Aplicaciones Biotecnológicas de Las Bacterias Halófilas.

2015
APLICACIONES BIOTECNOLGICAS DE
LAS BACTERIAS HALFILAS
UNIVERSIDAD NACIONAL SAN LUIS

GONZAGA DE ICA.
FACULTAD DE CIENCIAS BIOLGICAS
2015 APLICACIONES BIOTECNOLGICAS DE LAS BACTERIAS HALFILAS
I. INTRODUCCIN:
La evolucin ha forjado todas las formas de vida en la tierra; la diversidad estructural y

funcional que apreciamos en las clulas representa un conjunto de xitos evolutivos que, a
travs del proceso de seleccin natural, confiere un valor de supervivencia (adaptabilidad)
a los microorganismos de hoy. La diversidad microbiana puede ser apreciada en trminos
de variaciones en el tamao celular y la morfologa, estrategias metablicas, movilidad,
divisin celular, biologa del desarrollo, adaptacin a ambientes extremos y muchos otros
aspectos estructurales y funciones de la clula (1).
Durante las ltimas dcadas se ha demostrado que las comunidades microbianas pueden
encontrarse en muchas condiciones adversas, como temperatura, pH y salinidad, entre
otras. Los microorganismos que habitan en estos ambientes extremos son llamados
extremfilos, y poseen caractersticas bioqumicas y metablicas que les permiten vivir en
hbitats poco comunes, resultando ser microorganismos muy tiles para el desarrollo de
nuevos procesos biotecnolgicos (2, 3).
Los microorganismos halfilos, al pertenecer al grupo de microorganismos extremfilos

capaces de vivir en ambientes salinos, ofrecen una multitud de aplicaciones en varios
campos de la biotecnologa (4) tales como en la produccin de enzimas industriales,
produccin de colorantes y aditivos, biotecnologa alimentaria y produccin de alimentos
fermentados, produccin de antibiticos (actinomicetos halfilos), produccin de
biopolmeros, incluso en la biorremediacin.
Facultad de ciencias biolgicas 1

Universidad Nacional San Luis Gonzaga de Ica
II. GENERALIDADES DE LOS HALFILOS:
2.1. MICROORGANISMOS HALFILOS:

La sal es un factor inhibidor para muchos microorganismos, sin embargo existen
aquellos que han logrado adaptarse a ambientes con elevadas concentraciones
de sales (Na Cl). Aunque las sales se requieren para todas las formas de vida,
los microorganismos pueden ser clasificados segn el requerimiento a este
factor:
- Los organismos no halfilos que slo pueden crecer por debajo de 0.2 M de
NaCl.
- Los halotolerantes son aquellos que pueden crecer en presencia y en
ausencia de altas concentraciones de sal.
- Los halotolerantes extremos son capaces de crecer aproximadamente al
15% (w/v) de NaCl (2,5 M).
- Los HALFILOS se distinguen por el requerimiento de condiciones
hipersalinas para su crecimiento.
- Los halfilos ligeros o dbiles muestran crecimiento ptimo dentro de una
concentracin de NaCl que oscila entre 0.2 y 0.85 M (2-5%). Aqu estn incluidos
la mayora de organismos marinos, considerando que el agua de mar contiene
cerca del 3% (w/v) de NaCl.
- Los halfilos moderados, crecen entre 0.85 y 3.4 M (5-20 %) de NaCl. Son
filogenticamente diversos incluyendo algunos metagnicos y gran nmero de
bacterias gram positivas y negativas.
- Los halfilos extremos, que crecen de 3.4 a 5.1 M (20-30%) de NaCl .Se
encuentran principalmente los de la familia Halobacteriaceae (5,6).
CUADRO 1. Clasificacin de microorganismos halfilos de acuerdo a sus

necesidades de NaCl.
HALFILOS CONCENTRACIONES DE NaCl
Halfilos extremos De 3.4 a 5.1 M (20-30%) a ms.
Halfilos moderados Entre 0.85 y 3.4 M (5-20 %).
Halfilos dbiles Entre 0.2 y 0.85 M (2-5%).
Halotolerantes Toleran salinidad.
2.2. DOMINIOS DE MICROORGANISMOS HALFILOS:

Arqueas:
Muchas archeas evolucionaron bajo condiciones que imperaban en la tierra primitiva,
condiciones extremas; alta temperatura (ebullicin), radiaciones letales, salinidad,
desecacin y atmsfera anaerobia. A diferencia de los extremfilos adaptados a una sola
condicin extrema las Haloarcheas disfrutan de un metabolismo verstil. Crecen en
aerobiosis, anaerobiosis o como fottrofos (mediante energa luminosa) se adaptan a
fluctuaciones de temperatura, pH y concentraciones de iones metlicos. Se las encuentran
en marismas anaerbicas, fuentes hidrotermales, permafrost antrticos, salmueras
subterrneas, subsuelos marinos entre otros ambientes hipersalinos. Son capaces de
reproducirse y realizar sus funciones metablicas de una manera ms eficaz en presencia

de altas concentraciones de sales, tienen la capacidad de balancear su presin osmtica
en relacin con el medio y resistir los efectos nocivos de la sal (6,7).
La principal dificultad tcnica que entraa el estudio de la mayora de especies de archeas
estriba en la recreacin, en el laboratorio, de las condiciones extremas que requieren. Las
archeas halfilas, en cambio, son fciles de cultivar; los microbilogos las has utilizado en
experimentos de gentica, fisiologa y biologa molecular (7,8).
Las arqueas halfilas se distribuyen en seis gneros principales, de los cuales cuatro
incluyen miembros que crecen a pH neutro: Halobacterium, Haloferax, Haloarcula y
Halococcus. Los miembros pertenecientes a los gneros Natronobacterium y
Natronococcus requieren condiciones alcalinas para su crecimiento (9).
Dentro de las especies ms estudiadas, se puede mencionar a Halobacterium halobium,

principal habitante del Gran Lago Salado de Utah en Estados Unidos, se adapta a la alta
concentracin de sal y escasez de oxgeno, desarollando una protena en la membrana
llamada bacteriorodopsina; esta protena contiene pigmentos que dan un color prpura a la
membrana y su capacidad de reaccionar ante la luz crea un gradiente protnico en la
membrana, permite la sntesis del ATP, importar iones de potasio o exportar los del
sodio; Halobacterium salinarum, concentra cloruro de potasio en su interior para evitar la
deshidratacin. Su crecimiento ptimo se da a 50C, un pH 7.2 y concentraciones de NaCl
de 3.5 a 4.3 M. tambin utiliza la bacteriorodopsina (10).
Bacterias:
La mayora de las bacterias halfilas, Gram positivas y Gram negativas; aerobias o

anaerobias facultativas son consideradas como miembros de los gneros: Halomonas,
Delega, Volcaniella, Flavobacterium, Paracoccus, Pseudomonas, Halovibrio y
Chromobacterium (11).
Eucariotas:
Hay un amplio rango de grupos taxonmicos eucariotas, aunque muy pocos han sido
estudiados en cultivos. Dunaliella salina, vive en lagos salados en los que muchas veces
es la nica alga presente. Sintetiza altas concentraciones del glicerol intracelular 7 M (56%)
como soluto compatible para mantener el balance osmtico.
CUADRO 2. Principales gneros de especies de microorganismos halfilos.
DOMINIO GNERO
ARCHAEA Halobacterium sp
Haloferax sp
Haloarcula sp
Halococcus sp
Methanohalobium sp
Methanohalophilus sp
BACTERIA Halomonas sp

Delega sp
Volcaniella sp
Flavobacterium sp
Paracoccus sp
Pseudomonas sp
Halovibrio sp
Chromobacterium sp
Salinibacter sp
Tetragenococcus sp
Marinococcus sp
Acetohalobium sp
Salibacillus sp
Halobacillus sp
EUCARIA Debaryomyces hansenii
Dunaliella sp
Hortaea werneckii
Wallemia ichthyophaga
2.3. ECOLOGA:
Los ambientes hipersalinos estn bastante extendidos por todo el mundo, sin
embargo, los ambientes extremadamente salinos son raros. La mayora de stos
se encuentran en zonas calientes y secas. La composicin inica de los lagos
salinos vara considerablemente. El predominio de unos u otros iones depende
de la topografa, geologa y condiciones climticas generales que rodean el lago.
El Gran Lago Salado, en el Estado de Utah, EE.UU., por ejemplo: este lago
est fundamentalmente constituido por agua de mar concentrada, debido a que
la proporcin relativa de cada in es la del agua de mar, slo que mucho ms
alta. El catin principal es el sodio, mientras que el anin primario es el cloro;
existen cantidades significantes de sulfato y un ligero pH alcalino. Por el
contrario, en el Mar Muerto, en Israel, es relativamente baja la concentracin del
catin sodio, pero alta la del magnesio. La qumica del agua de los lagos
carbonatados se asemeja a la del Gran Lago Salado pero, debido a los
carbonatos que se incorporan al agua de las rocas circundantes, el pH es
bastante ms alcalino, presentando valores de entre 10 y 12; adems, el
magnesio y el calcio estn prcticamente ausentes, debido a que los mismos
precipitan a altos valores de pH. A pesar de que parece que son ecosistemas
duros para la vida, los lagos salados representan ecosistemas muy bio-
productivos.
Las salinas marinas son tambin buenos hbitats para los procariotas, halfilos
extremos. Como se sabe, las salinas son aguas de mar estancadas, que se
evaporan lentamente por la accin del sol. A medida que la salina se aproxima
a la concentracin de sales que permitan el crecimiento de los halfilos
extremos, las aguas se vuelven de color rojizo, debido al aparecimiento masivo
de arqueas halfilas que crecen en este hbitat (la coloracin rojiza proviene de
los carotenoides y otros pigmentos). Tambin suelen encontrarse en las salinas

