cultivo en dilucin, se sita entre el 2 y el 60 por ciento; la viabilidad disminuye con
concentraciones de carbono aminoacdico superiores a 5 m g por litro. El tiempo
de duplicacin oscila entre un da y una semana para estas poblaciones de
ultrabacterias oligotrficas.

En el ciclo del nitrgeno que tiene lugar en el agua de mar intervienen muchas
poblaciones de bacterias quimiolitotrofas (Belser 1979)- Entre ellas se encuentran
los gneros Nitrosococcus, Nitrosomonas, Nitrospina, Nitrococcus y Nitrobacter.

Las poblaciones fngicas de los ecosistemas marinos no haban sido tenidas en


cuenta en el pasado, aunque en las ltimas dcadas se han escrito varios tratados

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 104


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

importantes sobre la distribucin de los hongos en el mar (Johnson y Sparrow


1961; Hughes 1975). Algunos hongos de los ecosistemas marinos necesitan
cloruro de sodio para crecer; otros son tolerantes a la sal. En el agua de mar se
encuentran frecuentemente las levaduras (Lodder 1971). Los gneros que
aparecen con mayor frecuencia son Candida, Torulopsis, Cryptococcus,
Trichosporon, Saccharomyces y Rhodotorula. Rhodosporidium, que es una
levadura relacionada con los basidiomicetes, tambin se ha encontrado en
diferentes hbitat marinos. Sin embargo, los basidiomicetes filamentosos son raros
en esos ecosistemas. Ocasionalmente, aparecen floraciones de levaduras en
zonas concretas del mar, como en algunas zonas del mar del Norte (Phaff et al.
1968).

Las algas suministran un aporte esencial de carbono al ecosistema marino (Taylor


1957; Boney 1966; Dawes 1974). Entre ellas se incluyen miembros de los
clorfitos, de los euglenfitos, de los fe- fitos, de los crisfitos, de los criptfitos,
de los pirrfitos, y de los rodfitos. La mayora de los fefitos, o algas pardas, son
marinas. Con ms de 1500 especies, dichas algas son un componente destacado
intermareal y se extienden desde la zona litoral superior a la sublitoral, a
profundidades de ms de 220 m en las aguas tropicales claras. Las algas pardas
comprenden algunos gneros que constituyen el kelp, como Fucus y Sargassum.
Los clorfitos y los crisfitos son miembros prominentes del plancton marino,
cuyas concentraciones mximas se dan en las regiones superiores del mar,
generalmente entre 0 y 50 m de profundidad (ZoBell 1946; Holm - Hansen 1969)
(Tabla 9-7). En las aguas tropicales muy transparentes, y debido a la alta
intensidad de la luz solar, el mximo de fitoplancton no se encuentra en la
superficie, sino entre los 10 y los 15 m de profundidad. Las algas verdes son muy
abundantes cerca de la superficie, y suelen desaparecer por debajo de los 30 m.
Las algas rojas y las algas pardas aparecen a profundidades algo mayores.

Las diatomeas planctnicas pueden describirse como holoplanctnicas,


meroplanctnicas o ticopelgicas. Las holoplanctnicas, aunque especies pel
gicas o litorales, llevan una existencia ocenica en el sentido de que no dependen

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 105


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

del fondo para completar su ciclo biolgico. Las meroplanctnicas son pelgicas
slo durante una parte de su vida y pasan el resto de su existencia en el fondo.
Las ticopelgicas pasan la mayor parte de su vida adheridas a un sustrato fijo,
pero van a las capas superficiales del mar cuando alguna fuerza las desprende de
su hbitat natural. Las diatomeas planctnicas muestran adaptaciones fisiolgicas
y estructurales a los ambientes marinos. En su estructura, han desarrollado
elaboradas proyecciones que perm iten aumentar la relacin entre la superficie y
el volumen celular, retardando as su velocidad de cada. Algunas diatomeas
adsorben selectivamente iones monovalentes por encima de iones divalentes ms
pesados, lo cual es una adaptacin fisiolgica que contribuye a la flotacin. Otro
mecanismo de flotacin utilizado por las diatomeas y otros organismos
planctnicos es el almacenamiento de material oleoso y de burbujas de gas, como
las vacuolas de gas de Trichodesmiun (Denton 1963).

En el mar se producen floraciones ocasionales de pirrfitos. Esa proliferacin de


dinoflagelados causa las llamadas mareas rojas, si la concentracin de estas
algas es tan grande que da una tonalidad pardo rojiza al agua del mar. En
ocasiones, esas floraciones ocupan una extensin de varios kilmetros cuadrados.
Las toxinas producidas por algunos de estos dinoflagelados pueden matar peces y
otros organismos marinos. La causa de la proliferacin de dinoflagelados y de la
consiguiente marea roja no est bien documentada, pero puede estar asociada al
aumento de nutrientes en la superficie causado por el afloramiento de las
corrientes procedentes del fondo ocenico (Round 1984).

