CUESTIONARIO

1. Cul de los mtodos utilizados le permiti observar mejor las endosporas

bacterianas? A qu atribuye la diferencia?

Las esporas se observaron mucho mejor con la tcnica de Drner ya que, en esta
tcnica, las esporas se tornan de color rojo, a diferencia de la clula vegetativa que
se torna incolora. Esto es, debido a la accin de la nigrosina que extrae el colorante
de todas las estructuras celulares a excepcin de las endosporas. La tcnica de
Schaeffer y Fulton tambin es buena pero, al tambin teir la clula vegetativa, la
diferencia entre sta y la endospora no resalta mucho.
2. Qu efecto producira el reemplazar el alcohol cido por otro decolorante como
el alcohol cetona?

No se podra demostrar el carcter cido resistente de la endospora y en general de

cualquier otra bacteria cido alcohol resistente como por ejemplo las especies de
gnero Mycobacterium, en las que su pared contiene concentraciones altas de un
lpido ceroso hidrfobo (cido miclico) que impide la absorcin de colorantes,
incluso los usados para la tincin Gram.
El cido miclico forma una cubierta por fuera de una capa delgada de
peptidoglucano. El cido miclico y peptidoglucano se mantienen unidos mediante
la accin de un polisacrido.
La pared celular cerosa hidrfoba determina que los cultivos de Mycobacterium se
aglutinen y se adhieran a las paredes del recipiente. Al teir las paredes de las
bacterias cido alcohol resistentes con carbolfucsina, el calentamiento aumenta la
absorcin del colorante. La fucsina atraviesa la pared celular, se fija al citoplasma y
resiste el tratamiento con cido-alcohol. Las bacterias cido-alcohol resistentes
retienen el color rojo de la fucsina debido a que el colorante es ms soluble en el
cido miclico de la pared celular que en el cido alcohol.
La eliminacin de la capa de cido miclico de la pared celular de las bacterias
cido-alcohol resistents las convierte en positivas para la tincin Gram.

3. Qu otros gneros de bacterias pueden formar endosporas?

Se tiene una variedad de gneros de bacterias que forman endosporas, por

ejemplo: Acetonema, Alkalibacillus, Ammoniphilus, Amphibacillus,
Caldanaerobacter, Caloramator, Caminicella, Cohnella, Dendrosporobacter,
Desulfotomaculum, Desulfosporomusa, Desulfosporosinus, Desulfovirgula,
Desulfunispora, Desulfurispora, Filifactor, Filobacillus, Gelria, Geobacillus,
Geosporobacter, Gracilibacillus, Heliobacterium, Heliophilum, Lentibacillus,
Mahella.
4. Revise otras tcnicas de tincin de esporas y comprelas con las usadas en este
ejercicio. Destaque ventajas y desventajas.

Se tiene por ejemplo la tcnica de Moeller donde se utiliza cido crmico y fucsina
fenicada en caliente para sensibilizar y colorear al esporo. La decoloracin se realiza
con cido-alcohol y se contracolorea con azul de metileno. Se observan las
endosporas rojas y el resto de la bacteria azul. Es similar a la tcnica de Schaeffer y
Fulton vista en el laboratorio, con la diferencia que no se emplea el colorante verde
malaquita. Se puede disponer de otras tcnicas de tincin para revelar la presencia
de endosporas. Los mtodos de tincin son de gran utilidad, pero deben usarse
siempre con precaucin ya que pueden conducir a errores. Las molculas de
colorante forman en ocasiones precipitados o agregados que parecen
estructuras celulares autnticas, pero que son formaciones completamente
artificiales inducidas por el mismo colorante. Tales estructuras se denominan
artefactos y deben tomarse muchas precauciones para tener la seguridad de
que no nos estamos equivocando al creer que un artefacto es una estructura
realmente existente.

Bibliografa:
Tortora,Gerard J.; Funke, Berdell R. ;Case, Christine L. Introduccin a la
microbiologa. Ed. Mdica Panamericana. 2007