procariotas poco comunes, como las bacterias cuadradas. Tambin se han

aislado halfilos extremos en alimentos con alta concentracin de sal, como
salmueras, salsa de soya y pescado. La ecologa y diversidad de los
microorganismos halfilos es muy variada; muchos de estos microorganismos
han sido aislados de hbitats que presentan alta salinidad, ubicados en
diferentes puntos geogrficos del planeta. En la TABLA 1 se mencionan algunos
de los puntos geogrficos caractersticos de los diferentes ambientes salinos, el
rango de salinidad que presentan as como el pH caracterstico en cada caso.
TABLA 1. Ecologa de los microorganismos halfilos, diferentes hbitats salinos.
Lagos Suelos Hbitats Hbitats Alimentos Hbitats

salinos salados salinos y salinos y salados poco
fros alcalinos comunes
Salinas de Mar Rojo Antrtica, 300 Lago Megadi, Pescado seco Plantas del
Espaa y (25 a 30%) lagos Kenia y Lago y salsa de desierto:
Salar de hipersalinos Wadi Natrum, soya (6,5 a Atriplex
Atacama, Alicante, (28%) Egipto (pH=9) 10%) halinus,
Chile Espaa (10%)
(15 - 30%) (2,4 - 12,7%) Vestfold Hills, Bacalao Desierto del
lago salino Lago Venere, (19%) Neguev,
Lago Assal, fro (0 - 5 C) Isla Israel
en Djibouti, (0,5 - 20%) Pantelleria, (0,5 - 20%)
Somalia Italia
(27,7%) Valles Dry, (pH=9,7) Animales del
suelo salino (9 - 17%) desierto:
Lago salado (12% a -40 fosas
de UTA, C) nasales de
EE.UU (22%) iguanas
(12 a 45 C)
Mar Muerto,
Israel
(28%)
III. ASPECTOS ENERGTICOS DE LOS MICROORGANISMOS

HALFILOS:
La fuente primaria de energa para la expulsin del Na+ y acumulacin de K+

por la mayora de los microorganismos es el gradiente electroqumico de
protones (H+) a travs de la membrana citoplasmtica. Este gradiente
electroqumico de protones deriva de la cadena transportadora de electrones (en
Halobacteriales durante el crecimiento aerbico) o del ATP formado durante la
fosforilacin por la actividad de la ATPasa (H+-ATPasa tipo F en bacterias+-
ATPasa tipo A en organismo halfilos del phylum Archae).
Existe un caso excepcional de la generacin directa de una fuerza protn motriz
generada por la luz, mediada por la bacteriorrodopsina en Halobacterium
salinarum y algunos miembros de Halobacteriaceae, sta parece ser una

excepcin, ms que la regla en los halfilos del dominio Archaea.Se puede

tambin establecer un gradiente de Na+ (Na+) a expensas del gradiente de
protones, va los antiportadores Na+/H+; tal actividad ha sido demostrada en las
halfilas del phylum Archaea, bacterias halfilas y eucariontes.
El bombeo de protones en los microorganismos que acumulan solutos orgnicos
tambin requiere energa para el bombeo de iones, para mantener su
concentracin inica intracelular baja y contender con la difusin de sales
inorgnicas a travs de sus membranas.
Los antiportadores Na+/H+ se han caracterizado en las bacterias halfilas
moderadas que sintetizan solutos orgnicos, tales como Salinivibrio costicola.
Estos antiportadores juegan un papel importante para mantener bajas las
concentraciones de Na+. La actividad del antiportador Na+/H+ de la membrana
citoplasmtica de Dunaliella aumenta cuando las clulas crecen en altas
concentraciones de NaCl. La captacin o expulsin de iones de las clulas juega
un papel importante en la osmoadaptacin de ciertos organismos. E. coli, por
ejemplo, activa un sistema de captacin de iones K+ en condiciones de alta
osmolaridad; esto lo realiza con el fin de acumular el ion K+ as como otros
osmolitos (5).
FIGURA 1. Modelo de haloarcheae. La bacteriorrodopsina, con su coloracin prpura, utiliza la energa

lumnica para la obtencin de combustible celular. Los fotones de luz producen cambios en la forma
de esa protena mediante el bombeo de protones (iones de hidrgeno) hacia fuera de la clula. Otra
protena, la ATP sintetasa, aprovecha el flujo de protones que tiende a volver al interior para convertir
el difosfato de adenosina (ADP) en trifosfato de adenosina (ATP). A su vez, el ATP aporta la energa
para que otras mquinas moleculares realicen un trabajo til (7).

FIGURA 2. Adaptacin a las altas concentraciones de sal en hongos halotolerantes / halfilas: una perspectiva
molecular (12).
IV. OSMOADAPTACIN BACTERIANA
Los seres vivos estn permanentemente expuestos a determinados factores biolgicos,

fsicos o qumicos existentes en el medio ambiente. Dichos factores se encuentran sujetos
a variaciones que pueden amenazar la supervivencia de los organismos, lo que hace
necesario desarrollar estrategias de adaptacin a estas variables. Uno de estos parmetros
es la concentracin de solutos, no slo importante en ambientes hipersalinos, sino en
cualquier ambiente natural en los que la desecacin o la lluvia puedan provocar importantes
variaciones en la osmolaridad. La osmolaridad es la presin osmtica de una solucin,
expresada en moles de soluto por litros de solucin. Un aumento en la presin osmtica del
medio conlleva a una baja actividad de agua, lo que provoca una deshidratacin por parte
de la clula, que puede significar su muerte. En procariotas, la osmoadaptacin comprende
un complejo sistema de mecanismos fisiolgicos y genticos de adaptacin al estrs
osmtico. As los microorganismos halotolerantes y halfilos han desarrollado una serie de
mecanismos especficos de adaptacin a elevadas concentraciones salinas, que
posiblemente se encuentren conectados entre s formando un complejo circuito que se
encuentra osmorregulado. Las dos primeras respuestas especficas de la clula frente a un
aumento de la presin osmtica externa son la adaptacin de la composicin lipdica de las
membranas y la acumulacin citoplasmtica de compuestos osmoprotectores para
compensar el estrs osmtico (1).
4.1. RESPUESTA ESPECFICA AL ESTRS OSMTICO:

4.1.1. Adaptacin de la composicin lipdica de las membranas.
La membrana citoplasmtica constituye una barrera que separa el

citoplasma del medio externo, en el que pueden producirse cambios en la
concentracin de sales, por lo que debe jugar un papel importante en la
respuesta de la clula a dichos cambios. Se ha demostrado que la
adaptacin de la composicin lipdica de las membranas celulares frente a
una nueva situacin de estrs osmtico incluye modificaciones en el tipo de
fosfolpidos existentes en las membranas y en el tipo de cidos grasos que
forman parte de los lpidos. Con respecto a los fosfolpidos, a medida que
aumenta la salinidad, la membrana se enriquece en fosfatidilglicerol y/o en
di-fosfatidilglicerol (cardiolipina), fosfolpidos cargados negativamente, a
costa de una disminucin en la fosfatidiletanolamina (PE), un fosfolpido
neutro. Estas modificaciones en la composicin de lpidos polares aportan
consistencia a la membrana, a la vez que son necesarios para mantener la
estructura en doble capa lipdica, ya que la PE, en respuesta a la salinidad,
tiende a formar fases en una nica capa.
La composicin en cidos grasos de los fosfolpidos de membrana tambin

experimenta modificaciones con respecto a la temperatura y la salinidad,
siendo estos diferentes en bacterias Gram-negativas y Gram-positivas. As,
en bacterias halfilas moderadas Gram-negativas, el cambio ms destacable
es un aumento de los cidos grasos ciclopropnicos, a costa de los
insaturados, de los cuales derivan. Este efecto se ha descrito en
Pseudomonas halosaccarolytica, H. halmophila, H. canadiensis, H. salina y
Chromohalobacter salexigens. La transformacin de cidos grasos
insaturados en ciclopropnicos proporcionara a la clula una disminucin en
la fluidez de la membrana, contribuyendo as a mantener la integridad de la
misma (1).
4.1.2. Mecanismos de resistencia al estrs osmtico:
Existen dos diferentes estrategias que permite a ciertos microorganismos

sobrellevar un estrs osmtico debido a la presencia de una alta
concentracin de sal; i) Las clulas mantienen altas concentraciones
intracelulares de sal, osmticamente o al menos equivalente a la
concentracin externa de sal (salt-in strategy); algunos sistemas
intracelulares deben adaptarse a la presencia de altas concentraciones de
sal. ii) Las clulas mantienen bajas concentraciones de sales en su
citoplasma (compatible-solute strategy). La presin osmtica del medio es
balanceada por solutos compatibles, y no se requiere de una adaptacin
especial de los sistemas intracelulares.
A. Mecanismo Salt-in: Este mecanismo es es utilizada por dos grupos

filogenticamente no relacionados: Los aerbicos extremadamente
halfilos del phylum Archaea, del orden de los Halobacteriales, y las

bacterias anaerbicas halfilas del orden de los Haloanaerobiales. Estos
microorganismos acumulan en su citoplasma iones inorgnicos,
principalmente K+ y Cl-. El aumento en la concentracin de KCl en el
citoplasma conlleva a una adaptacin a las altas concentraciones salinas
de todas las protenas y otros componentes celulares como los
ribosomas. En las clulas que usan la estrategia salt-in para la
adaptacin osmtica, las enzimas y componentes estructurales de las
clulas se han adaptado a la presencia de altas concentraciones de sal
para asegurarse del propio funcionamiento de la maquinaria enzimtica
intracelular. Se ha observado que los organismos halfilos muestran
adaptaciones moleculares, dentro de las cuales existe un exceso de
aminocidos con carcter cido y pocos aminocidos hidrofbicos en sus
protenas. Esto determina que los organismos que utilizan este
mecanismo tengan una limitada capacidad para adaptarse a los cambios
en la osmolaridad del medio, por lo que su crecimiento se restringe a
ambientes con concentraciones salinas muy elevadas.
Es interesante que no se ha identificado ningn soluto orgnico
osmoprotector en los organismos representativos de estos grupos, y en
la mayora de los estudios reportados, las concentraciones intracelulares
de iones son similares a la que se encuentran en el medio donde habitan
estos organismos (1,5).
B. Mecanismo Salt-out: En otros microorganismos halfilos y

