"Ao de la consolidacin del

Mar de Grau"

Universidad Nacional de Piura

Facultad de Ingeniera de Minas
Ingeniera Ambiental y Seguridad
Industrial

Informe

Curso : Anatoma Y Fisiologa Humana

Docente : Ricardo lvarez Prieto
Alumno : Rivera Delgado Aarn Alejandro
Practica : Membrana Selectiva
MESA : 02
Fecha : 19/09/ 2016
 EFECTO DE LA TEMPERATURA SOBRE LA
GLUCOSA - OXIDASA
Introduccin

La temperatura del medio influye mucho en la actividad de las enzimas. La temperatura ptima para
la accin de enzimas es la temperatura del cuerpo de los animales que oscila en el intervalo de 36 a
41c con cierto aumento de la temperatura del medio ocurre aceleracin de la reaccin a
consecuencia de la activacin de las molculas de sustrato. A la vez, incluso un aumento pequeo
de la temperatura de las enzimas, necesaria para la manifestacin de su actividad cataltica.

Empieza gradualmente, la desnaturalizacin de la enzima cuando se acelera bruscamente la

temperatura y esta sobrepasa los 50c. La inactivacin de la enzima con aumente de la temperatura
del medio es irreversible. Al bajar la temperatura la actividad de la enzima disminuye.

El mecanismo de este proceso no est claro. Sin embargo, el enfriamiento no causa

desnaturalizacin de la enzima por lo tanto su inactividad puede ser reversible.

Descripcin de la GLUCOSA OXIDASA (Glucoxidasa)

Enzima que oxida la glucosa dando como resultado al D-glucono-delta-lactona, que a su vez
se hidroliza a cido glucnico y perxido de hidrgeno por la lactonasa. Pertenece al grupo de
la flavoprotenas, debido a que posee un cido nuclicoderivado de la riboflavina.

Usos de la GLUCOSA OXIDASA (Glucoxidasa)

Como marcador en tcnicas de inmune ensayo, en la deteccin de glucosa en plasma u orina, como
biosensor en detectores digitales para diabticos. Se utiliza adems en jugos vegetales, frutales,
vinos y cervezas, para evitar cambios en olor, sabor y color por presencia de oxgeno; se emplea
para evitar el movimiento de metales a productos enlatados y conservas, etc.

Obtencin de la GLUCOSA OXIDASA (Glucoxidasa)

Se obtiene deAspergillus niger, Penicillum vitale y Penicillum notatum.

Propiedades de la GLUCOSA OXIDASA (Glucoxidasa)

Trabaja a un pH ptimo de 3 a 7.La glucosa oxidasa puede parecer una enzima comn, pero se ha vuelto
de importancia comercial en los ltimos aos, ganando una gran cantidad de diferentes usos en las
industrias qumica, farmacutica, alimentos, bebidas, y otras industrias. Adems, el cido glucnico,
que se produce a partir de la hidrlisis deD-glucono-1,5-lactona, tiene sus propios usos industriales
importantes.

La las
influye
de temperatura
enzimas.
mucho en del
Lalamedio
actividad
 Objetivo
El objetivo de la siguiente prctica es demostrar el efecto de la temperatura sobre la glucosa
oxidasa.

Metodologa

Reactivo de trabajo: 1ml de glicemia

Temperatura : 37C

Incubacin : 10 minutos

Glucosa (ul) :

Incubacin : 10 minutos
 I II III

1 1 1

0C 37C 70C

10

10 10 10

10

Discusin
La enzima glucosa oxidasa (GOx) es una oxidorrectudasa que cataliza la oxidacin de la
glucosa para formar perxido de hidrogeno y D glucono lactona. En las clulas
contribuye a degradar los azucares hacia sus metabolitos.
La glucosa oxidasa es ampliamente utilizada para la determinacin y cuantificacin de
glucosa libre en los fluidos biolgicos, tales como sangre y orina, en materia prima vegetal
y en la industria de los alimentos. Tiene adems muchas aplicaciones en biotecnologa y se
utiliza para la fabricacin de biosensores sensibles a glucosa.

Conclusin
A una elevada temperatura predomina la desnaturalizacin con prdida precipitada de la
actividad cataltica. Por tanto las enzimas muestran una temperatura ptima de accin. Los
lmites de actividad para la mayor parte de las enzimas tienen un lugar entre los 10c y
50c; la temperatura ptima para las enzimas en el cuerpo se halla alrededor de 37c.
El factor por el cual un proceso biolgico aumenta para un incremento de temperatura de
10c es el coeficiente de temperatura o Q1o para la mayor parte de las enzimas vara entre
1.5 y 3
 .

Referencias bibliogrficas

Bioqumica ilustrada de HARPER edicin 17ava pg.