Las floraciones estacionales de dinoflagelados, menos espectaculares que las


mareas rojas, son inocuas para la vida marina, pero las neurotoxinas producidas
por estas microalgas se acumulan en los moluscos que las ingieren por filtracin.
Cuando el marisco afectado se destina al consumo humano puede causar una
intoxicacin paralizante (PSP, paralytic shellfish poisoning). En casos suaves, los
sntomas son una sensacin de hormigueo en los labios; dosis ms elevadas
pueden provocar parlisis y la muerte por parada respiratoria. Los viveros de
cultivo de marisco en las zonas donde se han dado casos de contaminacin por

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 106


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

dinoflagelados deben clausurarse estacionalmente, lo que produce una


considerable prdida econmica. El marisqueo ilegal en esas zonas puede causar
problemas de salud en ciudades alejadas. La mayor prevalencia de la intoxicacin
se da entre la poblacin local, cuando se hace caso omiso de la prohibicin y se
contina el marisqueo para el consumo propio. Existen otros tipos de
intoxicaciones relacionadas con el consumo de marisco que son menos conocidas
y estn asociadas a dinoflagelados y a algunas diatomeas (Falconer 1993).

Los protozoos son un componente importante del zooplancton marino (W estphal


1976). Se adaptan bien al ambiente salino y en ocasiones se han observado
niveles de tolerancia de hasta un 10 por ciento de NaCI. Los protozoos marinos
comprenden flagelados, rizpodos y ciliados. Los cocolitoforales flagelados son los
protozoos planctnicos ms pequeos y los principales constituyentes del plancton
marino. Entre ellos se encuentran las especies de Radiolaria y Acanthara. La
mayora de las especies de Radiolaria viven slo hasta profundidades de 350 m,
pero se han encontrado otros radiolarios a profundidades de entre 4000 y 5000
metros. Tintinnidium es un ciliado marino que prospera en las capas superiores del
mar. Los protozoos y los microcrustceos raspadores (grazers) se alimentan de
bacterias, de fitoplancton y de los componentes ms pequeos del zooplancton. El
raspado del zooplancton proporciona una conexin fundamental en la cadena
trfica marina entre los productores prim arios muy pequeos y los componentes
superiores de dicha cadena.

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 107


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

CONCLUSION

Se comprob que existen distintos microorganismos que nos ayudan a llenar


informacin y ser depuradores del agua

Se dio a conocer los estndares de calidad ambiental para conocimiento general

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 108


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

REFERENCIA BIBLIOGRAFICA

Guas para la Calidad del Agua Potable, Vol. 3, Publicacin Cientfica N 58,
Organizacin Panamericana de la Salud, Washington, (1988)

M.T. Madigan, J.M. Martinko y Parker J. Broca, Biologa de los Microorganismos,


Prentice Hall, Madrid, (2004).

Rodier, Anlisis de las aguas, Omega, Barcelona, (1989).

Microbiologa- CARPENTER- 1969 1 edicin - Interamericana S.A. Mxico

Andia Chvez Juan. 2009. Manual de derecho ambiental. Editorial el Saber.

Lima Per. Andia Valencia Walter.2010. Manual de gestin Ambiental. Editorial el


Saber.Lima Per.

Tecnologas y Sistemas de Gestin. 1999. Editorial Mcgrawhill. Espaa.


Universidad Autnoma del Caribe 2001. Evaluacin y control de ruido.

Sonometras dosimetras, tayeres de higiene y seguridad industrial

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 109


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

PGINAS WEB.

http://www.minam.gob.pe/notas-de-prensa/provincia-de-maynas-elaborara-plande-
prevencion-y-control-de-la-contaminacion-sonora/

http://uprl.unizar.es/higiene/ruido.html

http://andressebastian.galeon.com/cvitae1918073.html

http://www.fceia.unr.edu.ar/acustica/biblio/hospital.htm

http://www.datosperu.org/tb-normas-legales-oficiales-2012-Febrero-05-02-2012-
pagina-51.php

http://www.monografias.com/trabajos10/ruho/ruho.shtml

http://www.fceia.unr.edu.ar/acustica/biblio/omscrit.htm

ANEXO

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 110


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 111


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 112


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 113


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 114


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 115


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 116


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 117


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 2017

INGENIERIA AMBIENTAL Pgina 118

Anda mungkin juga menyukai