REALIZAO DO TESTE DE VDRL QUALITATIVO E QUANTITATIVO

Executante da Tarefa: Farmacutico Bioqumico, Biomdico e Tcnico de Laboratrio

Resultado Esperado: Resultados com reprodutibilidade

Objetivo do Teste: Determinao de anticorpos (reaginas) no soro ou plasma para triagem da Sfilis.

Recursos Necessrios:

Kit VDRL Laborclin

Ponteiras

Pipetas de 50 l

Agitador de placas

Placas escavadas kline

Soro Fisiolgico 0,9%

Microscpio ptico

Biossegurana: Utilize equipamentos de proteo individual: Jaleco, gorro, mscara e luva.

Cuidados Especiais:

Retirar o kit da geladeira 30 antes do incio da rotina e retornar o kit a geladeira aps o uso.

Verificar se as amostras esto bem centrifugadas.

No usar material com validade vencida.

Em caso de necessidade as amostras podem ser conservadas no mximo por 5 dias a 2 a 8C e 4 a 6 semanas a -
20C.

Utilizar equipamentos de proteo individual: Jaleco, luva, mscara e gorro.

Passos ou Atividades:

I TESTE QUALITATIVO:

Retirar o kit da geladeira 30 antes do incio da rotina;

Numerar as placas escavadas: as duas primeiras escavaes da primeira placa com os controles NEGATIVO e
POSITIVO do kit, e em seguida as amostras de acordo com a rotina;

Colocar 50 l dos controles em sua respectiva cavidade;

Pipetar 50ul das amostras na cavidade de cada amostra (soro puro);

Homogeneizar suavemente o frasco de antgeno;

Com frasco na posio vertical adicionar uma gota do antgeno (20ul) nas cavidades contendo controles e amostras;
Agitar imediatamente no agitador de placa por 4 a 180 rpm;

Ler imediatamente em microscpio ptico com objetiva 10 x iniciando sempre com os controles (2 primeiras
cavidades da primeira placa) para a validao da rotina.

Iniciar a leitura das amostras somente se controles internos apresentarem resultados esperados. (CQN e CQP do Kit
Negativo e Positivo respectivamente).

Interpretao: - Reao Negativa: Ausncia de agregados. Aspecto homogneo.

- Reao Positiva: Presena de agregados.

10. Realize o teste semi-quantitativo das amostras reagentes em soro puro conforme descrito abaixo.

11. Realize a diluio 1/8 nas amostras no reagentes para deteco de amostras reagentes falso-negativas em soro
puro devido efeito prozona:

- Em um tubo de hemlise pipete 350ul de soluo fisiolgica 0,9%

- Adicione 50ul da amostra no tubo de hemlise e agite manualmente

- Realize o teste qualitativo com a diluio 1:8 preparada conforme descrito acima.

Obs.: Caso de reao negativa no soro puro, e reao positiva na diluio 1/8, indica efeito prozona, e o resultado do
teste Reagente. Assim como as demais amostras reagentes, dever ser realizado o teste semi-quantitativo descrito
abaixo para avaliao do ttulo da amostra.

Obs.: Ao fim da rotina, antes da liberao dos resultados, dever ser realizado o teste qualitativo e semi-quantitativo
da amostra controle interno da ControlLab, a qual dever apresentar resultado Positivo, com ttulo na faixa obtida na
caracterizao, conforme GETDT-POP-018, para que a rotina seja liberada.

II TESTE SEMI-QUANTITATIVO (SOMENTE AMOSTRAS POSITIVAS):

Realizar diluio da amostra positiva (puro e/ou diluio 1/8) em soluo salina para diluies de 1/2, 1/4, 1/8, 1/16,
1/32 ou mais se necessrio, colocando 50 l de soluo fisiolgica em 06 cavidades da placa escavada;

Colocar 50 l da amostra a ser testada na 1 cavidade, misturar e transferir para 2 e assim por diante at a 6
cavidade e desprezar 50 l desta ltima diluio. Obtm-se desta forma as diluies 1/2, 1/4, 1/8, 1/16, 1/32, 1/64 ...

Adicionar uma gota do antgeno previamente homogeneizado;

Agitar imediatamente no agitador de placa por 4 a 180 rpm;

Ler imediatamente em microscpio ptico com objetiva 10x;

Dar o resultado em ttulo, de acordo com a ltima titulao onde se visualiza a presena de agregados.