Principios de bioqumica, McGraw Hill , 1989
http://apuntes de bioqumica.tripod.com./id8.html

ANEXOS
Materiales a utilizar para la prctica
Sacando reactivo para agregar al tuvo de ensayo ( 1ml de glicemia )
 Reactivo
agregado
al tubo de
ensayo

Haciendo
la incubacin
a 37c
 Agregando glucosa

Vemos el cambio de color

 Obtenemos un resultado

EFECTO DEL pH
SOBRE LA
GLUCOSA
 OXIDASA

Introduccin
Para cada enzima existe un ptimo de pH en el que se crean las condiciones ms favorables para el
mantenimiento de la conformacin funcionalmente activa de la molcula. Los grupos amino y
carboxilo de los restos de aminocidos ionizados a una magnitud de pH distinta se altera la
ionizacin de los grupos correspondientes, y como resultado se rompen los enlaces que aseguran la
formacin de los centros catalticos, y la enzima se inactiva. A los valores del pH muy altos o muy
bajos las enzimas se desnaturalizan.

El estudio del pH en relacin a la actividad enzimtica es un tpico de inters en el estudio de las

reacciones biolgicas tato en vivo como en la industria. Debido a sus propiedades inicas, cada
enzima posee caractersticas nicas de actividad con respecto al pH.

El pH es un factor que ejerce una gran influencia sobre la inercia de las reacciones catalizadas por
enzimas. Dado que los sitios activos de las enzimas estn completamente compuestos de grupos
ionizables que deben estar en la forma inica apropiada para mantener la conformacin del sitio
activo, acoplar los sustratos o catalizar la reaccin, las propiedades inicas del medio ejercen una
influencia directa sobre la cantidad de enzima que tienen los grupos ionizados de la manera
correcta para llevar a cabo la catlisis.

De hecho, una gran cantidad de estudios que tratan sobre el comportamiento enzimtico involucran
a su vez investigaciones sobre la variacin de las actividades enzimticas de acuerdo al pH.

Estudios de este tipo pueden conducir a una gran cantidad de informacin til sobre los mecanismos
involucrados en el proceso catalticos. Adems de afectar directamente la actividad de la enzima,
afecta tambin la estabilidad de esta debido a su naturaleza proteica, lo cual debe ser tomado en
cuenta en cualquier estudio que intente reaccionar la velocidad de la catlisis con el pH.

Objetivo
Identificar los cambios de pH en el reactivo de trabajo, sustancia buffer con la glucosa oxidasa y as
los alumnos poder reconocer un cambio de pH.

Procedimientos
Calibracin del equipo
 Verter agua destilada en un tubo de ensayo e introducirlo en el espectrofotmetro
para su medicin.
Si la medicin no es la correcta, debera ser cero ya que el agua destilada deja pasar
completamente la luz, girar las perillas hasta llegar al valor indicado.
Una vez logrado la medicin correcta, ya podemos medir las muestras de cada
grupo.

Medicin de la absorbancia

Preparar la muestra y agregar HCl.

Agregar un micro litro de glucosa y homogenizar.
Incubar por 10 minutos a 37c.

Metodologa

Reactivo de trabajo: 1ml de glicemia

Hcl : 0.01 (ml)

Glucosa (ul) : 1 micro litro

Temperatura : 37C

Incubacin : 10 minutos

I II III
 1 1 1

01 -------- ----------

-------- 01 -------

10 10 10

10

DISCUSION
Factores que afectan la actividad enzimtica: concentracin del sustrato- a mayor concentracin del
sustrato, a una concentracin fija de la enzima se obtiene la velocidad mxima. Despus de que se
alcanza esta velocidad, un aumento en la concentracin del sustrato no tiene efecto en la velocidad
de la reaccin.

Concentracin de la enzima siempre y cuando haya sustrato disponible, un aumento en la

concentracin de la enzima aumenta la velocidad enzimtica hacia cierto lmite.

Temperatura un incremento de 10c duplica la velocidad de reaccin, hasta ciertos lmites. El

calor es un factor que desnaturaliza las protenas por lo tanto si la temperatura se eleva demasiada,
la enzima pierde su actividad.

Las buenas condiciones son fundamentales para obtener buenos resultados, es por ello que hemos
podido observar variaciones en los resultados, de ambas mesas debido a la presencia de algn factor
externo o una manipulacin que puede que haya hecho que nuestros resultados varen. Como una
lama incubacin o adicin de los reactivos o sustrato.
 Conclusin
Tericamente el pH ptimo de la accin de
la glucosa oxidasa esta entre 3 y 7 por lo
tanto al desarrollar la practica podemos
concluir que a las muestra que se les agrego
HCl y a las que no se les agrego HCl ni
NaOH son las que ms accin enzimtica
han tenido.

Algunos resultados variaron mucho de lo

que tericamente es lo correcto y esto nos da
a entender que hubo otros factores que
afectaron a la accin enzimtica en las
muestras.

Referencias bibliogrficas

Biologa y Qumica.1era Edicin. Madrid, Editorial Santillana.

Bioqumica Ilustrada. 28ava edicin. Editorial MacGraw Hill.
Plumer D. (1981).Introduccin a la Bioqumica Practica. Editorial MacGraw Hill.
Stryer L. (1995). Bioqumica 4ta edicin. Barcelona Editorial Reverte.
Nelson D. Y Cox M.(2007) Lehninger: Principios de Bioqumica.5ta edicin. Madrid,
Editorial Omega
Anexos