TOKSIKOLOGI

METODE ANALISIS ANTEMORTEM

Abstrak

Melakukan pengujian analitis untuk obat-obatan dan racun dalam spesimen yang diperoleh dari
subjek hidup atau orang-orang yang dirawat di rumah sakit memberikan informasi berharga
kepada penyelidikan forensik. Subtansi/zat eksogen dapat mempengaruhi berbagai perilaku, hasil
kesehatan yang buruk atau bahkan dapat menyebabkan toksisitas. Berbagai spesimen dapat
diambil, terutama darah, rambut dan urin. Teknik yang digunakan meliputi immunoassay
screening untuk kelas obat-obatan dan berbagai teknik kromatografi. Spektrometri massa
memberikan identifikasi dan konfirmasi akhir dari setiap tes pendahuluan.

Glosarium / daftar kata kata sukar
Toksikologi analitik : Penggunaan teknik analisis
untuk mengetahui adanya zat asing.
Biokonversi : Penggunaan proses biologis untuk
mengubah sifat suatu zat, misalnya dengan enzim
di hati atau dari enzim dalam mikroba.
Kromatografi : Penggunaan teknik pemisahan
berdasarkan partisi analit dari satu fase ke fase
lainnya, misalnya fase cair ke gas.
Tes konfirmasi : Uji yang penegasan yang
menetapkan adanya zat kimia
Drug impairment : Efek samping yang
diakibatkan oleh obat-obatan yang menghambat
kemampuan melakukan fungsi normal yang
berhubungan dengan aktivitas tertentu.
Immunoassay : Uji analitik untuk mendeteksi
atau mengukur protein tertentu atau zat lain
melalui sifatnya sebagai antigen atau antibodi.
Spektrometri massa : Metode analisis untuk
mengidentifikasi konstitusi kimiawi suatu zat
dengan cara pemisahan ion sesuai dengan massa
dan muatannya.
Tes Skrining : Tes awal untuk menunjukkan
kemungkinan adanya zat kimia.

Pendahuluan

Dengan tidak adanya beberapa bentuk pengujian analitis, penggunaan obat tidak dapat
dikonfirmasi atau dihilangkan sebagai kemungkinan yang masuk akal dalam kasus forensik yang
relevan. Pengujian analitik forensik juga membantu pengadilan dalam menetapkan kebenaran,
atau sebaliknya, bukti lain yang menunjukkan penggunaan narkoba. Pada akhirnya, pengujian
obat-obatan dan racun membantu pihak yang berwenang menyelidiki informasi ilmiah forensik
yang relevan/berkaitan dengan penyelidikan kasus.
Uji toksikologi analitik sangat penting pada korban serangan, di mana obat mungkin
diberikan oleh penyerang yang diduga untuk mengurangi kesadaran atau ingatan korban. Obat-
obatan yang sering digunakan dalam kasus ini biasanya Benzodiazepin (clonazepam,
flunitrazepam, alprazoram, dan lain lain), gamma hydroxybutyrate ( GHB dan prekursornya
seperti 1,4 butanediol), atau sejumlah obat penenang lainnya. Serangan seksual yang difasilitasi
oleh narkoba adalah kasus yang paling umum; Namun pemberian obat penenang secara rahasia
masih dapat terjadi dalam kejahatan lain yang melibatkan penyerangan atau penipuan. Serangan
seksual yang difasilitasi oleh narkoba adalah kasus yang paling umum; Namun pemberian obat
penenang secara rahasia masih dapat terjadi dalam kejahatan lain yang melibatkan penyerangan
atau penipuan.
Pelaku kejahatan kekerasan mungkin juga mengonsumsi alkohol, obat terlarang, atau
bahkan berada di bawah resep obat. Dalam praktek, Pengguna narkoba yang melakukan
kejahatan kemungkinan berada di bawah pengaruh dua atau lebih obat-obatan terlarang.
Pengemudi yang terlibat dalam kecelakaan kendaraan bermotor atau yang menyebabkan
pelanggaran lalu lintas juga sering dipengaruhi oleh dua atau lebih obat-obatan terlarang.
Pengujian analitik forensik terhadap spesimen yang diambil segera setelah insiden yang
diteliti lebih cenderung membantu dalam membangun perilaku orang yang disebabkan oleh obat
daripada saat spesimen diperoleh beberapa saat kemudian. Untuk alasan ini lebih tepat untuk
menguji spesimen antemortem diambil dari orang yang tak lama setelah masuk rumah sakit
daripada yang diambil kemudian atau di postmortem. Hal ini juga mengurangi masalah
interpretasi yang terkait dengan artefak postmortem. Proses postmortem bisa mengubah
konsentrasi darah, menyulitkan interpretasi toksikologi postmortem. Ini termasuk redistribusi,
fermentasi (untuk alkohol), dan biokonversi.
Karena sebagian besar kasus (>70%) melibatkan lebih dari satu obat-obatan, dianjurkan
untuk melakukan skrining obat yang luas untuk memasukkan sebagian besar obat terlarang
penyalahgunaan dan obat-obatan, Daripada menargetkan analisis pada satu atau kisaran obat
yang terbatas seperti yang disarankan oleh keadaan. Ini disebut analisis toksikologi sistematis.

