8.1 INTRODUCCIN
Todas las especies de mamferos tienen un grupo de genes estrechamente ligados
y muy polimrficos, que fue descubierto por su implicacin en el rechazo o
aceptacin de transplantes o injertos de tejidos u rganos; de ah deriva su
nombre de Complejo Principal de Histocompatibilidad (MHC, del ingls Major
Histocompatibility Complex).
Pero obviamente, su papel fisiolgico (natural) no puede ser ese (al fin y al cabo,
la evolucin no pudo prever que una especie - la humana- se fuera a dedicar a
hacer transplantes). Las molculas codificadas por el MHC intervienen de un
modo central en el desarrollo de las respuestas inmunes especficas, tanto la
humoral como la celular:
Las molculas del MHC juegan un papel esencial en el reconocimiento del antgeno por
parte de los linfocitos T (tanto los coadyuvantes, TH, como los citotxicos, TC).
El juego particular de molculas MHC de cada individuo (determinado por el conjunto
de alelos de los genes MHC que posee) influye sobre el repertorio de epitopos que
pueden reconocer sus linfocitos TC y TH. Por ello, la capacidad de respuesta frente a los
patgenos (es decir, la mayor o menor susceptibilidad a la enfermedad infecciosa) y los
fenmenos de autoinmunidad dependen parcialmente de esa dotacin concreta de alelos
del complejo MHC.
En los aos 30 de este siglo, Gorer & Snell estaban estudiando los antgenos de
superficie de clulas sanguneas, e identificaron varios grupos de genes
responsables de esos antgenos. Se percataron de que uno de esos grupos de
genes, los cuales estaban estrechamente ligados, determinaban el rechazo de
trasplantes entre distintos individuos no emparentados de la misma especie. Por
esta razn, denominaron a estas molculas como antgenos de
histocompatibilidad, y al conjunto de genes ligados que los codificaban complejo
principal de histocompatibilidad, MHC. (Snell fue premiado con el Nobel en
1980 por este descubrimiento).
Complejo HLA
Clase
MHC MHC-II MHC-III MHC-I
Regin
DP DQ DR C4, C2, BF, B C A
etc.
Productos
gnicos
DP DQ DR (ab) protenas del HLA-B HLA- HLA-A
(ab) (ab) complemento, C
TNFa , TNFb
Ubicacin
hacia centrmero brazo corto hacia telmero -
cromosoma 6
En cada especie de mamfero los distintos loci del MHC son muy polimrficos;
de hecho poseen la mayor variabilidad gentica intraespecfica detectada en la
Gentica de Poblaciones. Es decir, cada locus concreto del complejo MHC posee
multitud de variantes allicas dentro de las poblaciones naturales de cada especie.
Cada individuo hereda un juego de MHC del padre y otro juego de la madre,
cada uno con sus distintos alelos. Cada juego completo de alelos heredado de un
progenitor se denomina haplotipo.
En una poblacin natural panmctica (es decir, en la que los cruces son al azar)
los individuos de cada generacin descendientes de los parentales suelen ser
heterozigotos en mltiples loci del MHC.
Los dos alelos de cada locus son de expresin codominante: esto significa que
un individuo heterozigoto para los distintos loci del MHC expresar en sus
clulas al mismo tiempo los dos tipos de variantes allicas de cada locus.
Esta raza F1 es histocompatible con injertos (es decir acepta estos injertos) de los dos padres, ya que expresa
ambos haplotipos al mismo tiempo.
Si cruzamos dos cepas de ratn homozigticas distintas, todos los individuos de la
generacin F1 sern heterozigotos para todos los loci:
En cambio, si cruzamos dos cepas no consanguneas y heterozigticas:
F1 formada por los siguientes genotipos, (cada uno con 25% de probalibilidad):
Si a un animal de esta F1 se le injerta un tejido de cualquiera de sus padres, lo rechazar. Pero si a un animal
de la F1 transplantamos un tejido de un hermano escogido al azar, tiene una probabilidad de 25% de aceptarlo.
a/b X a/b
F3: todos son heterozigotos a/b para el H-2
a/b de F3 X a/b de F3
Esta raza es homozigtica para todos los loci de la raza A, pero lleva en
homozigosis los alelos H-2 de la raza B.
Durante este largo proceso de seleccin repetida, de vez en cuando pueden surgir
recombinaciones dentro del complejo H-2, por lo que se generan recombinantes
en los que algunos loci del complejo MHC son de la raza A y otros de la raza B.
