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UNIVERSIDAD CATLICA DE SANTA MARA

FACULTAD DE CIENCIAS FARMACETICAS,


BIOQUMICAS Y BIOTECNOLGICAS

PROGRAMA PROFESIONAL DE INGENIERA BIOTECNOLGICA

GUA DE PRCTICAS

FISIOLOGA VEGETAL

DOCENTES:

QF. Fernando Torres Vela


Ing. Cinthia Crdova Barrios

2017
U.C.S.M. P.P. Ing. Biotecnolgica
Prcticas de Fisiologa vegetal
INDICE

INTRODUCCIN 3

PRCTICA N 1: NUTRICIN MINERAL 5

PRCTICA N 2: FACTORES QUE INFLUYEN LA ABSORCIN DEL AGUA POR LA RAZ 15

PRCTICA N 3: EFECTO DEL pH EN LA NUTRICIN MINERAL DE LAS PLANTAS 19

PRCTICA N 4: DETERMINACIN DEL POTENCIAL HDRICO 23

PRCTICA N 5: TURGENCIA Y FLACIDEZ 29

PRCTICA N 6: DETERMINACIN DEL CONTENIDO HDRICO 31

PRCTICA N 7: MECANISMOS PASIVOS DE ABSORCIN 33

PRCTICA N8: TRANSPIRACIN 37

PRCTICA N 9: TEORA COHESO - TENSO RESPIRATORIA 41

PRCTICA N 10: ACCIN DE LA CATALASA 45

PRCTICA N 11: MEDIDA DE LA INTENSIDAD RESPIRATORIA 49

PRCTICA N 12: PIGMENTOS VEGETALES 53

PRCTICA N 13: DEGRADACIN DEL ALMIDN EN LAS PLANTAS 57

PRCTICA N 14: DETERMINACIN Y EVALUACIN DEL ACIDO GIBERLICO EN 61


LA GERMINACIN DE SEMILLAS

BIBLIOGRAFA 64

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Desde el inicio de los tiempos, el hombre ha utilizado las plantas para su beneficio, en
forma de alimento, vestido, material de construccin, fuente de energa, ornamento, o
para la obtencin de productos teraputicos. Al irse conociendo mejor la diversidad de las
plantas y su funcionamiento en los distintos niveles: molecular, celular, organismo y
poblacin, ha sido posible disear estrategias ms perfeccionadas para aumentar su
produccin y mejorar su calidad.

Por otra parte, la biologa de las plantas puede proporcionar soluciones, al menos
parciales, a los problemas que se enfrenta nuestra especie y nuestro planeta, entre ellos la
escasez de alimentos, el agotamiento de las reservas de combustibles fsiles y la escasez de
agua.

Por tanto a travs de la Fisiologa vegetal podemos estudiar cmo funcionan las plantas,
es decir, qu es lo que las mantiene vivas, explicar mediante leyes fsicas y qumicas, el
modo en que las plantas utilizan la energa de la luz para sintetizar, a partir de
sustancias inorgnicas, molculas orgnicas con las que construyen las complejas
estructuras que forman su cuerpo.

La presente Gua de Prcticas considera aspectos fundamentales de la Fisiologa vegetal,


a travs de aspectos prcticos en nutricin mineral, transporte de agua y solutos,
bioqumica, metabolismo, crecimiento y desarrollo.

El objetivo es desarrollar en el futuro Ingeniero Biotecnlogo, conocimientos cientficos,


habilidades, destrezas y aptitudes en temas de Fisiologa vegetal.

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PRACTICA N 1.

NUTRICIN MINERAL

EXPERIMENTO N 1: EFECTO DE LA CARENCIA DE MINERALES


ESENCIALES EN EL CRECIMIENTO DE LOS VEGETALES
1. MARCO TERICO:

Las plantas como organismos auttrofos no slo necesitan de luz, agua y dixido
de carbono para su supervivencia, sino tambin de la absorcin de sustancias
minerales del suelo para su completo desarrollo. Dichas sustancias son utilizadas
por las plantas de acuerdo a sus necesidades, las cuales varan en relacin al
elemento en s, con la especie, con la edad, y con las condiciones del ambiente en
el que se desarrolla la planta.

Los elementos minerales esenciales se pueden agrupar en macronutrientes, los


cuales se encuentran en mayor cantidad en la planta y se necesitan en
concentraciones de tejido igual a 1000 mg/Kg de materia seca, como el carbono,
hidrgeno, oxgeno, nitrgeno, fsforo, potasio, azufre, calcio y magnesio; y los
micronutrientes u oligoelementos los cuales son utilizados en pequesimas
cantidades y se necesitan en concentraciones de tejido iguales o menores a 100
mg/Kg de materia seca, como son el hierro, boro, manganeso, cobre, zinc,
molibdeno, cloro, silicio y nquel.

La falta o deficiencia de uno u otro elemento mineral produce, en las hojas, tallos o
frutos de la planta, caractersticas peculiares, que nos permite reconocer la
carencia o deficiencia del mineral en la nutricin de la planta. Este estudio se
puede realizar haciendo uso de soluciones nutritivas completas y carentes de
alguno de los elementos minerales necesarios para el crecimiento normal de la
planta, y distinguir el tipo de respuesta por la falta o deficiencia de un determinado
mineral.

2. OBJETIVOS:

2.1 Conducir y evaluar experimentos de nutricin mineral.


2.2 Preparar soluciones nutritivas completas y deficientes segn la formulacin
de Hoagland.
2.3 Observar y analizar los sntomas de deficiencia de nutrientes.
2.4 Enfatizar en el proceso enseanza-aprendizaje valores de puntualidad,
responsabilidad, cooperacin y perseverancia.

3. MATERIALES:

3.1 Material vegetal:

Plntulas de Capsicum pubescens (rocoto).

3.2 Reactivos o insumos:

Soluciones minerales stock segn Hoagland.

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3.3 Material de vidrio:

Recipientes, 200 mL.


Baguetas.
Pipetas, 1 mL, 2 mL, 5 mL y 10 mL.
Probetas, 100 mL.

3.4 Otros:

Papel aluminio.
Tecnopor.

3.5 Aparatos y equipos:

Balanza analtica.

4. PROCEDIMIENTO:

4.1. Preparar soluciones madre de sales minerales:

Tabla N1: Soluciones minerales stock segn Hoagland

Smbolo Compuesto Concentracin


Molaridad g/L
A Ca(NO3)2.4H20 1.00 M 236.00
B KNO3 1.00 M 101.00
C MgSO4.7H20 1.00 M 247.00
D KH2PO4 1.00 M 136.00
E Ca(H2PO4)2.2H20 0.01 M 2.70
F K2S04 0.50 M 87.00
G CaSO4.2H20 0.01 M 1.70
H Mg(NO3)2.6H20 1.00 M 256.00
I Micronutrientes *
J Fe-EDTA 10.00
K Micronutrientes menos Boro
L Micronutrientes menos Mn
M CuSO4 0.01 M

* Solucin de Micronutrientes:
MnCl2.4H20 1.81 g
ZnSO4.7H20 0.22 g
H2MoO4.H20 0.10 g
H3B03 2.86 g
CuSO4.5H20 0.10 g
Agua destilada 1000 mL

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4.2. Preparar soluciones nutritivas completas y deficientes:

TABLA N2: Soluciones stock en mL para preparar 1 L de solucin nutritiva

Soluciones Cantidad de soluciones stock en mL para preparar 1 L de solucin nutritiva


nutritivas A B C D E F G H I J K L M AGUA
1 Completa 5 5 2 1 1 1 985.0
2 Sin K 7.5 2 50 1 1 938.5
3 Sin P 7.5 2 20 1 1 968.5
4 Sin Ca 15 2 1 1 1 980.0
5 Sin N 0.5 50 20 200 1 1 727.5
6 Sin Mg 5 5 1 1 10 1 1 976.0
7 Sin S 5 5 1 2 1 1 985.0
8 Sin Fe 5 5 2 1 1 986.0
9 Sin B 5 5 2 1 1 1 985.0
10 Sin Mn 5 5 2 1 1 1 985.0
11 Agua potable 1000
12 Agua destilada 1000

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4.3. Establecimiento experimental:

A partir de una almaciguera, transplante y sujete cuidadosamente plntulas sanas y vigorosas, en recipientes de vidrio que contiene las
soluciones nutritivas completas y deficientes. Rotule cada frasco segn el tratamiento descrito en la TABLA N2. Cambiar las soluciones
nutritivas respectivas en forma peridica.

Figura N1: Sistema experimental de nutricin mineral


Fuente: Registro de la prctica

5. PROCEDIMIENTO DETALLADO:

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6. RESULTADOS Y DISCUSIN:

Completar la TABLA N3 para preparar un volumen definido de soluciones nutritiva.

TABLA N3: Soluciones stock en mL para preparar _______ de solucin nutritiva

Soluciones Cantidad de soluciones stock en mL para preparar _______ de solucin nutritiva


nutritivas A B C D E F G H I J K L M AGUA
1 Completa
2 Sin K
3 Sin P
4 Sin Ca
5 Sin N
6 Sin Mg
7 Sin S
8 Sin Fe
9 Sin B
10 Sin Mn
11 Agua potable
12 Agua destilada

Anotar los sntomas visibles que van apareciendo en el transcurso del crecimiento de las plntulas en estudio y al final del experimento,
como crecimiento radicular, altura del tallo, nmero de hojas y brotes y peso freso de la plntula.

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7. CONCLUSIONES:

8. SUGERENCIAS:

9. CUESTIONARIO:

Qu ventajas o desventajas puede encontrar en el mtodo de cultivo que emplea


soluciones nutritivas?
Describa otros mtodos para establecer el estado nutricional de un cultivo.
Qu es hidropona?
Describe dos sistemas hidropnicos realizados en agua.
Describe dos sistemas hidropnicos realizados con sustratos.