halotolerantes, el balance osmtico se establece mediante pequeas
molculas que son sintetizadas por las clulas o tomadas del medio
donde se encuentran disponibles. Este es el llamado mecanismo
compatible solute o solutos compatibles. Los solutos compatibles se
definen como solutos que a altas concentraciones permiten a las enzimas
funcionar eficientemente
Este mecanismo es el que utilizan las bacterias, tanto halfilas como
halotolerantes, adems de las arqueas metangenas halfilas
moderadas. As, estos microorganismos, en respuesta al estrs
osmtico, acumulan en su citoplasma compuestos orgnicos de bajo
peso molecular, que mantienen el equilibrio osmtico sin interferir con el
metabolismo celular, por lo que se denominan solutos compatibles. Se
trata de un sistema mucho ms flexible, ya que permite la adaptacin a
las fluctuaciones en la presin osmtica del medio. Los solutos
compatibles pueden acumularse tras su transporte al interior celular
desde el medio externo, o bien mediante sntesis, como sucede por
ejemplo cuando las bacterias se cultivan en un medio mnimo. Dado el
ahorro de energa que supone para la clula, el transporte es preferido a
la sntesis de novo. Los osmoprotectores incorporados desde el medio
externo son acumulados junto con los producidos por la clula, o bien

pueden reemplazarlos totalmente. A su vez, existen canales proteicos

que responden frente a un choque hipoosmtico, diferentes a los
sistemas de transporte, que funcionan como vlvulas de seguridad,
permitiendo la expulsin de los solutos compatibles acumulados. La
mayor flexibilidad y versatilidad de este mecanismo explica el hecho de
que se encuentre mucho ms extendido en la naturaleza, habindose
observado tambin en hongos, plantas y animales, incluso en clulas
humanas (1,5).
Los solutos compatibles son molculas polares sencillas, altamente solubles y sin carga,
o bien con carga neta neutra a pH fisiolgico, con capacidad estabilizadora de protenas
frente al calor, la desecacin o la congelacin. Estos efectos beneficiosos se basan en
el modelo de exclusin preferencial. Segn dicho modelo, los solutos compatibles
quedaran excluidos de la primera capa de hidratacin de las protenas, lo que dara
lugar a una hidratacin preferencial de la superficie de las mismas, disminuyendo as el
volumen que ocupan y estabilizando su estructura. Los solutos compatibles que
acumulan las bacterias halfilas moderadas se han identificado recientemente mediante
tcnicas de RMN y HPLC. Dichas tcnicas han permitido, entre otros avances,
identificar las tetrahidropirimidinas (ectona e hidroxiectona), y elucidar las rutas
biosintticas de varios solutos compatibles. A continuacin se describen los principales
solutos compatibles.
a) Aminocidos: Aunque este tipo de compuestos fueron los primeros solutos

compatibles que se identificaron, no parecen tener una gran importancia en
bacterias halfilas moderadas. La excepcin la constituye la prolina, que es
acumulada por algunas especies Gram-positivas, como Salinococcus roseus y S.
hispanicus. Sin embargo, en bacterias no halfilas, los aminocidos parecen poseer
una mayor importancia. As, la prolina es un importante osmoprotector en Bacillus
subtilis, cuya ruta biosinttica recientemente se ha elucidado, Staphylococcus
aureus y Salmonella typhimurium. El glutamato es el anin regulado osmticamente
ms abundante en enterobacterias. Asimismo, stas tambin acumulan alanina y
glutamina, aunque a niveles muy inferiores.
b) Azcares: En muchos microorganismos, incluyendo algunas bacterias halfilas
moderadas, es frecuente la acumulacin de sacarosa y trehalosa, como respuesta
a un choque hiperosmtico, aunque estos compuestos alcanzan concentraciones
intracelulares poco elevadas, inferiores a 500 mM, y slo pueden reemplazar
parcialmente a los solutos compatibles nitrogenados. En E. coli, sin embargo, la
trehalosa es el principal osmoprotector que se acumula cuando se cultiva en medio
mnimo, teniendo lugar su sntesis a partir de la glucosa-6-fosfato en respuesta a un
choque hiperosmtico. Los genes responsables de la sntesis (otsAB) estn
regulados por la osmolaridad del medio y la fase estacionaria de crecimiento del
cultivo. La trehalosa tambin interviene en la proteccin de la clula frente a otros
tipos de estrs, como el calor, la desecacin, o la congelacin. Sin embargo, la
trehalosa no funciona como agente osmoprotector si se suministra externamente.

c) Glicina betana (Betana): La mayora de las bacterias, incluyendo las bacterias

halfilas moderadas, acumulan betana como principal soluto compatible, cuando
se cultivan en medio complejo con elevadas concentraciones salinas. La betana se
acumula tras su transporte desde el medio externo, o bien por oxidacin de su
precursor, la colina. Tambin existen bacterias capaces de sintetizar betana de
novo. Esta sntesis, muy comn en bacterias fottrofas, no se observa en
quimiohetertrofas, a excepcin de las halfilas extremas Actinopolyspora halophila
y Halothiorhodospira halochloris. Esta ruta de sntesis, que se inicia a partir del
aminocido glicina, comprende tres reacciones de metilacin, con sarcosina y
dimetilglicina como intermediarios, y la S-adenosil metionina como donador de
grupos metilos.
Los mecanismos de transporte y de sntesis de betana por oxidacin de colina han
sido estudiados en profundidad en bacterias no halfilas, como B. subtilis, E. coli, S.
typhimurium y Sinorhizobium meliloti. En bacterias halfilas moderadas, estos
estudios son ms recientes, destacando la caracterizacin bioqumica del sistema
de transporte de alta afinidad por betana, y la clonacin de los genes de sntesis de
betana a partir de colina en C. salexigens.
d) Ectona e hidroxiectona: La ectona (2-metil-4-carboxi-3,4,5,6-
tetrahidropirimidina) se describi por primera vez en la bacteria purprea
fotosinttica Halorhodospira halochloris (anteriormente Ectothiorhodospira
halochloris, de donde proviene el nombre de ectona), aunque se encuentra
ampliamente distribuida en bacterias, as como su derivado hidroxilado, la
hidroxiectona (2-metil-4-carboxi-5-hidroxi-3,4,5,5-tetrahidropirimidina). La ruta
biosinttica de la ectona fue elucidada en H. halochloris y H. elongata por Peters y
col. Esta ruta comienza con la transformacin del aspartato semialdehido en cido
diaminobutrico (DA), que a su vez es transformado en cido N-acetildiaminobutrico
(NADA), que es convertido finalmente en ectona. Se han aislado y caracterizado
parcialmente las enzimas implicadas en dicha ruta en H. elongata (53); la DA
transaminasa, la DA acetil transferasa y la NADA deshidratasa, ms conocida como
ectona sintasa. Hasta el momento se han caracterizado los genes de sntesis de
ectona de Marinococcus halophilus, H. elongata y Sporosarcina pasteurii. En H.
elongata existen evidencias de que la hidroxiectona se forma a partir de la ectona
por hidroxilacin directa. En las especies del gnero Halomonas y en C. salexigens,
la ectona y la hidroxiectona son los solutos predominantes cuando las clulas se
cultivan en un medio sin betana o colina, alcanzando concentraciones
considerablemente elevadas, que son suficientes para conseguir, junto con los iones
intracelulares, un equilibrio osmtico con el medio.
e) Otros solutos compatibles de origen bacteriano: Existe una amplia gama de
compuestos solutos compatibles, cuya composicin qumica vara, dependiendo de
la especie bacteriana que los sintetiza. Adems de los descritos anteriormente,
destaca especialmente el glucosilglicerol, que es acumulado por un gran nmero de
cianobacterias halfilas moderadas. Tambin se ha destacado en Rhodobacter
sulfidophilus, Pseudomonas mendocina, P. alkaligenes y C. salexigens. Por otro
lado, en algunas bacterias Gram-positivas, como Halobacillus halophilus,

Planococcus sp. y Sporosarcina halophila, mediante 13C-RMN se han podido

detectar diaminocidos N-acetilados, como la N-acetilisina y la N-acetilornitina.
En la arquea hipertermfila Pyrococcus furiosus, se ha detectado la acumulacin de
manosilglicerato y di-mio-inositolfosfato, en respuesta a aumentos de temperatura o
salinidad. El manosilglicerato se acumula preferentemente al aumentar la salinidad,
mientras que el di-mio-inositolfosfato se acumula a temperaturas superiores a la
temperatura ptima de crecimiento. Por otro lado, en varias especies del gnero
Thermococcus se ha identificado un nuevo soluto compatible, la -galactopiranosil-
5-hidroxilisina, que probablemente se sintetiza a partir de la peptona presente en el
medio de cultivo.
FIGURA 3. Solutos compatibles orgnicos encontrados en microorganismos halfilos y halotolerantes (5).
V. APLICACIONES BIOTECNOLGICAS:

5.1. PRODUCCIN DE ENZIMAS INDUSTRIALES Y OTRAS MOLCULAS DE

INTERES BIOTECNOLGICO:
Muchos procesos industriales se desarrollan bajo condiciones extremas, lo

que ofrece un campo de aplicacin para las enzimas producidas por
microorganismos extremfilos, capaces de actuar a valores extremos de
temperatura, pH o salinidad. La mayora de las enzimas halfilas extra e
intracelulares que se han aislado y caracterizado a la fecha provienen de
bacterias halfilas moderadas. As se han descrito varias hidrolasas del tipo de
las amilasas, proteasas, nucleasas y 5- nucleotidasas as como otras molculas
que actualmente tienen importantes aplicaciones en procesos biotecnolgicos
producidas por halfilos (4).
La base de este inters son las propiedades que presentan las protenas
haloflicas, llamadas as porque necesitan en general altas concentraciones
salinas para su correcto funcionamiento. Las enzimas haloflicas necesitan
normalmente una concentracin 1M de Na+ o K+ para presentar actividad, y
muestran su actividad mxima a una concentracin de 2-4M (segn especies y
enzimas). A concentraciones salinas bajas estas protenas se desnaturalizan y
pierden su actividad. Se han sugerido varios modos por los que las protenas
haloflicas mantendran su estructura y funcin a concentraciones salinas tan
altas: en la estructura tridimensional de las protenas aparecera un
apantallamiento exterior de cargas negativas,debido al exceso de residuos
cidos (glutmico y asprtico),a las que se uniran iones positivos.Mediante
estos residuos polares y los iones se creara una capa de hidratacin en la
superficie de la protena (13).
FIGURA 4. Efectos de baja y alta osmolaridad sobre la estructura y funcin de las enzimas halfilas. Se originan
fuerzas de repulsin debido a la carga negativa neta en la superficie de la enzima lo que resulta en la
desnaturalizacin de la estructura de la protena nativa a baja osmolaridad. A altas concentraciones de cationes
se forma un blindaje (K +) neutralizando la carga negativa, reduciendo as las fuerzas de repulsin sobre la
superficie de la enzima (14).

