TP 7

Los diversos tipos de tejidos conectivos deben sus caractersticas especficas al tipo de colgeno que
contienen, a su cantidad y, V
que es ms importante, a las otras molculas que se entremezclan con el colgeno en proporciones variables.
Estas comprenden la protena elstica elastina, que confiere la elasticidad a las paredes de los vasos
sanguneos cuando los pulsos d' sangre pasan por ellos, as como muchas molculas de polisacridos
especializa dos

El colgenos son las protenas principales de los huesos, los tendones y la piel (el cuero es colgeno curtido)
y constituyen el 25% del total de la masa proteica presente en los mamferos, un porcentaje mayor que el de
cualquier otro tipo de protena

El rasgo caracterstico de una molcula de colgeno tpica es su estructura de triple hlice larga y rgida, en la
que tres cadenas polipeptdicas de colgeno se entrelazan formando una superhlice similar a una cuerda

Las fibrillas de colgeno cumplen adecuadamente su funcin cuando se alinean en forma correcta. Por
ejemplo, en la piel, las fibrillas se entrelazan fo; mando un patrn similar a un tejido de mimbre o
constituyen capas alternadas con diversas orientaciones que resisten las tensiones generadas en muchas
direcciones (Fig. 20-12). En los tendones, que insertan los msculos en los huesos, las fibrillas se alinean en
fascculos paralelos a lo largo del eje mayor de tensin. Las clulas del tejido conectivo controlan esta
orientacin, en parte por medio del depsito del colgeno en una orientacin especfica y en parte por medio
de su reordenamiento posterior. Durante el desarrollo del tejido, los fibroblastos moldean el colgeno que
secretan desplazndose sobre l y traccionando de sus fibras; de este modo, contribuyen a compactarlo en
lminas y% formar estructuras similares a cables-. Esta funcin mecnica que cumplen los fibroblastos
dando forma a las matrices de colgeno ha podido demostrarse muy bien en cultivos celulares. Cuando los
fibroblastos se mezclan con una red de fibrillas de colgeno orientadas al azar que forman un gel en una
placa de cultivo se observa cmo traccionan de la red, lo que determina el movimiento del colgeno desde
sus alrededores y su compactacin. Si se colocan dos fragmentos de tejido embrionario que contengan
fibroblastos con colgeno interpuesto sobre un gel de colgeno, el colgeno interpuesto se organiza y forma
una banda densa de fibras alineadas que conectan los dos fragmentos (Fig. 20-13). Los fibroblastos emigran
de los fragmentos a lo largo de las fibras de colgeno alineadas. Esto significa que los fibroblastos influyen
sobre la alineacin de las fibras de colgeno y que estas fibras, a su vez, afectan la distribucin de los
fibroblastos. Es probable que los fibroblastos cumplan una funcin similar en la produccin de un orden
superior en la matriz extracelular del organismo -por ejemplo, que contribuyan a la sntesis de los tendones y
de las capas de tejido conectivo rgidas y densas que rodean y conectan la mayora de los rganos-. La
migracin de los fibroblastos tambin es importante para la curacin de heridas

Las integrinas acoplan la matriz extracelular con el citoesqueleto intracelular

Otra protena de la matriz extracelular, la fibronectina, permite la conexin: una parte de la molcula de
fibronectina se une al colgeno mientras que otra parte forma un sitio de insercin en la clula

La clula se adhiere al sitio especfico en la fibronectina a travs de una protena receptora,

denominada integrina, que atraviesa la membrana plasmtica de la clula. El dominio extracelular de
la integrina se une a la fibronectina mientras que el dominio intracelular se adhiere (a travs de un
conjunto de molculas de adaptacin) a los filamentos de actina

los proteoglucanos, que corresponden a protenas extracelulares ligadas con una clase especial de
polisacridos complejos con carga negativa denominados giucosamino- glucanos (GAG) Los proteoglucanos
Oevan a cabo muchas funciones sofisticadas adems de proporcionar un espacio hidratado alrededor de las
clulas. Estas molculas pueden formar geles con distintos tamaos de poros y densidad de carga variable
que actan como filtros que regulan el pasaje de las molculas a travs del medio extracelular. Pueden unirse
a factores de crecimiento secretados y a otras protenas que actan como seales para las clulas. Adems,
estas molculas pueden bloquear, estimular o guiar la migracin de la clula a travs de la matriz. Los
componentes de la matriz influyen sobre el comportamiento de las clulas en todas estas formas y muchas
veces afectan a las mismas clulas que sintetizan la matriz -lo que representa una interaccin recproca que
ejerce efectos importantes sobre la diferenciacin celular-.

CAPAS EPITELIALES Y UNIONES CELULARES

La capa epitelial tiene dos caras: la superficie apical libre y expuesta al aire o a un lquido acuoso y la
superficie basal apoyada sobre algn tejido -por lo general tejido conectivo- al que est unida (Fig. 20-19).
La superficie basal del epitelio tiene una capa delgada y resistente de matriz extracelular, denominada lmina
basal (Fig. 20-20), que est compuesta por un tipo especializado de colgeno (colgeno de tipo IV) y varias
otras molculas , p. ej., una protena denominada l a m i n illa que aporta sitios adhesivos para las molculas
de integrina en la membrana plasmtica de las clulas epiteliales y, por lo tanto, cumple una funcin de
conexin similar a la de la fibronectina en los tejidos conectivos.

Las uniones estrechas determinan la impermeabilidad del epitelio y separan su superficie apical de su
superficie basal

La funcin de sellado se logra (en los vertebrados) por las uniones estrechas u ocluyentes ( ti g h t j u n c ti o
n s ). Estas uniones sellan las clulas vecinas de manera que las molculas hidrosolubles no puedan pasar con
facilidad entre las clulas. Si se introduce un trazador en una cara de una capa de clulas epiteliales por lo
general no podr pasar ms all de la unin estrecha (Fig. 20-23). La unin estrecha est compuesta por
protenas denominadas c l a u d i n a s y o c lu d in a s , que estn dispuestas en cadenas a lo largo de la lnea
de unin formando una barrera. Sin uniones estrechas que impidan las filtraciones sera intil la actividad de
las bombas en las clulas destinadas a la absorcin, como por ejemplo las que se desarrollan en el intestino, y
la composicin del medio a ambos lados del epitelio se tomara homognea. las uniones estrechas tambin
cumplen una funcin clave en el mantenimiento de. la polaridad de las clulas epiteliales de dos maneras: en
primer lugar, el complejo de la unin estrecha que rodea el borde apical de cada clula evita la difusin de
las protenas de la membrana lo cual mantiene la diferencia entre el dominio apical de la membrana
plasmtica y el dominio basal o basolateral; en segundo lugar, en muchos epitelios las uniones estrechas son
sitios del ensamblado de los complejos de protenas intrace- lulares que determinan la polaridad apicobasal
en el interior de la clula.

Las uniones relacionadas con el citoesqueleto conectan de manera firme las clulas epiteliales entre s y con
la lmina basal

Las uniones que mantienen unido el epitelio mediante la formacin de adherencias mecnicas
corresponden a tres tipos principales. Las u n i o n e s a d h e r e n t e s y los d e s m o s o m a s
conectan las clulas epiteliales entre s mientras que los h e m i
d e s m o s o m a s unen las clulas epiteliales con la lmina basal

Las uniones adherentes y los desmosomas se forman alrededor de protenas transmembrana que pertenecen a
la familia de las cadherinas: una molcula de cadherina presente en la membrana plasmtica de una clula se
une en forma directa con una molcula de cadherina idntica situada en la membrana plasmtica de la clula
vecina). Esta clase de unin se denomina h o m fit a .
En el caso de las cadherinas, la unin tambin requiere Ca2+ en el medio extracelular, lo que determina el
nombre de la molcula.
En una unin adherente cada molcula de cadherina est anclada al interior de la clula con
filamentos de actina a travs de varias protenas de conexin. Con frecuencia, las uniones adherentes
forman una banda de adhesin continua que rodea cada clula epitelial que interacta en la unin;
este cinturn se localiza cerca del extremo apical de la clula, justo por debajo de las'uniones estrechas
Por el contario, en un desmosoma, un conjunto diferente de molculas de cadhe- rina est anclado a
filamentos intermedios dentro de cada clula. Estas cadheri- nas forman conexiones con los filamentos
intermedios -en forma especfica a queratinas, que representan el tipo de filamento intermedio hallado en los
epitelios

En el exterior, estas integrinas se unen a la protena laminina de la matriz extracelular de la lmina basal;
dentro de la clula se conectan con los filamentos de queratina y forman una estructura que a grandes rasgos
se asemeja a la mitad de un desmosoma. En consecuencia, estas adherencias de las clulas epiteliales en la
matriz extracelular subyacente se denominan hemidesmosomas

Las uniones comunicantes (gap) permiten el pasaje de iones y de molculas pequeas de una clula a
otra

se observa una regin en la que las membranas de dos clulas se encuentran en contacto estrecho y
exactamente paralelas con un espacio muy angosto entre ellas ). Este espacio no est vaco sino que se halla
atravesado por los extremos sobresalientes de muchos complejos proteicos idnticos que se encuentran en las
membranas plasmticas de las dos clulas yuxtapuestas. Estos complejos, denominados c o n e x o n e s ,
forman canales que atraviezan las dos membranas plasmticas, con ambos extremos alineados formando
tneles angostos que permiten el pasaje de iones inorgnicos y pequeas molculas disolubles que se
desplazan del citosol de una clula al citosol de otra clula.

Cmo est compuesta la lmina basal?

La capa epitelial tiene dos caras: la superficie apical libre y expuesta al aire o a un lquido acuoso y la
superficie basal apoyada sobre algn tejido -por lo general tejido conectivo- al que est unida (Fig. 20-19).
La superficie basal del epitelio tiene una capa delgada y resistente de matriz extracelular, denominada lmina
basal (Fig. 20-20), que est compuesta por un tipo especializado de colgeno (colgeno de tipo IV) y varias
otras molculas , p. ej., una protena denominada l a m i n illa que aporta sitios adhesivos para las molculas
de integrina en la membrana plasmtica de las clulas epiteliales y, por lo tanto, cumple una funcin de
conexin similar a la de la fibronectina en los tejidos conectivos.

Las clulas de algunos tejidos conectivos, auqnue pueden movilizarse, suelen permanecer en sus sitios
debido a que establecen unionnes ms o menos duraderas con componentes fijos de la matriz extracelular. En
esas uniones intervienen, del lado de las clulas, los contactos focales mientras que los componentes fijos de
la matriz extracelular corresponden a las fibras colgeno.
Debe recordarse que cada contacto focal consta de una rotena transmembrana llamada integrina,
cuyo dominio interno est unido -mediante varias protenas ligadoras- a haces de filamentos de actina
denominados hebras tensoras. Es precisamente la integrina -a travs de su monio colgena de la matriz
extracelular. Lo hace con la ayuda de la protena adhesiva fibronectina.
Que son las citoqueratinas y donde se sintetzan?

Los monmenros de los filamentos de queratina se llaman citoqueratinas. Existen alrededor de 30

citoqueratinas distintas, clasificadas en dos grupos: las de clase 1 (que son cidas) y las de clase 2 (que son
neutras o bsicas).

TP N8:

Todos los ARN tienen funciones regularotias:

El ARN snc -------- ARNr

ARNsn--------------ARNm- espleiciosoma
ARNsc--------------Tradiccin.

La improinta es expressin monoallica.

Para algunos genes, slo un alelo debe expresarse.

Impronta materna slo se expresa la del padre.

TpN8

Las anomalias cromosmicas constituyen las causas principales conocidas de retraso mental y
prdidas fetal.
La disposicin ordenada de los cromosomas se llama cariotipo o cariograma.

Si el centrmero se encuentra cerca de la mitad del cromosoma, se dice que es un

cromosoma metacntrico. Un cromosoma acrocntrico tiene el centrmero cerca de la punta y los
cromosomas submetacntricos los tiene en algn lugar entre el centro y la punta.

La punta de cada cromosoma es el telmero. El brazo corto del cromosoma se denomina P Y

largo Q.

TIPOS DE MTODOS DE INVESTIGACIN:

Las bandas de cromosomas ayudan a identificar cromosomas individuales y anomalias

estructurales en los cromosomas.
Las tcnicas de bandeo incluyen el bordeo por QUINACRINA DE GIEMSA, INVERSO C
Y NOR. El bandeo de alta resolucin, que utiliza cromosomas en profase o prometafase aumenta el
nmero de bandas observables.

La FISH tcnica en la cual uuna sonda marcada se hibrida en cromosomas en metafase,

profase o interfase. Puede emplearse para detectar material cromosmico ausente o sobrante, as
como reordenamientos cromosmicos. La tcnica FISH puedde extenderse con mltiples colores
para detectar posibles alteraciones del nmero de cromosomas al mismo tiempo. Es posible usar
mltiples sondas para pintar cada cromosoma con un color nico lo que facilita la deteccin de los
reordenamientos estructurales.

Las prdidas o duplicaciones de regiones cromosmicas especficas pueden detertarse

mediante una tcnica conocicda como hibridacin genmica comparada o GSH.
El ADN que se va analizar se marca con una sustancia que muestra un color en el
microscopio de fluoresscencia; el ADN de las clulas de control normales se marca con un segundo
color.
Siuna regin del ADN est duplicada se marcar con color verde y si est deleccionada, se
marcar con color rojo.

Las clulas que no contienen un nmero mltiplo de 23 se denomina aneuploidia y presenta

ganancia o prdida de cromosomas.
La cromosomia se trata de una sola copia de un cromosoma en una clula por lo dems
DIPLOIDE y de TRISOMIA tres copias de un cromosoma. Las monosomias autosmicas son
siempre incompatibles con la supervivencia hasta el nacimiento.

La causa ms frecuente de aneuplodia es la ausencia de DISYUNCIN; es decir, la

incapacidad de los cromosomas para separarse normalmente durante la meiosis.

TRANSLOCACIN: Es un intercambio de material gentico entre cromosomas no

homlogos.
Existen dos tipos de translocacin:

RECPROCA: Estas translocaciones tienen lugar cuando ocurren en dos cromosomas

diferentes y se produce un intercambio mutuo del material.

ROBERTSONIANA: Se pierden los dos brazos cortos de dos cromosomas no homlogos y

los brazos largos se unen por el centmero, formando un cromosoma nico. Este tipo de
translocaciones se limita a los cromosomas 13,14,15,21 y 22.
Dado que los portadores de translocacin robertsoniana pierden material gentico que no es
esencial, son fenotpicamente normales.

DELECCIONES: Una deleccin est causada por una rotura cromosmica y la posterior
prdida del material gentico. Una nica rotura causane de una prdida que incluye la nta del
cromosoma se denomina deleccin terminal. Una deleccin intersticial se da cuando tiene lugar
dos roturas y se pierde el material situado entre ellas.

El sndrome de Down es una enfermedad de novo.

El 95% es producida por la no disyuncin. El 90% ha demostrado que es la madre que
aporta el cromosoma extra.
Hay rasgos caractersticos propios que determinan este sndrome. Aunque tambin puede ser
sndrome de Down con mosaicismo es decir que no todos las clulas del cuerpo tienen un
cromosoma de ms; esto siempre va a conllevar al defecto de ciertos rganos y va a dificultar el
diagnstico de dicha enfermedad.
Bandeo cromosomico: Es de gran utilidad en la deteccin de delecciones, duplicaciopnes y otras
anomalias estructurales, y facilita la identificacin correcta de los cromosomas individuaels
El bandeo C colorea la heterocromatina constitutiva, que normalmente se encuentra cerca del
centrmero y la tincin NOR pone de rlieve los satlites y los troncos de los cromosomas
acrocntricos.

HIBRIDACIN FLUORECENTE IN SITU

Un segmento de ADN monocateriano marcado se expone a cromosomas desnaturalizados en

metafase, profase o interfase de un paciente. La sonda experimenta emparejamiento de bases
complementarias (hibridacin) solo con la secuencia complementaria de ADN en una ubicacin
especfica en uno de los cromosomas desnaturalizados. UN uso comunde la FISH es determinar
si una parte de un cromosoma est delecionada en un paciente.
La fish tambin puede detectar copias adicionales de una regin cromosmica.
Dado que la deteccin mediante FISH de cromosomas ausentes o sobrantes puede llevarse a
cabo con cromosomas en interfase, no es necesario estimular las clulas para que se dividan para
obtener cromosomas en metafase.

HIBRIDACIPN GENMICA COMPARADA CGH

Se extrae ADN de una fuente de prueba, como clula de un tumor o clulas de la sangre de un
paciente. A continuacin, el ADN se marca con una sustancia que adopta un color (p.ej. ROJO) al
microscopio de fluorescencia. EL ADN procedente de las clulas de control normales se marca con
un segundo color (por ej. VERDE). En la primera versin de la CGH, ambos conjutnso de ADN se
hibridan en cromosomas normales en metafase en un porta. SI cualquier regin cromosmica est
duplicada en la clula tumoral, la regin cromosmica est duplicada en la clula tumoral, la regin
correspondiuente del cromosoma en metafase se hibridar con la cantidad sobrante de ADN
marcado en rojo. Esta regin aparecer de color rojo al microscopio. EN cambio, si esta regin est
suprimida en la clula tumoral, la regin correspondiente del cromosoma en metafase se hibridar
slo con el ADN de control marcado en verde y la regin aparecer de color verde al microscopio.
La CGH es especialmente til para detercar delecciones y duplicaciones en el material
cromosmico de las clulas cancerosas. Pero no detecta reordenamientos equilibrados, es
decir, translocaciones recprocas o inversiones.

TP 8:

EL sndrome de Down es producto a una no disyuncin. Por lo general se debe a la madre en el

90% de los casos.
Tambin puede ser, en el menor de los casos, una translocacin robertsoniana.

Se podra completar el anlisis haciendo un bandeo FLUORECENTE DE FISH. Aunque hay rasgos
que comprometen al paciente y detectan desde ya su anomalia.
De manera menos precisa, el paciente puede tener sndrome de Down con mosaicismo ya
que esta determina que unas clulas padezcan de este sndrome y otras no. Por tanto slo algunos
rganos se vern afectados.

TP 9:

Toda la variacin gentica tiene su origen en el proceso denominado MUTACIN.

Las secuencias ivergentes se denominan ALELOS. La ubicacin de un gen en un
cromosoma se llama LOCUS.
El trmino recesivo viene de la raz latina que quiere decir OCULTAR. Es una buena descripcin
del comportamiento de los alelos recesivos; en los heterocitogas, las consecuencias de un alelo
recesivco estn ocultos.

UN alelo dominante ejerce su efecto tanto en el homocigota como en el heterocigota,

mientras que la presencia del alelo recesivo slo se detecto cuando aprace en forma homocigota.

CONCEPTOS CLAVES: Del trabajo de Mendel surguieron dos principios importantes. EL

primero es el pprincipio de la SEGREGACIN: Que declara que uno de los dos alelos de un mismo
cromosoma homlogo va a permanecer en la siguiente generacin (progenie).

Segregacin independiente: Los genes de diferentes locus se transmiten de manera

independiente.

Herencia autosmica dominante: Se caracteriza por la transmisin verticfal del fenotipo

de la enfermedad. La ausencia de salto de generacin y una cifra aproximadamente equivalente de
hombres y mujeres afectados por igual.

Patron autosmico dominante.

Hay varios individupos afectados en la familia y en varias generaciones. UN
individuo afectado tiene un progenitor afectado. VERTICALIDAD en la lnea de afectados.
Hay similar proporcin de varones y mujeres afectados y se puede ver la transmisin directa
varn varn.
La penetrancia se expresa como el porcentaje de individuos con un genotipo dado Exiben el
fenotipo asociado correspondiente. Esta penetrancia puede ser incompleta cuando hay individuos
que portando un genotipo patolgico no expresan en fenotipo pero sin embargo son capaces de
transmitir a su descendencia. En una genealoga aparecen como SALTOS GENERACIONALES.

Patrn autosmico recesivo:

Los individuos afectados aparecen en la hermandad del individuo y, por lo general,
no hay otros antecedentes familiares. Hay horizontalidad en la lnea de los afectados.
Ambos sexos pueden estar igualmente afectados.
El riesgo de ocurrencia en cada embarazo es del 25%.
La consanguinida predispone a su aparicin, especialmente cuando la enfermedad es rar en
la poblacin.

El fenotipo se manifiesta en el homocigota

Patrn ligado al x recesivo.

Hay exclusivamente varones afectados en la familia y estos se encuentran unidos por
mujeres portadoras.
Las hijas de un varon afectado sern portadoras.
Los hijos varones de las mujeres tendrn 50% de ser afectados.

TP10:

La herencia multifactorial tambin permite explicar aquellos rasgos que no son netamente
cuantitativos como son las malformaciones congnitas para cuya aparicin se requiere atravesar un
umbral de predisposicin gentica que puede favorecer o limitarse por factores ambientales.
La tasa de concordancia entre gemelos mono y dicigticos no sigue las proporciones
mendelianas.
EL rasgo aparece con mayor frecuencia en un grupo tnico determinado.
La mayor parte de los nios afectados tienen padres normales por lo que suele aparecer
como rasgo aislado. Puede aparecer con agregacion familiar pero no parece seguir patrin
mendeliano.
El riesgo de recurrencia se incrementa cuando es mayor el nmero de individuos afectados
en la familia.
La consanguinidad incrementa el nmero de individuos afectados.
El riesgo de infeccin se un individuo es tanto mayor cuanto ms prximo est en la
genealiga de un afectados.
Hay diferente probabilidad de compromiso entre ambos sexos.
Los descendientes de individuos afectados del sexo que se afecta con menor frecuencia
tienen mayor riesgo de estar afectados.

