LABORATORIO DE ANLISIS ISNTRUMENTAL - UNIVERSIDAD DEL VALLE

DETERMINACIN ESPECTROFOTOMETRICA DE Fe (II) EN UN PRODUCTO

FARMACEUTICO: CURVA DE ERROR
Lina Liseth Sandoval Yate (1538967), Kelly Johana Rojas Ortiz (1524798).
sandoval.lina@correounivalle.edu.co, kelly.rojas@correounivalle.edu.co
Programa: Tecnologa qumica (2131)
Fecha laboratorio: 01 de Septiembre de 2107
Fecha entrega: 08 de Septiembre de 2017
Docente: Harold Daz Segura

Palabras clave: absortividad molar, espectrofotmetro, curva de calibracin.

Resumen. En la prctica se determin por espectrofotometra la concentracin de hierro en un producto

farmacutico, se utiliz en este caso un jarabe. Para ello fue necesario la preparacin previa de una
solucin acetato de sodio 10% p/v, cloruro de hidroxilamina 10% p/v, 1-10 fenantrolina, HCl1%v/v y
soluciones estndar de hierro a partir de una solucin de 50ppm preparada previamente. Finalmente en el
espectrofotmetro se procedi a realizar un barrido espectral con una solucin de hierro de 2.0 ppm en un
intervalo de longitud de onda de 400 a 600 nm encontrando as un mximo de absorbancia de 512 nm, se
realiz la curva de error para mirar los intervalos donde el error relativo se hace menor y con base en esto
se pudo realizar una curva de calibracin. Obtenindose de la muestra problema una concentracin de
hierro 7782,2 ppm con un porcentaje de error de 3,13, con una absortividad molar de 10404,8 L/ mol x cm
con un error de 6,26%.

Clculos y resultados necesarios para obtener la solucin requerida y se

consignaron en la tabla 1.
Preparacin de soluciones
Se prepararon 25 mL de una solucin 2,0 ppm de Fe 25 [ ]
tomando como base una de 50 ppm, se realiz el [ ]
siguiente clculo para hallar los mL que se necesitaban. =
2,0 1000 Ec.1
50 = 2 50
1000 50 Concentracin Volumen de sln Volumen de sln
Luego se prepar una solucin de cloruro de 2,0 ppm (mL) 50 ppm (mL})
hidroxilamina al 10% p/v de la que se necesitaban 25 mL, 0,04 0,5 0
adicionalmente se elabor una solucin 10% p/v de 0,08 1,0 0
acetato de sodio (CH3COONa), a continuacin se 0,16 2,0 0
encuentran los respectivos clculos. 0,24 3,0 0
0,40 5,0 0
10 1,0 0 0,5
25 = 2,5
100 2,0 0 1,0
CHA: hidroxilamina 4,0 0 2,0
10
200 = 20 3 8,0 0 4,0
100 10,0 0 5,0
16,0 0 8,0
Posteriormente para realizar la solucin de 1-10
Tabla 1. Volumen de soluciones patrn
fenantrolina se utilizaron 0,05 g de monohidrato de 1-10
fenantrolina a la cual se le agreg 1 mL de etanol
A cada solucin patrn se le adicionaron 1 mL de cloruro
diluyendo en 10 mL de agua tibia y enrasando a 50mL y
de hidroxilamina, 2,5 mL de solucin de 1-10
para realizar los 200 mL de HCl al 1% v/v se
fenantrolina, 8,0 mL de solucin de acetato de sodio y se
cuantificaron los mL necesarios as:
enras con agua. Se llev acabo el mismo procedimiento
1 1,18 100 para la preparacin del blanco, teniendo en cuenta que
200 = 6,37 no se le adicionaba el analto en cuestin.
100 1 37
Consecutivamente se realiz un barrido espectral usando
Soluciones patrn la solucin que contena 2,0 ppm de Fe para visualizar la
Para preparar las soluciones estndar con las que se longitud de onda con mayor absorcin usando el blanco
trabajaron, se realiz una ecuacin general [Ec 1] en la como referencia, los resultados se encuentran en la tabla
que utilizando el anlisis dimensional se hallan los mL de 2.
la solucin patrn (ya sea de 2 o 50 ppm de Fe)
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(nm) Abs Para realizar la curva de Crawford con el fin de

