REPLICACIN DEL ADN

Introduccin
La unidad bsica de informacin en los seres vivos es el gen, definido en
clulas eucariotas como un segmento de ADN que lleva la informacin
necesaria para la sntesis de una protena o de un ARN. La cantidad, tamao y
distribucin de los genes vara segn la especie analizada. En el hombre, el
nmero de genes que codifican protenas se calcula que es tan slo el 3 % del
ADN; siendo el resto, secuencias reguladoras y estructurales.

La replicacin del ADN es el proceso mediante el cual se duplica una molcula

de ADN. Cuando una clula se divide, en primer lugar, debe duplicar su
genoma para que cada clula hija contenga un juego completo de
cromosomas.

La replicacin del ADN, o copiado del ADN de la clula, no es una tarea

sencilla. Los mecanismos bsicos de la replicacin del ADN son similares
entre los organismos.

El significado gentico de la replicacin es el de conservar la informacin

informacin gentica, de manera que cuando una bacteria se divide, de lugar
a una bacteria hija que contenga la misma informacin gentica.

Historia
El modelo molecular del ADN dado a conocer en el ao 1953, marcara una
pauta par que James D. Watson y Francis H. Crick propusieran su modelo
general del proceso replicativo. Dicha propuesta consista en suponer que
cada una de las cadenas de polidesoxinucletidos serva de molde o patrn
para la formacin de una nueva cadena complementaria a la original. Como
parte de esta teora se establecan dos posibilidades fundamentales: una
conservativa, en la que una vez sintetizadas las dos nuevas cadenas estas se
separaban del molde y se apareaban entre s dando lugar a una nueva
molcula de doble banda; y una semiconservativa, en la que las nuevas
molculas estaran formadas por una cadena del molde y otra recin
sintetizada.
Caractersticas del ADN
Es una cadena molecular, quiere decir que es una sustancia constituida
por distintos tipos de molculas sencillas ligadas entre s para as ir
formando cadenas.
Es bastante largo y extremadamente delgado. Si aumentramos cien
veces el tamao del ncleo celular alcanzara el tamao de la punta de un
alfiler, mientras que el ADN plegado en ese mismo ncleo alcanzara la
longitud de un campo de ftbol.
Hay cuatro tipos de eslabones, esos son las molculas denominadas
nucletidos en la cadena. Sus nombres son: cido adenlico (adenina),
cido guan lico (guanina), cido citidlico (citosina) y cido timidlico
(timina) y las abreviaturas, A, G, C, T, para cada una.

Una vez que se comprob que el ADN era el material hereditario y se descifr
su estructura, lo que quedaba era determinar como el ADN copiaba su
informacin y como la misma se expresaba en el fenotipo. Matthew
Meselson y Franklin W. Stahl disearon el experimento para determinar el
mtodo de la replicacin del ADN. Tres modelos de replicacin era plausibles.

1. Replicacin conservativa durante la cual se producira un ADN

completamente nuevo durante la replicacin.
2. En la replicacin semiconservativa se originan dos molculas de ADN, cada
una de ellas compuesta de una hebra de el ADN original y de una hebra
complementaria nueva. En otras palabras el ADN se forma de una hebra vieja
y otra nueva. Es decir que las hebras existentes sirven de molde
complementario a las nuevas.

3. La replicacin dispersiva implicara la ruptura de las hebras de origen

durante la replicacin que, de alguna manera se reordenaran en una
molcula con una mezcla de fragmentos nuevos y viejos en cada hebra de
ADN.
El experimento de Meselson-Stahl consiste en cultivar la bacteria Escherichia
coli en un medio que contenga nitrgeno pesado (15Nitrgeno que es mas
pesado que el istopo mas comn: el 14Nitrgeno ). La primera generacin de
bacterias se hizo crecer en un medio que nicamente contena 15Nitrgeno
como fuente de N. La bacteria se transfiri luego a un medio con 14N. Watson
y Crick haban pronosticado que la replicacin del ADN era semiconservativa,
de ser as el ADN extrado de las bacterias luego de cultivarlas por una
generacin en 14N tendra un peso intermedio entre el ADN extrado del
medio con 15N y el del extrado de medio con 14N y as fue.

Los detalles del experimento que incluye un proceso de ultracentrifugacin

en cloruro de Cesio (CeCl2) puede encontrarse en el Curtis.

La replicacin del ADN, que ocurre una sola vez en cada generacin celular,
necesita de muchos "ladrillos", enzimas, y una gran cantidad de energa en
forma de ATP (recuerde que luego de la fase S del ciclo celular las clulas
pasan a una fase G a fin de, entre otras cosas, recuperar energa para la
siguiente fase de la divisin celular). La replicacin del ADN en el ser humano
a una velocidad de 50 nucletidos por segundo, en procariotas a
500/segundo. Los nucletidos tienen que se armados y estar disponibles en
el ncleo conjuntamente con la energa para unirlos.
La iniciacin de la replicacin siempre acontece en un cierto grupo de
nucletidos, el origen de la replicacin, requiere entre otras de las
enzimas helicasas para romper los puentes hidrgeno y
las topoisomerasas para aliviar la tensin y de las protenas de unin a
cadena simple para mantener separadas las cadenas abiertas.

Una vez que se abre la molcula, se forma una rea conocida como
"burbuja de replicacin" en ella se encuentran las "horquillas de replicacin"
. Por accin de la la ADN polimerasa los nuevos nucletidos entran en la
horquilla y se enlazan con el nucletido correspondiente de la cadena de
origen (A con T, C con G). Los procariotas abren una sola burbuja de
replicacin, mientras que los eucariotas mltiples. El ADN se replica en toda
su longitud por confluencia de las "burbujas".

Dado que las cadenas del ADN son antiparalelas, y que la replicacin procede
solo en la direccin 5' to 3' en ambas cadenas, numerosos experimentos
mostraron que, una cadena formar una copia continua, mientras que en la
otra se formarn una serie de fragmentos cortos conocidos como fragmentos
de Okazaki . La cadena que se sintetiza de manera continua se conoce como
cadena adelantada y, la que se sintetiza en fragmentos, cadena atrasada.

Para que trabaje la ADN polimerasa es necesario la presencia, en el inicio de

cada nuevo fragmento, de pequeas unidades de ARN conocidas
como cebadores, a posteriori, cuando la polimerasa toca el extremo 5' de un
cebador, se activan otras enzimas, que remueven los fragmentos de ARN,
colocan nucletidos de ADN en su lugar y, una ADN ligasa los une a la cadena
en crecimiento.