FIGURA 5. Estabilizacin de la estructura de enzimas en halotolerantes a elevada osmolaridad. Exclusin

preferencial de solutos compatibles (crculos azules) en la superficie de la protena ayuda a mantener la
estructura de la enzima en la osmolaridad elevada, mientras que tambin ayuda a aumentar el volumen celular
(14).
A) Enzimas industriales:
Los biotecnlogos han explotado a los extremfilos como fuente de enzimas

denominadas extremoenzimas, las cuales ofrecen nuevas oportunidades para
biocatlisis y biotransformaciones como resultado de su extrema estabilidad. Las ms
usadas son las bacterias halfilas moderadas ya que crecen ptimamente en un rango
de salinidad de 0.5 a 2.5 M; adems producen una serie de enzimas hidrolticas
extracelulares tales como: amilasas, proteasas, lipasas, nucleasas y esterasas (15). En
los ltimos aos, el inters por el estudio de estas enzimas se ha incrementado debido
a sus propiedades catalticas y potencial de aplicacin industrial en la formulacin de
detergentes, elaboracin de productos dietticos, procesamiento de cuero, papel y
alimentos crnicos, as como tambin en biodegradacin de residuos txicos y
contaminantes industriales, entre otros (16). Aunque el potencial de las halobacterias
para catalizar reacciones bajo condiciones extremas de sal es bien conocido, hasta
ahora no hay muchos reportes de su aplicacin en forma inmovilizada, debido a que
estas clulas son muy frgiles y se lisan con la disminucin de sal en el medio externo;
sin embargo, se ha observado que la produccin de -amilasa por parte de
microorganismos halfilos se ha logrado mantener durante 45 das, inmovilizando los
microorganismos en perlas de alginato y pelculas de alcohol polivinlico.
Uno de los gneros reportados como productores de mayor diversidad de enzimas

extracelulares son los miembros del gnero Halomonas. La primera de estas enzimas
extracelulares caracterizada a nivel bioqumico y molecular ha sido una alfa-amilasa
producida por Halomonas meridiana. Por otra parte Snchez-Porro y col., 2003 llevaron
a cabo un estudio de las bacterias halfilas moderadas productoras de enzimas
hidrolticas extracelulares presentes en ambientes hipersalinos. Como resultado del
mismo encontraron una gran variedad de enzimas con potencial biotecnolgico,
incluyendo amilasas, DNAsas, lipasas, proteasas y pululanasas (17).
Las hidrolasas:
Las hidrolasas producidas por microorganismos halfilos han sido usadas en la

industria farmacutica para la elaboracin de algunos medicamentos como
antibiticos, hormonas y pesticidas, tambin han sido usadas para el tratamiento de
superficies marinas contaminadas con petrleo. Algunas celulasas haloestables han
sido aisladas de Salinovibrio sp. Por otro lado, se han caracterizado isomerasas
termoestables que permiten que la manipulacin del DNA sea ms conveniente y
eficiente; la Peptidil prolil cis-trans isomerasa (PPIasa) ha sido usada para la
regeneracin de protenas desnaturalizadas, para la estabilizacin de protenas,
para la produccin de protenas recombinantes y para la produccin de importantes
sustancias inmunosupresoras y fisiolgicamente activas (15 y 18)
B) Solutos compatibles:
Las bacterias halfilas acumulan en su citoplasma determinados compuestos orgnicos

de bajo peso molecular que no interfieren con el metabolismo celular, por lo que se
denominan solutos compatibles, y que constituyen la base fundamental de la tolerancia a
la sal de estos microorganismos (4). Dichos compuestos osmoprotectores han despertado
un enorme inters a nivel industrial ya que poseen un alto poder estabilizador y protector
de enzimas, cidos nucleicos, membranas e incluso clulas enteras, contra la congelacin,
la desecacin, la desnaturalizacin por calor y la alta salinidad. Tambin se han descrito
sus posibles aplicaciones en tecnologa enzimtica (biosensores, PCR, etc.) y en la
industria farmacutica y cosmtica. Algunos solutos compatibles, como la ectona y la
hidroxiectona han demostrado poseer un marcado efecto protector sobre las enzimas
lbiles, como la lactato deshidrogenasa y la fructoquinasa. As, en diversos estudios en los
que se compar el efecto protector de distintos solutos compatibles sobre estas enzimas
(glicina betaina, trealosa, glicerol, prolina, ectonas y azcares), se puso de manifiesto que
las ectonas fueron los mejores agentes protectores del calor y los procesos de congelacin
y descongelacin. (15,19 y 20)
La trehalosa, un osmolito en varias bacterias halotolerantes, puede utilizarse como

crioprotector para el congelamiento de biomolculas, pero tambin para la
conservacin de los microorganismos, ya que la estructura de las membranas es
preservada en presencia de este disacrido (5).
Las ectonas son comunes en eubacterias aerbicas heterotrficas como
Halomonas elongata. La ectona posee propiedades protectoras adicionales en
comparacin con otros solutos compatibles, y estabiliza incluso clulas enteras
contra tensiones tales como la radiacin UV o citotoxinas. Tambin protege contra
la inflamacin inducida por nanopartculas en el epitelio pulmonar, y daos en el
intestino delgado de la isquemia y reperfusin. Sus propiedades protectoras hacen
de la ectona un compuesto valioso, que se comercializa en productos de cuidado
de la salud y cuidado de la piel. Por lo tanto, se produce anualmente en una escala
de toneladas por la industria en un proceso biotecnolgico utilizado como cepa
productora a H. elongata -proteobacteria (21).
Una de las aplicaciones ms prometedoras es el uso de la ectona como
estabilizador de la reaccin en cadena de la polimerasa-PCR (5).
Los aminocidos activos son ampliamente usados como intermediarios en la

semisntesis de antibiticos, hormonas peptdicas y pesticidas. Una ruta
quimioenzimtica para la sntesis de D-aminocidos involucra la conversin de DL-
5-hidantonas. Estas son asimtricamente hidrolizadas a N-carbamoil D-aminocido
por una hidantoinasa especfica (dihidro-pirimidasa). El producto es convertido
qumicamente a los correspondientes D-aminocidos bajo condiciones cidas (5).
C) El Q fotoproducto de bacteriorodopsina: Debido a sus propiedades fotocrmicas,

se perfila como un pigmento con gran futuro en aplicaciones muy diversas como
material para elaboracin de memorias pticas, almacenamiento y procesado de
informacin, holografa, moduladores espaciales de luz, etc (22).
Se ha determinado que Haloarcula marismortui es la archea de mayor produccin de la Q

bacteriorrodopsina. Sin embargo durante el proceso de expresin de la protena, el
problema de la agregacin de protenas se presenta a menudo en forma de cuerpos de
inclusin, por lo que no todo el producto sale de la clula. Feng et al, 2013, purific el gen
BRS que codifica la bacteriorodopsina y lo inserto en el genoma de E. coli pET21b, los
resultados de sobreexpresin del producto fueron favorables (23).
FIGURA 6. Esquema del procedimiento para lograr la sobreexpresin del gen BR mutado en E. coli (23).
En el CUADRO 3 se ejemplifican las enzimas y otras molculas de inters biotecnolgico

producidas por estos microorganismos.
CUADRO 3. El presente cuadro se ejemplifica algunas aplicaciones biotecnolgicas de las enzimas

y otras molculas halofilicas.
ENZIMAS/OTROS APLICACIN

Bacteriorodopsina Interruptores pticos y

generadores fotnicos
de corriente en
dispositivos
bioelectrnicos.
Proteasas Sntesis peptdica
Deshidrogenasas Biocatlisis en medio
orgnico
MICROORGANISMOS Nucleasas, amilasas Agentes saborizantes
HALOFILOS Solutos compatibles Protectores de protenas
y clulas en una
variedad de aplicaciones
industriales como
congelacin y
calentamiento.
b-galactosidasa,a- Obtencin de productos
amilasas,serina en la industrias
proteasas,etc. farmacutica y qumica.
Modelamiento,
Isomerasas estabilizacin.
Desnaturalizacin y
renaturalizacin de
protenas.
5.2. BIOTECNOLOGA ALIMENTARIA:

A) Acidos grasos poliinsaturados de cadenas larga (PUFA):
Los microorganismos halfilos han sido usados para la produccin de
suplementos alimenticios; como por ejemplo los cidos grasos
poliinsaturados de cadena larga (PUFA), usados como complementos en
dietas para contrarrestar deficiencias en acidos grasos esenciales. Una
alternativa promisoria para la produccin de estos cidos grasos, son las
bacterias marinas, las cuales permiten procesos de purificacin
convencionales, rpidos rangos de produccin y buena consistencia del
producto y rendimiento (15 y 22).
B) Pigmentos carotenoides:
En el caso de los colorantes, los -carotenos son usados en la industria de
alimentos como colorantes naturales, y al ser precursores de la vitamina A,
son usados como complementos alimentarios (preparaciones
multivitamnicas) y productos saludables. Tambin como aditivos en
cosmticos y como componentes de frmacos. Se ha reportado que las
bacterias halfilas extremas tienen un ptimo crecimiento y un buen
rendimiento en la produccin de carotenoides en presencia de 25% de NaCl
(15).
C) Agentes saborizantes:
Las nucleasas y amilasas producidas por bacterias halfilas son usadas
como agentes saborizantes en la industria alimentaria.
5.2.1. PRODUCCIN DE ALIMENTOS FERMENTADOS:

Los microorganismos halfilos juegan un importante papel en los procesos
de fermentacin que ocurren en presencia de sal; estos microorganismos
catalizan la fermentacin y generan los compuestos encargados de dar
caractersticas de sabor, consistencia y aroma a los productos resultantes,
adicionalmente los microorganismos halfilos producen compuestos que
pueden servir como control de microorganismos no deseados (15). As en la
elaboracin de la salsa de soya intervienen determinadas especies del
gnero Tetragenococcus. Los granos de trigo y soya se resuspenden en
agua con NaCl al 19% y se deja durante 9 meses en oscuridad. T. halophila
se emplea como indicador de la fermentacin pudiendo alcanzar una
densidad de 108UFC/mL en la salsa de soya, que contiene una
concentracin aproximadamente 3 M de NaCl (24).
CUADRO 4. En el presente cuadro se ejemplifica algunas aplicaciones biotecnolgicas de los

microorganismos halfilos en la produccin de alimentos.
FUENTE APLICACIN
PUFA Alimentos naturales,
complementos
alimenticios humanos y
para ganado.
MICROORGANISMOS Microorganismos Salsas fermentadas y
HALOFILOS modificadores de
sabor y textura en
alimentos
Transformacin y
degradacin de
desechos
5.3. PRODUCCIN DE ANTIBITICOS:
La aparicin de resistencia a los antibiticos es un proceso evolucionista que se

basa en la seleccin para los organismos que tienen mayor capacidad para
sobrevivir dosis de antibiticos letales. Diferentes antibiticos como la penicilina,
eritromicina y gentamicina que solan ser una de los curas importantes ahora
son menos eficaces porque las bacterias tienden a ser ms resistentes. La
ventaja de que se mantenga la estabilidad estructural de la protena de un
halfilo en ambientes de alta concentracin de sal se ha atribuido al bajo
contenido de residuos hidrofbicos y en consecuencia dbiles interacciones

hidrfobas dentro de las molculas de la protena. Esta ventaja de los halfilos
ha mostrado muchas aplicaciones mdicas (25).
5.3.1. HALOCINAS PRODUCIDAS POR ARCHEAS HALFILAS:
Las bacteriocinas denominadas BLIS (Bacteriocin like inhibitory substance) son

aquellas subtancias que cumplen al menos dos requisitos esenciales:
- Son protenas o pptidos sintetizados ribosmicamente y liberados al

exterior celular.
- Su modo de accin sea bactericida.
En cuanto al significado biolgico de ser de las bacteriocinas resulta muy

tentador asignarles un papel importante en la regulacin de la dinmica de
poblaciones en ecosistemas microbianos. Todo parece apuntar a que la
produccin de estas sustancias es un mecanismo de competencia territorial.
Otros autores opinan que en realidad las bacteriocinas tal vez intervengan en
algn proceso vital para las clulas que lo producen, es decir, que tiene una
funcin primaria distinta a la actividad antibitica que manifiestan sobre otros
microorganismos.
Las halocinas son sustancias BLIS, producidas por casi todas archeas halfilas
que se han estudiado, a excepcin del gnero Halococcus ya que hasta la fecha
no se ha descrito ninguna halocina producida por este gnero. En contraste con
el gran nmero de halocinas estudiadas que se han detectado, el nmero de
ellas que han sido estudiadas en profundidad es muy reducido.
Como puede apreciarse en la TABLA 2, la mayora de halocinas que se han

caracterizado hasta el momento, excepto la H4 y la H1, son pptidos de bajo
peso molecular, ms comparables con microcinas bacterianas. Por ello resulta
ms adecuado referirnos a ellas con el trmino de microhalocinas.
TABLA 2. Halocinas estudiadas hasta la actualidad con sus respectivas referencias.
HALOCINA Microorganismos Peso Precursor 1 Referencia

productor molecular
H4 Haloferax 34,9 kD No Meseguer & Rodrguez-Valera 1985

mediterrane R4
(ATCC 33500)
Hal R1 Halobacterium 2,5 kD Si Rdest & Sturn, 1987
spp GN 101
Hal R2 Halobacterium 6,2kD No hay datos Rdest & Sturn, 1987
spp Tu A4

H6 Haloferax 2,7kD Probablemente Torreblanta et al., 1989

gibbonsii (ATCC
33959)
H1 Haloferax 31kD No Platas et al., 1996
mediterranei M2a
S8 Cepa S8a 3,58kD Si Price & Shand, 2000
C8 Halobacterium 6,3kD Si Li et al., 2003

spp AS7092
Los genes que codifican halocinas, estudiados hasta el momento, se han

localizado en plsmidos. Esta tambin es una caracterstica muy tpica de las
bacteriocinas bacterianas. A continuacin, se describen la halocinas H4 y H6,
por ser las ms estudiadas con relacin al mecanismo de accin:
Halocina H4: La halocina H4, la primera que se descubri. Esta se

obtiene a partir del sobrenadante de cultivos de Haloferax mediterranei.
La mxima actividad se alcanza justo despus de la fase estacionaria.
Se trata de una protena de 34.9 kD en forma madura. Es una protena
sal dependiente y posee una regin hidrofbica de 32 residuos de
aminocidos. Posee un amplio espectro de accin. En contacto con la
clulas sensible esta se absorbe y produce la muerte por inhibicin tanto
del transporte de aminocidos como del retorno pasivo de protones al
medio intracelular por lo que las clulas se hinchan y se deforman antes
de la muerte por lisis. Tales efectos sugieren que el objetivo primario de
esta halocina se encuentra localizado en la membrana citoplasmticas y
concuerdan con la presencia de la mencionada regin hidrofbica de la
molcula. La H4 se unira a la membrana alterando su permeabilidad y
equilibrio inico, produciendo finalmente la muerte celular.
Halocina H6: La halocina H6 es sin duda, la de mayor inters desde el

punto de vista biotecnolgico. Fue la segunda halocina estudiada. Esta
halocina se obtiene a partir de cultivos de Haloferax gibbonsii al final de
la fase exponencial de crecimiento mediante procesos de ultrafiltracin.
La halocina H6 es un inhibidor especfico del intercambiador Na /H o
NHE, (Sodium Proton exchanger). Las haloarcheas viven en un ambiente
donde la concentracin de Na alcanza valores de saturacin (3-4
molar).Sin embargo la concentracin de Na en el medio intracelular,
oscila entre valores de 0,5 a 3 dependiendo de las especies y, por encima
de estos valores,comienza a ser perjudicial para la actividad celular. Para
contrarrestar la entrada de Na, estos microorganismos disponen de un
NHE unidireccional activado por la fuerza protn motriz, que se encarga
de eztraer este catin del citoplasma en contra de su gradiente. Si el NHE
deja de funcionar, la concentracin de Na intracelular aumenta

rpidamente, provovando un desajuste osmtico.El agua comienza a
entrar, las clulas se hinchan progresivamente y finalmente se lisan. El
espectro de accin de la halocina H6 frente a otras halo arqueas, no es
muy amplio, pero en contraste, su actividad no se restringe a las arqueas
halfilas sino que sorprendentemente es capaz de inhibir el NHE de
clulas eucariotas. Este es el primer caso en que una bacteriocina o BLIS
ejerce su efecto sobre organismos tan distantes filogenticamente del
productor. El NHE es un mecanismo presente en todas las clulas
conocidas, tanto procariotas como eucariotas. En todas ellas es
bidireccional (excepto en las arqueas halfilas) y tiene funciones
importantes como la regulacin del pH y volumen intra celular. De hecho,
en mamferos algunos estados patolgicos provocan la hiperactividad del
NHE que causa daos irreversibles en las clulas que la conducen a la
muerte. Tales estados patolgicos son, por ejemplo, situaciones de
isquemia como las que se producen en el infarto de miocardio o el
cerebral. Si en esos procesos patolgicos se pudiera administrar un
inhibidor del NHE, muchas clulas podran sobrevivir. Y eso es realmente
lo que ocurre En sayos realizados en animales de experimentacin han
puesto de manifiesto un gran efecto protector del miocardio al
suministras halocina H6 intravenosa a los animales durante el infarto. A
si mismo se ha demostrado in vitro que la H6 es activa sobre el NHE de
clulas humanas en cultivo.
Durante el procedimiento del curtido de pieles se utiliza la sal como
conservante. Sin embargo, algunos microorganismos halfilos extremos
presente en dicha sal, pueden crecer sobre la piel y deteriorarlo. Estudios
recientes realizados por Todkar S. et al. (26) en el 2012, demuestran la
actividad antibacteriana de halfilos marinos que inhibe el crecimiento de
bacterias gram negativos como Staphylococcus aureus, Klebsiella
pneumoniae, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Bacillus
subtilis y hongos como el Aspergillus niger, Penicillium sp. Candida
albicans, mostrando actividad significativa de la inhibicin contra ellos.
La TABLA 3 muestra la actividad antibacteriana de los halfilos (protena
extracto crudo) en contra de los organismos de prueba. La inhibicin se
encontr que era mxima contra Escherichia coli, Pseudomonas
aeruginosa, Bacillus subtilis seguidos por Klebsiella pneumona.
TABLA 3. Muestra la actividad antibacterial in vitro de los extractos puros de protenas (halocina) de
halfilos marinos.
Organismos Zone of Inhibition in (mm) Isolate 1

Escrherichia coli 8,4

Pseudomonas 5,4
aeroginosas
Bacillus subtilis 5,2
Klebsiella pneumonia 4,2
La TABLA 4 muestra la actividad antifngica de los halfilos (protena crudo extracto) contra
los hongos de ensayo y la inhibicin se encontr que era mxima contra Candida Albicans
seguido por Aspergillus niger, Penicillium spp.
TABLA 4. Muestran la actividad antifngica in vitro de los extractos puros de protenas (halocina) de
halfilos marinos.
Organisms Zone of Inhibition in (mm) Isolate 1

Candida albicans 8,4
Aspergillus niger 6,2
Penicillium sp 6,4
5.4. PRODUCCIN DE BIOPOLMEROS:
Los microorganismos halfilos tienen la capacidad de producir biopolmeros de

diferentes clases entre los cuales encontramos: exopolisacridos,
biosurfactantes, liposomas, lectinas y bioplsticos.
5.4.1. Produccin de exopolisacridos:

Algunas especies del gnero Halomonas producen exopolisacridos (EPSs)
de inters biotecnolgico. Los EPS son polmeros constituidos por
carbohidratos que se depositan por fuera de la pared celular o se excretan al
medio. Su composicin qumica y estructura puede ser muy variada por lo
que son molculas verstiles con aplicaciones muy diversas en distintos
campos biotecnolgicos debido a sus propiedades viscosizantes,
estabilizantes, emulsificantes, formadoras de geles y a su contenido en
sulfatos. Nuestro grupo de investigacin, durante las ltimas dos dcadas,
ha caracterizado una decena de estos polmeros. Entre ellos destaca el EPS
de Halomonas eurihalina por su capacidad de formar geles; el de Halomonas
maura por sus propiedades viscosizantes y emulgentes; y el de Halomonas
stenophila por sus propiedades antitumorales debido al alto contenido en
grupos sulfato presente en el exopolisacrido (17). Estos son poco
frecuentes entre los exopolisacridos de origen microbiano. Una de las
ventajas de estos exopolisacridos es que tienen actividad moduladora de la
proliferacin de distintos tipos celulares, entre ellos clulas tumorales y

bloquea la entrada de clulas virales en clulas hospederas, adems, los
exopolisacridos le dan la capacidad a las clulas bacterianas de formar
biofilms permitindoles la adhesin a diferentes superficies Adicionalmente
algunos exopolisacridos pueden ser fuentes de oligosacridos ricos en
fucosa, presentando potenciales aplicaciones en cosmtica y medicina. El
exopolmero poli (-D-cido glutmico) (PGA) puede ser usado como un
espesante, humectante, material de liberacin sostenida, o portador de
medicamentos biodegradable en la industria farmacutica o alimentaria (18).
Se ha aplicado la gelificacin de exopolisacridos bajo condiciones alcalinas
para remover colorantes de efluentes textiles (15).
FIGURA 7. Fotografa de una placa con colonias mucosas posibles productoras de

EPS de Halomonas sp (17).

FIGURA 8. Micrografa electrnica mostrando la acumulacin de EPS alrededor de Halomonas almeriensis M8T
durante la fase de crecimiento exponencial (A) y estacionaria (B). Las flechas indican el EPS producidos por la
cepa (27).
FIGURA 9. Tabla 3 del estudio realizado por Llamas et al. 2012, donde se muestran las caractersticas de los
exopolisacridos producidos por bacterias halfilas (27).
5.4.2. Produccin de biosurfactantes:

Los biosurfactantes mejoran la remediacin de suelo y agua contaminados
con aceite, disminuyen la tensin superficial, incrementan la solubilidad y
movilidad de hidrocarburos hidrofbicos, promoviendo la degradacin (Figura
11). Los microorganismos halfilos o halotolerantes productores de
biosurfactantes podran jugar un papel importante en la acelerada remediacin
de medios ambientes salinos contaminados con aceite (15).

FIGURA 10. Produccin de emulsificantes del petrleo por bacterias halfilas.
5.4.3. Produccion de liposomas

Los liposomas son usados en medicamentos y cosmticos para el transporte
de los compuestos hacia sitios especficos en el cuerpo. Los lpidos unidos
a teres de halfilos del phylum Archae tienen una alta estabilidad qumica
y resistencia contra las esterasas y de esta manera tienen una alta tasa de
sobrevivencia comparada con los liposomas que estn basadas en
derivados de cidos grasos (15 y 18).
5.4.4. Produccin de lectinas

Las lectinas son protenas selectivas unidas a azcar, son herramientas
tiles para la investigacin de la superficie celular y marcadores celular. Son
usadas como marcadores de las modificaciones de la superficie celular para
la deteccin de clulas malignas (15 y 18).
5.4.5. Produccin de bioplsticos:

Los polihidroxialcanoatos (PHAs) son polisteres sintetizados por algunos
microorganismos. Tienen numerosas aplicaciones industriales como la
produccin de plsticos biodegradables utilizados en la elaboracin de papel
de embalaje o en la fabricacin de materiales utilizados en medicina. Este
polmero es acumulado intracelularmente por muchas de las especies de
este gnero Halomonas (15 y 17).
5.4.6. Aplicacin en procesos de extraccin del crudo en la industria

petrolera.
Los polmeros bacterianos tienen gran importancia en la industria petrolera.
Gracias a sus propiedades surfactantes y emulsionantes pueden aumentar
la eficacia de los procesos de extraccin de crudo del subsuelo
incrementando la viscosidad del agua que se inyecta alrededor de las bolsas,
disminuyendo as su tensin superficial. Las bolsas de petrleo suelen
presentar una elevada salinidad, lo que hace especialmente interesante la
utilizacin directa de bacterias halfilas moderadas productoras de
biopolmeros (28).
CUADRO 5. En el presente cuadro se ejemplifica algunas aplicaciones biotecnolgicas de los

biopolmeros producidos por bacterias y archeas halfilas.
BIOPOLIMEROS APLICACIN
Polihidroxialcanoatos Plsticos de uso en
medicina
Polmeros reolgicos Recuperacin de
petrleo

Lpidos Liposomas para

BACTERIAS Y liberacin de frmacos y
ARCHEAS HALFILAS cosmticos
Membranas Surfactantes para
productos farmacuticos
Glicerol Productos farmacuticos
5.5. PRODUCCIN DE TRANGNICOS:

La salinidad del suelo y la sequa son algunos de los ms graves problemas
agrcolas y ambientales de hoy. Por lo tanto, las investigaciones de resistencia
de las plantas al estrs abitico han recibido mucha atencin en los ltimos
aos. Reda E.A. Moghaieb et al ,2011 (29) evaluaron la tolerancia a sales de
plantas de tomate (Lycopersicum sculentum variedad "Momotaro") transgnicos
que contenan los genes L-2,4-cido diaminobutrico aminotransferasa (gen: ect
B), cido acetil L-2,4-diaminobutrico transferasa (gen: ect A) y sintasa L-ectona
(gen: ectC) ,dichos genes son necesarios para la sntesis de ectona que es un
soluto compatible comn en bacterias halfilas que se origina a partir de L-
aspartato -semialdehdo. La expresin de los genes biosintticos de la ectona
se detect en las plantas transgnicas mediante northern blot. La concentracin
de ectona aumento con el aumento de la salinidad. Los resultados sugieren que
bajo condiciones salinas la sntesis de ectona se promueve en las races de las
plantas transgnicas, lo que conduce a una aceleracin la actividad fotosinttica
en las races. Posteriormente, la funcin de raz tales como la absorcin de agua
se mejora, en comparacin con plantas de tipo salvaje. De esta manera, la tasa
fotosinttica se incrementa mediante la mejora de la estabilidad de la membrana
celular en condiciones oxidantes bajo estrs salino. Por otro lado Gasparic M.
et al, 2013 (30) identificaron la secuencia codificante completa de una protena
3'-fosfoadenosina-5'-fosfatasa, gen ApHal2, a partir de la levadura halotolerante
Aureobasidium pullulans. Este gen junto al motivo MET se insert
en Arabidopsis thaliana haciendo que esta sobreexprese un gen modificado
denomidado SAL1 (mSAL1),la planta mostr una mejor halotolerancia y
tolerancia a la sequa. Por lo tanto, la presencia de esta secuencia motivo META
fngica es beneficioso en condiciones de aumento de la salinidad y la sequa
moderada, y no muestra inconvenientes para supervivencia de las plantas en
condiciones de sequa severa. Esto demuestra que las adaptaciones de los
hongos extremotolerantes deben ser considerados como un valioso recurso
para mejorar el estrs de tolerancia en el fitomejoramiento en el futuro.
5.6. BIORREMEDIACIN:
5.6.1. Biodegradacin de residuos txicos industriales:
Las bacterias halfilas han alcanzado recientemente un gran inters
en el campo de la degradacin de los residuos txicos. Constituyen
una importante alternativa a los tratamientos microbiolgicos
convencionales en aquellos casos en los que stos sean ineficaces,

como son los procesos industriales que generan aguas residuales

hipersalinas. Esto sucede por ejemplo en la produccin de diversas
sustancias qumicas como los pesticidas, determinados productos
farmacuticos y herbicidas, y los procesos de extraccin de petrleo
y gas (31).
5.6.2. Biorremediacin de ambientes contaminados con
hidrocarburos:
El petrleo crudo es una mezcla de hidrocarburos compuesta
principalmente de hidrocarburos oxigenados y no oxigenados. Hasta
la fecha muchos estudios han informado de la capacidad de los
microorganismos para utilizar los componentes del crudo como
sustratos para su crecimiento en ambientes moderados o de alta
salinidad. Daz et al. 2000 (32) han enriquecido consorcios
microbianos, MPD-7 y MPD-M de los campos de petrleo del
cormorn en el Mar del Norte y sedimentos asociados a las races de
mangle, respectivamente. Estos cultivos degradan hidrocarburos
alifticos y aromticos a una salinidad que oscila entre 3,5 y 10%
NaCl. La degradacin total de petrleo por MPD-7 oscil entre 20 y
38%, mientras que MPD-M degrada mayor cantidad de petrleo
crudo que oscila entre 45 y 48%. En un estudio posterior, Diaz et
al. 2002 (33) han inmovilizado el cultivo de MPD-M en fibras de
polipropileno y mostr que la cepa fue capaz de degradar el petrleo
crudo en mucho mayor salinidad de hasta 18% de NaCl. Riis et
al. 2003 (34) fueron capaces de mostrar la degradacin de
combustible diesel en presencia de sal de hasta 17,5% en
comunidades microbianas extrados de suelos salinos
argentinas. Adems, estos investigadores aislaron varias bacterias
halotolerantes de los gneros Cellulomonas, Bacillus, Dietzia,
y Halomonas con la capacidad de degradar el petrleo crudo como
fuente de carbono. Del mismo modo, muchos otros investigadores
han aislado cultivos puros incluyendo Halomonas
shengliensis, Halomonas sp. cepa C2SS10, Marinobacter
aquaeolei, Streptomyces albiaxialis, Rhodococcus erythropolis,
y Dietzia maris a partir de yacimientos petrolferos, agua de
produccin, y otros ambientes salinos que degradan el petrleo crudo
como la fuente de carbono en presencia de 0-30% de sal. Borzenkov
et al. 2006 (35) reportaron el aislamiento de varias cepas de bacterias
oxidantes de hidrocarburos que representa los
gneros Rhodococcus, Gordonia, Dietzia y Pseudomonas de las
aguas de petrleo y estratal de Tatarstn, el oeste de Siberia, y los
campos petrolferos de Vietnam.
Recientemente, Al-mailem et al. 2013 (36) han aislado Marinobacter
sedimentalis y Marinobacter falvimaris obtenidas de agua y suelo en
el estanque hipersalinos de sabkhas (18-20% de salinidad) en