10. BIBLIOGRAFIA:

11. ANEXOS:

Describir los sntomas de deficiencia (carencia) y toxicidad (exceso) de los


elementos esenciales: K, P, Ca, N, Mg, S, Fe, B, Mn y Cu, en el crecimiento y
desarrollo de las plantas.

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PRACTICA N 1.

EXPERIMENTO N 2: TOXICIDAD Y ANTAGONISMO DE LOS ELEMENTOS


MINERALES
1. MARCO TERICO:

La absorcin en exceso de elementos minerales esenciales produce efectos


contraproducentes en el crecimiento de las plantas. La desproporcionalidad de
sales, ya sean solas o en mezcla de varias sales, pueden causar efectos txicos o
de deficiencia en las plantas, estando an presentes los elementos. Asimismo,
otros elementos que no son esenciales, pueden ser absorbidos en ciertas
condiciones, resultando nocivas para las plantas.

Cuando las sales minerales se encuentran en proporciones adecuadas y sin


producir efectos txicos se dice que se encuentran balanceadas, no obstante, una
solucin con una proporcin inadecuada de una de las sales minerales inhibe la
absorcin de otros elementos, o bien contrarrestan su funcin metablica, a ste
fenmeno se le conoce con el nombre de antagonismo. Por tanto, el efecto
antagnico es ms que todo un efecto de proporcin, el cual se acenta si ocurre
un marcado desbalance. No obstante, es necesario considerar en la absorcin
mineral, un fenmeno contrario, llamado sinergismo, el cual consiste en que un
ion puede favorecer la absorcin de otro o reforzar su actividad metablica.

2. OBJETIVOS:

2.1 Describir como el exceso de un determinado mineral puede causar efectos


txicos y de antagonismo.
2.2 Comparar las respuestas del crecimiento por antagonismo y toxicidad
mineral.

3. MATERIALES:

3.1. Material vegetal:

Plntulas de Capsicum pubescens (rocoto).

3.2. Reactivos o insumos:

Soluciones minerales stock segn Hoagland.

3.3. Material de vidrio:

Pipetas, 1 mL, 2 mL, 5 mL y 10 mL.


Probetas, 100 mL.

3.4. Otros:

Papel aluminio.
Tecnopor.

3.5. Aparatos y equipos:

Balanza analtica.

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4. PROCEDIMIENTO:
4.1. Preparar soluciones nutritivas con efectos de toxicidad y antagonismo:

TABLA N1: Soluciones stock en mL para preparar 1 L de solucin nutritiva

Soluciones Cantidad de soluciones stock en mL para preparar 1 L de solucin nutritiva


nutritivas A B C D E F G H I J K L M AGUA
13 Exceso de K y N 5 20 2 1 1 1 970.0
14 Exceso de Cu y S 5 5 2 1 1 1 1 1 984.0

4.2. Establecimiento experimental:


A partir de una almaciguera, transplante y sujete cuidadosamente plntulas sanas y vigorosas, en recipientes de vidrio que contiene
las soluciones nutritivas completas y deficientes. Rotule cada frasco segn el tratamiento descrito en la TABLA N1. Cambiar las
soluciones nutritivas respectivas en forma peridica.

5. PROCEDIMIENTO DETALLADO:

6. RESULTADOS Y DISCUSIN:

Completar la TABLA N3 para preparar un volumen definido de cada tratamiento.

TABLA N2: Soluciones stock en mL para preparar _______ de solucin nutritiva

Soluciones Cantidad de soluciones stock en mL para preparar _______ de solucin nutritiva


nutritivas A B C D E F G H I J K L M AGUA
13 Exceso de K y N
14 Exceso de Cu y S

Anotar los sntomas visibles que van apareciendo en el transcurso del crecimiento de las plntulas en estudio y al final del experimento,
como crecimiento radicular, altura del tallo, nmero de hojas y brotes y peso freso de la plntula.

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7. CONCLUSIONES:

8. SUGERENCIAS:

9. CUESTIONARIO:

Cmo se explica los efectos de la toxicidad y antagonismo en los vegetales?


Cmo explica usted el fenmeno de sinergismo?
Cmo explica el efecto daino de algunos fertilizantes aplicados en exceso?

10. BIBLIOGRAFA:

11. ANEXOS:

Nutriente Funciones
mineral

Grupo 1: Nutrientes que forman parte de compuestos orgnicos.

N Constituyente de aminocidos, amidas, protenas, cidos nucleicos,


nucletidos, coenzimas, etc.

S Componente de cistena, metionina y protenas. Constituyente de


coenzima A, glutation, biotina, etc.

Grupo 2: Nutrientes importantes en el almacenamiento de energa o integridad


estructural.
P Componente de azucares-fosfato, cidos nucleicos, nucletidos,
coenzimas, fosfolpidos, etc. Tiene un papel clave en las reacciones que
implican ATP.
B Forma complejos con manitol, cido polimanurnico y otros constituyentes
de las paredes celulares. Est implicado en la elongacin celular y en el
metabolismo de los cidos nucleicos.

Grupo 3: Nutrientes que pertenecen en forma inica

K Es necesario como cofactor de ms de 40 enzimas. Catin principal en el


establecimiento de la presin de turgencia celular.

Ca Constituyente de la lmina media de las paredes celulares. Es necesario


como cofactor de varias enzimas implicadas en la hidrlisis de ATP y
fosfolpidos.
Mg Constituyente de la clorofila.

Mn Est implicado junto con otras enzimas activadas con cationes, en la


generacin de O2 fotosinttico.

Grupo 4: Nutrientes implicados en reacciones redox

Fe Constituyente de citocromos y protenas implicadas en la fotosntesis, la


fijacin de nitrgeno y la respiracin.
Cu Componente de la cido ascrbico oxidasa y citocromo oxidasa. Influye en
la fijacin del nitrgeno atmosfrico y regulacin de la transpiracin.

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PRACTICA N 2.

FACTORES QUE INFLUYEN EN LA ABSORCIN DEL AGUA POR LA RAZ


1. MARCO TERICO:

La existencia de un contacto directo entre la superficie de la raz y el suelo es


esencial para que la absorcin de agua por la raz sea efectiva. Sin embargo, los
factores que influyen en la absorcin del agua en las plantas, lo podemos dividir
en tres tipos: Factor suelo, factor planta y factor ambiente.

Factor suelo: como el tamao de las partculas, temperatura del suelo,


contenido de sales y aireacin del suelo.
Factor planta: especie, profundidad de races y nmero de las mismas.
Factor ambiente: humedad relativa, temperatura, viento, lluvia.

La temperatura del suelo, cuyo efecto ms importante es el aumento de la


resistencia hidrulica de las membranas celulares en las races. La existencia de
fro en la raz y ciertas condiciones ambientales provocan retraso en la absorcin
en condiciones de buena disponibilidad de agua, el cual llega a ser tan acentuado
que las plantas se marchitan.

La salinidad es, tal vez, el ms antiguo de los factores de degradacin y prdida


de suelos agrcolas. La salinidad de un suelo viene determinada por la
conductividad elctrica (EC) de su fase acuosa. Un suelo agrcola debe presentar
un valor de EC inferior a 2 mS, lo que representa menos del 10 % de la salinidad
del agua del mar, valor suficiente para que slo las plantas tolerantes a la
salinidad puedan desarrollarse en estas condiciones. La utilizacin de nuevas
variedades y, sobre todo de nuevas tecnologas de riego, est permitiendo
mejorar estos niveles de tolerancia.
El Cloruro de sodio y el Sulfato sdico son las sales ms comunes en los suelos
salinos que pueden ocasionar estrs hdrico, al reducirse la absorcin de agua por
el efecto osmtico y toxicidad inica relacionada con la excesiva absorcin de
sodio, que desencadena un desequilibrio inico en la planta. Por tanto, el estrs
salino provoca una reduccin en el crecimiento vegetal, si estos minerales
alcanzan niveles que limitan la disponibilidad de agua o exceden la zona ptima
para un nutriente determinado.

La capacidad de las plantas para absorber agua y nutrientes minerales del suelo
est relacionada con su capacidad para desarrollar un extenso sistema radical,
que depende de su forma y la disponibilidad de agua y minerales de la rizosfera.

2. OBJETIVOS:

2.1. Estudiar los factores ms importantes que influyen en la absorcin del agua
y en el crecimiento de la planta.
2.2. Evaluar el efecto de la temperatura, concentracin de sales y nmero de
races en la absorcin del agua por la raz y en el crecimiento de la planta.
2.3. Enfatizar en el proceso enseanza-aprendizaje valores de puntualidad,
responsabilidad, cooperacin y perseverancia.

3. MATERIALES:

3.1 Material vegetal:

Plntulas de Lactuca sativa (lechuga).

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3.2 Reactivos o insumos:

Soluciones minerales stock segn Hoagland.


Cloruro de sodio.

3.3 Material de vidrio:

Baguetas.
Beakers, 250 mL.
Matraces 250 mL.
Pipetas, 1 mL, 2 mL, 5 mL y 10 mL.
Probetas, 100 mL.
Tubos de ensayo.

3.4 Otros:

Hielo.
Gradilla para tubos.
Papel aluminio.
Plumn indeleble.
Regla.

4. PROCEDIMIENTO:

4.1. Efecto de la temperatura:

Colocar en dos tubos de ensayo 20 mL de la solucin nutritiva completa


de Hoagland y una plntula de lechuga.
Depositar uno de los tubos en un beaker que contiene agua y hielo, el
tubo restante dejarlo al medio ambiente, por 24 horas.
Marcar el nivel de la solucin en cada tubo.

4.2. Efecto de la concentracin de sales:

Adicionar Cloruro de sodio a una solucin nutritiva completa de


Hoagland, de tal manera que se obtengan 20 mL de las siguientes
concentraciones: 0.0, 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, y 0.5 M.
Colocar en cada tubo una plntula de lechuga.
Marcar el nivel de la solucin en cada tubo.