Spesimen
Spesimen antemortem yang dikumpulkan paling sering adalah seluruh darah atau plasma /
serum, atau urine. Namun,

Tabel 1 Spesimen Umum

Spesimen Aplikasi Kemungkinan deteksi

Jendela
Blood (Plasma/ serum) Kerusakan obat Jam
Toksisitas obat
Pemantauan obat
terapeutik

Rambut Pengujian pra-kerja Minggu sampai berbulan-

(tempat kerja) bulan
Obat terlarang
 serangan

Cairan Oral Real time testing Jam

tempat kerja
Driver pengujian real
time

Keringat pengujian tempat kerja

Urine Obat terlarang Hari sampai mingguan

serangan Hari (1-5)
pengujian tempat kerja
Pengujian
pemasyarakatan /
parola

Spesimen alternatif seperti rambut, keringat, dan cairan juga telah digunakan untuk
menilai penggunaan narkoba dan bisa menjadi spesimen tambahan yang berharga (Tabel 1).

Darah dan Plasma

Seluruh darah, atau plasma / serum yang berasal dari darah, adalah spesimen yang paling
berguna yang dapat dikumpulkan karena obat yang ada dalam cairan ini paling baik dikaitkan
dengan efek fisiologis dan dapat digunakan untuk menilai kemungkinan penggunaan obat atau
paparan bahan kimia baru-baru ini. Darah mengandung sel darah merah yang didominasi, sel
darah putih, dan plasma. Plasma diperoleh dari darah yang tidak digaruk dengan cara
menghilangkan sel dengan sentrifugasi, Serum adalah fase cairan yang tersisa setelahnya Darah
dibiarkan menggumpal. Dalam bab ini, darah, plasma, dan serum dianggap satu spesimen,
kecuali jika dibedakan. Pada kasus forensik, dan terutama kasus postmortem, seluruh darah yang
diawetkan dengan sodium fluorida (1-2%) paling sering digunakan, sedangkan pada kasus klinis
plasma yang diobati dengan beberapa jenis antikoagulan, atau serum, paling sering digunakan.
Pembaca harus sadar bahwa untuk beberapa obat ada perbedaan konsentrasi yang signifikan
dalam serum / plasma dibandingkan dengan darah.
Program pemantauan obat terapeutik sering dilakukan di laboratorium toksikologi klinis
dalam plasma dan merupakan dasar kepatuhan obat terapeutik dan membantu mengoptimalkan
dosis obat. Biasanya, immunoassay digunakan dalam pemantauan dan skrining obat bius,
walaupun kromatografi cair kinerja tinggi (KCKT), kromatografi gas (GC), dan teknik
spektrometri massa (MS) sama-sama cocok.

Hair
Rambut telah lama digunakan untuk menguji paparan logam berat seperti arsenik,
merkuri, dan timah dan juga terbukti menjadi spesimen yang berguna untuk analisis obat-obatan.
Hal ini sangat berguna untuk menetapkan penggunaan narkoba beberapa minggu sampai bulan
sebelum pengumpulan.
Masuknya obat ke dalam rambut rumit dan melibatkan sejumlah proses. Penggabungan
oleh jebakan dari pemandian darah folikel yang tumbuh merupakan mekanisme utama, walaupun
penggabungan melalui kontak langsung dengan rambut dewasa dengan sekering keringat atau
sekresi sebaceous juga merupakan sumber masuk obat yang signifikan. Karena kemampuan
rambut untuk menyerap obat secara langsung, kontaminasi rambut oleh paparan lingkungan
langsung juga harus dikecualikan secara wajar, jika hasil rambut digunakan. Misalnya, nikotin
ditemukan di rambut bukan perokok dan kokain bisa ditemukan di rambut anak pengguna
kokain. Adanya zat dari paparan eksogen perlu dipertimbangkan dalam interpretasi hasil rambut.
Berbeda dengan urin, analit target pada rambut sebagian besar adalah obat induk. Kokain,
thc, heroin, dan metabolit pertama 6-asetilmorfen, dan benzodiazepin ditemukan pada
konsentrasi yang lebih tinggi daripada metabolitnya yang sesuai.
Ada sejumlah faktor yang mempengaruhi retensi obat menjadi rambut. Warna rambut
adalah faktor yang perlu dipertimbangkan saat mengikat dan menahan obat yang bersangkutan.
Rambut berpigmen memiliki tingkat kokain lebih tinggi daripada rambut berpigmen lemah. Hal
ini mungkin berlaku untuk semua obat dasar, yang ind untuk melanin, pigmen utama pada
rambut. Obat asam cenderung memiliki konsentrasi lebih rendah daripada obat-obatan dasar.
Pemutihan dan penggunaan sampo dan conditioner yang berlebihan juga bisa mengurangi
konsentrasi obat dalam rambut. Untuk alasan ini, dan berbagai rute asupan obat masuk ke
rambut, hasil kuantitatif pada rambut jarang bermanfaat. Terlepas dari masalah ini, rambut telah
menjadi spesimen yang sangat berguna untuk memantau obat pada orang-orang di bawah
layanan korektif yang diperintahkan untuk tidak menggunakan obat terlarang, dan dalam hal-hal
kustodi yang memerlukan bukti adanya larangan penggunaan narkoba. Analisis segmental dari
bagian 1-2 cm juga dapat memberikan gambaran penggunaan obat yang berubah selama periode
waktu yang lebih lama

Cairan Oral
Ada sejumlah cairan yang disekresikan ke dalam rongga mulut; Secara kolektif ini
disebut cairan oral. Cairan ini terutama diekskresikan oleh tiga kelenjar: parotid, submaxillary,
dan sublingual, dan oleh kelenjar kecil lainnya seperti kelenjar labial, bukccal, dan palatal.
Cairan oral yang digunakan untuk analisis obat terdiri dari sekitar 65% dari submandibular, 23%
parotid, sublingual 4%; 8% sisanya berasal dari tiga kelenjar lainnya.
Aliran harian cairan oral pada orang dewasa berkisar antara 500 sampai 1500 ml.
Aliran air liur dikendalikan oleh sejumlah faktor fisiologis, terutama faktor emosional, serta usia,
jenis kelamin, dan asupan makanan.
Cairan oral bukan ultrafiltrasi darah, melainkan kompleks Cairan yang dibentuk oleh
mekanisme yang berbeda terhadap gradien konsentrasi; Seperti dengan pinositosis, dengan
ultrafiltrasi melalui pori-pori di membran dan dengan transportasi aktif. Difusi pasif adalah
mekanisme yang dominan. Air liur paling baik dikumpulkan dengan penyerapan ke bahan
penyerap atau alat yang merangsang produksi cairan mulut. Sejumlah perangkat semacam itu
tersedia untuk memudahkan proses pengumpulan. Juga penting bahwa pengumpulan cairan oral
berlangsung paling sedikit 30 menit setelah makan atau konsumsi minuman atau obat-obatan,
dan rongga mulut bebas dari bahan makanan dan benda lain sebelum dikumpulkan.
Kelemahan utamanya adalah volume cairan oral biasanya kecil; Maka akan ada
keterbatasan kemampuan untuk mengulang analisis. Selain itu, tidak semua subjek akan mampu
memberikan cairan oral sesuai permintaan. Obat tertentu dapat mengeringkan mulut (termasuk
THC dan amfetamin) dan sejumlah mekanisme fisiologis dapat secara nyata mengurangi air liur
Interpretasi konsentrasi obat cairan oral lebih sulit daripada darah karena konsentrasi cairan oral
lebih banyak bergantung pada variabel daripada darah, seperti kadar ikatan protein, pKa obat dan
pH cairan oral. Untuk beberapa obat konsentrasi cairan oral (benzodiazepin) jauh lebih rendah
daripada darah, sedangkan untuk konsentrasi amfetamin lainnya lebih tinggi. Intinya semua obat
ditemukan dalam cairan oral
Pengumpulan spesimen ini tidak memerlukan pengalaman medis atau paramedis khusus
(untuk pengumpulan darah) atau fasilitas pengumpulan khusus (pengumpulan urin), walaupun
tentu saja beberapa pelatihan diperlukan untuk memastikan kepatuhan terhadap protokol
pengumpulan (dan analisis) dan penahanan rantai. Karena proses pengumpulan relatif tidak
invasif untuk spesimen ini, ia mengarahkan dirinya ke uji coba di tempat atau waktu nyata untuk
obat-obatan pada orang. Akibatnya saya cenderung digunakan dalam keselamatan pekerjaan
kritis seperti deteksi obat orang di tempat kerja mereka atau deteksi di pinggir jalan obat dalam
pengemudi.

Keringat
Berkeringat adalah proses fisiologis yang menyediakan mekanisme untuk mengurangi
suhu tubuh. Kering diproduksi oleh kelenjar eccrine terletak di lapisan transdermal yang paling
banyak pada permukaan kulit, dan kelenjar apokrin yang terletak di aksila dan daerah kemaluan.
Sekitar 40% dari semua keringat diproduksi oleh tubuh , 25% oleh kaki, dan 35% oleh kepala
dan ekstremitas atas. Keringat kira-kira 99% air, sisanya berupa sodium klorida Berkeringat
lebih dari 20ml h 1 dapat terjadi pada siituasi stres. Kelenjar keringat sering dikaitkan dengan
rambut Folikel dan oleh karena itu kadang sulit untuk membedakan rasa kehadiran obat dalam
rambut dan keringat.
Keringat biasanya dikumpulkan dengan menggunakan penyerap yang sesuai perangkat
seperti keringat patch. Waktu kontak bisa bermacam-macam Dari babatan sederhana dari
sebagian kulit ke hari untuk keringat untuk menyerap keringat yang terakumulasi. Waktu yang
digunakan dan pengumpulan akan mempengaruhi kemampuan untuk mendeteksi obat-obatan
yang diekskresikan. Di beberapa perangkat, pemanas lokal memudahkan berkeringat,
mempercepat pendeteksian obat-obatan.
Kacang keringat modern memiliki insiden reaksi alergi yang rendah, namun secara tidak
disengaja atau disengaja kontaminasi dapat membatasi kegunaannya. Kenali yang terdeteksi
dalam keringat meliputi alkohol (etanol), amfetamin, cocaine, benzodiazepin, barbiturat, opioid,
dan Phencyclidine
Air seni
Ini adalah spesimen yang paling sering dikumpulkan selama konsentrasi obat dan metabolit obat
jauh lebih tinggi daripada darah. Urine bisa diobati dengan sodium fluorida (1%) untuk
mencegah fermentasi untuk deteksi alkohol, jika tidak maka harus disimpan sekitar
4 C untuk penggunaan dalam beberapa hari, atau jika diperlukan di luar untuk beberapa hari itu
harus disimpan beku (-20 1C).
Urin menyediakan spesimen yang berharga untuk menilai penggunaan narkoba lebih dari
sehari atau dua hari. Volume besar (50 mlatau lebih) dapat dikumpulkan, memungkinkan
specimen cukup untuk teknik yang kurang sensitif.Namun,kehadiran obat dalam urine tidak
selalu berarti baru-baru ini.Penggunaan obat, apalagi membantu dalam memprediksi dosis atau
kemungkinan efek obat.Untuk alasan ini disarankan untuk disertakan tes darah jika penilaian
efek obat mungkin terjadi wajib.

Teknik
Berbagai teknik tersedia untuk mendeteksi obat di Spesimen yang dikumpulkan untuk
aplikasi ini. Jangkauan dari immunoassay berbasis kit komersial hingga teknik pemisahan
instrumental yang canggih seperti HPLC dan GC.MS adalah teknik definitif untuk
membuktikannya dari struktur zat yang tidak diketahui dan dapat digunakan untuk
mengidentifikasi adanya zat yang tidak diketahui dalam spesimen biologis dan sampel lainnya.

Immunoassays
Sejumlah metode immunoassay berbeda tersedia untuk obat-obatan penyalahgunaan.
Berbagai peralatan komersial sekarang ada untuk tujuan ini. Ini termasuk enzim immunoassay
(EIA) (mis., Enzim-multiplie dimmunoassay Teknik (EMIT)) dan enzim-linked dalam
mmunosorbent Tes (ELISA), immunoassay polarisasi fluoresensi (FPIA) (mis., Abbott TDx dan
ADx), aglutinasi atau Interaksi kinetik immunoassays mikropartikel (misalnya,Triages and
Onlines), dan enzim kloning immunoassay (CEDIA). Kit ini juga termasuk perangkat untuk
Cepat on-site (juga dikenal sebagai point-of-care atau real-time Pengujian) pengujian darah,
cairan oral, urine, dan keringat tanpa perlu penganalisis biokimia.
Tes ini memiliki keuntungan untuk mengenali lebih banyak dari satu anggota kelas obat-
obatan, misalnya Amfetamin, benzodiazepin, dan opiat. Namun, tidak semua anggota kelas obat
terdeteksi dengan kepekaan yang sama. Untuk alasan ini, sensitivitas tidak hanya bergantung
pada reaktivitas silang antigen terhadap anggota kelas obat tertentu, tetapi juga profil metabolit
yang ada dalam spesimen, dan jumlah obat yang dikonsumsi tertelan. . Serangkaian antibodi
yang berbeda juga akan mempengaruhi sensitivitas dan selektivitas obat dan metabolitnya.
Sensitivitas keseluruhan dalam urin juga dapat ditingkatkan dengan hidrolisis urin
sebelumnya untuk mengubah konjugat glucuronide dan sulfate menjadi zat yang dapat dideteksi
oleh kit, walaupun mengurangi konsentrasinasi cut-off yang direkomendasikan dapat
mengakomodasi sebagian besar hilangnya sensitivitas. Teknik ini sangat berguna untuk ganja,
morfin, dan benzodiazepin yang dimetabolisme menjadi konjugat terhidrolisis.
Untuk spesimen non urin, seperti darah atau plasma dianjurkan untuk menggunakan
ELISA. Dalam kebanyakan kasus teknik ini memungkinkan analisis langsung tanpa memerlukan
pengobatan spesimen. Volume spesimen biasanya kurang dari 0,1 ml spesimen.
Hasil positif palsu dengan immunoassay terjadi. Hal ini dapat diakibatkan oleh obat-
obatan yang terkait secara struktural, dari metabolit obat lain yang dikenali oleh antibodi, atau
kadang-kadang oleh artefak. Adulterants ditambahkan ke urine untuk menghindari tes, pH
ekstrim, deterjen, dan surfaktan lainnya juga dapat mempengaruhi pengujian. Untuk alasan ini,
ada hasil positif yang harus dikonfirmasi dengan teknik alternatif, lebih disukai kromatografi
dengan identifikasi struktur MS.

Kromatografi gas
GC didasarkan pada prinsip mempartisi zat dalam fase gas dari fasa cair stasioner. Fasa
diam biasanya berupa cairan polimerik, yang dilapisi ke silika, atau dilapisi secara kimia pada
permukaan kaca kolom itu sendiri. Sifat sandpolaritas kelompok fungsional dari polimer dan
suhu kolom memberikan sarana untuk memvariasikan kondisi persiapan ini.

Biasanya, kolom adalah kapiler fleksibel yang terbuat dari silika leburan dengan diameter
internal 0,1-0,5 mm, dan dilapisi dengan polimer tahan panas untuk meningkatkan fleksibilitas.
Kisaran kolom yang besar tersedia untuk memberi analis fleksibilitas yang cukup untuk
mengoptimalkan kondisi pemisahan. Jenis kolom berkisar dari polietilena dimetil polisiloksan
rendah, 14% sianopropilfenil, 5% difenilmetil polisiloksan sampai polar
trifluoropropilpolisiloksan, dan fase 50 difenil methylpolysiloxane. Penggunaan stase
sianopropilfenil atau 5% phenylmethylsilicone dapat memberikan pemisahan yang lebih baik
dari sejumlah senyawa majemuk moderat metana metilpilikselase 100%. Karena perbedaan
polaritas obat yang luas, Pemrograman suhu diperlukan untuk pengujian dalam mendeteksi
beberapa obat.

Kelas zat / substansi Detektor

Alkohol dan zat volatil MW rendah FID dan MS

Amphetamine-jenis stimulan NPD dan MS
Obat antidepresan NPD dan MS

Obat antipsikotik NPD dan MS

Benzodiazepin ND, ECD, dan MS

Karbon monoksida TCD

Kokain dan tirabolit NPD dan MS

Hidrogen sianida TCD
THC dan cannabinoids sintetis MS MS
Opiat andopioids NPD dan MS
Pestisida organofosfat NPD dan MS
Pemrograman suhu diperlukan untuk pengujian yang melibatkan deteksi sejumlah obat.

Berbagai detektor tersedia untuk GC. Detektor flionion-ization adalah detektor tenaga
kerja untuk setiap senyawa yang mengandung karbon, dimana sejumlah detektor tersedia untuk
algroup fungsi tertentu. Detektor nitrogen fosfor (NPD) secara selektif mendeteksi senyawa
dengan nitrogen atau fosfor, sedangkan detektor tangkapan elektron (ECD) mengandalkan
kemampuan senyawa untuk menangkap elektron saat melewati medan listrik.
Detektor ECD memberikan batas deteksi terbaik (turun sampai kira-kira ngml _1) dari
1,0 ml plasma, walaupun NPD menyediakan batas deteksi hingga kira-kira 5 ngml _1 untuk zat
nitrogen dan lebih baik dari 1 ngml _1 untuk bahan yang mengandung fosfor (misalnya pestisida
organofosfat) (Tabel 2). Gas beracun seperti karbon monoksida dan hidrogen sianida yang
dilepaskan dalam api dapat dideteksi dengan menggunakan detektor konduktivitas termal.
Agar obat-obatan dapat disetujui GC, senyawa ini harus stabil secara termal agar
memungkinkan penguapan menjadi gas inert (mis., Heliumandnitrogen). Dalam banyak kasus,
senyawa dapat diturunkan untuk meningkatkan stabilitas termalnya, atau untuk mengubah
karakteristik retensi pasir sehingga memungkinkan pemisahan terjadi.
Ekstraksi mikro fase padat adalah teknik yang relatif baru untuk memungkinkan analisis
obat yang cepat tanpa memerlukan pembersihan dan konsentrasi sampel yang ekstensif. Injeksi
langsung online menggunakan teknik dialisis yang melibatkan pra-kolom kopolimer untuk
penyerapan juga telah dilaporkan pada volume sampel kecil.