Kuwait. El aislamiento de estos organismos se realiz utilizando

placas de agar proporcionados con vapor de petrleo crudo como la
nica fuente de carbono y 6% de NaCl. Estos estudios tambin
mostraron que ambos organismos eran capaces de fijar el nitrgeno
atmosfrico y dicho potencial es beneficioso para la biorremediacin
eficaz de compuestos de petrleo en alta salinidad sin la necesidad
de proporcionar fertilizante.
Las archeas, por otro lado, poseen un sistema anlogo a la
bacteriorrodopsina, esta estrategia permitira utilizar el oxgeno
limitado disponible para iniciar la degradacin de hidrocarburos en
condiciones de alta salinidad. Los estudios tambin han informado de
la capacidad archaeal para degradar petrleo crudo en ambientes
hipersalinos. Al-mailem et al. 2010 (37) han aislado cepas archaeas
extremadamente halfilas de Haloferax, Halobacterium,
y Halococcus de una zona costera hipersalina del Golfo Arbigo.
Estos organismos tambin metabolizan diversos hidrocarburos
alifticos y aromticos como las nicas fuentes de carbono y energa,
en alta salinidad. Sin lugar a dudas tales propiedades son
importantes para la biorremediacin de sitios ridos de alta salinidad
impactados por el petrleo crudo.
En conclusin, la degradacin de hidrocarburos mejorada en
presencia de la luz es una observacin interesante y merece una
mayor investigacin sobre por qu las arqueas dominan los
ambientes hipersalinos. Este conocimiento podra ser til para
desarrollar estrategias para mejorar la degradacin de hidrocarburos
en ambientes de alta salinidad. Slo unos pocos estudios disponibles
sobre la capacidad de los hongos para degradar hidrocarburos en
ambientes de alta salinidad. Obuekwe et al. 2005 (38) son los
primeros en reportar el aislamiento de Fusarium lateritium,
Drechslera sp y Papulaspora sp de un pantano de sal en el desierto
de Kuwait que son capaces de degradar el petrleo crudo como la
nica fuente de carbono a la salinidad que van desde 5 a 10%. En
general, bacterias, arqueas y eucariotas unos pocos se han
demostrado para degradar el petrleo crudo en un amplio intervalo
de salinidad (0-30%).
De ellos, eubacterias, tales como Marinobacter aquaeolei, albiaxialis
Streptomyces, Actinopolyspora sp y arqueas
como Haloferax, Halobacterium y Halococcus soportar la salinidad
extrema (20-30%) y tales organismos son importantes para la
limpieza de ambientes hipersalinos impactados por el petrleo ya que
la atenuacin natural en estos entornos es demasiado lento (39).

FIGURA 11. Se muestran las especies degradadoras de petrleo crudo a distintas

concentraciones de sal (39).

FIGURA 12. Se muestran las especies degradadoras de hidrocarburos alifticos a distintas concentraciones de
sal (39).

FIGURA 13. Se muestran las especies degradadoras de benzeno, tolueno, etilbenzeno y xileno a distintas
concentraciones de sal (39).
5.6.3. Biorremediacin de ambientes contaminados por colorantes

industriales y metales pesados:
Existen algunos reportes sobre la capacidad de los microorganismos
halfilos para degradar los azo colorantes phenolicos y aniones
txicos de colorantes textiles en efluentes altamente txicos y salino
con concentraciones de sal del 15-20 %. Salinococcus iranensis y las
Halomonas son especies que coadyuvan a decolorar los colorantes
azo y usan el fenol como fuente primaria de energa.
As mismo debido a la produccin eficiente de exopolisacridos las
bacterias halfilas tienen la capacidad de captar metales pesados.
Aunque los mecanismos de esta actividad an siguen en estudios.
5.6.4. Biorremediacin de suelos salinos-sdicos:

La presencia de sodio y condiciones salinas en los suelos, interfiere en el
crecimiento adecuado de la mayora de los cultivos y por lo tanto constituye uno
de los problemas ms serios que enfrenta la agricultura sostenible en todo el
planeta. La FAO y la UNESCO calculan que el rea total de suelos salinos en
el mundo es de 397 millones de hectreas y los suelos sdicos corresponden a
434 millones de hectreas. La recuperacin de los suelos sdicos se ha hecho

principalmente cambiando el sodio en complejo coloidal por otro catin,
aplicando principalmente sales solubles de calcio sales de calcio con baja
solubilidad (cal agrcola), siendo esta una opcin costosa, Snchez L. y col.
2006, proponen una alternativa en la cual algunas bacterias halfilas son
capaces de capturar sodio in vitro y pueden ser posiblemente utilizadas en un
biorreactor para la bioremediacin de suelos sdicos y salinos, formando un
consorcio entre bacterias autctonas y bacterias a las cuales se les ha
comprobado su capacidad de capturar sodio (40).
VI. INVESTIGACIONES DE HALFILOS EN EL PER.
6.1. Caracterizacin de bacterias halfilas productoras de amilasas

aisladas de las Salinas de San Blas en Junn:
El objetivo de este estudio fue caracterizar bacterias halfilas con actividad
amiloltica provenientes de las Salinas de San Blas-Junn, ubicadas en los Andes
peruanos aproximadamente a 4100 m de altitud. Este estudio se realiz con 34
bacterias aisladas de muestras de suelos las cuales se cultivaron en agar agua
de sales (SW) 5 % conteniendo extracto de levadura 0,5 % y almidn 1 %. El 41
% de bacterias mostr la capacidad de hidrolizar almidn, stas fueron
caracterizadas mediante pruebas fisiolgicas y bioqumicas convencionales.
Tres bacterias fueron Gram-negativas y once Gram-positivas. El 21 % (3/14)
creci en un amplio rango de concentracin de sales, entre 5 y 20 %. El 14 %
(2/14) de las bacterias present actividad lipoltica, proteoltica y nucleoltica, y
el 29 % (4/14), present actividad proteoltica y nucleoltica. Las bacterias se
identificaron mediante los perfiles de restriccin de los genes ribosmicos 16S
amplificados, las enzimas usadas fueron Hae III, BstU I, Hinf I y Cfo I. Los genes
ribosmicos 16S de siete bacterias que presentaron perfiles de ADN diferentes
se amplificaron, secuenciaron y analizaron mediante programas bioinformticos.
Del anlisis fenotpico y molecular de las 14 bacterias amilolticas se obtuvieron
dos grupos, uno perteneciente al gnero Halomonas y el otro, al gnero Bacillus.
Las bacterias amilolticas caracterizadas podran ser de potencial uso a nivel
industrial (41).
6.2. Rendimiento de exopolisacridos emulgentes producidos por

bacterias halfilas nativas en tres concentraciones de melaza de
Saccharum officinarum L. caa de azcar:
El objetivo del estudio fue determinar el rendimiento y productividad de
exopolisacridos emulgentes por bacterias halfilas nativas en melaza. A partir
de muestras de agua y suelo de salinas en los distritos de San Jos y Santa
Rosa, en Lambayeque, se obtuvieron 138 aislados de bacterias en medio
sinttico malta-extracto de levadura con 5 % p/v de sales. Con el 10,8 %
de estas bacterias formadoras de colonias gomosas y cultivadas en glucosa
como fuente de carbono se recuperaron EPS, cuyos valores mximos de

emulsin en las mezclas agua fase oleosa fueron 63,3 y 56,6 %, despus
de 1 y 24 horas. El aislado M510-1C1 identificado como Halomonas sp.
M5 sintetiz EPS emulgentes en caldo con 20, 30 y 40 gL-1de melaza,
alcanzando 0,296; 0,200 y 0,113 gg-1 de rendimiento Yp/s y 0,016; 0,017 y
0,010 gL-1h-1 de productividad , respectivamente, no existiendo diferencias
significativas entre 20 y 30 g L -1. Con el control 10 gL-1 de glucosa se alcanz
un rendimiento Yp/s de 0,171 gg-1 y una productividad de 0,018 gL-1h-1. Se
demostr que las bacterias halfilas nativas producen exopolisacridos
emulgentes en melaza como fuente de carbono (42).
6.3. Bacterias halfilas moderadas productoras de hidrolasas de inters

biotecnolgico:
El objetivo de este estudio fue caracterizar bacterias halfilas moderadas
productoras de hidrolasas de inters biotecnolgico. Para ello, se seleccionaron
32 aislados bacterianos aerobios procedentes de ambientes salinos de Pilluana,
Huacho, Maras, Chilca, Paracas y Ventanilla. Para todos los microorganismos
se determinaron: caractersticas morfolgicas, fisiolgicas y capacidad
hidroltica a diversos sustratos. La caracterizacin genotpica se realiz
amplificando los genes ribosmicos bacterianos 16S y cortando con la enzima
Hae III. Los microorganismos presentaron actividad hidroltica sobre tween 80,
aceite de oliva, almidn, casena, lactosa y ADN; correspondiendo cada una de
estas molculas a los nmeros de aislado 23, 2, 24, 19, 2 y 6, respectivamente.
Los aislados L3CH y L2PAR hidrolizaron la mayora de sustratos a excepcin de
lactosa y ADN, respectivamente. Por otro lado, los aislados P2RI-17 y M17
hidrolizan solamente Tween 80. Del anlisis de restriccin del ADN ribosmico
16S amplificado se obtuvieron 12 perfiles genticos, lo cual indica que al menos
existen 12 especies bacterianas con gran potencial biotecnolgico en la
produccin de enzimas hidrolticas (43).
6.4. Actinomycetes bioactivos de sedimento marino de la costa central del