establecer el intervalo en el cual el error cometido
400 0,108
experimental es mnimo, para esto es necesario utilizar
420 0,177 los datos de absorbancia de las soluciones estndar, se
440 0,232 puede calcular la transmitancia usando la Ecuacin 3,
ahora con ese resultado se puede obtener la curva de
460 0,281
error usando la Ecuacin 4, considerando un error
480 0,330 fotomtrico constante de = 0,05%. Los datos
500 0,345 resultantes de la aplicacin de las ecuaciones se
encuentran en la tabla 3.
502 0,348
504 0,350 Solucin A T %T C/C
506 0,353 patrn
508 0,356 (ppm)
510 0,537 0,04 -0,09 1,230 123,026 0,195
512 0,358 0,08 -0,04 1,096 109,647 0,494
514 0,357 0,16 0,012 0,972 97,274 -1,858
516 0,355 0,24 0,020 0,954 95,499 -1,136
518 0,350 0,40 0,048 0,895 89,536 -0,504
520 0,343
1,00 0,177 0,665 66,527 -0,184
540 0,196
2,00 0,348 0,448 44,874 -0,138
560 0,063
580 0,018 4,00 0,723 0,189 18,923 -0,158
600 0,002 8,00 1,480 0,033 3,311 -0,442
10,00 1,818 0,015 1,520 -0,784
Tabla 2. Datos de barrido espectral con solucin de 2,0
ppm de Fe 16,00 1,889 0,012 1,291 -0,889
Tabla 3. Datos curva de Crawford

Espectro de absorcin de Fe % = 10 100 [. 3]

0,434
0.4 = [. 4]
log
0.35
Con la tabla 3 se realiza la curva de Crawford (C/C vs
0.3
%T)
Absorcin

0.25
0.2
0.15
Curva de error relativo
0.1 1
0.05
0.5
0
350 400 450 500 550 600 650 0
(C/C)

Longitud de onda () -20 30 80 130

-0.5

Grfica 1. Espectro de absorcin del Fe (Absorcin vs -1

Longitud de onda)
En la grfica se evidencia que la longitud de onda con -1.5
mayor absorcin se encontr en 510 nm. -2
%T
Curva de error
Se midi la absorbancia emitida por las soluciones que Grfica 2.Curva de error relativo de las concentraciones
estaban a diferente concentracin, usando el blanco vs % de transmitancia.
como referencia y ajustando la longitud de onda de
mayor absorcin obtenida en el barrido espectral.
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Segn la grfica 2, la curva de error nos indica cuales Tabla 5. Datos usados para la curva de calibracin luego
son las concentraciones que tienen mejor linealidad y por de analizar la curva de error.
lo tanto menor error relativo posible, el rango oscila entre
las concentraciones de 0,24 a 4,0 ppm. Curva de calibracin
Para obtener un mejor intervalo ptimo de 0.800
concentraciones que la curva de Crawford se procede a 0.700
y = 0.1863x - 0.0215
construir la curva de Ringbom (grfica 3), que consiste en 0.600
R = 0.9994

Absorbancia
construir una grfica de absorbancia (100- %T) vs. Log 0.500
[Concentracin], Para realizar esta curva se consigna los
0.400
datos en la tabla 4.
0.300
Log 100-%T 0.200
[Concentracin] 0.100
-1,398 -23,027 0.000
0 1 2 3 4 5
-1,097 -9,648
Concentracin (ppm)
-0,796 2,725
-0,620 4,501 Grfica 4. Curva de calibracin
-0,398 10,464
Determinacin de concentracin de Fe
0 33,473
En el tratamiento de la muestra se utiliza un jarabe con
0,301 55,125 803,33 mg Fe por 100 mL de jarabe, inicialmente se
0,602 81,077 adicionan 0,5 mL de este y 4,0 mL de HCl concentrado,
se procede a digestar calentndolo en una plancha hasta
0,903 96,689
que el volumen se disminuy a la mitad, luego de que se
1,000 98,479 enfri se adicionaron 10 mL de agua y se filtr, se
1,204 98,709 realizaron lavados con HCl 1% v/v hasta que completo
Tabla 4.Datos para curva de Ringbom los 100 mL del matraz, simultneamente se prepar un
blanco llevando a cabo el mismo procedimiento pero sin
adicionar el analito.
Curva de Ringbom Se hall la concentracin de Fe en el jarabe realizando el
siguiente clculo.
150.000 8033,3 1
0,5 = 40,16
1000 0,1
100.000
Para realizar la solucin 2,0 ppm de Fe a partir de la
100-%T

50.000 solucin preparada anteriormente se hallan los mL

necesarios as:
0.000 2 1000
25 = 1,24
-2.000 -1.500 -1.000 -0.500 0.000 0.500 1.000 1.500 1000 40,167
-50.000 Luego de mezclar los mL de solucin necesaria con agua
Log [Fe] se adicionan los mismos reactivos utilizados en las
soluciones patrn del primer punto.
Grfica 3.Curva de Ringbom
La muestra se deja reposar normalmente 15 minutos y se
Teniendo en cuenta la curva de error se decide tomar los toman las respectivas absorbancias en el
puntos de mejor linealidad y representarlos en una tabla. espectrofotmetro, el trabajo se realiza por duplicado y
(Tabla 5) para proceder a realizar la curva de se obtienen las absorbancias correspondientes a una
calibracin.(Grfica 4) longitud de onda de 512 nm.

Concentracin (ppm) Absorbancia Absorbancia muestra 1: 0,338

0,24 0,02 Absorbancia muestra 2:0,258
0,40 0,048
1,0 0,177 Con la grfica 4 (Curva de Beer o de calibracin) se
2,0 0,348 determin el comportamiento del sistema siendo ste
4,0 0,723 lineal y obedece a la siguiente ecuacin:
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= 0.1863 0,0215
A partir de sta ecuacin podemos determinar la Anlisis de resultados
concentracin de la muestra siempre y cuando su La base de la espectroscopia Visible y Ultravioleta
absorbancia est en el intervalo de la curva. consiste en medir la intensidad del color (o de la
radiacin absorbida en UV) a una longitud de onda
+ 0.0215
= especfica comparndola con otras soluciones de
0,1863 concentracin conocida (soluciones estndar) que
0.338 + 0.0215
contengan la misma especie absorbente. Para tener
= esta relacin se emplea la Ley de Beer, que
0.1863
establece que para una misma especie absorbente
= 1,93 en una celda de espesor constante, la absorbancia
es directamente proporcional a la concentracin.
Concentracin de Fe en la muestra
Uno de los instrumentos utilizados en esta tcnica
1,93 25 100 1000 es el espectrofotmetro, para la determinacin de

1000 1,24 0.5 1 hierro en la prctica se utiliz uno de un solo haz, en
= 7782,2 el cual el haz de luz sigue una nica trayectoria entre
la fuente y el detector, normalmente se debe saber
Concentracin de Fe en la muestra expresada en en qu rango aproximado de longitud de onda
ppm de FeSO4 presenta seales significativas de absorbancia, es
necesario para poder programarlo. A continuacin en
7782,2 1 1 4 la imagen 1 se puede apreciar el tipo de

1000 55.85 1 espectrofotmetro que se us.

151.91 4

1 4

= 21,16 4

| .|
% = 100 [Ec. 5]

|8033,3 7782,2|
% = 100
8033,3

% = 3,13%

Absortividad molar del complejo Fe-(Fenantrolina)

Con la pendiente de grfica 4, podemos determinar el

coeficiente de absorcin molar de la siguiente manera:

0.1863 1 Imagen 1. Espectrofotmetro Genesys 20

=
1.00
Componentes
1000 55,85
= 0.1863 1 1. Interruptor de encendido/apagado
1 1 2. Pantalla digital
3. Tapa de compartimiento de muestras
= 10404,81 1 4. Teclado
5. Impresora interna opcional
|1110010404,8|
% = 100 6. Puerta del compartimiento de la lmpara
11100

% = 6,26% En este espectrofotmetro se trabaja en el rango visible

ya que el complejo del 1,10-fenantrolina con el hierro
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crea un complejo fuerte de color rojo cuya forma
correspondiente oxidada da lugar a un color azul, el
complejo (Imagen 2) obedece la ley de Beer para
concentraciones de Fe (II) inferiores a 9ppm, ya que para
concentraciones superiores a esta pierde su linealidad.
Por esto al trabajar en concentraciones de 2ppm el
porcentaje de error es muy bajo. Se puede comprobar
con la longitud de onda de mxima intensidad obtenida
en este laboratorio que fue de 512nm y en la literatura la
longitud de onda mxima para el complejo que se form
esta reportada con un intervalo de 510nm-512nm
Imagen 2.Reaccin hierro-fenatrolina
En la grfica 2 en la que se observa la curva de error o
curva de Crawford, se puede apreciar que en
disoluciones concentradas y diluidas existe un error ms
grande, en el caso de las altas concentraciones hay un
mayor error debido a que las molculas de soluto
interaccionan entre s debido a su proximidad. Cuando
las molculas del soluto se aproximan entre s, sus
propiedades cambian en algo. A concentraciones muy
altas, los solutos se convierten prcticamente en
disolvente, para concentraciones de soluto
suficientemente altas el ndice de refraccin cambia y la
variacin de la absorbancia parece no obedecer la ley de
Beer.[1] Al igual en las concentraciones bajas la deteccin
en la absorcin va a ser muy pequea y arrojar que no
hay cantidad significativa de soluto.
Cuando se analiza la curva de error, es necesario
descartar las absorbancias tomadas de las
concentraciones tanto bajas como altas debido a lo que
se explic anteriormente, finalmente se escogi un rango
entre 0,24 y 4,0 ppm de Fe para no tener la tendencia
de desviarse de la ley de Beer .
Posteriormente en la grfica 3 se realiz la curva de
Ringbom que puede ser usada para obtener el intervalo
ptimo de concentraciones en la cual la absorbancia se
comporta de forma lineal, esta se elabora mediante la
magnitud de 100-%T en el eje Y y en el eje x se
representan la funcin Log de la concentracin en ppm.
Se puede decir que el porcentaje de error en las
muestras aunque es relativamente bajo puede deberse a
las diluciones y a no dejar una de las muestras reposar
los 15 minutos requeridos, esto provoca que al enrasar
los reactivos no reaccionen completamente y haya una
prdida de analito.
Conclusiones.
Se puede atribuir el porcentaje de error calculado en la
determinacin del hierro al no identificar las limitaciones
de la ley de Lamber-Beer. Para una aplicacin
espectrofotomtrica es necesario conocer las limitaciones
de la ley minimizando las desviaciones de la misma y
poder obtener resultados ms exactos, seleccionar la
longitud de onda mxima es una prioridad ya que la
Absorbancia (A) y la Absortividad Molar () varan con
respecto a esta. Otra limitacin real de dicha ley es el
caso de que las soluciones utilizadas deben estar en
concentraciones inferiores a 0.01M. A concentraciones
ms altas, la distancia entre las molculas absorbentes
disminuye ocasionando que cada una de ellas afecte la
distribucin de carga de las dems. Esta interaccin
altera la cantidad de radiacin de determinada longitud
de onda que puede absorber ocasionando que algunas
necesiten ms radiacin que otras que no fueron afectas
su distribucin de carga.
Preguntas
1) Suponiendo un error fotomtrico del 1%,
demuestre matemticamente que el error en la medicin
de la transmitancia es mnimo cuando el valor es
alrededor del 37%.
El error absoluto cometido en la determinacin de la
concentracin, para un cierto error de lectura de
transmitancia es pequeo, pero al ser pequea la
concentracin, el error relativo puede ser grande.
Como se indica a continuacin se puede demostrar
que el mnimo error relativo se obtiene para una
absorbancia de 0.434.
La primera derivada de la ley de Beer es:
=
=
=
Donde dT representa el error indeterminado en la
lectura de la escala de transmitancia y dC indica la
incertidumbre en la concentracin.
Se tiene que = 0,434
=
=
Se obtiene:
= 0,434 ()
Derivando esta ecuacin de nuevo e igualando a
cero, se obtiene que la transmitancia ptima
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corresponde a 36.8 % o 37% que equivale a una