El riesgo de recurrencia es ms elevado si est afectado ms de un miembro de la familia.

Si la expresin de la enfermedad es ms grave en el probandom el riesgo de recurrencia es mayor.
El riesgo de recidiva es ms elevado si el probando pertenece al sexo afectado con menor
frecuencia. Esto se debe a que normalmente un individuo afectado del sexo menos susceptible se
encuentra en una posicion ms extrema en la distribucin de la susceptibilidad.

DISOMIA UNIPARENTAL:
La mayora de los casos restantes se deben a disomia uniparental, un trastorno en el cual un
progenitor ha aportado dos copias de un cromosoma y el otro ninguna. Si el progenitos ha aportado dos
copias de un homlogo, el trastorno se denomina isodisomia. SI el progenitor ha aportado una copia de cada
homlogo, se denomina heterodisoma.

TP N11:

1) Polimorfismos: Las variantes de la secuencia de ADN que son ms frecuentes en las

poblaciones (esto es, en las que dos alelos o ms de un locus presentan frecuentes superiores
al 1%) se denominan polimrficas. (muchas formas). Estos LOCI (plural de locus). Se
denominan polimorfismoss, aunque hoy en da los alelos con una frecuencia inferior al 1!
tambin suelen denominarse polimorfismos. Se sabe que muchos polimorfismos influen en
el riesgo de padeer enfermedades complejas y frecuentes como la diabetess y la cardiopata.
En cambio las mutaciones son a nivel de bases haciendo que haya una modificacin en
la sntesis y formacin del ARN.

2- TCNICA DE SOUTHERN Y ANLISIS DE FRAGMENTOS DE RESTRICCIN.

Uno de los mtodos iniciales para la deteccin de la cvariacin entica en el nivel del ADN
aprovechaba la existencia de las enzimas bacterianas denominadas endonucleasas de restriccin o
enzimas de restriccin. Estas enzimas parten el ADN humano en secuencias especficas llamadas
sitios de restriccin.

La tcnica en s es fragmentar el adn y unirlo con otro adn monocatenrio. La tcnica de

Southern fueu instrumental en el anlisis de los polimorfismos de la longitud de fragmentos de
restriccin (RFLP) PUEDE DETECTAR INSERCIONES O DELECCIONES EN LAS
SECUENCIAS DE ADN.
 Los polimorfismos de minisatlites se denominan nmero variable de repeticiones en
tnden (VNTR), y los polimorfismos de microsatlites se denominan polimorfismos por
repeticiones cortas en tndem (STRP)

3) Un clon es una copia idntifca de una secuencia de ADN.

Nuestro objetivo es insertar una secuencia de ADN humano en un organismo de
reproduccin rpida para poder crear copias (clones) del ADN con rapidez. Un sistema rpido para
este propsito es el plsmido, un pequeo fragmento circular y autorreplicatio de ADN que reside
en muchas bacterias. Es posible insertar el ADN humano en el plsmido, gracias a las enzimas de
restriccin que cortan el ADN en fragmentos para poder dominarlo.
Los plsmidos resultantes contienen insertos de ADN humamno. Los plsmidos vuelven a
inserirse en bacterias, donde se reproducen con rapidez a travs de lad ivisin celular natural. As,
se clona la secuencia de ADN humano, que se reproduce junto con el otro ADN del plsmido.
Al plsmido se lo denomina vector. Pueden emplearse otros tipos de vectores com
ovehculos de clonacin, incluyendo bacterifagos (virus que infectan bacterias), csmidos
(hbridos de fago y plsmidos capaces de contener insertos de ADN relativamente grandes),
cromosomas artificiales de levadura

5) La reaccin en cadena de ka oikunerasa (PCR), que ha hecho la deteccin de la variacin

gentica en el nivel del ADN mucho ms eficiente. Esencialmente, la PCR, es un medio
artificial de replicar una secuencia de ADN.
El procedo de PCR requiere cuatro componentes:
Dos cebadores, un gran nucletidos de ADN libres y ADN genmicode un individuo.