Estas razas congnicas y congnicas recombinantes han sido muy tiles en el
anlisis del sistema principal de histocompatibilidad, ya que permiten comparar
las diferencias funcionales atribuibles a un solo locus o unos pocos loci de dicho
complejo. La caracterizacin de las distintas molculas del MHC se realiza
mediante reacciones entre anticuerpos anti-MHC obtenidos de razas diferentes a
los de la raza a ensayar. Ms recientemente, los mtodos de ADN recombinante,
y especialmente la reaccin en cadena de la polimerasa (PCR) han servido para la
caracterizacin molecular detallada del complejo MHC.
8.3 MOLCULAS Y GENES DEL MHC
DE CLASE I
Las molculas de clase I constan de:
Interaccin a 1- a 2:
Los dos dominios ms externos (a 1 y a 2), que son polimrficos, interactan para generar
una notable estructura tridimensional: una plataforma plana formada por 8
cadenas b antiparalelas, de la que sobresalen, abarcndolas, dos largas
hlices a ligeramente arqueadas. (Su aspecto se puede comparar con el de una especie de
plato que soporta dos pltanos).
Dicha estructura deja un surco profundo entre las dos hlices a , que tiene unas
dimensiones de 25x10x11 C . Este surco o hendidura es el sitio destinado a albergar el
pptido procesado: tiene una capacidad para pptidos entre 8 y 20 aminocidos.
Interaccin a 3 - b 2-m:
Estos dos dominios slo interaccionan mediante enlaces no-covalentes, siendo ambos
tpicos dominios globulares de tipo Ig, estabilizado cada uno por en caracterstico enlace
disulfuro intracatenario.
El dominio a 3 est bastante conservado entre las molculas MHC-I, y contiene una
secuencia que ser reconocida por la molcula CD8 de la membrana de los linfocitos T
CD8+.
La b 2-microglobulina interacciona ampliamente con el dominio a 3, y con algunos
aminocidos de a 1 y a 2. Todas estas interacciones son necesarias para que la MHC-I
adquiera su configuracin cuaternaria adecuada para cumplir su misin.
una determinada molcula MHC-I puede unirse con muchos tipos de pptidos
diferentes; ahora bien, cada tipo concreto de MHC-I, y concretamente, cada variante
allica, slo puede unirse a una gama relativamente amplia, pero limitada, de pptidos,
pero no a otros.
Cada forma allica de cada tipo de molcula de clase I es capaz de unirse a un "juego"
caracterstico de pptidos y no a otros.
Tienen algo en comn todos estos pptidos? Cmo es la unin entre ellos y la
molcula del MHC-I?
ratn humanos
IA (a , b ) DQ(a , b )
IE (a , b ) DR (a ,b )
- DP (a , b )
Cada molcula de clase II est formada por dos cadenas, una a y otra b , que se
asocian entre s de forma no covalente.
La cadena a tiene unos 33 kDa, y consta de dos dominios globulares (el amino-
terminal, a 1, sin puentes disulfuro, y el a 2 de tipo Ig, con su puente disulfuro), un
segmento transmembrana y finalmente una cola intracitoplsmica.
La cadena b , de unos 28 kDa consta de un dominio aminoterminal (b 1) con puentes
disulfuro (pero no de tipo Ig), seguido por el dominio b 2 de tipo Ig (con puentes
disulfuro), segmento transmembrana y cola intracitoplsmica.
Los pptidos que se albergan en el surco de MHC-II son ms largos que los de la
clase I: de 13 a 20 aminocidos. Esto parece que se debe al hecho de que la
hendidura de MHC-II no est tan cerrada por sus extremos. Los pptidos no
tienen por qu encajar entre los lmites de esta hendidura, sino que pueden
sobresalir de ellos (aspecto de un perrito caliente).
Se ha deducido que deben de existir unos 100 alelos diferentes para cada locus
polimrfico del MHC. En ratn, el clculo de combinaciones tericas dara la
astronmica cifra de un billn (1012) de variantes. Ahora bien, como estos genes
estn estrechamente ligados y se heredan como un haplotipo unitario, la
diversidad real queda muy lejos de esta cifra, pero an as es gigantesca. Ello
crea precisamente el gran obstculo a la hora de los trasplantes e injertos entre
individuos de la misma especie.
1. Recombinacin homloga entre alelos del mismo locus. Parece ser que
existen ciertos "puntos calientes" para la recombinacin en ciertas partes
del complejo MHC.
