PRCTICA DE LABORATORIO No.

El Microscopio

Introduccin:

El microscopio es un instrumento ptico que permite observar imgenes ampliadas de

objetos que no pueden ser vistos a simple vista.

Las clulas por su tamao microscpico no pudieron ser observadas hasta que se
perfeccion el microscopio. El invento del microscopio compuesto se atribuye a los
fabricantes holandeses de lentes, padre e hijo, Hans y Zacharas Janssen, quienes lo
construyeron en 1590 con base en una adaptacin del telescopio de Galileo, este
microscopio permita la ampliacin de la imagen del objeto entre 3 y 9 veces.

El microscopio permiti el acceso a un mundo hasta entonces desconocido: el universo

microscpico.

En 1665, Robert Hooke, botnico ingls, usando un microscopio primitivo, observ un

delgado corte de corcho (corteza del rbol alcornoque) y us el trmino clula para
para denominar las cavidades vacas similares a las de un panal de abejas. Hooke en
realidad no vio clulas vivas, observ clulas vegetales muertas con forma poligonal.
Anthony Van Leeuwenhoek, (1674) Comerciante de telas, holands, careci casi por
completo de formacin cientfica, pero estaba dotado de una gran curiosidad,
paciencia y habilidad, perfeccion el microscopio, logro aumentar el tamao de la
imagen hasta 250 veces. Fue el primero en observar clulas vivas aisladas, eritrocitos,
espermatozoides y protistos en agua estancada, fue llamado el primer cazador de
microbios

A partir de estos pioneros, se ha logrado desarrollar microscopios que han hecho

comprensible el mundo microscpico que nos rodea.

Objetivo: Aprender el uso, manejo y cuidados del microscopio.

Materiales: Microscopios, letras e , portaobjetos, cubreobjetos, goteros, cabellos,

papel milimetrado, tijeras, cebolla.

Microscopios Simples y Microscopios Compuestos

De acuerdo con el nmero de lentes presentes los microscopios se clasifican en simples

y compuestos. Los microscopios simples constan de un solo tipo de lente y
proporcionan pocos aumentos, un ejemplo de ellos es la lupa. Los microscopios
compuestos son los ms utilizados y constan de un sistema de varios lentes con los que
se consiguen mayores aumentos.

El microscopio ptico tradicional es un microscopio compuesto que consta de 3

sistemas fundamentales: 1. Sistema ptico. 2. sistema de iluminacin y 3. Sistema
mecnico.

1. Sistema ptico: tiene como funcin reproducir y aumentar las imgenes

mediante el conjunto de lentes que lo componen. Los lentes son el ocular y los
objetivos.

El ocular es un lente de aumento, llamado as por la cercana con nuestro ojo al mirar
por l, ubicado sobre el tubo porta- ocular, existen oculares de diversos aumentos
desde 5 aumentos (5X) hasta 20 aumentos (20X), el ms usado proporciona 10
aumentos, (10X), son intercambiables. Existen microscopios monoculares y
binoculares.

Los Objetivos son igualmente lentes que proporcionan diferentes aumentos desde 4x
hasta 100X, son llamados as porque se disponen cerca del objeto observado. Hay dos
tipos de objetivos secos o de aire (4X, 10X, 20X, 40X) llamados as porque entre el
objeto a observar y ellos existe una separacin dada por el aire y los hmedos o de
inmersin (100X), al usarlos tienen que estar inmersos en aceite de cedro, llamado
tambin aceite de inmersin. Los diferentes objetivos que posee un microscopio estn
insertados en una pieza rotatoria llamada revlver que es un componente del sistema
mecnico.
Sistema de iluminacin: Constituido por la fuente de iluminacin, el espejo, el
diafragma y el condensador.

La fuente de iluminacin: generalmente es una lmpara halgena cuya luz ayuda a

iluminar la preparacin. Los microscopios recientes usan lmparas led.