Per:
En el presente trabajo se evalu la actividad antibacteriana y antifngica de
actinomycetes marinos sobre patgenos de origen clnico. Asimismo, fueron
evaluadas la capacidad de producir enzimas extracelulares como carbohidrasas,
lipasas y proteasas. Los Actinomycetes fueron aislados de sedimentos
colectados entre setiembre a diciembre del 2005 de las Bahas de Ancn (Lima)
e Independencia (Ica) de 34 y 100 m de profundidad. El aislamiento se realiz
en Agar Casena - Almidn (ACA) y Agar Marino (AM) con adicin de
Cicloheximide (10 ng/mL). Las evaluaciones antimicrobianas fueron realizadas
frente a bacterias patgenas antibitico-multirresistentes y hongos de origen
clnico; en tanto, para evaluar su actividad multienzimtica se utilizaron sustratos
polimricos diversos. Se aislaron un total de 62 actinomycetes, de los cuales 31
(50%) mostraron actividad antibacteriana frente a Staphylococcus aureus, 36
(59%) frente a Pseudomonas aeruginosa y 23 (37%) a ambos patgenos. Las

cepas de actinomycetes I-400A y M10-77 identificadas en cada caso como

Streptomyces y Thermoactinomyces fueron las que exhibieron mayor actividad
inhibitoria frente a P. aeruginosa y S. aureus respectivamente. Asimismo, 13
actinomycetes (20,97%) mostraron actividad antifngica frente a cultivos de
Candida albicans cepa 1511 y 17 (27,42%) frente a Candida albicans cepa
1511MIC; sin embargo, ningn actinomycete present actividad inhibitoria frente
a Aspergillus niger, Aspergillus fumigatus y Trichophyton mentagrophytes. La
mayora de los actinomycetes mostraron tener actividad multienzimtica capaz
de hidrolizar compuestos polimricos como el tween-80 (96%), la gelatina (95%),
almidn (93%), lecitina (88%) y la casena (74%). Extractos del compuesto activo
obtenidos de la cepa M10-77 con etil acetato rindieron notable actividad
inhibitoria contra S. aureus. Se concluye que el sedimento marino es fuente de
Actinomycetes con gran capacidad de producir sustancias bioactivas de
importancia mdica-farmacolgica e industrial (44).

VII. CONCLUSIONES:
o La sal es un factor inhibitorio de crecimiento microbiano, sin embargo existen

microorganismos llamados halfilos que han desarrollado una serie de
estrategias para resistir el estrs osmtico originado por las elevadas
concentraciones de sales. Debido a que muchas de los procesos
biotecnolgicos se llevan en condiciones de estrs y se requiere evitar
cualquier tipo de contaminacin microbiana, los halfilos han captado el
inters de muchos cientficos que mediante sus investigaciones dilucidan
poco a poco el uso ptimo de los halfilos para la produccin de enzimas y
otras molculas de inters biotecnolgico a nivel industrial.
o A pesar de que actualmente se usan algunos microorganismos halfilos en

distintas industrias, an son escasas las investigaciones sobre los usos
potenciales y/o la optimizacin del proceso biotecnolgico.
VIII. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS:

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1729/5/1/385/htm

IX. ANEXOS:
ANEXO 1. Se presentan imgenes relacionadas al tema.
FIGURA 1. Gradiente de protones utilizado para generar ATP fuente (on line)
disponible en: https://en.wikipedia.org/wiki/halobacterium_salinarum

FIGURA 2. Colonias (a) y clulas de Halobacterium ( Hbt. )salinarum vesculas de gas que
produce (b, c). ( un ) Las colonias sobre medios slidos cultivaron durante una semana a 40
C y tres semanas a temperatura ambiente. Vescula (Vac +clulas) forman colonias blancas
rosadas, mientras que las colonias de Vac - mutantes son el rojo y transparente. ( b ) las
clulas cultivadas en medios lquidos observadas por microscopa de luz de contraste de
fase. ( c ) clulas de un Vac +colonia investigado por microscopa electrnica de
transmisin.La forma de las clulas pleomrfico crecido durante tres meses en m edios slidos
se diferencia de las clulas con forma de bastn visto en cultivo lquido (45).

FIGURA 3. Estructura de la bacteriorrodopsina. Fuente (on line) disponible en:

http://es.slideshare.net/jarconetti/tema-10-6796319
FIGURA 4. Flujograma general de obtencin de plantas de tomate

(Lycopersicum sculentum variedad "Momotaro") transgnicos resistentes a
suelos salinos.

1. Bacteriorrodopsina: memorias pticas, almacenamiento y procesado de informacin,

holografa, moduladores espaciales de luz, etc.
2. Solutos compatibles: estabilizadores de biomolculas y clulas, antagonistas de sales,

agentes protectores de estrs, etc
a. Exopolisacridos: espesantes, emulgentes y gelificantes.
b. Liposomas: transporte de compuestos en medicina y cosmtica.

3. Biopolmeros
c. Acido poli-glutmico (PGA): humectante, espesante, etc.
d. Polihidroxialcanoatos: plsticos biodegradables, prtesis, etc.
a. Hidrolasas
4. Enzimas
b. Isomerasas
5. Halocinas como el PINHE : protector en el infarto de miocardio (entre otros usos)
6. Vesculas de gas: separacin, presentacin de antgenos y desarrollo de vacunas
7. Pigmentos carotenoides: suplementos y pigmentacin de alimentos
FIGURA 5. Resumen de las aplicaciones biotecnolgicas de los halfilos.

BIOTECNOLOGA


Aplicaciones Biotecnológicas de Las Bacterias Halófilas.

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Aplicaciones Biotecnológicas de Las Bacterias Halófilas.

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2015

UNIVERSIDAD NACIONAL SAN LUIS

La evolucin ha forjado todas las formas de vida en la tierra; la diversidad estructural y

Los microorganismos halfilos, al pertenecer al grupo de microorganismos extremfilos

Facultad de ciencias biolgicas 1

II. GENERALIDADES DE LOS HALFILOS:

2.1. MICROORGANISMOS HALFILOS:

CUADRO 1. Clasificacin de microorganismos halfilos de acuerdo a sus

2.2. DOMINIOS DE MICROORGANISMOS HALFILOS:

reproducirse y realizar sus funciones metablicas de una manera ms eficaz en presencia

Dentro de las especies ms estudiadas, se puede mencionar a Halobacterium halobium,

La mayora de las bacterias halfilas, Gram positivas y Gram negativas; aerobias o

CUADRO 2. Principales gneros de especies de microorganismos halfilos.

Facultad de ciencias biolgicas 3

Facultad de ciencias biolgicas 4

procariotas poco comunes, como las bacterias cuadradas. Tambin se han

TABLA 1. Ecologa de los microorganismos halfilos, diferentes hbitats salinos.

Lagos Suelos Hbitats Hbitats Alimentos Hbitats

III. ASPECTOS ENERGTICOS DE LOS MICROORGANISMOS

La fuente primaria de energa para la expulsin del Na+ y acumulacin de K+

Facultad de ciencias biolgicas 5

excepcin, ms que la regla en los halfilos del dominio Archaea.Se puede

FIGURA 1. Modelo de haloarcheae. La bacteriorrodopsina, con su coloracin prpura, utiliza la energa

Facultad de ciencias biolgicas 6

IV. OSMOADAPTACIN BACTERIANA

Los seres vivos estn permanentemente expuestos a determinados factores biolgicos,

4.1. RESPUESTA ESPECFICA AL ESTRS OSMTICO:

La membrana citoplasmtica constituye una barrera que separa el

La composicin en cidos grasos de los fosfolpidos de membrana tambin

4.1.2. Mecanismos de resistencia al estrs osmtico:

Existen dos diferentes estrategias que permite a ciertos microorganismos

A. Mecanismo Salt-in: Este mecanismo es es utilizada por dos grupos

halfilos del phylum Archaea, del orden de los Halobacteriales, y las

B. Mecanismo Salt-out: En otros microorganismos halfilos y

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pueden reemplazarlos totalmente. A su vez, existen canales proteicos

a) Aminocidos: Aunque este tipo de compuestos fueron los primeros solutos

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c) Glicina betana (Betana): La mayora de las bacterias, incluyendo las bacterias

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Planococcus sp. y Sporosarcina halophila, mediante 13C-RMN se han podido

FIGURA 3. Solutos compatibles orgnicos encontrados en microorganismos halfilos y halotolerantes (5).

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5.1. PRODUCCIN DE ENZIMAS INDUSTRIALES Y OTRAS MOLCULAS DE

Muchos procesos industriales se desarrollan bajo condiciones extremas, lo

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FIGURA 5. Estabilizacin de la estructura de enzimas en halotolerantes a elevada osmolaridad. Exclusin

Los biotecnlogos han explotado a los extremfilos como fuente de enzimas

Uno de los gneros reportados como productores de mayor diversidad de enzimas

Las hidrolasas producidas por microorganismos halfilos han sido usadas en la

Las bacterias halfilas acumulan en su citoplasma determinados compuestos orgnicos

La trehalosa, un osmolito en varias bacterias halotolerantes, puede utilizarse como

Los aminocidos activos son ampliamente usados como intermediarios en la

C) El Q fotoproducto de bacteriorodopsina: Debido a sus propiedades fotocrmicas,

Se ha determinado que Haloarcula marismortui es la archea de mayor produccin de la Q

En el CUADRO 3 se ejemplifican las enzimas y otras molculas de inters biotecnolgico

CUADRO 3. El presente cuadro se ejemplifica algunas aplicaciones biotecnolgicas de las enzimas

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Bacteriorodopsina Interruptores pticos y

5.2. BIOTECNOLOGA ALIMENTARIA:

5.2.1. PRODUCCIN DE ALIMENTOS FERMENTADOS:

CUADRO 4. En el presente cuadro se ejemplifica algunas aplicaciones biotecnolgicas de los

5.3. PRODUCCIN DE ANTIBITICOS: