En el siglo XIX la nica manera de conseguir una orqudea, era extrayndola de su hbitat natural, y no era
posible hacer germinar sus semillas. Sin embargo observaron que cuando caan sobre las races de la planta
madre, s germinaban algunas (gracias al hongo mycorrhiza presente en las races).
En 1922, El profesor Lewis Knudson de la Cornell University descubri que, entre otras, las semillas de
orqudea podan germinar en un frasco conteniendo una gelatina a base de agar con nutrientes qumicos, lo
que posibilitaba la produccin de miles de plntulas a partir de una cpsula de semillas.
Knudson es el padre del cultivo in-vitro.
MULTIPLICACIN VEGETATIVA
Se pueden reproducir las orqudeas por va vegetativa, o sea, por particin, keikis, esquejes o meristema (que
es como se producen la mayora de las plantas que estn en el mercado).
En todos estos casos estamos obteniendo clones idnticos a la planta madre.
Existe otra manera, de la que vamos a tratar a continuacin : la va sexualo por semillas.
Las partes sexuales de la flor estn en la columna, los polinios (dos o ms bolsitas amarillas) protegidas por la
tapa de la antera, el estigma, (zona pegajosa) dnde se han de introducir los polinios, hasta llegar al ovario a
travs del canal del estigma.
La reproduccin por semillas da lugar a plantas hermanas, por lo tanto muy parecidas pero NO iguales.
POLINIZACIN MANUAL
Se retira la tapa de la antera con un palillo, se desprenden los polinios, y se introducen en el estigma al que se
adhieren.
En la polinizacin es conveniente seleccionar la flor ms fuerte y que se encuentre ms cerca del pseudobulbo
o tallo, y no fecundar muchas flores en una misma vara.
Las flores tienen que tener unos das de maduracin segn su especie, por ejemplo las Phalaenopsis tienen que
tener 10 das como mnimo para que maduren y as poder polinizarlas.
FORMACIN DE LA CPSULA
Al da siguiente, la columna se cierra sobre la superficie estigmtica y la flor empieza a marchitarse, y a los
pocos das el ovario de la flor empieza a hinchar, la flor ha sido fecundada con xito y las semillas se
empiezan a formar tardando entre 3 y 14 meses en llegar a maduracin, dependiendo de cada gnero de
orqudea. La planta puede abortar la cpsula en cualquier momento, y no siempre las semillas resultarn
frtiles.
MADURACIN DE LA CPSULA
GERMINACIN SIMBITICA
Las mycorrhizas son relaciones simbiticas que se establecen entre las races de las plantas y los hongos.
Las semillas de orqudea necesitan la asociacin simbitica con un hongo especfico (Rhizoctonia), ya que est
cubierta por una cpsula muy resistente la testa, el hongo destruye la testa sin alterar las clulas
interiores y permite la germinacin de la semilla.
Las semillas de las orqudeas son sumamente pequeas. Su contenido ha sido reducido a la ms mnima
expresin, pues no almacenan ningn elemento nutritivo.
Para suplir esta carencia de nutrientes se gener una dependencia con hongos que alimentan a los embriones
de las semillas en el momento de la germinacin.
GERMINACIN ASIMBITICA
Para facilitar la germinacin de las semillas y sustituir los efectos del hongo mycorrhiza, en primer lugar se
erosiona la testa durante la esterilizacin con hipoclorito de calcio (leja). Y ya que las semillas de orqudea
estn desprovistas de reservas nutritivas, hay que sembrarlas en un medio rico en sales minerales y azcares.
MEDIOS DE CULTIVO
Frmulas comerciales
M&S
Phytamax
Las semillas de orqudeas terrestres necesitan para germinar un medio diferente con menos sales minerales y
un pH ms alcalino
Agua destilada
Frascos de cristal (botes de conserva...)
Medio Phytamax-6668 de SYGMA
Agar-Agar (en tiendas naturistas)
Agua oxigenada
Semillas
Jeringuilla
Autoclave/Olla-express
Se calienta el agua destilada (250 ml.) con el agar (2 3 g) removiendo hasta que se disuelva casi
totalmente, entonces se echan 6,8 gramos de Phytamax P-6668.
Repartir entre los frascos. Verter unos 50 ml. de medio en cada uno (o sea, 1 o 2 cm. de fondo).
En las tapas se hace un agujerito en el centro para ventilacin, que se tapar con una tirita redonda por
fuera de la tapa.
Se cierran los frascos, y se envuelve la parte superior del frasco con papel de aluminio.
1.- Semillas inmaduras en cpsula verde.- slo se esteriliza la cpsula por fuera, luego en la zona asptica,
se corta la cpsula con un bistur tambin estril y se siembran las semillas tal cual.
En un vaso preparar 10 ml. de agua destilada con leja al 5% y una gotita de mistol (mojante).
En una pequea probeta, verter unos 3ml., y aadir una pequesima cantidad de semillas.
Tras agitar de vez en cuando, dejar reposar unos 5 minutos, y las semillas frtiles irn cayendo
al fondo.
Enjuagar las semillas.- Con una jeringuilla estril, se succiona toda el agua que se pueda sin
absorber las semillas del fondo. Se vierte de nuevo un par de ml. de agua destilada y estril, se
agita un poquitn y se repite el proceso de retirar el agua con la jeringuilla 2 o 3 veces.
En la ltima, se deja un poco de agua (menos de 1 ml.) con las semillas, pues esto es lo que se
verter en los frascos de cultivo.
ZONA DE TRABAJO
La siembra en laboratorio se realiza en una cabina laminar de flujo, pero en casa se puede
trabajar sobre vapor, ya que el vapor crea una zona estril.
Preparar un spray con agua normal y 20% de leja, y vaporizar los frascos por FUERA.
Poner a hervir agua en una olla ancha llena con un tercio de agua, y sobre la rejilla colocada encima,
se realiza la siembra sin riesgo de contaminacin fngica, pues las esporas dispersas en el aire no
traspasan el vapor.
SIEMBRA
Colocamos tanto el frasco con el medio, como la probeta con las semillas esterilizadas.
Procedemos al vertido de las semillas en el frasco, evitando movimientos bruscos que muevan el aire y
con la mayor rapidez para evitar riesgos de contaminacin que puede ser por hongos o bacterias.
Tanto la apertura y cierre del frasco, como el vertido, se realiza sobre la rejilla, entre el chorro de
vapor y con rapidez.
En zona iluminada, con refuerzo de luz fluorescente, para alcanzar 12 horas diarias.
Con temperatura lo ms constante posible (alrededor de 22 C).
GERMINACIN
Empiezan hinchndose las diminutas semillas, para convertirse en protocormos (semejantes a bolas de caviar
de color verde).
Si germinan demasiadas semillas para un frasco, ser necesario repartir los protocormos en varios frascos
(esto se llama repicado).
El repicado se suele realizar dentro de una cmara laminar de flujo para asegurar las condiciones de
esterilidad y asepsia.
ACLIMATACIN
Se pueden plantar en diversos medios (de grado fino y alta retencin de humedad):
Musgo
Arena de ro
Perlita
Sramis
A partir del momento en que empiezan a desarrollar nuevas races tienen posibilidades de sobrevivir.
Aqu no se acaba la historia. Empieza el cultivo ex-vitro. A partir de ahora pueden tardar entre 1 y 5 aos en
florecer segn la especie.
Susi Cabrera