El espejo: Est presente en aquellos equipos que no tienen fuente de iluminacin

incorporada. El espejo tiene dos caras: una cara plana y otra cncava, la cara plana se
emplea cuando se trabaja con luz natural mientras que la cncava cuando se usa con
luz artificial ya que concentra los rayos de luz.

El condensador: sistema de lentes convergentes que capta los rayos de luz y los
concentra sobre la preparacin, de permitiendo ajustar el contraste. Se regula en
altura mediante un tornillo (ver figura).

El diafragma: Tiene como funcin regular la cantidad de luz que llega a la preparacin.
Acta como el iris en nuestro ojo. Ubicado por debajo de la platina y por encima del
condensador.

2. Sistema mecnico: conformado por la platina, el brazo, el tubo, el revlver,

tornillo macromtrico y tornillo micromtrico

Pie o Soporte: Es la base del microscopio y en l se encuentra la fuente de

iluminacin.

Platina: superficie sobre la que se coloca la preparacin. Tiene un orificio central que
permite el paso de luz procedente de la fuente luminosa. Sobre la platina suele haber
un dispositivo llamado carro que permite sujetar el portaobjetos con la preparacin y
mediante dos tornillos situados en la parte inferior de la misma se desplaza la
preparacin sobre la platina, en sentido longitudinal o transversal, cuenta adems con
un sistema de coordenadas que ayudan a conocer qu parte de la muestra se est
observando.

El tubo: cilindro hueco que constituye el soporte de oculares y del revolver que
contiene los objetivos.

El brazo o columna: Sostiene el tubo en su porcin superior y por el extremo inferior se

adapta al pie. Es la parte por la que se debe tomar el microscopio, sostenindolo por la
base para trasladarlo de lugar.

El Tornillo macromtrico: Se usa para el enfoque de la imagen, mueve la platina o el

tubo hacia arriba y hacia abajo. Permite desplazamientos amplios para un enfoque
inicial

El Tornillo micromtrico: provoca desplazamientos muy finos, imperceptibles, para un

enfoque ms preciso de la imagen observada.
Procedimiento:

Anlisis de la imagen dada por el microscopio

1. Tome una de las letras e que recort del papel impreso y, colquela en un porta-
objetos limpio y seco, agrguele dos gotas de agua, espere a que el papel se moje
totalmente. Tome un cubre-objetos en un ngulo de 45 respecto al portaobjetos,
djelo caer suavemente sobre la muestra de manera que el agua quede distribuida
uniformemente. Haga presin suavemente sobre el cubre-objetos para eliminar las
burbujas de aire que pudieran haber formado.

2. Coloque la lmina preparada sobre la platina de tal manera que la letra quede en
posicin correcta de lectura y sujtela con las pinzas de ajuste. Mueva el
portaobjetos de tal modo que la letra e quede en el centro del orificio de la
platina.
3. Gire el revlver y enfoque con el objetivo de menor aumento (4X). Con el tornillo
macromtrico mueva la platina hasta el tope superior. Encienda el microscopio y
regule entrada de luz haciendo uso del diafragma y del condensador.
4. Mirando por los oculares y usando el tornillo macromtrico baje lentamente la
platina hasta que la imagen aparezca difusa. Realice el enfoque correcto usando el
tornillo micromtrico. Utilice los tornillos del carro para centrar la letra e en el
campo de visin.
5. Realice un dibujo de la letra e como fue colocada en el portaobjetos y haga un
dibujo de la imagen que se observa a travs del microscopio.
6. Use el carro para mover hacia adelante el portaobjetos, Describa el sentido del
movimiento de la imagen que observa? Mueva el portaobjetos hacia la derecha. En
qu direccin se desplaza la imagen? Mueva ahora el portaobjetos hacia la
izquierda. Qu puede deducir usted acerca de la posicin relativa y del movimiento
de los objetos cuando stos se ven a travs del microscopio compuesto?
7. Gire el revlver y enfoque con el objetivo de 10X, realice un enfoque ntido usando
el tornillo micromtrico si es necesario. Haga un dibujo de lo observado. Repita el
procedimiento con el objetivo de 40X.

El aumento dado por el microscopio

Para calcular cunto est aumentada est una imagen cuando observamos con un
microscopio dado, multiplicamos el valor del aumento dado por el ocular por el valor
de aumento proporcionado por el objetivo.

Ocular Objetivo Aumento

10X 4X 40X
10X 10X 100X
10X 40X 400X
10X 100X 1000X
As una clula que mida 40 m (40 micrmetros = 40 milsimas de milmetro),
observada con un ocular 10X y objetivo de 10X tendr un tamao aparente de: 40 m
x 100 = 4000 m = 4 mm
Profundidad de campo:

Realiza un montaje hmedo de dos hebras de cabello de diferente color, dispuestas

una sobre otra (en forma de cruz). Observa con el objetivo de menor aumento y dibuja.
Ubica el portaobjeto de manera que el cruzamiento de los cabellos quede en el centro
del campo.

Gira el revlver hasta que el objetivo de mayor aumento quede en posicin de

enfoque, si los cabellos no quedan ntidamente enfocados ajuste el enfoque con el
tornillo micromtrico.

Puedes ver ntidamente ambos cabellos en el mismo nivel de enfoque?

Los detalles observados ntidamente en un determinado campo se encuentran en el

mismo plano focal (nivel de enfoque). En la preparacin puede haber detalles que
queden sobre o debajo de ese plano focal y no se ven o simplemente se ven borrosos o
desenfocados. Es necesario mover el micromtrico para ajustar el enfoque a diferentes
planos y as obtener una observacin ms completa.

Medida del campo de visin del microscopio.

El campo de visin de un microscopio es la zona circular que se observa al mirar la

preparacin bajo un determinado aumento. El dimetro de este campo es su medida.

Cmo calcular el dimetro del campo de visin?

1. Recorte un cuadrado de 1 cm de lado de papel milimetrado y realice un montaje

hmedo. Enfoca con el objetivo de menor aumento 4X.
2. Mida el dimetro del campo visual haciendo coincidir una de las lneas del papel
milimetrado con el borde del campo de visin. Cuente el nmero de milmetros
que se ven y estime aproximadamente la fraccin sobrante, si la hay. El resultado
ser el dimetro del campo visual para ese aumento (objetivo x ocular).Calcule el
dimetro del campo de visin usando los objetivos 4X, 10X y 40X. Exprese los
resultados en milmetros (mm) y en micrmetros (m).

Ocular x Objetivo Campo de visin (mm) Campo de visin (m)

10X x 4X
10X x 10X
10 X x 40X

Una vez calculado el campo visual, es muy fcil calcular el tamao de un objeto. Para
ello basta con contar el nmero de clulas que caben en el campo visual y
posteriormente, dividir el dimetro entre el nmero de clulas. Halle de esta forma el
tamao de las clulas de la epidermis de cebolla (longitud y anchura) que se observan
en la figura siguiente, sabiendo que el campo visual mide 0,18 mm.
Observacin de clulas de Cebolla: obtenga un catafilo de cebolla (porcin interna
de la cebolla) a partir de este saque una pequea porcin de la misma. Una vez
obtenida, colquela sobre una lmina portaobjetos poniendo la parte ms
hmeda de la misma sobre la lmina, agregue en un extremo una gota de agua y
en el otro una gota del colorante Lugol. Cubra cada el montaje con una laminilla
portaobjeto y observe a 4X, 10X, 40X y agregando una gota de aceite de inmersin
sobre la laminilla, observe a 100X. Debe tener presente que debe cuadrar el
condensador para mejorar la iluminacin del montaje. Enfatice su observacin en
tres estructuras celulares: pared celular, citoplasma y ncleo.
 El Microscopio y sus componentes

Identifique cada uno de los componentes del microscopio en recuadro correspondiente. Explique
Brevemente las funciones de los componentes.