2. Conversin gnica: una secuencia de un alelo de un locus MHC se ve
reemplazada en parte por otra secuencia de un gen homlogo. Este gen
homlogo no tiene que pertenecer al mismo locus, y ni siquiera tiene que
ser un gen funcional: se ha visto que como donadores de la conversin
pueden intervenir algunos pseudogenes que existen dentro del complejo.
3. Mutaciones puntuales, que introducen frecuentemente aminocidos
diferentes a los originales. Pero no hay una mayor tasa de mutacin. El
MHC parece bastante antiguo, existiendo alelos tan viejos que sobreviven
de una especie a otra.
Los aminocidos variables entre las distintas versiones allicas se localizan (en
referencia ahora a la estructura tridimensional) en la hendidura que sirve para
unirse al pptido. Esto parece sugerir que son precisamente estas diferencias
allicas las responsables de las diferencias observadas en la capacidad de
diversas versiones de molculas MHC de responder a determinados pptidos y no
a otros.
los linfocitos poseen los mayores niveles (500.000 molculas por clula)
menos abundantes en hgado, rin y pulmones
apenas nada en cerebro y msculo esqueltico
nada en clulas de la placenta (trofoblasto velloso).
Cada clula infectada por un determinado virus tiene varios tipos de MHC-I en su
membrana, y cada tipo (de cada versin allica) despliega un juego diferente de pptidos
de ese virus.
Ahora bien, otro individuo de la misma especie (dotado de otro juego diferente de alelos
de MHC-I, es decir, de otro haplotipo) desplegar en el surco de sus molculas de clase I
un conjunto diferente de pptidos de ese virus.
Imaginemos un ratn heterozigoto para los haplotipos k y d (es decir, H-2k/d). Pues bien, sus clulas
despliegan en superficie simultneamente los siguientes tipos de molculas de clase I: Kk, Dk, Lk(heredados
de la madre), Kd, Dd, Ld (procedentes del padre.
Debido a que cada molcula de clase II consta de una cadena a y otra b , cada una
codificada por un gen distinto de la regin II del MHC, y debido a que los dos
alelos de un locus del heterozigoto son codominantes, la asociacin aleatoria de
cadenas a y b de cada alelo puede dar origen a combinaciones de molculas
MHC-II homlogas o heterlogas.
Cada clula presentadora de antgenos de ratn tendra 8 tipos posibles de molculas de clase II, y en
humanos habra 12 combinaciones tericas. Pero en realidad, existen an ms combinaciones, ya que en el
complejo MHC hay mltiples genes para cadena a en cada locus, y tambin varios genes de cadena b para
cada locus de clase II.
Existe una correlacin entre el MHC y el olor de la orina. Ello hace que las hembras
seleccionen para aparearse preferentemente a machos de otro haplotipo, con la
consecuencia de que aumenta la heterozigosis de la siguiente generacin, con lo cual se
evitan los cruces consanguneos y aumenta el "vigor hbrido" de la poblacin.
Sin embargo, a la hora de la cra comunitaria, las hembras prefieren como compaeras
de guardera (para cuidar a los hijos comunales) a aquellas con genes MHC parecidos
(reconocidas por el olor); este comportamiento tiene un significado sociobiolgico,ya
que de este modo las hembras se aseguran que las dems hembras coloborarn sin
"explotar" a las compaeras, evitndose igualmente el infanticidio (ms frecuente en el
caso de cuidados maternos a cras no emparentadas genticamente).
Se sabe que los genes de MHC pueden ser regulados tanto de modo positivo
como negativo. Por ejemplo:
En humanos se conoce un caso bien datado histricamente: en 1845 emigr a Sudamrica un grupo de 50
familias holandesas, con slo 367 individuos. A las dos semanas de su llegada haban muerto el 50% a causa
de fiebres tifoideas. A los 6 aos sucumbi un 20% adicional por la fiebre amarilla. Los sobrevivientes se
casaron entre s (en vez de hacerlo con los autctonos de la regin, que hubiera "vigorizado" genticamente al
grupo). Los descendientes actuales se caracterizan por mostrar un repertorio muy limitado de haplotipos,
seleccionados respecto de la media de haplotipos de los holandeses de los Pases Bajos.
En regiones del sureste de China y en Papa-Nueva Guinea un 60% de la poblacin humana lleva el alelo
HLA-A11. En estas poblaciones, muchas cepas del virus de Epstein-Barr han mutado un epitopo que
originalmente era presentado de forma dominante por HLA-A11, pero ahora los pptidos mutantes del virus
ya no se unen a esta forma allica de MHC-I, por lo que ya no son reconocidos por los linfocitos T.