Prctica N 10
2. Objetivos:
a. General
Determinar la concentracin de fosfatos por espectrofotometra para el anlisis del
agua.
b. Especficos
Establecer la concentracin de fosfatos obtenidos en la prctica.
Indicar la importancia de la determinacin de fosfatos en los recursos hdricos.
Identificar el tipo de anlisis efectuado en la determinacin de fosfatos.
3. Marco Terico
Heteropolicidos
Los cidos dbiles conformados por metales anfteros (grupo V y VI) poseen la
propiedad de condensarse para formar aniones, que tienen algunas molculas de
anhdrido del cido. Este tipo de cidos son capaces de condensarse con otros cidos,
como, el cido fosfrico (3 4 ) y el cido arsnico (3 4 ) , para la formacin de
heteropolicidos. Los heteropolicidos se conforman por un conjunto de molculas del
anhdrido del cido (3 , 3 2 5 ), con un segundo cido que determina el tomo
central del conjunto del anin complejo.
Los heteropolicidos tienen la propiedad de absorber fuertemente en el
espectrofotmetro, por ejemplo, cuando est presente el ion Mo (VI) se reduce
rpidamente formando un compuesto de color azul. Para reducir solo este ion combinado
con el heteropolicido se controla la acidez, y el agente reductor utilizado es el cloruro
de estao (2 ) [1].
Fosfatos
El fosfato es un parmetro utilizado para el anlisis de agua, siendo un nutriente esencial
y podra ser considerado como contaminante si su concentracin es elevada. El anlisis
de fosfatos en agua es importante debido a que su alta concentracin en los recursos
hdricos est relacionado a escurrimientos agrcolas. La determinacin de fosfatos se
puede realizar por tres mtodos de acuerdo a su concentracin.
Mtodo del cido vanadomolibdofosfrico: Se los usa en un rango de 1 a 20 ppm
P.
Mtodos del cloruro estaoso y el cido ascrbico: Recomendados para un rango
de 0,01-6 ppm P.
Espectrofotometra
Para este mtodo se utiliza la espectrofotometra que permite determinar los fosfatos en
las disoluciones. El principio fsico qumico de la espectrofotometra es la propiedad que
poseen las molculas para absorber energa y almacenarla.
La energa que absorben las molculas en funcin de una longitud de onda es como la
huella digital que poseen las molculas, es decir, dos molculas distintas muestran
diferentes espectros de absorcin.
Donde:
4. Materiales y Reactivos
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a) Equipos
Balanza analtica
Modelo: aeAdam
Marca: PW 124
Plancha de calentamiento
Modelo: Thermolyne
Marca: Cimarec 2
Espectrofotmetro
Modelo: 1200 RS UV-Visible
Marca: ATL Unicam
Rango de operacin: 325 a 1000 nm
b) Materiales
Vasos de precipitacin
Marca: Glassco
Resistencia: Boro 3.3
Volumen: 50 ml
Pipeta
Marca: Marienfeld
Material: Vidrio Borosilicato 3.3
Volumen: 10 ml
Tubos de ensayo
Marca: Senna
Material: Vidrio Borosilicato 3.3
Volumen: 30 ml
Matraz aforado
Marca: Pyrex
Material: Vidrio Borosilicato 3.3
Volumen: 250 ml
Agitador
Pera
Embudo
Vidrio de reloj
Esptula
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c) Reactivos
cido clorhdrico
Frmula:
Concentracin: 6 M
Peso molecular: 36.458 g/mol
Agua destilada
Frmula: 2
Peso molecular: 18.006 g/mol
Glicerina
Frmula:2 2
Peso molecular: 92.094 g/mol
cido sulfrico
Frmula: 2 4
Concentracin: concentrado
Peso molecular: 98.072 g/mol
Fenolftalena
Frmula: 20 14 4
Rango de viraje (pH): 8.3 a 10
Peso molecular: 318.22 g/mol
5. Procedimiento
Preparacin de reactivos
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c) Solucin estndar de fosfatos: se debe realizar la preparacin de 100ml de
disolucin que sea de 50ppm de fosforo en fosfatos, mediante el fosfato de
potasio monobsico (KH2PO4).
d) Solucin de 10 ppm de fosfatos: con lo obtenido anteriormente en el literal c se
de realizar la preparacin de 100ml de esta solucin de fosforo a 10 ppm.
e) Soluciones para curva de calibracin: con lo obtenido en el literal anterior, se
debe preparar 100 ml para cada dilucin para poder realizar la curva de
calibracin correspondiente al analito (P-PO4-) con cada una de las distintas
concentraciones: 0.1, 0.3, 0.5, 0.8, 1.0 ppm.
f) Muestra problema: se trata de forma preliminar la muestra problema que
tenemos usando cido clorhdrico o digestin, con la ayuda del indicador de
fenolftalena, en caso de que la muestra presente alcalinidad.
Procedimiento para los estndares de calibracin y tambin de la muestra problema.
1. Tomar 25ml de cada solucin estndar, y ponerlas en tubos de ensayo que estn
etiquetados para poderlos diferenciar.
2. A cada tubo se le debe aadir 1ml de molibdato de amonio.
3. Agregar 3 gotas de la mezcla de cloruro estaoso anteriormente preparada a cada
uno de los tubos y luego agitar hasta que se homogenice por completo.
4. Esperar durante 12 minutos en la oscuridad, que las soluciones reaccionen,
tendrn un color azul.
5. Usamos el espectrofotmetro a 690 nm para realizar la lectura d absorbancia de
cada uno de los estndares y tambin de la muestra problema.
6. Usando el mtodo de regresin lineal, procedemos a hacer la curva de
calibracin.
7. Hallar la concentracin que tiene nuestra muestra problema en trminos de ppm
de P-PO4- , usando los datos que obtuvimos en la realizacin de la curva de
calibracin.
6. Reacciones involucradas
+
3 4 () + 12 (4 )2 4 () + 12()
(4 )3 4() 123 () + 214+() + 122 ()
7. Resultados
Muestra Absorbancia
Desconocida 0.808
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Grafico #1. Recta de calibracin
Curva de Calibracion
1
ABSORBANCIA
Clculos:
= 0.7723 + 0.0182
0.808 0.0182
= = 1.023
0.7723
Sin embargo, la muestra se encontraba diluida a la mitad, por lo que la verdadera
concentracin de la misma era igual a:
() = 1.023 2 = 2.046
Concentracin
Muestras
[ppm]
Desconocida 2.046
8. Observaciones
El molibdato de amonio va a reaccionar con los iones fosfatos en un medio cido con un
agente reductor, en este caso se us el cloruro de estao (II). Se produjo una reduccin
de los iones de molibdeno (VI) a (V) que formaron un heteropolicido o tambin llamado
complejo azul de molibdeno. El color azul de la solucin es proporcional a la
concentracin de iones fosfatos que fueron aadidos al heteropolicido.
Los iones fosfatos tienen su propio espectro de absorcin que se determina mediante el
uso de un espectrofotmetro que mide la absorbancia de cada una de las soluciones
preparadas para poder calcular la concentracin de la muestra inicial.
9. Anlisis de Resultados
Como se puede apreciar por la recta de calibracin los datos pasan por debajo y
por arriba de la misma, alejados mnimamente de la recta calculada, no debera
ser mayor problema esta situacin ya que experimentalmente nunca se
encontraran los datos precisos formando una recta o curva, ms bien se encuentra
esta distribucin uniforme por arriba y debajo de la recta. Vale recalcar que la
confeccin de la curva se basa en la ley de Beer. Cuando el molibdato se une con
el fosfato, la solucin se torna azul indicando la presencia de aniones PO4 (3-). La
ley de Beer nos indica que A=ebC, una ecuacin lineal, donde y es igual a la
absorcin y x es igual a la concentracin. Como se dijo anteriormente mediante
soluciones con el ion indicado y de concentraciones conocidas (0.1,0.3,0.5,0.8,1)
en partes por milln se calibro la recta utilizando agua destilada como blanco. Al
saber la pendiente esta nos dice el valor de dos constantes tanto el valor de
absorcin molar asi como la longitud de la celda, es conocido que la longitud de
la celda es de un centmetro; por lo tanto, la constante de asertividad molar para
nuestra recta fue de 0.7723 [ppm/cm]. Adems, el valor de R^2, que se refiere a
cuan cerca estn los valores de la regresin lineal realizada, mientras ms cerca se
encuentre de 1, mejor la regresin podemos ver que hay cierta desviacin, lo cual
nos da dos ideas; primero, la concentracin de las soluciones estn o bien por
debajo o por encima del valor que se requera prepara; segundo, el tiempo de
espera no fue el ptimo la obtencin del valor azul que se refera a la formacin
de todos los fosfatos con molibdeno. Sin embargo, vale recalcar que la diferencia
se encuentra en las milsimas, y nos aseguran que el mtodo y recta calculada para
fines prcticos es correcta. Esto quiere decir que el valor de concentracin de la
muestra de 2.046 ppm esta desviado mnimamente en las milsimas.
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Un error que se pudo haber evitado es crear una solucin de blanco con todos los
iones y sustancias menos el fosfato en este blanco de modo que la lectura seria
solo de los fosfatos; incluso una solucin de cloruro de estao ayudara a evitar la
interferencia dada por los iones cloruros.
10. Conclusiones
Se determin la concentracin de fosfatos que haba en la muestra problema, mediante el
proceso de espectrofotometra y con la ayuda de la curva de calibracin, en ppm de P-
PO4-.
Se lo realiz por medio de un mtodo colorimtrico en la cual usamos reactivos como el
molibdato de amonio y tambin con el cloruro estaoso.
Se aprendi acerca de la importancia que tiene la determinacin de los fosfatos en
recursos biolgicos, as como por ejemplo las aguas de consumo humano, ya que un alto
contenido de esto puede hacer que se modifiquen ciertas caractersticas y tambin se
dificulten la coagulacin en las plantas de tratamiento.
11. Recomendaciones
Cuando se vaya a colocar cada uno de las muestras estndares en el espectrofotmetro
realizarlo lo ms rpido posible para que quede dentro del rango de tiempo que se ha
calculado, y as evitamos cualquier tipo de interferencia.
Fijarnos de que el espectrofotmetro este calibrado correctamente en 690 nm para poder
realizar correctamente nuestra prctica.
Se debe coger los tubos de ensayos con la ayuda de guantes y tomarlos desde la parte
superior para evitar que queden huellas en los tubos, ya que lo que vamos a medir es la
cantidad de luz que absorbe, y si tienen mancha o huella eso se ver afectado.
12. Bibliografa
[1] F. Pino Perez, D. Perez Bendito. (1983). Anlisis de elementos- traza por
espectrofotometra de absorcin molecular UV-visible. Sevilla: Universidad de Sevilla.
Pg. 375
[2] Francy Julieth Osorio Velez, Daniela Sandino Vargas. (2012). VALIDACION DE
UNA METODOLOGIA ANALITICA PARA LA DETERMINACION DE FENOLES Y
FOSFATOS EN AGUA CRUDA, TRATADA Y RESIDUAL POR EL METODO DE
ESPECTROFOTOMETRIA DE ABSORCION PARA EL LABORATORIO DE AGUAS Y
ALIMENTOS DE LA UNIVERSIDAD TECNOLOGICA DE PEREIRA. Pereira:
Universidad de Pereira. Pg. 13
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