4.3. Efecto del nmero de races:

Colocar en dos tubos de ensayo 20 mL de la solucin nutritiva completa


de Hoagland y una plntula de lechuga. Cada una de las plntulas debe
variar en el nmero de races a la mitad con respecto a la otra.
Marcar el nivel de la solucin en cada tubo.

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Figura N2: Efecto de la temperatura en la absorcin del agua


Fuente: Registro de la prctica

5. PROCEDIMIENTO DETALLADO:

6. RESULTADOS Y DISCUSIN:

Reportar la absorcin del agua por la raz (mL) en los tres factores evaluados.
Reportar el crecimiento de las plntulas de lechuga sometidas a los tres efectos
evaluados.

7. CONCLUSIONES:

8. SUGERENCIAS:

9. CUESTIONARIO:

Cules son los mecanismos por los cuales las plantas halfitas toleran la salinidad?
Qu especies han sido modificadas genticamente para tolerar estrs salino?
Realiza un comentario sobre los crioprotectores en plantas.

10. BIBLIOGRAFA:

11. ANEXOS:

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PRACTICA N 3.

EFECTO DEL pH EN LA NUTRICIN MINERAL DE LAS PLANTAS


1. MARCO TERICO:

La concentracin de protones (pH) es una propiedad importante en los suelo,


porque afecta: la disponibilidad de los nutrientes, el crecimiento radicular y a los
organismos del suelo.

El pH del suelo determina la disponibilidad de los nutrientes vegetales. La ligera


acidez favorece la erosin de las rocas, que liberan K +, Mg2+, Ca2+ y Mn2+, y
aumenta la solubilidad de carbonatos, sulfatos y fosfatos. El aumento de la
solubilidad de los nutrientes facilita su disponibilidad para las races.

El crecimiento radicular se ve favorecido en suelos ligeramente cidos, con valores


de pH entre 5.5 y 6.5. Generalmente los hongos predominan en los suelos cidos,
mientras que las bacterias prevalecen en suelos bsicos.

Los principales factores que reducen el pH del suelo son los niveles de lluvia y la
descomposicin de la materia orgnica.

La descomposicin de la materia orgnica produce dixido de carbono, cuya


reaccin con el agua, libera protones y reduce el pH del suelo. A su vez la
descomposicin microbiana produce amoniaco y sulfuro de hidrgeno que pueden
ser oxidados en el suelo a las formas cidas fuertes, cido ntrico y cido sulfrico,
respectivamente.

La mayora de las plantas crece en suelos cuyo pH oscila entre 4 y 8, en los


extremos de este intervalo se producen situaciones de estrs a las que se han
adaptado diversas especies como las basfilas que viven en suelos con valores de
pH entre 8 y 9; y acidfilas, que viven en suelos con valores de pH inferior a 4.

2. OBJETIVOS:

2.1 Explicar la importancia del pH en la nutricin mineral.


2.2 Evaluar el efecto del pH en la absorcin del agua por la raz y en el
crecimiento de la planta.
2.3 Determinar el pH ptimo para el crecimiento y desarrollo de las plantas.
2.4 Enfatizar en el proceso enseanza-aprendizaje valores de puntualidad,
responsabilidad, cooperacin y perseverancia.

3. MATERIALES:

3.1. Material vegetal:

Plntulas de Lactuca sativa (lechuga).

3.2. Reactivos o insumos:

Soluciones minerales stock segn Hoagland.


Solucin de NaOH 0.1 N.
Solucin de HCl 0.1 N.

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3.3. Material de vidrio:

Baguetas.
Pipetas, 1 mL, 2ml, 5 mL y 10 mL.
Probetas, 100 mL.

3.4. Otros:

Papel aluminio.
Picetas.

3.5. Aparatos y equipos:

Potencimetro.

4. PROCEDIMIENTO:

Colocar en seis tubos de ensayo 20 mL de la solucin nutritiva completa de


Hoagland.
Ajustar los valores de pH con una solucin de HCl 0.1 N o NaOH 0.1 N,
hasta obtener soluciones con valores de pH igual a 3, 5, 7, 9, 11 y 13.
Colocar una plntula de lechuga en cada tubo de ensayo.
Marcar el nivel de la solucin en cada tubo.

Figura N3: Efecto del pH en la absorcin del agua


Fuente: Registro de la prctica

5. PROCEDIMIENTO DETALLADO:

6. RESULTADOS Y DISCUSIN:

Reportar la absorcin del agua por la raz (mL) en cada sistema de pH.
Reportar el crecimiento de las plntulas de lechuga sometidas a los diferentes
valores de pH.

7. CONCLUSIONES:

8. SUGERENCIAS:

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9. CUESTIONARIO:

Cul es el pH ptimo en cultivos en suelo, cultivos hidropnicos y cultivos in vitro?


Nombrar cuatro ejemplos para cada sistema.
Describe y compara las plantas basfilas con las acidfilas.
Qu microorganismos favorecen la absorcin de nutrientes por las races.
Realiza un comentario sobre la biorremediacin de suelos cidos.

10. BIBLIOGRAFA:

11. ANEXOS:

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PRACTICA N 4.

DETERMINACIN DEL POTENCIAL HDRICO


1. MARCO TERICO:

El cuerpo de las plantas est constituido al menos por un 70% de agua. Para que
un vegetal este fisiolgicamente activo, precisa entre otras condiciones, de un
balance hdrico favorable. La tendencia del agua a ser retenida por un vegetal es
la propiedad ms importante para conocer los movimientos de agua en el sistema
suelo, planta y atmosfera. El potencial hdrico ( ) mide dicha tendencia, el agua
siempre se mover de manera pasiva hacia los lugares del sistema en donde el
potencial hdrico sea ms bajo. El potencial hdrico tiene dimensiones de presin
(MPa, bar y atm) y es igual a:

= + + +

= .
= .
= .
= .

La frmula anterior puede abreviarse prescindiendo de los dos ltimos


componentes por su escaso peso y complicada determinacin. Por tanto el
potencial hdrico es igual a:

= +

Para la determinacin prctica del potencial hdrico de un tejido vegetal se utilizan


diferentes mtodos basados en variables fisicoqumicos: peso, densidad y
volumen y potenciales osmticos conocidos. El fundamento se basa en que al
introducir muestras de un determinado tejido vegetal en una batera de
disoluciones de sacarosa de concentraciones conocidas, el agua se intercambia
desde el tejido a la disolucin o viceversa hasta alcanzar en equilibrio, conforme
al principio de que el agua se mueve a favor de gradiente de potencial hdrico.

En el equilibrio, cuando no hay movimiento neto de agua, el potencial hdrico en el


interior del tejido () es igual al potencial hdrico de la solucin externa ().
Es decir:

=
o igual a:
+ = +

es igual a 0 porque las disoluciones estn a presin atmosfrica.


Por tanto, en el equilibrio, el potencial hdrico del tejido es igual al potencial
osmtico o de soluto de la disolucin en que est sumergido.

Es decir:
=

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El potencial de soluto de la disolucin se calcula a travs de la ecuacin de Vant
Hoff:

= ().
= . .
= . (. / ).
= ().

La determinacin del potencial hdrico se realiza a travs de tres mtodos:

Mtodo gravimtrico: Mtodo cuantitativo que se fundamenta en la variacin de


peso de un tejido vegetal debido al flujo de agua.
Si el potencial hdrico del tejido es igual al potencial osmtico de la disolucin no
habr osmosis en ningn sentido, por tanto, el tejido no variar de peso.

Mtodo densitomtrico o de Chardakov: Mtodo cualitativo que se


fundamenta en observar la ausencia de cambio en la densidad de una disolucin
de concentracin conocida, tras introducir en ella una muestra de tejido vegetal
durante un tiempo.

Mtodo volumtrico: Este mtodo se basa en los cambios de volumen o


curvatura experimentados por tejidos que han sido expuestos en disoluciones de
presin osmtica conocida.

Importancia de la determinacin del potencial hdrico:


El concepto de potencial hdrico tiene dos implicancias: en primer lugar, el
potencial hdrico impulsa el transporte a travs de las membranas celulares, y en
segundo lugar, el potencial hdrico se usa con frecuencia como una medida del
estado hdrico de una planta, siendo los procesos ms afectados por el dficit
hdrico, el crecimiento celular, inhibicin de la divisin celular, la inhibicin de la
sntesis de pared y de protenas, la acumulacin de solutos, cierre de los estomas
y la inhibicin de la fotosntesis.

2. OBJETIVOS:

2.1 Explicar la importancia de la determinacin de potencial hdrico en las


plantas.
2.2 Conocer el fundamento de la determinacin del potencial hdrico en tejidos
vegetales.
2.3 Determinar el potencial hdrico de tejidos vegetales por el mtodo
gravimtrico, densitomtrico y volumtrico.
2.4 Enfatizar en el proceso enseanza-aprendizaje valores de puntualidad,
responsabilidad, cooperacin y perseverancia.

3. MATERIALES:

3.1 Material vegetal:

Tubrculos de Solanum tuberosum (papa).


Pednculos de la inflorescencia de Tarxacum officinalis (diente de
len).

24
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Prcticas de Fisiologa vegetal
3.2 Reactivos o insumos:

Solucin acuosa de azul de metileno al 1%.


Soluciones de sacarosa 1M.

3.3 Material de vidrio:

Baguetas.
Pipetas, 1 mL, 2mL, 5 mL y 10 mL.
Pipetas pasteur.
Placas petri.
Tubos de ensayo.

3.4 Otros:

Bistures.
Gradilla para tubos.
Plumn indeleble.
Sacabocados.

4. PROCEDIMIENTO:

4.1. Mtodo gravimtrico:

A partir de una solucin de sacarosa 1 M, preparar 20 mL de las


siguientes disoluciones: 0.1, 0.2, 0.3, 0.4 y 0.5 M y depositarlas en
tubos de ensayo, previamente rotulados.
Con un socabocado obtener 10 cilindros del tejido de reserva del
tubrculo de papa de 5 cm de longitud y 4 mm de dimetro, secarlos
rodando suavemente sobre papel filtro.
Registrar el peso de cada grupo de dos cilindros, considerando este
como peso inicial tiempo cero.
Colocar un grupo por cada tubo, tapar y dejar en reposo por 45 min.
Agitar peridicamente cada tubo para facilitar el contacto del tejido con
la disolucin.
Registrar el peso de cada grupo cada 15 minutos, extrayendo los
cilindros y secndolos suavemente sobre papel filtro.

4.2. Mtodo densitomtrico o de Chardakov:

A partir de una solucin de sacarosa 1 M, preparar las siguientes


disoluciones: 0.1, 0.2, 0.3, 0.4 y 0.5 M.
Disponer de dos gradillas, serie A y serie B, con cinco tubos de ensayo
cada una, previamente rotulados de 0.1 al 0.5 M.
Depositar 20 mL de cada disolucin en cada tubo de cada pareja.
Con un socabocado obtener 5 cilindros del tejido de reserva del
tubrculo de papa de 5 cm de longitud y 4 mm de dimetro, secarlos
rodando suavemente sobre papel filtro.
En la serie A, colocar un cilindro del tejido por cada tubo, tapar y dejar
en reposo por 30 minutos. Agitar peridicamente cada tubo para facilitar
el contacto del tejido con la disolucin.
En la serie B o control, en la que las concentraciones rotuladas no varan
a lo largo del experimento, aadir unas gotas de azul de metileno a cada
uno de sus tubos, para colorear cada disolucin.

25
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Prcticas de Fisiologa vegetal
Finalizado el tiempo, retirar los tejidos de la serie A y con una pipeta
pasteur extraer unas gotas de cada tubo de la serie B que mantiene la
densidad inicial, en el centro del tubo correspondiente de la serie A.
Observar el movimiento de la gota en el interior de la disolucin.

4.3. Mtodo volumtrico:

A partir de una solucin de sacarosa 1 M, preparar 20 mL de las


siguientes disoluciones: 0.1, 0.2, 0.3, 0.4 y 0.5 M y depositarlas en
placas petri, previamente rotuladas.
Obtener 5 segmentos de 5 cm del tallo de la inflorescencia del diente de
len y realizar dos cortes longitudinales, en cruz, de 2.5 cm de longitud.
Depositar cada segmento en cada disolucin, tapar y dejar en reposo
por 30 minutos.
Agitar peridicamente cada placa para facilitar el contacto del tejido con
la disolucin.
Finalizado el tiempo, observar el grado de curvatura de los tejidos
sumergidos en cada disolucin.

Figura N4: Mtodo densitomtrico


Fuente: Registro de la prctica

5. PROCEDIMIENTO DETALLADO:

6. RESULTADOS Y DISCUSIN:

Mtodo gravimtrico:
Representar grficamente el % Cambio de peso inducido por el potencial osmtico
de las disoluciones de sacarosa.
Determinar el potencial hdrico () del tejido.

Mtodo densitomtrico o de Chardakov:


Observar la direccin del desplazamiento de la gota y dar una explicacin.
Determinar el potencial hdrico () del tejido.

Mtodo volumtrico:
Observar el grado de curvatura del tejido y dar una explicacin.
Determinar el potencial hdrico () del tejido.

26
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Prcticas de Fisiologa vegetal
7. CONCLUSIONES:

8. SUGERENCIAS:

9. CUESTIONARIO:

Por qu es importante determinar el potencial hdrico () de un tejido vegetal?


Describe brevemente que otros mtodos se utilizan para la determinacin del
potencial hdrico ()
Es el potencial osmtico o el potencial de presin el que tiene la funcin ms
importante en la regulacin del potencial hdrico () en las clulas vegetales? Por
qu?
Realiza un comentario sobre la importancia de la determinacin del potencial
hdrico de un tejido vegetal en el rea de Biotecnologa vegetal.
Hallar el (MPa) de una solucin de sacarosa de 0.35 M a 25 .

10. BIBLIOGRAFA:

11. ANEXOS:

27
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PRACTICA N 5.

TURGENCIA Y FLACIDEZ
1. MARCO TERICO:

Un aspecto general del movimiento del agua en las plantas es que se trata de un
proceso totalmente pasivo. El movimiento del agua entre o hacia las clulas vivas,
o a travs del suelo, tiene lugar, habitualmente, mediante osmosis o difusin
inducida del agua a travs de una membrana selectivamente permeable de un
medio de menor concentracin a otro de mayor concentracin osmtica, es decir,
por una diferencia de potencial hdrico.

Las clulas vegetales pueden encontrarse en tres situaciones osmticas distintas,


segn la concentracin de solutos en el medio externo. Estas situaciones son:
turgencia, plasmlisis y plasmlisis incipiente.

Si el tejido se encuentra en un medio externo hipotnico, el potencial hdrico de


ste es mayor que el potencial hdrico del tejido. El gradiente de potencial
determina la entrada de agua en el interior de la clula y el volumen vacuolar
aumenta hasta que el citoplasma contacta con la pared celular, hacindose
positivo el potencial de presin. Esta es la situacin de turgencia.

<

Por su parte, si el tejido se encuentra en un medio hipertnico el potencial hdrico


en el exterior es menor que en el tejido. El gradiente de potencial determina la
salida al exterior de la clula; la vacuola se vaca hasta que el citoplasma se
desprende de la pared celular, hacindose negativo el potencial de presin. Esta
es la situacin de plasmlisis o flacidez.

>

Por ltimo, en el caso en que las clulas estn en un medio isotnico, el potencial
hdrico en el exterior es igual que en el tejido. Al no existir gradiente de potencial,
no hay flujo de agua o ste se compensa y el potencial de presin es igual a cero.
Esta situacin es la plasmlisis incipiente.

2. OBJETIVOS:

2.1 Demostrar las relaciones osmticas en tejidos vegetales.


2.2 Explicar los fenmenos de turgencia, plasmlisis y plasmlisis incipiente en
tejidos vegetales.
2.3 Enfatizar en el proceso enseanza-aprendizaje valores de puntualidad,
responsabilidad, cooperacin y perseverancia.

3. MATERIALES:

3.1 Material vegetal:

Pednculos de la inflorescencia de Tarxacum officinalis (diente de


len).

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Prcticas de Fisiologa vegetal
3.2 Reactivos o insumos:

Solucin de sacarosa 1M.

3.3 Material de vidrio:

Beakers, 100 mL.


Probetas, 100 mL.

3.4 Otros:

Bistures.
Regla.

4. PROCEDIMIENTO:

Obtener 4 segmentos de 5 cm del tallo de la inflorescencia del diente de len


y realizar dos cortes longitudinales, en cruz, de 2.5 cm de longitud.
Transferir 2 segmentos en un beaker con agua destilada y los dos restantes
en un beaker que contiene una solucin de sacarosa 1 M. Explicar los
fenmenos observados.

Figura N5: Material vegetal en medio acuoso


Fuente: Registro de la prctica

5. PROCEDIMIENTO DETALLADO:

6. RESULTADOS Y DISCUSIN:

7. CONCLUSIONES:

8. SUGERENCIAS:

9. CUESTIONARIO:

Qu es el potencial osmtico?
Menciona y describe que mtodos se utilizan para determinar el potencial osmtico

10. BIBLIOGRAFA:

11. ANEXOS:

30
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PRACTICA N 6.

DETERMINACIN DEL CONTENIDO HDRICO


1. MARCO TERICO:

El agua es la molcula ms abundante en la superficie terrestre, cuya


disponibilidad es el factor que ms limita la productividad vegetal en la tierra.
El agua, que es el componente mayoritario en la planta, aproximadamente un 80
a 90% del peso fresco en plantas herbceas, y ms del 50% de las partes leosas,
afecta, directa o indirectamente, a la mayora de los procesos fisiolgicos.
El agua en las plantas interviene principalmente como:

Constituyente de sus componentes: protenas, cidos nucleicos,


polisacridos y otros componentes celulares.
Responsable de la turgencia celular: importante en las vacuolas de las
clulas vegetales, ya que ejerce presin sobre el protoplasma y la pared
celular, manteniendo as la turgencia en hojas, races y otros rganos de la
planta.
Disolvente ideal para muchas sustancias, tales como, sales inorgnicas,
azcares y aniones orgnicos.
Constituye el medio para la mayora de las reacciones bioqumicas: El agua
proporciona el medio para el movimiento de las molculas tanto en el
interior celular como entre clulas, por esta razn es esencial para el
transporte y la distribucin de nutrientes y metabolitos en toda la planta.
Responsable de la termorregulacin: El elevado calor de vaporizacin del
agua permite a las plantas enfriarse al evaporar el agua de la superficie de
sus hojas. A su vez, el elevado calor especfico del agua permite a las
plantas amortiguar las fluctuaciones de temperatura.

Para comprender las relaciones plantaagua, es necesario definir y determinar el


estado hdrico en la clula, rgano e, incluso, en toda la planta. El contenido
hdrico de una planta vara segn: su etapa de desarrollo, especie, variedad y
hbitat.
En la prctica, se determinar el contenido hdrico de los rganos fundamentales
de plantas clasificadas segn el medio en que viven.

2. OBJETIVOS:

2.1 Explicar la importancia del agua en los procesos fisiolgicos de la planta.


2.2 Explicar la importancia de la determinacin del contenido hdrico en tejidos
vegetales.
2.3 Determinar el contenido hdrico de los rganos fundamentales de plantas
mesofitas, hidrofitas y xerofitas.
2.4 Enfatizar en el proceso enseanza-aprendizaje valores de puntualidad,
responsabilidad, cooperacin y perseverancia.

3. MATERIALES:

3.1 Material vegetal:

Planta mesfita.
Planta hidrofita.
Planta xerofita.

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Prcticas de Fisiologa vegetal
3.2 Otros:

Papel craft.
Pavilo.
Tijeras.

3.3 Equipos y aparatos:

Balanza analtica.
Estufa.

4. PROCEDIMIENTO:

Recolectar plantas mesfitas, hidrofitas y xerofitas, conteniendo sus tres


rganos fundamentales: raz, tallo y hojas.
Pesar una porcin de cada uno de ellos y envolverlos con papel craft y pavilo.
Rotular.
Llevar a la estufa a 120 por 3 horas.
Finalizado el peso, registrar el peso final de cada porcin.

Figura N6: Seleccin del material vegetal


Fuente: Registro de la prctica

5. PROCEDIMIENTO DETALLADO:

6. RESULTADOS Y DISCUSIN:

Calcular el contenido hdrico de los rganos fundamentales de plantas mesofitas,


hidrofitas y xerofitas.

7. CONCLUSIONES:

8. SUGERENCIAS:

9. CUESTIONARIO:

Caracteriza brevemente a una planta mesfita, hidrofita y xerofita


En que otra forma se puede expresar el contenido hdrico?

10. BIBLIOGRAFA:

11. ANEXOS:

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PRACTICA N 7.

MECANISMOS PASIVOS DE ABSORCIN


1. MARCO TERICO:

Las molculas de agua en una solucin no estn quietas, estn en continuo


movimiento, chocando unas con otras. Como resultado de la agitacin trmica al
azar, se origina la difusin, movimiento de las molculas desde las zonas ms
concentradas a las menos concentradas, hasta que se alcance la condicin de
equilibrio, es decir a favor de gradiente de concentracin.

El cientfico alemn Adolf Fick descubri que la tasa de difusin o velocidad de


transporte de soluto es directamente proporcional al gradiente de concentracin
( ), es decir, a la diferencia de concentracin de la sustancia ( ), entre
dos puntos separados por una distancia () y al coeficiente de difusin ( ) ,
constante de proporcionalidad que mide la facilidad con la que la sustancia
atraviesa un medio, es caracterstico de cada sustancia y depende del medio.

El signo negativo de la ecuacin indica que el flujo se produce a favor de un


gradiente de concentracin.
= ( )

Durante mucho tiempo hubo mucha incertidumbre sobre el movimiento del agua a
travs de las membranas vegetales, ya que algunos estudios indicaban que la
difusin directa a travs de la bicapa lipdica no era suficiente para explicar las
enormes velocidades de movimiento de agua observadas en las membranas, esta
incertidumbre fue desvelada recientemente con el descubrimiento de las
acuoporinas, protenas integrales de membrana que forman canales selectivos
para el paso de agua a travs de la bicapa lipdica, que facilitan el movimiento del
agua a travs de la membrana.

En la Figura N 7, el agua puede atravesar las membranas vegetales por difusin


de las molculas a travs de la bicapa de la membrana, como se muestra a la
izquierda del esquema, y por canales selectivos generados por las acuaporinas.

Figura N7: Difusin a travs de la membrana celular


Fuente: Taiz y Zeiger. Plant physiology

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Prcticas de Fisiologa vegetal
2. OBJETIVOS:

2.1 Explicar el movimiento de las molculas a travs de las membranas celulares


por mecanismos pasivos.
2.2 Analizar los factores que influyen en la difusin de molculas a travs de las
membranas celulares.
2.3 Comprobar la permeabilidad de la membrana celular por cambios de color.
2.4 Enfatizar en el proceso enseanza-aprendizaje valores de puntualidad,
responsabilidad, cooperacin y perseverancia.

3. MATERIALES:

3.1 Material vegetal:

Levadura seca o liofilizada.

3.2 Reactivos:

Carbonato de sodio (Na2CO3) 0.5%.


Hidrxido de sodio (NaOH) 0.02 N.
Hidrxido de amonio (NH4OH) 0.02 N.
Rojo neutro en solucin acuosa al 0.02%.

3.3 Material de vidrio:

Baguetas
Beakers, 100 mL.
Embudos de vidrio.
Pipetas, 1mL, 5mL y 10 mL.
Tubos de ensayo.

3.4 Otros:

Esptula.
Gradilla de tubos de ensayo.
Mechero Bunsen.
Papel filtro.
Pinzas para tubos.

3.5 Equipos y aparatos:

Balanza analtica.

4. PROCEDIMIENTO:

En un beaker, suspender 0.5 g de levadura liofilizada, en 15 mL de solucin


de Carbonato de sodio 0.5%.
Depositar 8 mL de esta suspensin en un tubo de ensayo y adicionar 8 mL
de rojo neutro al 0.02%. Mezclar bien y dejar en reposo por 5 minutos.
Observe que la suspensin adquiere un color naranja.
Dividir la suspensin en cuatro tubos de ensayo, a razn de 4 mL por cada
uno.

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Prcticas de Fisiologa vegetal
Realice las siguientes pruebas:

a. Tubo I : Filtrar, observar el filtrado y el color de las clulas


que quedan retenidas en el papel filtro.
b. Tubo II : Aadir 3 mL de NaOH 0.02 N.
c. Tubo III : Aadir 3 mL de NH4OH 0.02 N.
d. Tubo IV : Caliente con cuidado sobre la llama de un mechero.

Figura N8: Verificacin del proceso de difusin


Fuente: Registro de la prctica

5. PROCEDIMIENTO DETALLADO:

6. RESULTADOS Y DISCUSIN:

Explicar lo sucedido en cada uno de los tubos de ensayo.

7. CONCLUSIONES:

8. SUGERENCIAS:

9. CUESTIONARIO:

Realiza un comentario sobre el descubrimiento de las acuaporinas


Establece diferencias entre osmosis y difusin.
Determinar el tiempo que tarda una molcula de glucosa en difundir a travs de
una clula con un dimetro 50 m. Si de la glucosa es 109 2 1 .

10. BIBLIOGRAFA:

11. ANEXOS:

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PRACTICA N 8.

TRANSPIRACIN
1. MARCO TERICO:

El proceso dominante en las relaciones hdricas de una planta es la absorcin de


grandes cantidades de agua a partir del suelo, su transporte a travs de la misma
y la prdida eventual de vapor de agua hacia la atmosfera circundante debida a la
transpiracin.

La transpiracin se define como la prdida de agua en la planta en forma de


vapor, cuya medida es un parmetro fisiolgico importante en la economa hdrica
de la planta.
Las plantas pierden agua casi constantemente por transpiracin, que se realiza,
sobre todo por los estomas de las hojas. La prdida de vapor de agua por
transpiracin supone ms del 90% del agua absorbida.

En la Figura N 9 se muestran imgenes de estomas de Euonymus japonica


(Bonetero del Japn) obtenidas con microscopio electrnico de barrido.

Figura N9: Estomas de Euonymus japonica


Fuente: Mangas y Martnez. Prcticas de Fisiologa Vegetal

Los factores que afectan principalmente a la intensidad de la transpiracin son:


humedad atmosfrica, humedad del suelo, concentracin del CO2 y O2 atmosfrico,
iluminacin, temperatura y velocidad del viento.

La intensidad de la transpiracin () de un vegetal es la masa de agua perdida


por unidad de superficie y por unidad de tiempo.


=

= Peso inicial.
= Peso final.
= rea o superficie.
= Tiempo.

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Prcticas de Fisiologa vegetal
En la prctica, se determinar la intensidad de la transpiracin mediante valores
gravimtricos, registrando el peso perdido por vstagos con hojas de superficie
conocida a lo largo de intervalos de tiempo conocidos. Tambin, se utilizar el
transpirmetro o potmetro, que mide la absorcin del agua e indirectamente las
transpiracin, midiendo el descenso del nivel de una columna de agua en una
pipeta. No obstante, su limitacin en la medida directa, nos permite evaluar
fcilmente el efecto de los factores ambientales como: luz, sombra, temperatura y
viento.

La intensidad de la respiracin se expresa en . 2 . 1 y los valores medios son


de 50 a 250 durante el da y menor de 10 de noche.

2. OBJETIVOS:

2.1 Explicar la importancia de la transpiracin de las plantas como proceso


fisiolgico y como parte del ciclo del agua.
2.2 Evaluar los factores ambientales que influyen en la transpiracin de las
plantas: luz, sombra, temperatura y viento.
2.3 Calcular la intensidad de la transpiracin de una planta mediante el mtodo
gravimtrico.
2.4 Calcular la intensidad de la transpiracin de una planta mediante el mtodo
del transpirmetro o potmetro.
2.5 Enfatizar en el proceso enseanza-aprendizaje valores de puntualidad,
responsabilidad, cooperacin y perseverancia.

3. MATERIALES:

3.1 Material vegetal:

Vstagos con hojas de una planta vigorosa.

3.2 Reactivos:

Agua hervida fra.


Lanolina anhidra.

3.3 Material de vidrio:

Matraz kitasato de 500 mL.


Pipetas de 1 mL.

3.4 Otros:

Lmpara con un foco de 300 W.


Mangueras de goma.
Papel.
Parafilm.
Pinzas.
Soporte universal.
Tapones de jebe perforados.
Tijeras.

3.5 Equipos y aparatos:

Balanza analtica.

4. PROCEDIMIENTO:

38
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4.1. Mtodo gravimtrico:

Separar un vstago vigoroso y limpio con varias hojas.


Sellar con lanolina anhidra el tallo seleccionado.
Pesar el vstago y considerar ste como peso inicial (0 ) para el tiempo
cero (0 ).
El vstago debe permanecer en un lugar aireado.
Anotar el peso en los siguientes intervalos de tiempo: 5 intervalos de 2
minutos, 4 de 5 minutos y 2 de 15 minutos.
El peso registrado a los 70 minutos, corresponde al peso final ( ).
Representar grficamente el cambio en peso fresco del vstago frente
al tiempo.
Reportar la intensidad de la transpiracin del vstago en
experimentacin, en . 2 1 .

4.2. Mtodo del transpirmetro o potmetro:

Separar un vstago vigoroso y limpio con varias hojas.


Armar el transpirmetro y colocar el vstago que contenga de 5 a 6
hojas grandes y limpias, elimine las hojas pequeas, tratando de no
daar los tejidos.
Llene el transpirmetro con agua hervida y fra, cuidando que no haya
fuga de agua y que no se formen burbujas debajo del tapn o en la
columna de agua en la pipeta.
El menisco de agua en la pipeta debe estar en su punto cero, de tal
manera que el sistema transpirmetro-planta forme una columna
lquida continua, sin entrada de aire ni salida de agua, siendo las hojas,
las nicas superficies a travs de las cuales se pierde agua por
transpiracin.
Para evaluar los factores ambientales que influyen en la transpiracin
de las plantas, someta a los transpirmetros a los siguientes
tratamientos:

I. Condiciones de laboratorio.
II. Bajo luz artificial de un foco de 300 W en el laboratorio.
III. Bajo luz solar y a las condiciones del medio ambiente.
IV. Bajo sombra, con viento fuerte en condiciones normales del
medio ambiente.

Los transpirmetros en estas condiciones deben estar por espacio de


30 minutos.
Reportar la intensidad de la transpiracin del vstago en
experimentacin, en . 2 . 1 y en . 2 . 1 .

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Prcticas de Fisiologa vegetal

Figura N10: Transpirmetro bajo luz artificial


Fuente: Registro de la prctica

5. PROCEDIMIENTO DETALLADO:

6. RESULTADOS Y DISCUSIN:

7. CONCLUSIONES:

8. SUGERENCIAS:

9. CUESTIONARIO:

Cmo se disponen los estomas en las partes de las planta?


Describe la estructura de un estoma.
De que dependen los movimientos estomticos en las plantas?
Cul es la influencia de los factores ambientales en la transpiracin de las plantas?
Realiza un comentario sobre la importancia de la determinacin de la intensidad
respiratoria de un tejido vegetal en el rea de Biotecnologa vegetal.

10. BIBLIOGRAFA:

11. ANEXOS:

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PRACTICA N 9.

TEORA COHESO - TENSO - RESPIRATORIA


1. MARCO TERICO:

La supervivencia de las plantas depende de que el agua sea absorbida por el


sistema radical y ascienda a travs del tallo y las ramas en cantidad suficiente
para reemplazar la prdida por transpiracin en las hojas.
La pregunta que a menudo se hacan los investigadores es como llegaba el agua a
las partes superiores de los arboles ms altos.
El ascenso del agua y los solutos en las plantas, es realizado por el xilema,
sistema conformado por vasos o traqueidas, mediante dos mecanismos;
capilaridad, gracias a la elevada tensin superficial del agua y por la teora
coheso-tenso-respiratoria, que postula que el agua asciende por el xilema gracias
a la cohesin molecular del agua, a la elevada tensin superficial y ayudados por
el potencial hdrico y la transpiracin.
En la prctica se demostrar los mecanismos que intervienen en el ascenso del
agua en las plantas.

2. OBJETIVOS:

2.1 Explicar el ascenso del agua y los solutos por el xilema en las plantas.
2.2 Demostrar que el agua asciende por el fenmeno de capilaridad.
2.3 Demostrar que el agua asciende segn la teora coheso-tenso-respiratoria.
2.4 Enfatizar en el proceso enseanza-aprendizaje valores de puntualidad,
responsabilidad, cooperacin y perseverancia.

3. MATERIALES:

3.1 Reactivos:

Azul de metileno.

3.2 Material de vidrio:

Pipeta, 1 mL.
Probeta de 50 mL.

3.3 Otros:

Papel filtro.
Piceta.
Pinzas.
Regla.
Soporte universal.

4. PROCEDIMIENTO:

4.1. Capilaridad:

Ensamblar el atmmetro, acondicionar una pipeta de 1 mL en el


interior de una probeta que contiene agua coloreada con azul de
metileno, la marca final de la pipeta al nivel del agua de la probeta.
Observar el ascenso del agua por el fenmeno de capilaridad.
Reportar la altura alcanzada por el agua.

41
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4.2. Teora coheso- tenso-respiratoria:

Ensamblar el atmmetro, acondicionar


una pipeta de 1 mL en el interior de
una probeta que contiene agua
coloreada con azul de metileno, la
marca final de la pipeta al nivel del
agua de la probeta.
En la parte superior de la pipeta,
colocar 1 cm2 de papel filtro hmedo
Observar el ascenso del agua por la
Teora coheso-tenso-respiratoria
Reportar la altura mxima alcanzada
por el agua, ya que despus comienza a
descender.

Figura N11: Acondicionamiento del


atmmetro
Fuente: Registro de la prctica

5. PROCEDIMIENTO DETALLADO:

6. RESULTADOS Y DISCUSIN:

7. CONCLUSIONES:

8. SUGERENCIAS:

42
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9. CUESTIONARIO:

Qu son las traqueidas del xilema?


Qu son los vasos el xilema?
Explica la teora coheso-tenso-respiratoria?
Explica que representa cada parte del atmmetro: pipeta, probeta con agua
coloreada y el papel filtro hmedo.
Qu altura alcanzara el agua, si los vasos tuvieran un dimetro de 1 y 5 m?
Empleando los datos prcticos del atmmetro Calcular la superficie evaporante
de una planta cuyos vasos miden 0.1 m?

10. BIBLIOGRAFA:

11. ANEXOS:

43
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44
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PRACTICA N 10.

ACCIN DE LA CATALASA
1. MARCO TERICO:

En los organismos vivos se produce un equilibrio entre oxidantes y antioxidantes,


cuando este equilibrio se rompe a favor de los oxidantes se produce estrs
oxidativo, el cual, est asociado a diversos mecanismos de oxidacin de las
macromolculas biolgicas.
Por tanto, es de vital importancia mantener el equilibrio entre oxidantes y
antioxidantes o incluso est a favor de los antioxidantes, ya que estos disminuyen
los efectos adversos de los radicales libres.

La catalasa es una enzima muy importante para las plantas, ya que pertenece al
sistema de antioxidantes endgenos, que cataliza la descomposicin de molculas
de perxido de hidrgeno.

El perxido de hidrgeno es un radical libre que pertenece al grupo de las especies


reactivas de oxgeno (ERO), como producto de las diversas oxidaciones biolgicas,
cuya acumulacin es txica para las plantas.
La catalasa evita esa toxicidad descomponiendo el perxido de hidrgeno en agua
y oxgeno de acuerdo a la siguiente ecuacin:

La catalasa se encuentra en los peroxisomas de las clulas vegetales,


principalmente en las semillas en germinacin, haciendo fcil su extraccin para
su estudio, cuya actividad es influenciada por la temperatura y el pH y es inhibida
por la presencia de cianuro.

2. OBJETIVOS:

2.1 Explicar la importancia de la catalasa en el equilibrio entre oxidantes y


antioxidantes.
2.2 Explicar la extraccin de la catalasa a partir de semillas germinadas.
2.3 Evaluar el efecto de la temperatura, pH e inhibidores en la accin de la
catalasa.
2.4 Enfatizar en el proceso enseanza-aprendizaje valores de puntualidad,
responsabilidad, cooperacin y perseverancia.

3. MATERIALES:

3.1 Material vegetal:

Semillas germinadas.

3.2 Reactivos:

Solucin de buffer fosfato de potasio pH 2.2, 5.8, 7.2 y 9.6.

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Solucin de Cianuro de potasio (KCN) al 5%.
Agua oxigenada al 5% (H2O2).

3.3 Material de vidrio:

Bagueta.
Beaker, 1000 mL.
Embudo de vidrio.
Matraz, 100 mL.
Pipetas, 5 y 10 mL.
Probeta de 50 y 100 mL.
Termmetro.
Tubos de ensayo, 16x150 y 10x60.

3.4 Otros:

Gasa.
Hielo.
Mangueras de goma.
Morteros.
Piceta.
Tapones de jefe.

3.5 Aparatos y equipos:

Bao termosttico.
Balanza analtica.

4. PROCEDIMIENTO:

Moler en un mortero 10 g de semillas germinadas, depositarlo en un beaker


y agregarle 50 mL de agua destilada.
Agitar, dejar que sedimente un poco, decantar el lquido en otro vaso. Este
es un extracto de catalasa.
Arme el equipo correspondiente para evaluar la accin de la catalasa.
Con una pipeta tomar 5 mL de la solucin buffer correspondiente y verterlo
en el tubo de ensayo. Cuidadosamente introducir el tubo pequeo
conteniendo 3 mL de Perxido de hidrogeno, evitando que ambos se
mezclen.
Luego depositar sobre la solucin buffer 5 mL del extracto de la catalasa.
Tapar el tubo grande que contiene la manguera de desprendimiento y que
est conectada al tubo de coleccin (probeta) que se encuentra lleno de
agua e invertido sobre un beaker.
Invierta el tubo grande con cuidado, para que se mezclen el Perxido de
hidrogeno, con el extracto y el buffer, evitando que estos migren por la
manguera de desprendimiento.
Vuelva el tubo a su posicin inicial y agite suavemente. Observe el
desprendimiento de oxgeno en forma de burbujas que van al tubo de
coleccin durante 15 minutos.
Hacer los siguientes tratamientos de acuerdo al Cuadro N1. Para la
variable inhibidor, agregar al extracto de catalasa unas gotas de Cianuro de
potasio al 5%.

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Cuadro N1: Efecto de la temperatura y pH en la accin de la catalasa:

Constante Variable Cantidad de O2 Cantidad de O2 en


desprendido mL.g-1.min-1
pH=2.2
Temperatura pH=5.8
ambiente pH=7.2
pH=9.6
T 0C
pH=7 T 60C
T ebullicin
pH=7 y
Temperatura Con inhibidor
ambiente

Figura N12: Sistema para evaluar la accin de la catalasa


Fuente: Registro de la prctica

5. PROCEDIMIENTO DETALLADO:

6. RESULTADOS Y DISCUSIN:

7. CONCLUSIONES:

8. SUGERENCIAS:

9. CUESTIONARIO:

Qu son los radicales libres?


Qu son los antioxidantes?
Cmo influye la temperatura en la accin de la catalasa?
Cmo influye el pH en la accin de la catalasa?
A partir de que otras fuentes se realiza la extraccin de catalasa?
Para qu se utiliza el agua oxigenada en los botiquines?

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10. BIBLIOGRAFA:

11. ANEXOS:

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PRACTICA N 11.

MEDIDA DE LA INTENSIDAD RESPIRATORIA


1. MARCO TERICO:

La fotosntesis proporciona los elementos orgnicos bsicos de los que dependen


las plantas. La respiracin libera la energa almacenada en dichos compuestos
orgnicos de una forma controlada para ser utilizada a nivel celular.

La respiracin aerbica es el proceso biolgico por el cual los compuestos


orgnicos reducidos son movilizados y posteriormente oxidados de modo
controlado. Durante la respiracin, la energa libre es liberada y almacenada en
forma de ATP, que puede ser rpidamente utilizada para el crecimiento de los
rganos vegetales y de la planta, el mantenimiento de las estructuras existentes,
el transporte de metabolitos e iones, la regeneracin de protenas y los procesos
de reparacin.

Se suele mencionar a la glucosa como el principal sustrato de la respiracin, sin


embargo, en una clula vegetal funcional, el carbono reducido deriva de diversas
fuentes como el disacrido sacarosa, hexosas fosfato y triosas fosfato derivadas
de la degradacin del almidn y de la fotosntesis, polmeros que contienen
fructosa y otros azcares, as como lpidos y protenas.
Desde un punto de vista qumico, la respiracin vegetal se suele expresar en:

+ + +

Para la obtencin de energa, la clula vegetal mediante procesos oxidativos,


consume oxgeno y produce dixido de carbono.

La relacin del volumen de 2 con el volumen de 2 , constituye el cociente


respiratorio (CR), el cual vara segn la especie, hbitat, tipo y edad del rgano en
concreto, sustratos y variaciones ambientales tales como la concentracin externa
de oxgeno, la temperatura, las nutrientes y el aporte de agua.

En la prctica, la respiracin ser medida, registrando el volumen de 2


consumido.

2. OBJETIVOS:

2.1 Explicar la importancia de la respiracin en las plantas.


2.2 Medir el oxgeno consumido en la respiracin de semillas en germinacin.
2.3 Evaluar el efecto de la temperatura en la intensidad respiratoria.
2.4 Enfatizar en el proceso enseanza-aprendizaje valores de puntualidad,
responsabilidad, cooperacin y perseverancia.

3. MATERIALES:

3.1 Material vegetal:

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Semillas germinadas.

3.2 Reactivos:

Solucin de azul de metileno al 1%.


Solucin de Hidrxido de sodio 10 N.

3.3 Material de vidrio:

Beaker, 400 mL.


Pipetas, 5 mL.
Termmetro.
Tubos de ensayo, 16x150 y 10x60.

3.4 Otros:
Hielo.
Mangueras de goma.
Pinzas.
Soporte universal.
Tapones de jefe.

3.5 Aparatos y equipos:

Bao termosttico.
Balanza analtica.

4. PROCEDIMIENTO:

Acondicionar un aparato manomtrico para el estudio de la intensidad


respiratorio de semillas germinadas.
En el tubo de ensayo de 16x150 colocar 5 g de semillas germinadas.
Introducir un tubo de ensayo de 10x60 conteniendo 2.5 mL de la solucin
de NaOH 10N.
Cerrar hermticamente el tubo grande con el tapn de jebe que est
conectado a una manguera y que a su vez se conecta a una pipeta de 2 mL.
Luego sumerja la pipeta de 2 mL en un beaker que contiene agua coloreada
con 10 gotas de azul de metileno y detergente.
Al inicio de la experiencia anotar la altura del agua en la pipeta.
Observar el ascenso de la solucin coloreada por el tubo capilar de la pipeta
a los 30 minutos.
La altura alcanzada por la solucin coloreada nos indica el volumen de 2
producido o el volumen de 2 consumido.
Se evaluar la intensidad respiratoria en diferentes condiciones de
temperatura: 0 C, 20 C, 40 C y 60 C.
Registrar la cantidad de 2 consumido en
mL/g.min

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Figura N13: Sistema para evaluar la intensidad respiratoria


Fuente: Registro de la prctica

5. PROCEDIMIENTO DETALLADO:

6. RESULTADOS Y DISCUSIN:

7. CONCLUSIONES:

8. SUGERENCIAS:

9. CUESTIONARIO:

Con que objeto se utiliza agua coloreada con azul de metileno?


Cul es la funcin del NaOH?
Lo que se est midiendo en la pipeta, es el 2 producido o el 2 consumido. Por
qu?
Qu factores afectan la intensidad respiratoria?
A que es igual el cociente respiratorio (CR)?

10. BIBLIOGRAFA:

11. ANEXOS:

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PRACTICA N 12.

PIGMENTOS VEGETALES
1. MARCO TERICO:

La fotosntesis es un proceso que permite a los vegetales obtener la materia y la


energa que necesitan para desarrollar sus funciones vitales, se lleva a cabo
gracias a la presencia de clorofila, pigmento que absorbe la energa lumnica.

Los pigmentos fotosintticos estn presentes en los cloroplastos y son los


encargados de captar la energa lumnica de un quanto de luz y transformarla en
energa qumica, es decir, sintetizar carbohidratos a partir de dixido de carbono y
agua, generando oxigeno.

Los pigmentos ms comunes en las plantas superiores se clasifican en: pigmentos


clorofilianos, como la clorofila a y la clorofila b; pigmentos carotenoides como la
xantofila y el caroteno; las ficobilinas como la ficoeritrina y la ficocianina;
betalanas como betacianina y betaxantina; y antocianinas.

Los pigmentos pueden ser fcilmente extrados con solventes orgnicos y luego
ser separados por diversos mtodos para su identificacin.

2. OBJETIVOS:

2.1 Explicar la importancia de los pigmentos vegetales en la fisiologa de las


plantas.
2.2 Explicar la extraccin, separacin e identificacin de los pigmentos vegetales.
2.3 Enfatizar en el proceso enseanza-aprendizaje valores de puntualidad,
responsabilidad, cooperacin y perseverancia.

3. MATERIALES:

3.1 Material vegetal:


Hojas y flores.

3.2 Reactivos:
Benceno.
Etanol 95%.
ter de petrleo.

3.3 Material de vidrio:


Bagueta.
Beaker, 50 mL.
Cmara de separacion para Cromatografia de Capa Fina (TLC).
Capilares.
Embudo de vidrio.
Matraz, 100 mL.
Pipetas, 5 y 10 mL.
Probeta de 50 y 100 mL.

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Tubos de ensayo, 16x150.

3.4 Otros:
Gasa.
Gradilla para tubos.

Morteros.
Placas cromatogrficas de silica gel.
Regla.

3.5 Aparatos y equipos:

Balanza analtica

4. PROCEDIMIENTO:

4.1. Obtencin del extracto:

Recolectar hojas y flores frescas.


Clasificar el material vegetal recolectado, utilizando como criterio, el
color.
Lavar el material vegetal seleccionado, colocarlo en un mortero y aadir
alcohol etlico al 96%.
Triturar la mezcla hasta que las hojas se decoloren y el disolvente
adquiera un color verde intenso.
Filtrar el extracto obtenido.

4.2. Cromatografa en capa fina de pigmentos:

Recorte una tira de placa cromatogrfica de silica gel y coloque con un


capilar varias gotas del extracto alcohlico. Dejar secar.
Prepare una solucin de ter de petrleo y benceno (9:1) y deposite 10
mL de la mezcla en el fondo de la cmara cromatogrfica.
Fijar adecuadamente la placa de silica gel.
Observe y determine el Rf para cada pigmento.

4.3. Separacin con solventes orgnicos:

Tomar 2 mL del extracto en un tubo de ensayo, agregar una porcin


igual de ter de petrleo.
Agitar invirtiendo el tubo. Observe la separacin de dos fases inmiscibles
y clasifique los pigmentos segn su polaridad en disolventes.

Figura N14: Obtencin del extracto

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Fuente: Registro de la prctica

5. PROCEDIMIENTO DETALLADO:

6. RESULTADOS Y DISCUSIN:

7. CONCLUSIONES:

8. SUGERENCIAS:

9. CUESTIONARIO:

10. BIBLIOGRAFA:

Dibujar las estructuras qumicas de los principales pigmentos vegetales.


Cules son los principios de la cromatografa?
Cul es el comportamiento de los pigmentos en la tcnica de TLC?
Cul es la funcin de los pigmentos accesorios o auxiliares?

11. ANEXOS:

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PRACTICA N 13.