absorbancia de 0.434.[y] Bibliografa.
Reemplazando T y T respectivamente como 1% y [1] Harris, D; Espectrofotometra. En Anlisis qumico
cuantitativo; Paniagua R; Grupo editorial Iberoamrica.
37% en la ecuacin (Ec.2) se tiene:
C 0.434 (1%) Mxico. ( pg. 499- 500).
= 0.37 log(0.37) [Ec 2]
C
[Y] Espectrofotometra de absorcin ultravioleta-visible
= 2.716% mnimo error pg. 8- pg. 9 http://ocw.usal.es/ciencias-
experimentales/analisis-aplicado-a-la-ingenieria-
quimica/contenidos/course_files/Tema_3.pdf (Revisado el
2) Explique porque hay perdida de la linealidad a 06 de Septiembre del 2017)
concentraciones altas del analito
La prdida de linealidad a concentraciones altas de
analto se puede atribuir a cambios en las especies
absorbentes o en las propiedades de la solucin. 2. Apellido, Inicial del nombre; Apellido, Inicial del nombre
Conforme una solucin se vuelve ms concentrada las (Ao). Ttulo del capitulo. En: ttulo del libro en letra cursiva.
molculas de soluto interactan entre si debido a su Apellido del Editor e Inicial del nombre. Editorial, Pas de
proximidad. Cuando una molcula interacta con otra, es edicin. pg-pg.
probable que cambien las propiedades elctricas de
ambas (incluyendo la absorcin de luz). En el caso
excepcional de una solucin muy concentrada el soluto Autores,direccin web, fecha de revision
se convierte en solvente.
Debido a esto se puede decir que no se espera que las
propiedades elctricas de la molcula sean las mismas
en diferentes solventes. En algunos casos, solutos que
no absorben pueden interactuar con las especies
absorbentes y modificar la absortividad aparente.
Para concentraciones de soluto suficientemente altas el
ndice de refraccin cambia y la variacin de la
absorbancia parece no obedecer la ley de Beer.[1]

3) Explique claramente como realizara la

especiacin del Fe (Fe3+ y Fe2+) en la muestra mediante
un mtodo espectrofotomtrico.
La dificultad en la especiacin del hierro es que se
requiere medir las diferentes especies en las que se
puede encontrar, la forma cambiante Fe2+ al igual que
Fe3+, cuya interconversin depende fuertemente del valor
de pH, por esto para hacer la especiacin de Fe3+ y Fe2+,
se debe tratar con un agente reductor como el cloruro de
hidroxilamina y mantenerla sellada hasta el momento de
realizar el anlisis para evitar la oxidacin a Fe+3, a esta
muestra es conveniente agregar fenantrolina utilizndolo
como ligando ya que forma complejos fuertes, se
adiciona en exceso para obtener una solucin coloreada,
adicionalmente agregar acetato de sodio que acta para
formar la correspondiente base conjugada y as regular el
pH, posteriormente se lleva a 25 ml con agua destilada y
finalmente se realizan las lecturas de absorbancia a 512
nm. En estos mtodos normalmente se determina el
contenido de Fe2+, y el Fe3+ se calcula por diferencia,
con respecto al hierro total