Kromatografi Cair Kinerja Tinggi

HPLC adalah sistem kromatografi yang umum digunakan yang melibatkan pemisahan
senyawa dengan memisahkan antara fasa cair bergerak bertekanan dan Sebuah pendukung padat
yang mengandung silika sangat halus (4-10 mm Partikel diameter) atau ikatan silika. Ligan
terikat bertindak sebagai fasa pseudo-cair. Kelompok bebas termasuk C2, C8, C18, CN-alkil, dan
fenil-alkilabel sifat fisiokimia dari fase terikat dan tahap pemindahan menentukan proses
pemisahan.
Fase gerak sering kali merupakan pelarut hydroalcoholic system seperti air asetonitril
atau metanol / unbuffered untuk larutan pelarut / penyangga fosfat, Pengubah dasar trietilamina,
dan pereaksi pasangan ion seperti asam sulfonat metana, hidrogen tetrametilammonium
Sulfat, dan tetrabutilamonium bromida.Gradien pemrograman dimana komposisi pelarutnya
diubah dengan waktu memberikan kemampuan untuk memisahkan senyawa polaritas yang
sangat berbeda. Fase normal Kromatografi pada kolom CN-, OH-bonded atau Kolom silika
fungsi serupa dengan pelatarannya Kromatografi (KLT), kecuali resolusi dan sensitivitasnya jauh
lebih besar.
Deteksi sampel paling sering dilakukan oleh UV spectrophotometri pada atau mendekati
penyerapan maksimal panjang gelombang, Meskipun penggunaan deteksi panjang gelombang
beragam untuk mengaktifkan spektrum UV yang akan diperoleh lebih banyak.Alternatif lain sifat
fisiokimia dari senyawa (s) dapat dieksploitasi ini termasuk inframerah, fluoresensi,
Sifat elektrokimia, dan konduktivitas. Dibentuk dengan kelompok fungsional dapat direaksikan
dengan reagen untuk diberikan deteksi yang lebih besar dengan satu atau lebih detektor, atau
kemmungkinkan resolusi stereoisomer.
Misalnya saat deteksi array UV atau fotodioda bisa digunakan untuk semua zat yang
menyerap sinar UVdi atas 190 nm. Ini termasuk stimulan jenis amfetamin, antidiabetes,
benzodiazepin, diuretik, analgesik, opioid dan anti-inflamasi non steroid.
Obat-obatan dan banyak obat-obatan dan racun lainnya.Beberapa senyawa alami berpendar atau
bisa dibuat untuk berpendar (Misalnya, flecainide, losartan, propranolol, kina, terazosin) dengan
menambahkan turunan atau beberapa senyawa deteksi elektrokimia dapat digunakan (mis.,
Morfin), sedangkan untuk anion dan kation membutuhkan konduktivitas detektor.
Namun, detektor yang paling umum sekarang adalah MS dan memungkinkan hampir
semua obat dan racun terdeteksi ketersediaan instrumen HPLC yang dihubungkan dengan MS
adalah terjangkau, dengan sebagian besar beroperasi di tandem Mode MS.
Batas deteksi sekitar 10-50 ng m1 adalah diharapkan untuk sebagian besar senyawa
dengan HPLC menggunakan deteksi UV , tergantung sifat fisiokimia dari
Obat, volume spesimen yang diekstraksi, dan metode yang digunakan. Batas deteksi rendah
mudah didapat menggunakan MS, sering turun sampai 1 ng ml1 atau kurang.
Ekstraksi fase padat (SPE) menggunakan kolom kecil menyerap obat selektif dari matriks
(mis., Extrelut,Sep-Pak, Bond-Elut, dll) memberikan yang sangat bagus alternatif teknik
ekstraksi cairan konvensional. Teknik fase padat telah dipublikasikan ntuk kebanyakan analit dan
cenderung cepat, dan sering memberikan ekstrak bersih. Prosedur SPE ini juga bisa siap otomatis
untuk meningkatkan throughput
Kolom sempit (diameter dalam 1-2 mm) membutuhkan sedikit sampel dan mudah
dihubungkan dengan MS.