El ADN genmico se calienta para desnaturalizarlo. Entonces el ADN monocateriano se

enfra hasta una temperatura de entre 35 y 65. mientras se expone a grandes cantidades de
cebadores monocaterianos, que se hibridan en una ubicacin especica del ADN genmico que
contiene las bases complementerarias adecuadas. A continuacin, el ADN se caliuenta hasta una
temperatura intermedia. En presencia de un gran nmero de nucletidos libres de ADN, a esta
temperatura, la ADN polimerasa sinteriza una nueva hebra de adn, extendindose a partir de la
secuencia cebadora. El ADN sintetizado consiste en una doble hebra que tiene el extremo 5 del
cebador en un extremo, seguido de las bases aadidas mediante la extensin del cebador en un
extremo, seguido de bases aadidas mediante la extensin del cebador por la ADN polimerasa. Este
ADN bicaternario se calienta de nuevo hasta temperaturas elevadas y se desnaturaliza. Se repite el
ciclo de calentamiento y enfriamiento. Ahora, el ADN sintetizado sirve de plantilla para futuras
sntesis. A medida que se repiten los ciclos de enfriamiento y calentamiento, los productos del ADN
ligado al cebador se amplifican de manera geomtrica el nmero de copias se duplica en cada ciclo.

En resumen, el proceso de la PCR consiste en tres pasos bsicos: DESNATURALIZACIN

DEL ADN A LA ALTA TEMPERATURA, HIBRIDACIN DEL CEBADOR A BAJA
TEMPERATURA Y EXTENSIN A PARTIR DEL CEBADOR A TEMPERATURA MEDIA.

Al no requerrir clonacin, el procedimiento es mucho ms rpido que los mtodos ms antiguos.

La PCR presenta algunso inconvenientes. Para empezar, su sntesis requiere conocer la

secuencia de ADN adyacente al ADN en cuestin.

MICRORRAYS: ADN monocateriano marcado con fluorescencia de un sujeto se

hibrida con los oligonucletidos del porta para determinar si el ADN se hibrida con los
oligonucletidos normales o mutados, y el patrn de las seales de hibridacin se analiza mediante
ordenador. Las micromatrices se emplean tambipn para examinar las variantes del nmero de
copias, los patrones de metilacin en el genoma de una persona y la variacin gentica en diversos
microorganismos patgenos. Una diferencia clave entre las micromatrices y los mtodos anteriores
es que normalmente las primeras analizan mutaciones conocidas incorporadas en sondas de
oligonucletidos. Las micromatrices conencionales no pueden detectar una mutacin rara no
identificada previamente.

6) FARMACOGENMICA: Es la evaluacin de numerosos genes que actan de manera

simultnea y afectan o se ven involucrados en la forma por la cual responde el cuerpo a un
compuesto sintetizado exgenamente es decir a un FRMACO.

Una genoteca genmica contiene el genoma humano: intrones, exones, potenciadores

activadores y las grandes extensiones de ADN no codificante que separan los genes.

PROTEMICA: Es el estudio a gran escala de las protenas en particular de su estructura y

funcin. Las protenas son partes vitales de los organismos vivos, ya que son los componentes
principales de las rutas metablicas de las clulas.

TRANSCRIPTMICA: Es el estudio del conjunto de ARN (ARNr, ARNt, ARNm,

ARNI, miARN) que existe en una clula o tejido.

METABOLMICA: Es el conjunto de ciencias y tcnicas dedicadas al estudio copleto del

sistema constitudo por el conjutno de molculas que constituyen los intermediarios metablicos,
metabolitos, hormonas y otras molculas seal, y los metabolitos secundarios que se pueden
encontrar en una clula.

Un organismos genticamente modificado tambin llamado transgnico, es un organismo

cuyo materail gentico ha sido alterado usando tcnicas de ingeniera gentica.

FIBROSIS QUSTICA:

El CFTR codifica los caales inicos cloruros regulados por AMP que cubren las membranas de las clulas
epiteliales especalizadas como las que revisten el intestino y el pulmn. Adems, el CFTR interviene en la
regulacin del transporte de los iones de sodio por las membranas celulares epiteliales. El papel del CFTR,
en el transporte del sodio y el cloriro nos auida a comprender los mltiples efectos de las mutaciones en el
locus de la fibrosis qustica