PROCEDIMIENTO DE LA SEPARACIN DE PIGMENTOS

FOTOSINTTICOS POR CROMATROGRAFA DE PAPEL

resultados

(hojas verdes)

Cogemos hojas verdes y las partimos finamente.

Echamos las hojas en un mortero y las machacamos.
Aadimos alcohol etlico y bencina (2ml c/u) al mortero y seguimos.
machacando hasta que la mezcla se torne de un color verde oscuro.
Colamos en un cernidor para conseguir una solucin de color verde
intenso llamada "clorofila bruta".
Echamos una pequea cantidad de disolucin de pigmentos en una
placa Petri.
Colocar un trozo de papel de filtro doblado en ngulo recto, de forma
que se sujete vertical.
Dejar reposar hasta que se separen las bandas.
(hojas verdes con violeta)

Cogemos hojas violetas y las partimos.

Echamos las hojas en un mortero y las machacamos.
Aadimos alcohol etlico y bencina (2ml c/u) al mortero y seguimos.
machacando hasta que la mezcla este bien aplastada.
Colamos en un cernidor para conseguir una solucin de color verde
intenso llamada "clorofila bruta".
Echamos una pequea cantidad de disolucin de pigmentos en una
placa Petri.
Colocar un trozo de papel de filtro doblado en ngulo recto, de forma
que se sujete vertical.
Dejar reposar hasta que se separen las bandas

DISCUCIONES

Los Pigmentos vegetales, que se encuentran en los cloroplastos, son

molculas qumicas que reflejan o transmiten la luz visible, o hacen ambas
cosas a la vez. El color de un pigmento depende de la absorcin selectiva de
ciertas longitudes de onda de la luz y de la reflexin de otras. Constituyen el
sustrato fisicoqumico donde se asienta el proceso fotosinttico. Hay diversas
clases de pigmentos: Principales: Clorofilas (a, b, c, d y bacterioclorofilas) de
coloracin verde. Accesorios: Carotenoides (carotenos y xantofilas) de
coloracin amarilla y roja. Ficobilinas de coloracin azul y roja presentes en
las algas verdeazuladas, que comprenden el filo de los Cianofitos. [2] La
Clorofila, es el pigmento que da el color verde a los vegetales y que se encarga
de absorber la luz necesaria para realizar la fotosntesis, proceso que posibilita
la sntesis de sustancias orgnicas a partir de las inorgnicas (CO2, H2O y
sales minerales), mediante la transformacin de la energa luminosa en energa
qumica. La clorofila absorbe sobre todo la luz roja, violeta y azul, y refleja la
verde. Generalmente la abundancia de clorofila en las hojas y su presencia
ocasional en otros tejidos vegetales, como los tallos, tien de verde estas
partes de las plantas. En ocasiones, la presencia de clorofila no es tan patente
al descomponerse y ocupar su lugar otros pigmentos de origen isoprnico
tambin presentes en los plastos como son los carotenos (alfa, beta y ganma) y
las Xantofilas. (Blanco Prieto 1983)

Las clorofilas presentan una estructura molecular de gran tamao de tipo porfirinico,
estando formada en su mayor parte por carbono e hidrgeno; constituyendo un anillo
tetrapirrolico ocupado en el centro por un nico tomo de magnesio, rodeado por un
grupo de tomos que contienen nitrgeno. Del anillo parte una larga cadena de 20
tomos de carbono, denominada fitol que constituye el punto de anclaje de la molcula
de clorofila a la membrana interna del cloroplasto, el orgnulo celular donde tiene lugar
la fotosntesis.
Los diversos tipos de clorofilas existentes, se diferencian en pequeos detalles de su
estructura molecular y que absorben longitudes de onda luminosas algo distintas. [3]
Por cromatografia se pueden separar cuatro clorofilas distintas:
La clorofila A constituye de manera aproximada el 75% de toda la clorofila de las
plantas verdes, estando presente tambin en las algas verdeazuladas y en clulas
fotosintticas ms complejas.
La clorofila B es un pigmento accesorio presente en vegetales y otras clulas
fotosintticas complejas; absorbe luz de una longitud de onda diferente y transfiere la
energa a la clorofila A, que se encarga de transformarla en energa qumica.
Las clorofilas C y la D son propias de algas y bacterias. (Garca JL 1990)

Al realizar la cromatografa de adsorcin el cual el eluyente fue la bencina en ter

dietlico, de manera que el eluyente comenz a subir por la columna, de manera que el
proceso de adsorcin hizo que unos componentes avanzaran ms rpidamente que
otros. Aparecieron varias bandas de diferentes colores que estuvieron ms o menos
alejados de la disolucin de bencina con alcohol segn la mayor o menor solubilidad de
los pigmentos en dicha disolucin. Estas bandas tenan diferente grosor, dependiendo
de la abundancia del pigmento en la disolucin. Las que tenan ms afinidad por el
disolvente suban ms rpido que los otros pigmentos.

A medida que el disolvente y los pigmentos ascienden por capilaridad por el

papel mantenido en posicin vertical, se produce la distribucin de los mismos
en funcin de su diferente solubilidad en alcohol. Los pigmentos ms solubles
acompaarn al disolvente que sube y se movern con el frente hacia el
extremo del papel. Los pigmentos menos solubles permanecern cerca de la
base del papel. Es decir, los pigmentos se separan al recorrer distintas
distancias desde el origen.

La primera fase est la clorofila beta que fue la que se obtuvo en primer lugar en cantidad
en color verde amarillento.
Despus se obtuvo la clorofila , la cual se obtuvo en mayor cantidad ya que esta es la
que constituye aproximadamente el 75% de toda la clorofila en las plantas verdes y es
de color verde azulado.

En la tercera fase la clorofila que se observa fue las xantofilas, las cules son de color
amarillo y olivo. Estas se obtuvieron en pequea cantidad cada uno de sus coloraciones

diferentes.
La nica diferencia que se not al hacer los dos experimentos fue que la distribucin del
pigmento de color amarillo fue ms alta por la cual haba ms cantidad de pigmentos
xantofilas

REFERENCIAS

[1] Blanco Prieto F. Manual del Laboratorio de Qumica. Grficas Cervantes. Salamanca, 1983

[2] Garca JL. Experiencias bsicas en la enseanza de las ciencias de la naturaleza II. Instituto de
la educacin. Universidad de Santander. Santander, 1980

[3] Gutirrez R. et al. Enseanza de las ciencias en la educacin intermedia. Ed. Rialp. Madrid,
1990

[4]http://www.botanica.cnba.uba.ar/Trabprac/Tp6/Pigm entos.htm [7] J. Azcn-Bieto, M. Taln

(eds.). Fundamentos de Fisiologa Vegetal. Madrid: McGrawHill/Interamericana, Edicions
Universitat de Barcelona, 2000