Spektrometri massa
MS adalah teknik definitif jika identifikasi yang tidak pasti dari senyawa yang tidak
diketahui diperlukan untuk forensik. Tujuan. MS biasanya dihubungkan langsung dengan proses
pemisahan kromatografi seperti HPLC, atau GC, atau bahkan ke MS lain (MS / MS atau tandem
MS).
Spektrometer massa dapat dioperasikan dengan pemindaian penuh mode, mis., Dari m /
z 50 sampai m / z 550 atau bahkan lebih tinggi tergantung pada berat molekul molekul dan
Ukuran ion fragmen. Untuk MS / MS, fragmentasi Ion yang terbentuk pada spektrum massa
primer bisa lebih jauh terfragmentasi dalam kondisi terkendali untuk membentuk ion sekunder
(kadang dikenal sebagai ion putri).
Full scan MS memberikan informasi spektral yang optimal
(Kelimpahan ion pada rasio m / z masing-masing). Massa Spektrometer juga dapat beroperasi
dalam mode ion yang dipilih atau Setara. Dalam mode ini hanya beberapa ion yang normal
dipantau. Hal ini paling sering digunakan untuk memperbaiki sensitivitas untuk kuantifikasi pada
konsentrasi yang lebih rendah atau untuk mengkonfirmasi obat yang biasa diamati yang sudah
ada telah diduga dengan teknik lainnya.
Senyawa tidak selalu menunjukkan ciri khas detail spektral (mis., Amfetamin oleh
dampak elektron). Konsekuensinya, dianjurkan untuk menyiapkan turunan untuk senyawa
tersebut, atau untuk zat itu menunjukkan sifat kromatografi yang buruk (Tabel 3).
Salah satu turunan yang paling sering digambarkan adalah Trimethylsilyl ether untuk
zat amina, hidroksil, dan karboksilat. Sebagai alternatif, silylethers lainnya seperti t-butil yang
digunakan, dan anhidrida asil berair (Mis., Pentafluoropropionat anhidrida) banyak digunakan
Untuk amina dan senyawa hidroksi, dan kombinasi dari alkohol perfluorinated dengan asil
perfluorinated Anhidrida untuk zat karboksi-, hidroksi-, dan amina. Turunan lainnya juga
diketahui.
Ionisasi ion positif ion menghasilkan banyak Ion molekuler dengan intensitas lebih
tinggi, dan sering digunakan untuk mengurangi fragmentasi dan memberikan bukti berat molekul
senyawa. Dalam mode ini pereaksi gas, seperti metana, dan amonia digunakan untuk
menghasilkan tumbukan ion-molekul yang berbeda di ruang ion (sumber).
Penggunaan ionisasi kimia ion negatif (NCI) memberikan batas deteksi yang sangat
disempurnakan untuk tertentu senyawa dibandingkan spektrometri massa dampak elektron (EI
MS). Dalam mode NCI ini sebuah cluster ion tunggal sering diamati dan dapat menyediakan
beberapa obat-obatan (misalnya,Benzodiazepin dan derivatisasi THC) batas deteksi ekitar 0,1 ng
ml.
Tabel 3

Derivat yang digunakan dalam analisis GC-MS pada obat-obatan pilihan

Obat atau golongan obat Turunan (derivat)

Amfetamin
Barbiturat
Benzodiazepin
Kokain dan metabolit
Morfin dan opiat lainnya
THC dan Carboxy-THC
AA, HFBA, dan metil kloroformat
Tidak ada atau iodometana di TMAH
t-butil-DMS, TMS, dan PC / PI
t-butyl-DMS, PFPA / PFP, dan TMS
PFPA / PFP dan TMS
TFAA, TMS, PFPA / PFP, dan t-butyl-DMS

Singkatan: AA, anhidrida asetat; HFBA, heptafluorobutyric anhydride; TMAH,

tetrametilammonium hidroksida; T-butil-DMS, t-butil dimetilsilil; TMS, trimetilsilil; PC,
propionilklorida; PI, propil iodida; Carboxy-THC, 11-nor-9- tetrahydrocannabinol carboxylic
acid; TFAA, anhidrida trifluorida; PFPA, pentafluoropropionat anhidrida; PFP,
pentafluoropropan-2-ol, THC, 9- tetrahydrocannabinol.

Penggunaan standar internal ter-deuterasi memberikan cara ideal untuk memantau

perubahan dalam kinerja kromatografi, dan yang terpenting, pada dasarnya menghilangkan efek
matriks yang disebabkan oleh pemulihan obat yang buruk. Meskipun pemulihan obat dapat
bervariasi dari satu matriks ke matriks lainnya, dan bahkan dari kalibrator, standar internal ter-
deuterasi akan memperbaiki hal ini. Untuk alasan ini, tes yang melibatkan MS harus
menggunakan standar internal ter-deuterasi sedapat mungkin.