DEGRADACIN DEL ALMIDN EN LAS PLANTAS


1. MARCO TERICO:

El almidn es un polmero de glucosa que constituye el principal producto de


almacenamiento en semillas y otros rganos. Su importancia econmica radica en
la elaboracin de bebidas alcohlicas producidas a partir de cereales.
El almidn es el producto de reserva de carbohidratos ms importante de toda la
planta y se almacena en forma de grnulos insolubles en determinados plastos y
plastidios como cloroplastos y amiloplastos. Su sntesis en los cloroplastos se lleva
a cabo mediante el proceso de fotosntesis y su estructura qumica es compleja y
ramificada.
El almidn est formado por unidades amilosa, molculas de glucosa unidas
linealmente mediante enlaces (1-4), y amilopectina, molculas de glucosa
unidas linealmente mediante enlaces (1-4) con ramificaciones formadas por
enlaces (1-6).
Por su compleja estructura, la degradacin del almidn debe llevarse a cabo
mediante un conjunto de reacciones en las que cooperan diferentes enzimas. Las
principales enzimas encargadas de la degradacin del almidn son tres: la -
amilasa, la -amilasa y la almidn fosforilasa, a las que hay que aadir las
enzimas desramificantes.
La -amilasa es la nica enzima que puede atacar los grnulos intactos de almidn
para hidrolizar enlaces (1-4) a discrecin, pero no puede degradar los enlaces
formadores de ramificaciones (1-6) ni los enlaces (1-4) cercanos a stos.
La -amilasa degrada cadenas de glucosas inicialmente degradadas por la -
amilasa y enlaces (1-4), pero a partir de los extremos no reductores. Al igual
que la -amilasa, la -amilasa tampoco puede romper los enlaces ramificantes
(1-6).
Las y -amilasas producen y -maltosa, respectivamente. La maltosa es un
disacrido compuesto de dos molculas de glucosa unidas por un enlace (1-4),
que se hidroliza rpidamente a dos molculas de glucosa mediante la -
glucosidasa.
La almidn fosforilasa tambin inicia la degradacin del almidn por el extremo no
reductor, al igual que la -amilasa, sin embargo, el producto final de esta reaccin
produce glucosa-1-fosfato, en lugar de maltosa. Este tipo de reaccin se conoce
como degradacin fosforilante del almidn, y tiene lugar cuando la concentracin
de fosfato inorgnico en los plastidios es alta.
Los enlaces ramificantes (1-6) son especficamente degradados por la
dextrinasas lmite o isoamilasas presentes en los plastidios. Una vez rota la
ramificacin, las amilasas y las fosforilasas llevan a cabo la degradacin final de la
cadena lineal hasta la obtencin de glucosa o glucosa-1-fosfato.
Estas enzimas estn presentes en la mayora de los tejidos vegetales pero ms
abundantemente se encuentran en las semillas en germinacin produciendo
cantidad de glucosa fcilmente disponible para los procesos metablicos que
acompaan a la germinacin.

2. OBJETIVOS:

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2.1 Comprobar la actividad enzimtica de los extractos de semillas germinadas
en la degradacin de almidn.
2.2 Determinar la hidrlisis enzimtica del almidn mediante la reaccin del
yodo.

2.3 Evaluar el efecto de la temperatura en la degradacin del almidn.


2.4 Enfatizar en el proceso enseanza-aprendizaje valores de puntualidad,
responsabilidad, cooperacin y perseverancia.

3. MATERIALES:

3.1 Material vegetal:

Semillas germinadas.

3.2 Reactivos:

Solucin yodo-yodurada (lugol).


Solucin de almidn al 1%.

3.3 Material de vidrio:

Bagueta.
Beaker, 50 y 400 mL.
Embudo de vidrio.
Matraz, 100 mL.
Pipetas, 5 y 10 mL.
Probeta de 50 mL.
Termmetro.
Tubos de ensayo, 16x150.

3.4 Otros:

Gasa.
Gradilla para tubos.
Hielo.
Morteros.
Picetas.
Placa de porcelana blanca de prueba.

3.5 Aparatos y equipos:

Balanza analtica.
Cocina elctrica.

4. PROCEDIMIENTO:

Moler en un mortero 10 g de semillas germinadas y aadir 50 mL de agua


destilada. Homogenizar.
Filtrar el extracto, dejar que sedimente y luego decantar. ste constituye
un extracto de enzima que hidroliza al almidn.
En un tubo de ensayo mezclar el extracto con una solucin de almidn al
1%, agitar ligeramente y extraer rpidamente una alcuota (tiempo 0).
La alcuota extrada colocarla en una superficie blanca o en una porcelana
para hacer pruebas de color. Para ello agregar 1 gota de solucin yodo-

58
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yodurada (lugol). Este servir como testigo para las sucesivas pruebas a
realizarse.
Hacer esta comparacin cada 2 minutos. Observar el progresivo cambio de
color con respecto al testigo, que demostrar la hidrlisis del almidn por
parte de estas enzimas.
Evaluar la degradacin del almidn en diferentes condiciones de
temperatura: 0 C, 20 C, 40 C y 60 C.

Figura N15: Prueba del lugol


Fuente: Registro de la prctica

5. PROCEDIMIENTO DETALLADO:

6. RESULTADOS Y DISCUSIN:

7. CONCLUSIONES:

8. SUGERENCIAS:

9. CUESTIONARIO:

Dibujar la estructura del almidn.


Explica el fundamento de la reaccin del yodo.
Realiza un comentario sobre las aplicaciones de la degradacin de almidn en la
Biotecnologa.

10. BIBLIOGRAFA:

11. ANEXOS:

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PRACTICA N 14.

DETERMINACIN Y EVALUACIN DEL ACIDO GIBERLICO EN LA


GERMINACIN DE SEMILLAS
1. MARCO TERICO:

Las hormonas vegetales o fitohormonas pueden ser definidas como un grupo de


sustancias orgnicas, sintetizadas por las plantas, que tienen la capacidad de
afectar a los procesos fisiolgicos en bajas concentraciones. El control de la
respuesta hormonal se lleva a cabo a travs de cambios en la concentracin y la
sensibilidad de los tejidos a las hormonas.

Las hormonas vegetales se clasifican en fitohormonas clsicas y no clsicas, entre


las fitohormonas clsicas se encuentran: las auxinas, giberelinas, citoquininas,
etileno y acido abscisico. En cuanto a las no clsicas, se incluye a los
brasinoesteroides, poliaminas, oligosacarinas, cido jasmnico, cido saliclico y
oligopptidos.

Las giberelinas (GAs) son compuestos naturales que actan como reguladores
endgenos del crecimiento y el desarrollo en los vegetales superiores. Este grupo
de hormonas fue descubierto por azar por fitiopatlogos japoneses que estudiaban
en el arroz una enfermedad conocida como bakanae o planta loca, causada por el
hongo Gibberella fujikuroi. El ataque del hongo produce en esta especie un
crecimiento excesivo de los tallos y brotes. Posteriormente, el 1955, se aisl a
partir del filtrado segregado por el hongo el compuesto inductor del crecimiento
del tallo, que se denomin cido giberlico. Unos pocos aos despus, se
comprob que las plantas tambin poseen compuestos con estructuras muy
semejantes al cido giberlico. Desde entonces se han aislado y caracterizado
hasta 136 GAs, la mayora de ellas a partir de vegetales superiores, y el resto, a
partir de Gibberella.

Los efectos ms evidentes que se observan son:

1. Estimulacin del crecimiento del tallo: de plantas enanas y en roseta.


2. Induccin del cuajado de frutos: inicio del crecimiento y desarrollo del fruto
tras la polinizacin.
3. Germinacin de semillas, por la movilizacin de reservas del endospermo
por sntesis de amilasas y activacin del crecimiento vegetativo del embrin.
4. Regulan la transicin desde la fase juvenil a la adulta: Influyen en el inicio
de la floracin y la determinacin del sexo.

2. OBJETIVOS:

2.1 Explicar la importancia de las hormonas vegetales en el crecimiento y


desarrollo vegetal.
2.2 Evaluar el efecto del cido giberlico en la germinacin de semillas.
2.3 Enfatizar en el proceso enseanza-aprendizaje valores de puntualidad,
responsabilidad, cooperacin y perseveran

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Prcticas de Fisiologa vegetal

3. MATERIALES:

3.1 Material vegetal:

Semillas de lechuga u alfalfa.

3.2 Reactivos:

Solucin de cido giberlico 100 ppm.

3.3 Material de vidrio:

Bagueta.
Pipetas, 1 y 5 mL.
Placas petri.
Tubos de ensayo, 16x150.

3.4 Otros:

Gradilla para tubos.


Papel filtro.
Papel aluminio.

3.5 Aparatos y equipos:

Estufa.

4. PROCEDIMIENTO:

5. PROCEDIMIENTO DETALLADO:

A partir de una solucin de cido giberlico 100 ppm, preparar 10 mL de las


siguientes diluciones: 0, 0.5, 1.0, 1.5, 2.0, 2.5, 3.0, 3.5, 4.0, 4.5 y 5.0 ppm,
y colocarlas en tubos de ensayo rotulados.
En un beaker colocar 100 semillas de lechuga o alfalfa, y lavarlas 3 veces
con agua destilada.
Luego coloque 10 semillas en una placa petri que contiene papel filtro
hmedo con una de las diluciones de prueba (AG3). Repetir sta operacin
con cada una de las diluciones preparadas.
Rotule adecuadamente las placas y para protegerlas de la luz deben ser
envueltas con papel aluminio.
Luego colocar las placas petri en una estufa a 25 C por 48 horas. El control
de la germinacin se puede hacer empleando una linterna de luz verde.
Determinar el porcentaje de semillas germinadas para cada concentracin
de AG3.

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Figura N16: Semillas en solucin de cido giberlico


Fuente: Registro de la prctica

6. RESULTADOS Y DISCUSIN:

7. CONCLUSIONES:

8. SUGERENCIAS:

9. CUESTIONARIO:

Cul es la aplicacin prctica del uso de fitohormonas en la Biotecnologa?


Nombra algunas aplicaciones de las giberelinas a nivel comercial.

10. BIBLIOGRAFA:

11. ANEXOS:

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Prcticas de Fisiologa vegetal

BIBLIOGRAFA
1. ARGENBIO.Por qu Biotecnologa. Consejo Argentino para la formacin y
desarrollo de la Biotecnologa. Argentina. 2000.

2. AZCON-BIETO y TALN.Fundamentos de Fisiologa vegetal. 2da Edicin.


Editorial McGraw Hill. Espaa. 2008.

3. CURTIS, H., BARNES, S., SCHNEK, A. y FLORES, G.Biologa. Sptima


Edicin. Editorial Mdica Panamericana. Argentina. 2008.

4. MANGAS, V. y MARTNEZ, P. El agua en las plantas. Prcticas de Fisiologa


Vegetal. Universidad de Alicante. Espaa. 2007.

5. RENNEBERG, R. Biotecnologa para principiantes. Editorial Revert. Espaa.


2008.

6. SMITH, J. Biotecnologa. Editorial Acribia. Espaa. 2006.

7. TAIZ, L y ZEIGER, E. Plant physiology. Third Edition. University of California.


2006

64