Universidad Catlica Sedes Sapientiae

Facultad de Ingeniera Agraria

Carrera Profesional de Ingeniera Ambiental

Prctica de Laboratorio: Coloracin ZIEHL NEELSEN

Curso:

Microbiologa Ambiental

Profesor:

Sergio Huatuco Trinidad

Estudiantes:

Ortega Villanueva, Hector ( 2014100513 )

Vasquez Jacinto, Sarahit Helsbett ( 2014100613 )

Zelada Zegarra, Mara del Pilar ( 2015100045 )

Ciclo:

IV

Lima 2017
 TINCIN DE ZIEHL NEELSEN

La tincin de Ziehl-Neelsen es una tcnica de tincin diferencial rpida y econmica, para

la identificacin de microorganismos patgenos, por ejemplo M. tuberculosis.

Fue descrita por primera vez por dos mdicos alemanes, Franz Ziehl, un bacterilogo y
Friedrich Neelsen, un patlogo.

Fundamento

La propiedad que presentan algunas bacterias de resistir la decoloracin con cidos

fuertes despus de ser coloreadas con solucin de fucsina caliente, permite reunirlas bajo
la denominacin general de bacterias cidoresistentes o cido-alcohol resistentes. La
cido-alcohol resistencia es la capacidad de incorporar ciertos colorantes y retenerlos
despus de someterlos a la accin de cidos y alcohol y est determinada por la
presencia en la pared celular de los cidos miclicos que son cidos grasos de cadenas
ramificadas de alto peso molecular (60 a 70 tomos de carbono). Las micobacterias son
bacilos cido-alcohol resistentes, cortos, ligeramente curvos. El gnero Mycobacterium,
incluido en esta clasificacin, comprende especies patgenas para el hombre, animales y
especies saprfitas. El grado de cido-alcohol resistencia es variable entre las especies
de este gnero y est relacionado muchas veces con las condiciones culturales, no
pudiendo utilizarse esta diferencia para distinguirlos entre s. Los bacilos cido-alcohol
resistentes (BAAR) se observan de color rojo al ser coloreados con los colorantes para
Ziehl Neelsen, mientras que otros grmenes y clulas toman distintos tonos de azul
debido al azul de metileno que se utiliza como colorante de contraste.
Relacin de bacterias y otros organismos teidas por la coloracin ziehl Neelsen

Bacterias y otros Organismos

Cocos (Rhodococcus, Cryptococcus)

Bacilos (Tsukamurella)

Espirilos

Espiroqueta

Hongos Filementosos

TCNICA

1. Coger por un lado una lamina

2. Abrir el frasco con el esputo (muestra)
3. Con un palo de lengua partido por la mitad (para que as se pueda prender mejor
el esputo), coger la muestra.
4. Extender la muestra de forma ovalada en la lmina sin llegar a los bordes
5. Extender la muestra y ponerlo en el mechero consecutivamente hasta que la
muestra este seca.
6. Quemar el lado del palo de la lengua que tuvo contacto con la muestra y
desecharlo.
7. Una vez seca la muestra en la lmina, verter la Fuccina Fenicada cubriendo toda
la lmina.

8. Calentar hasta la emisin de 3 vapores.

9. Con un gotero echar el decolorante (alcohol-cido)
10. Lavar con agua poniendo la lmina de una manera inclinada, tiene que quedar
totalmente transparente.
11. Cubrir con azul de metileno toda la lmina, dejar el tiempo que desee.
12. Lavar con agua.
13. Observar las bacterias de color rojo indicando la presencia de tuberculosis en un
fondo azulado.
Foto de internet.

Foto de laboratorio.

Foto de laboratorio. Prendiendo el mechero.

Foto de laboratorio. 3 muestras teidas con azul de metileno.

Primera muestra ya terminada debidamente lavada.