Kombinasi HPLC dengan MS (LC-MS) dan keduanya atau ion-trap MS (LC-MS / MS)
memberikan contoh bagus dari kekuatan pemisah pada batas deteksi HPLC yaitu lebih baik dari
1 ng / ml untuk banyak senyawa yang menggunakan termospray atau Antarmuka electrospray.
Teknik ini telah menjadi teknik yang diinginkan dalam prosedur kimia forensik karena dapat
memisahkan zat yang biasanya tidak dapat diterima oleh GC, seperti zat dengan berat molekul
lebih tinggi atau senyawa polar yang memerlukan derivatisasi. Contoh penggunaannya meliputi
anabolik dan steroid lainnya, diuretik, benzodiazepin, buprenorfin, dan opioid lainnya.

Deuterasi = (Dari senyawa) di mana isotop hidrogen biasa telah diganti dengan deuterium.

Lihat juga: Alkohol: Penggunaan Akut dan Kronis dan Temuan Postmortem. Alkohol: Analisis
Darah dan Cairan Tubuh. Alkohol: Analisis Nafas. Temuan Otopsi: Otopsi dalam Penggunaan
Narkoba. Temuan Otopsi: Racun Organik. Paparan Karbon Monoksida: Temuan Otopsi.
Toksikologi: Metode Analisis, Postmortem
Bacaan lebih lanjut:

Caplan, Y.H., Gold berger, B.A., 2001. Alternative specimens for work place drug testing.
Journal of Analytical Toxicology 25, 396399.

Dolan, K., Rouen,D., Kimber,J., 2004. An overview of the use of urine, hair, sweat and saliva
to detect drug use. Drug and Alcohol Review 23, 213217.

Drummer, O.H., 2007. Requirements for bioanalytical procedures in postmortem toxicology.

Analytical and Bioanalytical Chemistry 388, 14951503.

Drummer, O.H., 2008. Introduction and review of collection techniques and applications of
drug testing of oral fluid. Therapeutic Drug Monitoring 30, 203206.

Drummer, O.H., 2010. Forensic toxicology. EXS 100, 579603.

Flanagan, R.J., Taylor, A., Watson, I.D., Whelpton, R. (Eds.), 2007. Fundamentals of
Analytical Toxicology. West Sussex: Wiley, 505 pp.

Kintz, P.(Ed.) ,2010. Practical and Analytical Aspects of Drug Testing in Hair. Boca Raton,
FL: CRC Press, 382 pp.

Kintz, P., Villain, M., Cirimele, V., 2006. Hair analysis for drug detection. Therapeutic Drug
Monitoring 28, 442446.

Levine, B. (Ed.), 1999. Principles of Forensic Toxicology. Washington, DC: American

Association of Clinical Chemistry, 394 pp.

Maurer, H.H., 2007. Current role of liquid chromatography-mass spectrometry in clinical and
forensic toxicology. Analytical and Bioanalytical Chemistry 388, 13151325.

Maurer, H.H., 2010. Perspectives of liquid chromatography coupled to low and high
resolution mass spectrometry for screening, identification, and quantification of drugs in
clinical and forensic toxicology. Therapeutic Drug Monitoring 32, 324327.

Moffat, A.C., Osselton, M.D., Widdop, B. (Eds.), 2004. Clarkes Isolation and Identification
of Drugs, third ed. London: Pharmaceutical Press.

Snyder, L.R., Kirkland,J.J., Glajch, J.L., 1997. Practical HPLC Method Development, second
ed. New York, NY: Wiley.

Spiehler, V., 2000. Hair analysis by immunological methods from the beginning to 2000.
Forensic Science International 107, 249259.

United Nations, 1998. Guidelines for Testing Drugs Under International Controlin Hair,
Sweat and Saliva. Vienna: United Nations.
Situs Web yang Relevan

www.soft-tox.org
Himpunan para ahli toksikologi forensik, Inc.

Www.tiaft.org
TIAFT
 TUGAS TOKSIKOLOGI

METODE ANALISIS ANTEMORTEM

Disusun oleh :
1. Ayu Fitri Wardani
2. Baiq Cika Amelia Z.
3. Baiq Inges Andini W.
4. Baiq Nasha Islaeli
5. Baiq Dea Nanda Savona
6. Muhammad Taofik
7. Muhammad Ikhsan Setyawan
8. Muhammad Risky Ibrika
9. Murhaeni
10. Nadia Qudsiati
11. Saiful
12. Shinta Devi Hariyanto
13. Sigit Kurniawan
14. Siti Nabila Mustiani
15. Sri Ratna Nurbaiti

POLTEKKES KEMENKES MATARAM

TP 2016 / 2017